枳实中橙皮苷提取方法的比较

枳实中橙皮苷提取方法的比较

作者：吴洪文，肖萍，吴敏，何楚华

【摘要】目的研究枳实中橙皮苷的最佳提取工艺。方法以橙皮苷的含量为指标，采用正交实验筛选出枳实中橙皮苷的最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为：20 ml 100%的甲醇超声15 min。结论此方法操作简便，稳定性好。

【关键词】枳实；正交实验；提取工艺

Abstract：ObjectiveTo optimize an extraction method of hesperidin.MethodsTaking the extraction rate of hesperidin as assessment index,an optimized extraction process was selected with the orthogonal design.ResultsThe optimum extraction process conditions were as follows:adding 20ml pure methanol,processing for 15 minutes with ultrasonic wave.ConclusionThe optimal process is convenient and stable,with high yield of effective ingredients.

Key words：Fructus Aurantii Immaturus; Orthogonal design; Extraction

枳实导滞丸为《内外伤辨惑论》中的药方，由大黄、枳实、神曲等8味中药组成，主治湿热食积症，枳实为主要成分之一。枳实为芸香科植物Citrus aurantium L.的干燥幼果，具有破气消积、化痰散痞之功效［1］。枳实的主要化学成分为橙皮苷等黄酮类化合物。为了更好地发挥枳实导滞丸的功效，我们采用正交设计实验，以橙皮

苷为枳实的质量控制指标，采用高效液相色谱法进行测定，探讨该方剂中枳实橙皮苷的提取工艺条件，并在实验中考察了影响橙皮苷含量的处理方法，为进一步将枳实导滞丸开发成成药制剂奠定基础。

1 仪器与试药

日本岛津LC-10AVP高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，SLC-10AVP控制器，LC-10TVP泵，超生波清洗机，橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所），枳实由柳州市药材站提供，甲醇为色谱纯，蒸馏水为本院生产。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱为VP-ODS 柱（4.6 mm×250 mm,5 μm），流动相为甲醇∶水=40∶60，流速1.0 ml·min-1,柱温40 ℃，检测波长285 nm，灵敏度1.0AUFS。

2.2 标准曲线精密称取橙皮苷对照品800 μg,置25 ml的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为32 μg·ml-1的储备液。精密量取储备液0.5，1，1.5，2.5，3，4，5 ml分别置10 ml的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下进样20 μl,测定峰面积，以药物浓度对峰面积进行线性回归，得回归方程：Y=3 102.9X-10 894，r=0.999 7，线性范围0.032～0.32 μg。

2.3 精密度实验精密取32 μg·ml-1的储备液溶液5 μl，重复进样6次，在上述色谱条件下测定, RSD为0.52%，精密度良好。

2.4 提取方法

2.4.1 超声方法分别精密称取干燥后的枳实细粉0.1 g，按

正交实验设计表的提取条件提取，提取后用0.45 μm的滤膜过滤，精密吸取1 ml滤液定容至10 ml。在上述色谱条件下进样10 μl。

2.4.2 回流法分别精密称取干燥后的枳实细粉0. 1g，加20 ml甲醇，精密称定重量，水浴加热至微沸，回流1.5 h，加甲醇补足重量，用0.45 μm的滤膜过滤，精密取滤液1 ml用甲醇定容至10 ml。在上述色谱条件下进样10 μl。

2.5 结果

2.5.1 正交实验以L9（34）正交表进行实验分析，结果见表1～3。表1 实验因素水平（略）表2 正交实验设计方案及结果（略）表3 方差分析（略）

从表3可知，B、C两因素各水平对橙皮苷提取量有显著性影响，B因素影响最大，其次为C因素， A因素无显著性影响。橙皮苷的优选提取方案为：A1B1C3。

2.5.2 平行对照实验

按照正交实验筛选出的最佳工艺条件，分别以超声法与甲醇回流法进行实验对照。结果见表4。表4 方差分析（略）

3 讨论

本实验采用超声提取法通过正交实验对枳实的提取工艺条件进行优化。实验中选择反应时间、溶剂浓度、溶剂量等影响因素为考察指标，结果显示最佳工艺为：20 ml 100%的甲醇超声15 min。

在相同的条件下，枳实分别用甲醇回流法和超声方法进行提取比较，测定橙皮苷的含量，结果后者比前者要高，说明用超声方法进行

提取比较完全且操作简便省时。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：148.