空气中微生物的检测

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各种粒径大小的菌落易沉降的部位及意义
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特点 a. 采集粒谱范围广，一般在0.2～20μm以上； b. 采样效率高，逃逸少 c. 微生物存活率高
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3.滤过法：使一定量的空气通过吸附剂（灭 菌生理盐水），然后培养吸附剂中的细菌， 计算出菌落数。
4.液体撞击法：和固体撞击式采样器一样， 是利用喷射气流方式将空气中的微生物粒 子采集在小体积的液体中，适用于高浓度 的空气微生物采样。
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1.对两种方法结果的比较？ 2.根据Anderson采样器的实验结果，计算空气
中微生物大小分布：以各级的菌落数占六 级总菌落数的百分比表示。
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两种方法比较
1. 沉降法测定的菌落总数要多，在实验条件下比撞击法多 24.6％。
2. 小颗粒含菌粒子在空气中稳定，不易沉降或者漂浮，撞 击法比沉降法更易采集到小粒子。
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2.撞击法 调整采样器高度为呼吸带高度于1.2～1.5m
↓ 将平皿依次放入圆盘，固定并做好标记
↓ 接通电源，开打电源开关，调整流量到28.3L/min
↓
采样5min/10min后，取出平皿，经过24h，37℃培养，计数
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分组： 4个同学一组，分别采用自然沉降法和 Anderson采样器，采样时间设为5min和 10min，比较两种采样方法的结果。
注意事项： 整个过程注意无菌操作。
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四、结果计算
1.自然沉降法
根据奥梅梁斯基建议，面积为100cm2的平板培养基，暴露 于空气中5min，于37℃温箱培养24h后所生长的菌落数相 当于10L空气中的细菌数
空气中细菌数（cfu/m 3） =1000×[(100/A) ×(5/t) ×(1/10)] ×N
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Anderson采样器（FA-1型）
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各级撞击盘捕获粒子范围及孔径大小
Ⅰ：＞7μm Ⅱ：4.7~7μm Ⅲ：3.3~4.7μm Ⅳ：2.1~3.3μm Ⅴ：1.1~2.1μm Ⅵ：0.65~1.1μm
孔径1.18㎜ 孔径0.91㎜ 孔径0.71㎜ 孔径0.53㎜ 孔径0.34㎜ 孔径0.25㎜
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公共场所空气卫生标准
图书馆、阅览室的空气卫生标准：空气细菌总数 ≤2500cfu/m3（撞击式），或≤30个/皿（沉降式）
娱乐场所的卫生标准：空气≤4000cfu/m3 幼托机构室内卫生标准：空气细菌菌落数应≤2500cfu/cm3
（沉降法）
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医院消毒卫生标准（GB 15982－1995）
3. 沉降法结果不稳定，容易受采样条件的影响。
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影响因素
1. 温度对细菌数量影响较大，温度越低，细 菌数越少。
2. 气流，不仅可以把室外的细菌带入室内， 也会将地面、墙壁的含菌粒子扬起。
3. 日光，波长为254纳米的紫外线光具有杀 菌作用
4. 湿度，湿度过低，繁殖体易趋向死亡。
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三、实验步骤
1.自然沉降法 配制琼脂培养基（已做） ↓
培养皿暴露空气中5min/10min ↓
37℃温箱培养24h ↓
计数和结果评价
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Байду номын сангаас
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采样布点原则 a. 根据室内面积进行对角线或者梅花式均匀布点，
小于50m2的房间应设3个点，50～100m2设3～5个 ；100m2以上至少5个点 b. 采样高度 和人呼吸高度一致（1.2～1.5m） c. 采样点应避开风口，离墙壁距离应大于0.5m,采样 时关闭门窗，减少人员走动
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空气中微生物数量的检测
2011.11.21
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一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、结果计算 五、结果评价
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一、实验目的和意义
掌握检测和计数空气中微生物的基本方法
掌握无菌操作技术和微生物实验的基本操 作
学习对室内空气进行初步的微生物学评价
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实验意义
= 50000N/(A×T)
A-平板面积（cm2） T-暴露时间（min）
N-平均菌落数（cfu/皿）
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2.撞击法 空气含菌量(cfu/m3)=[六级采样板的总菌数（cfu）
÷28.3（L/min）×采样时间（min）] ×1000
计算空气中微生物大小分布： 各级微生物粒子数 ％=该级菌落数/六级总菌落数
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五、结果评价
空气微生物卫生标准，是以细菌作为标准 细菌选用的指标是菌落总数，表示方法为cfu/皿
或者cfu/m3
我国现行标准是根据空气中实测细菌数和流行病学 观察结果为主要依据。
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室内空气质量标准 （GB/T18883-2002） 2500cfu/m3
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2.撞击法
Anderson采样器原理：多级筛孔型采样器
由6个带有微细针孔的金属撞击盘构成，盘下放置 有培养基的平皿，每个圆盘上有400个环形排列小 孔，由上到下孔径逐渐减小。气流从顶罩进第一
级，较小的粒子会由于动量不足随气流绕过平皿
进入下一级。经过6次撞击后，可把绝大部分微生 物采下。
空气中细菌总数常作为室内空气质量和空 气受到微生物性污染程度的指标。
用于医院、公共场所等空气质量的评价
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二、实验原理
1：自然沉降法（沉降平板法）
根据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力的 作用下，以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上， 经过24h，37℃温箱培养计算出菌落数。
特点：此法简单方便，但稳定性差，直径1～5μm 的粒子在5min中内沉降距离有限，使小粒子采集 率较低。