酶标仪常见技术和应用
酶标仪的应用原理及操作
酶标仪的应用原理及操作1. 引言酶标仪（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种常用的生物化学分析方法，广泛应用于医学、生物学、农学等领域。
它通过检测酶与抗原或抗体的特异性结合来测定样品中的物质含量。
2. 原理酶标仪的应用原理基于酶与抗体或抗原的特异性结合，并利用酶的催化作用来进行定量检测。
2.1 抗原抗体反应酶标仪通常用于检测抗原或抗体的存在和浓度。
首先，将待测样品中的抗原或抗体与特异性的抗体或抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
2.2 酶标记为了使抗原-抗体复合物可观察和测量，通常需要将酶标记与抗原-抗体复合物结合。
常用的酶标记物包括辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
2.3 底物催化酶标记与抗原-抗体复合物结合后，加入相应的底物进一步进行反应。
底物的选择取决于所使用的酶标记物。
酶通过催化底物的反应，产生可观察的信号，如颜色变化。
3. 操作步骤以下是酶标仪的一般操作步骤，具体步骤可能因不同设备而有所差异。
3.1 样品制备•收集样品，并按照实验要求进行处理，如稀释、预处理等。
3.2 板面涂布•将特异性抗体或抗原溶液均匀涂布在试验板上，然后将其孵育一段时间，使其与孔中的抗原或抗体结合。
3.3 样品加入•加入待测样品到试验板的相应孔中，并进行充分的混合。
3.4 孵育•将试验板放置于恒温箱或酶标仪内进行孵育，使样品中的抗原与抗体结合。
3.5 洗涤•倾倒试验板中的液体，然后用洗涤缓冲液或PBS洗涤试验板，去除未结合的物质。
3.6 酶标记物加入•加入含有酶标记物的溶液到试验板的相应孔中，并进行充分的混合。
3.7 孵育•将试验板再次孵育，使酶标记物与抗原-抗体复合物结合。
3.8 洗涤•重复步骤3.5，去除未结合的酶标记物。
3.9 底物加入•加入含有底物的溶液到试验板的相应孔中，并进行充分的混合。
3.10 信号测定•使用酶标仪测量反应后的信号，如光密度、发光强度等。
酶标仪常见技术和应用
细胞活力检测
细胞活性检测 – MTT、XTT法
• MTT-黄色染料 ↓被活体细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原 • 形成蓝紫色结晶-甲瓒 ↓DMSO溶解 检测OD570(OD630作为背景参照） 细胞质 线粒体 细胞核 cell
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光吸收的基本检测类型
• 特定波长检测: DNA、RNA及蛋白质浓度
• 比色测定: 检测反应的产物产生的颜色变化（450nm） 酶联免疫吸附试验（ELISA）
• 浊度检测: 检测样品中微颗粒产生的光的散射 细菌的生长（600nm）
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21/02/2014
Coቤተ መጻሕፍቲ ባይዱparison of Microplate Readers with Absorbance Detection
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《酶标仪系列》课件
技术创新推动行业发展
未来酶标仪的技术创新将进一步推动行业发展，提高检测效率和精 度。
国际化竞争加剧
随着酶标仪市场的不断扩大，国际化竞争将进一步加剧，国内品牌 需加强技术创新和品牌建设。
05
总结与展望
对酶标仪的总结
技术发展
酶标仪在技术上经历了多次突破 ，从最早的机械式到现在的数字 化和智能化，其检测精度和稳定
酶标仪的发展趋势
技术创新
随着科技的不断进步，酶 标仪在技术上不断创新， 如提高检测精度、降低检 测时间等。
智能化发展
酶标仪正朝着智能化方向 发展，如实现自动进样、 自动检测、自动数据分析 等功能。
定制化服务
针对不同行业和客户需求 ，酶标仪厂商提供定制化 服务和解决方案。
酶标仪的前景展望
市场需求持续增长
究提供有力支持。
医学诊断
用于检测各种疾病标志物，如 肿瘤标志物、心血管疾病标志 物等，为临床诊断提供依据。
食品安全检测
用于检测食品中的有害物质、 农药残留等，保障食品安全。
环境监测
用于检测水体、土壤等环境中 的有害物质，为环境保护提供
数据支持。
02
酶标仪系列介绍
酶标仪系列的产品种类
01
02
03
04
。
清洗反应孔
每次使用后，及时清洗 反应孔，避免残留物影
响检测结果。
检查仪器性能
定期检查仪器各项功能 是否正常，如有异常及
时处理。
存储环境
保持仪器放置在干燥、 无尘的环境中，避免阳
光直射。
酶标仪的常见问题及解决方案
01
02
酶标仪的原理及应用
酶标仪的原理及应用酶标仪（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，简称ELISA）是一种基于酶反应原理的生化分析方法。
它广泛应用于医学诊断、生物学研究、环境监测以及食品安全等领域。
下面将从酶标仪的原理、操作步骤以及应用等方面进行详细介绍。
酶标仪的原理酶标仪原理主要基于免疫学的“抗原-抗体”反应。
在酶标仪实验中，首先将待测物（如细菌、病毒、蛋白等）与特异性抗体结合，在固定的试剂盘或板上形成抗原抗体复合物。
然后，通过添加与抗体结合的酶标记物，例如酶标记的辣根过氧化酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP），使抗原抗体复合物与酶标记物进行特异性反应。
最后，通过加入底物使酶标记物发生催化反应，并转化为显色产物。
测量产物的光密度或发光强度，可以获得待测物的定量信息。
酶标仪的操作步骤酶标仪的操作步骤主要包括涂覆试样、孵育、洗涤、添加酶标物、孵育、洗涤和测定结果等几个主要过程。
1. 涂覆试样：将待测物（如蛋白、抗原、抗体等）溶液涂覆到微孔板上，通过静置或离心等方式将试样固定在孔底或表面。
2. 孵育：将标样或样品加入微孔板中，与已固定的待测物结合形成复合物，保温孵育一段时间，使反应充分发生。
3. 洗涤：通过加入缓冲液，用洗涤机或离心等方式清洗微孔板，去除未结合的物质，如杂质、底物残留等。
4. 添加酶标物：将酶标记的抗体或物质加入微孔板孵育，将其与已结合的待测物发生特异性反应。
5. 孵育：保温孵育一段时间，使反应充分发展。
6. 洗涤：通过加入缓冲液，用洗涤机或离心等方式清洗微孔板，去除未结合的物质。
7. 测定结果：加入合适的底物，使酶标记物发生催化反应，形成显色产物。
通过酶标仪测量光密度或发光强度，根据标准曲线或对照组数据计算出待测物的浓度。
酶标仪的应用酶标仪在医学诊断、生物学研究等领域具有广泛应用。
1. 医学诊断：酶标仪可用于检测特定抗体或抗原，例如检测病毒感染、肿瘤标志物、自身免疫疾病等。
通过测定样品中特定物质的浓度，可以帮助医生进行病情判断、疾病诊断和疗效评估。
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪工作原理及使用方法酶标仪简介：酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理：酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪 化学发光 荧光
酶标仪化学发光荧光
酶标仪是一种用于检测生物分子的分析仪器，主要应用于生物化学、免疫学、分子生物学等领域。
它可以通过检测光吸收、荧光或化学发光等信号，对样本中的生物分子进行定量或定性分析。
在酶标仪的检测方法中，光吸收、荧光和化学发光是三种常见的检测模式。
光吸收检测是基于物质对光的吸收特性来进行分析的。
在酶标仪中，通过使用特定波长的光照射样本，并检测透过或反射的光强度，可以测量样本中生物分子的浓度或活性。
荧光检测则是利用物质在受到激发光照射后发出的荧光信号来进行分析。
荧光检测具有较高的灵敏度和选择性，常用于检测标记有荧光染料的生物分子。
化学发光检测是基于某些化学反应产生的光发射现象来进行分析的。
在酶标仪中，通过引发化学反应并检测产生的光信号，可以测量样本中特定生物分子的浓度或活性。
这些检测模式各有特点和应用范围，根据不同的实验需求和生物分子的特性，可以选择合适的检测模式进行分析。
酶标仪的应用非常广泛，包括蛋白质定量、DNA/RNA 定量、酶活性检测、药物筛选、免疫学分析等。
它为生物研究、药物开发和临床诊断提供了重要的分析工具。
总的来说，酶标仪结合不同的检测模式，为生物分子的检测和分析提供了高灵敏度、高准确性和高效率的方法，对于生物科学和医学领域的研究和应用具有重要意义。
酶标仪的原理及应用实验
酶标仪的原理及应用实验酶标仪的原理酶标仪是一种用于检测酶活性的实验仪器，原理是通过测量底物的反应产物与酶反应所生成的物质的量的比例，从而确定酶活性的强度。
它主要由光源、检测系统、温控系统和数据分析软件等组成。
光源酶标仪的光源通常是白炽灯或氙灯，其特点是亮度高、颜色均匀，并且能够提供稳定的光源。
光源的光波长范围决定了酶标仪的检测范围。
检测系统酶标仪的检测系统通常由光电检测器和滤光片组成。
光电检测器可以将光信号转换为电信号，常用的有光电二极管和光电倍增管。
滤光片用于选择特定波长的光信号，以消除其他干扰信号。
温控系统酶标仪的温控系统用于维持反应体系的温度稳定。
通常采用Peltier元件来控制温度，可以在较短的时间内快速升温或降温。
温控系统的稳定性对于酶标仪的实验结果至关重要。
数据分析软件酶标仪通常配备了专业的数据分析软件，可以对实验结果进行处理和分析。
这些软件可以进行数据的图形化显示、数据的导出和保存等功能，方便用户对实验结果进行进一步的研究和分析。
酶标仪的应用实验酶标仪在生物医学领域有着广泛的应用，可以用于检测酶活性、蛋白质含量、抗体浓度等各种实验。
酶活性检测酶标仪可以通过测量酶催化反应产物的浓度来确定酶活性的强度。
常见的酶活性检测实验包括酶动力学研究、酶抑制剂筛选等。
蛋白质含量检测酶标仪可以通过测量蛋白质与染色剂的反应产物的光吸收值来确定蛋白质的含量。
这种方法被广泛应用于蛋白质定量、蛋白质纯化等实验。
抗体浓度检测酶标仪可以通过测量抗体与抗原结合产生的信号强度来确定抗体的浓度。
这种方法被广泛应用于免疫学研究、疫苗开发等实验。
其他应用除了酶活性、蛋白质含量和抗体浓度检测外，酶标仪还可以用于DNA浓度检测、细胞增殖实验、荧光标记实验等多种实验。
酶标仪实验的步骤1.准备实验材料，包括底物、酶、抗体等。
2.设置酶标仪的参数，如波长、温度等。
3.加入适量的底物和酶或抗体到反应体系中。
4.将反应体系放入酶标仪中，启动实验。
酶标仪使用详解范文
酶标仪使用详解范文酶标仪是一种常见的实验仪器，用于检测生物样本中特定分子的浓度。
它广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。
本文将详细介绍酶标仪的使用方法及注意事项。
一、酶标仪的基本原理酶标仪是通过光学测量来确定样本中特定分子浓度的仪器。
其工作原理是利用底物与酶的反应产生的物质颜色变化来测定样品中酶活性或者其中一种特定分子的浓度。
酶标仪通过测量底物产生的吸光度或荧光来确定管内样本中特定分子的浓度。
二、酶标仪的使用步骤1.准备工作：首先打开酶标仪电源，等待其预热。
然后根据需要选择合适的检测模式，如吸光度或荧光模式。
2.设定参数：按照实验要求，设定酶标仪的参数，包括波长、时间和增益等，这些参数取决于所使用的底物和样品类型。
通常需要根据实验所需设定不同的参数。
3.校准仪器：在进行测量之前，需要对酶标仪进行校准，以确保测量结果的准确性。
校准一般分为零点校准和标准曲线校准两个步骤。
零点校准是将酶标仪的读数归零，标准曲线校准则是使用已知浓度的标准样品制作标准曲线，以便后续测量时根据标准曲线确定待测样品中的物质浓度。
4.加样测量：用自动吸管器或移液器将样品加入酶标仪中，确保每个孔都有足够的样品进行测量。
加样完成后，将酶标板或孔板插入酶标仪的样品槽内，等待测量结果。
5.数据处理：酶标仪会自动测量各个孔的吸光度或荧光值，并将结果显示在仪器屏幕上。
根据实验要求，将数据导出并进行数据处理，如制作标准曲线、计算浓度等。
三、酶标仪使用注意事项1.酶标仪是一种精密仪器，使用前需仔细阅读使用说明书，并按照操作步骤进行操作。
2.操作时要注意保持操作平台的清洁和无尘，避免杂质对测量结果的影响。
3.底物的选取应根据实验目的和样品特性进行选择，不同底物对于不同物质浓度的测定有其特定的敏感性和检测范围。
4.样品的加入量需要根据实验要求准确控制，加样时尽量避免泡沫的产生。
5.酶标仪在校准时需要使用标准样品，为确保准确性应使用不同浓度的标准样品制作标准曲线。
酶标仪功能
酶标仪功能酶标仪（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，简称ELISA）是一种常用的实验技术，用于检测和测量生物样品中特定分子的存在和量。
它结合了酶学和免疫学原理，可以快速、敏感地检测蛋白质、抗体、细胞因子等分子。
酶标仪的主要功能如下：1. 定量分析：酶标仪可以精确地测量样品中特定分子的浓度。
通过与标准曲线比较，可以确定未知样品中分子的浓度。
这种定量分析可以用于医学诊断、药物监测、生物研究等领域。
2. 高灵敏度：酶标仪具有高灵敏度，可以检测到非常低浓度的分子。
这对于检测稀有蛋白质或低丰度的生物标志物非常重要，比如早期癌症标志物、病毒抗体等。
3. 特异性检测：酶标仪可以检测特定的分子，具有很高的特异性。
这是由于ELISA采用了免疫反应，通过特异性反应的抗体与目标分子结合，从而实现准确的检测。
4. 广泛应用：酶标仪可以应用于多个领域，如医学、生物学、环境检测等。
在医学上，ELISA可用于检测传染病（如HIV、肝炎等）、癌症标志物、自身免疫疾病等。
在生物学研究中，ELISA可用于检测细胞因子、蛋白质互作等。
5. 高通量检测：现代酶标仪具有高通量检测的能力，可以同时处理多个样品。
这大大加快了实验速度，提高了效率。
6. 简便易行：ELISA技术相对简单易行，不需要复杂的设备和操作。
只需将样品加入酶标板中，与特异性抗体结合，然后用荧光或酶底物反应来检测。
综上所述，酶标仪是一种功能强大的实验工具，广泛应用于科学研究和临床诊断。
它通过定量分析、高灵敏度、特异性检测等功能，可以快速、准确地测量生物样品中的特定分子。
这不仅对于疾病的早期检测和诊断具有重要意义，也在科研领域提供了有力的支持。
随着技术的不断进步，相信酶标仪的功能将会不断拓展和完善，为科学研究和医学诊断提供更多的帮助。
酶标仪的使用方法和注意事项
酶标仪的使用方法和注意事项一、酶标仪的基本介绍酶标仪是一种用于定量分析的仪器，可以测定生物样品中的蛋白质、核酸等生物分子的浓度。
其原理是利用特定酶促反应，将待测物质转化为可检测的产物，并通过光学方法进行测定。
二、酶标仪的使用前准备1.检查设备：在使用前，需要检查设备是否正常工作。
首先，检查电源线是否牢固连接；其次，检查光源和探测器是否干净无污染；最后，打开电源开关进行预热。
2.准备样品：根据实验需要，准备好待测样品，并按照实验方案进行处理。
3.调节波长：根据实验需要，选择合适的波长进行测量。
通常情况下，选择与产物吸光度最大值相对应的波长进行测量。
三、操作步骤1.打开软件：将电脑与酶标仪连接，并打开相应软件。
2.设置参数：在软件界面上设置相关参数，如波长、板型、样品类型等。
3.加入标准曲线：根据实验需要，在板子上加入标准曲线，通常选择不同浓度的标准品进行加入。
4.加入样品：将处理好的样品加入板子中，并记录每个孔的位置和名称。
5.开始测量：将板子放入酶标仪中，并按照软件提示操作，开始测量。
6.保存数据：测量完成后，将数据保存在电脑中，并进行必要的数据分析和处理。
四、注意事项1.保持清洁：在使用酶标仪前后，需要保持仪器和实验环境的清洁。
特别是光源和探测器等灵敏部件，需要定期清洗和消毒。
2.注意波长选择：选择合适的波长进行测量非常重要。
如果波长选择不当，可能会影响到测量结果的准确性。
3.注意样品稀释：如果样品过于稠密或者杂质过多，可能会影响到反应效果。
因此，在进行酶标实验前，需要对样品进行必要的稀释或者纯化处理。
4.注意安全操作：在使用酶标仪时，需要注意安全操作。
尤其是涉及到有毒有害物质时，需要采取必要的防护措施。
5.注意数据分析：在完成实验后，需要对数据进行必要的分析和处理。
特别是需要注意数据的可靠性和可重复性。
五、总结酶标仪是一种非常重要的实验仪器，可以用于定量分析生物样品中的各种生物分子。
在使用酶标仪时，需要注意设备维护、样品处理、波长选择等方面的问题，以确保实验结果的准确性和可靠性。
酶标仪的原理应用
酶标仪的原理应用1. 酶标仪的原理酶标仪是一种用于测定酶活性的仪器，它基于酶的特异性反应原理进行操作。
下面是酶标仪的原理：•酶的特异性反应酶是一种生物催化剂，可以加速生物体内化学反应的速率。
它具有高度的特异性，只能与特定的底物结合，并催化其转化为产物。
•酶标仪的工作原理酶标仪的工作原理基于酶底物与底物之间的特异性反应。
具体步骤如下：1.首先，将待测样本添加到酶标仪中的反应孔中。
2.酶标仪通过自动混匀系统，将酶底物和底物与待测样本充分混合。
3.然后，酶底物与底物发生特异性反应，酶催化底物转化为产物。
4.酶标仪通过检测系统，监测底物或产物的吸光度或荧光强度的变化。
5.最后，根据吸光度或荧光强度的变化，酶标仪计算出待测样本中酶的活性。
2. 酶标仪的应用酶标仪具有广泛的应用领域，以下是酶标仪的常见应用：•生物医学研究酶标仪在生物医学研究中起着重要的作用。
它可以用于：–酶活性的测定：酶标仪可以测定细胞或组织中特定酶的活性，从而评估生物体内某一特定过程的变化。
–蛋白质测定：酶标仪可以用于测定样品中的蛋白质浓度，用于研究蛋白质的表达与功能。
–免疫学研究：酶标仪可以用于检测抗体与抗原的相互作用，从而评估免疫反应的强度和特异性。
•临床诊断酶标仪在临床诊断中被广泛应用。
它可以用于：–病毒检测：酶标仪可以检测体液中的病毒抗体或病毒核酸，用于判断感染的病毒种类和程度。
–药物浓度测定：酶标仪可以测定药物在体液中的浓度，用于判断药物的疗效和安全性。
–癌症标志物检测：酶标仪可以检测体液中的癌症标志物，用于早期发现和诊断癌症。
•食品安全检测酶标仪在食品安全检测中起着重要的作用。
它可以用于：–食品中毒素检测：酶标仪可以检测食品中的各种毒素，用于判断食品的安全性。
–食品成分检测：酶标仪可以测定食品中的营养成分或添加剂，用于评估食品的品质。
–食品标签检测：酶标仪可以检测食品中的标签成分，用于确认食品是否符合标签说明。
3. 酶标仪的优势酶标仪相比传统的方法具有以下优势：•高灵敏度酶标仪可以测定低浓度的分子，具有高灵敏度，能够检测微量的样品。
酶标仪使用详解
CutOff公式
NC*2.1
控制界面
酶标板
酶标板
组成
酶标板是由12*8个孔组成的，每一个孔可以理 解为一个标本。每一板中还需要设置和阳性公 式相关的孔阳性、阴性、空白等。
酶标项目
每一行可以设置一个酶标项目（下拉方式）， 可以设置为单板单项和单板多项。
MK3
PC
P 测量 测量结果
MK3
练习
按要求建立酶标项目。（见练习文档提纲 十）
酶标板项目设置
单板单项
一个酶标标只有一个项目，常用于标本量比较 大的时候。
单板多项
一块板可以做多个项目，注意项目是横向排列 的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性 阳性孔。
工作流程
PC
R 连接仪器 OK
MK3
PC
F2 设置波长 OK
MK3
PC
X1 振板频率 OK
MK3
PC
30 振板时间 OK
酶标仪使用详解
工作原理
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测 被测物的吸光值。在特定波长下测定每一 种物质都有其特定的波长，在此波长下， 此物质能够吸收最多的光能量。如果选择 其它的波长段，就会造成检测结果的不准 确。因此，在测定检测物时，我们选择特 定的波长进行检测，称为测量波长。注意 这里提出了两个关键概念OD值（吸光值） 和波长。
酶标板
每一个孔代表可以设置的含意
普通(纯数字) = 标本号 空白孔=(BC+N) 阴性孔=(NC+N) 阳性孔=(PC+N) 质控孔=(QC+N)
酶标板
空白对照=(BC1+BC2+BC3…)/N
酶标仪的使用方法和实验操作技巧
酶标仪的使用方法和实验操作技巧酶标仪（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是一种广泛应用于生物学领域的分析方法，能够对特定抗原或抗体进行灵敏、快速的检测。
本文将介绍酶标仪的使用方法和实验操作技巧，帮助读者更好地了解和应用这一技术。
一、酶标仪的基本原理酶标仪基于酶的催化作用来检测分子的存在。
其基本原理是将待测分子与特异性抗体结合，在酶标记抗体的作用下，通过酶反应产生可视化的信号。
常见的酶标记包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP），通过其催化底物的转化，可以得到颜色或荧光信号。
二、酶标仪的使用步骤1. 酶标仪的预热和设置在开始实验前，酶标仪需要预热至合适的温度，并设置所需的波长和光强。
一般情况下，450 nm的波长被广泛应用于酶标仪实验。
2. 样品制备和反应板处理样品的制备包括对待测物体的收集、处理和提取。
蛋白质的浓度测定、稀释和标准曲线的制作也属于这一步骤。
反应板则需根据实验设计选择合适的板型并进行预处理，如洗涤、孵育等。
3. 样品的加样和反应将待测样品、标准品和对照加入准备好的反应孔中，控制好反应时间并按照实验要求进行孵育。
注意避免交叉污染和误操作。
4. 反应终止和底物加入根据实验需要，在合适的时间点将反应终止剂加入反应孔中，阻断酶反应的进行。
接着，加入合适的底物，使颜色或荧光信号表现出来。
5. 数据采集和分析使用酶标仪读取反应孔中的信号，记录吸光度或荧光强度数值。
根据实验设计，采集所需的数据并进行统计和分析，包括标准曲线的拟合、样品浓度的计算等。
三、实验操作技巧1. 严格遵循操作规程在操作酶标仪时，必须遵循严格的操作规程，包括个人防护、培训和实验室安全等。
遵循实验设计、正确操作仪器设备，确保实验的准确性和重复性。
2. 反应条件的优化反应时间、反应温度和底物浓度等条件的优化对于获得准确、灵敏的结果至关重要。
通过试验调整这些条件，找到最佳工作范围，提高实验结果的可靠性。
酶标仪的分类
酶标仪的分类酶标仪是一种常见的生物化学检测仪器，用来检测样品中的特定蛋白质分子含量或酶反应活性。
根据其检测原理和应用领域的不同，酶标仪可以被分为多种不同类型。
在本文中，我们将讨论酶标仪的分类及其主要特点和应用。
1. 吸光度酶标仪吸光度酶标仪是一种基于分子吸收现象的检测仪器。
该仪器通过测量样品在特定波长下的吸光度来确定其中特定蛋白质或酶反应产物的浓度。
吸光度酶标仪通常使用紫外线或可见光谱的波长范围进行测量，有时也会同时使用不同的波长范围以得到更加精确的测量结果。
吸光度酶标仪广泛应用于生物化学和分子生物学领域中的酶活性检测、蛋白质定量、酸碱度测量等范畴。
2. 荧光酶标仪荧光酶标仪是一种基于分子荧光现象的检测仪器。
该仪器通过激发样品中的特定荧光染料，测量其在不同波长下的荧光强度来确定相应的蛋白质或酶反应产物的浓度或活性。
荧光酶标仪通常使用多个不同波长的激发光源和荧光探测器，以提高测量灵敏度和特异性。
荧光酶标仪广泛用于生物学、临床医学、环境科学和食品安全监测中的DNA、RNA、蛋白质等分子的检测和定量。
3. 酶联免疫吸附测定仪（ELISA）酶联免疫吸附测定仪是一种根据抗原抗体反应的原理，测定样品中特定抗原或抗体浓度的仪器。
该仪器通过将样品加入特定的抗原或抗体固相载体（如微孔板），与标记了特定酶的抗体或抗原反应，并通过酶标记化学物质反应产生颜色变化来检测。
酶联免疫吸附测定仪广泛应用于生物医学、兽医学、环境监测和食品安全监测等领域中。
4. 电化学酶标仪电化学酶标仪是一种基于电化学信号的检测仪器。
该仪器将样品中的酶产物或底物转化为电化学信号，并测定其电化学响应的强度和方向来确定其浓度或反应活性。
电化学酶标仪通常适用于测量电子游离的小分子，如氧气、硫化氢和甲烷等气体，以及电子转移的酶反应，如葡萄糖氧化酶、乳酸脱氢酶等。
电化学酶标仪在环境检测、生物燃料电池和生产化学品等领域具有潜在应用前景。
总之，不同类型的酶标仪在不同的生物化学检测领域中发挥着不同的作用。
酶标仪工作原理及应用领域
酶标仪工作原理及应用领域酶标仪是一种常用的生物化学实验仪器，用于检测和测定生物样品中的特定物质。
它的工作原理基于酶的特异性反应，通过酶反应的底物与辅助物质的相互作用，产生颜色变化或发光来测定样品中特定物质的存在量。
酶标仪的工作原理基于酶的底物与辅助物质的相互作用，而这些底物和辅助物质通常是与酶的底物或酶反应产物结合并进一步转化为可测量信号的物质。
根据测定的特定物质不同，酶标仪可以使用各种不同的底物和辅助物质。
常见的酶标方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、辣根过氧化物酶标记法(HRP法)和碱性磷酸酶法(AP法)等。
在酶标仪的运行过程中，需要将待测样品加入含有酶反应物的孔板中，然后将孔板放入酶标仪中进行反应。
酶标仪通过内置的光学系统检测样品中的光学信号，并通过内部计算机系统进行信号分析和浓度计算，最终给出待测物质的浓度或存在量。
酶标仪的测量结果通常以定量浓度或阳性/阴性判断等形式呈现出来。
酶标仪的应用领域非常广泛。
在生物医学研究中，酶标仪可以用于疾病的诊断和预后评估。
例如，ELISA可以检测血清中的某种抗体或抗原，用于检测各种传染病、自身免疫性疾病等。
酶标仪还能够检测肿瘤标志物和生物分子，用于肿瘤筛查和早期诊断。
此外，酶标仪在药物研发、食品安全、环境污染检测等领域也有重要的应用。
酶标仪还可以用于学术研究，如蛋白质与蛋白质相互作用的研究和酶动力学的测定等。
总之，酶标仪通过酶的特异性反应原理，结合光学检测系统和计算机模型，可以准确、快速地监测和测定生物样品中的特定物质。
其应用领域广泛，包括医学诊断、药物研发、食品安全和环境监测等。
随着科技的发展和应用需求的增加，酶标仪的性能和功能也将不断提高，为科学研究和生物医学领域的进展做出更大的贡献。
酶标仪的原理及应用
酶标仪的原理及应用引言酶标仪是一种常用的实验仪器，用于测定化学反应中酶的活性和浓度。
它主要通过测量酶与底物反应产生的颜色变化来进行分析，具有灵敏、准确和高通量的特点，被广泛应用于生物医药、食品安全和环境监测等领域。
本文将介绍酶标仪的基本原理和应用。
一、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理可以分为三个步骤：底物反应、产物检测和数据分析。
1. 底物反应在底物反应阶段，酶和底物发生特定的化学反应，并产生反应产物。
这个化学反应的速率与酶的活性和浓度成正比。
2. 产物检测产物检测是酶标仪的核心步骤，它可以通过光学或电化学方法来量化产物的信号。
常用的光学方法包括吸光度法、荧光法和发光法。
其中，吸光度法是酶标法最常用的方法，通过测量反应溶液的吸光度来确定产物的浓度。
荧光法和发光法则利用反应产物的荧光或发光信号进行定量测定。
3. 数据分析数据分析是酶标仪实验的最后一步，它包括对产物信号的定量测定和数据处理。
常见的数据处理方法包括计算标准曲线、计算酶活性和浓度、绘制图表等。
二、酶标仪的应用酶标仪作为一种常用的实验仪器，在生物医药、食品安全和环境监测等领域有着广泛的应用。
1. 生物医药酶标仪在生物医药领域广泛应用于生物标志物的检测和药物研发。
例如，它可以用于测定血中肿瘤标志物、酶活性和蛋白质浓度，从而实现早期癌症诊断和药物疗效评估。
2. 食品安全酶标仪在食品安全领域用于检测食品中的有害物质和微生物污染。
例如，它可以用于测定食品中的农药残留、重金属含量和细菌水平，以确保食品的安全性。
3. 环境监测酶标仪在环境监测领域用于检测水质和大气污染物。
例如，它可以用于测定水中的重金属、有机物和微生物，以及大气中的颗粒物和气体成分。
4. 其他领域除了上述应用领域，酶标仪还可以应用于植物病害诊断、生物燃料生产和药物筛选等领域。
结论酶标仪是一种重要的实验仪器，它通过测量酶与底物反应产生的信号来分析酶的活性和浓度。
酶标仪的应用范围广泛，可以在生物医药、食品安全和环境监测等领域发挥重要作用。
酶标仪的常见功能
酶标仪的常见功能
酶标仪是一种常用的实验仪器，主要用于酶标的相关实验和分析。
以下是酶标仪的一些常见功能：
1. 光吸收测定：酶标仪能够测定不同物质在不同波长的光吸收情况。
这对于测定酶促反应产生的色素变化等非荧光信号很有帮助。
2. 荧光测定：酶标仪可用于测定与荧光染料反应产生的荧光信号。
这对于测量荧光染料标记的分子数量、监测细胞内活性小分子的浓度等非荧光信号很有帮助。
3. 发光测定：酶标仪能测定与化学荧光染料或发光底物反应产生的发光信号。
这适用于较低浓度的目标分子检测福利使用，以及对活性分子的连续监测和定量分析。
4. 温度控制：酶标仪可以通过内置或外接的温度控制系统对样品进行恒温控制。
这对于温度敏感性酶的活性保持很重要。
5. 吸光度校正：酶标仪可以进行吸光度校正，确保测量的准确性和精确性。
6. 数据处理和分析：酶标仪通常配备有自动数据处理和分析功能，包括曲线拟合、数据萃取、浓度计算等，简化实验操作，并提供实验结果的可视化和统计分析。
7. 多通道检测：一些酶标仪具有多个独立的检测通道，可以同
时测量多个样品，提高实验效率。
8. 自动化操作：高级酶标仪还具有自动操作功能，如自动吸孔板加载、液体的自动加样等，使实验操作更加方便和高效。
总之，酶标仪具有多种功能，可以广泛应用于酶标实验、分析和检测等领域，帮助研究人员获得准确、可重复的实验结果。
酶标仪工作原理
酶标仪工作原理一、引言酶标仪（ELISA）是一种常用的实验技术，用于检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。
它的工作原理基于酶的催化作用和免疫学原理，具有高灵敏度和高特异性的特点。
本文将介绍酶标仪的工作原理，包括直接法、间接法、竞争法和间接酶标法。
二、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理是利用酶作为信号放大器，将检测目标物与酶标记的抗体或抗原结合，通过酶的催化作用产生可定量测量的信号。
通常，酶标仪使用底物和显色剂来测量酶的活性或产生的产物，并将其与目标物的浓度相关联。
三、直接法直接法是酶标仪中最简单的方法之一。
它利用酶标记的抗体直接与目标物结合。
首先，在酶标板的孔中涂覆待测物质，然后加入酶标记的抗体。
如果目标物存在，酶标记的抗体将与其结合。
接下来，通过加入底物和显色剂，测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成正比。
四、间接法间接法是酶标仪中最常用的方法之一。
它利用酶标记的二抗与目标物结合。
首先，在酶标板的孔中涂覆待测物质，然后加入一抗。
一抗与目标物结合后，再加入酶标记的二抗。
二抗与一抗结合形成免疫复合物。
最后，通过加入底物和显色剂，测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成正比。
五、竞争法竞争法是酶标仪中用于测定抗原或抗体浓度的常用方法。
首先，在酶标板的孔中涂覆固定浓度的抗原或抗体，然后加入酶标记的抗原或抗体样品。
如果样品中含有目标物，它将竞争性地与固定在酶标板上的抗原或抗体结合。
接下来，通过加入底物和显色剂，测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成反比。
六、间接酶标法间接酶标法是酶标仪中用于检测抗体的常用方法。
首先，在酶标板的孔中涂覆待测物质，然后加入抗原。
抗原与待测物质结合后，再加入酶标记的抗体。
酶标记的抗体与抗原结合形成免疫复合物。
最后，通过加入底物和显色剂，测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与待测物质的浓度成正比。
七、总结酶标仪是一种常用的实验技术，通过利用酶的催化作用和免疫学原理，可以检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。
酶标仪的应用(综述)
酶标仪的应用摘要：自七十年代酶标法提出以来，经过不断地发展现已成为检验某些指标的主要方法，与此同时，作为专用于微孔板比色的酶标仪也获得了很大的发展。
本文主要从血液检验、农业、食品安全、微生物学等方面来简述酶标仪在当今时代的应用与其所发挥的重要作用。
并简述酶标仪室内质量控制。
关键词：酶标仪、酶联免疫吸附试验、血液检验、室内质控、丙氨酸氨基酸轻移酶、伏马菌素0 引言酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA) 简称酶标法，是标记技术中的一种，从荧光抗体技术、同位素免疫技术发展而来的一种敏感、特异、快速且自动化的现代技术。
酶联免疫吸附试验自七十年代初提出以来，由于其操作简便，灵敏度高，特异性强，试剂保存时间长，对环境污染小等特点广泛应用于各种生物化学物质的免疫测定。
现已成为各医院、血站、卫生防疫站检验科的检验乙肝、丙肝、艾滋病抗体的主要方法。
与此同时，作为专用于微孔板比色的酶标仪，得到了很大发展，产品种类齐全，型号多样，各有特色，目前国内市场上销售的酶标仪已摆脱原来的单孔测量方式，整板测量、定性定量计算、存贮、多种报告格式、滤光片自动转换等已成为基本的、必备的功能。
各种新推出的酶标仪性能日益完善，功能不断扩充，具体表现在测量高速化、宽吸光度范围、扩展到紫外、具有温育功能、具有动力学检测功能[1]。
1 酶标仪在血液检验上的应用目前在国内血站临床试验室中，酶联免疫吸附试验已成为最主要的免疫测定技术，由于大部分ELISA最后以比色测定，使酶标仪成其它各类型酶标仪为ELISA测定的重要工具。
八十年代初，当酶免疫测定技术从国外引进时，基本上均使用肉眼判断结果，难以满足临床测定要求。
目前国内医院和血站实验室所使用的酶标仪绝大部分为进口仪器，品种型号多达数十种。
软件功能是酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶动力学、紫外、凝集等的统计分析并报告结果的功能，是判断酶标仪质量的一个指标。
酶标仪研究报告
酶标仪研究报告引言酶标仪是一种广泛应用于生物化学和分子生物学研究中的仪器。
它能够测量样品中的酶活性，并通过光学检测方法分析反应结果。
本报告将全面探讨酶标仪的原理、应用和前景，以期为相关研究人员提供有价值的参考。
酶标仪的原理酶标仪基于酶的高度特异性反应原理，通过检测样品中的酶活性来定量分析感兴趣的分子或物质。
其原理主要包括以下几个方面：1. 酶底物反应首先，酶底物与样品中的酶发生特异性反应，产生一个新的化合物。
2. 底物检测接下来，酶标仪使用特定的物理或化学方法检测底物变化的量，如颜色、荧光或发光。
3. 光学测量酶标仪将底物变化量与标准曲线进行比较，通过光学测量来确定底物浓度或酶活性。
酶标仪的应用酶标仪在医学、生物学和药学领域有着广泛的应用。
以下是几个酶标仪应用的示例：1. 免疫分析酶标仪可以用于检测体液中的特定抗原或抗体。
通过结合特定的抗原-抗体反应和底物检测，可以快速、准确地确定抗体或抗原的浓度。
2. DNA测序对于DNA测序中的特定序列，酶标仪可以用于检测对应的碱基或测量PCR扩增产物的浓度。
这有助于研究基因组学、疾病诊断和药物开发领域。
3. 细胞生物学酶标仪可以用于测量细胞增殖、凋亡和代谢活性。
通过检测细胞中的特定酶活性，可以了解细胞的功能状态。
4. 环境监测酶标仪可以用于检测水、土壤和空气中的有毒物质。
通过测量特定酶的活性，可以快速判断环境中是否存在污染物，并评估其浓度。
酶标仪的前景随着生物技术和分子生物学的不断发展，酶标仪在科学研究、临床医学和环境保护等领域的需求也在不断增加。
以下是酶标仪未来的发展前景：1. 创新技术酶标仪领域正在积极探索新的检测技术，如荧光探针、纳米颗粒标记和微流控技术。
这些技术的应用将极大地提高酶标仪的灵敏度和准确性。
2. 自动化和高通量随着自动化技术的进步，酶标仪的操作将更加简便和高效。
高通量酶标仪的出现将使大规模样品分析成为可能，加快研究进程。
3. 多功能性未来的酶标仪将具有更多功能，如多重检测、实时监测和数据分析。
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细胞活力检测
细胞活性检测 – MTT、XTT法
• MTT-黄色染料 ↓被活体细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原 • 形成蓝紫色结晶-甲瓒 ↓DMSO溶解 检测OD570(OD630作为背景参照） 细胞质 线粒体 细胞核 cell
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最常见应用类型ELISA（酶联免疫吸附试验）实验
反应原理 阳性样品
阴性样品
加入底物
显色反应
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DNA、RNA或蛋白浓度检测
DNA双螺旋中碱基 蛋白质酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸成分含量
A = a*c*l a = 物质消光系数 c = 浓度 l= 光径（0.5mm或者1mm）
决定上 样体积
SMP软件自动给出 DNA浓度：OD260=1表示
50 µg/ml双链DNA(dsDNA)
DNA纯度：纯度计算(OD260/OD280)
21/02/2014
目前中国市场主要几个酶标仪厂家
产品线丰富（高中低，Multi-mode 11、Single-mode 9） 新产品推出速度快（Paradigm、I3+ MinMax 、I3+ Scanlater） 品牌知名度高、市场占有率大 MD主要竞争对手（Multi-mode 8、Single-mode 10） 新产品推出紧随MD（如Cytation3对应I3、Neo对应 Paradigm ） 产地瑞士、在欧洲及北美有较高知名度 （Multi-mode 3、Single-mode 3） 最近无新产品推出，进入中国较早，在东北地区用户较多 主要产品非酶标仪（Multi-mode 3、Single-mode 10） 最近无心产品推出 具有专利Alpha技术，但没有型号支持HTRF技术（认证） 主要产品非酶标仪（Multi-mode 4、Single-mode 2） 多功能酶标仪（覆盖全波长）仅一款VF，只有四功能 无最新产品问世
物质最佳吸收波长
不同物质有不同吸收峰，有些实验检测物质需要更宽的波长 范围
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全波长带来优势——ELISA不同颜色需不同波长 酶决定底物类型
碱性磷酸酶（AP） 常用底物：PNPP 405nm 特点：本底低，灵敏度高，较昂贵 辣根过氧化物酶(HRP) 底物：ABTS 410/650nm OPD 492nm TMB 450nm 特点：常用，灵敏度不如AP系统
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酶标仪能做什么？
凡是与光信号相关的实验、需要高通量、需要节省试 剂的实验 且可以转移到微孔板中液体物质 都可以考虑使用微孔板检测仪（酶标仪）进行信号检 测！
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Agenda
• 酶标仪工作原理及应用范围 • 光吸收检测技术原理及常见应用 • 荧光检测技术原理、分类及常见应用 • 化学分光技术检测原理及常见应用 • Alpha技术特点
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DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8
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酶活力分析
酶活性分析：就是指在一定条件下，通过连续 测定酶的吸光值，从而达到动态监测酶活性的 一个过程。
• 乳酸脱氢酶（ LDH ）活 性检测 • β-半乳糖苷酶检测 • 血清心肌酶活性检测 • 脱氢酶活性检测
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酶标仪常见技术和应用
尹迪
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酶标仪与分光光度计的不同？
1:通量上 支持6、12、24、48、96、384孔板，高端酶标仪 可达到3456孔板
2:功能上 单功能酶标仪（吸收光、荧光、化学发光） 多功能酶标仪
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酶标仪工作原理
• 工作原理为一台升级版的分光光度计
1.紫外可见分光光度计 2.可见分光光度计 3.紫外分光光度计 4.荧光分光光度计 5.近红外分光光度计 6.红外分光光度计 7.双光束紫外可见分光光度计 不同物质对 特点波长光 吸收值
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光吸收的基本检测类型
•应的产物产生的颜色变化（450nm） 酶联免疫吸附试验（ELISA）
• 浊度检测: 检测样品中微颗粒产生的光的散射 细菌的生长（600nm）
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光波长范围
多数低端单功能酶标仪光谱范围（400-750nm） 中、高端单功能或多功能光谱范围（200-1000nm）
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酶标仪——多功能微孔板读板机（仪）
学名：微孔读板机（仪） Microplate Reader 俗称：国内俗称酶标仪，因早期主要用于酶联免疫检 测（ELISA），故久之习称为酶标仪
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光吸收检测常见应用
利用光吸收原理最常见的几种生物学实验 DNA/RNA含量检测 常用于快速检测质粒DNA浓度 ELISA（酶联免疫吸附试验）检测 方法多（间接法、竞争法、双抗夹心法等）、应用广 细胞活力检测 MTT、XTT等 酶活动力学检测