细胞工程
细胞工程名词
细胞工程名词解释细胞工程 (cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论，采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物，并发展有关理论和技术方法的学科。
动物细胞培养（animal cell culture）：是指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞后，模拟动物体内的生理条件，在体外无菌、适当的温度、湿度、酸碱度、气体环境及一定营养条件下，使其不断地生长、增殖并维持其正常的结构和功能的一种技术。
动物器官培养（organ culture）：是指对离体的整个器官、器官芽基或器官的一部分进行体外培养，构成器官的不同组织仍保持着它们原来的结构与功能，因而培养的器官在结构、功能上与体内相应的器官非常相近。
动物组织培养（tissue culture）：是指取自动物体的某种组织，不经细胞分散处理，对组织团块直接进行体外培养，组织中的细胞与其邻近的细胞、细胞外基质仍然保持着原本的联系，且细胞一直保持原本已分化的特征，组织的结构和功能在培养过程中无明显的变化。
原代培养（primary culture）：从有机体取得的材料（细胞、组织或器官）在培养容器培养到第一次传代前，即为原代培养或初代培养。
汇合（confluent）：指在培养容器中培养的细胞彼此汇合形成单层。
接触抑制(contact inhibition)：体外培养的正常动物细胞，在生长过程中达到相互接触时停止分裂和运动的现象。
外植快（explant）：用于初始体外培养而切下的一小块组织或器官。
传代（passage）：将细胞从一个培养容器移植到另一个培养容器中，也称为传代培养或再培养（subculture）。
细胞系（cell line）：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。
如果细胞系不能继续传代或传代次数有限，称为有限细胞系（finite cell line)。
第二讲细胞工程-PPT
3、2、2、1 制片技术
1)超薄切片
通常以锇酸与戊二醛固定样品,以环氧树脂包埋,以 热膨胀或螺旋推进得方式推进样品切片,切片厚度 20~50nm,切片采用重金属盐染色,以增大反差,图
2)负染技术
负染就就是用重金属盐(如磷钨酸、醋酸双氧铀) 对铺展在载网上得样品进行染色;吸去染料,样品干 燥后,样品凹陷处铺了一薄层重金属盐,而凸得出地 方则没有染料沉积,从而出现负染效果,分辨力可达 1、5nm左右,图
3、2、4 扫描隧道显微镜
扫描隧道显微镜由Binnig等1981年发明,根据量子 力学原理中得隧道效应而设计。当原子尺度得针 尖在不到一个纳米得高度上扫描样品时,此处电子 云重叠,外加一电压,针尖与样品之间产生隧道效应 而有电子逸出,形成隧道电流。电流强度与针尖与 样品间得距离有函数关系,当探针沿物质表面按给 定高度扫描时,因样品表面原子凹凸不平,使探针与 物质表面间得距离不断发生改变,从而引起电流不 断发生改变。将电流得这种改变图像化即可显示 出原子水平得凹凸形态。扫描隧道显微镜得分辨 率很高,横向为0、1~0、2nm,纵向可达0、001nm。
基中添加较高浓度得生长素类激素使植物 重新处于旺盛得有丝分裂状态
6、1、3 继代增殖阶段 6、1、4 生根发芽阶段 6、1、5移栽成活阶段 植物组织培养过程 转基因植物培育过程
6、2 植物细胞原生质体得制备与融合
6、2、1原生质体得制备 植物细胞原生质体就是指那些已去除全部
细胞壁得细胞
原生质体得制备包括取材与除菌、酶解、 分离、鉴定5个步骤
激光共聚焦扫描显微镜
激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细 胞形态,也可以用于细胞内生化成分得定量 分析、光密度统计以及细胞形态得测量,其 原理就是利用激光作扫描光源,逐点、逐行、 逐面快速扫描成像,由于激光束得波长较短, 光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高 得分辨力,大约就是普通光学显微镜得3倍
细胞工程的名词解释是什么
细胞工程的名词解释是什么细胞工程，是一门通过应用生物技术和工程原理研究和利用细胞的学科。
它将工程学和生物学相结合，旨在改变细胞的特征、功能或行为，以满足各种实际需求。
细胞工程在医学、农业、食品工业等领域具有广泛的应用前景。
一、细胞工程的基本原理细胞工程的核心在于对细胞的改造和设计。
研究人员通过基因工程技术、细胞培养和细胞分化等手段，对细胞进行修饰和改变，使其具备特定的功能和特性。
这种方式在基因治疗、组织工程和器官移植等领域具有重大意义。
基因工程技术是细胞工程的重要工具之一。
通过插入、删除或修改细胞的基因序列，研究人员可以改变细胞的生理特征和功能。
基因治疗便是细胞工程的一个应用领域，通过提供、修复或替换功能缺失的基因，治疗一些遗传性疾病。
细胞培养是细胞工程的另一个主要手段。
研究人员将细胞在实验室中繁殖和培养，以满足大规模生产和应用的需要。
细胞培养技术广泛应用于药物研发、生物制造和组织工程等领域，为人类健康和生产提供了重要的支持。
细胞分化是细胞工程的重要环节。
通过控制和引导细胞的分化方向，研究人员能够使其发展成为特定类型的细胞或组织。
这对于再生医学和组织工程等领域来说非常关键，为细胞材料的修复和替代提供了可能。
二、细胞工程的应用领域细胞工程在医学领域具有巨大的潜力。
通过细胞工程技术，研究人员可以设计和构建人工器官，替代或辅助受损的组织和器官，为病患提供重要的帮助。
此外，细胞工程还可以用于研发新型药物和治疗方法，提高疗效和降低副作用。
农业领域也是细胞工程的重要应用领域之一。
通过改造作物细胞的基因，在作物中增加耐虫性、抗病性或提高产量等特征，可以有效提高农作物的质量和产量，减少对化学农药的依赖，实现可持续农业的发展。
此外，细胞工程还在食品工业中起到重要的作用。
研究人员通过细胞工程技术，培育高营养价值和功能性的食品材料。
这不仅可以满足人们对于健康食品的需求，还有助于解决全球食品供应和营养不足的问题。
三、细胞工程面临的挑战与展望尽管细胞工程在多个领域已经取得了显著的进展，但仍然面临着许多挑战。
(细胞工程)名词解释
一、名词解释细胞工程:是应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。
通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。
外植体:是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。
植物组织培养：（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
（狭义）组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
胚状体〔embroid〕:—对应于胚〔embryo〕，在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
离体无性繁殖：是在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖的技术。
跟常规的繁殖方法相比它是一种微型操作过程，因此，有时就直接称之为微繁继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。
细胞分化:指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
细胞脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。
细胞再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
人工种子:亦称体细胞种子。
早期的人工种子概念是：体细胞胚经过人工种皮包被后而形成的体细胞种子。
现在指任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。
植物细胞全能性:指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力，因为每个细胞都具有全套的遗传基因，无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。
细胞工程名词解释
细胞工程名词解释细胞工程是一门跨学科的科学，涉及生物学、工程学和医学等领域。
它利用细胞和细胞内部的分子机制来改变或控制细胞的行为和功能，旨在开发新的治疗方法、生产新的药物和材料，甚至重新构建组织和器官。
细胞工程中涉及的名词有很多，下面将逐个进行详细解释。
1. 细胞：细胞是生物体的基本单位。
它由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
不同类型的细胞具有不同的结构和功能，包括神经细胞、肌肉细胞、免疫细胞等。
2. 细胞培养：细胞培养是指将细胞从生物体中分离出来，并在人工培养基中提供适宜的环境条件以维持其生长和繁殖。
细胞培养是细胞工程研究的基础，也是生产细胞和组织相关产品的必要过程。
3. 细胞系：细胞系是指从同一来源的细胞分离出的并能无限传代的细胞群。
细胞系的建立对于细胞研究和应用非常重要，可以提供大量相同的细胞用于实验和生产。
4. 基因工程：基因工程是指通过改变细胞或生物体中的基因来获得新的性状或功能。
在细胞工程中，基因工程被广泛应用于构建基因表达系统、改良细胞的代谢途径或增强细胞分泌功能等。
5. 组织工程：组织工程是利用细胞和支架材料构建人工组织或器官。
通过将细胞种植到支架材料上，并提供适宜的生长条件，可以使细胞自组织形成功能性的组织结构。
6. 干细胞：干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜力的细胞。
干细胞可以分化为各种不同类型的细胞，包括神经细胞、心肌细胞等。
在细胞工程中，干细胞被广泛研究和应用于再生医学和组织工程。
7. 基因治疗：基因治疗是一种通过引入或修复患者体内的遗传物质来治疗疾病的方法。
在细胞工程中，基因治疗被用于修复或增强细胞的功能，以实现治疗效果。
8. 生物反应器：生物反应器是用于在控制条件下培养细胞的设备或系统。
生物反应器的设计和优化对于细胞工程研究和应用至关重要，可以提高细胞的产量和质量。
9. 细胞活力评估：细胞活力评估是用于确定细胞的生存状态和活力水平的方法。
通过测量细胞的代谢活性、细胞膜完整性、细胞数量等指标，可以评估细胞的健康状态和响应。
细胞工程简介PPT课件
基因编辑的基本原理
基因编辑是一种通过修改生物体 的基因序列来改变其遗传信息的
精确技术。
它利用特定的核酸酶，如 CRISPR-Cas9系统，来识别和 切割DNA的特定位点，以达到
修改基因序列的目的。
基因编辑技术可以用于纠正缺陷 基因、引入有益基因或删除有害 基因，以改善生物体的性状或治
疗遗传性疾病。
利用干细胞的免疫调节功能 ，可以用于治疗各种免疫系 统疾病，如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。同时 ，通过基因编辑技术可以将 干细胞改造为能够治疗遗传 性疾病或癌症的细胞。
干细胞的抗衰老作用为其在 美容和保健领域的应用提供 了可能，如用于生产美容护 肤品或开发抗衰老疗法。
04
基因编辑与细胞治疗
在适宜的环境和营养条件下，细胞能够进行自我复制和分化，形 成新的组织和器官。
细胞对环境敏感
细胞对周围环境中的物理、化学和生物因子非常敏感，这些因子可 以影响细胞的生长、分裂和分化。
细胞间的相互作用
细胞之间存在相互作用，可以通过信号传递等方式影响彼此的生物 学行为。
细胞培养的方法与技术
原代细胞培养
传代细胞培养
细胞工程简介
目录
• 细胞工程概述 • 细胞培养技术 • 干细胞工程 • 基因编辑与细胞治疗 • 细胞工程的前景与挑战
01
细胞工程概述
定义与分类
定义
细胞工程是以细胞为基本单位，在体 外或体内通过人工操作获得细胞、组 织或器官的技术。
分类
根据操作对象和应用目的，细胞工程 可分为动物细胞工程和植物细胞工程 两大类。
可以模拟体内环境，研究细胞的生物学行为；可以大量生产细胞和蛋白质；可 用于药物筛选和毒理学研究等。
缺点
细胞工程名词解释
细胞工程名词解释细胞工程(Cell Engineering)：是指按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
MTT比色法：线粒体脱氢酶能将染料MTT还原为难溶的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，经酸性异丙醇溶解后测定其OD值，可反映活细胞的代谢水平活体染色：是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化引起细胞的死亡。
接触抑制定义：由于细胞接触而抑制细胞运动的现象。
由于接触抑制，正常细胞不互相重叠于其上生长，而是呈单层细胞生长。
密度抑制：细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍然能够增殖分裂，数量仍在增多，但当细胞密度进一步增大，培养液中的营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制，导致细胞分裂停止。
细胞周期：是指一个母细胞分裂结束后形成的细胞至下一次再分裂结束形成两个子细胞的时期，可分为G1期、S期、G2期和M期。
细胞系：由原代培养经初步纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。
细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。
抗原：一类能激发机体产生免疫应答，并能与相应的免疫应答产物（抗体或致敏淋巴细胞）发生特异性结合的物质，包括蛋白质、多糖、核酸、病毒、细菌等。
抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，即抗体。
单克隆抗体：当机体受抗原刺激时，抗原上的多个决定簇分别激活不同的B细胞。
其中，每一个B细胞分裂增殖形成的浆细胞群就是一个纯系，即单克隆，只针对某一特定抗原决定簇起作用。
（由单克隆产生的只针对一个抗原决定簇的抗体叫做单克隆抗体（McAb），简称单抗。
）多克隆抗体：在体液免疫反应中，由于一个抗原分子上有多个决定簇，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，简称多抗。
第十七章 细胞工程(胡以平)
4.灌注培养系统（perfusion culture system） • 可使细胞始终处于一个较好的营养状态和生存环境 • 可以在 “旧”培养基中连续收集培养细胞所分泌
的某些产物
• 可以根据特殊的要求，通过改变培养液的组成实现 对于细胞状态的人为调控
BB CC
DD
AA
（三）影响细胞生长的因素
1.量化评估大规模培养细胞的营养需求 2.探索大规模培养细胞合适的生存环境 3.鉴定细胞的健康状况
GCS technology enables life science researchers to mimic in vivo morphology in an in vitro environment
Glass Ball Spinner System
（2）中空纤维（hollow fiber ）
胞团细胞为供核细胞获得克隆后代。 • 1984年， Willadsen，世界上第一只以未分化的胚
胎细胞为供核细胞的核移植绵羊。 • 1995年7月，Wilmut等，已分化的胚胎细胞作为供
核细胞，克隆了Megan和Morag。
克隆羊Megan和Morag
2．成体细胞核移植
• 1962年，Gorden，紫外线照射方法，非洲爪蟾 的未受精的卵细胞的核失活，同种爪蟾的小肠 上皮细胞的核植入其中，结果约1％的重组卵发 育为成熟的爪蟾。这一成功，标志着由体细胞 核培育动物的技术体系在两栖类获得了成功。
二、核移植（nuclear transfer）
是指利用显微注射装置，将一个细胞的核植入于另 一个已经去核的细胞中，以得到重组细胞的技术。通常 所说的核移植，则是指将一个二倍体的细胞核植入于另 一个已经去核的细胞（受精卵或处于MⅡ期的卵母细胞） 中，以得到重组细胞，并使其在一定环境中生长发育， 最后获得新的个体的综合技术体系。
细胞工程知识点填空
细胞工程知识点填空一、细胞工程的概念细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过（）水平或（）水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的（）或获得细胞产品的一门综合科学技术。
二、细胞工程的分类1、植物细胞工程植物组织培养原理：（）。
过程：外植体经过（）形成愈伤组织，愈伤组织经过（）形成胚状体或丛芽，进而发育成完整植株。
应用：快速繁殖、培育（）、获得细胞产品等。
植物体细胞杂交原理：（）和（）。
过程：去除细胞壁获得（），诱导原生质体融合形成（），再经过（）培养形成杂种植株。
意义：克服（）障碍，培育作物新品种。
2、动物细胞工程动物细胞培养原理：细胞增殖。
过程：取动物组织块，用（）处理分散成单个细胞，制成细胞悬液，放入培养瓶中进行原代培养和传代培养。
条件：无菌、无毒的环境，营养，（），温度和 pH 等。
应用：生产生物制品、检测有毒物质、培养医学研究用的细胞等。
动物体细胞核移植原理：（）。
过程：将供体细胞的细胞核移入去核的（）中，使其重组并发育成新个体。
应用：加速家畜（）进程，保护濒危物种等。
动物细胞融合原理：（）。
方法：物理法（）、化学法（）、生物法（）。
应用：制备单克隆抗体。
三、植物细胞工程的应用1、微型繁殖优点：保持优良品种的（）。
实例：兰花、生菜等的快速繁殖。
2、作物脱毒选材部位：（）。
优点：提高作物的（）和（）。
3、人工种子组成：（）、人工胚乳和人工种皮。
优点：不受（）和（）限制，便于贮藏和运输。
4、细胞产物的工厂化生产细胞产物：（）、蛋白质、脂肪、糖类等。
实例：人参细胞培养生产人参皂苷。
四、动物细胞工程的应用1、单克隆抗体制备过程：将（）与骨髓瘤细胞融合，经过多次筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，再进行体内或体外培养获得单克隆抗体。
优点：（）强、（）高、可大量制备。
应用：诊断疾病、治疗疾病、运载药物等。
2、动物细胞融合与细胞杂交应用：制备（）、生产生物制品等。
3、胚胎移植过程：将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体。
细胞工程课件 第一章 细胞工程
5. 花药与花粉培养
无菌培养植物的花药（带花粉）或花粉， 形成单倍体植株。
有效的育种辅助手段：单倍体植株获得以后， 通过染色体加倍，即得到可以稳定遗传的纯合 二倍体，缩短植物育种年限。
6.细胞培养 (Cell culture)
无菌培养植物单细胞或小细胞团。
细胞培养可用于： 1、植物克隆 2、细胞系的诱变和变异体的筛选 3、生产有用化合物（useful chemicals）
细胞工程 Cell Engineering
Plant Cell
Animal Cell
细胞
大量培养 调控分化
生产有用物质(药 物、蛋白质、酶、 有用化合物)
生产组织和器官， 用于医疗修复
个体再生
优良个体克隆， 用于良种推广
遗传改良
新细胞系、新组 织、新个体
细胞融合、细胞器移植、核 质移植、转基因
细胞工程(cell engineering)：在体外培养生物
参考资料
1. 杨淑慎：细胞工程，科学出版社 2. 李青旺：动物细胞工程与实践 ，化学化工出版
社 3. 曹孜义、刘国民（主编）：实用植物组织培养
技术教程，甘肃科学技术出版社，1999年 4. Pierik RLM: In Vitro Culture of Higher Plants
(4th Edition). Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Netherland, 1999. 5. Plant Cell, Tissue, and Organ Culture (杂志) 6. Plant Cell Reports (杂志) 7. 植物生理学通讯（杂志）
无菌培养植物的成熟胚或未成熟胚， 使其形成正常的植株。
细胞工程定义
细胞工程定义细胞工程是一门跨学科领域，结合了生物学、工程学和医学的知识，旨在利用人工手段对细胞进行控制和改造，以实现医学、生物学和工业等领域的应用。
通过细胞工程，科学家们能够对细胞的结构、功能和行为进行精确调控，从而开创出许多前所未有的研究和应用领域。
细胞工程的核心目标是通过对细胞进行改造，实现对其特定性状和功能的调控。
这种调控可以包括改变细胞的基因组，调整蛋白质表达水平，甚至重新设计和构建细胞内的分子网络。
通过这些手段，科学家们可以使细胞产生新的药物、化学品，改善工业生产过程，甚至修复受损的组织和器官。
在细胞工程中，研究人员通常采用基因编辑技术来改变细胞的基因组。
最著名的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统，它能够精确地剪切和修改细胞的DNA序列。
借助这项技术，科学家们可以删除、插入或修复细胞中的特定基因，从而影响细胞的功能和特性。
细胞工程在医学领域具有巨大的潜力。
通过细胞工程，科学家们可以制造出可用于治疗癌症、心脏病和其他疾病的细胞。
例如，他们可以利用干细胞技术培育出患者特定的器官细胞，用于替代受损的组织。
此外，细胞工程还可以用于生产具有特殊功能的细胞，用于药物筛选、疫苗开发和疾病模型的构建。
除了医学领域，细胞工程在生物学和工业领域也具有重要的应用价值。
在生物学研究中，细胞工程可以帮助科学家们更好地理解细胞的运作机制和生物过程。
在工业领域，细胞工程可以用于生产生物燃料、化学品和材料，以及改善工业生产的效率和可持续性。
细胞工程的发展正迅猛地推动着人类社会的进步。
然而，我们也需要认识到细胞工程所面临的伦理和安全挑战。
在开展细胞工程研究和应用时，科学家们必须遵循严格的伦理标准，并确保安全性和可行性。
只有在平衡科学发展和社会利益的基础上，细胞工程才能为人类带来更多福祉和进步。
总之，细胞工程作为一门跨学科领域，为我们提供了探索细胞世界的新视角。
通过精确调控和改造细胞，细胞工程为医学、生物学和工业等领域的发展带来了巨大的潜力。
细胞工程名词解释最终版
一、名词解释1、细胞工程（cell engineering）：应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。
2、细胞培养（cell culture）：是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。
8、植物细胞工程：以植物组织细胞为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物个体，或获得有用物质的过程。
动物细胞工程：以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作，使细胞产生某些人们所需要的生物学特性，从而改良品质，加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。
9、脱分化：离体培养条件下，一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。
11、细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。
12、外植体：植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
13、愈伤组织：脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。
14、细胞分化：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
器官发生：是指植物根茎叶花果实等器官的分化和形成18、体细胞胚或胚状体：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似结构统称为体细胞胚19、初代培养：原代培养也称初代培养，严格的说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养20、继代培养：将初代培养产物转入继代培养基上,使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整植株22、花药培养(anther culture):把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程.23、花粉培养(pollen culture):也叫小孢子培养(microspore culture),是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程.31、细胞同步化：同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
细胞工程
细胞工程技术的应用
优质植物快速培育与繁殖 动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种 利用动植物细胞培养生产活性产物、药品。 新型动植物品种的培育。 在医学器官修复或移植中的应用。 制备转基因动植物的生物反应器。 珍稀动植物资源的保存与保护。 在遗传学、发育生物学等领域的理论研究。 在能源、环境保护等领域的应用
28
1959年，张明觉以家兔为实验材料，从一只交配后12h 的母兔子宫中冲取精子(即体内获能的精子)，从另外两只 超数排卵处理母兔的输卵管中收集卵子，精子和卵子在体 外人工配制的溶液中完成受精过程，然后，正常卵裂的36 枚胚胎被移植到6只受体兔的输卵管中，其中4只妊娠，并 产下15只健康仔兔，这是世界上首批试管动物，它们的正 常发育标志着体外受精技术的建立。
44
培养方法：
（1）分批培养：在新鲜培养基中加入少量 细胞，在培养过程中不加入，也不放出培 养液的做法。
45
（2）半连续培养 培养一段时间后，部分培养液与新鲜培 养液交换 （3）连续培养法 培养过程中，不断抽取悬浮培养物并注 入等量新鲜培养基。 恒浊培养（菌体浓度、生长浓度恒定） 恒化培养（营养物质浓度基本恒定）
24
4） 细胞器移植技术
277次乳腺细胞核 移植实验； 获得29个发育为8 细胞的“胚”；
13头代孕母亲；
1996 年 7 月 5 日 ， 羊 羔 6LL3 ， 被 命 名为“多莉”。
25
5）染色体工程技术
染色体工程是按人们的需要来添加、削减或 替换生物的染色体的一种技术。主要分为动 物染色体工程和植物染色体工程。
8
（3）细胞融合技术
两个或多个细胞相互接触后，其细胞发生 分子重排，导致细胞合并、染色体等遗传 物质重组的过程称为细胞融合。细胞融合 是细胞工程的重要基本技术，过程包括： 制备原生质体 诱导细胞融合（一定的比例，物理、化学 或生物方法） 筛选杂合细胞。
第二章 细胞工程 第1节 植物细胞工程
第1节植物细胞工程一、细胞工程概念及植物组织培养技术1．细胞工程的含义2.细胞的全能性(1)定义：细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
(2)在生物的生长发育过程中，并不是所有的细胞都表现出全能性，这是因为在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达。
3．植物组织培养技术(1)概念：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
(2)理论基础：植物细胞的全能性。
(3)前提：离体的植物器官、组织或细胞等。
(4)条件：激素、人工配制的培养基上、适宜的培养条件。
(5)结果：脱分化形成愈伤组织，再诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株。
(6)相关概念①外植体：用于植物组织培养的离体的植物器官、组织或细胞。
②脱分化：已经分化的细胞，在一定激素和营养等条件的诱导下，失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞。
③愈伤组织：脱分化而形成的不定形的薄壁组织团块。
④再分化：愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。
4．菊花的组织培养【归纳总结】生长素和细胞分裂素的用量生长素/细胞分裂素的比值作用效果比值高时 促进根的分化、抑制芽的形成 比值低时 促进芽的分化、抑制根的形成比值适中时促进愈伤组织的形成【强化记忆】1．植物细胞具有全能性的原因是什么？ 提示 植物细胞具有本物种的全部遗传信息。
2．在生物的生长发育过程中，细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种组织和器官的原因是在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有选择地表达。
3．请用流程图的形式写出植物组织培养的过程。
提示 外植体――→脱分化愈伤组织――→再分化胚状体――→诱导生芽――→诱导生根――→诱导试管苗。
4．在菊花组织培养过程中，在愈伤组织的诱导阶段往往要避光培养，有利于细胞脱分化产生愈伤组织(如果是在光照条件下，容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织)。
细胞工程(cell engineering)技术
细胞工程（cell engineering）技术广义的细胞工程（cell engineering）指所有应用于生物学和医学的、以细胞为操作对象的技术手段，其中也包括细胞培养。
一般地说，细胞工程主要指应用各种手段对细胞不同结构层次(整体、细胞器、核、基因等)进行改造，如进行细胞融合、核移植、基因转移等，以获得具有特定生物学特性的细胞。
一．细胞融合技术在细胞自然生长情况下，或在其他人为添加因素存在下，使同种细胞之间或不同种类细胞之间相互融合的过程，即为细胞融合（cell fusi on）。
通过细胞融合，可将来源于不同细胞核的染色体结合到同一个核内，结果形成一个合核体的杂种细胞。
细胞在生长过程中，可能发生自发的融合，但几率很低。
在实际工作中常采用各种促融合手段，包括病毒类融合剂如仙台病毒、化学融合剂如聚乙二醇（PEG）及电激融合法等。
在进行细胞融合反应和适当时间的培养后，需要通过一定方法对两种亲本细胞融合产生的具有增殖能力的杂种细胞进行筛选。
筛选方法主要包括药物抗性筛选、营养缺陷筛选和温度敏感性筛选等。
细胞融合最典型的应用是单克隆抗体技术。
细胞融合技术的发展和骨髓瘤细胞株的建成促成了B细胞杂交瘤技术的建立和单克隆抗体技术的成功。
1975年Koehler和Milstein将用绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和体外培养能长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合，获得了具有两种亲本细胞特性的杂交细胞，即既能在培养条件下长期生长增殖，又能分泌特异的抗绵羊红细胞的抗体的B淋巴细胞杂交瘤。
对这种融合细胞进行克隆化以后，即可获得来自同一细胞克隆的抗体，这种抗体具有高度的均一性，称为单克隆抗体。
二．核移植技术细胞核移植（nuclear transfer）是指将一个双倍体的细胞核（可来自胚胎细胞或体细胞）移植到去核的成熟卵母细胞或受精卵中。
重组的卵细胞可以植入母体，并能发育为与供核细胞基因型相同的后代，因此又称为动物克隆技术。
1997年诞生的克隆羊“多利”就是体细胞核移植技术的产物。
细胞工程的概念
细胞工程的概念细胞工程是一种新兴的交叉学科，它将生物学、化学、物理学、工程学等多个学科的知识和技术相结合，旨在通过对细胞的控制和改造，实现对生物体的精准控制和改造。
细胞工程的主要内容包括以下几个方面：1. 细胞培养技术：细胞培养技术是细胞工程的基础，它是指将细胞放入培养基中，提供适宜的营养物质和环境条件，使细胞在体外生长和繁殖的技术。
细胞培养技术的发展为细胞工程的研究提供了基础条件。
2. 细胞转染技术：细胞转染技术是指将外源性DNA或RNA导入到细胞内，使其表达特定的基因或蛋白质的技术。
细胞转染技术是细胞工程中最重要的技术之一，它可以用于基因治疗、蛋白质表达、细胞信号转导等方面的研究。
3. 细胞工程药物：细胞工程药物是指通过细胞工程技术生产的药物，包括蛋白质药物、抗体药物、疫苗等。
细胞工程药物的生产技术已经得到广泛应用，成为现代医学中不可或缺的一部分。
4. 细胞治疗：细胞治疗是指通过细胞工程技术改造或修复患者自身的细胞，以达到治疗疾病的目的。
细胞治疗是一种新兴的治疗方式，它可以用于治疗癌症、心血管疾病、神经系统疾病等多种疾病。
5. 细胞生物反应器：细胞生物反应器是一种用于细胞培养和生产细胞工程药物的设备。
细胞生物反应器的设计和优化是细胞工程中的重要研究方向之一。
细胞工程的发展为人类健康和生命科学的研究提供了新的思路和方法，它将细胞作为研究和应用的核心，通过对细胞的控制和改造，实现对生物体的精准控制和改造。
随着细胞工程技术的不断发展和完善，相信它将为人类健康和生命科学的研究带来更多的突破和进展。
现代技术专题细胞工程
现代技术专题细胞工程汇报人：日期:•细胞工程概述•细胞培养技术•细胞分化与基因编辑技术目录•细胞工程在医学领域的应用•细胞工程在农业领域的应用•细胞工程未来发展趋势与挑战01细胞工程概述细胞工程是利用细胞生物学和分子生物学的原理和技术，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
细胞工程定义细胞工程涉及细胞培养、细胞融合、细胞拆分、染色体操作等技术，以实现细胞水平的遗传改造、细胞生产以及细胞水平的医学治疗等目的。
基本概念定义与基本概念细胞工程发展历程早期探索细胞工程起源于20世纪初，当时科学家开始尝试进行细胞培养和细胞融合实验。
快速发展20世纪70年代以后，随着分子生物学和遗传学的发展，细胞工程进入快速发展阶段，出现了许多重要的技术和方法。
广泛应用近年来，随着生物技术的不断进步和应用领域的拓展，细胞工程在农业、工业、医学等领域得到了广泛应用。
农业领域利用细胞工程技术培育抗逆、抗病、优质农作物新品种，提高农业生产效率。
工业领域利用细胞工程技术生产生物燃料、生物材料等，实现生物资源的有效利用。
医学领域利用细胞工程技术进行组织工程、药物筛选和疾病治疗等，为医学研究和治疗提供新的手段和方法。
细胞工程应用领域02细胞培养技术细胞增殖与分化在适宜的培养条件下，细胞不断增殖并分化成特定的细胞类型。
细胞与细胞间相互作用细胞在培养过程中会形成细胞间连接，通过信号分子进行信息交流。
细胞贴壁生长细胞在培养容器表面贴附并分泌细胞外基质，形成一层细胞单层。
直接从生物体内获取的细胞进行培养。
原代细胞培养传代细胞培养干细胞培养将原代细胞或已适应的细胞进行传代培养。
对干细胞进行体外培养，用于再生医学和药物筛选等领域。
030201用于研究细胞的生长、增殖、分化等基本生命活动。
基础研究通过细胞培养筛选具有药效的化合物或药物。
药物筛选利用干细胞培养技术修复损伤的组织器官。
再生医学用于评估食品或化学物质的潜在风险。
细胞工程
1、细胞工程的定义及特点？细胞工程（cell engineering）：是指主要以细胞为对象，应用生命科学的理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞，组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞工程的特点：前沿性：现代生物技术的热点争议性：新技术给伦理道德带来的冲击综合性：多学科交叉应用性：工程类课程，重在产品与技术11、植物再生的理论基础：细胞全能性（是指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能）。
12、植物组织培养的再生途径有哪两种？⑴器官发生途径：成熟细胞---愈伤组织---出根出芽---完整植株。
（离体的植物器官、组织、细胞--------愈伤组织--------根芽----植物体）⑵体细胞胚发生途径：成熟细胞----分生细胞-----胚状体----完整植株。
17、植物细胞几种大规模培养系统各有什么特点？⑴悬浮细胞培养：在愈伤组织体液培养的基础上发展起来，是指将单个有力细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
特点：细胞可以不断增值，形成高密度的细胞群体，斌且适于大规模培养，可大量提供较均匀的细胞，为深入细致地研究细胞的生长、分化创造了一个很好的实验方法和条件。
⑵植物细胞固定化培养：把细胞固定在一种惰性基质上，如琼脂、藻酸盐、聚丙烯酰胺和纤维膜等，细胞不能运动，而营养液可以在细胞间流动，供应细胞营养的培养方法。
优点①细胞经过包埋后所到的剪切力损伤减小，维持了细胞的稳定性，适合脆弱的植物细胞的培养，同时也利于采用传统生物反应器大规模培养。
②悬浮细胞培养体系中细胞密度比较高时会因粘度增加儿引起传质困难，固定化细胞培养系统中细胞密度远高于悬浮培养，但并不会改变培养液流体性质，利于传代。
③大多数植物次级代谢产物合成在生长停止后才大量合成。
采用固定化培养可以将细胞生长与产物合成分成两个阶段④细胞生长较为缓慢，利于次级代谢产物的积累⑤固定化增加了细胞与细胞间的接触，促进了细胞间信息传递，利于代谢产物的合成；⑥固定化细胞可以反复使用，可以方便的进行产物的连续性收获，降低了成本。
细胞工程概念
细胞工程概念
细胞工程（Cell Engineering）是一门涉及工程学、生物学和医
学的学科，旨在利用工程技术和细胞生物学的知识，对细胞进行设计、改造和控制，以达到提高细胞功能、生产有用物质或治疗疾病的目的。
细胞工程包括以下几个方面：
1. 细胞培养与扩增：通过优化细胞培养条件，如培养基的组成、培养环境的控制等，促进细胞增殖和生长，以提高细胞数量和产量。
2. 细胞表型调控：通过外源基因的表达和调控，改变细胞的性状和功能，使其具备特定的生物产物生产能力或执行特定的生物功能，如产生药物、合成化学品等。
3. 细胞工程产品的制备：包括细胞的收获、提取和保存等步骤，以确保细胞工程产品的纯度、活性和稳定性。
4. 细胞生物反应器的设计与控制：设计合适的反应器，提供适宜的环境条件，如温度、pH值、氧气含量等，以保证细胞工
程过程的高效进行。
细胞工程广泛应用于药物生产、生物修复和再生医学领域。
通过改造细胞，可以生产更高效、更稳定的药物，如重组蛋白的生产；通过修复和再生损伤组织，可以治疗各种疾病，如心脏病、肝脏损伤等。
细胞工程还有望在组织工程、器官移植和人
工生殖等方面发挥重要作用。
尽管细胞工程在科学和技术上的发展还面临许多挑战，如细胞合成、细胞重编程和细胞材料相容性等问题，但它有着巨大的潜力，对于人类健康和社会的发展具有重要意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
细胞工程学复习资料一、名词解释1、细胞工程按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
2、接触抑制由于细胞的移动而互相靠近发生接触时，细胞不再移动的现象。
其实质是由于细胞接触而抑制细胞运动的现象。
3、密度抑制当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分的减少，代谢产物的增多。
细胞因营养的枯竭和代谢物的影响而导致细胞分裂停止的现象。
4、无血清培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。
5、原代培养即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。
由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很好的实验对象。
6、传代培养当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。
此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。
这个过程就称为传代培养。
7、饲养细胞也称滋养细胞，是一层经过射线照射或丝裂霉素C作用后失去分裂能力，供其他细胞附着的细胞层。
8.细胞系原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。
9.细胞株从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选购方法,由单细胞增殖形成的细胞群.10.单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术: 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。
11.外植体把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。
12.愈伤组织脱分化的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性、松散的细胞团。
是植物细胞体外再生的第一步，关键一步。
13.继代培养指培养组织在培养基上生长一段时间后，营养物质枯竭，水分散失，并已积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养。
14脱分化：分化的细胞在一定条件下，可以转变为胚性状态，重新获得分裂能力。
15再分化：是脱分化后的分生细胞在一定的条件下，重新分化为各种类型的细胞，并进一步发育成完整植株。
16组织工程是指应用工程学和生命科学的原理和方法来研究正常或病理状况下哺乳动物组织的结构、功能和生长的机制，研究开发能够修复、维持或改善损伤组织的人工生物替代物的一门学科。
其核心是有种子细胞核生物活性材料构成的三维空间复合体。
17顶体反应是指精子在进入卵丘细胞后由精子头部释放顶体小泡中的内含物，有助于精子穿过透明带的反应过程。
18胚胎发育阻滞是指体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不在发育，这种现象及胚胎发育阻滞。
二、填空题1、以细胞工程为基础，发展派生出了不少以工程冠名的新领域，如组织工程、胚胎工程、染色体工程等2、动物细胞工程实验室的设置严格要求无菌环境，避免微生物及其它有害因素的影响。
一般分为六个工作方面：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。
3、理想的无菌操作室应划分为更衣间、缓冲间及操作间。
4、植物的细胞工程实验室设置特有光照培养室、试管苗培养的温室、移植驯化室。
5、实验室的生物安全保护必须有房租致病性微生物扩散的制度和人体防护措施。
即包括物理性防护和制度性防护。
其中物理性防护包括隔离的设备、实验室的设计及实验实施三方面。
6、玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。
其中浸酸的组成是重铬酸钾、浓盐酸、蒸馏水。
7、根据离体细胞在体外生长时是否贴壁的性质，将其分为贴壁型和悬浮型两类。
贴壁型细胞包括上皮细胞型、成纤维细胞型、游走细胞型、多形型细胞。
8、无血清培养基包括基础培养液及添加成分两大部分。
9、组织细胞的分离方法主要为机械法和消化法。
机械法包括离心、切割、机械分散等方法；消化法包括胰蛋白酶、胶原酶、螯合剂消化法。
10、培养方法包括组织块培养法、单层细胞培养、悬浮细胞培养。
11、细胞的复苏冻存基本原则是慢冻快融。
12、细胞的运输方法有贴身运输、冰瓶运输、液氮罐运输。
13、胚胎发育的基本过程有生殖细胞的发生、受精、卵裂、囊胚的形成、原肠胚的形成、中胚层及体腔的形成、胚层分化。
14、人工种子包埋方法：A干燥包埋法 B 液胶包埋法C 水凝胶法15、人工种子的组成：人工种皮、人工胚乳、体细胞胚。
16、幼胚培养中，常见的生长方式有胚性发育、早熟萌发、愈伤组织。
17、器官的发生和胚状体形成是愈伤组织再分化形成植株的两个途径。
三、简答题1、超净工作台的分类？它们的特点（原理）各是什么？答：超净工作台分为侧流式和外流式两类。
原理：侧流式净化后的空气从气流由左侧或右侧通过工作台面流向两侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，从而形成气流屏障以保持工作区无菌。
外流式使净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作区，但如进行有毒物质的实验操作则对操作者不利，外流式多为开放式方便取放实验物品。
2、倒置显微镜的使用优点？电热干燥箱使用注意事项？答：（1）倒置显微镜的使用优点：可以从培养皿的下方检查培养物，减少观察对细胞生产的影响。
（2）电热干燥箱使用注意：①消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而致玻璃器皿损坏，应该等候温度自然下降至100℃以下方可打开。
②电热干燥时温度不宜过高，过高的温度可导致包裹的纸或棉花烧焦，从而影响细胞的生长。
3、细胞培养室常见的消毒方法有哪些？答：消毒的方法分为物理灭菌法（紫外线、电离辐射、湿热、干热、过滤）和化学消毒法（各种化学消毒剂）4、如何实现无菌操作技术及其关键流程？答：无菌操作技术是细胞体外培养的基本技术，也是最易被感染的。
因此，防止污染是决定细胞培养成败的关键。
无菌概念和无菌操作必须贯穿整个培养过程的始终。
（1）实验器具和材料的准备根据实验要求，将所需要的实验器具和材料准备好，以合适的方法进行消毒和灭菌。
（2）培养室和超净工作台的消毒用70%～75%酒精擦洗工作台面后，将已消毒灭菌的实验用品取出，并将操作器械放置在无菌器械支架上，然后开始实验操作。
在实验操作过程中，对所有操作器械每次使用后都要进行灭菌，常采用酒精灯火焰灼烧灭菌。
（3）洗手和着装进入层流操作室进行实验操作，应完成缓冲准备区内的淋浴、一次更换灭菌衣帽、拖鞋；手臂消毒、二次更换灭菌防护衣帽、手套、拖鞋等；再在风淋区进行无菌风淋后方可进入层流操作室。
进入无菌操作区后，再用70%～75%的酒精擦拭双手和前臂，完成无菌操作准备工作。
（4）无菌培养操作①操作时，动作要准确敏捷，但不宜过快，以防止空气流动，增加污染机会。
②操作有条不紊，合理布局保持一定操作顺序，尽量减少不必要的身体与器皿的接触，防止交叉污染。
③操作时切勿大声讲话和咳嗽，以免不必要的细菌污染带入工作台面。
5、常见的细胞培养液体答：（1）水水为细胞培养所必需，细胞所需的化学成分、生存环境、营养物质都必须用水溶解才能吸收，其代谢产物也必须溶解于水才能被排泄。
水还能维持细胞形态、调节渗透压及平衡PH值有一定作用。
（2）平衡盐溶液是Ringer生理盐水发展起来的，是组织细胞培养中常用的基本液体。
BSS 可以调节PH、维持渗透压以及供给细胞生存所需的能量和无机离子成分，主要作为合成培养基的基础液及用于洗涤组织、细胞等。
（3）消化液常用的消化液有胰蛋白酶溶液、二乙烯四乙烯二钠溶液（EDTA—Na）及胶原酶溶液，这些溶液可单独使用也可混合使用。
（4）消化酶抑制液在无血清培养时必须使用消化酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶的过度消化而损坏。
（5）PH调整液常用的有NaHCO3溶液和HEPES溶液。
（6）抗生素液培养液内加入适量的抗生素，可以预防由于操作不慎而产生的微生物污染。
常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。
（7）谷氨酰胺补充液谷氨酰胺在细胞的代谢过程中起着重要作用，因而合成培养基都需要添加。
6、天然培养基中添加的血清有哪些作用？缺点？P46—47（百度）血清含许多对细胞有利成分，能够提供丰富的营养组分；有促生长效果。
成分不明确；血清保存期短（至多一年），不能排除血清中含有易变物质；使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态，血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)，血清含一些对细胞产生毒性的物质，影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。
取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性。
血清制作过程复杂、批间差异大，成分不能保持一致，使用使得实验和生产的标准化困难，其中的蛋白质使得某些转基因蛋白生物药品生产中分离纯化工作很难完成。
质量不稳定，价格昂贵，进出口管制影响盈利.，使用不方便。
7、常见的培养技术及各自特点？P56-63答：（1）悬滴培养也称组织块悬滴培养，是最早建立的体外培养技术。
优点是活体观察时可直接使用油浸物镜，缺点是操作时生长基质盖片即容易破碎又容易污染。
（2）培养瓶培养是将拟培养对象直接接种在培养瓶内再入培养箱进行培养的方法。
（3）旋转管培养就是将所培养的组织细胞接种在一管状培养器皿内，再将旋转管固定在一可以旋转的装置上，边旋转进培养的一种培养方法。
（4）克隆培养法即纯化培养，又称单细胞分离培养法。
就是将从细胞悬液中获得的单个细胞用于培养，使之重新繁衍成一个新的细胞群体的培养技术。
所获得的后裔细胞属于一个共同祖细胞，称细胞株。
（5）细胞同步化培养是指自然或人工方法获得的细胞群体的细胞周期同步化生长。
分为选择细胞同步化和诱导细胞同步化。
前者包含M期细胞震摇脱落法、离心洗脱法、梯度沉降法；后者有血清饥饿法、异亮氨酸营养缺乏法、DNA合成抑制剂阻断法、秋水仙素阻断法。
（6）动物细胞的大规模培养一般分为分批式操作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作五种操作模式。
8、常用的动物细胞大规模培养主要有哪些操作模式？各有哪些优缺点？答：操作模式：可采用分批式操作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作等多种操作方式进行培养。
分批式操作：将细胞扩大培养后，一次性将细胞和培养液投入生物反应器内进行培养，在培养过程中其体积不变，不添加其他成分，待细胞增长和产物积累到适当的时间，一次性对细胞、产物、培养基进行收获，从中分离所需物质。
该操作简单、培养周期短、污染和细胞突变的风险小，既能直观地反应细胞生长代谢的过程，又可直接放大，是进行动物细胞培养工艺条件研究常用的手段。
流加式操作：细胞持续生长至较高的密度，整个培养过程没有流出或回收，细胞或产物达到所需指标后终止培养，一次性回收整个反应体系，分离纯化产品。