酶Ⅰ的识别序列和切点是—G

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分子生物学大实验习题及解答(精)

分子生物学大实验习题及解答一、名词解释1、genome；2、基因芯片；3、持家基因；4、Operon；5、感受态细胞；6、逆转录酶；7、PCR技术；8、转化；9、重组DNA技术；10、基因沉默；11、hnRNA；12、复制子；13、反义RNA；14、衰减子；15、拟基因；16、RNA编辑；17、颠换；18、拓扑异构酶；19、变性；20、转座子二、基础理论单项选择题1、DNA连接酶的作用为（）A、合成RNA引物B、将双螺旋解链C、去除引物、填补空隙D、使双螺旋DNA链缺口的两个末端连接2、DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。

A、引导合成冈奇片段B、作为合成冈奇片段的模板C、为DNA合成原料dNTP 提供附着点D、激活DNA聚合酶3、下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分（）A、 H1B、H2A 、H2BC、 H3、H4D、 H54、DNA的变性：（）A、包括双螺旋的解旋B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂5、转录需要的原料是:（）A、 dNTPB、 dNDPC、 dNMPD、 NTP6、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核甘酸：A、DNA聚合酶ⅢB、 DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅠD、外切核酸酶MFl7、下真核生物复制起始点的特征包括（）A、富含GC区B、富含AT区C、 Z DNAD、无明显特征8、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同9、DNA复制时不需要以下哪种酶？（）A、 DNA指导的DNA聚合酶B、RNA指导的DNA聚合酶C、拓扑异构酶D、连接酶10、1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。

这两个实验中主要的论点证据是：（）A、从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂B、DNA突变导致毒性丧失C、生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能D、DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子11、利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件叫（）A、启动子B、转座子C、T-DNAD、顺反子12、原核DNA合成酶中（）的主要功能是合成前导链和冈崎片段A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、引物酶13、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。

与限制酶有关的例题及解析_陈品琴

( 1) 把经酒精浸泡过的盖玻片擦拭干净，用小砂轮切割成约 5 × 8mm 大小的小片。
( 2) 按常规方法，将原生动物细胞固定，制备成电镜包埋块，修整后置于超薄切片机上，调整超薄切片机至半薄切片档进行切片，得到一定数量的切片( 0． 5 ～ 2μm 厚度) ，用睫毛针把切片从包埋块上剥离。
( 3) 一手用镊子夹取玻璃小片在水槽中捞取半薄切片，同时另一手持睫毛针对切片进行引导、定位。
例 3 如图是含某种目的基因的 DNA 片段，据图回答下列问题。
根据图示可知，若用 EcoRⅠ( 能识别 GAATTC 序
列) 和 SmaⅠ( 能识别 CCCGGG 序列) 限制酶切割，则
此 DNA 片段可有
个限制酶切割位点。
解析: EcoRⅠ和 SmaⅠ能识别的序列均为 6 个核
苷酸。EcoRⅠ能识别的只是 5’→3’的 GAATTC 序列，
而不能识别 3’→ 5’的 GAATTC 序列。故该目的基因
的 DNA 片段中共有 1 个 EcoRⅠ的切点和 1 个 SmaⅠ
切点。答案 2。
提示: 在一般表示 DNA 分子碱基序列的图中，上
边一条链是 5’→3’方向，下边一条是 3’→5’方向。
限制酶的识别序列具有方向性，通常写出的限制酶的
( 1) 将图中①的 DNA 用 HindⅢ、BamHⅠ完全酶
切后，反应管中有
种 DNA 片段。
解析: 图中 ① DNA 中在目的基因的左侧依次有 BamHⅠ和 HindⅢ的切点各 1 个，在目的基因的右侧有 BamHⅠ的切点 1 个，因此图中 ①DNA 共有 3 个酶切点，被完全酶切后可获得 4 种 DNA 片段。答案 4。

限制酶的多种切割方法以及在高中生物试题中的体现

限制酶的多种切割方法以及在高中生物试题中的体现周荷静（相城区陆慕高级中学 215131）摘要：本文总结了限制酶的多种割切方法，并分析其优缺点，并结合相关生物试题，对其更加深入理解。

关键字：限制酶单酶切双酶切高考题限制酶是基因工程中的工具酶之一，为了让目的基因能连接到运载体上，需要用限制酶分别切割含目的基因的DNA片段和运载体，切割方法有多种，现就其切割方法进行总结，分析其优缺点。

近几年高考生物试题中几乎年年涉及到限制酶的切割方法，这应该引起教师的注意。

1 单酶切1.1 同一种限制酶分别切割目的基因与运载体这是最简单的一种方法，用同一种酶切割后能产生相同的粘性末端，末端之间能发生碱基互补配对而形成重组DNA分子。

1.2 用同裂酶分别切割目的基因与运载体同裂酶：有时两种限制性内切酶的识别核苷酸顺序和切割位置都相同，这些有相同切点的酶称为同裂酶（同切酶或异源同工酶）。

同裂酶差别只在于当识别顺序中有甲基化的核苷酸时，一种限制性内切酶可以切割，另一种则不能。

例如HpaⅡ和MspⅠ的识别顺序都是5’……G|CG G……3’和3’……G GC|G……5’，如果其中有5’-甲基胞嘧啶，则只有HpaⅡ能够切割。

例1 （2009年江苏生物高考题）苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。

下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图amp r为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

(2) 图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______种重组质粒；如果换用Bst I与BamH I酶切，目的基因与质粒连接后可获得_______种重组质粒。

解析题中考查的是相同的粘性末端才能发生碱基互补配对而连接这一知识点。

用HindIII与Bam I酶切，则质粒产生两个粘性末端，分别是H和B，也就是说能与质粒连接的DNA分子的粘性末端也只能是H和B，用HindIII与Bam I酶切含目的基因的DNA片段，可得到4种DNA片段，他们的粘性末端分别是B、B和H、H和B、B，因此有中间的两个DNA片段可以与质粒连接，形成2种重组质粒。

基因工程【课后练习题】

基因工程课后练习题1.基因工程技术引起的生物变异属于（）A．染色体变异 B．基因突变 C．基因重组 D．不可遗传的变异2.在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（）A．540个B．8100个 C．17280个 D．7560个3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不正确的是（）A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4.当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是（）A．都与天然产物完全相同 B．都与天然产物不相同C．基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同D．基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同5．在进行植物组织培养时，培养基中的某种化合物被3H标记。

一段时间后，发现3H只集中在愈伤组织细胞的细胞核、线粒体和叶绿体。

则培养基中被标记的化合物最．可能是 ( )A.氨基酸B．核苷酸C．葡萄糖 D．水6.切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是（）A．基因突变：DNA→RNA→蛋白质 B．基因工程：RNA→RNA→蛋白质C．细胞工程：DNA→RNA→蛋白质 D．基因工程：DNA→RNA→蛋白质8．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B.噬菌体、质粒、DNA连接酶C.限制酶、RNA连接酶、质粒D.限制酶、DNA连接酶、质粒9．不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因 D．它是环状DNA10．下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（）T A G G G G T A①②③④A．①②B．②③C．③④D．②④11．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（）①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦ B．①④⑥ C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦12．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用A .提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C.增加质粒分子的分子量 D．便于与外源基因连接13．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A．人工合成基因B．目的基因与运载体结合C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测和表达14．不属于基因工程方法生产的药物是（）A．干扰素 B．白细胞介素 C．青霉素D．乙肝疫苗15.若利用基因工程技术培育能固氮的水稻新品种，其在环保上的重要意义是（）A．减少氮肥的使用量，降低生产成本 B．减少氮肥的使用量，节约能源C．避免氮肥过多引起环境污染 D．改良土壤结构16.上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指（）A.提供基因的动物B.基因组中增加外源基因的动物C.能产生白蛋白的动物D.能表达基因信息的动物17．在基因诊断技术中，所用的探针DNA分子中必须存在一定量的放射性同位素，后者的作用是（）A．为形成杂交的DNA分子提供能量B．引起探针DNA产生不定向的基因突变C. 作为探针DNA的示踪元素D．增加探针DNA的分子量18．诊断苯丙酮尿症所用的探针是（）A．32P半乳糖甘转移酶基因 B．荧光标记的苯丙氨酸羧化酶C. 荧光标记的β—珠蛋白基因 D．3H苯丙氨酸羧化酶基因19．现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。

基因工程典型例题

1．下图a 示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒，Amp r 表示氨苄青霉素抗性基因，Tet r 表示四环素抗性基因。

目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。

为了检查运载体是否导入原本没有Amp r 和Tet r 的大肠杆菌（受体细胞），将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图b 的结果（黑点表示菌落）。

再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图c 的结果（空圈表示与b 对照无菌落的位置）。

据此分析并回答：（1）pBR322质粒的化学本质是，其控制着等性状，质粒的复制必须在中完成。

（2）根据用途，题中所用培养基属于选择培养基，与图c 空圈相对应的图b 中的菌落表现型是，由此说明目的基因插入了中。

2、科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。

其过程大致如下图所示：(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是。

(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有、等。

(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的特点。

Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为。

(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是。

(5)一个基因表达载体的组成必须有等。

(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是。

这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是。

若从个体水平来任何检测？。

3、利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。

2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。

元旦作业新题

高三生物元旦假期作业——新题部分29．（12分）请回答下列问题：（1）某研究小组对甲、乙两种植物的叶肉细胞在不同光照强度下的相关生理过程进行了测定，得到了下表所示数据（光照强度的单位为千勒克斯，CO2的吸收和释放速率的单位不作要求）：当光照强度为2千勒克斯时，甲植物光合作用产生的O2的去向是__________，乙植物光合作用产生的O2的去向是__________。

当光照强度为8千勒克斯时，乙植物的总光合速率是__________。

（2）下图所示装置可以测定一些生理活动强度（仅考虑以葡萄糖为呼吸作用底物）：①若甲烧杯中为酵母菌培养液，乙烧杯中为NaOH溶液，液滴向左移动，则单位时间内移动的距离可代表__________。

②若甲烧杯中为小球藻培养液，乙烧杯中为__________，装置置于适宜光照强度条件下，液滴向__________移动，则单位时间内移动的距离可以代表小球藻净光合作用的强度。

30．（14分）为研究油菜素内酯（BR）在植物向性生长中对生长素（IAA）的作用，科研人员以拟南芥为材料进行了如下实验。

请回答下列问题：（1）BR作为一种植物激素，它与其他植物激素的关系是__________。

（2）科研人员在黑暗条件下用野生型和BR合成缺陷突变体拟南芥幼苗进行实验，三组幼苗均水平放置，其中一组野生型幼苗施加外源BR，另外两组不施加，测定0～14h内三组幼苗胚轴和主根的弯曲度，结果如下图所示。

若测得主根向下弯曲，则胚轴弯曲的方向向__________。

施加外源BR的野生型幼苗的胚轴、主根出现最大弯曲度的时间是__________，该BR合成缺陷突变体植株出现最大弯曲度的时间较其他两组出现最大弯曲度的时间__________。

上述实验结果能说明__________。

（3）IAA可引起G酶基因表达，G酶可催化无色底物生成蓝色产物。

科研人员将转入了G酶基因的野生型和BR合成缺陷突变体植株的主根用含有无色底物的溶液浸泡一段时间后，观察到野生型植株主根的蓝色产物分布于分生区和伸长区，而BR合成缺陷突变体植株主根的蓝色产物仅分布于分生区，说明__________，进而推测BR能够促进IAA的极性运输。

3.1重组DNA技术的基本工具——高二生物学人教版(2019)选择性必修三同步课时训练

3.1重组DNA技术的基本工具——2023-2024学年高二生物学人教版（2019）选择性必修三同步课时训练一、单选题1．同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。

下图为EcoRI、Bam-HI、BglI和MboI四种限制酶的识别序列及酶切位点。

下列说法正确的是( )A.BamHI、BgⅡ、MboI属于同族酶，他们的识别序列相同B.使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大C.选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化D.用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后，可被二者重新切开2．红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种激素物质，是当今最成功的基因工程药物，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。

由于天然EPO来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。

其简要生产流程如图，下列相关叙述正确的是( )A.过程①用到的工具酶有DNA聚合酶、限制酶和DNA连接酶B.构建的重组表达载体中终止子的作用是终止翻译过程C.检测重组细胞是否表达出rhEPO常用抗原—抗体杂交技术D.用乳腺生物反应器生产EPO可将人EPO基因导入哺乳动物体细胞获得3．甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关如图所示的黏性末端的说法，正确的是( )A.甲、乙、丙三种限制酶识别的核苷酸序列由核糖核苷酸组成B.限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团C.甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产生的相同黏性末端D.甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段能被甲、乙限制酶切割4．甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。

图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。

下列相关叙述错误的是( )A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为200bp,Bam HⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点5．基因编辑是一种基因工程技术，CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割。

生物选修3专题1_基因工程__1.1DNA重组技术的基本工具_训练案及答案

高中高效课堂高一生物训练案一、选择题：1．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA 连接酶B.噬菌体、质粒、DNA 连接酶C.DNA 限制酶、RNA 连接酶、质粒D.DNA 限制酶、DNA 连接酶、质粒 2．不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A ．能复制 B.有多个限制酶切点 C ．具有标记基因 D ．它是环状DNA3．下列四条DNA 分子，彼此间能连接在一起的一组粘性末端是（）① ②③ ④A ．①②B ．②③C ．③④D ．②④ ４．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A ．①③⑤⑦B ．①④⑥C ．①③⑥⑦D ．②③⑥⑦５．有关基因工程的叙述中，错误的是（）A ．DNA 连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B ．限制性内切酶用于目的基因的获得C ．目的基因须由载体导入受体细胞D ．人工合成目的基因不用限制性内切酶６．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。

一种限制性内切酶能识别DNA 子中的GAATTC 顺序，切点在G 和A 之间，这是应用了酶的（）A ．高效性 B.专一性 C ．多样性 D.催化活性受外界条件影响７．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C. 增加质粒分子的分子量 D ．便于与外源基因连接8．下列属于基因运载体所必须具有的条件是（多选）（）A 、具有某些标志基因B 、具有环状的DNA 分子C 、能够在宿主细胞内复制D 、具有多种限制性内切酶9．下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选）（）A ．大肠杆菌B ．质粒C ．动物病毒D ．线粒体 10．在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( )A.将目的基因从染色体上切割出来B.识别并切割特定的DNA 核苷酸序列C.将目的基因与运载体结合D.将目的基因导入受体细胞11．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA 末端为A 、平头末端B 、3突出末端C 、5突出末端D 、粘性末端 12．在基因工程中通常所使用的质粒是（） A 、细菌的染色体DNA B 、细菌拟核外的DNA C 、病毒染色体DNA D 、噬菌体DNA13．下列关于限制酶的说法不正确的是( )A.限制酶广泛存在于各种生物中，在微生物细胞中分布最多B.不同的限制酶识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因 14．（05全国Ⅰ）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。

2020年人教版高考生物一轮复习重点知识一题多变解题技巧和复习训练(精品)

范文2020年人教版高考生物一轮复习重点知识一题多1/ 6变解题技巧和复习训练(精品)一题多变限制性内切酶的识别与切割： 1．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。

已知限制酶 I 的识别序列和切点是—G↓GATCC 一，限制酶 II 的识别序列和切点是一↓GATC 一。

根据图示,判断下列操作正确的是： A．质粒用限制酶 I 切割，目的基因用限制酶 II 切割 B．质粒用限制酶 II 切割，目的基因用限制酶 I 切割 C．目的基因和质粒均用限制酶 I 切割 D．目的基因和质粒均用限制酶 II 切割 2．科学家通过基因工程的方法，能使大肠杆菌产生人的胰岛素。

以下叙述，错误的是 A．人工合成的胰岛素基因与天然的胰岛素基因碱基序列不一定相同 B．目的基因导入受体细胞后不一定能表达C．DNA 连接酶和限制性内切酶都是构建重组质粒必需的工具酶 D．不同的限制性内切酶处理目的基因和质粒产生的黏性末端一定不能互补配对 3．下面是 5 种限制性内切酶对 DNA 分子的识别序列和剪切位点图（↓ 1表示剪切点、切出的断面为黏性末端）：限制酶 1：——↓GATC——；限制酶 2：——CATG↓——；限制酶 3：——G↓GATCC——；限制酶 4：——CCGC↓GG——；限制酶 5：——↓CCAGG——。

请指出下列哪组表达正确 A．限制酶 2 和 4 识别的序列都包含 4 个碱基对 B．限制酶 3 和 5 识别的序列都包含 5 个碱基对C．限制酶 1 和 3 剪出的黏性末端相同 D．限制酶 1 和 2 剪出的黏性末端相同 4．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割 DNA 分子上特定的核苷酸序列。

下图为四种限制酶 BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。

箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的 DNA 片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何? A．BamHI 和 EcoRI；末端互补序列一 AATT 一 23/ 6B．BamHI 和HindⅢ；末端互补序列—GATC—C．EcoRI 和HindⅢ；末端互补序列—AATT—D．BamHI 和Bg lⅡ；末端互补序列一 GATC—限制性内切酶的切割片断计算： 1．现有一长度为 3000 碱基对(bp)的线性 DNA 分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。

基因工程学习案

专题1 基因工程【复习要求】1．说明基因操作的基本工具的来源及作用2．举例说明基因工程的基本操作程序【预习成果展示】1.【小组合作探究】一．思考：怎样书写黏性末端？限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC —。

在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点，用上述两种酶分别切割质粒和含有目的基因的DNA。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶的作用下，上述两种限制酶切割后形成的黏性末端是否能连接起来，为什么？规律提升：限制酶切割后形成黏性末端的步骤：①根据序列完成②找到酶切位点③目的基因位于识别序列中间，限制酶切割会产生个切口，个黏性末端。

二．基因工程操作的基本程序思考1.基因表达载体的构成(用图的形式表示各部分及位置关系)。

2.标记基因能作为检测基因工程成功的依据吗？应该怎样检测才能判定基因工程的成功与否？3．外源基因之所以在受体细胞实现表达的原因.【当堂检测】1.下列关于DNA连接酶作用的叙述正确的是A．将单个核苷酸加到某DNA片段末端形成磷酸二酯键B．将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C．连接两条DNA链上碱基之间的氢键D．只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能将双链DNA片段平末端连接2.由同一种限制酶切割成的黏性末端是（）A①②B①③C①④D②③3．（06江苏）我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不正确的是A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4.（11海南）回答有关基因工程的问题：（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_ __末端。

基因工程练习题（附答案）

基因⼯程练习题（附答案）基因⼯程练习题1、在基因⼯程中使⽤的限制性核酸内切酶，其作⽤是( )A、将⽬的基因从染⾊体上切割出来B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列C、将⽬的基因与运载体结合D、将⽬的基因导⼊受体细胞2、基因⼯程中常⽤细菌等原核⽣物作受体细胞的原因不包括( )A、繁殖速度快B、遗传物质相对较少C、多为单细胞，操作简便D、DNA为单链，变异少3、基因⼯程是DNA分⼦⽔平的操作，下列有关基因⼯程的叙述中，错误的是( )A、限制酶只⽤于切割获取⽬的基因B、载体与⽬的基因可以⽤同⼀种限制酶处理C、基因⼯程所⽤的⼯具酶是限制酶，DNA连接酶D、带有⽬的基因的载体是否进⼊受体细胞需检测4、运⽤现代⽣物技术，将苏云⾦芽孢杆菌的抗⾍基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最⽅便的⽅法是检测棉花植株是否有( )A、抗⾍基因B、抗⾍基因产物C、新的细胞核D、相应性状5、转基因动物转基因时的受体细胞是( )A、受精卵B、精细胞C、卵细胞D、体细胞6、基因⼯程中常见的载体是( )A、质体B、染⾊体C、质粒D、线粒体7、⽔母发光蛋⽩由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋⽩质的基因作为⽣物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋⽩质的作⽤是( ) A、促使⽬的基因导⼊宿主细胞中B、促使⽬的基因在宿主细胞中复制C、使⽬的基因容易被检测出来D、使⽬的基因容易成功表达8、运⽤现代⽣物技术的育种⽅法，将抗菜青⾍的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗⾍的油菜品种，这⼀品种在⽣长过程中能产⽣特异的杀⾍蛋⽩质，对菜青⾍有显著抗性，能⼤⼤减轻菜青⾍对油菜的危害，提⾼油菜产量，减少农药使⽤，据以上信息，下列叙述正确的是( )A、Bt基因的化学成分是蛋⽩质B、Bt基因中有菜青⾍的遗传物质C、转基因抗⾍油菜能产⽣杀⾍蛋⽩是由于具有Bt基因D、转基因抗⾍油菜产⽣的杀⾍蛋⽩是⽆机物9、⼈的糖蛋⽩必须经内质⽹和⾼尔基体进⼀步加⼯合成，通过转基因技术，可以使⼈的糖蛋⽩基因得以表达的受体细胞是( )A、⼤肠杆菌B、酵母菌C、T噬菌体 D、质粒DNA410、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA11．下列关于各种酶作⽤的叙述，不正确的是（）A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C．⼀种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种⽬的基因D．胰蛋⽩酶能作⽤于离体的动物组织，使其分散成单个细胞12、治疗⽩化病、苯丙酮尿症等⼈类遗传疾病的根本途径是A、⼝服化学药物B、注射化学药物C、利⽤辐射或药物诱发致病基因突变D、采取基因疗法13．下列与基因⼯程⽆关的是( )A、培养利⽤“⼯程菌”⽣产胰岛素B、基因治疗C、产⽣⼈胰岛素的⼤肠杆菌D、杂交育种14.基因⼯程的设计施⼯是在什么⽔平上进⾏的 ( )A.细胞B.细胞器C. 原⼦D.分⼦15．⼈胰岛细胞能产⽣胰岛素，但不能产⽣⾎红蛋⽩，据此推测胰岛细胞中（）A．只有胰岛素基因B．⽐⼈受精卵的基因要少C．既有胰岛素基因，也有⾎红蛋⽩基因和其他基因D．有胰岛素基因和其他基因，但没有⾎红蛋⽩基因16、能够使植物体表达动物蛋⽩的育种⽅法是（）A、单倍体育种B、杂交育种C、基因⼯程育种D、多倍体育种17、要彻底治疗⽩化病必须采⽤（）A．基因治疗 B．医学⼿术C．射线照射 D．⼀般药物18、下列哪项不是基因⼯程中经常使⽤的⽤来运载⽬的基因的载体（）A、细菌质粒B、噬菌体C、动植物病毒D、细菌核区的DNA19、在基因⼯程中，作为基因运输⼯具的运载体，下列特征除哪项外，都是运载体必须具备的条件（）A、能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存B、具有多个限制酶切点C、必须是细菌的质粒或噬菌体D、具有某些标记基因20、1993年，我国科学⼯作者培育成的抗棉铃⾍的转基因抗⾍棉，其抗⾍基因的来源（）A.普通棉花的基因突变B.棉铃⾍变异形成的致死基因C.寄⽣在棉铃⾍体内的线⾍D.苏云⾦芽孢杆菌体内的抗⾍基因21．正确表⽰基因操作“四步曲”的是（）①提取⽬的基因②⽬的基因导⼊受体细胞③⽬的基因与运载体的结合④⽬的基因的检测和表达A.①②③④B.④①③②C.①③②④D.③①②④22．现有⼀长度为1000碱基对（bp）的DNA分⼦，⽤限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分⼦仍是1000bp，⽤KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分⼦，⽤EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分⼦。

高中生物选择性必修三练透试卷第3章章末检测试卷(三)

章末检测试卷(三)(满分：100分)一、选择题(本题包括18小题，每小题3分，共54分)1．(2023·江苏泰州高二模拟)下列有关酶的叙述，正确的是()A．DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来B．限制性内切核酸酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子C．DNA聚合酶可将两个DNA分子片段连接起来D．逆转录酶是以RNA为模板指导核糖核苷酸连接合成DNA的酶2．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。

已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。

根据图示判断，下列操作正确的是()A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割C．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割D．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割3．如图为某质粒限制酶酶切图谱。

某基因不含图中限制酶识别序列。

为使PCR扩增的该基因与该质粒构建重组质粒，则扩增的该基因两端需分别引入哪两种限制酶的识别序列()A．NdeⅠ和Bam H ⅠB．NdeⅠ和XbaⅠC．XbaⅠ和Bam H ⅠD．Eco R Ⅰ和KpnⅠ4．(2023·贵州遵义高二检测)下列与DNA粗提取和鉴定有关的叙述，正确的是()A．预冷的酒精可使DNA更容易析出B．DNA在2 mol·L－1的NaCl溶液中溶解度较低C．鉴定粗提取的DNA时，对照组与实验组的区别是加不加二苯胺试剂D．用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近5.科学家设法将生长激素基因导入其他生物体(细胞)内，从而获取大量的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗。

部分过程如图所示，下列有关分析错误的是()A．人的生长激素mRNA只能从人的垂体细胞中提取B．过程①需要逆转录酶的参与C．过程②之前可用同一种限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒D．人的生长激素基因可以导入其他生物细胞内，说明生物之间共用一套遗传密码6．(2023·河北邯郸高二诊断)下列有关抗虫基因表达载体的叙述，正确的是()A．切割含抗虫基因的DNA片段和载体必须用同一种限制酶B．抗虫基因表达载体中要有启动子和终止密码子C．抗虫基因表达载体必须具备标记基因，其作用是筛选含有目的基因的受体细胞D．抗虫基因的表达启动于复制原点7．如图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性内切核酸酶Eco R Ⅰ、Bam H Ⅰ、Hin d Ⅲ的酶切位点。

高中生物一轮复习习题(三维设计)选修③ 第一讲基因工程课时作业

选修三第一讲基因工程[课时作业]一、选择题1．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。

下图为四种限制酶Bam HⅠ、Eco RⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点Bam HⅠEco RⅠHindⅢBglⅡ↓↓↓↓GGATCC GAATTC AAGCTT AGATCTCCTAGG CTTAAG TTCGAA TCTAGA↑↑↑↑切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是() A．Bam HⅠ和Eco RⅠB．Bam HⅠ和HindⅢC．Bam HⅠ和BglⅡD．Eco RⅠ和HindⅢ解析：只有黏性末端相同才可互补，Bam HⅠ和BglⅡ切出的末端相同。

答案：C2．近年来基因工程的发展非常迅猛，科学家可以用DNA探针和外源基因导入的方法进行遗传病的诊断和治疗，下列做法中不．正确的是() A．用DNA探针检测镰刀型细胞贫血症B．用DNA探针检测病毒性肝炎C．用导入外源基因的方法治疗半乳糖血症D．用基因替换的方法治疗21三体综合征解析：镰刀型细胞贫血症是由于基因突变引起的疾病，用β珠蛋白的DNA探针可以检测到；用DNA探针也可以很方便地检测出肝炎患者的病毒；半乳糖血症是由于体内缺少半乳糖苷转移酶，将带有半乳糖苷转移酶的基因导入半乳糖血症患者的体内，可以治疗这种疾病；21三体综合征是由于患者多了一条21号染色体，不能用基因替换的方法治疗。

答案：D3.质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。

质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。

外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是()A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是bC．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b解析：对①细菌来说，能在含青霉素的培养基上生长，也能在含四环素的培养基上生长，说明抗青霉素基因和抗四环素基因没有被破坏，插入点是c；对②细菌来说，能在含青霉素的培养基上生长，说明其抗青霉素基因正常，不能在含四环素的培养基上生长，说明其抗四环素基因被破坏，插入点应为b；对③细菌来说，不能在含青霉素的培养基上生长，说明其抗青霉素基因被插入而破坏，故插入点为a。

江苏省启东中学高一生物人教版必修2 课后作业：6.2《基因工程及其应用》 Word版含答案

6.2 新提升·课后作业一、选择题1．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A．细菌质粒 B．噬菌体C．动植物病毒 D．细菌核区的DNA【解析】基因工程中经常使用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。

【答案】 D2．“黄金大米”是将胡萝卜素转化酶的基因导入到水稻细胞中而制备成功的。

一般地说，制备“黄金大米”植株的过程中，不需要．．．使用下列中的A．限制性核酸内切酶 B．纤维素酶C. DNA连接酶D. DNA聚合酶【解析】获取目的基因和构建基因表达载体时都需要使用限制性核酸内切酶，A错误；采用基因工程技术培育“黄金大米”植株的过程中不需要使用纤维素酶，B正确；构建基因表达载体时，需要使用DNA连接酶，C错误；基因在受体细胞中复制时需要DNA聚合酶，D 错误。

【答案】 B3.一种限制性内切酶能识别DNA分子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的A．高效性B．专一性C．多样性D．催化活性受外界条件影响【解析】酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类物质的化学反应，所以一种限制性内切酶能识别DNA分子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的专一性，B项正确，A、C、D三项均错误。

【答案】 B4.如图所示限制酶切割基因分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列和切点是A．CTTAAG，切点在C和T之间B．CTTAAG，切点在T和A之间C．GAATTC，切点在G和A之间D．GAATTC，切点在C和T之间【解析】据图分析，该限制酶能识别的碱基序列为GAATTC，其切点是在G和A之间，所以C正确。

【答案】 C5．下列关于基因工程中载体的叙述，不正确的是A．目的基因与载体结合的过程发生在细胞外B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C．载体对宿主细胞的生理代谢不起决定作用D．常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等【解析】目的基因与载体结合的过程发生在细胞外，是人为控制操作的，A正确；目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因重组，B错误；载体对宿主细胞的生理代谢不起决定作用，能在受体细胞内稳定存在，C正确；常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等，D正确。

高中生物 1.1DNA重组技术的基本工具课后习题3高二3生物试题

德钝市安静阳光实验学校【优化设计】高中生物1.1DNA重组技术的基本工具课后习题新人教版选修3课时演练·促提升1.有关DNA重组技术中的工具——“分子缝合针”“分子手术刀”“分子运输车”的组合正确的是( )①DNA连接酶②DNA聚合酶③限制酶④RNA聚合酶⑤载体A.②③⑤B.①③④C.①③⑤D.④③⑤答案:C2.下列有关基因工程中限制酶的描述,错误的是( )①一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列②限制酶的活性受温度影响③限制酶能识别和切割RNA ④限制酶可从原核生物中提取⑤限制酶的操作对象是原核细胞A.②③B.③④C.③⑤D.①⑤解析:限制酶的作用是在基因工程中提取目的基因和切割载体,是作用于DNA 分子,而非原核细胞,也不能识别和切割RNA分子。

答案:C3.下列黏性末端属于同一限制酶切割而成的是( )A.①②B.①③C.①④D.②③解析:将①②③④黏性末端分别进行比较,只有①③相同,因此①③属于同一种限制酶切割形成的末端。

答案:B4.下面是质粒的结构示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因,箭头分别表示四种限制性核酸内切酶的不同酶切位点。

若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞,应选用的限制酶酶切位点与哪一选项相符?( )解析:要得到能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞,选用的质粒应为ori正常、amp被破坏、tet正常。

答案:A5.现有一长度为1 000碱基对(bp)的DNA分子,用限制性核酸内切酶Eco RⅠ酶单独酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp,用KpnⅠ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA片段,用Eco RⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA片段。

该DNA分子的酶切图谱正确的是( )解析:从图谱中可发现有链状DNA、环状DNA,用Eco RⅠ酶切割后DNA的长度不变,此DNA应该为环状。

2018年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(一)(含答案)

2019年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(一)1．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。

下列选项中能说明目的基因完成表达的是（）A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因B．山羊乳腺细胞中检测到人的生长激素基因C．大肠杆菌中检测到人的胰岛素基因转录出的mRNAD．酵母菌细胞中提取到人的干扰素【答案】D2．下列关于基因工程中有关酶的叙述不正确的是（）A．限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNAB．DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接C．DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNAD．逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA【答案】C3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不正确的是（）A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的【答案】D4．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。

下列相关叙述错误的是（）A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质【答案】D5．下图为利用转基因技术将控制人α一抗胰蛋白酶基因导入受体细胞，最终培育出能在乳腺细胞表达人α－抗胰蛋白酶的转基因羊的过程简图，图中GEP基因为绿色荧光蛋白基因。

下列相关叙述错误的是（）A．α—抗胰蛋白酶基因和GEP基因的基本组成单位相同B．GEP基因可作为标记基因C．图中受体细胞为羊的乳腺细胞D．可用显微注射法将重组质粒导入受体细胞【答案】C6．玫瑰有5000多年的人工栽培历史，迄今已培育出2500多个品种。

基因工程试题库及答案

基因工程习题集一、名词解释：（20×4/）1、基因2、克隆3、基因定位4、PCR5、基因工程工具酶6、组织培养7、限制性核酸内切酶8、受体细胞9、生物技术 10、基因沉默11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程20、生物反应器二、单项选择题：(60×2/)1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不．正确的是（）A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。

但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。

以下有关叙述，正确的是（）A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。

限制性核酸内切酶相关知识总结范文限制性核酸内切酶名词解释

限制性核酸内切酶相关知识总结范文限制性核酸内切酶名词解释限制性核酸内切酶是生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。

限制性核酸内切酶主要存在于原核生物，它的功能是能将外来的DNA切断，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。

由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶(简称限制性内切酶或限制酶)。

它不同于一般的脱氧核糖核酸酶（DNae），限制性核酸内切酶的切点大多很严格，要求专一的核苷酸序列。

限制性核酸内切酶按其性质可分为三大类，即所谓Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型酶，基因工程最常用也是高中生物所指的限制性核酸内切酶即为Ⅱ型酶。

新课标高中生物必修2――遗传与进化模块中“基因工程及其应用”这一节对限制性核酸内切酶作了一定的介绍，但笔者在教学过程中发现部分学生概念有些模糊，做题准确率不高。

因此笔者总结了有关限制性核酸内切酶的知识点，并结合近年来的高考真题，对该酶作一次较为详细的总结。

1.限制性核酸内切酶的相关知识点限制性核酸内切酶识别序列的长度一般为4-8个碱基，最常见的为6个碱基。

一般情况下，不同的限制性核酸内切酶具有不同的识别序列和酶切位点。

但这并非绝对，部分限制性核酸内切酶具有相同的识别序列，但切割的位点不同，如某maI和SmaI都识别六核苷酸CCCGGG，然而它们的酶切位点分别是C↓CCGGG和CCC↓GGG；有些限制性核酸内切酶不但具有相同的识别序列，连酶切位点都一样，如BamHI、BglⅡ、BtI这三种酶，它们的识别序列及切割位点都为G↓GATCC。

不同的限制性核酸内切酶切割双链DNA所形成的末端通常是不同的，有的酶切割后切口是平的，即形成平末端，如AluⅠ和HaeⅢ。

有的切口可带有一个短的单链末端，即黏性末端，如EcoRⅠ和HindⅢ。

有些限制性核酸内切酶识别序列不同，但是产生相同的粘性末端，称为同尾酶，如BamHI(G↓GATCC)和BglⅡ(A↓GATCT)，由此产生的DNA片段可借黏性末端相互连接，使DNA重组在操作时具有更大的灵活性。

专题1 基因工程专题试卷及答案解析

专题1 基因工程一、选择题1．科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是()A．定向提取生物体的DNA分子B．定向地对DNA分子进行人工“剪切”C．在生物体外对DNA分子进行改造D．定向地改造生物的遗传性状2．关于基因工程的叙述，正确的是()A．基因工程是指非同源染色体上非等位基因重组B．基因工程是指同源染色体上等位基因重组C．基因工程是指一种生物的基因转接到另一种生物的DNA分子上D．基因工程是指同种生物的基因转接到同种生物的其他个体DNA上3．“分子手术刀”在切割DNA时，切开的结构是()A．氢键 B. 共价键C．二硫键D．磷酸二酯键4．下列关于限制性核酸内切酶的说法，正确的是()A．限制性核酸内切酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键B．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制性核酸内切酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制性核酸内切酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布5．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件之一及理由是()A．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达B．具有标记基因，以便为检测目的基因的表达提供条件C．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选D．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因6．属于“分子缝合针”的是()①E•coli DNA连接酶②T4 DNA连接酶③DNA聚合酶④解旋酶⑤RNA聚合酶A．①②③B．①②C．①②⑤D．②④7．下列说法正确的是()A．DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的B．限制酶的切口一定是GAA TTC碱基序列C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”8．正确表示基因操作“四步曲”的是()A．提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因与载体结合→目的基因的检测和表达B．目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与载体结合→将目的基因导入受体细胞C．提取目的基因→目的基因与载体结合→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达D．目的基因与载体结合→提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达9．基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，主要原因是() A．结构简单、操作方便B．繁殖速度快C．遗传物质含量少D．性状稳定、变异少10．1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于()A．普通棉的突变基因B．棉铃虫变异形成的致死基因C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因D．苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因11．右下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是()A．CTTAAG，切点在T和C之间B．GAATTC，切点在G和A之间C．GAATTC，切点在A和G之间D．CTTAAC，切点在T和C之间12．用DNA 探针检测饮用水中病毒的具体方法是( )A ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行比较B ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行杂交C ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行组合D ．A 、B 、C 三种方法均可13．基因治疗是指( )A ．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的B ．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常C ．把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的D ．对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的14．下列关于基因工程成果的概述，错误的是( )A ．在医药卫生方面，主要用于诊断治疗疾病B ．在环境保护方面主要用于环境检测和对污染环境的净化C ．在畜牧业上主要通过克隆培育出体型巨大，品质优良的动物D ．在农业上主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗性的农作物15．切取牛的生长激素和人的生长激素基因，构建表达载体后，用显微注射技术将含有目的基因的表达载体分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是( )A ．基因突变：DNA →RNA →蛋白质B ．基因工程：DNA →RNA →蛋白质C ．细胞工程：DNA →RNA →蛋白质D ．胚胎工程：DNA →RNA →蛋白质二、非选择题16．限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是 —G ↓GATCC —，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是 —↓GATC —。

2017-2018学年高二生物三教学案：1DNA重组技术的基本工具含答案

一、基因工程阅读教材P1～31．基因工程概念的理解2．基因工程的诞生和发展(1）基础理论的重大突破①DNA是遗传物质的证明.②DNA双螺旋结构和中心法则的确立.③遗传密码的破译。

(2）技术发明使基因工程的实施成为可能①基因转移载体和工具酶相继发现.②DNA合成和测序技术的发明。

③DNA体外重组得到实现，重组DNA表达实验获得成功。

(3)基因工程的发展与完善①1980年,科学家首次培育出世界上第一个转基因小鼠。

1983年，世界上第一例转基因烟草培育成功,基因工程进入迅速发展阶段。

②1988年PCR技术的发明，使基因工程技术得到了进一步发展和完善。

二、DNA重组技术的基本工具错误!1．限制性核酸内切酶（限制酶）——“分子手术刀”（1)来源:主要从原核生物中分离纯化出来.（2)作用①识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。

②切割特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)作用结果：产生黏性末端或平末端。

2．DNA连接酶—-“分子缝合针"(1)作用：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，拼接成新的DNA分子。

(2)种类的平末端3.基因进入受体细胞的载体—-“分子运输车"（1）种类①质粒:一种很小的双链环状DNA分子.②其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(2)特点①能够进行自我复制.②有一个至多个限制酶切割位点，供外源基因插入。

③具有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

④对受体细胞无害。

（3)作用结果：将外源基因送入受体细胞。

三、重组DNA分子的模拟操作阅读教材P6～71．材料用具：两种颜色的硬纸板,剪刀（代表Eco R Ⅰ限制酶），透明胶条（代表DNA连接酶）。

2．切割要点(1）先分别从两块硬纸板上的一条DNA链上找出G—A—A—T—T—C序列，并选G—A之间作切口进行“切割”.(2)然后再从另一条链上互补的碱基之间寻找Eco R Ⅰ相应的切口剪开。

3．操作结果：若操作正确,不同颜色的黏性末端能互补配对；否则，操作错误。