人C反应蛋白CRP酶联免疫分析试剂盒使用方法
人超敏C反应蛋白定量检测试剂盒 说明书
![人超敏C反应蛋白定量检测试剂盒 说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/d4e67f35182e453610661ed9ad51f01dc2815789.png)
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人超敏C反应蛋白(hs-CRP)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人超敏C反应蛋白(hs-CRP)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中超敏C反应蛋白(hs-CRP)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人超敏C反应蛋白(hs-CRP)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人超敏C反应蛋白(hs-CRP)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人超敏C反应蛋白(hs-CRP)含量。
【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL2标准品:10ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍浓缩洗涤液20mL9终止液6mL4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:10、5、2.5、1.25、0.625、0.312ng/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
CRP说明书
![CRP说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/7c8d474c69eae009581bec88.png)
C-反应蛋白(CRP)测定试剂盒(胶乳增强比浊法)使用说明书【产品名称】通用名称:C-反应蛋白(CRP)测定试剂盒(胶乳增强比浊法)英文名称:C-Reactive Protein Test Kit(Latex-Enhanced Turbidimetric Assay)【包装规格】50人份/盒;200人份/盒【预期用途】用于体外定量检测人全血/血清/血浆中的C反应蛋白含量。
【检验原理】血液中的CRP抗原与结合在胶乳颗粒表面的抗人CRP多克隆抗体结合,发生抗原抗体反应,形成胶乳-抗体-抗原结合物。
测定此结合物在630nm处的浊度,当光线通过反应悬液时发生散射并由特定蛋白分析仪检测到,散射强度与抗原抗体免疫复合物的含量成正比。
【储存条件及有效期】1、试剂盒于2℃~8℃密封保存,不得冷冻。
2、试剂盒有效期为12个月。
【适用仪器】本公司生产的QR系列特定蛋白分析仪器。
【样本要求】1、指2、血用采血针刺破手指,擦去第一滴血,从第二滴起用玻璃毛细管吸取10μl。
3、抗凝全血全血可收集在用EDTA和肝素抗凝的小管内,颠倒混匀,并按测试程序进行分析,如果测试不能立即执行,全血可以在2-8℃下贮存48小时。
3、血清取静脉血标本并分离血清,如果不立即分析,血清在2-8℃可贮存7天,在-20℃以下可贮存7个月。
4、血浆将全血标本收集到含抗凝剂(如EDTA、肝素)的试管内,从全血细胞内分离血浆应避免溶血,微量溶血不影响测试结果【检测方法】1、测量杯中应加入的试剂量2、操作步骤:(1)开机显示“请读卡”,将对应批号的磁卡置于读卡槽,读卡正确后屏幕显示该试剂名称及批号,仪器状态指示灯亮(黄绿色)。
请仔细核对。
(2)批号试剂确认后,将10μl样本加入到装有400μl反应缓冲液(R1)和搅拌子的比色杯中。
加样品时注意尽量不要产生气泡。
(3)将比色杯放入检测口,轻轻按压比色杯直到其接触到底部。
仪器自动检测到比色杯后状态指示灯灭。
(4) 当仪器显示“加入试剂[R2]”时,将80μl CRP抗体胶乳结合物(R2)加入到比色杯中。
C-反应蛋白测定试剂盒说明书
![C-反应蛋白测定试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/43d7121877c66137ee06eff9aef8941ea76e4b6d.png)
C-反应蛋白液体试剂C-REACTIVE PROTEIN (CRP)本试剂用于人血清或血浆C-反应蛋白的体外定量测定。
【订货信息】货号试剂盒规格S700021 试剂1 5×25 ml +试剂2 1×25 ml【方法】免疫浊度终点测定法。
【原理】通过抗原-抗体反应引起的透射光强度变化对C-反应蛋白浓度进行终点比浊测定。
【各组份在测定反应中的含量】试剂1:Tris 缓冲液 pH 7.5 100 mmol/LPEG,表面活性剂,稳定剂适量试剂2:Tris 缓冲液 pH 8.0 100 mmol/L抗人C反应蛋白抗体(山羊)稳定剂适量校准液(另购):稳定的人血清多点校准液,浓度见标签。
【试剂准备】试剂与校准液均为即用式。
【试剂稳定性与贮存】试剂避光存放于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
【样品】血清、EDTA处理的血浆。
样品的稳定性:在-20℃可稳定3个月(一次冻融),2℃~8℃可稳定8天。
通常浓度的抗凝剂对反应无干扰。
【注意事项】试剂中含叠氮钠,避免接触皮肤及粘膜。
校准液由志愿者血清制备,经FDA认可的方法测定,未发现HIV抗体、HBsAg,但仍须如病人样品一样小心处理。
【检测用设备】准确的移液器或加样器,试管和试管架,具定时及控温的分光光度计或生化分析仪。
【测定条件】温度37℃ 比色杯光径 1.0 cm 波长 340 nm【操作步骤】(手工操作)按下表进行【计算】通过合适的数学模型如Logit/Log拟合6点定标的校准曲线(以0.9%的NaCl溶液作为零点)。
建议使用配套的校准液,以获得最令人满意的测定范围。
【参考值范围】成人:≤8 mg/L3天新生儿:≤15 mg/L出生4天后婴儿及儿童:≤10 mg/L【病人结果可报告范围】本法的检测范围为2~250 mg/L。
如样品测定值超过250mg/L时,应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。
C反应蛋白检测操作规程
![C反应蛋白检测操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/8856909277eeaeaad1f34693daef5ef7ba0d12bd.png)
C反应蛋白检测操作规程
一、实验前准备
1.准备检测所需的试剂和仪器设备,包括CRP试剂盒、检测仪器、离心机等。
2.检查试剂盒的有效期和储存条件,确保试剂的质量。
3.准备所需的标本,可以是血清、血浆或体液等,标本需要保存在干燥、避光和低温的环境中。
二、操作步骤
1.取出所需的标本,将标本室温下放置15-30分钟,让其回温。
2.打开CRP试剂盒,将试剂盒中的试剂和标本(100μl)混合均匀。
3.将试剂和标本混合液输送到试剂盒中的孔道中,注意不要溢出。
4.将试剂盒放入检测仪器中,启动检测仪器进行检测。
5.等待检测结果,根据仪器的提示进行数据读取和记录。
三、数据处理
1.检测仪器会输出数值型的结果,将结果记录下来。
2.根据所使用的仪器设备,可以参考相应的参考范围,判断检测结果是否在正常范围内。
3.如果检测结果超出正常范围,则可能存在炎症反应,需要进一步的临床检查和诊断。
四、实验后处理
1.关闭检测仪器,清理试剂盒和仪器,按照相关的处理方法处理废弃物。
2.将数据记录保存,并整理相关实验记录。
3.对实验过程中出现的问题进行总结,记录并反馈给相关人员。
4.定期对仪器进行维护和保养,确保其正常运行。
以上是C反应蛋白检测的基本操作规程,需要注意的是,在进行CRP 检测时,应遵循一定的操作规范,确保实验的准确性和可靠性。
同时,在实验前准备和实验后处理中,需要注意安全操作,避免对人员和环境造成伤害。
人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0
![人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0](https://img.taocdn.com/s3/m/038efc83e009581b6ad9eb36.png)
人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0 即用10-1136-0196人份试剂由瑞典Mercodia AB制造用于标签上的标识的说明预期用途C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)提供了一种人血清、血浆、尿液样本中C肽的定量检测方法。
本试验综述和说明胰岛β细胞功能的定性与定量评估不仅用于糖尿病自然历史的诊前和诊后研究,也在临床上作为选择正确疗法的导向。
外周胰岛素不能用于评估β细胞功能,鉴于门静脉循环使得肝脏吸收的大量化和复杂化,并且胰岛素试验不能区分内源性胰岛素和外源性胰岛素。
胰岛β细胞内的胰岛素原可裂解为1分子的C肽和1分子的胰岛素,C肽以和胰岛素等摩尔浓度量释放到循环中,相比胰岛素而C肽最低限度被肝脏吸收,因此,外周C肽浓度更能反映β细胞的分泌量,比胰岛素更准确。
尿液中C肽含量与血浆中C肽含量相关,但个体内和人体间存在很高的差异性,所以测定β细胞功能不够精确。
检测程序的原理C肽检测试剂盒(酶联免疫法)是一种固相双表位酶联免疫试剂。
它基于双夹心技术,两单克隆抗体分别结合在C肽分子的抗原决定簇上。
在孵育过程中,样本中的C肽与结合在微孔(板)中的C肽抗体和酶标C肽抗体反应。
洗涤移去非结合的酶标抗体。
结合的偶联物(标记物)通过与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)反应而被检测到。
加入酸后反应终止,然后通过分光光度计(酶标仪)读取反应的终点。
警告与注意事项●用于体外诊断。
●不能让反刍动物或猪接触到本试剂盒的内容物及其残余物。
●本试剂盒的终止溶液含有0.5M的硫酸。
按常规预防措施处理危险化学品。
●所有的患者样本都应按潜在传染物处理。
要求但未提供的材料●配备相应的移液管(重复移取加入酶结合物溶液、试验缓冲液、TMB底物和终止溶液)●用于试剂制备的试管、烧杯和量筒●重蒸水●磁力搅拌器●涡轮混合器●酶标仪(含450nm滤光片)●平板振荡器(建议速率700-900循环/分钟,轨道运动)●微孔板(酶标板)洗涤设备试剂各Mercodia胰岛素ELISA检测试剂盒(10-1128-01)都包含96孔的试剂,足够用于双份测试的42个样本、1个校准曲线。
酶联免疫试剂盒实验操作规程及注意事项
![酶联免疫试剂盒实验操作规程及注意事项](https://img.taocdn.com/s3/m/8a49d2a1dd3383c4bb4cd23f.png)
操作规程:溶液配制1、针对呋喃唑酮、呋喃它酮、氯霉素等试剂盒,他们的1X洗液、1X样品稀释液、终止液是通用的。
检测数量大的情况下可以大量配制洗液、样品稀释液等,一般建议一个礼拜重配一次。
2、可以或需要前处理前配制的溶液:呋喃类:缓冲溶液、样品稀释液、1M HCL、1M NaOH、10mM邻硝基苯甲醛、洗涤工作液氯霉素:样品稀释液、洗涤工作液3、检测时配制的溶液:呋喃类:A、B液需在洗板前配制好,并混合均匀。
氯霉素:酶结合物工作液、A B液样本处理呋喃类:1、1g组织样本+4ml水+0.5ml 1M HCL+400ul 10nM邻硝基苯甲醛,剧烈涡动1min;2、60℃温箱孵育1h,然后拿出来涡动30s,继续孵育0.5h;3、依次加入5ml缓冲溶液、400ul 1M NaOH、6ml乙酸乙酯;4、剧烈涡动1min后4000g离心10min;5、取3ml上清液50-60℃氮气吹干,加入2ml正己烷,再加入1ml样品稀释液,高速涡动30s;6、4000g以上,离心5min,去上层及中间层杂质,取下层液体待测。
氯霉素:1、3g样品+ 6 mL 乙酸乙酯,充分涡动1 min后4000 g 离心 10 min;2、取 4 mL 上层乙酸乙酯50-60℃氮气吹干,加入2 mL正己烷,充分涡动10 s,再加入 1 mL 样品稀释液,低速涡动 1 min;3、4000 g 以上,离心 5 min,完全弃去上层正己烷及中间层杂质,取50 µL 进行检测。
检测过程呋喃唑酮:1、加50ul标准品/样品+50ul酶标二抗+50ul抗体工作液后室温(23-27℃)反应30min;2、每孔加260ul洗涤工作液洗板,共洗4次,拍干,加入混合好的100ul AB液,室温下避光反应15-20min(看颜色深浅),加入50ul终止液后读板。
呋喃它酮:1、加50ul标准品/样品+50ul酶结合物后室温(23-27℃)反应30min;2、每孔加260ul洗涤工作液洗板,共洗4次,拍干,加入混合好的100ul AB液,室温下避光反应15-20min(看颜色深浅),加入50ul终止液后读板。
人C-jun酶联免疫分析试剂盒使用方法
![人C-jun酶联免疫分析试剂盒使用方法](https://img.taocdn.com/s3/m/e20eab2af111f18583d05ad0.png)
人C-jun酶联免疫分析试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T3U/L – 80U/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-jun含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-jun水平。
用纯化的人C-jun抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-jun,再与HRP标记的C-jun抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-jun呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C-jun浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书
![人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/ec3b0f423c1ec5da50e27040.png)
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因子(CRP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的转化生长因子(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子(CRP),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转化生长因子(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C反应蛋白(CRP)浓度。
试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:100ng/ml 1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗OT抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP 1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)试剂盒组成:3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人C反应蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤:1. 使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul 于反应孔、加入待测样品50 ul 于反应孔内。
人C反应蛋白CRPELISA试剂盒使用说明书
![人C反应蛋白CRPELISA试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/a95f7937a76e58fafab003d5.png)
人C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒首选森贝伽。
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人C-反应蛋白(CRP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C-反应蛋白(CRP)的含量。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
人C-反应蛋白CRP酶联免疫分析试剂盒使用方法
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人C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T30μg/L -800μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中C-反应蛋白(CRP)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
C反应蛋白(CRP)检测操作规程
![C反应蛋白(CRP)检测操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/b7e4445d3c1ec5da50e270fc.png)
C反应蛋白(CRP)检测操作规程1.目的C-反应蛋白(CRP)是急性相的反应物质,在临床应用比较广泛。
在一些领域较常规检查更敏感,特异性较高,它可以辅助细菌与非细菌感染间的鉴别,判断组织炎症或损伤的程度,而且有利于观察患者对治疗的反应及术后监测。
虽然CRP浓度的改变仅反映了疾病的非特异性变化,但对临床疾病的诊断、鉴别诊断及疗效的观察上均有重要的参考意义。
2.检测原理和方法hsCRP检测是一项基于免疫荧光定量检测技术,干化学层析法。
将检测缓冲液和血样样本在检测瓶中进行混合,缓冲液中的荧光标记抗hsCRP抗体和血样中的hs-CRP抗原结合形成抗原抗体符合物。
当混合样本被放到反应板的样本上并通过毛细血管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上,该复合物被检测带上的抗hsCRP抗体所捕获。
因此,血液样本中的hsCRP 越多,测试带上的复合物积聚的越多。
荧光抗体的信号强度反应了被捕获的hsCRP数量,经过i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪的处理,能够反应出血液样本中hsCRP的浓度。
默认的hsCRP检测结果用mg/L做单位。
hsCRP的检测范围和检测灵敏度分别是0.5-200mg/L 和0.1mg/L。
hsCRP检测CV值应小于10%。
3.标本3.1标本种类:新抽取的静脉血血清、血浆和全血。
3.2标本要求:3.2.1血清样本:将血液收集于一个不加抗凝剂的试管中,待其凝固后,尽快将血清吸出,以防止其溶血发生。
3.2.2血浆样本:将血液收集于一个加有EDTA的试管中(不建议使用EDTA以外的抗凝剂),待其凝固后,尽快将血浆吸出。
3.2.3使用全血:建议采集后马上进行实验。
3.3标本储存:如不能马上进行测试的话,建议将血清或血浆样本存于零下20℃的环境中。
冷冻样本必须被彻底解冻并恢复至室温后方可使用。
3.4注意:尽量避免溶血情况的发生,如发现样本已经溶血,则应重新采集样本。
4.设备韩国Boditech Med inc公司生产的i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪。
C反应蛋白测定试剂盒说明书
![C反应蛋白测定试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/ae69e311f11dc281e53a580216fc700abb6852a1.png)
C反应蛋白测定试剂盒说明书1. 简介C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是一种由肝脏合成的血浆蛋白,其水平在炎症和感染的早期阶段会显著升高。
C反应蛋白测定试剂盒是一种用于测量血液中C反应蛋白水平的试剂盒。
本说明书将详细介绍试剂盒的使用方法以及相应的操作流程。
2. 试剂和设备本试剂盒包括以下试剂和设备:•CRP标准品•反应底物•反应缓冲液•酶标板•洗涤缓冲液•试剂盒封板•打孔器•温度计•离心机•阅读器3. 操作流程步骤1:样本准备•收集血液样本并用血液收集管收集。
•在操作前,请确保所有材料和设备已经准备好,并按照要求在试剂盒封板上填写相关信息。
•将收集的血液样本放入离心机中,以提取血清。
步骤2:标准曲线制备•在酶标板中分别加入一定体积的CRP标准品,并加入相应体积的反应缓冲液。
•加入洗涤缓冲液,轻轻摇动酶标板,使样品均匀地分布在孔中。
•将酶标板放入离心机中,以提取标准曲线数据。
步骤3:样本处理•将提取的血清样本稀释到适当浓度。
•在酶标板中加入稀释后的样本,并加入相应体积的反应缓冲液。
•加入洗涤缓冲液,轻轻摇动酶标板,使样品均匀地分布在孔中。
步骤4:反应底物添加•加入一定体积的反应底物到每个孔中。
•轻轻摇动酶标板,使反应底物均匀地分布在孔中。
步骤5:反应•将酶标板放入恒温水浴中进行反应。
•根据试剂盒的要求,设置适当的反应时间和温度。
步骤6:反应停止•加入适量的反应停止液到每个孔中,停止反应。
•轻轻摇动酶标板,使反应停止液均匀地分布在孔中。
步骤7:测量和分析•使用阅读器读取酶标板中各个孔的吸光度。
•根据标准曲线,计算出每个样本的CRP浓度。
4. 注意事项•本试剂盒仅用于科研目的,不用于临床诊断。
•在操作过程中,务必佩戴手套和其他防护措施,以避免接触试剂。
•按照试剂盒要求严格控制反应时间和温度,以确保测量结果的准确性。
•在操作完成后,将废弃物和试剂正确处理,以保护环境。
5. 结论C反应蛋白测定试剂盒是一种可靠和敏感的方法,用于测量血液中C反应蛋白的浓度。
QuicKey-人 C 反应蛋白(CRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书
![QuicKey-人 C 反应蛋白(CRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/f664a672f011f18583d049649b6648d7c0c70872.png)
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)QuicKey-人C反应蛋白(CRP)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human CRP( C-Reactive Protein) ELISA Kit产品货号:E-TSEL-H000796T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。
Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆中CRP 浓度。
其它相关生物液体请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.23ng/mL。
●检测范围:0.39-25ng/mL。
●特异性:可检测样本中的人CRP ,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
背景介绍C-反应蛋白(CRP)是动物演化史中古老又高度保守的“pentraxin”蛋白家族的一员,该蛋白家族还包括所有淀粉样蛋白沉积的组成部分:血清淀粉样蛋白P组分(SAP)。
在人类和其他动物物种中,CRP是一种主要的急性期血浆蛋白,在感染或组织损伤时,其血清浓度迅速并显著升高。
CRP主要用作炎症指标。
除了肝功能衰竭,很少有已知的因素影响CRP的产生。
干扰素α抑制肝细胞中CRP的产生,这可以解释为何在病毒感染中发现的CRP相对于细菌感染中的水平相对较低。
测量和记录CRP的值在确定疾病进展或治疗效果过程中是非常有价值的。
ELISA、免疫比浊、浊度测定、免疫快速扩散、视觉凝集等都是CRP的检测方法。
人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA酶联免疫分析
![人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA酶联免疫分析](https://img.taocdn.com/s3/m/06f9dac2aaea998fcd220e00.png)
人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E08617h检测范围:0.312 ng/ml - 20 ng/ml最低检测限:0.078 ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人Hs-CRP,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中Hs-CRP 含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗Hs-CRP抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗Hs-CRP抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Hs-CRP呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120ul/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120ul/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
C反应蛋白(CRP)测试盒说明书
![C反应蛋白(CRP)测试盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/b64536ae162ded630b1c59eef8c75fbfc77d9499.png)
C反应蛋白(CRP)测试盒胶乳增强免疫比浊法R1:40ml×1 R2:10ml×1一、试剂规格R1 液体25ml×1 瓶R2 液体25ml×1 瓶二、检测原理将抗人 C 反应蛋白抗体包被在胶乳颗粒上,可与血清中的 C 反应蛋白产生凝集反应,形成抗原抗体复合物。
通过测定特定波长的吸光度值,通过多点定标校准曲线即可计算出血清中CRP 的含量。
三、储存条件及有效期在2~8℃避光密封保存可稳定12 个月。
试剂盒开瓶后避免污染,2~8℃可稳定七天。
四、适用仪器分光光度计或各种类型的全自动生化分析仪和半自动生化分析仪。
五、操作表○生化分析仪(或酶标仪)操作:①主要性能参数:主波长570nm(550nm~590nm)反应方法两点法辅助波长700nm 反应温度37℃② 操作步骤表○ 分光光度计操作:空白管 标准管 测定管 R1(μl ) 500 500 500 蒸馏水(μl ) 60 标准液(μl ) 60 待测样本(μl )60混匀,37℃孵育 3-5 分钟;R2(μl )500500500混匀,37℃孵育 10 秒后,空白管调零,0.5cm 光径,570nm 处,空白孔 标准孔 测定孔 R1(μl ) 140 140 140蒸馏水(μl ) 15标准液(μl 15待测样(μl )15混匀,37℃孵育 5 分钟;R2(μl )140140140混匀,37℃孵育 10 秒后,读取吸△光度(A1),5 分钟后,读取吸光度(A2), A=A2-A1六、计算:读取吸光度(A1),37℃孵育2分钟,读取吸光度(A2),以标准品浓度为横坐标,值为纵坐标建立标准曲线,拟合标准曲线计算,标准曲线制作见试剂盒内说明书附录。
人和肽素(CPP)酶联免疫检测说明书
![人和肽素(CPP)酶联免疫检测说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/72b5b47a5acfa1c7ab00cc04.png)
人和肽素(CPP)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于生物素双抗体夹心技术原理,来检测人和肽素(CPP)),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中和肽素(CPP)的测定。
工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人和肽素(CPP)的水平。
向预先包被了人和肽素(CPP)单克隆抗体的酶标孔中加入和肽素(CPP),温育;温育后,加入生物素标记的抗CPP抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人和肽素(CPP)的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
5.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比2复孔。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书
![人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/7e227c2e6d175f0e7cd184254b35eefdc8d315be.png)
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书引言:本文是针对人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒的使用说明书,旨在帮助用户正确、便捷地操作该试剂盒,获取准确的检测结果。
请用户在使用前仔细阅读本说明书,并按照所列步骤进行操作。
1. 产品介绍1.1 人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒是一种用于定量分析人体内C反应蛋白的试剂盒。
1.2 试剂盒内含有酶标板、标准品、检测样本预处理液、酶标抗体、酶标底物、洗涤缓冲液等。
2. 前期准备2.1 检测前,确保试剂盒在正确的保存条件下,并检查是否有损坏。
2.2 准备洗涤缓冲液,并按照说明稀释至所需浓度。
2.3 准备一次性使用的微量移液器和吸头。
2.4 样本处理前,确保样本已经充分解冻,并且清晰无杂质。
2.5 标准品的准备:按照说明书中的浓度进行稀释,得到一系列不同浓度的标准品。
3. 检测步骤3.1 样本预处理:取相应数量的样本和标准品,加入与试剂盒提供的检测样本预处理液等体积比例的去蛋白液,混合均匀,放置于室温下孵育一段时间。
3.2 洗涤:将试剂盒提供的洗涤缓冲液加入洗涤槽中,使用洗涤缓冲液洗涤酶标板中的洗涤孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.3 添加试剂:按照试剂盒中所标示的各组分体积,将样本、标准品和酶标抗体等逐步加入对应的酶标孔中。
3.4 孵育:酶标板封闭后,放置于恒温孵育箱中,按照说明书中所示的温度和时间进行孵育。
3.5 清洗:孵育结束后,将酶标板取出倒置,用洗涤缓冲液洗涤酶标孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.6 加底物:将试剂盒提供的酶标底物加入酶标孔中,按照说明书中所示的温度和时间进行反应,避免阳光直射。
3.7 反应终止:加入酶标终止液终止反应,避免经久暴露。
3.8 检测:使用酶标仪读取各孔的吸光度,记录相应数值。
4. 数据分析4.1 根据吸光度值,绘制标准曲线,使用标准曲线确定样本中的C 反应蛋白浓度。
C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求普恩光德
![C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求普恩光德](https://img.taocdn.com/s3/m/aa13677d2cc58bd63086bd37.png)
C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(酶联免疫吸附法).适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中C反应蛋白(CRP)浓度。
1.1包装规格48人份、96人份1.2 主要组成成分质控品质控范围批特异,详见标签。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整,液体无渗漏。
2.1.2 标识应清晰,易识别。
2.2 空白检出限空白检出限浓度应不高于1.0ng/ml。
2.3 线性在[0.1,32]mg/L范围内线性相关系数r≥0.990。
2.4 重复性分别用高、低浓度的样品各重复检测10次(样品浓度范围25mg/L±5.0mg/L和7.5mg/L±1.5 mg/L),其变异系数(CV)应不大于10%。
2.5 准确度将已知浓度的纯品加入到血清基质中,其回收率应在85%~115%之间。
2.6 分析特异性按表1所示交叉反应物规定浓度进行测定,检测结果的浓度值不得超过3.0mg/L。
表1:交叉反应物及浓度列表2.7 溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容。
校准品溯源至企业工作校准品,并与已上市产品比对赋值。
2.8 质控品赋值有效性本试剂盒质控品的测定结果应在质控范围内。
2.9 批间差用3个批号试剂盒检测同一份样品(25mg/L±5.0mg/L),则三个批号试剂盒之间的批间变异系数CV(%)应不超于15%。
2.10稳定性试剂盒在(2~8)℃储存条件下的有效期为12个月,试剂盒在规定的条件下保存,取到效期后的试剂盒进行检测,检验结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6的规定。
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人C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析试剂盒使用方法
检测范围:96T
30μg/L -800μg/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中C-反应蛋白(CRP)浓度。
试剂盒组成
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。