移液器使用与注意事项

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2014-05-03 16:45刘进

1 适用范围

➢ 本SOP适用于科研实验中心移液器的使用

2 移液器结构示意图

3 移液器操作流程

3.1 根据移取液体体积，选择合适量程的移液器。

➢ 单次移取液体体积在移液器量程范围内，选择最接近最大量程的移液器。(就近原则：在移取1μL液体时，优先选择0.1-2μl移液器，而不是选择0.5-10μl移液器，这样可以保证移液体积更准确,同时减少了旋转体积调节按钮的圈数，节省时间。）➢ 单次移液比多次移液误差小。

3.2 设定移液量

➢ 转动移液器顶部的按钮进行移液量的设定。

➢ 逆时针转动可增加移液量，顺时针转动可减少移液量。

➢ 刚开始旋转操作按钮时，缓慢旋转。观察读数是变小还是变大，从而改变旋转方向。

➢ 设定的移液量不能超出该移液器标定的移液范围。过度用力试图把按钮转至额定范围之外将造成机械件卡死，最终导致移液器损坏。

3.3 安装吸头

➢ 嘴锥对准吸头，轻轻用力下压，同时还可旋转或左右摆动移液器（不同品牌的移液器上吸头的方式可能不同，因此对安装吸头的方式未做统一要求。）

➢ 切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器造成损害。

➢ 下按力度应保证吸头与移液器嘴贴合紧密，无漏气。吸液后，吸头不漏液。

3.4 吸液

➢ 先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸头浸入液面。

➢ 浸入液面的深度不能过大。（浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响。

还有一点，吸头外壁吸附过多液体，影响吸液准确性。）

➢ 平稳缓慢松开按钮，切记不能过快。（过快会导致液体上冲，流入移液器内腐蚀弹簧和活塞。）

➢ 缓慢松开按钮后，待吸头内液面不再上升后，才能将吸头移出液面。（过早移出液面会吸入气体，导致吸液体积偏小。）

➢ 吸头移出液面后，可在空中悬停数秒，观察吸头是否漏液。（如果漏液，可能因为吸头未安装好，也有可能是嘴锥上刮痕或者活塞密封圈损坏。需要注意：吸取易挥发液体时，漏液属于正常现象。例如：吸取乙醇，吸头会漏液。）

➢ 当移液器吸头里有液体时，切勿将移液器平放或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞和弹簧。

3.5 放液

➢ 放液时，吸头可紧贴容器壁或浸入液面，也可悬空。（根据实际需要选择：移取小体

积时，不能悬空加入，吸头会挂液。如果重复移取同一种液体到另一种液体内，不想更换吸头时，可以悬空放液，但应注意防止另一种液体溅在吸头上。如果吸头被污染，应果断更换吸头。）

➢ 先将排放按钮按至第一停点，略作停顿以后，再按至第二停点，这样做可以确保吸头内无残留液体。

➢ 放液结束，吸头离开液面，才能松开排放按钮。

3.6 卸去吸头

➢ 操作时移液器吸头对准废物缸，然后用大拇指按住吸头推杆顶向下压，则可安全退除吸头。

➢ 有时，因为吸头和移液器不匹配，下按吸头推杆，无法退除吸头，可用手取下。切勿过度用力下按吸头推杆。

4 移液技术（考核只要求掌握前进移液法，其余移液方法若实验需要可自学。）

4.1 前进法

1) 将按钮压至第一停点位置。

2) 将吸头浸入液面，不要过深并缓慢松开按钮，待吸头内液面不上升后，将吸头移出液面并

斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3) 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，约1s后继续将按钮向下压至第二停点，此作用是排

尽吸头内的溶液。

4) 松开按钮使之返回起点位置。（在Tip头离开液面前，不得松开按钮。需要时，可更换吸

头继续移液操作。）

4.2 倒退法

➢ 倒退法适用于高黏度液体或易起泡沫液体的移液，此方法也推荐用于极微量液体的转移。（移液体积应小于移液器量程的一半）

1) 将按钮压至第二停点位置。

2) 将移液器吸头浸入液面，然后缓慢松开按钮吸液。待吸头吸入溶液后，将吸头移出液面并

斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3) 轻轻按下按钮到第一停点位置，放出预设定的液体。将操作按钮保持在第一停点位置，使

少量不包括在移液量内的液体仍留在吸头内，此时不得松开按钮。

4) 排液后，在废弃Tip头内剩余液体之前，不得松开按钮。

5) 排掉剩余液体后废弃Tip头。

4.3 重复移液法

➢ 重复移液法提供了快速、简单地重复转移相同容量的液体

1) 将操作按钮下压至第二停点位置。

2) 将移液器吸头浸入液面，然后缓慢松开操作按钮。该操作可以将液体吸入吸头。待操作按

钮回至起始位置后，将吸头移出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3) 轻轻按下按钮到第一停点位置，放出预设定的液体。将操作按钮保持在第一停点位置，使

少量不包括在移液量内的液体仍留在吸头内。重新插入待转移溶液之前，不得松开按钮。

4) 重复第三步和第四步，可重复转移相同容量的液体。

5 注意事项

5.1 使用前应确保你使用的这套移液器总数数目正确。如发现缺失，应及时告诉管理员。5.2 使用前应检查移液器是否完好，无破损、零部件缺失等。

5.3 使用前需检查嘴锥是否被污染，若有污染，则需擦拭干净。（下按按钮，观察嘴锥内是否

有液体。）

5.4 吸放液体时，下按或松开操作按钮应缓慢，尤其是做高粘度液体时更应如此，绝不允许

让操作按钮极速弹回。

5.5 当移液器吸头里有液体时，切勿将移液器平放或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。5.6 移液器在混匀液体时，不得使用最大量程，避免液体反冲至移液器的吸头嘴锥，建议使

用最大量程的一半来操作。

5.7 当使用体积超过1ml（含）Tip头时，在移液前可先将溶液吸入新装的Tip头，然后排空、

吸入反复2～3次后方可进行实际操作。（根据吸液体积的精确要求选择是否需要润洗吸头）

5.8 吸液完毕后，应将移液器调回最大量程，避免移液器弹簧长期压缩而损坏。

5.9 将移液器放回移液器架子上，检查同一套移液器操作按钮的高度是否相同。若不同，则

有移液器未调回最大量程。

5.10 不将一个平台的移液器，拿到其他平台使用。

5.11 不将非同一套移液器混用、混放，尤其注意不要混放，这会对我们移液器日常维护工作

造成极大不便。（中心购买的新的移液器，还未到货，目前暂时会混用多种品牌的移液器。）