光照条件对植物组培的影响

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组培成功必备的几大要素

组培成功必备的几大要素

组培成功必备的几大要素组织培养(tissue culture)是一种在实验室或生物技术设施中,通过控制环境条件来培养植物组织或细胞的技术。

以下是组织培养成功必备的几大要素:1.无菌环境:无菌环境是组织培养成功的首要条件。

所有用于组织培养的材料,包括外植体、培养基、接种工具等,都必须进行严格的消毒处理,以防止细菌、真菌等微生物的污染。

实验室应配备超净工作台、紫外灯、高压蒸汽灭菌器等设备,确保无菌操作。

2.合适的培养基:植物组织培养的成功与否,很大程度上取决于所使用的培养基。

培养基应含有植物生长所需的营养成分,如糖、氨基酸、微量元素、维生素等,以及适量的植物生长调节剂,如生长素和细胞分裂素。

根据不同的植物种类和培养目的,可以选择不同的培养基。

3.适宜的温度和光照:在组织培养过程中,温度和光照也是影响成功的关键因素。

每种植物都有其最适的生长温度和光照条件。

一般来说,大多数植物在25-30℃的温度下和16-24小时的光照条件下生长良好。

4.外植体选择与处理:选择健康、无病虫害的植物材料作为外植体,并对材料进行适当的预处理,如清洗、消毒等,是组织培养成功的关键步骤。

此外,选择适合的外植体类型也对培养成功至关重要。

5.接种技术:接种是将外植体接入培养基的过程。

熟练的接种技术能够减少对植物组织的损伤,避免污染,并提高组织的存活率。

6.细胞分裂与增殖:在适宜的培养条件下,植物细胞会分裂并增殖形成愈伤组织。

这个过程需要定期观察和记录细胞的生长情况,及时调整培养条件以促进细胞的分裂和增殖。

7.生根与移植:当愈伤组织形成后,可以将其转移到生根培养基中,促使组织产生根系。

当根系形成后,可以将其移植到土壤中或进行其他后续实验。

8.遗传稳定性:为了确保组织培养后得到的植株是纯合的,并保持其遗传稳定性,需要采用适当的遗传检测方法。

这可以通过分子生物学方法,如DNA 指纹分析或基因表达分析来实现。

9.法规与伦理:在进行组织培养实验时,必须遵守相关的法规和伦理准则。

高中生物 专题 植物的组织培养技术 课题 菊花的组织培养素材2

高中生物 专题 植物的组织培养技术 课题 菊花的组织培养素材2

专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织培养庖丁巧解牛知识•巧学一、植物组织培养的基本过程1.细胞分化植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程叫做细胞分化。

高等生物一般都从一个受精卵开始发育,经多次细胞分裂与分化,产生出各种不同的特殊结构和专一功能的细胞。

例如,植物体中的木纤维、韧皮纤维等.已分化的细胞,其基因组成并未改变,并无遗传信息的增减,仍具有发育的全能性。

一般认为,细胞分化是细胞中遗传信息有选择地表达的结果。

2.细胞的全能性细胞全能性比较权威的定义是1984年国际组织培养协会做出的:“细胞全能性为细胞的某种特征,有这种能力的细胞保留形成有机体所有细胞类型的能力”。

这个定义比一般所说的概念“一个细胞中包含着这种生物的全部遗传信息(基因),在适当的条件下可以发育成一个完整的生物体”更基本和全面.它不但包含了培养细胞再生成植株的情况(分化成各种类型的细胞,并以一定形式构建成植物),同时也包含了培养细胞生产次生代谢物的情况(不分化或只分化成某种类型细胞,但仍留着分化为其他细胞类型的能力).前者成为组织培养和转基因植物需要进行植株再生的理论基础,后者成为像微生物发酵一样培养细胞,生产人们所需要的次生代谢产物的理论基础,如通过红豆杉的细胞培养生产紫杉醇.难点培析 (1)全能性的含义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整的个体的潜能。

(2)全能性的基础:每个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体的全部基因.(3)全能性程度:由高到低依次是受精卵→生殖细胞→体细胞 .(4)表现全能性的条件:①离体 ②营养物质 ③激素。

(5)与植物和低等细胞相比,高等动物体细胞的发育潜能有显著差异.3.植物组织培养的过程植物组织培养是指在无菌条件下,对离体植物组织(器官或细胞)分离并在培养基中培养,使其能够继续生长,甚至分化发育成完整植株的一项技术。

生根培养的注意事项

生根培养的注意事项

生根培养的注意事

生根培养是植物
组织培养中的重要步骤,以下是进行生根培养时需要注意的6个方面:
1.温度:温度是影响
植物生根的重要因素
之一。

在生根过程中,需要保持温度的稳定,
以促进根系的正常生长。

2.光照:光照也是影响植物生根的重要因素之一。

在生根过程中,需要提供适宜的光照条件,以满足植物生长所需的能量和光照需求。

3.湿度:湿度是影响植物生根的重要因素之一。

在生根过程中,
需要保持适宜的湿度条件,以防止过度干燥或过度湿润对植物生长造成不利影响。

4.营养:营养是影响植物生根的重要因素之一。

在生根过程中,需要提供适宜的营养条件,以满足植物生长所需的营养需求。

5.激素:激素也是影响植物生根的重要因
素之一。

在生根过程中,需要使用适宜的
激素浓度和比例,以
促进根系的正常生长。

6.容器和基质:容器
和基质的选择也是影
响植物生根的重要因
素之一。

在选择容器
和基质时,需要考虑
其透气性、排水性和
营养性等因素,以确
保植物根系正常生长所需的良好环境。

组培期末考试题及答案

组培期末考试题及答案

组培期末考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 组培技术中,通常使用哪种培养基?A. 固体培养基B. 液体培养基C. 半固体培养基D. 气体培养基答案:B2. 植物组织培养中,以下哪个激素不是必需的?A. 生长素B. 细胞分裂素C. 乙烯D. 赤霉素答案:C3. 组培中诱导分化的常用方法是什么?A. 改变光照条件B. 改变温度C. 改变培养基成分D. 所有以上答案:D4. 以下哪个不是植物组织培养的优点?A. 快速繁殖B. 保持母本性状C. 降低成本D. 产生新品种答案:D5. 组培中常用的消毒方法是什么?A. 紫外线消毒B. 高温消毒C. 化学消毒D. 所有以上答案:D6. 植物组织培养中,愈伤组织的形成通常发生在哪个阶段?A. 诱导期B. 增殖期C. 分化期D. 成熟期答案:B7. 组培中,哪个因素对细胞生长和分化影响最大?A. 光照B. 温度C. pH值D. 培养基成分答案:D8. 组培中,以下哪种培养方式不是常用的?A. 固体培养B. 液体培养C. 气体培养D. 半固体培养答案:C9. 植物组织培养中,以下哪个不是常用的外植体?A. 叶片B. 根C. 种子D. 果实答案:D10. 组培中,以下哪个不是愈伤组织的形态特征?A. 无定形B. 无分化C. 有组织结构D. 细胞密集答案:C二、填空题(每空2分,共20分)1. 组培技术是指在无菌条件下,利用植物的________进行快速繁殖的技术。

答案:组织或细胞2. 在植物组织培养中,常用的生长素有________和________。

答案:吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)3. 组培过程中,光照对植物的________和________有重要影响。

答案:光合作用、形态建成4. 组培中,培养基的pH值通常控制在________至________之间。

答案:5.5、6.55. 组培中,常用的消毒剂有________和________。

答案:酒精、次氯酸钠6. 组培技术在生产上的应用包括________、________和________。

组培中常见问题分析

组培中常见问题分析

组培苗在培养过程中常见问题分析一、植物褐化A、原因可能有:1、植物本身含有较多的酚类物质,在切割外植体时,从伤口渗透出来,直接渗入培养基中,或在继代培养时不断形成并渗出。

2、(1)外植体的取材部位及季节(2)培养基成分,浓度过高的无机盐和高浓度6-BA、KT 等容易加重褐化。

(3)培养条件不当,温度过高培养时间过长、光照过强,均可以提高多酚氧化酶的活性。

B、防止措施:1、选择合适的外植体:选取幼龄材料,选合适部位,时间一般在初冬或初春2、暗培养或勤转瓶3、弱光培养、低温培养4、添加活性炭或抗氧化剂等5、可以降低无机盐含量,由全量降为半量,减少铵态氮的含量。

二、玻璃化现象A、原因可能有:1、培养温度高2、生长素种类及其配制比例不合适。

铵态氮及碳源对某些植物培养不适宜。

B、防止措施:1、降低培养瓶内的湿度,增加琼脂量,每瓶接种量减少三分之一2、降低培养温度3、增加光照4、降低培养温度5、降低培养基中细胞分裂素含量,可以考虑加入适量脱落酸。

也可以降低或去除铵态氮。

6、在培养基中加入1.0~5.0g/L活性炭。

三、黄化现象A、原因可能有:1、培养基中铁元素含量不足,激素配比不当,糖用量不足。

2、培养瓶温度不适,光照不足。

3、pH值有问题。

(培养基配置不正确)B、防止措施:1、检查培养基配置过程,保证培养基成分正确添加2、调节培养基的成分和pH值3、控制培养室温度,增加光照,用透气盖改善瓶内通气情况四、污染现象A、原因可能有:1、原瓶苗有污染2、接种工具灭菌不彻底3、操作时认为带入菌4、接种环境不干净5、原瓶苗细菌性污染(浑浊水渍状、或泡沫发酵状)常由于灭菌锅未排尽冷空气、灭菌锅压力温度不够,计时不准确造成。

6、原瓶苗真菌性污染(出现各种颜色的孢子),可能是由于空气、瓶口及瓶盖真菌孢子引起。

B、防止措施:1、正确使用灭菌锅2、接种工具每次使用完后要消毒灭菌,接种时,手不要碰盘子的任何地方,用镊子夹盘子。

3、污染的原瓶苗要及时淘汰,如果原瓶苗数量少要进行灭菌4、接种时,要保证接种环境的干净卫生,台内工具不宜放太多。

光照对植物组培的影响

光照对植物组培的影响

光照对植物组培的影响
近几年来随着越来越多培养基研究成果的积累,人们的研究逐渐深入到培养条件方面,如培养温度、光照强度、容器内空气因素对组培和培养过程中植物生长速度、生长质量的影响。

组织培养中光照也是重要的条件之一,主要表现在光强、光质、以及光照时间方面:
1、光照强度(lightintensity)光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,从
目前的研究情况看,光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。

一般来说,光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长。

2、光质(lightwave)光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。

如百合珠芽在红光下培养,8周后,分化出愈伤组织。

但在蓝光下培养,几周后才出现愈伤组织,而唐菖蒲子球块接种15天后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长旺
盛,而白光下幼苗纤细。

据倪德祥等在香石竹的研究表明,白光条件下生长量最高,其次是红、黄、绿、蓝光对生长有抑制作用,单色光对叶绿素合成有抑制作用,叶绿素的合成需要在复合光条件下完成。

3、光周期(lightperiod)试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养,最常用的周期是16h的光照,8h的黑暗。

研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照
下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。

如红花、乌饭树的愈伤组织。

除某些材料诱导愈伤组织需要黑暗条件外,一般培养都需一定的光照。

不同光源处理对非洲菊组培苗生长的影响

不同光源处理对非洲菊组培苗生长的影响

不同光源处理对非洲菊组培苗生长的影响王政;张丹丹;刘艳楠;尚文倩;贺丹;何松林【摘要】以非洲菊瑞扣为材料,普通荧光灯为对照,研究发光二极管(LED)和冷阴极荧光灯(CCFL)处理对其组培苗生长的影响.结果表明:在红光/蓝光=7/3(光质比)的情况下,LED光源处理下,组培苗地下部、整株鲜质量,叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量,可溶性蛋白含量及根系活力均高于其他处理;LED和CCFL光源处理下,组培苗叶长显著高于对照;在根长方面,CCFL光源处理下出现最大值,LED次之,均显著高于对照;LED和对照处理下,根数、地上部鲜质量、地下部干质量均显著高于CCFL处理;CCFL处理下,叶片下表皮气孔面积显著大于其他处理,在气孔密度方面,LED处理略显优势.综合比较,LED光源是用于非洲菊组织培养的最佳光源.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2016(045)007【总页数】5页(P96-100)【关键词】发光二极管;冷阴极荧光灯;非洲菊;组培苗;组织培养【作者】王政;张丹丹;刘艳楠;尚文倩;贺丹;何松林【作者单位】河南农业大学林学院,河南郑州450002;河南农业大学林学院,河南郑州450002;河南农业大学林学院,河南郑州450002;河南农业大学林学院,河南郑州450002;河南农业大学林学院,河南郑州450002;河南农业大学林学院,河南郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S682.1+1光是植物生长发育必需的环境因素之一,对植物组培苗的生长发育、形态建成及生理代谢等均具有很大的影响[1]。

植物生长所需的光合有效辐射(PAR)在波长400~700 nm,因为红光和蓝光组合光谱与叶绿素的吸收光谱一致,在蓝光区(425~490 nm)和红光区(610~700 nm)植物的光合效率最高[2-3]。

在传统组织培养中,使用最广泛的光源有高压钠灯、普通荧光灯和金属卤化物灯,其光源主要集中在蓝紫光范围(450~580 nm),在红光区域较低,难以有效促进植物生长[4];并且这些传统光源普遍存在能耗高、寿命短及发热量大等缺点,大大增加了组培苗工厂化生产的成本[5];同时由于传统光源发热量大的缘故,传统组培架的空间利用率低,单位面积产量严重受到影响。

植物组织培养的三大难题及解决方法

植物组织培养的三大难题及解决方法

植物组织培养的三大难题及解决方法摘要:植物组织培养是以细胞全能性为理论基础建立的一种离体培养技术,阐述了植物组织培养快繁中褐变、玻璃化、污染和移栽成活率低等问题出现的原因,提出预防和控制措施。

关键词:植物组织培养;污染;玻璃化;褐化中图分类号:q813.1+2 文献标识码:a 文章编号:1674-0432(2012)-11-0142-2植物组织培养是利用植物体的一部分进行无性繁殖,而产生大量同源母本基因幼苗的生物技术。

植物的组织培养到如今以和农业、园艺、林业、医药等多个方面有了密不可分的关系,为其提供了理论基础和研究方法。

利用自然条件在获得珍稀植物和经济价值较高的植物时,由于受地域及季节的限制,很难达到高效、快速的目的。

通过组织培养这一技术手段则能满足这一要求。

组织培养在挽救珍稀植物、创造新物种等方面做出了重要的贡献[1]。

但是在植物的组培技术上面临的三个难题却经常困扰大家。

它们分别是污染,植物玻璃化和植物褐化。

1 污染污染是在组培过程中所面临的首要难题,该问题经常遇到并且难以解决。

不能把污染率降低到可行的范围内植物组培就很难进行下去,这是该问题所要面对的第一个难题。

在进行植物的组织培养时,通常存在两种污染方式:一种是外植体消毒不彻底以及无菌操作过程中引起的污染;另一种是引起内源菌污染的主要原因的真菌和细菌[2]。

大多数的研究结果表明引起污染的主要原因为外植体的生长状况、环境条件和操作过程[3]。

外植体污染是最难解决的污染之一。

污染来源主要为外植体处理不当或培养基的灭菌不彻底,或对接种工具的消毒不够,或操作人员的操作不慎,或环境不洁等所致。

选取外植体的原则是污染少易启动[4-5]。

选择有最大分化潜能的外植体是确保组织培养成功的关键[6]。

常规试验一般选用0.1%hgcl2溶液浸泡,再用无菌水对外植体进行反复冲洗,灭菌效果最好且污染率低。

胡重怡等在烟草无菌苗培养前种子消毒技术的研究中使用先用70%c2h5oh溶液进行消毒,再用30%h2o2的浸泡,再用无菌水反复冲洗外植体,所得烟草种子污染率底[7],h2o2分解后生成有杀菌作用的氧气而成为无毒害的化合物[8-9]对外植体的损害小。

组培实验报告结果(3篇)

组培实验报告结果(3篇)

第1篇一、实验简介实验名称:植物组织培养实验实验目的:通过植物组织培养技术,探究植物细胞分裂、分化和再生能力,掌握植物组织培养的基本操作流程,并观察培养过程中植物组织的生长变化。

实验材料:水稻、玉米、小麦等植物叶片、茎段、愈伤组织等。

实验方法:采用植物组织培养技术,对植物叶片、茎段、愈伤组织进行体外培养,观察其在不同培养基、激素浓度、光照条件下的生长和分化情况。

二、实验结果与分析1. 培养基对植物组织生长的影响实验结果表明,不同培养基对植物组织的生长和分化具有显著影响。

其中,MS培养基(Murashige and Skoog培养基)对植物组织的生长和分化效果较好,愈伤组织诱导率和再生植株数量较高。

(1)MS培养基在MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为80%,玉米叶片愈伤组织诱导率为75%,小麦叶片愈伤组织诱导率为70%。

再生植株数量分别为:水稻40株,玉米30株,小麦20株。

(2)改良MS培养基在改良MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为70%,玉米叶片愈伤组织诱导率为65%,小麦叶片愈伤组织诱导率为60%。

再生植株数量分别为:水稻25株,玉米20株,小麦15株。

2. 激素对植物组织生长的影响实验结果表明,激素对植物组织的生长和分化具有显著影响。

其中,生长素(IAA)和细胞分裂素(KT)对植物组织的生长和分化效果较好。

(1)生长素和细胞分裂素浓度对愈伤组织诱导率的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻叶片愈伤组织诱导率达到最高,为80%。

玉米叶片愈伤组织诱导率达到最高,为75%。

小麦叶片愈伤组织诱导率达到最高,为70%。

(2)生长素和细胞分裂素浓度对再生植株数量的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻再生植株数量为40株,玉米再生植株数量为30株,小麦再生植株数量为20株。

3. 光照条件对植物组织生长的影响实验结果表明,光照条件对植物组织的生长和分化具有显著影响。

植物组织培养的培养条件

植物组织培养的培养条件
✓水解酪蛋白:浓度100-200mg/L,应用在微茎尖培 养
Auxins——生长素
溶于95%乙醇或 1mol/LNaOH
诱导细胞的分裂和根的分化
培养基对非洲紫罗兰组织培养的影响
No NAA
NAA reduced to 0.1 mg. l-1
NAA increased to 5.0 mg. l-1
Na2MoO4.2H2O 0.25 mg/L
CuSO4.5H2O 0.025 mg/L
CoCl2.6H2O 0.025 mg/L
Na2.EDTA
37.3 g/L
FeSO4.7H2O 27.8 mg/L
一、母液的配制与保存
培养基母液:培养基各类溶液的浓缩液。
一、母液的配制与保存
• 培养基母液:配制母液不但可以保证各物 质成分的准确性及配制时的快速移取。一 般母液配成比所需浓度高。
第一节 植物组织培养的条件
1. 植物组织培养最基本的前提条件:用于培 养的外植体细胞必须具有全能性
2.离体隔离 3.适宜的培养条件
环境条件:光照、温度、湿度。 营养条件:培养基。
一、环境条件
温度
植物组织培养在最 适宜的温度下生长分 化才能表现良好,大 多数植物组织培养都 是在23-27 ℃之间进行,
无机盐浓度高、元素间比例适当,离子平衡性好,具 有较强的缓冲性,是目前使用最广泛的培养基。
White培养基特点:
无机盐、有机成分含量较低,适用于生根培养。
一、常用培养基特点
B5培养基 特点:
含较高的NO3-N,氨态氮含量较低,含有 较高的硫胺素(VB1)较适用于一些要求较 高氮素营养的植物培养,如常见木本植物 双子叶植物组培的选择
Murashige and Skoog (MS) Medium

光照强度对铁皮石斛组培幼苗生长及生理特性的影响

光照强度对铁皮石斛组培幼苗生长及生理特性的影响
2 Gu a n g d o n g Go l d e n Cr o ps Ag r i c u l t u r e S c i e n c e& T e c h n o l o g y Co mpa n y ,Gu a n g z h o u .Gu ng a d o n g 5 1 0 6 4 0 ,Ch i n a
o f ic f i n a l e Ki mu r a e t Mi g o i n v i t r o
L I Wu ,Z H E N G J i n g r o n g ,MO Z h a o w e n ,L I Z h i j u n , - , J I A N G L i
3 C o l l e g e f o A g r i c u h u r e ,S o u t h C h i n a A g r i c u l t u r e U n i v e r s i t y ,G u a n g z h o u ,G u a n g d o n g 5 1 0 6 4 2 ,C h i n a
s e e d l i n g s i n v i t r o .I n t h e s t u d y ,w e u s e d t e s t — t u b e s e e d l i n g s a s t h e e x p e i r me n t a l ma t e i r a l ,a n d s e t f o u r h i g h e r l i g h t
Ab s t a c t T h e s u i t a b l e l i g h t i n t e n s i t y h a s a g r e a t s i g n i i f c a n c e f o r c u l t i v a t i n g h i g h q u a l i t y D e n d r o b i u m o f i f c i n a l e

植物组织培养常见失败原因

植物组织培养常见失败原因

植物组织培养常见失败原因植物组织培养是一种将植物细胞或组织培养于无菌条件下,通过调节培养基中营养物质和激素的浓度,促使细胞或组织快速增殖和分化的技术。

然而,在实践中,植物组织培养常常会面临许多失败的挑战。

下面将介绍植物组织培养中常见的失败原因。

第一,原料选取不当。

植物组织培养需要使用健康且无病原体的组织或种子作为起始材料。

如果选取的组织或种子存在病原菌、真菌污染或已经失活,那么培养过程中很可能会导致失败。

因此,在进行组织培养前,必须对起始材料进行消毒处理,以确保无菌。

第二,环境因素不适宜。

组织培养需要在特定的环境条件下进行,包括温度、光照、湿度和气体浓度等。

如果环境温度过高或过低、光照不足或过强、湿度不够或过高,或者气体浓度不合适,都会对组织培养的成功率产生影响。

因此,在进行组织培养时,要选择适宜的实验室条件,并严格控制环境参数。

第三,培养基成分不合理。

培养基是植物组织培养中非常重要的因素之一,它提供了必需的营养物质和激素来支持细胞或组织的生长和分化。

如果培养基中营养物质过少或过多,或者激素浓度不合适,都会对组织培养的成功产生影响。

因此,在制备培养基时,要准确地配制营养物质和激素,并进行适当的调整。

第四,污染现象的发生。

由于植物组织培养需要在无菌条件下进行,因此,污染成为影响成功率的一个主要因素。

污染可以来自起始材料、培养器皿、培养基或操作者等多个方面。

常见的污染源包括细菌、真菌、酵母菌等微生物,以及灰尘、皮屑等异物。

为了避免污染,必须进行严格的无菌操作,并确保材料和设备的无菌。

第五,植物基因型和酶活性的影响。

不同植物的基因型和酶活性可能存在差异,这会影响组织培养的成功率。

有些植物品种对组织培养非常敏感,容易出现培养失败的情况。

此外,在进行组织切割和悬浮培养时,细胞酶的活性可能会导致组织断裂或无法分化。

因此,在进行植物组织培养前,要充分了解植物的基因型和酶活性,并选择合适的操作方法和培养条件。

第六,愈伤组织的选择和建立。

组培综合实验报告

组培综合实验报告

一、实验简介实验名称:组培综合实验实验目的:通过本实验,了解组织培养的基本原理和操作流程,掌握植物组织培养技术,并应用于植物繁殖和育种。

二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,通过离体培养的方法,使植物细胞或组织在人工控制的环境下生长、发育,最终形成完整的植株。

本实验主要涉及以下原理:1. 细胞全能性:植物细胞具有全能性,即具有发育成完整植株的潜力。

2. 培养基:培养基是植物组织培养的基础,提供植物生长所需的营养物质、激素等。

3. 灭菌:灭菌是防止微生物污染的关键环节,保证培养过程的顺利进行。

4. 光照:光照是植物进行光合作用的必要条件,有利于植物生长。

三、实验材料与仪器1. 材料:(1)植物材料:选用健康、无病虫害的植物器官或组织。

(2)培养基:MS培养基、1/2MS培养基等。

2. 仪器:(1)超净工作台:用于无菌操作。

(2)接种针:用于接种植物材料。

(3)培养箱:用于培养植物材料。

(4)显微镜:用于观察植物细胞形态。

(5)剪刀、镊子、酒精灯、烧杯等。

四、实验步骤1. 材料准备:选取健康、无病虫害的植物器官或组织,用自来水冲洗干净,然后用无菌水浸泡一段时间。

2. 灭菌:将准备好的植物材料放入70%酒精中浸泡30秒,然后用无菌水冲洗干净,再用0.1%氯化汞溶液浸泡5分钟,最后用无菌水冲洗干净。

3. 接种:将灭菌后的植物材料用接种针接种到培养基上。

4. 培养基配制:根据实验需求,配制MS培养基或1/2MS培养基。

5. 培养过程:将接种后的培养基放入培养箱中,控制温度、光照等条件,观察植物材料的生长情况。

6. 观察与记录:定期观察植物材料的生长情况,记录生长状态、植株高度、叶片数量等。

7. 数据分析:对实验数据进行整理、分析,得出结论。

五、实验结果与分析1. 植物材料在培养基上的生长情况良好,部分材料分化出芽和根。

2. 通过观察和记录,发现不同植物材料的生长速度和分化能力存在差异。

3. 分析实验数据,得出以下结论:(1)植物组织培养技术可以成功应用于植物繁殖和育种。

植物组培室设备及培养条件全攻略

植物组培室设备及培养条件全攻略

植物组培室设备及培养条件全攻略组培室建设首要考虑的问题就是组培室需要哪些设备条件和需要什么样的培养条件。

对这些有了全面了解以后,我们便可以因地制宜地新建或利用现有房屋建设实验室。

在设计组培室时,一般情况应按组培的流程来设计,同时考虑人物分流顺畅,空间合理利用。

植物组织培养要求严格的无菌的条件,需要一定专业仪器设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。

第一、实验室一个标准的组织培养实验室应当包括洗涤室、•配置室、接种室、培养室、观察室(冷却室)、灭菌室、洗苗室等。

在实际中可结合可行条件,合并一部分。

(一)洗涤室洗涤室完成玻璃器皿和其它仪器的清洗、干燥和贮存。

室内应配备大型水槽,用于培养器皿的洗涤,最好是内衬白瓷砖的水泥槽。

为防止碰坏玻璃器皿,可铺橡胶板,上下水道要畅通。

备有大型塑料筐,用于放置培养器皿。

可直接置于搁架上,以节约空间和便于运输工作。

备有空干架,以空干涮净的培养器皿。

(二)配置室、灭菌室(可分开)准备室要求明亮、通风。

在准备室内要完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。

如果房间较多,可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。

洗涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作;配置室则负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。

为完成培养基的制备工作,准备室还应配备以下仪器设备:1.工作台。

其高度应方便配制工作。

2.药品柜。

用以放置常用药品。

3.普通冰箱。

主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。

4.电子分析天平和托盘天平。

电子分析天平精确度为0.001g,用于称取大量元素、微量元素、维生素、激素等微量药品;托盘天平精确度为0.1g,用于称取用量较大的糖和琼脂等。

天平应放置在干燥、不受振动的固定操作台上。

5.纯水仪或电蒸馏水器。

纯水仪提供纯水,水质好。

电蒸馏水器,采用硬质玻璃或金属制成。

蒸馏水用于配制母液或培养基,配培养基可用自来水来代替,若实验要求严格的话,则须用蒸馏水。

不同光照强度对蝴蝶兰组培中外植体褐化的影响

不同光照强度对蝴蝶兰组培中外植体褐化的影响

南仪器厂 ) 。设 置 三 种 光 照 强 度 : 3 12 8士1 0 x 2 1 0 8 L ; 8 士
15 7 Lx; 1 士 1 0 。 323 6 Lx
附生草本植物 , 为单茎气 生兰 , 分株繁殖系数极低 【 。因此 , I ]
国 内外 对其 组培快繁做了大量研究工作 , 但对其成活率 的关
褐化百分数=塑
1 4 z 多酚氧化酶活性测定 .. 参考植物生理学实验 ( 朱广
1 材 料与 方法
11 试 验 材 料 .
廉等 ,90 [ 19) 。略傲改进 , 研磨浸 提液 为 0 0mo/ p . . 5 lL H5 8
磷酸缓冲液 。在 UV一1 O 6 1型分光光度 计上测 定 5 5 m处 2n
的 0D值 。
中 国农 业科 学院蔬菜 花卉研究 所花卉 组培室 的蝴蝶兰
R 4品 种 。
1 2 培 养过 程 中 不 同 光 照 强 度 处 理 .
] ̄ W:
( A/ ・ lf g A O O n n。 ) i
均在 P - 3 0 QX 0 B智能人工气候培养箱中进行 ( 宁波东
类物质形成醌而引起 的[ 。通过加 入抗氧化 荆和吸 附剂可
较好控制褐化发生 , 但对外 植体生 长不利 , 而对外 植体进 行遮光处理可减缓酚 类物 质合成m .这 与酚类物质 合成 和
氧 化 相 关 的酶 都 是 光 诱 导 型 的 有 关 。本 试 验 通 过 在 培 养 过
c , m) 每处 理接种 2 瓶 , o 3次重 复 , 1 0株外植 体 , 共 8 用于测
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北 方 园 艺 20()10 11 06 : ~ 6 4 6

不同光谱的LEDs对蝴蝶兰组培苗生长的影响

不同光谱的LEDs对蝴蝶兰组培苗生长的影响

不同光谱的LEDs对蝴蝶兰组培苗生长的影响戴艳娇;王琼丽;张欢;代大勇;文民操;徐志刚【摘要】研究新型光源LEDs(Light emitting diodes)辐射的红蓝等光进行不同光质配比组合后,对蝴蝶兰组培苗各形态指标、色素含量、碳氮代谢及抗氧化酶系活性的影响.结果表明,单色红光处理的蝴蝶兰组培苗徒长,RBG(红光/蓝光/绿光)处理组全部生根,单色蓝光处理的组培苗根系活力最高.红蓝组合和单色蓝光处理的叶片色素含量高于白光,叶绿素a/b比值、叶绿素a/类胡萝卜素比值随着R/B比率的降低而减小.可溶性糖、蔗糖、游离氨基酸和淀粉的含量及C/N(碳氮比)在单色蓝光下均高于单色红光处理.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2010(000)005【总页数】5页(P227-231)【关键词】发光二极管(LEDs);光质;蝴蝶兰;植物组织培养【作者】戴艳娇;王琼丽;张欢;代大勇;文民操;徐志刚【作者单位】南京农业大学农学院,江苏南京,210095;南京农业大学农学院,江苏南京,210095;南京农业大学农学院,江苏南京,210095;南京农业大学农学院,江苏南京,210095;南京农业大学农学院,江苏南京,210095;南京农业大学农学院,江苏南京,210095【正文语种】中文【中图分类】S682.310.4+3蝴蝶兰(Phalaenopsis ssp.),兰科蝴蝶兰属植物,原产于中国台湾、菲律宾、印尼、泰国、马来西亚等地[1]。

其株型美观,花型奇特似蝶,花色鲜艳,花期持久,在热带兰中有“兰花皇后”之美誉,有较高的观赏和经济价值,深受国内外花卉市场的欢迎。

由于其典型的单茎性气特性,既无匍匐茎,也无假球茎,极少发育侧枝,故不易进行分株繁殖,又其形成种子少且该种子无胚乳,种子繁殖非常困难,为满足蝴蝶兰与日俱增的市场需求量,组织培养作为蝴蝶兰高效繁殖的重要手段越来越受到重视[2]。

光谱对植物的生长发育、形态建成、光合作用、物质代谢以及基因表达均有调控作用[3],通过光质调节和控制植株形态建成和生长发育,可使植株在一定程度上满足人们生产需要。

植物组织培养

植物组织培养

绪论植物组织培养(Plant tissue culture)广义上是指无菌条件下,在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。

外植体:愈伤组织:一、植物组织的主要特征:(1)在培养容器中进行;(2)无菌培养环境,排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入;(3)各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下,并可达到最适条件。

(4)通常打破了正常的植物发育过程和格局;(5)随着单细胞和原生质体培养技术的发展,对植物显微结构进行操作成为可能。

二、植物组织培养类型:根据不同分类的依据可以分为不同类型。

1、根据培养材料不同分为:(1)完整植株培养(Plant Culture):对幼苗和较大植株等的培养。

(2)胚胎培养(Embryo Culture):包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。

(3)器官培养(Organ Culture):包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。

(4)组织培养(Tissue Culture):如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。

(5)细胞培养(Cell Culture):指对单细胞或较小的细胞团进行培养。

(6)原生质体培养(Protoplast Culture):指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。

三.植物组培的应用1.植物离体快繁。

2.无病毒苗木培养。

3.培育新品种或创制新物种。

4.次生代谢物生产。

5.植物种质资源的离体保存。

6.人工种子。

第一章1.)实验室包括:准备室,无菌操作室,培养室,温室。

2.)器具的灭菌:1、器具灭菌:培养皿、解剖刀、镊子等用品。

(1)干热灭菌:铝箔包好后,放于恒温干燥箱内,150 ℃保温2小时,成本较高。

(2)高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌锅内120 ℃15-20分钟。

(3)灼烧灭菌:接种时,解剖刀及镊子等浸入95%乙醇,然后取出在酒精灯火焰上灼烧杀菌。

2、培养基灭菌:采用高压蒸汽灭菌。

组培光照要求

组培光照要求

组培光照要求
嘿,咱来说说组培光照要求哈!这光照啊,那可太重要了,就好比人得吃饭一样关键!你想想,植物没了合适的光照,那不就跟人饿着肚子没力气差不多嘛!
先说光照强度。

哎呀呀,它可不能太强喽,太强了那植物不得被晒得晕头转向啊!比如说把小幼苗放在大太阳下面直晒,那不就像人在沙漠里被暴晒一样难受嘛!但也不能太弱呀,太弱了植物咋生长呀,就像人没吃饱饭哪有力气长个儿呀!你说是不?比如有些组培的植物放在很暗的地方,那能长好才怪呢!
还有光照时间。

这也得恰到好处才行呢!时间太长太短都不行呀!就跟人睡觉一样,睡多了睡少了都不舒服。

要是光照时间太长了,植物也会累呀,它也得休息休息呀!可要是太短了,那它营养都不够,怎么能好好发育呢,好比人没睡够觉没精神一样。

比如有些植物需要每天照那么几个小时,多了少了可能都会出问题呢!
总之啊,组培光照要求可得重视起来,可别小瞧了这些细节,不然咱的组培成果可就不咋样喽!。

组培实验外植体选择处理及接种培养

组培实验外植体选择处理及接种培养
刀、剪、镊等用具,一般在使用前浸泡在95%酒精中 或插在器械灭菌器中,用时在火焰上消毒,待冷却后使 用。每次使用前均需进行用具消毒。
(二)外植体的培养 接种后的外植体应送到培养室去培养。组织培养的优
点之一就是在人工控制的环境条件下,使培养物生长发育 ,研究植物的生命活动。
培养室的培养条件要根据植物对环境条件的不同需求 进行调控。其中最主要的是光照、温度、湿度、氧气和培 养基的pH值等。
(1)防止材料带菌
①用茎尖作外植体时,可在室内或无菌条件下对枝条先进行预 培养。枝条水洗净插入无糖的营养液或自来水促使抽枝,以这 种新抽的嫩枝条作为外植体接种。这样便可大大减少材料的污 染。
或在无菌条件下对采自田间的枝条进行暗培养,待抽出徒 长的黄化枝条时采枝,经灭菌后接种也可明显减少污染。
②选择合适的时间去田间采取外植体
2.温度 离体培养中对温度的调控要比光照显得更 为突出。不同的植物有不同的最适生长温度,大多 数植物最适温度在23C-32C之间。培养室一般所 用的温度是25C±2C。低于15C或高于35C,对 生长都是不利的。
3.湿度 组织培养中的湿度影响主要有两个方面,一是培 养容器内的湿度,它的湿度条件常可保证100%。二是培 养室的湿度,它的湿度变化随季节和天气而有很大变动 。湿度过高过低都是不利的,过低会造成培养基失水而 干枯,或渗透压升高,影响培养物的生长和分化;湿度 过高会造成杂菌滋长,导致大量污染。因此,要求室内 保持70%-80%的相对湿度。

②对易污染而难灭菌的材料用多种药液交替浸泡消毒: • 一是将外植体用洗涤液充分洗净并修整干净; • 二是将材料放入75%洒精中灭菌30-60s; • 三是在1:500的Roccal B(一种商品灭菌剂名)稀释液中
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光照条件对植物组培的影响
植物组培是二十世纪发展起来的一项生物技术,经过几十年的发展,这项技术在基础理论和实际应用方面都获得了飞快的发展。

早期的组培报道,多集中于研究各类植物的培养基组成,包括无机盐、有机物、激素等培养基成分的种类和配比浓度。

近几年来随着越来越多培养基研究成果的积累,人们的研究逐渐深入到培养条件方面,如培养温度、光照强度、容器内空气因素对组培和培养过程中植物生长速度、生长质量的影响。

组织培养中光照也是重要的条件之一,主要表现在光强、光质、以及光照时间方面:
1、光照强度(lightintensity)
光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,从目前的研究情况看,光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。

一般来说,光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长。

2、光质(lightwave)
光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。

如百合珠芽在红光下培养,8周后,分化出愈伤组织。

但在蓝光下培养,几周后才出现愈伤组织,而唐菖蒲子球块接种15天后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长旺盛,而白光下幼苗纤细。

据倪德祥等在香石竹的研究表明,白光条件下生长量最高,其次是红、黄、绿、蓝光对生长有抑制作用,单色光对叶绿素合成有抑制作用,叶绿素的合成需要在复合光条件下完成。

3、光周期(lightperiod)
试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养,最常用的周期是16h的光照,8h 的黑暗。

研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。

如红花、乌饭树的愈伤组织。

除某些材料诱导愈伤组织需要黑暗条件外,一般培养都需一定的光照。

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