食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)
发酵罐生产平菇液体菌种技术
菌一 料一 上 料一 灭 菌一 冷 却 、 瓶一 接种 一 培 养 。 一配 并
２ 发 酵 罐 深 层 培 养 相 关 设 备 的配 置
在 利 用 发 酵 罐进 行 食 用 菌 液 体 菌 种 生 产 的 过程 中 ，需要
较少 ， 萌发 均 匀迅 速 。
文章 编 号 １ ｏ 一 ３ ７ ２ １ ） ３ ｏ ５ — ２ ｏ ｏ ８５ （ｏ ０ ｏ 一 ｏ ｌ ｏ
随着 工 厂 化 和 标 准 化 生产 的呼 唤 ，液 体 菌 种 逐 渐 被 应用
到 食 用 菌领 域 。 同 菌种 要 求 的发 酵 工 艺 参 数有 所不 同 ， 目 不 且 前 国内 开 发 的食 用 菌 专 用 发 酵 罐不 同 于工 业 微 生 物 发 酵 用 的
１ 平 菇 液体 菌 种 生产 工艺 流 程
发 酵 罐 的 清 洗 和 检 查一 煮 罐 、空 气 过 滤 器 及 无 菌 水 灭
５ 接 种 及 培 养 参数 的设 定
当培养 液冷 却 到 ２ ℃时 ， ６ 调整 放气 阀至罐 压降 到 ０ ５Ｍ ａ ． Ｐ ， ０ 在 火 焰 保 护 下 将 已 并 瓶 的液 培专 用 种 投 入 发 酵 罐 ，接种 量 为 ４ （／） ％ ｖ ｖ 。设 置 发 酵 温度 为 ２ ℃ ， 压 ００ ａ 调 整 空 气 流 ５ 罐 ．３ＭＰ ，
培 养 。 种 方 法 制成 的菌 种 ， 球 大小 不一 ， 不 容 易 打散 。 这 菌 且 现
７ 发 酵 液 质 量检 查项 目
７１ 菌 液颜 色和 气 昧 的检 查 正 常 情 况 下 ， 液 初 期 略 显 浑 ． 菌
食用菌液体菌种的制作食用菌
食用菌液体菌种的制作食用菌
在无菌的条件下把菌种投放到培养基里。
安装通气管后用输氧机给培养基输入氧气。
把培养基放置在摇床机上进行振荡培养。
食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、发酵快、适宜于工厂化生产等优点。
食用菌液体菌种的生产方式一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。
据省农科院食用菌站工作人员介绍，摇瓶机法不仅接种简单，管理方便，而且生产量根据机器的设定而不同，投资2000~3000元即可。
配制液体培养基先把马铃薯煮到熟而不烂时提取上清液，然后配制3%葡萄糖、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾，最后将马铃薯上清液和上述溶液及水混合即可。
液体培养基适用于多种食用菌菌种的培养。
摇瓶振荡培养液体培养基配制好后，装入容量为500毫升的三角烧瓶中，每瓶装入100毫升，并加入1～15粒小玻璃珠，瓶口用棉塞、牛皮纸密封，在1.5千克/平方厘米压强下灭菌30分钟。
然后投入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养24小时。
待菌丝萌发时再放置在往复式摇床上振荡培养，振荡频率为每分钟80～100次，振幅为6～10厘米。
摇床室的温度控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是5天左右。
将振荡好的培养基倒入大容器里，经过扩容后，在无菌条件下安装通气管，用输氧机通入适量氧气后培养48小时。
培养结束的标准：培养液清澈透明，其中悬浮着大量小菌丝球，并伴有******菇类特有的香味。
培养好的液体菌种应放入培养箱中保存。
第1页共1页。
食用菌液体菌种发酵罐规范化操作规程
⾷⽤菌液体菌种发酵罐规范化操作规程⾷⽤菌液体菌种由于其有利于⾼效率、⼯⼚化、规范化栽培，解决了⾷⽤菌集约化⽣产中的瓶颈制约难题，且与固体菌种相⽐具有⽣产周期短、菌龄⼀致、出菇齐、成本低、纯度⾼、活⼒强等优点，越来越受到⾷⽤菌栽培者的青睐，已成为⾷⽤菌产业的发展趋势。
但由于发酵罐的操作需要较强的专业知识，提⾼发酵成功率⼀直是普通⽣产者的使⽤难题。
笔者经过⼏年对70型发酵罐的⽣产实践，总结出了该设备⾼成功率的实⽤规范化操作规程，供⼤家借鉴。
⾷⽤菌液体菌种⽣产流程：罐的清洗和检查－煮罐－配料－灭滤芯、⽆菌⽔、接种枪管－上料－灭菌(安装滤芯计时开始时开⽓泵吹⼲滤芯)－降温(先接进⽓管后放，并瓶)－发酵罐接种(第2天装袋灭菌)－培养⼀接菌袋(瓶)。
1 清洗与检查 发酵罐在每次使⽤后或再次使⽤之前都必须进⾏彻底清洗，除去罐擘的菌球、菌块、料液及其它污物。
对于内壁粘附的污物可以⽤⽊棒包扎软布揩拭，洗罐⽔从罐底接种阀排出。
如有⼤的菌料(块)不能排出，可卸下进⽓管的喷嘴排出菌料(块)。
清洗的标准：罐内壁⽆悬挂物，⽆残留菌球，排放的⽔清澈⽆污物。
罐清洗完毕即可加⽔，加⽔量以超过加热管为宜(绝对禁⽌加热管⼲烧)。
然后启动设备，观察检查控制柜、加热管⼯作是否正常，各阀门有⽆渗漏，检查合格⽅能开始⼯作。
2 煮灌 正常⽣产不须煮罐，上⼀次⽣产完只需将罐洗净就可进⼊下⼀批⽣产。
如果有下列情况之⼀者须要煮罐：①新罐，初次使⽤须要煮罐；②上⼀次污染杂菌的罐；③更换⽣产品种的罐；④长时间不⽤的罐。
煮灌是对罐内进⾏预消毒的过程，具体操作⽅法：①关闭罐底部的接种阀和进⽓阀，把⽔从进料⼝加⼊⾄视镜中线，盖上进料⼝盖，拧紧，关闭排⽓⼝。
②启动电源，按控制柜灭菌键4s，屏幕上两个加热指⽰灯亮，此时设备进⼊灭菌状态。
③当温度达到100℃时排放冷⽓，微微打开排⽓阀直⾄灭菌结束。
④当控制柜显⽰屏上的显⽰温度123℃、压⼒表压⼒0.12MPa时，控制柜⾃动计时，显⽰屏上交叉显⽰温度和计时时间。
食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法）
培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培养液时，先将土豆片、麸皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅料混匀即可。
4、接种
培养器上端有接种口，也是装料口，将母种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作准确。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术
1、溶氧量
液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。在这里我们对此进行简单介绍
一、液体菌种设备基本原理
任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
三、液体菌种生产流程
工艺流程图：空气压缩→过滤
↓
配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种
↑
试管斜面种→三角瓶颗粒种
配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁，在将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至121.3℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
木耳液体菌种制作规程
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
食用菌液体菌种生产技术操作规程
土 豆 ２ 、 麸 ２ 、 白 胨 ３ 、 萄 糖 Ｏ 麦 蛋 ‰ 葡
２ 、 酸二 氢钾 １ 、 酸 镁 ０ ５ 、 膏 ０ ５ 、 磷 ‰ 硫 ．‰ 石 ．‰
收 稿 日期 ： ０ １１ — ６ ２ １ －２２
一 一
上， 接种 结束 后 塞 好 棉 塞 。然 后 放 人 恒 温箱 中在
２ ℃ 的条 件 中静止 培 养 ３ 。待 接种 块在 培养 ６ —４ｄ 液 面上长 到 ｌ ｍ（ 个菌 种块 ） ｃ 单 时停止 培养 。在摇
摇床 培 养 …
一发 酵罐 的清 洗 …
一
一
发酵 罐 的空灭 …
一 一
项 目来 源 ： 西 省 重 大 科 技 创 新 项 目 ， 号 ２ ０ Ｚ 陕 编 ０ ８ ＫＣ７ １ 。 — ０
李
俊 ： 用 菌 液 体 菌 种 生 产 技 术 操 作 规 程 食
对其 进 行彻 底 的清 洗之后 才 能投 料使 用 。洗 罐 主
要 是除 去罐 壁 的菌 球 、 块 料 液 及 其 它 污 物 。操 菌
用 ， 果 显 著 。为 提 高食 用 菌液 体 茵 种 生 产技 术 ， 效 结合 我 们 多年 的 生 产 实 践 经 验 ， 食 用 茵液 体 菌种 生 产技 术 将 规 程 作 以介 绍 ， 以广 大食 用 菌液 体 菌 种 生 产 者 。
关 键 词 ： 用 茵 ；液体 茵 种 ； 术规 程 食 技
质 的飞跃 。结 合 我们 这几 年 的实 际生产 液体 菌种
煮 至土 豆 熟 ， 滤定 容 ， 过 加入 其 余 的 原料 至 溶 解 。
在摇 瓶 中放一 粒转 子 ， 培养基 冷 却后 放入 摇瓶 中 ， 将瓶 口和胶皮 管 口用棉 塞塞 紧 ， 并用 牛皮 纸包 扎 。 将摇 瓶放 入高 压锅 灭 菌 中 ， 温 度 １ １ ， 在 ２ ℃ 压力 在
食用菌液体菌种发酵罐专用母种制作方法
食用菌液体菌种发酵罐专用母种制作方法作者：白胡木吉力图白福林哈斯图力古尔刁雅娟钱丹珠来源：《农业与技术》2016年第08期摘要：本文介绍了液体专用母种的制作过程、培养终点及质量好坏的判断、液体专用母种生产中应注意的问题等内容。
关键词：液体菌种；培养器；母种中图分类号：S646 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160432006在液体菌种培养器的使用越来越普及时种植户遇到了不会制作液体菌种培养器专用母种的难题，影响了种植户使用液体菌种培养器这种先进设备的积极性。
本文介绍其制作方法如下：1 液体专用母种的制作过程1.1 试管斜面种的制作采用PDA综合培养基。
另外，根据不同需要可以采用营养加富培养基，即在上述配方外加入20g麸皮或0.5g蛋白胨；用漏斗将培养基分装至试管1/5～1/4处，试管口壁不粘培养基；梳棉制作大小合适的棉塞，松紧适度，塞入试管内1.5 ～2.0cm，外露0.5 ～1.0cm7支或10支捆成1捆，管口用牛皮纸包好，直立于灭菌锅内，准备灭菌；121～126℃（0.11 ～0.15MPa）的条件下灭菌30min，将培养基冷却至60～70℃时将灭好菌的培养摆成斜面，冷却备用；当培养基温度降至30℃以下时，无菌室内将菌种用接种钩接入空白培养基上，动作迅速、准确；根据不同的品种选择其适宜的温度避光培养，常规品种22～26℃，高温品种29～31℃，一般7～11d即可长好，菌丝生长健壮、洁白、均匀、无任何杂菌污染的菌种为优良菌种。
1.2 摇瓶种的制作按液体培养基的配料办法按一定的配比制作培养基（土豆20%、麸皮45%～5%、红糖1.2%～5%、葡萄糖1.5%、KH2PO40.2%、MgSO40.1%、蛋白胨0.3%、VB120mg/L）；每瓶装料系数为20%～40%，即1000mL的锥形瓶装料约200～400mL；棉塞外包1层纱布，大小要合适，上面加盖1层牛皮纸，用线绳绑好。
(液体罐菌种的生产)学习资料单
第四章原种的生产（液体菌种生产）第三节：液体罐菌种的生产市场上液体菌种罐种类很多，从大型工业发酵罐到小型液体发酵罐都向操作简便和高成功率转型。
一、发酵罐型号食用菌液体发酵罐有很多型号：如50L，100L，200L，400L，600L。
各个菌罐生产厂所生产的食用菌罐各有其优缺点，只要是操作技术人员熟悉罐体结构，成功率就很高了。
二、常用的液体罐菌种的生产流程现在菌种生产者常用的液体罐菌种的生产流程：(一)发酵罐培养基配方以1L的培养基配方为例进行计算。
如下：1.红糖10g，玉米粉5g，豆饼粉10g,蛋白胨1.5g，磷酸二氢钾0.8g，硫酸镁0.8g。
2.也可以用煮土豆麦麸培养基。
各种斜面培养基配方都可以做为液体菌培养液配方使用。
一般200L的发酵罐一般可装160L培养料。
（二）液体菌种生产工艺流程：罐的清洗与检查→培养基的配制→上料→灭菌→降温→摇瓶接种→培养→接种栽培袋1.罐的清洗与检查每一罐做完之后，新的一罐做之前。
我们都需要对罐体进行清洗，目的是除去罐内所有污垢。
方法就是用清水冲刷内壁。
然后检查各部件是否完好，有无渗漏，设备能否正常运转。
我们还需要进行煮罐，那在什么时候进行煮罐呢？比如在新罐第一次使用时；在上一罐染菌时；在更换品种时；在长期闲置不用时。
这些时候我们都需要进行煮罐。
具体的操作方法就是：①、加水至试镜中线，扣上接种盖，微开排气阀。
②、打开启动开关，进入灭菌状态，温度升到124℃时，计时，40分钟后，控制柜报警。
③、关闭排气阀，关闭启动开关，闷罐20分钟，放水。
2.如是外置滤芯需要对外置滤芯及无菌水灭菌(1)将进气管管口用8-10层纱布包好。
(2)选择容积是1000ml的广口烧瓶，加水750-780ml，盖棉塞，包牛皮纸。
(3)在压力是0.11-0.15MPa，温度121-126℃的条件下，计时60分钟。
3.培养基的制作配方按生产品种配制。
很多公司现在也有现成的专用培养基。
直接配比水即可。
食用菌液体发酵罐制种技术
食用菌液体发酵罐制种技术食用菌制种主要有液体和固体两种制种方式。
液体制种是目前国际上通用的、先进的方法。
液体菌种具有生产周期短、用工成本低、菌丝活力强、接种后萌发吃料快、菌种在培养基中的流动性和分散性好、菌龄一致、出菇整齐、可缩短栽培时间等优点。
在对液体制种与固体制种经济效益分析比较中指出，液体菌种发育时间可以减少24d，接栽培袋菌丝满菌时间缩短约10d，污染率可以降低1.5%，成本利润率可提高42%。
液体菌种作为食用菌基料工厂化生产发展过程中的重要环节，具有重要意义。
而现在食用菌产业受资金和技术的限制，其规模化、工厂化生产仍然以固体菌种为主，液体菌种的应用只有少数较大规模工厂化生产的企业及少数栽培品种工厂化栽培中获得应用，液体菌种的优势完全没有发挥出来。
液体菌种在制作过程中对设备、技术的要求较高，液体菌种发酵罐的操作技术流程复杂，增加了使用者的生产难度。
我们将对食用菌液体菌种发酵罐的生产工艺、操作流程进行技术总结，为食用菌项目的液体菌种提供参考。
1、研发液体菌种发酵罐的构造液体菌种在发酵培养过程中需要充足的氧气，属好氧性发酵。
满足于好氧性发酵的生化反应器主要有两大类即机械搅拌通风发酵罐和气流搅拌发酵罐。
前者利用通风装置和搅拌装置将氧溶入发酵液中，因机械搅拌剪切力而对菌丝产生破坏作用，因此不适于栽培型菌种的应用。
而后者则利用外部供气装置将气体通入发酵罐内形成环流将氧溶入发酵液中，其特点是基质溶液分布均匀、具有较高的溶解氧速率和溶解氧效率、结构简单、易于加工和操作。
而气流搅拌发酵罐的构造主要由电控系统、气体输送系统、发酵培养系统三部分组成。
1.1电控系统。
由控制箱体、微型电脑、集成传感器、报警器、数码显示屏、控制开关等组成，可调控灭菌温度、时间、压力及培养温度等。
1.2气体输送系统。
由无油隔膜泵、气水分离器、空气过滤器、滤芯、止回阀、压力表、硅胶管等组成，可为发酵罐提供纯净、无菌的气源。
1.3发酵培养系统。
食用菌生产技术 液体菌种
3.制作饮料、保健品 3.制作饮料、 制作饮料 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→ 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→热 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配， 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配，可研 制成功能饮料、保健品。 制成功能饮料、保健品。 4. 制作畜禽饲料 食用菌液体培养物，经过浸提或提取有用成 食用菌液体培养物， 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。
五、液体菌种制作的主要工艺 1.液体种子制备 1.液体种子制备 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 健壮的、高纯度的菌丝体。 健壮的、高纯度的菌丝体。 ⑴ 斜面菌种制备 制备方法（培养基配方和操作步骤）同试 制备方法（培养基配方和操作步骤） 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 ⑵ 摇瓶种子制备 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 无菌检验→接种→ 无菌检验→接种→振荡培养管理
四、液体菌种制作的主要设备 1.摇床食用菌为需氧菌，液体菌种培养需 摇床食用菌为需氧菌， 摇床食用菌为需氧菌 要增加氧气的供应，因此， 要增加氧气的供应，因此，不断振荡有 利于菌丝体的快速生长。 利于菌丝体的快速生长。摇床是液体菌 种生产常用的设备 2.种子罐和发酵罐 种子罐和发酵罐 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐 一级种子罐通常为 ， 为500-1000L。 。
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 2.接种量 3.温度 1.菌龄 2.接种量 3.温度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 7.罐压 8.泡沫控制 7.罐压 8.泡沫控制 9.发酵特点 9.发酵特点
用发酵罐生产食用菌液体菌种的流程揭秘
用发酵罐生产食用菌液体菌种的流程揭秘发酵罐是食用菌液体菌种生产流程的主要设备，发酵罐为液体菌的生长提供均匀、恒定的营养条件，主要包括提高溶氧浓度，对培养基进行充分混匀。
食用菌发酵过程中，菌丝体相互纠结成球状，所以在食用菌液体菌种发酵生产流程上发酵罐需保持干净，清洁，没有污染物。
食用菌液体发酵罐的发酵设备包括：温度控制系统、供气系统、冷却系统、搅拌系统组成。
食用菌液体菌种的生产流程是：发酵罐的清洗检查—发酵罐的消毒—配料—上料—灭菌—降温—发酵—培养—装瓶。
使用发酵罐注意事项1、当发酵罐的各个设备都能正常工作时，必须使用该系统。
2、对过滤器进行消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力不得超过0.17mpa，否则会损坏滤芯，造成过滤器容量损失。
3、发酵过程中，罐内压力不得超过0.17mpa。
4、在实际消耗过程中，当夹套被蒸汽预热时，进汽压力必须控制在设备工作压力范围内（不超过0.2mpa），否则会对发酵罐造成损坏。
5、在排空和实际排空时，必须将剩余的水排尽在发酵罐的护套内。
否则，发酵罐内筒可能被压缩，造成设备损坏。
此外，过多的冷凝水会导致培养基稀释，不能满足工艺要求。
6、发酵罐内的负压严禁在清除空罐和实际清除后的冷却过程中产生，以免对设备造成污染甚至损坏。
7、在发酵过程中，发酵罐的压力应保持在0.03-0.05mpa之间，以避免污染。
8、每次操作时，气管内的压力必须保持高于发酵罐内的压力，否则发酵罐内的液体会回流到过滤器内，堵塞滤芯或使过滤器失效。
9、如果遇到自己无法解决的问题，请直接联系发酵罐售后服务部。
切勿强行拆卸或修理发酵罐。
食用菌液体菌种生产流程上发酵罐的清洗：发酵罐在每次使用后或者再次使用前都必须进行彻底的清洗，除去发酵罐罐壁的菌球、料液及其他的污染物。
清洗后的发酵罐应达到罐内壁没有悬挂物，无残留的菌球、清洗后排放的水清澈没有污染物。
发酵罐的消毒：发酵罐的消毒就是对罐体进行高温的煮罐，新的发酵罐罐体在使用时必须进行煮罐消毒。
食用菌液体菌种发酵培养基制作方法
食用菌液体菌种发酵培养基制作方法一、概述食用菌是一类富含营养且具有较高经济价值的真菌。
通过液体菌种发酵培养基，可以有效地培养和繁殖食用菌菌种，为食用菌的生产提供良好的基础。
二、制作原料准备1. 鲜活食用菌菌种：可选择各种常见的食用菌，如蘑菇、香菇等。
2. 培养基原料：包括淀粉、葡萄糖、酵母粉、氨基酸等。
3. 辅助原料：如蒸馏水、矿物质溶液等。
三、制作步骤1. 菌种处理：将鲜活食用菌菌种进行处理，去除不完整或有病变的部分，并将其洗净备用。
2. 培养基准备：按照一定比例将淀粉、葡萄糖、酵母粉、氨基酸等原料混合均匀。
然后加入适量的蒸馏水，搅拌至完全溶解，得到培养基液体。
3. 培养基消毒：将制好的液体培养基倒入培养瓶中，用高压蒸汽进行消毒，确保无菌。
4. 菌种接种：将处理好的食用菌菌种均匀地接种到培养瓶中的培养基上。
5. 培养条件调控：将接种好的培养瓶放入恒温培养箱中，调控温度、湿度和光照等条件，创造适宜的生长环境。
6. 培养过程管理：定期观察培养瓶内的菌丝生长情况，注意消毒和通风，防止细菌交叉感染。
7. 菌种提取：待菌丝生长到一定程度后，可将其提取出来，作为食用菌的菌种，用于后续培养和生产。
四、注意事项1. 在制作过程中要严格控制消毒条件，确保培养基和培养器具的无菌。
2. 培养箱的温度、湿度和光照等条件要根据不同食用菌的要求进行调控。
3. 培养过程中要定期观察并记录菌丝的生长情况，及时处理异常情况。
4. 制作过程中要注意卫生和安全，避免食用菌菌种污染其他物品或环境。
5. 培养完毕后，要妥善保存食用菌菌种，以备后续使用。
通过上述的制作步骤和注意事项，可以制作出适用于食用菌液体菌种发酵的培养基。
这种培养基能够为食用菌的生产提供良好的基础，促进食用菌菌种的繁殖和生长。
制作过程中需要注意无菌操作和合理的培养条件调控，以保证培养基的质量和菌种的活力。
同时，制作过程中也需要注意卫生和安全，避免污染和交叉感染的发生。
液体菌种的制作及使用方法
液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。
液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。
它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。
工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。
液体菌种的制作及使用方法液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。
液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。
近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。
与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。
目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。
一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。
若少量生产，可以用摇瓶培养法。
深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。
而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。
本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。
1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的组成均为天然有机物。
合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。
在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。
但无论如何划分，每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
食用菌液体菌种的制作步骤
食用菌液体菌种的制作步骤
一、液体培养基配方：葡萄糖20克蛋白胨10克硫酸镁
0.5克硫酸二氢钾1克水1000ml
二、液体培养基的制作步骤：
1、称量、溶解
按配方称量药品，将药品置于烧杯中加水，玻璃棒搅匀。
2、分装
分装三角瓶时避免培养液黏住瓶壁口，用漏斗进行分装，三角瓶装料系数60％。
3、加棉塞
棉塞大小，松紧度要适中，一般塞入3-4厘米。
4、装锅灭菌
塞好棉塞的三角瓶用双层报纸包扎好，装入灭菌锅，盖上报纸，排气后，待温度升至121℃开始计时，温度控制在121—123℃，维持50min。
5、烘棉塞
当压力降至0.05MPa时带压进入无菌室，当压力即将降至零时开始放气，打开锅盖拿出报纸，将锅盖嵌一小缝，以此来烘干棉塞，维持40—50min。
6、冷却
取出三角瓶放在超净工作台或接种箱中，冷却后进行接种。
液体菌种生产与固体培养不同，是以液体做培养基，通过多级发酵培养得到菌液，发酵菌液中含有大量的菌丝体，
可直接做液体菌种。
目前，液体菌种发酵生产的工艺流程有：一是摇瓶培养工艺，即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子；二是深层发酵罐培养工艺，即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。
少量可用摇瓶震荡培养，大量的用发酵罐通气培养。
香菇液体发酵罐接种工艺流程
香菇液体发酵罐接种工艺流程如下：
1.给液体菌种发酵罐（选用200L罐）注水、加温，灌体水温上
升到70℃时投料。
2.投料前用温水把玉米粉1.5kg、黄豆粉1.0kg、葡萄糖1.0kg、维
生素B1100片和维生素B2100片搅拌均匀，用网布过滤。
3.打开灌体投料口，把过滤的培养液用漏斗加入到灌体，总量加
到观察镜顶部为宜。
4.倒入30mL消泡济，拧紧投料口。
5.经投料灭菌后，培养料冷却至25℃时接种。
6.用1000mL三角瓶装500mL水，置高压锅中灭菌30min，冷却
后将原种在无菌箱中搅碎，接入三角瓶，再倒入800万单位的青霉素摇动匀后接入发酵灌。
7.接种时先用火焰圈对接种口进行灭菌，在接种口放置酒精圈，
点燃后燃烧1min左右。
8.接种后，迅速盖上投料口并拧紧。
食用菌的液体深层发酵技术
食用菌的液体深层发酵技术食用菌液体菌种发酵技术属于现代生物技术之一。
深层发酵技术直接生产食用菌菌体，同时获得富含氨基酸等营养成分的发酵液。
一、深层发酵培养基的选择1、食用菌液体深层发酵技术研究的关键是培养基。
不同食用菌要用不同的培养基进行培养，因此，培养基的选择与配制是食用菌液体深层发酵技术的关键。
食用菌的深层液体发酵生产主要是采用了抗生素生产的工艺和设备，其工艺大致是：母种一级种子二级种发酵罐深层发酵根据培养基组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的组成均为天然有机物，合成培养基则是采用一些已知化合成分的营养物质作为培养基，无论哪一种培养基，其组成都离不开碳源、氮源、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
2、选择培养基时应注意的问题(1) 氮源过多会引起菌丝生长过于旺盛，不利于代谢产物的积累。
碳源不足，又容易引起菌体衰老和自溶，碳、氮比不当，会影响菌丝按比例地吸收营养物质。
(2) 同一种原料因产地不同其营养成分有差异，这在氮源表现得较明显，如大豆、玉米浆、蛋白陈等，必须记下每一种原料的产地、批号、生产厂等，并对原料进行化学成分分析。
(3) 水质对发酵生产的影响也很大，自来水、地表水、河水、并水、雪水等，其中所含溶解氧、金属离子及酸碱度等均有差异。
另外，有的水中还含有较多的氯离了。
因此应对水质进行化学分析。
(4) 高温(或高压)灭菌会引起某些营养成分的破坏，特别是还原糖、氨基酸和肽类等共同加热时，会形成与羟甲基糠醛及类黑精等物质。
赖氨酸最容易与糖发生反应，形成棕色物。
这些在选择培养基及灭菌时都应预先想到。
二、食用菌的摇瓶培养将食用菌的试管母种接人已灭菌的三角瓶培养液中，然后置于摇床上振荡培养，这种培养方式即为摇瓶培养。
经过摇瓶培养的菌丝体呈球状、絮状等多种形态。
培养液可呈糊状，消液状等状态，有或无清香味及其他异味。
菌液中有菌株发酵产生的次生代谢产物，可呈不同的颜色。
在进行菌株的初期培养或生理生代研究时，一般皆采用摇瓶培养法。
液体菌种制作
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度，例如，黑木耳的
最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。
7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵，目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。
9.发酵特点
发酵终点是否准确，应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常，摇瓶种子菌龄控制在 4-10d，一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地，食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30℃生长最快，得率最高。
4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积 /min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。
食用菌为需氧菌，液体菌种培养需要增加氧 气的供应，因此，不断振荡有利于菌丝体的 快速生长。摇床是液体菌种生产常用的设备。
往复式播床：振荡方式为来回振荡 旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5．供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备
五、液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备 种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度 的种子 ①斜面菌种制备 。制备方法（培养基配方和操作步骤） 同试管斜面母种的制备一样。 ②摇瓶种子制备 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→ 接种→振荡培养管理 ③一级、二级种子制备 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐为500-1000L。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法）
传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点：
1．菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。
2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。
3．接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。
4．适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍
一、液体菌种设备基本原理
任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选
择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术
1、溶氧量
液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤
技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400mu，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。
当然如果选的太小，成本将大幅度提高。
另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。
3、培养液
培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。
不同的菌种对营养要求偏重不同。
配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、
维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。
配置培养液时，先将土豆片、麸皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅料混匀即可。
4、接种
培养器上端有接种口，也是装料口，将母种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作准确。
5、环境
如前所述，环境对菌种生产影响很大，过滤器本身不可能把杂菌百分之百地滤掉，减少环境中的杂菌基数是非常重要的，液体菌种母种接入到经灭菌的培养液中只要能形成对杂菌的生长优势就可以抑制杂菌感染，也就是说，液体菌种培养不是建立在绝对无菌的前提下相反是建立在相对无菌的前提下。
就此意义上说，保持环境清洁，减少空气中杂菌基数，对于提高菌种培养成功率意义较大。
三、液体菌种生产流程
工艺流程图：空气压缩→过滤
↓
配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种
↑
试管斜面种→ 三角瓶颗粒种
配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁，在将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至121.3℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养，培养时根据不同的菌
种，设定适宜的温度。
培养期间应注意观察，并做好记录。
包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。
如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。
来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。
培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可接种。
四应用领域
1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规模生产单位；
2.用于多种微生物的培养;
3.含食用菌活性成分的保健食品生产；
4.各种奶制品的活性因子生产;
5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品添加剂;
6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等；
7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事食用菌栽培人员的菌类生产。