实验糖耐量

.口服葡萄糖耐量试验
• OGTT是口服一定量葡萄糖后，作系列血浆葡萄 糖测定，以评价机体对血糖调节能力的标准方法。
• WHO推荐法，葡萄糖75g，对于小孩，按1.75g/kg 体重计，总量不超75g。清晨空腹坐位取血后，用 水250~300ml溶解5min内饮完，之后30min取血1 次，共4次，历时2h。
注意事项
加样准确，加样后立即摇匀。
反应结束，冷却至室温后及时比色。
实验前受试者应充分休息，避免体力活动，试验 中亦不能吸烟、喝咖啡，以免影响实验结果。 葡萄糖氧化酶对β -D葡萄糖高度特异，溶液中葡 萄糖约36%为α 型，64%为β 型。葡萄糖的完全氧 化需要α 型到β 型的变旋反应。新配制的葡萄糖标 准液主要是α型，故需放置2h以上（最好过夜）， 待变旋平衡后方可应用。
实验目的
1.掌握血糖测定原理 2.掌握OGTT的测定方法及 临床应用 3.熟悉OGTT曲线绘制、 分析及临床意义
血糖的代谢途径
Baidu Nhomakorabea
来源
去路
食物中糖消化吸收 肝糖原分解
血糖3.9-6.1mmol/L
非糖物质异生作用 其它己糖转变
彻底氧化分解 合成肝、肌糖原 合成脂肪、氨基酸 转变为其它糖及衍生物 超过肾糖阈（尿糖）
IGT
DM
FPG 服糖后2h
＜6.1 ＜7.8
6.1~6.9 ＜7.8
＜7.0 7.8~11.0
≥7.0 ≥11.1
OGTT是一种负荷试验，在明确诊断后不易再用。
实验仪器及试剂
小试管
7支
5.0ml吸管
1支
加样器
1支
722分光光度计
实验操作步骤
血清 （ml）
空白管 （B）
——
标准管 （S）
注意事项
葡萄糖氧化酶法可以直接测定脑脊液葡萄糖含 量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿 液中尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过氧 化物酶反应，造成结果假性偏低。 因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测 定样品以草酸钾-氟化钠做抗凝剂以抑制糖酵解。 严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。
OGTT临床意义
1.诊断妊娠期糖尿病（GDM）。 2.诊断糖耐量减退病 3.无法解释的肾病，视网膜病，随机血糖
<7.8mmol/L. 4.人群筛查.
• 临床上常用的方法是清晨空腹抽血后，开始饮葡 萄糖水后30min、60min、120min和180min分别测 定静脉血浆葡萄糖。
以测得的血清葡萄糖浓度为纵座标，时间为横座标， 绘制成糖耐量曲线图。
口服葡萄糖耐量曲线
OGTT对DM相关状态的判定指标（静脉血糖mmo1/L）
相关状态 正常糖耐量 IFG
混匀，置37℃水浴中，保温20min，在波长500nm处比色，以空白管调零，读 取标准管及测定管吸光度。然后分别计算出葡萄糖浓度C0、C1、C2、C3、C4
计算:
血清葡萄糖（mmol/L）=（A测定/A标准）*C标准
单位换算：葡萄糖mmol/L * 18=葡萄糖 mg/dL 将各次血糖测定结果，与相应的时间绘制 成糖耐量曲线图，进行分析。
——
测定管 （T0）
0.020
测定管 （T1）
0.020
测定管 （T2）
0.020
测定管 （T3）
0.020
测定管 （T4）
0.020
葡萄糖 标准液 （ml）
蒸馏水 （ml）
—— 0.020
0.020 ——
—— ——
—— ——
—— ——
—— ——
—— ——
工作试 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 剂（ml）