结核病防治实验室痰检工作——第一讲痰涂片镜检.
结核杆菌痰涂片镜检的意义及其应注意的问题需知
结核杆菌痰涂片镜检的意义及其应注意的问题需知结核杆菌，是人类结核病的病原菌。
结核杆菌是专性需氧菌，无鞭毛，有荚膜，没有运动能力，典型的结核杆菌的形态为细长稍弯曲或直的、两端圆钝的杆菌，长1μm～4μm，宽0.3μm～0.6μm。
痰涂片经过抗酸染色阳性的标本，在100倍的生物显微镜下可在蓝色背景下看到紫红色的杆状菌，呈单个散在，有时也呈X、Y形或条索状、聚集成簇等。
痰涂片经金胺“O”染液染色后，在含有紫外光源的荧光显微镜下发出橘黄颜色，高倍镜（物镜40倍目镜10倍）下，可见结核杆菌产生黄绿色荧光，呈杆状或分枝状。
目前基层实验室多采用抗酸染色镜检。
（一）结核杆菌痰涂片镜检的意义1.诊断传染性肺结核结核病的控制是以发现和控制传染源为主，而痰涂片镜检阳性的肺结核患者是社会上最主要的传染源，故痰涂片镜检结果对诊断传染性肺结核具有重要意义。
2.评价化疗效果结核病是由结核杆菌引起的，针对结核病的治疗，现行化疗方案的制定也主要是以结核杆菌的生物学特性为依据，所以痰涂片镜检结果可以作为化疗效果的评估依据。
1.为流行病学疫情评价服务由于传染性肺结核在流行病学中有着特殊的意义，因此，涂阳患病率、涂阳发现率是反映某一国家或地区结核病疫情的严重程度的重要指标。
根据世界卫生组织（WHO)和国际防痨及肺部疾病联合会（UNION）针对低收入且结核病疫情严重的发展中国家所制定的技术指南，痰涂片镜检是相应国家开展结核病控制项目时非常符合成本效益原则的细菌学试验技术。
相对于临床和实验室经常采用的其他诊断和检查项目，高质量的痰涂片镜检有其自身特殊的优势：作为诊断手段，对传染性肺结核的诊断比X线的准确性高；技术相对简单，操作容易标准化；建立结核杆菌检查室设备投入少；检查成本低，易于接受；从收到标本到报告结果的时间短，能够满足临床诊断的需要；对涂阳患者的治疗效果，能够作出及时和准确的评价。
（二）结核杆菌痰涂片镜检应注意的问题1.实验室布局原则结核杆菌检查需要有独立的实验室，不能和其他实验室混用；染液配置、镜检等相对洁净的操作与标本存储、涂片、染色等污染操作要有独立分开的场所，最好分别在专用的房间进行，中间通过传递窗连接；基层实验室若只从事涂片镜检的，在只拥有一间独立房舍的情况下，相对洁净区与污染区也要有明显区分。
对肺结核痰涂片镜检中若干问题的探讨
对肺结核痰涂片镜检中若干问题的探讨摘要：随着卫十项目的全面启动，dots策略在全国范围内的实施，痰涂镜检成了发现肺结核传染源、实施化疗方案、评价化疗效果以及其流行病学与防治措施上的重中之重。
为进一步规范痰检工作，提高痰检质量，国家卫生部疾病控制司发布了一系列与肺结核防治规划有关的痰检方法，还专门出台了《中国结核病防治规划痰涂片镜检质量保证手册》（以下简称《手册》）。
笔者作为痰检人员，在执行和使用该书的同时，查阅了一些与肺结核痰检有关的书籍，其操作方法大致相同。
经过多年来的工作实践，笔者发现传统方法及《手册》存在几点商榷之处。
关键词：肺结核痰涂片镜检若干问题探讨【中图分类号】r9 【文献标识码】b 【文章编号】1671-8801（2013）06-0403-01随着卫十项目的全面启动，dots策略在全国范围内的实施，痰涂镜检成了发现肺结核传染源、实施化疗方案、评价化疗效果以及其流行病学与防治措施上的重中之重。
为进一步规范痰检工作，提高痰检质量，国家卫生部疾病控制司发布了一系列与肺结核防治规划有关的痰检方法，还专门出台了《中国结核病防治规划痰涂片镜检质量保证手册》（以下简称《手册》）。
笔者作为痰检人员，在执行和使用该书的同时，查阅了一些与肺结核痰检有关的书籍，其操作方法大致相同。
经过多年来的工作实践，笔者发现传统方法及《手册》存在几点商榷之处。
1 痰标本性状的确定标准的a、b痰按《手册》描述易确定，但对c痰、d痰就难了。
工作中经常会遇到黏液痰中夹黄色痰；灰黑色的“橡皮”样硬痰；粘度较大的透明痰；粉末样痰等。
感官描述与镜检上描述大不一样。
既然痰检质控要求每视野大于10个痰细胞为合格痰，那么对于感官难以确定的痰也可以根据这个标注来判断其性状。
2 痰标本涂片方法传统方法与《手册》一样，涂片时只需用竹签茬端粘痰直接在玻片上涂抹。
对于脓性干酪样a痰及口水d痰，直接涂抹相对容易，但对于粘度较大的痰、质地较硬的“橡皮”痰或血块、气泡较多的痰等，直接涂抹比较费时，按《手册》取0.05-0.1ml痰这个量难以掌握，而且厚薄不均。
痰涂片镜检操作规范
玻片的保存
使用显微镜附带的镜油，或者是购 买的镜油（immersion oil）,而不 是香柏油（cedar oil）,则不需使 用二甲苯，直接使用镜头纸擦拭即 可 干燥后的玻片，按实验室序号及涂 片编号放置在玻片盒中，存放在阴 凉干燥环境中。处于潮湿炎热的环 境中抗酸菌易于褪色。
痰细菌学检查工作经常被忽视
标本性状的控制加强于医生沟通3份痰标本1即时痰2夜间痰3晨间痰痰标本保存不能当日检查的保存于冰箱防液化染液控制用之前过滤一下一周一次如何进行痰涂片质量控制室内质控抽查复检当日10的涂片自查或互查选取结果可疑的涂片复查尤其是只看到一条的或只在一处视野看到细菌选择痰阳病人有阴性结果的涂片记录结果18条涂片玻片的保存使用显微镜附带的镜油或者是购买的镜油immersionoil而不是香柏油cedaroil则不需使用二甲苯直接使用镜头纸擦拭即干燥后的玻片按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中存放在阴阴凉干燥凉干燥环境中
痰涂片镜检操作规范
宁波市疾病预防控制中心 平国华
一、标本的来源与收集
初诊时留取标本数量 以三份标本的阳性检出例数作为 100％，留取一份标本的阳性检出 例数占全部阳性例数的80％，留取 两份标本的阳性检出例数占全部阳 性检出例数的95％。
不同痰液涂片阳性率表 （仅供示例）
性质 干酪样痰 血性痰 粘液性痰 水样痰 例数 55 46 529 92 阳性数 36 16 56 7 阳性率 65.5% 34.8% 10.6% 7.6%
附件（仅 供参考）
六、评价痰涂片 位置 大小（10mm×20mm） 厚薄（刚好透过报纸的5号字体，镜下每个视 野20个左右细胞） 染色（肉眼看天蓝色,无红/紫色斑块） 脱落（＜10%痰膜面积）
单一的抗酸菌
“V”- 字形
肺结核病人痰涂片镜检不同质控方式效果评价
结 果
1.不同督导方式、不同地理条件下四次质控结果的各项指标差异无显著意义(P>0.05)，见表1。
2.针对痰涂片及其质控的有关问题，对痰检人员进行了培训，并在质控前、后进行了两次问卷考核，22名地(市)及县级痰检人员质控后的答对率(90%)明显高于质控前(53%)。
表1 不同地理条件及督导方式痰片复检符合率
4 100.0 100.0 96.3 94.4 90.7 95.3 96.3 98.0 99.5 95.3 89.6 91.8 95.0 96.9
3.费用：表2显示2个省16个县4次督导总的经费消耗，直接督导(包括督导员差旅费、食宿费等)明显高于间接督导(包括包装邮寄费、复印费等)(P<0.05)；山区督导费高于平原(P<0.05)。
4 100.0 99.2 97.8 96.3 94.0 98.1 94.5 99.4 99.6 95.9 92.5 90.2 94.6 97.7
1 100.0 97.2 88.6 91.9 86.3 90.5 91.9 96.8 98.9 91.1 84.8 85.1 89.6 96.3
2.复检痰片数 直接督导组：每次每个实验室抽取阳性涂片20张，阴性涂片30张。间接督导组：每次每个实验室抽取阳性涂片20张，阴性涂片60张。
3.复检的痰涂片分别按“镜下观察”和“肉眼观察”进行评价并按统一表格记录。镜下观察：包括阳性、阴性符合情况及镜下每视野痰细胞数是否≥10个。肉眼观察：包括痰膜面积、厚薄、染色情况、痰膜脱落情况等，合格标准以“结核病诊断细菌学检验规程”［3］为准。
地理
条件 质控
次数 直 接 督 导 间接督导
镜下观察 肉眼观察 镜下观察 肉眼观察
结核病实验室涂片镜检技术
理治疗带来新的希望。
结核病细菌学诊断
结核病细菌实验室布局原则
• 1、结核病细菌学检查要有独立的实验室，不得 与其他实验室混用，最好为P3级实验室；
• 2、培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与涂片 镜检、培养前处理、药敏试验等污染操作要有独 立分开的场所，最好分别在专用的房间进行；
盐类
• 钙、钾、镁、铁、磷等，约占菌体成 分的 6％。
营养与发育
• 结核菌是需氧菌，但在含有比较低氧的环 境下也能生存，比如骨结核，淋巴结核。
• 在少量二氧化碳的环境中生长的也很好。 • 结核菌生长的适宜温度和人体相近为370C • 结核菌生长所必需的元素有氧、碳、氮、
氢、磷、钾、镁等。
结核分枝杆菌形态
抗酸性
抗酸性是分枝杆菌的重要特征。其化学 基础是分枝菌属的细胞壁脂质含量较高， 并含有大量分枝菌酸。
抗酸性与细菌细胞壁的完整性关系密切， 若菌体自溶（如标本保存时间过长、温度 过高）、结核菌的异型相（如：L-型菌、 干酪或脓液中的结核菌）可能失去抗酸性。
生长特性
生长适宜温度37C，PH6.8-7.2。营养要求较高。 在常用的罗氏（Lowenstein-Jensen）培养基上 生长的菌落粗糙、凸起、致密，有表面皱折， 呈颗粒、结节或菜花样，乳白色或米色，不透 明。
是国家结核病控制规划（NTP）的重要组成部分 是发现传染源的最主要途径和手段 是考核疗效、评价防治效果的可靠指标
分枝杆菌 生物学基础
概述
结核分枝杆菌是1882年郭霍（Robert Koch） 从肺结核病人痰标本中发现。是人类结核 病的主要病原菌。
分类
痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册
痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册一、操作流程1. 准备工作在进行痰涂片镜检之前，首先要做好准备工作。
包括整理工作台、准备所需试剂和材料、带好个人防护用具等。
确保环境整洁，避免外界污染。
2. 采集标本需要采集患者的痰液标本。
在采集时，要注意不要污染标本，并且采集的标本应该足够用于镜检。
3. 制作涂片将采集的痰液标本滴于载玻片上，用另一块载玻片将其涂开，制作成薄膜。
这一步需要技术娴熟，避免产生气泡或过厚的制片。
4. 干燥固定将制作好的涂片进行干燥固定，以保证镜检时的清晰度和稳定性。
通常可以用自然风干或特殊设备进行干燥。
5. 着色染色将干燥固定的涂片进行染色处理，使细胞和微生物更易于观察和分辨。
6. 镜检操作进行镜检操作。
在显微镜下观察涂片，分析痰液中的细胞、细菌和真菌等微生物结构和形态，及时记录观察结果。
二、质量保证手册1. 质量控制制定痰涂片镜检的质量控制标准，包括操作流程、质量评价标准、设备维护等方面，确保每一项操作都符合标准要求。
2. 培训与考核对进行痰涂片镜检的人员进行专业培训，包括操作技巧、细胞和微生物识别能力提升培训等，并定期进行考核，确保技能和认识的稳定性。
3. 质量评价建立定期的内部质量评价机制，对镜检结果进行复核、比对等，在发现问题时及时采取纠正措施。
4. 设备维护对显微镜等设备进行定期的维护保养，确保设备的正常使用和观察质量。
三、个人观点痰涂片镜检在临床诊断和疾病监测中扮演着重要的角色，标准化操作和质量保证手册则是保证检测结果准确性和稳定性的基础。
通过规范的操作流程和严格的质量控制，可以减少操作误差和结果偏差，提高痰涂片镜检的准确度和可靠性。
培训检验人员和定期的质量评价不仅可以提升检验人员的技术水平，还可以及时发现和解决问题，保证实验室检测的质量和可靠性。
总结回顾通过本文对痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册的介绍，我们了解到了其重要性和必要性。
良好的操作流程和质量保证手册是保证痰涂片镜检准确性和可靠性的关键步骤，对于临床诊断和疾病监测具有重要的意义。
痰涂片镜检实验室质量保证手册
现场评价（On-site evaluation） 国家或地区结核病规划下的地区督导员的常规对下 级实验室的督导检查和高水平实验室督导员的年度督导检查。
图 2 标本容器 （二）标本的性状：
合格的痰标本应是患者深呼吸后，由肺部深处咳出的分泌物。 1、干酪痰：标本外观以黄色（或奶酪色）脓样、团块状的肺部分泌物为主，粘度较粘液 痰低，制片时较易涂抹；涂片染色后镜检，可见大量脓性炎症细胞、肺上皮脱落细胞。由于 此类标本是由肺部深处咳出，对肺结核的诊断最有价值，故 AFB 的检出率较高。 2、血痰：此类标本是因粘液痰或干酪痰标本中混有血液而形成，颜色为褐色或深褐色、 鲜红色或伴有血丝；涂片染色后镜检除能够观察到粘液痰或干酪痰的细胞特征外，含新鲜血 液的标本中还可见到被染色的红细胞。由于含血标本易干扰 AFB 镜检的结果，故在制片时 应尽量避免挑取含血标本。 3、粘液痰：标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主，制片时需仔细涂 抹；涂片染色后镜检时，镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞（细胞较长且形态不规则、 细胞核和细胞质着色均较深，细胞一端可见着色较浅的纤毛），伴有少量肺上皮脱落细胞（多 数为圆形，细胞核较小，且着色较细胞质深，核质比＞1:3）、脓性炎症细胞（卵圆形、细 胞核占细胞比例较大且着色较深，核质比＜1:1）、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。此类标本 的 AFB 检出率较唾液高。 4、唾液：目视观察标本外观，以透明或半透明水样、粘度较低的口腔分泌物为主，标本 中有时伴有气泡；涂片染色镜检时，镜下可见少量口腔上皮脱落细胞（形态不规则、细胞核
痰涂片检查在肺结核病诊疗工作中的重要作用
国际 通 用 的螺 旋 盖 痰 瓶 ，或可 密 封 塑 料 盒 、蜡 纸 盒 。痰 标 本性 状 属 于 干 酪痰 、褐 色 血 痰 、黏 液 痰 为 合 格 标 本 。 干 酪 痰 的 标 本 外 观 以 黄 色 （ 酪 奶 色） 、脓 样 、团 块 状 的肺 部 分 泌 物 为 主 ， 黏 度 较 低 。染 色镜 检 后 可 见 大 量脓 性 炎 症 细 胞 ，肺 上 皮 脱 落 细胞 ，此 类 标 本 是 由肺 部 深 部 咳 出 ，对 肺 结 核 的 诊 断价 值 最 高 ；血痰 标 本 是 黏 液 痰 或 干 酪 痰
正确 的 留痰 方 法 是 ，在 留 痰 之前 先 用 清 水 漱
受 ，但 对在 治疗 前 及 治 疗过 程 中要 定 期 查 痰 还 不 能理 解 甚 至不 能 接 受 。 其 实痰 涂 片 检 查 对 治 疗 和 控制肺结 核病是 极为 重要 和必不可 少 的。 首 先 ，痰 涂 片检 查 是诊 断肺 结 核 病 以及 判 断 肺 结 核 病传 染 性 强 弱 的最 直 接 、最 主要 的依 据 。 疑 有肺 结 核 病 除进 行 Ｘ线 胸 透 、摄 片检 查 外 ，必
标 本 中 混有 血 液 而 成 ，颜 色 为 褐 色 或 深 褐 色 ；黏
液痰 的标 本 外 观 以 白色 、黏 度 较 高 的肺 部 和 支气 管分 泌物 为 主 。唾 液标 本 整 体 外 观 以透 明 或半 透 明水 样 、黏度 较 低 的 口腔 分 泌 物 为 主 ，标 本 中有 时伴 有 气 泡 ，此 类标 本 检 出率 很 低 ，属 于 不 合 格 标 本 。痰 标 本 不 合 格者 ，应 予 以进 一 步 指 导并 要 求 其 重新 送 检 。 初次 就 诊 需 查 痰 者 ，要 求 送 检 三 个 痰 标 本 ：① 即 时痰 ：就 诊 当 时 咳 出 的痰 ；② 夜 间 痰 ：前 一 天 晚 间 咳 出 的痰 ；⑧ 清 晨 痰 ：起 床 后 深 咳 吐 出 的痰 ，其 中 以清 晨 第 一 次 咳 出的 痰 效 果
痰涂片镜检诊断肺结核
痰涂片镜检诊断肺结核肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种危害人体健康的慢性传染病，主要通过呼吸道传播。
结核分枝杆菌可侵及人体多个脏器，其中肺部感染后形成肺结核是最为常见的疾病表现。
我国是结核病高负担国家之一，2020年全球结核病报告显示，我国新发肺结核是83.3万，位居世界第二位。
早期诊断并通过隔离传染源、切断传播途径是控制结核传播的重要手段。
目前结核病诊断方法主要有分子生物学检查、影像学检查、痰培养及痰涂片镜检等。
其中采集痰标本通过涂片采用显微镜进行抗酸杆菌检查是实验室常用的方式。
本文主要针对痰涂片镜检诊断结核病进行科普，帮助人们更多更好的了解结核病。
1 肺结核的临床症状（1）咳痰在肺结核患者群体中，典型症状包括咳嗽、咳痰，痰液主要以白色粘液状、黄脓痰为主，偶见坏死物。
（2）咳嗽当肺结核发生时，患者将会出现一定程度的干咳，若其存在痰中带血情况，则高度怀疑为肺结核。
（3）咯血随着时间的推移，疾病将会进一步发展，病灶会影响肺部的毛细血管，从而引发咯血症状，若病灶损伤大血管时，将会出现大量咯血。
（4）胸痛在肺结核患者中，因为胸痛不是主要表现症状，该症状的发生主要是因为胸膜邻近病灶和胸膜产生粘连所导致的，患者会感受到明显的钝痛和刺痛，呼吸不会引起疼痛发生。
当发生结核性胸膜炎时，患者会感受到强烈疼痛，该阶段，呼吸会导致疼痛发生。
（5）呼吸困难随着疾病的进展，患者发生胸腔积液以及气胸时，累积的积液会对气管产生压迫作用，从而引起呼吸困难。
尤其是在疾病晚期，病灶的扩大会增加对肺部的影响，从而导致呼吸衰竭以及心功能不全，此时患者的呼吸困难症状会进一步加重。
（6）结核性变态反应某些患者因自身为高敏体质，在肺结核发作阶段，会出现全身性过敏反应，主要表现为结节性红斑、多发性关节疼痛等，在青年女性群体中较为常见。
由此得知，肺结核的临床症状有多种表现形式，在一般情况下，某些患者可能不具备典型症状，也有的患者可能会在体检的过程中被明确诊断，因此在肺结核的诊断当中，需要采用有效的诊断措施，以此方式达到早期诊断，早期治疗的目的。
肺结核痰涂片检查工作规范
肺结核痰涂片检查工作规范--------------------------------------------------------------------------------痰涂片检查是肺结核病人诊断与鉴别诊断、制定化疗方案、疗效考核的主要方法或手段。
为贯彻落实市卫生局《关于在全市一级以上医疗单位中开展传染性肺结核筛查工作的通知》的精神，加强传染性肺结核病人发现力度，特制定本规范。
一、痰检的对象和要求（一）对象1．咳嗽、咳痰≥3周或有咯血或血痰症状以及胸片异常者。
2．进行疗效考核的病人：凡已确诊、登记、治疗的肺结核病人，在化疗期间应按规定定期作痰菌复查。
1）初治涂阳病人（含重症涂阴病人）在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳病人在疗程满2、5、8个月时，各查痰一次。
2）初、复治涂阳病人在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满 3个月时增加查痰一次。
3）确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后满2和6个月时进行痰菌检查。
（二）要求1．初诊病人应送3份痰标本（夜间痰、清晨痰和即时痰）。
如无夜间痰，在留清晨痰后2～3小时再留取一份痰标本；或在送痰时，留取两份即时痰。
治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰（清晨痰和夜间痰）。
2．痰标本采集：即时痰为病人就诊时咳出的痰液。
清晨痰为清晨深咳出的痰液。
夜间痰为就诊前一天晚睡前咳出的痰液。
痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为3～5毫升。
应由检验人员或专人验收痰标本，痰液不合格者，要求重新送检。
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状以供分析结果时参考。
痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4厘米、高2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。
留痰容器上应注明病人姓名、编号（门诊序号或病人登记号）及日期。
3．痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。
不能立即作涂片检查的痰标本，须置4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。
结核病实验室基本要求和痰涂片检查-结核病防治网
一、标本的容器
采用世界卫生组织（WHO）推荐的国际 通用螺旋盖痰瓶，或可密封塑料盒、蜡纸 盒收集痰标本（参考规格：直径 4㎝，高 度2㎝）。痰容器应标明病人姓名、编号 （初诊病人门诊序号或随访病人登记号）、 检查项目和容器序号1、2、3。
二、 痰标本采集
根据痰标本采集的时间，可将标本分为三类： 即时痰：就诊时深呼吸后咳出的痰液； 晨痰：患者晨起立即用清水漱口后，咳出 的第2口、第3口痰液； 夜间痰：送痰前一日，患者晚间咳出的痰 液； 无痰患者可采用雾化引痰或鼻咽拭子采 集标本。其他标本采集略……
三、 痰标本的性状
血痰：此类标本是在粘液痰或干酪痰 标本中混有血液，颜色为褐色或深褐 色、鲜红色或伴有血丝；涂片染色后 镜检除能够观察到粘液痰或干酪痰的 细胞特征外，含新鲜血液的标本中可 见到被染色的血细胞。由于含血标本 易干扰AFB镜检的结果，故在制片时 应尽量避免挑取含血部分。
三、 标本的性状
三、 痰标本的性状
合格的痰标本应是患者深呼吸后，由肺部 深处咳出的分泌物。 干酪痰：标本外观以黄色(或奶酪色)、脓 样、团块状的肺部分泌物为主，粘度较粘 液痰低，制片时较易涂抹；涂片染色后镜 检，可发现大量脓性炎症细胞、肺上皮脱 落细胞。由于此类标本是由肺部深处咳出， 对肺结核的诊断最有价值，故AFB的检出 率较高。
五、污物处理及消毒 3.实验用的试管、吸管、注射器，须装在加 盖不漏的容器内，经高压消毒后拿出实验 室。 4.培养物或实验室垃圾，在丢弃前必须经过 高压消毒和紫外灯近距离长时间照射处理。 5.实验室内未经消毒的污水，禁止直接排入 公共排水系统，更不允许混入居民生活垃 圾。
六、意外事故的处理
1.实验过程中，如标本或含标本的前消化 处理液被打翻污染操作台或地面，应以 吸满75%乙醇溶液的卫生纸覆盖污染区， 15 分钟以后卫生纸方可移去。
痰检验的一般步骤
痰检验的一般步骤痰检验是一种常见的临床实验室检查方法，用于评估呼吸系统的健康状况和诊断呼吸系统疾病。
下面将介绍痰检验的一般步骤，以帮助读者更好地了解这项检查。
一、样本采集痰检验的第一步是采集痰样本。
通常情况下，医生会要求患者咳嗽产生痰液。
如果患者无法咳嗽或痰液不易产生，医生可能会建议进行人工刺激，例如通过吸气盐水进行刺激以促使咳嗽。
采集到的痰液应尽快送到实验室进行检验，以确保结果的准确性。
二、样本制备在进行痰液检验前，需要对样本进行一系列的制备工作。
首先，实验室技术人员会检查痰液的颜色、黏稠度和气味等特征。
然后，他们会将痰液样本放入离心管中，并进行离心处理，以分离出痰液中的固体物质和液体成分。
离心后，他们会将上清液和沉淀分开保存。
三、常规检验接下来，实验室技术人员会对痰液样本进行常规检验。
常规检验包括观察痰液的颜色、黏稠度和气味等特征，以及测定痰液的pH值。
这些指标可以帮助医生判断痰液的性质，例如是否为感染性痰液或非感染性痰液。
四、微生物学检验微生物学检验是痰液检验中的重要环节，用于检测痰液中是否存在病原微生物，例如细菌、病毒或真菌。
实验室技术人员会将痰液样本接种在适当的培养基上，培养一段时间后观察是否有细菌或真菌的生长。
如果有生长，则可以通过进一步的鉴定测试确定具体的病原微生物。
五、细胞学检验细胞学检验是痰液检验中的另一个重要环节，用于评估痰液中的细胞类型和数量。
实验室技术人员会将痰液样本制备成涂片，并使用染色剂对细胞进行染色。
然后，他们会在显微镜下观察和计数不同类型的细胞，例如上皮细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等。
这些细胞的类型和数量可以帮助医生判断痰液中是否存在炎症或恶性细胞。
六、其他检验除了常规检验、微生物学检验和细胞学检验外，痰液检验还可以包括其他一些特殊检验项目，例如药敏试验、分子生物学检验和肿瘤标志物检验等。
这些检验项目可以根据具体的临床需要进行选择，以更全面地评估痰液的性质和疾病的特征。
结核病实验室痰涂片检查质量控制现场评价督导
足够用量 是否 是否 是否 是否 是否
如有填写“否”的项目，请简要说明原因：_________________
2.供应
检查的问题
下列原料可以是否得 到？ 痰盒规格是否标准？ 是否供涂片存放用的 储片盒符合规格标准 ？是否数量足够？ 近3个月是否供应短 缺？ 有否有蒸馏水？水是 否保存在无菌瓶子里 ？
实验室是否使用手套？使用是否合适？
应戴防护手套，手套种类应符合所从事安全 工作的要求
试验结束后是否洗手？
遵守正确的洗手程序
实验室是否有上下水?
实验室应当有上下水
实验室是否洁净有序?
干净整洁，物品摆放有序
下班后，是否关闭实验室门窗？是否例行安全检查？ 关闭好门窗，巡视检查，确保安全后离去
结果 是否 是否
染色试剂做质量检测吗？
经过火焰3-5次加热固定。
一批最多10-12张涂片。
石碳酸复红热染5分钟，染色剂不许在玻片上干燥，盐酸酒 精脱色1分钟，仅必要时重复脱色，不要脱色过度，亚甲基 蓝复染1分钟
试剂必须用已知阳性玻片进行检验，至少每月一次
显微镜多久用擦镜纸清理一次? 报告一个阴性结果要观察多少个视野？
2）涂片总张数＝阴性涂片数＋阳性涂片数 3）阳性涂片率% = 阳性涂片数/涂片总张数 登记日期： 年 月
1.试剂
检查的问题
现有的染色剂是否都可以使用？ 最近3个月是否试剂短缺？ 使用的试剂是否在有效期内？ 镜油粘度是否合适？
指标 试剂名称 可用性 石碳酸复红 是 否 亚甲蓝 是 否 5%乙醇酸 是 否
3、实验室安全
检查的问题
指标
痰涂片检查在哪里进行？
在一个与其他实验室隔开的地方进行
痰涂片检查结核分枝杆菌规范化操作研究
痰涂片检查结核分枝杆菌规范化操作研究摘要】目的：对痰涂片检查结核分枝杆菌规范化操作的方式以及效果进行调查。
方法：我疾控检验室在2012年1月-2014年12月间所有进行痰液检查的患者，所有患者均采用抗酸染色法进行涂片制作，对所有患者的检测结果进行调查。
结果：14年，45人次痰检，3人初诊痰涂片阳性，片子共计118张。
13年，67人次痰检，32人初诊，其中5人初诊阳性。
涂片计111张。
12年，29人次，初诊21人次，3人初诊阳性，后经临床证实，所有初见为阳性的患者均为结核类疾病患者，我疾控检验室涂片检测率为100%。
结论：在操作过程中要注意加热操作，防止涂片干涸。
【关键词】痰涂片；结核分枝杆菌；规范化操作【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）10-0222-02结核类疾病是一种具有传染性的疾病，最常见的就是肺结核。
实验室检查是发现疾病传染源的主要途径，也是制定患者治疗方案的重要指标。
实验室检查最常用的就是痰涂片检查，痰涂片镜检和检查也是世界卫生组织公认的诊断结核疾病的标准，但痰涂片的制作方式较多，对检查结果也有着不同的影响，我站主要采用了抗酸染色法做痰涂片，并对其检查结果进行了调查。
1.资料与方法1.1一般资料选择我疾控中心2012年1月-2014年12月间所有进行痰液检查的患者，12年29例；13年67例；14年45例，共141例。
患者平均年龄为（46.2±17.5）岁，男性67例，女性74例，患者平均病程为（2.5±1.7）个月。
1.2试剂溶液我疾控检验室采用抗酸染色法进行涂片制作（萋-尼（Z-N）抗酸染色法），染色液选用3%盐酸乙醇溶液；0.8%石炭酸复红溶液；0.1%亚甲蓝溶液；脱色液。
1.3涂片制作根据痰标本采集时间，可将标本分为三类：1.3.1即时痰就诊时深呼吸后咳出的痰。
1.3.2患者晨起时立即用清水簌口后，咳出的第二口。
痰涂片检查与质量控制
(3)痰标本性质：按脓样痰、干酪样痰、血性样痰、脓性粘液痰和水样痰分类登记。
(4)“标本镜检结果”中的“日期”为实际镜检日期。
6.废弃标本和污染物的处理：
1) 痰盒和废弃标本等污染物，均须经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗，严禁不经灭菌随意处理。
2) 痰盒等污染物如采用焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。焚化不彻底，或暴露焚烧是有害的。
—省参比室在对地(市)和/或县(市)直接质控时，宜采用地(市)质控的同批县(市)涂片，填 写“痰涂片室间质控记录表”(表 4)。
表 1 痰涂片室间质控记录表( 省 市(地) 县(市) 第次质控)
实验序 号
自检 结果
镜检复验情况
复检结果
痰细胞 (＞10 个/视野)
肉眼观察制片质量 涂膜大小 厚薄 染色 脱落
质控单位
痰片保存情况 实验室工作记录 签名
日期
表 2 地(市)痰涂片室间质控结果汇总表 ( 地市 年 第次质控)
复验涂片数
米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号(门诊序号或病人登记号)及日
期。
3. 痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。不能立即作涂片
检查的痰标本，须置 4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。
需送上一级细菌实验室培养的痰标本，外送前应认真核对痰标本容器上标注，是否正确
和清晰，是否与化验单一致。痰容器应采用专用的结核杆菌和痰标本冰盒运送，或以纸张和
3) 痰检工作台面的消毒：可将痰标本置于一搪瓷盘中，在操作厨中进行痰涂片操作。涂片操作完成后，将盘与废弃物
等一并进行高压蒸汽灭菌，或与操作台面同时以 3%石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外线灭菌灯(距离 1 米)照射
结核病防治实验室痰检工作——第一讲 痰涂片镜检
结核病管理及最新进展
第一节 结核病防治实验室痰检工作
第一讲
痰涂片镜检
本节内容导航
痰检工作的目的和意义 国家结核病规划（NTP） 与结核病细菌学实验室网络 检查对象 结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌 染色特性 萋尼氏染色镜下形态
本节内容导航
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理 痰标本的采集－容器 痰标本的采集 留取标本 痰标本的运送 标本的性状 直接涂片的步骤 染色的步骤
检查对象
确定诊断
凡因结核病症状求诊及转诊的可疑肺结核患 者，均应进行痰直接涂片检查
结核病症状体征 持续咳嗽 咳痰超过 3周
咳血或伴 有血痰
发热或胸 痛超过2周
胸部X线异常
检查对象
确定诊断的涂片检查应采集3个合格的痰标本 就诊当时在门诊留一份“即时痰”标本，同时给 患者2个痰盒，嘱患者留取“夜间痰”和“晨 痰”，于次日交验
痰检工作的目的和意义 痰检工作的
在结核病控制工作中痰结核菌涂片镜检对 于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核 疗效、评价防治效果具有重要意义
2
1
是国家结核病控制规划(NTP) 的重要
组成部分，在现代结核病控制工作中起着不 可缺少的重要作用
国家结核病规划（NTP）与 结核病细菌学实验室网络
1
结核病细菌学实验室通过日常、有效的细
检查对象
疗效评价
治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰 (当 日即时痰、当日或次日晨痰） 初治涂阳患者在疗程满2、5、6月时 复治涂阳患者在疗程满2、5、8月时
结核菌的形态和结构
光学显微镜下为细长 稍弯曲，两端钝圆的 杆菌 ，菌体长度多为 1.5~3.5um
结核分枝杆菌
结核病痰涂片和质量保证专家讲座
专业处理：
试验操作工作面应以3%石炭酸或其它可 靠消毒液擦拭，再用紫外线灭菌灯照射30 分钟。
结核病痰涂片和质量保证
第12页
二、痰涂片镜检试验室质量确 保
结核病痰涂片和质量保证
第13页
按照世界卫生组织（World Health Organization)和国家结核病防治规划 (Nationaltuberculosis programme）要求，在我国已全方面推 行DOTS策略或DOTS策略得到良好落实 执行地域，为了连续提升结核病试验室痰 涂片检验工作效率和可靠性，必须建立我 国结核病试验室质量确保系统网络。在试 验室内部质量控制基础上，应用试验室间 质量检验和评定方法，进行试验室检验系 统评价，并经过采取一系列办法改进和不 停提升试验室业务总体水平。
④涂片初检结果与第一复检者盲法复检结果之间 分歧，由第二复检者复检后最终确定。
⑤督导者应及时将复检结果反馈给被督导试验室， 以利于涂片技术与质量不停提升。
结核病痰涂片和质量保证
第31页
盲法复检评价：
盲法复检目标不是为了验证某个病人诊疗 正确是否，而是评价整个试验室操作水平。 评价内容除了涂片镜检结果存在误差之外， 还包含检验标本质量（合格标本和不合格 标本百分比）、涂抹大不和厚度、染色质 量怎样等，方便采取纠正办法，提升试验 室工作质量。
搜集标本容器应采取国家参比室推荐标准 痰瓶，或采取直径4厘米、高2厘米广口塑 料（或蜡纸）或密闭容器。
结核病痰涂片和质量保证
第5页
容器上应注明与检验单一致病人姓名、编 号及日期。
需送上一级试验室检验痰标本应置4℃冰箱 保留，外送前认真查对检验单与痰瓶上标 注，放专用冰盒内运输，或用纸袋、塑料 袋封扎牢后次序放入包装盒，盒外注明请 勿倒置标志。
结核病防治实验室痰检工作——第一讲痰涂片镜检.共61页文档
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
结核病防治实验室痰检工作——第一 讲痰涂片镜检.
6、法律的基础有两个，而且只有两个……公平和实用。——伯克 7、有两种和平的暴力，那就是法律和礼节。——歌德
8、法律就是秩序，有好的法律才有好的秩序。——亚里士多德 9、上帝把法律和公平凑合在一起，可是人类却把它拆开。——查·科尔顿 10、一切法律都是无用的，因为好人用不着它们，而坏人又不会因为它们而变得规矩起来。——德谟耶克斯
肺结核痰涂片检查工作规范
肺结核痰涂片检查工作规范肺结核痰涂片检查工作规范肺结核痰涂片检查工作规范--------------------------------------------------------------------------------痰涂片检查是肺结核病人诊断与鉴别诊断、制定化疗方案、疗效考核的主要方法或手段。
为贯彻落实市卫生局《关于在全市一级以上医疗单位中开展传染性肺结核筛查工作的通知》的精神，加强传染性肺结核病人发现力度，特制定本规范。
一、痰检的对象和要求（一）对象1．咳嗽、咳痰≥3周或有咯血或血痰症状以及胸片异常者。
2．进行疗效考核的病人：凡已确诊、登记、治疗的肺结核病人，在化疗期间应按规定定期作痰菌复查。
1）初治涂阳病人（含重症涂阴病人）在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳病人在疗程满2、5、8个月时，各查痰一次。
2）初、复治涂阳病人在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满3个月时增加查痰一次。
3）确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后满2和6个月时进行痰菌检查。
（二）要求1．初诊病人应送3份痰标本（夜间痰、清晨痰和即时痰）。
如无夜间痰，在留清晨痰后2～3小时再留取一份痰标本；或在送痰时，留取两份即时痰。
治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰（清晨痰和夜间痰）。
2．痰标本采集：即时痰为病人就诊时咳出的痰液。
清晨痰为清晨深咳出的痰液。
夜间痰为就诊前一天晚睡前咳出的痰液。
痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为3～5毫升。
应由检验人员或专人验收痰标本，痰液不合格者，要求重新送检。
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状以供分析结果时参考。
痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4厘米、高2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。
留痰容器上应注明病人姓名、编号（门诊序号或病人登记号）及日期。
3．痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。
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于试管中加20%的枸橼酸钠3—5滴，或10%的草酸钾
5—6滴，可防止15—20ml 胸腹水凝固。无菌采取胸腹
水以后应立即送检。可采取离心集菌或漂浮集菌法检查
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【纤维支气管镜刷检物】 可将毛刷直接进行抗酸染色,也可将刷检标本洗脱于装有 无菌生理盐水的试管中,再涂片检查
痰涂片操作程序
直接涂片的步骤
【清洁无划痕的新玻片脱脂、干燥】 编号
无磨砂面的玻片，需用玻璃刻刀或用标签纸
有磨砂面的玻片，可用铅笔编号
痰涂片操作程序
直接涂片的步骤
【清洁无划痕的新玻片脱脂、干燥】 使用折断的竹签茬端，取痰标本中干酪样或脓样 0.05~0.1毫升，涂于玻片右2/3处，均匀涂抹 10x20毫米大小的椭圆形痰膜
痰标本的运送
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但 应注明标本性状，以供分析结果时参考 需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰箱保存， 外送前认真核对检验单与痰瓶上标注，放专用的冰
盒内运送，或用纸袋、塑料袋封装扎牢后顺序放入
包装盒，盒外注明请勿倒置标志
痰涂片操作程序
标本的性状
外层是 口 腔黏液
复治涂阳患者在疗程满2、5、8月时
结核菌的形态和结构
光学显微镜下为细长 稍弯曲，两端钝圆的 杆菌 ，菌体长度多为 1.5~3.5um
结核分枝杆菌
宽度为0.3～0.6um， 生 长发育期间形成分枝 经萋尔-尼尔逊染色后 在显微镜内蓝色背景 下呈红色杆状
结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌
细胞壁 细胞膜
常见标本的收集及处理 痰标本的采集－容器 痰标本的采集 留取标本 痰标本的运送 标本的性状 直接涂片的步骤 染色的步骤
痰检工作的目的和意义
1
在结核病控制工作中痰结核菌涂片镜检对 于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核
疗效、评价防治效果具有重要意义
2
是国家结核病控制规划(NTP) 的重要组成
核心是肺 部坏死组 织
中间层是支 气管分泌物
合格的痰标本应是患者深呼吸后，由肺部深处咳 出的分泌物
痰涂片操作程序
标本的性状
【干酪痰】 标本外观以黄色(或奶酪色)、脓样、团块状的肺部 分泌物为主，粘度较粘液痰低，制片时较易涂抹
涂片染色后镜检，可发现大量脓性炎症细胞、肺上
皮脱落细胞 由于此类标本是由肺部深处咳出，对肺结核的诊断 最有价值，故抗酸杆菌(以下简称AFB)的检出率较高
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
脓液直接涂片染色镜检 病灶组织或干酪样组织需充分研碎后再涂片检查
痰涂片操作程序
痰标本的采集－容器
当前,贵州省疾病预防控制机构结核病实验室进行痰检 工作的耗材由项目统一提供： 螺旋盖痰瓶 可密封的塑料盒 可密封的蜡纸盒
痰涂片操作程序
痰标本的采集－容器
痰涂片操作程序
结核分枝 杆菌 细胞质 核物质
结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌
Gram-positive S. aureus Gram-negative E. coli Acid fast M. tuberculosis
结核菌的形态和结构
染色特性
1
结核杆菌用革兰氏染色，着色较差但呈兰色， 列为G＋菌
不均匀、脱落、脱色不佳
痰涂片操作程序
染色后外观
本节小结
本讲课内容主要从痰涂片镜检的角度讲述了结核
病防治实验室痰检工作中新的进展
本讲中的重点内容是痰涂片的操作程序，辅以开篇
的背景知识帮助理解
痰涂片操作程序
标本的性状
不同痰液涂片阳性率表 （仅供示例）
性质 例数 阳性数 阳性率
干酪痰
血痰 粘液痰 唾液
55
46 529 92
36
16 56 7
65.5%
34.8% 10.6% 7.6%
痰涂片操作程序
标本的性状
细胞核质比，白细胞，说明痰的质量较好
痰涂片操作程序
标本的性状
上皮细胞多，说明标本质量差
部分，在现代结核病控制工作中起着不可缺
少的重要作用
国家结核病规划（NTP）与 结核病细菌学实验室网络
结核病细菌学实验室通过日常、有效的细
菌学（病原学）诊断，发现传染源、决定化疗方
案和评价治疗效果为实现NTP的重要目标服务
2
1
痰涂片镜检服务必需在健全的细菌学实验
室网络中才能实现
国家结核病规划（NTP）与 结核病细菌学实验室网络
火焰加热至出现蒸汽，勿使沸腾
脱离火焰，保持5分钟
痰涂片操作程序
染色步骤
【脱色】 流水自玻片一端清 缓冲洗染色液，沥 去玻片上的水，滴 加脱色液，保持1 分钟
痰涂片操作程序
染色步骤
【复染】 滴加亚甲蓝复染 液，保持30秒钟 流水冲洗，沥去
玻片上的水 玻片干燥后镜检
痰涂片操作程序
染色步骤
3
结核病高负担国家NTP主要通过实施现代结
核病控制策略（DOTS）来实现
4
痰涂片镜检是结核病细菌学实验室服务中 最重要的内容之一。痰涂片镜检发现传染源是 DOTS策略的重要组成部分
检查对象
确定诊断
凡因结核病症状求诊及转诊的可疑肺结核患 者，均应进行痰直接涂片检查
结核病症状体征 持续咳嗽 咳痰超过 3周
痰膜朝上，待自然干燥(一般20分钟)
痰涂片操作程序
涂片面积
10×20mm
10mm
20mm
痰涂片操作程序
染色步骤
初染 (碱性复红)
染色过程
脱色 (盐酸酒精)
复染 (亚甲兰)
痰涂片操作程序
染色步骤
【初染】 将玻片放置染色架上，玻片间距保持10毫米以上距离 火焰固定（5秒钟将玻片过火4次） 滴加石炭酸复红染液，盖满玻片
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【脑脊液的采取】 无菌手术取得脑脊液以后，3000转离心30分钟，取沉
淀物涂片染色检查
结核性的脑脊液放在冰箱中4℃过夜以后，会在液面形
成一个倒漏斗状的薄膜，取此薄膜涂片染色镜检
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【尿标本的采取】 通常留取清晨第一次全尿或中后段夜尿,也可留取24小时 的尿液，放冰箱或阴凉处，静置，去上清，留沉淀部分 50—60ml送检，取此沉淀液，经3000转，离心30分钟， 取沉淀部分2ml直接涂片，染色检查
留取标本
留痰时应嘱咐病人尽量深咳，留取痰量3~5毫升 干酪痰、血痰、黏液痰为合格的标本唾液属不合 格痰标本
痰瓶上标明病人姓名，初诊门 诊序号（或随访病人登记号） 痰标本留取后，痰盒切勿倒置、 严防痰液外溢，应立即送检
留取标本
进行细菌学检查时，应在登记 本和检验报告单上注明标本性 状
痰涂片操作程序
痰涂片操作程序
标本的性状
【血痰】 此类标本是因粘液痰或干酪痰标本中混有血液而形成
颜色为褐色或深褐色、鲜红色或伴有血丝
涂片染色后镜检除能够观察到粘液痰或干酪痰的细胞 特征外，含新鲜血液的标本中可见到被染色的血细胞 由于含血标本易干扰AFB镜检的结果，故在制片时应尽 量避免挑取含血标本
痰涂片操作程序
痰涂片操作程序
标本的性状
【唾液】 目视观察标本整体外观，以透明或半透明水样、粘度 较低的口腔分泌物为主，标本中有时伴有气泡 涂片染色镜检时，镜下可见少量口腔上皮脱落细胞(形 态不规则、细胞核着色较细胞质深，核质比接近或大
于 1:2)和口腔内寄生菌，有时可见食物残渣
由于此类标本进行AFB检查时的检出率很低，用于对患 者确定诊断时是不合格的标本
2
结核杆菌用普通的染色方法不易着色，在染液
中加入石炭酸后才可着色
结核菌的形态和结构
染色特性
3
抗酸染色时，因结核杆菌菌体含有大量脂质，其脂质 的含量占分枝杆菌之首，占菌体干重的40%，因脂质的 含量大，所以不易着色，但经过加热或者提高石炭酸的 浓度、延长染色时间等处理以后才能着色
结核菌的形态和结构
第三章 结核病管理及最新进展
第一节 结核病防治实验室痰检工作
第一讲
痰涂片镜检
本节内容导航
痰检工作的目的和意义 国家结核病规划（NTP） 与结核病细菌学实验室网络 检查对象 结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌 染色特性 萋尼氏染色镜下形态
本节内容导航
痰涂片操作程序
将涂片排放在染色架上，注意间隔
痰涂片操作程序
染色步骤
滴加碱性复红
痰涂片操作程序
染色步骤
加热
痰涂片操作程序
染色步骤
流水冲洗
痰涂片操作程序
染色步骤
脱色
痰涂片操作程序
染色步骤
流水轻缓冲洗
痰涂片操作程序
染色步骤
复染
痰涂片操作程序
染色步骤
流水洗去复染液
痰涂片操作程序
染色步骤
在玻片架上自然干燥
痰涂片操作程序
咳血或伴 有血痰
发热或胸 痛超过2周
胸部X线异常
检查对象
确定诊断的涂片检查应采集3个合格的痰标本
就诊当时在门诊留一份“即时痰”标本，同时给
患者 2 个痰盒，嘱患者留取“夜间痰”和“晨
痰”，于次日交验
பைடு நூலகம்
检查对象
疗效评价
治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰(当 日即时痰、当日或次日晨痰） 初治涂阳患者在疗程满2、5、6月时
染色特性
4
一旦着色，不易被盐酸酒精脱色，而其他细菌均被
脱色，把不被盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸菌，这种方