家兔离体肠肌

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《医学机能实验学》学院:

专业:针灸推拿学

班级:

学号:

姓名:

******大学

2013/11/9

某些因素对家兔离体肠肌影响

姓名

(******大学**级针灸推拿专业1班6组,**学号)

摘要目的:观察不同因素(HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱)对家兔离体十二指肠活动的影响。方法:采用常规小肠平滑肌标本离体灌流的实验方法,观察不同剂量、浓度的HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱的对小肠平滑肌自发收缩活动的影响及其变化规律。结果:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强效应,其收缩幅度与对照组比较差异有统计学意义,NaOH、肾上腺素对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制效应,其幅度变化与对照组比较差异有统计学意义。结沦:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对大鼠十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强作用,NaOH、肾上腺素则有减弱作用。【1】。

关键词家兔离体肠肌

肠道平滑肌有壁内神经丛,因此有自动节律性收缩的特性,其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。本实验加入药物HCl NaOH 乙酰胆碱台氏液肾上腺素观察记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。【2】

1.材料

实验动物:选用体重为2~3kg的健康家兔1只,雌雄不限。

主要试剂与仪器:麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、HCL、NaOH、乙酰胆碱、台氏液、肾上腺素、RM6240系统生物机能实验系统等。

2.方法

2.1标本制备:击昏家兔,剖腹取长约2 cm十二指肠肠管;将肠管放入室温的台氏液中轻轻漂洗。肠内容物洗净后,肠段两端各系一条线,一端固定在标本钩上,另一端缚线连接张力传感器,整个肠管置于37 ℃台氏液中,台氏液内持续供95%O2与5%CO2混合气体,其间更换台氏液1次,待收缩活动平稳后用RM6420生物机能实验系统记录平滑肌收缩活动曲线。

2.2灌液10ml,离体小肠稳定10min,记录一张对照张力曲线,滴加HCl溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。

2.3灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加NaOH溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。

2.4灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加18℃台氏液溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。

2.5灌液10ml,,记录一张对照张力曲线,滴加1:10000肾上腺素溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。

2.6灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加1:100000乙酰胆碱溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。

2.7数据采集:计算给药前小肠平滑肌肠段的张力、收缩波平均振幅、平均张力作为对照值,采集给药后的相应值。

2.8统计学处理实验结果以均数±标准差(x±s)表示,用Prim4.0进行方差分析处理。

3.结果

图1 图

图1

与对照组比较:*P<0.01 , **P<0.05 , ***P>0.05

据资料【3】显示,当滴加HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱后,对家兔离体肠肌(十二指肠段)平滑肌自发收缩活动有增强效应;而滴加NaOH溶液、肾上腺素后有抑制效应。如表1所示,实验乙酰胆碱组差异有显著性(P<0.05),即对家兔离体肠肌运动有抑制效应;由于实验操作等多原因导致实验HCl组、NaOH组、18℃台氏液组、肾上腺素组差异不显著(P>0.05)。

4.讨论

4.1 HCL对离体十二指肠的影响

加入HCl后,对小肠的收缩活动有增强效应。酸性环境有助于小肠平滑肌的运动,实验中观察到HC1对小肠平滑肌收缩节律影响不明显,因此HCl对小肠活动影响的作用机制,主要是通过影响慢波基础上产生动作电位的数量来调整胃肠功能状态,而对慢波节律可能无明显影响。

4.2 NAOH对离体十二指肠的影响

加入氢氧化钠后,对肠段的收缩活动有抑制效应。NaOH为碱性成分,正常机体胃肠内有胰腺小导管细胞分泌的HCO3可起到中和胃酸的作用,使小肠液p H值升高,甚至偏碱性,有利于小肠内各种酶发挥作用。但碱性成分对小肠平滑肌自发机械收缩活动有抑制效应。故肠段的收缩频率都较正常水平减慢,振幅减小。

4.3 18℃台氏液对离体十二指肠的影响

加入18℃台氏液后,对肠段的收缩活动有增强效应。正常情况下,机体中的细胞外液中存在较多的Ca2+,而Ca2+则是肌肉收缩的必要条件。平滑肌细胞兴奋→肌膜被激活→细胞外Ca2+进入膜内,而且肌浆网释放Ca2+ →[Ca2+]i浓度升高→Ca2+与钙调蛋白结合(1分子钙调蛋白结合4个Ca2+) →肌球蛋白激酶活化→ATP分解释放能量→横桥获能处于高自由能→横桥牵动细肌丝滑动→平滑肌收缩。台氏液给离体小肠提供一个具有营养的外环境,古小肠平滑肌收缩加强。

4.4肾上腺素对离体十二指肠的影响

加肾上腺素后,对肠段的收缩活动有抑制效应。。肾上腺素是肾上腺髓质的主要激素,外源性肾上腺素能和肠道平滑肌上的肾上腺素能受体(α受体和β受体)结合使平滑肌松弛,抑制了小肠的活动,收缩幅度大大降低。

4.5乙酰胆碱对离体十二指肠的影响

加入乙酰胆碱后,对肠段的收缩运动有增强效应。胆碱能神经元释放的乙酰胆碱可激动胃肠平滑肌细胞膜上的M受体,M受体是G蛋白耦联受体,M2受体与配体结合后通过G蛋白与腺苷酸环化酶(AC)耦联,抑制该酶的活性,使胞内环磷酸腺苷浓度下降,通过细胞膜信号传导

系统,导致胞内钙离子浓度升高,兴奋胃肠平滑肌并产生强烈的收缩运动。

5.结论

家兔肠肌段属消化道平滑肌,具有肌组织的一般特性,如兴奋性和收缩性,同时又有自己的特点,如和骨骼肌相比,消化道平滑肌的兴奋性较低,收缩速度较慢,但伸展性大。消化道平滑肌对电刺激不敏感,而对机械牵张,温度变化和化学刺激敏感。许多部位的消化道平滑肌有自发节律性运动,但频率慢且节律不稳定。温度对于肠段的运动也有影响。肠段的活动还受到体液因素的作用。肠的平滑肌有神经调节的作用:小肠平滑肌的肌间神经丛中主要有两类神经元。一类神经元含血管活性肠肽、腺苷酸环化酶激活肽、一氧化氮合成酶等,它们可以使中间神经元或抑制性运动神经元;另一类神经元含乙酰胆碱、速激肽、P物质等,它们可以使中间神经元或兴奋性运动神经元。这些神经元通过他们末梢释放的递质,调节小肠平滑肌的活动。即:

①消化道平滑肌具有自律性,但其收缩缓慢,节律性不规则。②消化道平滑肌具有一定的紧张性。③消化道平滑肌的活动易受温度、PH值及其它化学因素、药物因素的影响, 对某些化学物质(如:酸、碱等)及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。

6.参考文献

【1】吕军等包头医学院学报2004年

【2】津田恭介等药理试验法.(药效的评价(1))[M]地人书馆

【3】姚泰人体生理学[M]第3版人民卫生出版社

7.原始数据

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