细菌培养采样方法

供应室工作环境监测

各类环境空气、物体表面、医务人员手细菌菌落总数卫生学标准如下：

消毒液的采样及检查方法

采样方法：用无菌吸管吸取使用中的消毒液1ML，置于备好的试管内及时送检，送检时间不超过4时，必要时试管中加中和剂。

采样前准备：洗手，手套，口罩，无菌吸管，试管，酒精灯，打火机，无菌剪刀

浸泡使用的消毒液细菌培养：用于灭菌的消毒液没有检出任何微生物为合格；用于消毒物品的消毒液其染菌量﹤100cfu/ml.未检出致病菌或细菌生长均为合格;

空气采样及检查方法

检查原则：每个月一次，空气消毒结束后进行，一般不超过消毒后4小时，采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超

过4h。未检出致病菌为合格，不得检出乙型溶血性链球菌，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌等其它致病菌，不得超过规定区域所执行的标准参数；

空气采样及检查方法：

采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样；

采祥高度：与地面垂直高度80－150cm；

布点方法：室内面积≤30M2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处各取一点;室内面积>30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m，注意采样时不走回头路，不得逆行；

采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。

采样前准备：洗手，戴口罩，培养皿（看采样面积大小准备）；

物体表面采样及检查方法

采样时间：选择消毒处理后4小时内进行采样；

采样面积：被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2；

采样方法：用5×5cm2的标准灭菌规格板；放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水平样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次；并随之转动棉拭子。连续采样1-4个规格板面积；剪去手接触部分，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。不规则样物品如门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。

采样前准备：试管，酒精灯，无菌生理盐水，棉拭子，打火机，无菌剪刀，手套，口罩，无菌规格板

医护人员手采样及检查方法

采样时间：在接触病人、从事医疗活动前进行采样。

采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm2〕，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位；将棉试子放入装有10ml采样液的试管内这位。采样面积按平方厘米（cm2）计算。采样前准备：试管，酒精灯，无菌生理盐水，棉拭子，打火机，无菌剪刀，手套，口罩

灭菌后无菌物品采样及检查方法

在无菌操作下按物体表面采样方法采样，放入肉汤试管中培养；

将嗜热脂脉杆菌片放于用专用毛巾制成的测试包中，打包成规格为23*23*15大小的标准测试包中，放于排汽口上方，经过一个灭菌周期后，在无菌操作下取出嗜热脂肪杆菌片放于培养皿中，经过48小时56℃培养箱培养后观察结果。

物品准备：培养皿，二把无齿镊