瑞氏染液怎么用
瑞氏吉姆萨复合染色液
外周血涂片的制作方法1、采血：胶头滴管吸取血液，血液直接滴加到洗净烘干并且硅化过的载玻片的一头。
2、推片：将推片的平齐端置载玻片上血滴的稍前方，将推片略向后移使与血液相接触，血液遂于推片与载玻片的夹角间散开。
以约30度的夹角向前均匀地推动推片即可制成血涂片。
其薄厚度要适中，分布均匀而无空泡，边缘整齐。
3、固定：推片做好后，涂片后潮干固定，以免细胞漂落太多，影响制片质量，甲醇固定液固定：涂片直接浸入固定液内，因固定液充足，固定效果较好。
但细胞易脱落而发生交叉污染，因此应该分瓶固定，固定液回收时应过滤。
多数标本用此法固定，固定时间15-30分钟。
4、染色：瑞氏-基姆萨双染1）从固定缸里取出载片后，在室温下通风晾干。
将载片平放在玻璃板上准备染色。
2）所用的两种染料事先过滤好（染料中有颗粒物，会沉淀在载玻片上影响载片的质量）3）将染料滴加到载玻片上以后，让其均匀覆盖住载片上的血细胞，染色时间约为2到3分钟。
等瑞氏染液有变红的趋势时，迅速滴加与瑞氏染液等量的PBS溶液。
继续染色2到3分钟。
4）染色时间到后，用PBS溶液冲片，小股水流，防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。
冲片结束后将载片放到阴凉处风干。
5）在玻璃板上放好牙签，将风干的载片倒扣在一根牙签上，从背面滴加基姆萨染液进行扣染。
染色时间约为10分钟。
时间到后用蒸馏水冲片，洗净染液后常温下风干。
5、封片：中性树胶封片，制作成永久涂片。
6、显微观察：将干燥后的血涂片置显微镜下观察。
用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。
在显微镜下，成熟红细胞染成粉红色；血小板染成紫色；中性粒细胞胞质染成粉红色，含紫红色颗粒；嗜酸性粒细胞含大的桔黄色颗粒；嗜碱性粒细胞胞质含有大量深紫蓝色颗粒；单核细胞胞质染成灰蓝色；淋巴细胞胞质染成淡蓝色。
所需材料：硅化过的载玻片，推片，甲醇瑞氏-基姆萨双染，过滤，PBS，牙签，蒸馏水，中性树胶，显微镜，吸耳球1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。
瑞氏染液使用说明
瑞氏染液使用说明货号：G1040规格：50ml/100ml保存：室温避光保存，有效期至少2年。
产品说明：瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料伊红（Eostm Y）组成的复合染料，溶于甲醇。
伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。
美蓝通常为氯盐，有色部分为阳离子。
甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红，使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。
后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是固定细胞形态，加速染色反应，增强染色效果。
使用方法：本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。
具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。
3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀，静置5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色。
注意事项：1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。
冲洗时间不能过久，以防脱色。
3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。
4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。
相关试剂：P210010×多聚赖氨酸G1010姬姆萨染色液G1100伊红染色液G1140苏木素染色液(常规染色)G1120H-E染色试剂盒。
瑞氏染液
新离解。 ○缓冲液须保持一定的 pH 使染色稳定，PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8， ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使
pH 定。 缓冲液配制
（pH6.4~6.8，弱酸性）： 配方 1 ： 配方 2： 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至 1000ml 置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。 姬姆萨（Giemsa's stain；天青-伊红）染色 1．姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2 号合成的。 2．姬姆萨染料（ Giemsa, 天青-伊红）染液配制： 姬姆萨染料（粉末） 0.5g 或 7.5g 甲醇（AR） 33ml 或 500ml 甘油（AR） 33ml 或 500ml ●先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于 56℃水温箱内，90～120 分 钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越 长越好。 ●使用染液可临时配置）：姬姆萨染液 1ml，加 DDH2O10ml 混匀。即可使用。 染色步骤 （1）先用甲醇固定 2～3 分钟。 （2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液 15～30 分钟。 （3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。 染液鉴定 瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定： 1．取 1 滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。 2．取 1 滴染液加 1 滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。 3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH 是 否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。 混合染色 瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨（Giemsa's）混合染色： ●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识 别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 ●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗 粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 ●故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。 染色步骤： 1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖； 2. 稍等片刻再加姬姆萨染液 2-3 滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)； 3. 稍等 1-2 分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液 形成表面张力而终止染色液加入； 4. 染色 30-40 分钟； 5. 分色：用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
瑞氏吉姆萨染色步骤
瑞氏吉姆萨染色步骤瑞氏吉姆萨染色是一种常用的细胞染色技术，它能使细胞的形态、结构和功能等方面的信息得到更加清晰的展现。
下面将介绍瑞氏吉姆萨染色的步骤。
一、制备细胞涂片首先需要制备细胞涂片，即取一定数量的细胞，将其分布均匀地涂在载玻片上。
制备细胞涂片时需要注意，要使细胞分布均匀，不要有过多的交叉和重叠现象。
二、固定细胞细胞涂片制备好后，需要进行固定。
固定的目的是防止细胞在染色过程中失去其原有形态和结构。
固定液可以用4%的乙醛或乙醇，也可以用甲醛进行固定。
三、染色在固定液起作用后，需要进行染色，这是瑞氏吉姆萨染色的核心步骤。
染色液的配方为：甲基绿、甲基红和亚甲蓝各1克，乙酸1毫升，蒸馏水100毫升。
将染色液滴在细胞涂片上，静置10-15分钟。
四、洗涤染色液静置后，需要用蒸馏水进行洗涤。
洗涤的目的是去除多余的染料和固定液。
五、脱水洗涤完成后，需要将细胞涂片进行脱水。
脱水的目的是使细胞涂片逐渐失去水分，加强细胞涂片的硬度和稳定性。
脱水可以用70%、80%、95%和绝对酒精进行，每种酒精浸泡时间为2-3分钟。
六、透明化脱水后，需要进行透明化处理。
透明化的目的是使细胞涂片变得透明，方便观察和保存。
透明化液可以用苯酚、苯酚-氯酸-甘油溶液等。
七、封片透明化完成后，需要进行封片，即用封片胶封住细胞涂片。
封片胶可以用环氧树脂或丙烯酰胶进行。
总结瑞氏吉姆萨染色是一种常用的细胞染色技术，能够使细胞形态、结构和功能等信息得到更加清晰的展现。
其步骤包括制备细胞涂片、固定细胞、染色、洗涤、脱水、透明化和封片。
不同的步骤需要注意不同的细节，只有每个步骤都严格按照要求操作，才能得到满意的染色结果。
瑞氏染色操作步骤
瑞氏染色操作步骤瑞氏染色是一种常用的细胞染色方法，主要用于观察细胞核形态和染色体结构。
下面将详细介绍瑞氏染色的操作步骤。
一、实验前准备1.1 材料准备瑞氏染色所需的材料有：0.075mol/L KCl、甲醛、乙酸、96%乙醇、苯酚红溶液、甲基绿溶液和天然丝。
1.2 设备准备实验所需的设备有：离心机、恒温水浴器和显微镜等。
二、样品制备2.1 细胞培养首先需要培养好待检测的细胞，使其达到适当生长状态。
在培养过程中，应注意避免污染和过度生长等问题。
2.2 细胞处理将待检测的细胞收集到离心管中，并加入0.075mol/L KCl缓冲液进行离心。
将上清液倒掉，再加入甲醛进行固定处理。
2.3 固定处理将含有甲醛的离心管放置在恒温水浴器中，在37℃下固定处理30分钟，使细胞膜破裂并释放染色体。
2.4 滴定染色将固定后的细胞加入苯酚红溶液，再滴入甲基绿溶液，使染料均匀地覆盖在细胞上。
三、显微镜观察将染好色的细胞片放置在显微镜下进行观察。
可以通过调节显微镜的焦距和光源亮度等参数来获得更清晰的图像。
四、实验注意事项4.1 操作过程中应注意保持无菌环境，避免污染样品。
4.2 在固定处理时，应控制好温度和时间，避免过度固定或过短固定导致样品失真。
4.3 在滴定染色时，应注意均匀地覆盖在细胞上，并避免出现气泡等问题。
总结：瑞氏染色是一种常用的细胞染色方法，其操作步骤包括实验前准备、样品制备、显微镜观察和实验注意事项等方面。
在操作过程中需要注意保持无菌环境、控制好温度和时间、均匀地覆盖染料等问题，以获得更准确的实验结果。
瑞氏-姬姆萨染液使用说明书
4、显微观察：将干燥后的载片被染成红色。
注意事项
1. 染色时间与室温及细胞多少有关。室温低、细胞多则染色时间要长；反之，可减少染色
时间。必要时可增加染液量或延长时间。冲洗前，应先在低倍镜下观察有核细胞是否染色清
楚，核质是否分明。应该在具体实践中摸索合适的时间，特别是在更换染液时。每批染色液，
100mL
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说明书
1份
1
均需试染，以便掌握染色时间。
2. 冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲洗，否则会使染料沉着在载片上。
3. 冲洗完的载片应立放于支架上，防止剩余水分浸泡而导致脱色。
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单
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包装
HCY115
瑞氏-姬姆萨染液
2）将瑞氏-吉姆萨染液倒入染缸内，使染液覆盖载片上的细胞。具体染色时间视细胞而定，
一般 3~30min，染色时最好在镜下观察；
3）染色后水洗，先用 PBS 溶液漂洗载片，再用小股水流冲洗，防止将大量的细胞从载片上
冲落下来而影响后续观察。冲片结束后将载片放到阴凉处风干。
3、封片：中性树胶封片，制作成永久涂片。
对胞质和中性颗粒则着色较差。
为兼顾二者之长，选用复合染色法。即瑞氏-吉姆萨染液。
染色步骤
1、涂片并固定：将细胞均匀的涂布于洁净的载玻片上，待其干燥后进行固定。
固定液的选择视具体情况而定，多数细胞可用甲醇固定。甲醇固定：涂片干燥后浸入甲醇内，
固定时间 15-30min。
2、染色：
1）固定后，室温下通风晾干。将载片置于染缸内准备染色；
瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料，血红蛋白，嗜酸性颗粒
瑞氏染色操作流程
瑞氏染色操作流程一、瑞氏染色实验前准备1.1准备染色液和显影液针对瑞氏染色实验，首先要准备染色液和显影液，染色液由25mL的瑞氏染料，90mL的盐酸溶液（浓度为5％），以及1mL的激发剂混合而成。
而显影液则是在10mL的9N的硫酸、10mL的5％的NaOH溶液、10mL的1％的苯甲醇和10mL的1％的芳香族醇基乙醇混合而成。
1.2准备染色木质菌梗在预先准备瑞氏染色液和显影液后，接下来要准备染色用的木质菌梗才能开始瑞氏染色实验。
首先，用洗碗笠将要染色的木质菌梗洗淨，然后用医用刀在木质菌梗中切出厚约2mm的薄片，最后用蒸汽–水泼淋法将木质菌梗片浸湿，方可准备瑞氏染色实验。
二、瑞氏染色实验操作2.1放置染色片在准备好染色液和显影液，以及木质菌梗薄片后，此时要把准备的的木质菌梗薄片放置在染色槽内，以留出表面空间，方便染色液充分浸渍。
2.2加入染色液之后将准备的瑞氏染色液加入染色槽，在实验室内控制温度为37℃，放置20分钟后，可以观察菌梗表面是否呈染色，一般都可以看到浅色到深色之间的蓝色或紫色染色，这说明瑞氏染色已经取得成功。
2.3加入显影液如果瑞氏染色实验成功，那么接下来可以准备将木质菌梗片洗净后加入显影液了，而此时温度需要将控制在22℃，放置5-10分钟后，可以发现菌梗片变淡，并且半透明，证明显影液已经取得成功。
2.4用x网影像再接着，用X网影像观测染色后的木质菌梗，当观测到菌梗表面开始出现斑斑点点发亮时，这表明染色实验结束，在此基础上对木质菌梗进行另一个体系的判断，也就是对菌梗的形态和染色的准确性进行分类、认定和鉴定。
三、瑞氏染色实验结束完成上述瑞氏染色实验操作后，就可以对经过染色后的木质菌梗进行分析、鉴定，完成木质菌梗的离子吸收率、分子斑点和染色效果等等内容，通过瑞氏染色实验把细菌聚集在一起，以便进行实验分析，这正是瑞氏染色实验取得成功的原因。
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项南宁市二医院检验科马升俊1.瑞氏染色的原理：瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。
瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物（天青）组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲和力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。
2.试剂的配制：2.1 瑞氏染液的配制：2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g，甲醇（AR）60ml。
将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。
染液配好后放于室温下，一周后即可使用。
新配制染液效果较差，放置时间延长，染色效果越好。
久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
染液中也可加中性甘油2～3ml，除可防止甲醇过早挥发外，也可使细胞着色清晰。
2.1.2 成品瑞氏染液:现巳有成品瑞氏染液，如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂（500ml/瓶）其只需室温密闭储存，可长期稳定，染色效果好。
2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2 g；加蒸馏水至1000 ml使其溶解。
配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值，其范围在PH6.4～6.8即可，后塞紧瓶口备用。
3. 瑞氏染色的使用方法：（以血涂片为例）：3.1把制好的血涂片编好号，然后将血片平放在染色架上；3.2加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定细胞约1分钟；3.3滴加等量或稍多的缓冲液（可按1：2滴加），使染液充分混匀，染色5～10分钟；3.4用流水冲洗去染液,待干后镜检。
4.染色结果判断：在正常情况下，血膜外观染成淡紫红色。
显微镜下，红细胞呈粉红色，在厚薄均匀处，略有碟状感。
白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩。
细胞核染紫红色，核染色质结构清楚。
5.注意事项:5.1 PH对细胞染色有影响。
瑞氏染色
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电话：400-676-6191 邮箱：bestbio@
传真：021-60853530
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
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产品 TRAP 染色试剂盒 Masson 染色试剂盒 革兰氏染色试剂盒 瑞氏染色试剂盒 姬姆萨染色试剂盒 亚甲基蓝染色试剂盒 碱性磷酸酶染色试剂盒 酸性磷酸酶染色试剂盒
产品说明书
产品号 403022 403023 403091 403092 403093 403094 403095 403096
结果分析： 细菌染成蓝色；细胞核呈蓝色；血红蛋白、嗜酸性颗粒染成粉红色；淋巴细胞胞浆、嗜 碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝色；组织细胞的细胞质呈红色；完全成熟的红细胞呈粉红色。
注意事项： 1、 推片方法：取全血 3ul 左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片 30 度角，置于血 滴正前方，稍往后移与血滴接触，即可见血液沿推片下缘散开，再均匀沿载玻片平 面平稳向前滑动，至血液铺完血膜为止。 2、 涂片时不要太厚也不要太薄。 3、 用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。血膜要干透后才能染色，否则染色时血 膜易脱落。 4、 染色过深或过浅应调整染色时间。 5、 染色过深可用水冲洗或浸泡，还可用 75%乙醇脱色 3-5 秒。 6、 染色液可重复使用。
简述瑞氏染色法的步骤
简述瑞氏染色法的步骤
瑞氏染色法是一种常用的染色技术，可以用于细胞和组织的染色。
它
是由丹麦科学家汉斯·克里斯蒂安·瑞氏于1884年首次提出的。
该方法
通过使用甲苯和乙醇的混合物处理样本，然后用胰蛋白酶去除细胞膜上的
脂肪，最后用甲苯溶液进行染色，以显示细胞的核和胞质细胞器。
具体步
骤如下：
1.处理样本：首先，将待染色的细胞或组织样本置于甲苯中，以去除
样本中的脂肪。
2.脱水：将样本放入一系列乙醇浓度不断增加的溶液中，以脱水样本。
这一步骤有助于防止样本的脂肪重新进入细胞。
3.清洗：用清洁的甲醇或二甲苯清洗样本。
这一步骤有助于去除残留
的脂肪和乙醇。
4.染色：将样本放入瑞氏染色剂中。
瑞氏染色剂是一种由甲苯、酸性
染料（如酸性果胶酸和酸性红G）和邻苯二甲酸二丁酯组成的溶液。
该溶
液可以染色细胞核和胞质细胞器。
5.清洗：将样本从染色剂中取出，用甲醇或二甲苯轻轻洗涤，以去除
多余染料。
6.干燥：用空气吹干样本或者放置在加热器中干燥。
7.盖片：将样本置于玻璃盖片上，加入合适的封片剂（如硬脂酸树脂），然后覆盖另一块盖片。
8.固定：将盖片置于120°C的烘箱中固定，使其更加耐久。
使用瑞氏染色法可以染色细胞核为蓝色或紫色，并使胞质细胞器以深红色或橙色显现。
这种染色方法在生物学、医学和组织学等领域被广泛使用，它可以帮助研究人员观察细胞和组织的结构与功能，提供有关细胞和组织的信息。
瑞士染液操作流程
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在进行瑞士染液操作之前，需要做好充分的准备。
骨髓涂片瑞氏染色步骤
骨髓涂片瑞氏染色步骤
骨髓涂片瑞氏染色步骤如下:
1. 采集骨髓涂片:通常使用新鲜骨髓或骨髓提取物制备涂片。
在采集过程中,需要使用一次性手套和消毒工具,确保不会对样本造成污染。
2. 处理骨髓涂片:将骨髓涂片放入含有酒精的消毒溶液中浸泡,以去除表面的细胞和血小板。
然后,将涂片放入含有单克隆抗体的溶液中浸泡,以识别不同的细胞类型和生物标记。
3. 标记细胞:使用标记抗体将骨髓涂片上的细胞类型进行分类。
常用的标记包括CD3、CD4、CD8、CD10、CD19、CD30、CD45、CD133、B220等。
在采集骨髓涂片之前,需要使用标记抗体进行预处理,以确保涂片上有足够的细胞类型。
4. 染色:将骨髓涂片与瑞氏染色液混合,并轻轻地涂抹在涂片上。
染色后,涂片会被染成红色或深红色,以显示不同的细胞类型。
常用的瑞氏染色液包括瑞氏试剂盒和瑞氏试剂管。
5. 分析细胞类型:将染色后的骨髓涂片放入显微镜下观察,以确定细胞类型。
可以使用光学显微镜或电子显微镜进行观察和分析。
骨髓涂片是一种常用的细胞学检测方法,可以用于诊断多种血液疾病和其他疾病。
通过使用瑞氏染色步骤,可以识别不同的细胞类型,帮助医生确定病情和制定治疗方案。
瑞氏染色液(Wright Stain)使用说明书
仅供科研使用版本号：170303瑞氏染色液(Wright Stain)【产品组成】Component SBJ-0519S2×100mlSBJ-0519M2×500mlStore at试剂(A):Wright Stain 100ml 500ml 室温,避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml 500ml 室温【保存条件】室温,24个月【产品概述】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,对原生质的染色有很好的区别作用。
各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质。
原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
瑞氏染液为蓝色澄明液体，有甲醇特异香味，主要由美蓝、伊红、甲醇等组成，其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。
Wright Stain以进口瑞氏色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。
该染液的特点：由Wright Stain和磷酸盐缓冲液组成，直接使用，无需任何配制过程，染液中加微量中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。
经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。
细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。
【使用方法】1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。
2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、滴加适量Wright Stain覆盖涂片，室温染色1～2min。
瑞氏-吉姆萨染液配法
瑞⽒-吉姆萨染液配法英⽂拼写 Wright's stain是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇。
后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离⼦。
使⽤⽅法瑞⽒（Wright's staim；美蓝－伊红Ｙ）染⾊：1．瑞⽒染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄⾊伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞⽒（美蓝－伊红Ｙ）染料。
2．⽤甲醇作瑞⽒染料溶剂，即成瑞⽒染液。
甲醇是瑞⽒染料良好溶剂，有两种作⽤：（1）甲醇使瑞⽒染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有⾊物质⽽着⾊。
甲醇ME（瑞⽒染料）----→M+ + E-在配制的瑞⽒染液中美蓝如放置过久即可氧化⽽含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红⾊，但不能使胞浆染为蓝⾊，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝⾊，染⾊主要是化学作⽤，是离⼦彼此结合的反应。
（2）甲醇具有强⼤的脱⽔⼒，可将细胞固定在⼀定形态及增加细胞结构的表⾯积，提⾼细胞对染料吸收作⽤，同时由于甲醇吸附染⾊液中的⽔，使染⾊液升温，加速染⾊反应。
染液配制(1) 瑞⽒染液配制：瑞⽒染料 830gm或1g甲醇（AR）500ml或600ml○先称⼲燥（事先放⼊温箱⼲燥过夜）瑞⽒染料放置乳钵内，⽤乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再⾏研磨⾄听不到研芝⿇声即呈细粉末，加少许⽢油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“⼀⾯镜”光泽，⽽⽆染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈⼀⾯镜光亮，静置⽚刻，将上层液体倒⼊⼀清洁储存瓶内（最好⽤甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，⾄乳钵内染料及甲醇⽤完为⽌，摇匀，密封瓶⼝。
○存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，⼀般储存3个⽉以上为佳。
(2) 缓冲液：●缓冲液作⽤：○染⾊对氢离⼦浓度是⼗分敏感的，据观察pH值的改变，可使蛋⽩质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持⼀定的pH使染⾊稳定，PBS的pH ⼀般在6.4~6.8，○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作⽤，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作⽤，使pH恒定。
16瑞氏染色操作规程
瑞氏姬姆萨染色操作规程生效日期：20150125 页码：第1页共2页1 目的：规范瑞氏姬姆萨染色操作规程，保证染色效果。
2 原理：2.1 染色原理：瑞氏姬姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成。
细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理吸附作用，又有化学亲和作用。
各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料（伊红）和碱性染料（亚甲蓝）的亲和力也不一样。
因此，标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。
2.2 试剂组成：瑞氏姬姆萨A液（瑞氏染料、姬姆萨染料）瑞氏姬姆萨B液（磷酸盐）3 操作步骤：3.1 滴加瑞氏姬姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上，并让染液覆盖整个标本染色1min；3.2 再将瑞氏姬姆萨B液加于A液上面（滴加量为A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3-10min。
（染血片时间可略短，染骨髓片时间应视细胞量多少而异）3.3 水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。
4 结果解释：4.1 血细胞涂片、骨髓涂片染色：红细胞呈粉红色，白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩，细胞核染紫红色，核染色质结构清楚。
4.2 阴道分泌物（妇科白带染色）：4.2.1 滴虫：经过染色后的滴虫跟活的滴虫呈现完全不同形态，一般情况下，看不到鞭毛，经过染色后，滴虫多为梨形、圆形、椭圆形或呈不规则形态，浆被染成灰蓝或天蓝色，核小，枣核状，常偏于一侧，需注意观察，避免与上皮细胞混淆。
4.2.2 念珠菌（霉菌）：染成深蓝色，可见芽生孢子，假菌丝细长而直。
4.2.3 白细胞：形态上与血细胞涂片的白细胞相同，一般白细胞的多少，提示发炎程瑞氏姬姆萨染色操作规程生效日期：20150125 页码：第2页共2页度的高低，对医生的诊断具有一定的指标作用。
瑞氏染色液
瑞氏染色液【产品名称】瑞氏染色液【包装规格】货号：DM0005单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇2、磷酸盐缓冲液磷酸盐【储存条件及有效期】5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。
瑞氏染液使用说明
瑞氏染液使用说明货号：G1040规格：50ml/100ml保存：室温避光保存，有效期至少2年。
产品说明：瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料伊红（Eostm Y）组成的复合染料，溶于甲醇。
伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。
美蓝通常为氯盐，有色部分为阳离子。
甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红，使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。
后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是固定细胞形态，加速染色反应，增强染色效果。
使用方法：本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。
具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。
3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀，静置5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色。
注意事项：1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。
冲洗时间不能过久，以防脱色。
3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。
4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。
相关试剂：P210010×多聚赖氨酸G1010姬姆萨染色液G1100伊红染色液G1140苏木素染色液(常规染色)G1120H-E染色试剂盒。
瑞氏染色液使用方法
瑞氏染色液说明书【产品名称】瑞氏染色液【包装规格】货号：DM0005单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇2、磷酸盐缓冲液磷酸盐【储存条件及有效期】5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。
瑞氏染色操作流程
瑞氏染色操作流程
1.实验准备
- 收集需要染色的细胞或组织样本，并固定在载玻片或试管中。
常用的固定方法包括用乙醇、甲醛、Perfix等。
-根据样品的特性和染色目的，选择适当的瑞氏染色方法和试剂。
常用的瑞氏染色方法包括瑞氏-厄利染色法、瑞氏-黛染色法等。
2.染色步骤
-将固定的细胞或组织样本浸入去离子水中，使其恢复至自然状态。
-准备适当浓度的染色试剂。
瑞氏染色试剂一般包括硒铁酸盐和酸性柠檬酸溶液。
-将样本浸入硒铁酸盐溶液中，浸泡时间根据实验需要和染色方法而定。
染色时间过长可能导致染色物质过量或染色效果不佳。
-用去离子水或PBS缓冲液冲洗样本，使其清洁并去除多余的染色试剂。
-将样本浸入酸性柠檬酸溶液中，去除多余的染色物质并增强染色效果。
-再次用去离子水或PBS缓冲液冲洗样本。
3.结果观察和分析
-将处理后的样本进行显微镜观察。
瑞氏染色可以用于可视化染色物质（如核酸和蛋白质）或细胞器结构（如核、线粒体等）。
-在显微镜下观察样本时，可以调整镜头焦距、曝光时间等参数，以获得清晰且准确的图像。
-观察到的染色结果可以进行进一步的分析和解释。
例如，可以量化染色强度或比较不同样本之间的染色差异。
总结：
瑞氏染色是一种常用的细胞和组织染色技术，可以用于生物学实验室的各种研究和应用。
该操作流程包括样本固定、染色步骤和结果观察与分析。
通过瑞氏染色，可以可视化并研究细胞和组织中的特定结构和分子，为生物学研究提供重要的实验基础。
瑞氏染色
精选课件
8
5、淋巴细胞(lymphocyte)
形态：呈圆形或卵圆形，大小不等； 胞核呈圆形，一侧常有小凹陷，染色深；胞质 较少，环绕核周围呈一窄带，嗜碱性，呈蔚蓝色
精选课件
9
正常值及临床意义
正常参考值
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 单核细胞 淋巴细胞
46-63% 0-5% 0-1% 1-7% 24-47%
形态：胞核呈蓝紫色，染色质呈块状，着色深； 成熟的N胞核多为分叶状，一般可分2～5叶，常见 3叶，幼稚的N胞核呈杆状。胞质中含许多散在细 小的颗粒，Wright染色中呈紫红色
嗜天青颗粒 溶酶体 特殊颗粒 分泌颗粒
精选课件
7
4、单核细胞(monocyte)
形态：胞体大，呈圆形或椭圆形；胞核形态多样，可呈 卵圆形、肾形或马蹄形，核常偏位，染色质颗粒 细而松散，故着色浅；胞质较多，呈弱嗜碱性， 常染 涂 片制 作：
推片 血液
载玻片
将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚 薄取决于速度和角度：快、大(厚)。 慢、小（薄）
一张满意的血涂片应厚薄均匀
头
体
尾鲜明
涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号
B 123
李 四
精选课件
3
血 涂 片 染色：
涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴 覆盖整个血膜1分钟
临床意义
外周血中白细胞主要由中性粒细胞和淋巴细胞 所组成，这二种细胞的升高及减低可直接导致 白细胞总数相应的改变。
精选课件
10
中性粒细胞
升高
感染或化脓性炎症 中毒 急性出血 恶性肿瘤
减低
某些感染 化学药物中毒 某些血液病 脾亢和免疫性疾病 放射病
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瑞氏染色液说明书
【产品名称】
瑞氏染色液
【包装规格】
货号：DM0005
单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；
每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】
主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】
瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇
2、磷酸盐缓冲液磷酸盐
【储存条件及有效期】
5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。
【检验方法】
1、滴加瑞氏染液于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片，染色；
2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面，以嘴或洗耳球使两液充分混合，染色；
3、水洗，冲洗时不能先倒掉染色液，可缓慢从玻片一端冲洗，以防有沉渣沉淀在标本上；
4、干燥、镜检。
【检验方法的局限性】
仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落，以免影响染色效果。
2、染色时间须视何种标本、涂片厚薄、有核细胞多少及温度等而定。
3、pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。
4、涂片染色中请勿先去除染色液或直接对涂片用力冲洗，不能先倒掉染液，以免染料沉着于涂片上。
5、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。
6、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。
7、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。
8、瑞氏染液用前应充分摇匀，保证染色的均一性；染色液用量应充足，勿使染色液蒸发干。
9、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
10、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
11、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。