鲎试剂灵敏度

（3）色素
有些细菌能产生色素，对细菌的鉴别有一定意 义。 细菌色素有两类：
①水溶性色素，可使培养基带上相应的颜色， 如绿脓杆菌产生的绿脓色素使培养基或脓汗呈绿 色。
②脂溶性色素，不溶于水，仅保持在菌落内 使之呈色而培养基颜色不变，如金黄色葡萄球菌 色素。
（4）抗生素 某些微生物代谢过程中可产生一种能抑制或杀
二、微生物的致病性
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1．侵袭力
（一）细
病 菌的毒力 原 菌 的 致 病 性
指病原菌突破宿主皮肤、黏膜生理 屏障，在体内生长繁殖和扩散的能力。 侵袭力与其表面结构和侵袭性酶有关。
2．毒素 其来源、性
（1）外毒素
主要是G+菌在生长繁殖过程
中合成并分泌到菌体外的毒性
质和作用不
极强,对机体的组织器官具有选
同，可分为
通常利用生化试验的方法，检测微生物对 各种物质的代谢作用及其代谢产物，称为微 生物的生化反应。这一反应通常用于微生物 的鉴别。
(2)发酵试验
多种单糖
酸、醛、醇、 酮、气体等 代谢产物
不同的微生物对糖的分解能力和 代谢产物不同，可用于鉴定。
(2)吲哚试验
营养物质中 的色氨酸
吲哚
加入对二甲基 氨基苯甲醛
死某些其他微生物或癌细胞的物质，称抗生素。抗 生素多由放线菌和真菌产生，细菌仅产生少数几种，
如多粘菌素、杆菌肽等。
（5）细菌素
某些细菌能产生一种仅作用于有近缘关系的细菌 的抗菌物质，称细菌素。细菌素为蛋白类物质，抗 菌范围很窄，无治疗意义，但可用于细菌分型和流 行病学调查。细菌素以生产菌而命名。大肠埃希菌 产生的细菌素称大肠菌素，绿脓杆菌产生的称绿脓 菌素，霍乱弧菌产生的称霍乱菌素。
择毒性作用的蛋白质。
（2）内毒素
是G-菌在死亡裂解或用人工
（二）细菌侵入的数量
方法破坏菌体后才释放出来细
胞壁中的能引起机体发热反应脂多
糖类脂A成分 。
（三）细菌侵入的部位
表6-1 细菌外毒素和内毒素比较
外毒素
内毒素
来源
活菌的代谢产物，并分泌 到菌体外
革兰阴性菌细胞壁的组 成成分，菌体裂解后释 放出来
第六章 微生物代谢产物的测定技术
教学目标： １、微生物代谢产物的测定技术 ２、知道微生物的致病性。
教学重点： 微生物代谢产物的测定技术，微生物的致病性。
教学难点： 微生物的致病性
第一节 理论基础
多糖、蛋白 质等大分子 营养物质
微生物
分解
单糖、小肽 或氨基酸
分解 代谢
吸收进入菌体，再经氧化或胞内 酶分解形成菌体可利用的成分
化学成分 蛋白质
脂多糖
热稳定性 不稳定，加热60℃以上被 耐高温，250℃30min才
破坏
被破坏
抗原性 强
弱
类毒素 经0.3-0.4%的甲醛能变成无 不能用甲醛液脱毒成类 毒性而有抗原性的类毒素 毒素
毒性
强，对机体的组织器官具 弱，对机体的组织器官
有选择性
选择性不强
致热作用 不能引起宿主发热
引起发热反应
二乙酰
胍基的化合 物反应
红色化合物
VP阳性
黄色为VP阴性
(5)枸橼酸盐利用试验
枸橼酸盐
唯一碳源
分解 生成
碳酸盐，同时 分解培养基的 铵盐生成氨
培养基变 为碱性
使培养基内的指 示剂溴麝香草酚 蓝由淡绿转为深 蓝，
此为阳性反应
指示剂不变 色(原为绿 色)，为阴性 反应
吲哚试验 、甲基红试验 、VP试验 、枸橼酸盐利用 试验 通常统称为I、M、VI、C生化试验。在鉴定上 使用广泛。
合成代谢
既能分解营养物质产生分解代谢产物，又能利用简单化合物产生 合成代谢产物。有的产物可用来鉴别微生物，有的产物与微生物 的致病性有关，有的产物可作为药物供临床上治疗疾病。
一、微生物的代谢产物 1．分解代谢产物及应用
不同的微生物，其自身含有的酶系统不同， 因此，在利用营养物质进行代谢时产生的代 谢产物也不完全相同。
吲哚试验阳性
生成红色的 玫瑰吲哚
(3)甲基红试验
葡萄糖分解 产生丙酮酸
不能形成乙 酰甲基甲醇，
中性的乙酰 甲基甲醇
培养液 pH＞5.4，
加甲基红指示剂呈桔黄色， (为甲基红试验阴性 )
培养液呈酸性pH＜5.4，指示 剂甲基红呈红色，称甲基红试 验阳性。
(4) VP试验
丙酮酸
脱羧、氧化 生成
(在碱性溶液中)
第二节 微生物内毒素测定的操作
可作为部分注射剂热原检查的代替方法，与
一、操作目的 家兔热原检查法相比，有快速、灵敏、重现
性好、简便易行等优点，并有利于热原检查 标准化。
二、操作原理
鲎,属节肢动物，肢口纲。在3亿中前的泥盆纪末期，鲎就问世 了，堪称海洋里的远古遗民。鲎是用鳃呼吸的节肢动物,目前 世界上仅有4种：中国鲎、美洲鲎、马来鲎和圆尾鲎。
大肠埃希菌
＋、＋、－、－
产气杆菌
－、－ 、 ＋、＋
I、M、VI、C生化试验录像
2.合成代谢产物及临床意义
除了合成 多糖、蛋 白质、脂 肪、核酸、 细胞壁及 各种辅酶 等自身成 分外
(1) 热原质 (2) 毒素与酶 （3）色素 （4）抗生素
（5）细菌素
(1)热原质
热原质即菌体中的脂多糖，大多是革兰氏阴性 菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故 名热原质。热原质耐高热，高压蒸汽灭菌（121℃， 20′ ） 不 能 使 其 破 坏 ， 加 热 （180℃4h;250℃45′;650℃1′）才使热原质失去作 用。热原质可通过一般细菌滤器，但没有挥发性， 所以，除去热原质最好的方法是蒸馏。药液、水等 被细菌污染后，即使高压灭菌或经滤过除菌仍可有 热原质存在，输注机体后可引起严重发热反应。生 物制品或注射液制成后除去热原质比较困难，所以， 必须使用无热原质水制备。
▪ 鲎的血变形细胞中含有两种物质，即高相对分子质量的凝固 酶原和凝固蛋白原，凝固酶原被内毒素激活转化成具有活性 的凝固酶，在凝固酶的酶解作用下，将凝固蛋白原转化成凝 固蛋白，凝固蛋白又通过交联酶作用互相聚合而形成牢固的 凝胶。可简单表示如下： 内毒素
(2)毒素与酶
细菌可产生内、外毒素及侵袭性酶，与细菌的致 病性密切相关。
内毒素即革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性成 分为类脂A。菌体死亡崩解后释放出来。外毒素是由 革兰阳性菌及少数革兰阴性菌在生长代谢过程中释 放至菌体外的蛋白质。具有抗原性强、毒性强、作 用特异性强的突出特点。
某些细菌可产生具有侵袭性的酶，能损伤机体组 织，促进细菌的侵袭、扩散，是细菌重要的致病因 素，如链球菌的透明质酸酶等。