高三生物二轮复习 实验专题

高三生物二轮复习--实验专题围绕一中心：以学生为中心，少讲精练坚持二原则：充分利用教材与学生已有的资料；充分研究海南生物高考考纲与高考真题明确三（考试）方向：实验设计（整体）；实验分析（现象结果）；实验评价（方法过程）第1讲必修教材实验概述显微镜的结构与使用1．高倍镜的使用步骤：（1）在低倍镜下找到物像，将物像移至视野正中央，（2）转动［7］转换器，换上高倍镜。

（3）调节［11］光圈和［13］反光镜，使视野亮度适宜。

（4）调节［2］细准焦螺旋，使物象清晰。

2．在显微镜操作过程中的有关问题①放大倍数：目镜的放大倍数与镜头长度成反比（正比或反比），物镜的放大倍数与镜头长度成正比；放大倍数的计算方法：目镜的放大倍数×物镜放大倍数；如果某显微图标明“放大倍数：640”，这里的“640”是指长度（长度或面积）放大了640倍。

②物像移动与装片移动的关系：若希望把视野左上方的细胞移至视野中央，应将玻片移向左上方。

③异物位置的判断：异物存在的位置可能在玻片标本、目镜、物镜等；转动目镜，异物不动，转动转换器，异物仍在，则异物可能在玻片标本。

实验一：用显微镜观察多种多样的细胞1.目的要求：①使用高倍显微镜观察几种细胞（如酵母菌、水绵、叶的保卫细胞、蛙的皮肤上皮细胞等），比较几种细胞的异同点。

②运用制作临时装片的方法。

2.实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、液泡等细胞器，从而能够区别不同的细胞。

临时装片的制作（以洋葱表皮细胞临时装片制作为例）擦：擦拭载玻片和盖玻片—→滴：在载玻片中央滴一滴清水—→撕：用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜（内表皮）—→展：把撕下的内表皮浸入载玻片上的水滴中，用镊子把它展平—→盖：用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上，这样才能避免盖玻片下面出现气泡而影响观察实验二：观察植物细胞质壁分离目的要求：①初步学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。

②理解植物细胞发生渗透作用的原理。

1.实验原理原生质层包括细胞膜、液泡膜和这两膜之间的细胞质，它相当于一层半透膜。

当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞失水，使细胞壁和原生质层都会出现一定程度的收缩。

由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，二者就会逐渐分离开来。

2.选材选择紫色洋葱鳞片外（内或外）表皮作实验材料，理由是有紫色的大液泡，便于观察。

注意所选细胞必须为有大液泡的活的植物细胞，否则不会发生质壁分离。

3．方法步骤制作临时装片→观察（用低倍镜观察细胞中紫色的液泡的大小及原生质层的位置）→滴加蔗糖溶液（注意从盖玻片一侧滴入，另一侧用吸水纸吸引）→观察质壁分离现象（液泡变小，细胞液颜色深，原生质层与细胞壁分离，细胞大小基本不变）→观察质壁分离复原（用清水做复原试剂）（1）发生质壁分离现象的外因是细胞内外溶液浓度差，内因是原生质层与细胞壁的伸缩性不同。

（2）相对细胞膜，细胞壁具有什么特性？全透性。

（3）实验常用0.3g/mL的蔗糖溶液。

若浓度过高，细胞质壁分离速度很快，但会导致细胞失水过多而死亡，细胞不能发生质壁分离复原现象；若浓度过低，则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。

（4）一定浓度的硝酸钾溶液、尿素等也能导致植物细胞质壁分离，但随后植物细胞可自动质壁分离复原。

实验三观察DNA和RNA在细胞中的分布目的要求：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法。

1.实验原理：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA 呈现红色。

利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。

盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染液进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

2.实验材料：可用人的口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶内表皮细胞3.实验步骤：取材制片→水解（用8%的盐酸溶液）→冲冼涂片→染色→观察（选择染色均匀、色泽浅的区域观察）（1）取口腔上皮细胞制片：①载玻片要洁净，先在载玻片中央滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液→②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，在载玻片的液滴中涂抹几下→③将载玻片烘干（2）水解：将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用30℃水浴保温5min（3）冲冼涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s，洗去多余的盐酸（4）染色：滴2滴吡罗红甲基绿染色剂于载玻片上染色5min，吸取多余染色剂，盖上盖玻片。

（5）观察：先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察4.结论：DNA是主要存在于细胞核中，RNA主要存在于细胞质中。

实验四观察线粒体和叶绿体目的要求：使用高倍显微镜观察叶绿体、线粒体的形态和分布1.实验原理：叶绿体主要存在于植物细胞中，呈绿色，扁平的椭球形或球形，不需要染色可直接观察。

线粒体普遍存在于动植物细胞中，形态多样。

健那绿染液使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。

2.实验材料：新鲜的藓类、黑藻或菠菜的叶肉细胞（观察叶绿体）；人的口腔上皮细胞（观察线粒体）（1）藓类或黑藻叶不需要切片，可直接制作装片，因为叶片很薄。

（2）用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉，因为表皮细胞不含叶绿体，所以要稍带叶肉。

（3）藓类、黑藻的叶细胞中也有线粒体，为什么不选作为观察线粒体的实验材料？藓类、黑藻的叶细胞有叶绿体，细胞本身的颜色会干扰实验结果。

实验五：观察植物细胞有丝分裂的实验目的要求：①制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。

②观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。

1．实验原理（1）染色体易被碱性染料着色。

（2）有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。

（3）在高倍镜下，根据染色体的存在状态，识别某个细胞处于有丝分裂的哪个时期。

2．实验步骤（1）洋葱根尖的培养（2）装片的制作包括①解离②漂洗③染色④制片四个步骤。

☆解离：用盐酸与酒精混合液进行解离，目的是溶解细胞间质，使组织中的细胞分散开来。

☆漂洗：用清水漂洗，目的是洗去解离液，防止解离过度。

☆染色：用龙胆紫或醋酸洋红，使染色体着色。

☆制片：用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。

用拇指轻轻地压载玻片。

压片的目的是使细胞分散开来，避免细胞重叠，便于观察。

☆观察：先在低倍镜下找到分生区细胞（细胞呈正方形，排列紧密），移到视野中央，然后换高倍镜进行观察。

视野中数目最多是处于分裂间期的细胞，原因是间期时间最长。

可根据视野中每一时期的细胞数/计数细胞的总数，判断细胞周期中不同时期的时间长短。

实验六：观察细胞的减数分裂目的要求：识别减数分裂不同阶段的染色体形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。

1.实验材料：蝗虫♀：24，xx，个体大♂：23，xo，个体小2.方法步骤⑴低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片。

识别初级精母细胞，次级精母细胞和精细胞。

⑵先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下观察染色体的形态、位置和数目。

⑶根据观察结果，绘制减数分裂不同时期的细胞简图。

实验七：低温诱导植物染色体数目的变化目的要求：①学习低温诱导植物染色体数目变化的方法。

②理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。

1.原理：用低温处理植物组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，因而使植物细胞染色体数目发生变化。

2.化学试剂及作用：卡诺氏液：固定细胞形态改良的苯酚品红染液：使染色体染色15%的盐酸溶液：使组织细胞分散开来95%的酒精溶液：洗去固定液和解离细胞时都要用3.方法步骤：培养根尖→低温诱导→固定细胞形态→制作装片(解离→漂洗→染色→制片)→观察，比较(先在低倍镜下找到染色体形态较好的分裂相，确认某个细胞发生染色体数目变化后，移到视野中央，再换用高倍镜进行观察）。

实验一：检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质目的要求：尝试用化学试剂检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。

（一）还原糖的检测和观察1、实验原理还原糖（常见的有葡萄糖、麦芽糖、果糖等）与斐林试剂（试剂）在水浴加热（条件），生成砖红色沉淀。

2、材料：应注意选择含糖量高，颜色浅的材料。

3、斐林试剂的使用（1）斐林试剂甲液——0.1g/ml氢氧化钠溶液斐林试剂乙液——0.05g/ml硫酸铜溶液（2）使用原则——①甲乙液混合均匀后使用；②现配现用（二）脂肪的检测和观察1、实验原理脂肪可被苏丹Ⅲ（试剂）染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）2、取材（1）选择富含脂肪的生物组织或器官，如：花生种子，干种子需要浸泡；（2）若需显微镜观察，则种子要足够大，便于做徒手切片。

3、方法步骤方法一、向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察待测组织样液被染色的情况。

方法二、制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。

取材→切片→制片（染色后，用50%的酒精洗去浮色。

）→观察（三）蛋白质的检测和观察1、实验原理（1）蛋白质与双缩脲(试剂)发生作用，可以产生紫色反应；2、双缩脲试剂的使用（1）双缩脲试剂A——0.1g/ml氢氧化钠溶液，双缩脲试剂B——0.01g/ml硫酸铜溶液（2）使用原则：先加入A 液，再加入B液。

（条件：不需加热）实验二：提取和分离叶绿体中的色素目的要求：①进行绿叶中色素的提取和分离。

②探究绿叶中含有几种色素。

1、原理：提取原理：叶绿体中的色素能溶解于有机溶剂（如无水乙醇、丙酮等）。

分离原理：叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

2、方法步骤：（1）提取绿叶中色素：称取绿叶5g →剪碎置于研钵→放入少许二氧化硅和碳酸钙→加入10mL 无水乙醇→充分研磨→过滤→收集滤液（试管口用棉塞塞严）（2）制备滤纸条：将干燥定性滤纸一端剪去两个角，并在距这一端1cm 处划一铅笔线（3）画滤液细线：用 毛细吸管 吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线。

待滤液干后，再画一两次。

（4）分离色素：滤纸条轻轻插入盛有层析液的小烧杯中，用培养皿盖住小烧杯。

结果分析：色素在滤纸条上的分布如下图：（橙黄色）最快（溶解度最大） （黄色） （蓝绿色）最宽（含量最多） （黄绿色）最慢（溶解度最小）实验三：模拟尿糖的检测目的要求：学会尿糖的检测方法，检查“尿样”中是否含有葡萄糖。

1.尿糖的形成：正常情况下肾小管能将原尿中的葡萄糖重吸收回血液，所以正常人的尿液中不含糖，但肾小管的重吸收能力是有限的，当血液中的葡萄糖浓度超过了160～180mg/dL 时，有部分葡萄糖就会随尿排出，而形成糖尿。

2.成因分析：①糖尿病患者；②肾小管肾炎，导致肾小管的重吸收能力下降；③一次性吃糖过多，导致血糖浓度暂时性过高而出现偶尔性糖尿。