2简单染色与革兰氏染色
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实验完毕后的处理
将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净： （1）先用脱脂棉将油镜头上的油擦去。 （2）用脱脂棉沾少许醇醚将镜头擦2—3次。 ）用脱脂棉沾少许醇醚将镜头擦2 （3）再用干净的脱脂棉将镜头擦2—3次。 ）再用干净的脱脂棉将镜头擦2 （4）注意擦镜头时向一个方向擦拭。
注意事项
1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度， 1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度， 革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色 时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性 菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多 少等因素的影响，难以严格规定。 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸 去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色 效果。 3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养 3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养 24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰 24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰 氏阳性菌转呈阴性反应。
简单染色与革兰氏染色
实验目的
学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法
实验原理
简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，简单染 色不能辨别细菌细胞的构造。 革兰氏染色法是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定 的。G 的。G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且 肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂 质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易 于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G 于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌 细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处 理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保 留初染时的紫色。
实验报告
实验过程 绘出简单染色观察的菌体形状 绘出枯草芽胞杆菌和大肠杆菌革兰氏染色 的结果 总结感想
实验器材
菌种： 苏云金芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌 液体培养12-16h的枯草芽胞杆菌和培养24h的大肠 液体培养12-16h的枯草芽胞杆菌和培养24h的大肠 杆菌 染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、蕃红、 染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、蕃红、 美蓝、醇醚、香柏油 器材：废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、 擦镜纸（脱脂棉）、显微镜
2 革兰氏染色： （1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同。 （2）晾干：与简单染色法相同。 （3）固定，与简单染色法相同 （4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上， 加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1 加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1 min。 min。 （5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （6）媒染：滴加碘液，媒染1 min。 ）媒染：滴加碘液，媒染1 min。
实验方法
1 简单染色： （4）染色：将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上， 加蕃红或美蓝染色1 2min。 加蕃红或美蓝染色1-2min。 （5）水洗：用水洗去涂片上的染色液 （6）干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸 吸干。 （7）镜检：先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的 视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴， 将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。
实验方法
1 简单染色： （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片上滴2滴蒸 ）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片上滴2 馏水，按无菌操作法取菌涂片，做成浓菌液。再取 干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑2 干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑2-3环涂在玻片 上。每个玻片可以涂样2 上。每个玻片可以涂样2-4个。注意取菌不要太多。 （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文 火烘干。 （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3 ）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2 次固定（以不烫手为宜）。
2 革兰氏染色： （7）水洗：用水洗去碘液。 （8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色30 s ）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色30 左右至流出液无色，立即水洗。 （9）复染：滴加蕃红复染2 min。 ）复染：滴加蕃红复染2 min。 （10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 （11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水 11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水 纸吸干。 （12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油 12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油 镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。
实验完毕后的处理
将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净： （1）先用脱脂棉将油镜头上的油擦去。 （2）用脱脂棉沾少许醇醚将镜头擦2—3次。 ）用脱脂棉沾少许醇醚将镜头擦2 （3）再用干净的脱脂棉将镜头擦2—3次。 ）再用干净的脱脂棉将镜头擦2 （4）注意擦镜头时向一个方向擦拭。
注意事项
1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度， 1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度， 革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色 时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性 菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多 少等因素的影响，难以严格规定。 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸 去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色 效果。 3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养 3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养 24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰 24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰 氏阳性菌转呈阴性反应。
简单染色与革兰氏染色
实验目的
学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法
实验原理
简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，简单染 色不能辨别细菌细胞的构造。 革兰氏染色法是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定 的。G 的。G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且 肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂 质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易 于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G 于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌 细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处 理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保 留初染时的紫色。
实验报告
实验过程 绘出简单染色观察的菌体形状 绘出枯草芽胞杆菌和大肠杆菌革兰氏染色 的结果 总结感想
实验器材
菌种： 苏云金芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌 液体培养12-16h的枯草芽胞杆菌和培养24h的大肠 液体培养12-16h的枯草芽胞杆菌和培养24h的大肠 杆菌 染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、蕃红、 染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、蕃红、 美蓝、醇醚、香柏油 器材：废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、 擦镜纸（脱脂棉）、显微镜
2 革兰氏染色： （1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同。 （2）晾干：与简单染色法相同。 （3）固定，与简单染色法相同 （4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上， 加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1 加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1 min。 min。 （5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （6）媒染：滴加碘液，媒染1 min。 ）媒染：滴加碘液，媒染1 min。
实验方法
1 简单染色： （4）染色：将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上， 加蕃红或美蓝染色1 2min。 加蕃红或美蓝染色1-2min。 （5）水洗：用水洗去涂片上的染色液 （6）干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸 吸干。 （7）镜检：先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的 视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴， 将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。
实验方法
1 简单染色： （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片上滴2滴蒸 ）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片上滴2 馏水，按无菌操作法取菌涂片，做成浓菌液。再取 干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑2 干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑2-3环涂在玻片 上。每个玻片可以涂样2 上。每个玻片可以涂样2-4个。注意取菌不要太多。 （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文 火烘干。 （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3 ）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2 次固定（以不烫手为宜）。
2 革兰氏染色： （7）水洗：用水洗去碘液。 （8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色30 s ）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色30 左右至流出液无色，立即水洗。 （9）复染：滴加蕃红复染2 min。 ）复染：滴加蕃红复染2 min。 （10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 （11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水 11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水 纸吸干。 （12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油 12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油 镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。