甲基化定量试剂盒与羟甲基化DNA定量试剂盒产品特点--Epigentek
超好用的DNA甲基转移酶(DNMTs)定量试剂盒

超好用的DNA甲基转移酶(DNMTs)定量试剂盒广义上的DNA甲基化是指DNA序列上特定的碱基在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)的催化作用下,以s一腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)作为甲基供体,通过共价键结合的方式获得一个甲基基团的化学修饰过程。
这种DNA甲基化修饰可以发生在胞嘧啶的C一5位、腺嘌呤的N一6位及鸟嘌呤的N一7位等位点。
许多研究发现,DNA甲基化模式的改变导致了肿瘤的发生。
在很多肿瘤中都发现DNMTs的表达异常。
这说明DNMTs在生物体内发挥着重要的作用。
DNMTs与癌症的关联艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐全球最畅销的DNMT1, DNMT3A, DNMT3B定量试剂盒:*每个试剂盒均被大量文献引用,见页面底部DNMT酶活性分析试剂盒原理【DNMT1为例】:EpiQuik的DNA甲基转移酶1检测试剂盒专为定量检测组织或细胞中的总Dnmt1而设计。
在检测实验中,微孔上包被有本公司特有的Dnmt吸附基质。
上样后,样品中的Dnmt1结合到基质上。
被结合的Dnmt1能被特异性的Dnmt1抗体识别,可以通过类酶联免疫吸附反应后测定其比色度来定量,Dnmt1的量与显色程度成线性关系。
DNMT酶活性分析试剂盒优势:1、操作十分快捷,3小时内可完成2、安全独创的比色度检测方法,不接触放射性物质,无需进行抽提和色谱分析3、96孔板模式使研究人员能根据自己需要选择手工或是高通量分析4、操作简便、结果可靠、统一的分析条件5、适用于人与小鼠样品《DNMT1试剂盒已发表文章》Swathy B et. al. (January 2018). Understanding the influence of antipsychotic drugs on global methylation events and its relevance in treatment response. Epigenomics.Li YC et. al. (September 2017). Procaine is a specific DNA methylation inhibitor with anti-tumor effect for human gastric cancer.J Cell Biochem.Rajpathak SN et. al. (February 2017). Micro RNAs and DNA methylation are regulatory players in human cells with altered X chromosome to autosome balance. Sci Rep. 7:43235.Cechinel LR et. al. (October 2016). Treadmill exercise induces age and protocol-dependent epigenetic changes in prefrontal cortex of Wistar rats. Behav Brain Res. 313:82-7.Wu F et. al. (March 2016). Oral administration of Schisandra chinensis extract suppresses Dnmt1 expression in Kunming mice ovaries Genes Genom. :1-8.Mytych J et. al. (February 2016). 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BTG3 tumor suppressor gene promoter demethylation, histone modification and cell cycle arrest by genistein in renal cancer. Carcinogenesis. 30(4):662-70.Roll JD et. al. (January 2008). DNMT3b overexpression contributes to a hypermethylator phenotype in human breast cancer cell lines. Mol Cancer. 7:15.. D. Roll et. al.(January 2008). DNMT3b overexpression contributes to a hypermethylator phenotype in human breast cancer cell lines Molecular Cancer.7(15)Full PDF Article《DNMT3A试剂盒已发表文章》Swathy B et. al. (January 2018). Understanding the influence of antipsychotic drugs on global methylation events and its relevance in treatment response. Epigenomics.Coco M et. al. (November 2017). Effects of age and sex on epigenetic modification induced by an acute physical exercise.Medicine (Baltimore). 96(44):e8325.Parira T et. al. (September 2017). Novel detection of post-translational modifications in human monocyte-derived dendritic cells after chronic alcohol exposure: Role of inflammation regulatorH4K12ac. Sci Rep. 7(1):11236.Mytych J et. al. (February 2016). Prolonged Effects of Silver Nanoparticles on p53/p21 Pathway-Mediated Proliferation, DNA Damage Response, and Methylation Parameters in HT22 Hippocampal Neuronal Cells. Mol Neurobiol.Horsburgh S et. al. (December 2015). Exercise-conditioned plasma attenuates nuclear concentrations of DNA methyltransferase 3B in human peripheral blood mononuclear cells. Physiol Rep. 3(12) MajidS et. al. (April 2009). BTG3 tumor suppressor gene promoter demethylation, histone modification and cell cycle arrest by genistein in renal cancer. Carcinogenesis. 30(4):662-70.Roll JD et. al. (January 2008). DNMT3b overexpression contributes to a hypermethylator phenotype in human breast cancer cell lines. Mol Cancer. 7:15.《DNMT3B试剂盒已发表文章》Coco M et. al. (November 2017). Effects of age and sex on epigenetic modification induced by an acute physical exercise.Medicine (Baltimore). 96(44):e8325.Cechinel LR et. al. (October 2016). Treadmill exercise induces age and protocol-dependent epigenetic changes in prefrontal cortex of Wistar rats. Behav Brain Res. 313:82-7.Mytych J et. al. (February 2016). Prolonged Effects of Silver Nanoparticles on p53/p21 Pathway-Mediated Proliferation, DNADamage Response, and Methylation Parameters in HT22 Hippocampal Neuronal Cells. Mol Neurobiol.Horsburgh S et. al. (December 2015). Exercise-conditioned plasma attenuates nuclear concentrations of DNA methyltransferase 3B in human peripheral blood mononuclear cells. Physiol Rep. 3(12) Zhao J et. al. (January 2013). Genome-wide identification of Epstein-Barr virus-driven promoter methylation profiles of human genes in gastric cancer cells. Cancer. 119(2):304-12.Jin Y et. al. (June 2011). Homocysteine levels impact directly on epigenetic reprogramming in astrocytes. 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一种用于DNA甲基化检测的试剂盒与方法及应用[发明专利]
![一种用于DNA甲基化检测的试剂盒与方法及应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/14e4065626d3240c844769eae009581b6bd9bd94.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810697732.9(22)申请日 2018.06.29(71)申请人 上海交通大学地址 200240 上海市闵行区东川路800号(72)发明人 康亚妮 赵小东 邵志峰 毛湛睿 金戈旋 (74)专利代理机构 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220代理人 郑立(51)Int.Cl.C12Q 1/6806(2018.01)(54)发明名称一种用于DNA甲基化检测的试剂盒与方法及应用(57)摘要本发明公开了一种用于DNA甲基化检测的试剂盒,其至少包括生物素标记的甲基化的λ-DNA和链霉素包被的磁珠。
还公开了该试剂盒在少量DNA样品甲基化检测中的应用,样品量可低至1ng。
本发明还公开了一种DNA甲基化检测的方法及其应用。
本发明提供的技术方案显著降低了DNA甲基化检测所需的最低起始样品量,且不需要特定的试剂盒和实验设备,节省成本,具有较高的普适性。
在富集甲基化DNA的同时不引入外源DNA污染,若采取文库构建和高通量测序的检测方法时不会受到外源DNA信息的影响,有利于进一步降低测序成本,提高数据质量。
权利要求书1页 说明书6页序列表2页 附图3页CN 108796039 A 2018.11.13C N 108796039A1.一种用于DNA甲基化检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒至少包括生物素标记的甲基化的λ-DNA和链霉素包被的磁珠。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括生物素标记的未甲基化的λ-DNA。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒在少量DNA样品甲基化检测中的应用,其特征在于,所述少量DNA样品的样品量低至1ng。
4.一种DNA甲基化检测的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:步骤1、制备生物素标记的λ-DNA;步骤2、将部分步骤1中制备得到的所述生物素标记的λ-DNA进行甲基化处理;步骤3、将生物素标记的未甲基化的λ-DNA和生物素标记的甲基化的λ-DNA按比例加入到片段化的DNA样品中,进行甲基化DNA的富集处理;步骤4、用链霉素包被的磁珠除去生物素标记的λ-DNA,纯化得到甲基化的DNA样品;步骤5、对所述甲基化的DNA样品进行甲基化水平检测。
易基因|表观技术靶基因DNA甲基化和羟甲基化测序定制精准检测

易基因|表观技术靶基因DNA甲基化和羟甲基化测序定制精准检测DNA甲基化是最早被发现、也是研究最深入的表观遗传调控机制之一。
目前研究中常用的DNA甲基化测序方法包括全基因组(WGBS、oxWGBS等)、简化基因组(dRRBS、RRBS、XRRBS等)、靶向基因组(液相捕获)、靶向基因(扩增子)和850K芯片等,适用于多种不同应用场景。
(易基因可提供以上所有DNA甲基化测序服务)那么基于靶基因的DNA甲基化和羟甲基化测序是怎样的呢?一起来看看吧!EGENE靶基因DNA甲基化和羟甲基化测序亚硫酸盐靶基因扩增高通量测序(Bisulfite amplicon sequencing,BA-seq)是针对已有目标基因panel组合,运用易基因自主研发的甲基化特异性多重PCR引物设计软件,对亚硫酸盐转化或氧化亚硫酸盐转化后的目标基因多重扩增,建库后进行超高深度(1000X以上)甲基化和/或羟甲基化精准检测。
BA-seq技术优势:➢超高深度亚硫酸盐甲基化测序,检测准确性极高,完胜传统BSP测序;➢实现近百个基因的多重扩增,检测通量高,优于焦磷酸甲基化测序;➢检测灵敏度高,可准确检测到样本中低于1%的甲基化水平;➢平行化学氧化后亚硫酸盐测序,甲基化和羟甲基化精准检测;➢样本需求量低,20ng基因组DNA可实现多基因扩增;➢适用范围广,对基因组DNA、FFPE样本、游离cfDNA等样本均适用;➢检测费用显著低于现有技术、快周期、超高性价比研究案例Vitamin C Prevents Offspring DNA Methylation Changes Associated with Maternal Smoking in Pregnancy靶基因DNA甲基化测序验证补充维C可减少后代因母亲妊娠期吸烟而发生的DNA甲基化变化1、背景妊娠期吸烟可能导致婴儿出生后终生肺功能下降。
此前已有不少研究描述了孕妇吸烟相关的的DNA甲基化变化,如在分娩时的胎盘和脐血、胎儿肺以及儿童时期的口腔上皮和血液中。
EpiMethy DNA 甲基化检测试剂 说明书

EpiMethy TM DNA甲基化检测试剂盒用户手册EpiMethy TM B isulfite Conversion KitUser Manual产品简介:DNA甲基化是一种表观遗传修饰,DNA甲基转移酶(Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作为供体,将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶。
CG二核苷酸是最主要的甲基化位点,它在基因组中呈不均匀分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化三种状态。
DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。
DNA甲基化对人类表观遗传、胚胎发育、基因印记、等位基因失活及肿瘤发生发展都起到重要作用。
EpiMethy TM Bisulfite Conversion Kit是一款用于DNA快速重亚硫酸盐转化处理的专用试剂。
基因组DNA双链变性结链后,在重亚硫酸盐的作用下序列中为甲基化的胞嘧啶(C)转变成尿嘧啶(U),而甲基化的C保持不变。
通过后续的各种检测手段,如MSP、BSP、HRM、Pyroseqencing及甲基化芯片等,将甲基化状态的差异转变成DNA序列的差异被检测出来,从而确定基因的CpG甲基化状态。
本试剂盒提供了重亚硫酸盐转化实验所需试剂和DNA纯化回收过程中所需的优化缓冲液,可获得臻于完美的DNA转化效果和回收效率。
与其他同类试剂盒相比,具有如下优势:�适用于各种样本类型。
�在3小时内完成富含GC的DNA的完全转化,转化效率高达99.9%。
�独特的保护剂最大限度地避免DNA降解,保障了后续的检测实验的需求。
�优化的缓冲液体系能最大限度的提高处理后的DNA回收效率。
�优化的操作步骤适合多种起始样本和起始量。
本产品仅供研究使用产品包装:EpiMethy TM B isulfite Conversion Kit(Kit Size)MD2301-1(10次)MD2301-5(50次)M-Conversion Reagent1Tube5TubesM-Dilution Buffer300ul 1.5mlM-Dissolving Buffer100ul500ulM-Binding Buffer6ml30mlM-Wash Buffer6ml30mlM-Desulphonation Buffer2ml10mlM-Elution Buffer400ul2mlF-Spin Columns10ct.50ct.Collection Tubes10ct.50ct.Instruction Manual11贮藏条件:室温保存。
QIAGEN DNA甲基化试剂盒说明中文版

QIAGEN EpiTect® Bisulfite•重亚硫酸盐处理DNA时,需要经高盐浓度、高温和低PH条件,会导致DNA断裂和片段化,并在随后的纯化过程中丢失,所以需要大量的input DNA•重亚硫酸盐转化未甲基化的胞嘧啶,转化率超过99%•Bisulfite Mix 足够做8个反应,用时要将Bisulfite Mix溶于800μl RNase-free water中,溶解的Bisulfite Mix 在-20℃可以保存4周•DNA Protect Buffer 能保护重亚硫酸盐处理的DNA在高温、低ph条件下被片段化•Carrier RNA 能提高小量DNA(小于500pg,体积大于40μl)绑定在回收柱滤膜上的效率,帮助核酸沉淀;总量大于100ng的基因组DNA没有必要加Carrier RNA•EpiTect Bisulfite Kit 在-20℃可以保存3年;可以适用于大范围的DNA量,input DNA范围为1ng~2μg;模板DNA片段范围可以在500bp~30kb之间DNA量在1ng~2μg之间,体积20μl以上开始前的准备重点:•Bisulfite Mix 足够做8个反应,如果样本少于8个,可以把溶解的Bisulfite Mix 保存于-20℃,4周内并不会影响其性能•DNA Protect Buffer在加入DNA–Bisulfite Mix后会由绿变蓝(step 2),表明溶液混合很充分且PH值正确•所有的离心分离步骤均在室温(15–25°C)下完成开始前准备的东西:•加入30ml乙醇(96%~100%)到Buffer BW中,室温(15–25°C)保存,使用之前摇匀•加入27ml乙醇(96%~100%)到Buffer BD中,2~8℃保存,使用之前摇匀,使用之后要立即盖上盖子。
储存一段时间后底部可能会出现白色沉淀,沉淀不影响Buffer BD的性能,但是还是要避免将沉淀吸到回收柱中。
甲基化试剂盒中文说明书

产品详细描述:在 3 小时内完全转化富含 GC的 DNA. 两次加热变性的反应步骤简化了由未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶的过程 .没有DNA 沉淀.并且通过柱层析一步完成DNA的纯化和脱硫.洗脱的超纯 DNA 对于一系列的分子生物分析是非常理想的。
描述EZ DNA Methylation-Gold KitTM 是我们 EZ DNA Methylation Kit产品的改进版. EZ DNA Methyl ation-Gold Kit 将 DNA 变性过程和亚硫酸氢盐转变过程转化为一步.此步骤采用温度变性来取代以前方案中使用氢氧化钠的化学变性过程. 经过DNA亚硫酸氢盐转变,试剂盒可大量回收到 DNA .两种试剂盒都是基于在胞嘧啶与亚硫酸氢钠之间发生的使胞嘧啶转变为尿嘧啶的三步反应. EZ DNA Meth ylation-Gold 与 EZ DNA Methylation Kits 都采用创新的柱内脱磺酸技术来减少不必要的DNA沉淀步骤以便每次都可以提供给研究人员较好的结果.试剂盒的设计可以减少模版降解和纯化过程中的DNA损失, 并且完全转化未甲基化的胞嘧啶.回收的DNA对于PCR扩增、限制性内切酶消化、测序、微阵列等下游分析是很理想的. 右图是 EZ DNA Methylation-Gold Kit所呈现出的结果.在经过亚硫酸氢盐处理后的DNA 测序结果. 使用EZ DNA Methylation-Gold Kit处理的甲基化的Cm pG (在 #5核苷酸位点)DNA.回收的DNA通过PCR来扩增并且直接测序.在 #5位置上甲基化的胞嘧啶仍然保持完整,当未被甲基化的胞嘧啶 (i.e., positions #7, 9, 11, 14 and 15)通过亚硫酸氢盐处理完后全部转化为尿嘧啶.试剂制备CT Conversion Reagent的制备试剂盒中所提供的CT Conversion Reagent是固体混合物并且一定要在首次使用前制备好. 通过添加 900 μl 水, 50 μl 的 M-Dissolving Buffer, 和 300 μl 的 M-Dilution Buffer 到一管的CT Conversion Reagent中. 在室温下溶解并且震荡10分钟或在摇床上摇动10分钟. 如果看到没有溶解的试剂是很正常的, 因为在溶液中的 CT Conversion Reagent 已经达到饱和状态.在使用之前将 CT Conversion Reagent 溶液在室温 (20°C -30°C)下避光保存.每管的 CT Conversion Reagent 是针对10次 DNA 处理设计的.为了得到较好的结果, CT Conversi on Reagent 应当在制备后立即使用.如果不立刻使用的话, CT Conversion Reagent 溶液可以在-2 0°C存储1星期.而且在使用之前存储的 CT Conversion Reagent 溶液一定要在室温下解冻并且通过震动或颠倒2分钟来混合. CT Conversion Reagent 对光很敏感,所以要尽量减少在光下的暴露.M-WASH BUFFER的制备添加24ml (对于200次的D5006应为96ml) 100%的乙醇到M-WASH BUFFER中来制备最终可以使用的M-WASH BUFFERProtocol:每次制备的DNA 范围在 500 pg 到 2 μg之间. 最佳量为200-500 ng.在PCR管中添加 130 μl 的 CT Conversion Reagent 到每 20 μl DNA 样品中. 如果 DNA 样品的体积小于 20 μl, 则用水来弥补差量. 通过轻弹试管或移液器操作来混合样品.For Example: 4 μl DNA 样品, 加入16 μl 水, 130 μl CT Conversion ReagentNote: 对于 DNA 体积 >20 μl, 就要调整 CT Conversion Reagent的制备过程. 对于每增加 10 μl DNA样品体积来说,水的量就要随之减少 100 μl. 例如, 40 μl DNA 样品, 就要添加 700 μl来制备 CT Conversion Reagent. DNA 样品的最大体积为每次转化反应50 μl. 不要调整 M-Diss olving Buffer 或 M-Dilution Buffer的体积.将样品管放到循环变温器并按以下步骤操作:1. 98°C 放置 10 分钟2. 64°C放置2.5 小时3. 立刻进行下述操作或者在4°C 下存储(最多20小时).添加 600 μl 的 M-Binding Buffer 到 Zymo-Spin IC Column 中,并将柱放如试剂盒所提供的Col lection Tube中.装填样品 (从步骤 2)到 Zymo-Spin IC? Column 含有 M-Binding Buffer. 盖上盖将柱颠倒数次来混合样品.全速 (>10,000 x g)离心 30 秒. 去除流出液.添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 到柱中. 全速离心30 秒.添加 200 μl 的 M-Desulphonation Buffer 到柱中并且在室温 (20 °C- 30 °C) 下放置 15-20 分钟. 在培养后, 全速离心 30 秒.添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 到柱中. 全速离心30 秒. 再添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 并且离心 30 秒.直接添加 10 μl 的 M-Elution Buffer 到柱基质中. 将柱放置在 1.5 ml 的管中. 全速离心来洗脱 DNA.DNA 可立刻进行分析或储存在低于-20°C 下以备以后使用. 我们建议您对于每次PCR使用 2 - 4 μl洗脱的 DNA.。
DNA甲基化——试剂盒+抗体解决方案

DNA甲基化——试剂盒+抗体解决方案DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。
所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。
大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。
一、DNA甲基化修饰相关产品DNA甲基化修饰研究手段——DNA亚硫酸盐转化,使用亚硫酸氢钠将胞嘧啶转化为尿嘧啶,而5-甲基胞嘧啶(5-mC)保持完整。
即未甲基化的胞嘧啶残基被脱氨成尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶(5-mC)残基不受影响,这使PCR扩增可将尿嘧啶视为胸腺嘧啶,将5-mC或5-hmC识别为胞嘧啶。
这样便能够区分甲基化和未甲基化的胞嘧啶残基,从而提供有关DNA甲基化区域的单核苷酸分辨率信息。
要成功地进行DNA甲基化研究,必须进行完全转化,并减少通常由于严酷的化学反应而导致的DNA降解量。
基于亚硫酸氢盐和亚硫酸氢钠的方法是用于研究DNA甲基化并帮助制备基因组DNA进行基因特异性DNA甲基化分析的常用方法。
亚硫酸氢盐转化后通常是下游应用,在基因特异性基础上分析DNA甲基化的流行下游方法包括亚硫酸氢盐测序,甲基化特异性PCR(MS-PCR)和基于甲基化的微阵列。
整个转换过程中,高质量的DNA是至关重要的,因为转换过程中的酸性物质会破坏DNA。
而对于大规模亚硝酸氢盐转化实验,高通量选择对于节省时间和降低成本至关重要。
此外,还有高通量DNA修饰试剂盒,EpiNext高灵敏度亚硫酸氢盐测序试剂盒(Illumina),一步法DNA 修饰试剂盒,Methylamp通用甲基化DNA试剂盒,Methylamp全细胞亚硫酸氢盐修饰试剂盒等。
二、甲基化DNA PCR & NGS 分析试剂盒上面我们了解了DNA甲基化修饰相关的产品,也了解了DNA经过修饰后适用于下游分析:如亚硫酸氢盐测序、甲基化特异性PCR(MS-PCR)和基于甲基化的微阵列。
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甲基化DNA定量试剂盒与羟甲基化DNA定量试剂盒产品特点
--Epigentek
启维益成提供---甲基化DNA定量试剂盒(比色法)
MethylFlash Methylated DNA Quantification Kit (Colorimetric)
产品优点:
1、整个比色法检测实验的操作简单易学,方便快捷,能定量检测全基因组的DNA甲基化
水平,只需要4小时就能完成实验。
2、新颖的试剂盒组分使背景信号极低,去掉了平板封闭并使分析更加地简单、精确、可靠、
稳定。
3、灵敏度高,能在50ng的基因组DNA中检测出低至0.2ng的甲基化DNA。
4、优化的抗体和增强溶液对检测5mC具有高度特异性,不会对未甲基化的胞嘧啶产生交
叉反应,且在指定的样品DNA的浓度范围内与羟甲基胞嘧啶无交叉反应或有轻微的交叉反应
5、试剂盒提供通用阳性和阴性对照,能用于定量检测任何物种来源的甲基化DNA,包括
哺乳动物、植物、真菌、细菌以及病毒;
6、96孔板模式使分析具有灵活性,您可以根据自己的需要选择用手工或者高通量分析。
启维益成提供---甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)
MethylFlash Methylated DNA Quantification Kit (Fluorometric)
产品优点:
甲基化定量试剂盒荧光法的产品优点与比色法基本相同,不同点为灵敏度不同,比色法能在50ng的基因组DNA中最低检测出0.2ng的甲基化DNA;荧光法能在20ng的基因组DNA中最低检测出50pg的甲基化DNA。
启维益成提供---羟甲基化DNA定量试剂盒(比色法)
MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit (Colorimetric)
关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的,由胞嘧啶修饰而来。
5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同,尽管到现在为止还不确知其功能。
有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。
5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA
甲基化信息,也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。
在Epigentek的MethylFlash技术之前,我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC。
5-hmC 和5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序,这些技术都不适合用来检测5-hmC,因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。
为了解决这个问题,Epigentek研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。
本试剂盒提供了一种经济有效的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶,并且区分5-hmC, 5-mC和C,使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息,也能够在新样品中寻找DNA 羟甲基化。
本试剂盒有以下优点和特性:
1、简单易学方便快捷的比色分析技术。
整个检测过程只需要3小时45分钟。
2、灵敏度高,在50ng的基因组DNA中最低检测出40pg的羟甲基化DNA。
3、高度的专一性,不与甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶结合。
5-hmC被专一地检测。
4、试剂盒中还提供有适用于定量所有物种羟甲基化DNA的通用阴性对照和阳性对照。
5、96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量。
6、简单、可靠、检测条件恒定。
启维益成提供---羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)
MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit (Fluorometric)
羟甲基化DNA定量试剂盒的比色法与荧光法的大部分优点相同,不同点为:灵敏度不同,比色法在50ng的基因组DNA中最低检测出40pg的羟甲基化DNA;荧光法在20ng的基因组DNA中检测出10pg的羟甲基化DNA。
整个检测过程的时间不同:比色法整个检测过程需要时间为3小时45分钟;荧光法整个检测时间需要3小时20分钟。