天然药物化学成分的提取、分离及鉴定
天然药物化学成分的提取分离与鉴定
分离原理
相似相溶原理
根据物质之间的相似性质进行溶解和分离。
酸碱反应
利用酸碱反应的性质进行分离。
分子间作用力
利用分子间的相互作用力，如范德华力、氢 键等实现分离。
离子交换
利用离子交换剂与溶液中的离子进行交换， 从而实现分离。
分离流程
提取
将天然药物原料破碎、 浸泡、回流提取，得 到提取液。
浓缩
将提取液进行浓缩， 减少体积，便于后续 处理。
超声波提取法
利用超声波的振动和空化作用，加速 目标成分的溶解和扩散，提高提取效 率。
微波提取法
利用微波的能量使目标成分与溶剂分 子相互作用，促进其溶解和扩散。
超临界流体萃取法
利用超临界流体作为萃取剂，具有高 渗透能力和良好的溶解性能，适用于 提取脂溶性和热敏性成分。
提取原理
相似相溶原理
根据物质之间的相似相溶原理 ，选择与目标成分极性相近的
溶剂中的溶解度差异， 将目标成分从一种溶剂转移 到另一种溶剂的过程。
沉淀法
通过加入沉淀剂使目标成分 或杂质沉淀，从而实现分离 的方法。
结晶法
通过降温或蒸发溶剂使溶液 达到饱和状态，然后缓慢降 温使目标成分结晶析出的方 法。
吸附法
利用吸附剂的吸附作用将目 标成分从溶液中分离出来的 方法。
05
天然药物化学成分提取分离与鉴定的
挑战与展望
技术挑战
提取分离难度大
天然药物中化学成分复杂，有效成分含量低，提取分离难度较大。
鉴定技术要求高
天然药物化学成分的鉴定需要高精度的分析仪器和专业的鉴定技术， 对实验条件和操作要求较高。
杂质干扰
天然药物中常含有大量杂质，对有效成分的提取分离和鉴定造成干 扰，影响实验结果。
天然药物化学第二章天然药物成分提取分离及结构鉴定方法
天然药物化学第二章天然药物成分提取分离及结构鉴定方法天然药物成分提取、分离及结构鉴定方法是研究天然药物化学的重要环节。
本文介绍了几种常见的方法，包括传统的提取和分离方法以及现代的结构鉴定方法。
首先是天然药物成分的提取方法。
传统的提取方法主要包括研磨法、浸泡法、渗漏法、浸渍法、热水浸提法等。
这些方法在药材的初步处理阶段起着重要作用，能够将有效成分从药材中充分提取出来。
现代化学技术的发展使得提取方法更加多样化，比如超声波提取、微波提取、超临界流体提取等，这些方法能够提高提取效率和提取速度。
接下来是天然药物成分的分离方法。
传统的分离方法主要包括溶剂沉淀法、蒸馏法、萃取法等。
这些方法常用于将药材提取液中的目标成分与杂质分离开来。
现代的分离方法有色谱技术。
色谱技术包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、薄层色谱（TLC）等，这些方法能够更加精确地分离和纯化目标成分。
此外，还有一些电泳方法如毛细管电泳、凝胶电泳等，能够对天然药物成分进行分离和鉴定。
最后是天然药物成分的结构鉴定方法。
结构鉴定方法主要包括光谱学和质谱学。
光谱学包括红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、核磁共振（NMR）等，这些方法能够提供分子结构和功能基团的信息。
质谱学通常用于研究分子的质量和质量分布，并且能够确定分子的分子式和分子量。
此外，还有一些其他的结构鉴定方法，如X射线衍射（XRD）、电子显微镜（SEM）等，这些方法能够提供分子的晶体结构和形貌信息。
综上所述，天然药物成分提取、分离及结构鉴定方法涉及到多个技术领域，传统的方法已经得到了很大的发展，同时现代化学技术的进步也为药物化学的研究提供了更多的选择。
可以预见，随着技术的进一步发展，天然药物的研究将会越来越深入，为人类健康做出更大的贡献。
天然药物化学 第二章 提取与分离 第一节
溶剂
特点
适用范围
醇溶液
提取效率高。 受热时间长。
对热稳定成分
提取效率比一
亲脂性有机 溶剂
般回流法高， 提取完全。 溶剂用量少。
对热稳定成分
受热时间长。
提取方法
超声波提 取法
溶剂 各类溶剂
特点
提取时间短， 效率高。 无需加热。
适用范围 各种成分
返回
◎适用物质： 1.具有一定的挥发性。 2.能随水蒸气蒸馏而不被破坏。 3.不与水发生反应。 4.不溶或几乎不溶于水。 ◎基本原理（了解）：
CH3-CH2-OH 乙醇
CH3C-HC｜H3-2C-HCO-OOHH OH
CH3-CH2-CH2-CH2-OH
正丁醇
常用溶剂的极性大小顺序排列如下： 水＞甲醇＞乙醇＞丙酮＞正丁醇＞乙酸乙酯＞
溶剂 极性
特点
适宜提取成分
优点：经济易得，安全。 糖类
氨基酸
蛋白质
水 强 缺点：①易霉变。②粘
鞣质
度大，难过滤。
材不适用）
浸渍法
水、酸水、 操作简单；时间 ①热不稳定成分。
碱水、稀 长，效率低。水 ②含果胶、淀粉。
醇
浸液易霉变。 粘液质、多糖等
成分多的物质
分。②含大量淀
浓度乙醇 间长，
粉、树胶、果胶
药材。
a.渗漉装置
提取方法 回流
提取法
连续回流 提取法
生物碱盐
③苷类成分易酶解。④
有机酸盐
提取液难浓缩。
大多数苷类
亲水性有 机溶剂
极 性
特点 （可与水以任意比例互溶）
适宜提取成分
乙醇 甲醇 丙酮
优点：①穿透力强，溶解
天然药物分离实验报告
实验名称：天然药物化学成分的提取与分离实验日期：2023年10月15日实验地点：化学实验室实验目的：1. 学习并掌握天然药物化学成分的提取与分离方法。
2. 提高对天然药物化学成分理化性质的认识。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析和处理能力。
实验原理：天然药物化学成分提取与分离实验主要依据相似相溶原理和分子极性差异。
通过选择合适的溶剂和分离技术，将天然药物中的有效成分提取出来，并进一步纯化。
实验材料：1. 植物药材：丹参2. 溶剂：甲醇、水、氯仿、乙酸乙酯3. 分离工具：漏斗、滤纸、烧杯、锥形瓶、旋转蒸发仪、硅胶柱4. 其他：NaOH、Na2CO3、NaHCO3、氨水、硅胶薄层板、紫外灯实验步骤：1. 药材处理：将丹参药材粉碎，过筛，取适量药材置于烧杯中。
2. 溶剂提取：1. 将药材与甲醇以1:10的比例混合，超声提取30分钟。
2. 过滤，收集滤液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。
3. 将浓缩液依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，收集各萃取液。
3. 硅胶柱层析：1. 将硅胶柱预处理，依次加入氯仿、乙酸乙酯，调节流速。
2. 将萃取液上柱，待液面降至硅胶层表面时，用氯仿-乙酸乙酯梯度洗脱。
3. 收集各洗脱液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。
4. 薄层色谱鉴定：1. 将各浓缩液点样于硅胶薄层板上，用氯仿-乙酸乙酯为展开剂进行展开。
2. 显色后，紫外灯下观察斑点，记录Rf值。
5. 含量测定：1. 根据薄层色谱斑点Rf值，确定各成分的纯度。
2. 采用高效液相色谱法测定各成分含量。
实验结果：1. 通过溶剂提取，从丹参药材中成功提取出多种化学成分。
2. 通过硅胶柱层析，将提取的化学成分进一步分离。
3. 薄层色谱鉴定结果显示，分离得到的化学成分主要为丹参酮类化合物。
4. 高效液相色谱法测定结果显示，各成分含量较高，纯度较高。
实验结论：1. 该实验成功提取和分离了丹参中的有效成分，为天然药物的开发和应用提供了实验依据。
2. 通过实验，掌握了天然药物化学成分的提取与分离方法，提高了实验操作技能。
天然药物化学 _提取分离鉴定的方法和技术
更快
晶体小宜吸附杂质
注意点：水为溶剂易变质，必要时加防腐 剂。
渗漉法
动态浸提法 粉碎
浸润 装筒
排气
浸渍
渗漉
提取范围：有效成分对热不稳定且易分解的成分 如甘草，稀氨水渗漉液，提取甘草酸铵盐。 优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。 缺点：溶剂用量大，且耗时多。
煎煮法
溶剂：水
提取范围：对含挥发油及遇热不稳定的的成分 不适合使用；含多糖类，因煎提液粘稠，难以过滤， 不常用。如：甘草煎煮，甘草酸单钾盐。 优点：操作简便易行，提取效率比冷浸高 缺点：水溶性杂质较多，水提液易发霉变质。
• 最粗粉，指能全部通过一号筛，但混有能通过三号筛不超 过20%的粉末。 • 粗粉，指能全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过 40% • 中粉，指能全部通过四号筛，但混有能通过五号筛不超过 60% • 细粉，指能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于 95% • 最细粉，指能全部通过六号筛，并含能通过七号筛不少于 95% • 极细粉，指能全部通过八号筛，并含能通过九号筛不少于 • 95% • 的粉末。
使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。
分配： 成分以不同程度溶解于两相溶 剂中的过程。 分配系数K=Cu/CL： 当分配达到动态平衡时，成分 在两相溶剂中的浓度比。
• A、B两种物质用三氯甲烷及水萃取， Ka=10，Kb=0.1， • 一次萃取后 • 90%的A在水中 • 90%的B在三氯甲烷中
• 铅盐法曾被应用于分离具有酸性和中性的 成分，目前已较少用。 • 在中性醋酸铅沉淀部分可得到含羧基 及邻二酚羟基的成分，如有机酸、粘液质、 鞣质、某些黄酮等。碱式醋酸铅沉淀部分 得到只有一个酚羟基的成分以及中性皂苷 等。经碱或醋酸铅沉淀后的水或醇液中有 中性成分。因铅对人有害，生产中最好不 用此法。
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法天然药物是指从动植物、矿物等自然产物中提取的具有药用价值的物质。
它们广泛存在于自然界中，具有活性成分丰富、毒性小、作用稳定等特点，因此受到了广泛的研究和应用。
在天然药物化学成分的提取、分离和鉴定过程中，色谱法是一种非常重要的方法。
色谱法运用了物质在固相（吸附、分配、离子交换）和液相（逆相、大小分、离子对）不同相上的分配行为，通过样品分子在固定相与移动相之间的差异与相互作用，实现目标物质的分离和鉴定。
常用的色谱法主要有层析色谱、气相色谱和液相色谱。
层析色谱是天然药物化学成分分离方法中最常用的一种。
它利用固体材料（如硅胶、氧化铝、活性炭等）作为分离介质，将样品分子按照一定的物理化学性质（如极性、分子量、酸碱性等）进行分离。
常用的层析色谱技术有薄层层析、柱层析和高效液相层析等。
气相色谱法（GC）是一种高效的物质分离和鉴定方法，常用于分析挥发性和蒸气压较高的物质。
在气相色谱中，样品被蒸发并转化为气相，然后通过固定相的柱子，利用挥发物在固定相和流动相间的分配行为进行分离和鉴定。
液相色谱法（LC）是一种常用的分离和鉴定方法，常用于分析溶解性较好的天然药物成分。
在液相色谱中，样品被溶解在流动相中，通过样品分子与固相的相互作用，实现各种化合物的分离和鉴定。
除了色谱法，还可以结合其他技术对天然药物成分进行分离和鉴定。
例如，质谱法结合色谱法可以对样品进行结构分析；核磁共振技术可以用于大分子的鉴定和结构分析；红外光谱和紫外光谱等光谱学方法可以进行成分的快速鉴定等。
总之，色谱法是天然药物化学成分提取、分离和鉴定的一种重要方法，通过对样品分子在不同相上的分离行为进行分析，实现对天然药物活性成分的鉴定和分离。
此外，还可以结合其他技术方法，如质谱法、核磁共振技术、光谱学等，对天然药物成分进行全面的分析和鉴定。
第2章天然药物化学成分提取、分离和鉴定的方法与技术
第二章天然药物化学成分提取、分离和鉴定的方法与技术【习题】（一）选择题 [1-210]A 型题 [1-90]1．不属于亲脂性有机溶剂的是A. 氯仿B. 苯C. 正丁醇D. 丙酮E. 乙醚2．与水互溶的溶剂是A. 丙酮B. 醋酸乙酯C. 正丁醇D. 氯仿E. 石油醚3．能与水分层的溶剂是A. 乙醚B. 丙酮C. 甲醇D. 乙醇E. 丙酮/甲醇（1:1）4．下列溶剂与水不能完全混溶的是A. 甲醇B. 正丁醇C. 丙醇D. 丙酮E. 乙醇5．溶剂极性由小到大的是A. 石油醚、乙醚、醋酸乙酯B. 石油醚、丙酮、醋酸乙醋C. 石油醚、醋酸乙酯、氯仿D. 氯仿、醋酸乙酯、乙醚E. 乙醚、醋酸乙酯、氯仿6．比水重的亲脂性有机溶剂是A. 石油醚B. 氯仿C. 苯D. 乙醚E. 乙酸乙酯7．下列溶剂亲脂性最强的是A. Et2 O B. CHCl3C. C6H6D. EtOAcE. EtOH8．下列溶剂中极性最强的是A. Et2O B. EtOAc C. CHCl3（氯仿）D. EtOH E. BuOH （正丁醇）9．下列溶剂中溶解化学成分范围最广的溶剂是A. 水B. 乙醇C. 乙醚D. 苯E. 氯仿10．下述哪项，全部为亲水性溶剂A. MeOH、Me2CO、EtOHB. nBuOH、Et2O、EtOHC. nBuOH、MeOH、Me2CO、EtOHD. EtOAc、EtOH、Et2OE. CHCl3 、Et2O、EtOAc11．一般情况下，认为是无效成分或杂质的是A. 生物碱B. 叶绿素C. 鞣质D. 黄酮E. 皂苷12．从药材中依次提取不同极性的成分，应采取的溶剂顺序是A. 乙醇、醋酸乙酯、乙醚、水B. 乙醇、醋酸乙酯、乙醚、石油醚C. 乙醇、石油醚、乙醚、醋酸乙酯D. 石油醚、乙醚、醋酸乙酯、乙醇E. 石油醚、醋酸乙酯、乙醚、乙醇13．不能以有机溶剂作为提取溶剂的提取方法是A. 回流法B. 煎煮法C. 渗漉法D. 冷浸法E. 连续回流法14．以乙醇作提取溶剂时，不能用A. 回流法B. 渗漉法C. 浸渍法D. 煎煮法E. 连续回流法15．提取含淀粉较多的天然药物宜用A. 回流法B. 浸渍法C. 煎煮法D. 蒸馏法E. 连续回流法16．从天然药物中提取对热不稳定的成分宜选用A. 回流提取法B. 煎煮法C. 渗漉法D. 连续回流法E. 蒸馏法17．提取挥发油时宜用A. 煎煮法B. 分馏法C. 水蒸气蒸馏法D. 盐析法E. 冷冻法18．用水提取含挥发性成分的药材时，宜采用的方法是A. 回流提取法B. 煎煮法C. 浸渍法D.水蒸气蒸馏后再渗漉法E. 水蒸气蒸馏后再煎煮法19．煎煮法不宜使用的器皿是A. 不锈钢器B. 铁器C.瓷器D. 陶器E. 砂器20．影响提取效率的最主要因素是A.药材粉碎度B. 温度C. 时间D. 细胞内外浓度差E. 药材干湿度21．22．乙醇不能提取出的成分类型是A．生物碱B．苷C．苷元D．多糖23．连续回流提取法所用的仪器名称叫A．水蒸气蒸馏器B．薄膜蒸发器C．液滴逆流分配器D．索氏提取器E．水蒸气发生器24．两相溶剂萃取法的原理是利用混合物中各成分在两相溶剂中的A．比重不同B．分配系数不同C．分离系数不同D．萃取常数不同E．介电常数不同25．26．可将天然药物水提液中的亲水性成分萃取出来的溶剂是A.乙醚B. 醋酸乙酯C. 丙酮D. 正丁醇E. 乙醇27．从天然药物的水提取液中萃取强亲脂性成分，宜选用A. 乙醇B. 甲醇C. 正丁醇D. 醋酸乙醋E. 苯28．从天然药物水煎液中萃取有效成分不能使用的溶剂为A. Me2 CO B. Et2O C. CHCl3D. nBuOHE. EtOAc29．采用液－液萃取法分离化合物的原则是A. 两相溶剂互溶B. 两相溶剂互不相溶C.两相溶剂极性相同D. 两相溶剂极性不同E. 两相溶剂亲脂性有差异30．31．32．33．34．35．36．37．采用乙醇沉淀法除去水提取液中多糖蛋白质等杂质时，应使乙醇浓度达到A.50%以上B.60%以上C.70%以上D.80%以上E.90%以上38．有效成分为黄酮类化合物的天然药物水提取液，欲除去其中的淀粉、多糖和蛋白质等杂质，宜用A. 铅盐沉淀法B. 乙醇沉淀法C. 酸碱沉淀法D. 离子交换树脂法E. 盐析法39．在浓缩的水提取液中，加入一定量乙醇，可以除去下述成分，除了A. 淀粉B. 树胶C. 粘液质D. 蛋白质E. 树脂40．在醇提取浓缩液中加入水，可沉淀A. 树胶B. 蛋白质C. 树脂D. 鞣质E. 粘液质41．42．43．44．45．分馏法分离适用于A．极性大的成分B．极性小的成分C．升华性成分D．挥发性成分E．内酯类成分46．影响硅胶吸附能力的因素有A．硅胶的含水量B．洗脱剂的极性大小C．洗脱剂的酸碱性大小D．被分离成分的极性大小E．被分离成分的酸碱性大小47．48．化合物进行硅胶吸附柱色谱时的结果是A．极性大的先流出B．极性小的先流出C．熔点低的先流出D．熔点高的先流出E．易挥发的先流出49．硅胶吸附柱色谱常用的洗脱剂类型是A．以水为主B．酸水C．碱水D．以醇类为主E．以亲脂性有机溶剂为主50．硅胶吸附柱色谱常用的洗脱方式是A．洗脱剂无变化B．极性梯度洗脱C．洗脱剂的极性由大到小变化D. 酸性梯度洗脱E．碱性梯度洗脱51．52．硅胶薄板活化最适宜温度和时间A.100℃/60minB. 100～150℃/60minC.100～110℃/30minD.110～120℃/30minE.150℃/30min53．54．55．氧化铝，硅胶为极性吸附剂，若进行吸附色谱时，其色谱结果和被分离成分的什么有关A．极性B．溶解度C．吸附剂活度D．熔点E．饱和度56．下列基团极性最大的是A．醛基B．酮基C．酯基D．酚羟基E．甲氧基57．下列基团极性最小的是A．醛基B．酮基C．酯基D．酚羟基E．醇羟基58．下列基团极性最大的是A．羧基B．胺基C．烷基D．醚基E．苯基59．下列基团极性最小的是A．羧基B．胺基C．烷基D．醚基E．苯基60．原理为氢键吸附的色谱是A．离子交换色谱B．凝胶过滤色谱C．聚酰胺色谱D．硅胶色谱E．氧化铝色谱61．62．具下列基团的化合物在聚酰胺薄层色谱中R f值最大的是A. 四个酚羟基化合物B．二个对位酚羟基化合物C．二个邻位酚羟基化合物D. 二个间位酚羟基化合物E．三个酚羟基化合物63．聚酰胺在何种溶液中对黄酮类化合物的吸附最弱A. 水B. 丙酮C. 乙醇D. 氢氧化钠水溶液E.甲醇64．65．化合物进行正相分配柱色谱时的结果是A．极性大的先流出B．极性小的先流出C．熔点低的先流出D．熔点高的先流出E．易挥发的先流出66．化合物进行反相分配柱色谱时的结果是A．极性大的先流出B．极性小的先流出C．熔点低的先流出D．熔点高的先流出E．易挥发的先流出67．正相分配色谱常用的固定相为A．氯仿B．甲醇C．水D．正丁醇E．乙醇68．正相分配色谱常用的流动相为A．水B．酸水C．碱水D．亲水性有机溶剂E．亲脂性有机溶剂69．可以作为分配色谱载体的是A．硅藻土B．聚酰胺C．活性炭D．含水9％的硅胶E．含水9％的氧化铝70．纸色谱的色谱行为是A．化合物极性大R f值小B．化合物极性大R f值大C．化合物极性小R f值小D．化合物溶解度大R f值小E．化合物酸性大R f值大71．正相纸色谱的展开剂通常为A．以水为主B．酸水C．碱水D．以醇类为主E．以亲脂性有机溶剂为主72．薄层色谱的主要用途为A．分离化合物B．鉴定化合物C．分离和化合物的鉴定D．制备化合物E．制备衍生物73．原理为分子筛的色谱是A．离子交换色谱B．凝胶过滤色谱C．聚酰胺色谱D．硅胶色谱E．氧化铝色谱74．凝胶色谱适于分离A. 极性大的成分B. 极性小的成分C. 亲脂性成分D. 亲水性成分E. 分子量不同的成分75．76．77．不适宜用离子交换树脂法分离的成分为A.生物碱B. 生物碱盐C. 有机酸D. 氨基酸E. 强心苷78．79．淀粉和葡萄糖的分离多采用A. 氧化铝色谱B. 离子交换色谱C. 聚酰胺色谱D. 凝胶色谱E. 硅胶吸附柱色谱80．81．与判断化合物纯度无关的是A．熔点的测定B．选二种以上色谱条件检测C．观察结晶的晶型D．闻气味E．测定旋光度82．紫外光谱用于鉴定化合物中的A．羟基有无B．胺基有无C．不饱和系统D．醚键有无E．甲基有无83．红外光谱的单位是A．cm-1B．nm C．m/zD．mm E．δ84．红外光谱中羰基的吸收峰波数范围是A．3000～3400 B．2800～3000C．2500～2800 D．1650～1900E．1000～130085．确定化合物的分子量和分子式可用A．紫外光谱 B．红外光谱C．核磁共振氢谱 D．核磁共振碳谱E．质谱86．用核磁共振氢谱确定化合物结构不能给出的信息是A．碳的数目 B．氢的数目C．氢的位置 D．氢的化学位移E．氢的偶合常数87．用核磁共振碳谱确定化合物结构不能给出的信息是A．氢的数目B．碳的数目C．碳的位置D．碳的化学位移E．碳的偶合常数88．核磁共振氢谱中，2J值的范围为A．0～1Hz B．2～3Hz C．3～5Hz D．5～9Hz E．10～16Hz89．红外光谱的缩写符号是A. UVB. IRC. MSD. NMRE. HI-MS90．核磁共振谱的缩写符号是A . UVB . IRC . MSD . NMRE . HI-MSB 型题 [91-150] [91-93]A . 苯B . 乙醚C . 氯仿D . 醋酸乙酯E . 丙酮 91．亲水性最强的溶剂是 92．亲水性最弱的溶剂是93．按亲水性由强→弱的顺序，处于第三位是 [94-96]C O B .A..-CHO C .COOR-D . -OHE . Ar -OH 94．极性最强的官能团是 95．极性最弱的官能团是96．按极性由小→大顺序，处于第三位官能团是 [97-98]A . 浸渍法B . 渗漉法C . 煎煮法D . 回流法E . 连续回流法 97．从天然药物中提取活性蛋白质最好采用 98．提取时效率高，使用溶剂最少的方法是 [99-100]A . CHCl 3B . Et 2 OC . EtOAcD . n BuOHE . MeOH99．在水提取液中进行液/液萃取分离黄酮类（包括苷）成分最好选用 100．在水提取液中进行液/液萃取分离亲水性皂苷时常采用 [101-103]A . 离子交换色谱B . 聚酰胺色谱C . 凝胶色谱D . 纸色谱E . 硅胶分配色谱 101．分离淀粉与葡萄糖采用 102．黄酮类化合物的分离多采用103．氨基酸的分离多采用[104-106]A. 水B.乙醇C.氯仿D.丙酮E.甲醇104．活性炭柱色谱洗脱力最弱的是105．氧化铝柱色谱洗脱力最弱的是106．聚酰胺柱色谱洗脱力最弱的是[107-100]A. 硅胶B. 氧化铝C. 活性炭D. 氧化镁E. 硅藻土107．非极性吸附剂是108．应用最广的吸附剂是109．吸附力最强的吸附剂是100．既可作吸附剂又常用于分配色谱作载体的物质是[111-112][113-114]A.水B.丙酮C.甲酰胺溶液D.乙醇E. 稀氢氧化钠溶液113．对聚酰胺色谱洗脱力最强的溶液是114．对聚酰胺色谱洗脱力处于第三位的溶剂是：[115-117]A.B.C.OH OHOHOH OHD. E.OHOH115．聚酰胺吸附力最强的化合物是116．聚酰胺吸附力最弱的化合物是117．聚酰胺吸附力处于第三位的是[118-122]A．浸渍法B．煎煮法C．回流提取法D．渗漉法E．连续提取法118．适用于有效成分遇热易破坏的天然药物提取，但浸出效率较差的是119．方法简便，药中大部分成分可被不同程度地提出，但含挥发性成分及有效成分遇热易破坏的天然药物不宜使用的是120．利用溶剂造成的良好浓度差进行提取，浸出效率较高，但溶剂消耗量大，费时长，操作麻烦的是121．采用索氏提取器用有机溶剂进行提取，但提取液受热时间长，对受热易分解的成分不宜使用的是122．采用有机溶剂加热提取天然药物成分，浸出效率高，但受热易破坏的成分不宜用，且溶剂消耗量大，操作麻烦的是[123-127]A．乙醇B．氯仿C．正丁醇D．水E．石油醚123．与水能互溶的有机溶剂是124．从天然药物水提液中萃取皂苷可采用125．比水重的亲脂性溶剂是126．亲脂性最强的溶剂是127．极性最大的有机溶剂是[128-130]A．硅胶色谱B．氧化铝色谱C．离子交换色谱D．聚酰胺吸附色谱E．凝胶色谱128．分离蛋白质、多糖类化合物优先采用129．分离有机酸类化合物优先采用130．分离生物碱类化合物优先采用[131-135]A．浸渍法B．渗漉法C．煎煮法D．回流提取法E．连续回流提取法131．不加热而浸出效率高的是132．以水为溶剂加热提取的是133．有机溶剂用量少而提出效率高的是134．自天然药物中提取合挥发性成分时不宜采用的方法是135．提取受热易破坏的成分最简便的方法是[136-140]A．吸附色谱 B．离子交换色谱C．聚酰胺色谱D．正相分配色谱E．凝胶色谱136．一般分离极性小的化合物可用137．一般分离极性大的化合物可用138．分离大分子和小分子化合物可用139．分离有酚羟基能与酰胺键形成氢键缔合的化合物可采用140．分离在水中可以形成离子的化合物可采用[141-145]A．透析法 B．升华法C．分馏法D．溶剂萃取法E．水蒸气蒸馏法141．提取分离升华性成分可用142．分离和纯化水溶性大分子成分可用143．分离分配系数不同的成分可用144．提取挥发性且与水不相混溶的成分可用145．分离沸点不同的液体成分可用[146-150]A．质谱 B．紫外光谱C．红外光谱D．氢核磁共振谱E．碳核磁共振谱146．用于确定分子中的共轭体系147．用于确定分子中的官能团148．用于测定分子量、分子式，根据碎片离子峰解析结构149．用于确定H原子的数目及化学环境150．用于确定C原子的数目及化学环境C型题：[151-160][151-155]A．煎煮法B．回流法C．二者均可D．二者均不可151．用水提取152．用乙醇提取153．提取挥发油154．用亲脂性有机溶剂提取155．提取遇热破坏成分[156-160][161-165][166-170]X型题：[171-220]171. 既属于水溶性成分，又属于醇溶性成分的是A. 苷类B. 生物碱盐C.挥发油D.鞣质E.蛋白质173. 选择水为溶剂可以提取下列哪些成分A.苷B. 苷元C.生物碱盐D.鞣质E.皂苷174. 属于亲脂性成分的是A.叶绿素B.鞣质C.油脂D.挥发油E.蛋白质175. 不能用高浓度乙醇作提取溶剂的成分有A.苷元B.多糖C. 油脂D. 生物碱E.蛋白质176．属于强极性化合物的是A．高级脂肪酸B．叶绿素C．季铵生物碱D．氨基酸E．油脂177．下列溶剂中属于极性大又能与水混溶者是A. MeOHB. EtOHC. nBuOHO E. tBuOHD. Et2178．天然药物中的多糖主要包括A．淀粉B．葡萄糖C．纤维素D．鼠李糖E．果糖179．下列溶剂极性由强到弱顺序正确的是A．乙醚＞水＞甲醇B．水＞乙醇＞醋酸乙酯C．水＞石油醚＞丙酮D．甲醇＞氯仿＞石油醚E．水＞正丁醇＞氯仿180. 用溶剂法从天然药物中提取化学成分的方法有A.升华法B.渗漉法C.两相溶剂萃取法D.水蒸气蒸馏法E.煎煮法181. 用水提取天然药物时，常不采用A.回流法B.煎煮法C.渗漉法D. 连续回流法E.浸渍法182.煎煮法宜使用的器皿是A.砂器B.搪瓷器C. 玻璃器D.铁器E.不锈钢器183．用水蒸气蒸馏法提取天然药物化学成分，要求此类成分A．能与水反应B．易溶于水C．具挥发性D．热稳定性好E．极性较大184. 水蒸气蒸馏法可用于提取A. 槟榔碱B. 小檗碱C. 麻黄碱D.薄荷醇E.甘草酸185．植物成分中易溶于石油醚、汽油等亲脂性溶剂的有A．糖苷B．鞣质C．香豆素D．萜类E．叶绿素186．用于天然药物化学成分的分离和精制的方法包括A．聚酰胺色谱B．红外光谱C．硅胶色谱D．质谱E．葡聚糖凝胶色谱187．天然药物化学成分的分离方法有A．重结晶法B．高效液相色谱法C．水蒸气蒸馏法D．离子交换树脂法E．核磁共振光谱法188．应用两相溶剂萃取法对物质进行分离，要求A．两种溶剂可任意互溶B．两种溶剂不能任意互溶C．物质在两相溶剂中的分配系数不同D．加入一种溶剂可使物质沉淀析出E．温度不同物质的溶解度发生改变189．用系统溶剂法提取天然药物成分中的游离生物碱、香豆素等化合物时可选用A．水B．碱水C．氯仿D．乙醇E．石油醚190．加入另一种溶剂改变溶液极性，使部分物质沉淀分离的方法有A．水提醇沉法B．醇提水沉法C．酸提碱沉法D．醇提醚沉法E．明胶沉淀法191．调节溶液的pH，改变分子的存在状态，影响溶解度而实现分离的方法有A．醇提水沉法B．酸提碱沉法C．碱提酸沉法D．醇提丙酮沉法E．等电点沉淀法192．如果从水提取液中萃取亲脂性成分，常用的溶剂是A. 苯B.氯仿C. 乙醚D.正丁醇E. 丙酮193.与中性醋酸铅试剂产生沉淀的化合物是A.纤维素B.鞣质C.蛋白质D.氨基酸E.糖194．用正相柱色谱法分离天然药物化学成分时A．只适于分离水溶性成分B．适于分离极性较大成分如苷类等C．适于分离脂溶性化合物如油脂、高级脂肪酸等D．极性小的成分先洗脱出柱E．极性大的成分先洗脱出柱195. 液-液分配柱色谱用的载体主要有A.硅胶B. 聚酰胺C. 硅藻土D.活性炭E.纤维素粉196. 下列有关硅胶的论述，正确的是A.与物质的吸附属于物理吸附B. 对极性物质具有较强吸附力C.对非极性物质具有较强吸附力D .一般显酸性E .含水量越多，吸附力越小197. 聚酰胺吸附色谱法适用于分离A.蒽醌B. 黄酮C.多糖D. 鞣质E. 皂苷198．用聚酰胺色谱法分离天然药物化学成分时；影响吸附能力强弱的因素有A．形成氢键的基团的数目B．是否形成分子内氢键C．化合物的酸碱性强弱D．羰基的位置E．化合物分子中芳香化程度199.下列化合物可被聚酰胺吸附的是A.生物碱B.蒽醌C. 黄酮D.鞣质E.萜类200．研究天然药物化学成分时常采用各种色谱方法，可用于化合物A．提取B．分离C．精制D．鉴别E．结构测定201．根据物质分子大小进行分离的方法有A．透析法B．凝胶过滤法C．两相溶剂萃取法D．分馏法E．沉淀法202．能作为沉淀试剂用于化合物分离的有A．中性醋酸铅B．氨性氯化锶C．五氯化锑D．雷氏铵盐E．醋酸-铜离子203．对天然药物的化学成分进行聚酰胺色谱分离是A．通过聚酰胺与化合物形成氢键缔合产生吸附B．水的洗脱能力最强C．丙酮的洗脱能力比甲醇弱D．可用于植物粗提取物的脱鞣质处理E．特别适宜于分离黄酮类化合物204. 透析法用于分离A. 酚酸与羧酸B.多糖与单糖C.油脂与蜡D.挥发油与油脂E.氨基酸与多肽205. 凝胶过滤法适宜分离A.多肽B.氨基酸C.蛋白质D.多糖E.皂苷206. 离子交换法适宜分离A.肽类B.氨基酸C.生物碱D.有机酸E.黄酮207. 大孔吸附树脂的分离原理包括A.氢键吸附B.范德华引力C.化学吸附D.分子筛性E. 分配系数差异208．大孔吸附树脂A．是吸附性和分子筛性原理相结合的分离材料B．以乙醇湿法装柱后可直接使用C．可用于苷类成分和糖类成分的分离D．洗脱液可选用丙酮和氯仿等E．可选用不同的洗脱液或不同浓度的同一溶剂洗脱209.提取分离天然药物有效成分时不需加热的方法是A. 回流法B.渗漉法C.升华法D.透析法E.盐析法210．结晶物的纯度应由化合物的下列哪项来判断A.晶形B.色泽C.熔点和熔距D.在多种展开剂系统中检定只有一个斑点E. 前面四项均需要211.检查化合物纯度的方法有A.熔点测定B. 薄层色谱法C.纸色谱法D.气相色谱法E.高效液相色谱法212．化合物纯度的检查包括A.有无旋光性B．有无挥发性C．有无明确熔点D．在薄层色谱的三种展开系统中均呈单一斑点E．用反相薄层色谱加以确认213．分子式的测定可采用下列方法A．元素定量分析配合分子量测定B．Klyne经验公式计算C．同位素峰度比法D．高分辨质谱法E．13C-NMR法214．天然药物化学成分结构研究采用的主要方法有A．高效液相色谱法B．质谱法C．气相色谱法D．紫外光谱法E．核磁共振法215．测定和确定化合物结构的方法包括A．确定单体B．物理常数测定C．确定极性大小D．测定荧光性质和溶解性E．解析各种光谱216. MS在化合物分子结构测定中的应用是A.测定分子量B.确定官能团C.推算分子式D.推测结构式E.推断分子构象217．质谱可提供的结构信息有A．确定分子量B．求算分子式C．区别芳环取代D．根据裂解的碎片峰推测结构式E．提供分子中氢的类型、数目218．各种质谱方法中，依据其离子源不同可分为A．电子轰击电离B．加热电离C．酸碱电离D．场解析电离E．快速原子轰击电离219．氢核磁共振谱（1H-NMR）在分子结构测定中的应用是A．确定分子量B．提供分子中氢的类型、数目C．推断分子中氢的相邻原子或原子团的信息D．判断是否存在共轭体系E．通过加入诊断试剂推断取代基类型、数目等220．天然药物化学的研究内容主要包括天然药物中化学成分的A．结构类型B．性质与剂型的关系C．提取分离方法D．活性筛选E．结构鉴定（二）名词解释 [1-22]1．溶剂提取法2．相似相溶原则3．亲水性有机溶剂4．亲脂性有机溶剂5．浸渍法6．煎煮法7．渗漉法8．回流提取法9．水蒸气蒸馏法10．沉淀法11．两相溶剂萃取法12．分配系数13．结晶法14．结晶15．重结晶16．吸附色谱17．活化18．去活化19．离子交换色谱法20．凝胶色谱21．盐析法22．透析法（三）填空题 [1-14]1. 天然药物化学成分的主要分离方法有：、、、、、及等。
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法
气相色谱-质谱联用法通过气相色谱将混合物中的各组分分离，然后将分离后的组分引入质谱仪中进行检测和鉴 定。该方法可用于分析挥发性成分、脂肪酸、酯类等复杂天然药物化学成分。
04 色谱法在天然药物化学成 分提取分离中的应用
柱色谱法
原理
利用不同物质在固定相和流动相 之间的分配系数差异进行分离。
应用
常用于分离和纯化天然药物中的 脂溶性成分，如生物碱、黄酮类
化合物等。
步骤
装柱、上样、洗脱、收集、检测。
薄层色谱法在天然药物化学成分分离中的应用
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间的吸附和分 配行为差异进行分离。
应用
常用于分离和鉴定天然药物中的水溶性成分，如 多糖、氨基酸等。
步骤
制备薄层板、点样、展开、显色、扫描和鉴定。
感谢您的观看
指纹图谱技术有助于评估天然药物的质量稳定性，发现可能 的掺杂物或假冒伪劣产品，提高产品的可追溯性和安全性。
多指标质量控制
多指标质量控制是指同时考虑多个指 标来评估天然药物的质量，包括化学 成分的含量、纯度、稳定性等。
通过多指标质量控制，可以更全面地 评估天然药物的质量，确保产品的质 量和疗效的稳定性。
详细描述
高效液相色谱法采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了快速、高效的分离和检测。 该方法可用于分离和鉴定各种类型的天然药物化学成分，如挥发油、黄酮类、生物碱类等。
气相色谱-质谱联用法
总结词
气相色谱-质谱联用法是一种将气相色谱的高分离效能与质谱的高鉴别能力相结合的方法，适用于复杂天然药物 化学成分的分离和鉴定。
原理
利用溶剂将天然药物中的有效成 分溶解出来，达到提取目的。
操作方法
天然药物化学的基本任务
天然药物化学的基本任务
天然药物化学的基本任务包括以下几个方面：
1. 分离和鉴定天然药物化学成分：天然药物化学研究的首要任务是从天然源中分离和鉴定具有药理活性的天然化合物。
通过使用不同的分离技术和分析方法，如柱层析、液相色谱-质谱联用等，可以纯化和鉴定天然化合物的化学结构，为进一步研究和利用提供基础。
2. 研究天然药物化学成分的药理活性：天然药物中存在多种具有生物活性的化合物，对其进行药理活性研究，了解其对人体的作用机制和潜在的药效，是天然药物化学的重要任务。
通过检测其对特定疾病的治疗效果，评估其药效和安全性，为天然药物的合理利用提供理论依据。
3. 研究天然药物的化学合成和修饰：天然药物的结构和生物活性往往与其特定的化学结构密切相关，在天然药物化学的研究中，可以通过合成和修饰天然化合物，改变其结构和活性，以获得更安全、有效的药物。
因此，研究天然药物的合成和修饰方法，是天然药物化学的基本任务之一。
4. 深入了解天然药物的来源和生物合成途径：天然药物往往由植物、动物、微生物等生物生产，其生物合成途径对于理解天然药物的生物学活性和规模化生产至关重要。
因此，研究天然药物的来源和生物合成途径，可以为天然药物的发现、鉴定和利用提供指导和支持。
综上所述，天然药物化学的基本任务是分离和鉴定活性成分、研究药理活性、化学合成和修饰、以及深入了解天然药物的来源和生物合成途径。
这些任务有助于揭示天然药物的化学本质和生物活性，为天然药物的开发和利用提供科学依据。
天然药物化学成分的提取分离与鉴定
应用：广泛应用 于天然药物、食 品、化妆品等领 域的化学成分提 取
原理：利用微波的热效应和生物效 应，使天然药物中的化学成分快速 提取出来
缺点：设备成本高，对某些成分的 提取效果不佳
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
优点：提取速度快，效率高，能耗 低，操作简便
应用：广泛应用于天然药物化学成 分的提取，如中药、天然植物提取 等
基因工程技术简介： 通过基因编辑、重 组等技术，对生物 体进行改造，以获 得具有特定功能的 生物产品。
基因工程技术在天 然药物化学成分研 究中的应用：通过 基因工程技术，可 以改造生物体，使 其产生具有特定功 能的天然药物化学 成分。
基因工程技术在天然 药物化学成分研究中 的挑战：如何保证基 因工程技术的安全性 和稳定性，以及如何 解决基因工程技术在 天然药物化学成分研 究中的伦理问题。
原理：利用超临界 流体的物理性质进 行萃取
优点：高效、环保、 无污染
应用：广泛应用于 天然药物化学成分 的提取
注意事项：选择合 适的超临界流体和 萃取条件
天然药物化学成分 的分离
原理：利用药物化学成分与溶剂之间的溶解度差异进行分离 操作步骤：溶解、过滤、洗涤、干燥、称重 适用范围：适用于溶解度较低的药物化学成分
步骤：选择合适的 溶剂、加热、过滤、 浓缩、结晶
优点：操作简单、 成本低、提取效 率高
缺点：可能存在溶 剂残留、提取物纯 度不高等问题
原理：利用超声 波的空化作用， 使细胞破裂，释 放出其中的化学 成分
优点：提取效率 高，时间短，操 作简便
缺点：可能会破 坏某些热敏性成 分，需要控制好 超声波的强度和 时间
蛋白质组学技术在药物化学成分鉴定中的 应用：通过蛋白质组学技术，可以鉴定药 物中的化学成分，从而确定药物的化学结 构
天然药物化学成分的提取、分离和鉴定
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
25
2. 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离
(1) 分配比K
(2) 分离因子β
K= CU / CL
β =KA / KB （KA KB ）
上层
下层
β 100
1次萃取，基本分离
10β 100 1012次 β 2 β 1 100次以上 无法分离
C．上样：
D．洗脱：
干法上样/湿法上样；
等度/梯度（洗脱剂极性递增）； Rf=0.2～0.3。
E．洗脱系统的选择： TLC
39
（5）聚酰胺柱色谱
• 高分子聚合物
• 不溶于常见有机溶剂
聚 酰 胺 性 质
• 对碱稳定
• 对酸特别是无机酸稳定性差
可溶于浓盐酸、冰乙酸、甲酸中
40
吸附原理
分子间氢键——半化学吸附
• 球形颗粒，不溶于水，可在水中溶胀； • 由两个部分组成： • 母核（苯乙烯通过二乙烯苯交 联而成的大分子网状结构） • 离子交换基团
50
3. 离子交换树脂的种类
• 阳离子交换树脂：强酸性（-SO3-H+） 弱酸性（-COO-H+）
• 阴离子交换树脂：强碱性（-N+（CH3）3Cl-） 弱碱性（-NH2，-NH-，-N=）
二、天然药物有效成分的分离与精制
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
35
（1）吸附的类型
• 物理吸附： 分子间力，无选择性，可逆。
如硅胶、氧化铝、活性炭
《天然药物化学》课程标准
《天然药物化学》课程标准一、课程性质与定位《天然药物化学》是高职高专药学专业的一门专业基础技术课程，实践性强，是培养相关专业药物制剂提取分离专门人才的一个必备环节。
该课程主要介绍天然药物化学成分的结构、性质、有效成分的提取、分离、鉴定等基本知识，着重培养学生天然药物化学成分提取分离和鉴定的基本技术与技能，同时注意传授知识、培养技能、提高素质为一体，注重培养学生实践际操作能力、综合应用能力、团结协作能力、自主创新能力及终身学习能力。
本课程主要服务于医药、中医药产业，为医药、中医药行业培养岗位技能型人才，其在人才培养方案中的主要作用是：培养从事药物调剂、天然药物制剂产品生产、检验等工作，掌握天然药物化学成分提取、分离和鉴定基本技能，能胜任天然药物提取工、天然药物制剂检验工等相关工作岗位，综合素质好的高技能人才。
因此，本课程的功能是：使学生具有天然药物制剂产品开发和生产等方面技能，为将来学生从事天然药物制剂产品的研究、开发、生产及天然药物及其制剂质量控制工作奠定基础，同时也为医药生产、药品营销企业以及医院天然药物房培养具有良好职业道德、较强专业技能，具有可持续发展能力的高级技术应用性专门人才。
二、课程设计（一）设计思路1.根据本课程在人才培养方案整个课程体系中的定位（课程衔接见图1）。
先修课化学基础课药学类专业基础课药用植物学《天然药物化学》药学专业基础课程药物制剂检测技术药物制剂技术职业技能鉴定就业岗位后续课本课程是在化学基础课、药用植物学等课程的基础上开设的，经过前期的基础学习，学生掌握了一定的基础知识和技能，为本课程的学习奠定了基础。
同时，本课程也为后续《药物制剂技术》等专业课程奠定基础。
2.针对与课程密切相关的三大就业岗位群（天然药物制剂生产岗位群、研发人员的助手岗位群、药学服务岗位群）需求，基于工作过程的需要等等的职业能力和岗位要求分析的基础上确定完成工作所需要的知识点、专业技能和职业素质要求，并兼顾学生考取相关工种涉及到的基础知识和基本技能。
天然药物化学成分提取分离鉴定方法和技术色谱法
21
常用旳硅胶吸附剂
粒径：200-300目 种类：硅胶G——硅胶+粘合剂煅石膏
硅胶GF254——具有荧光物质 硅胶H ——不含粘合剂煅石膏 硅胶HF254 ——具有荧光物质
检验
表面光滑平整，均匀，无杂质
25
操作技术—活化
涂布后旳薄层先在室温下阴干，至完全干透后，
在使用前置合适温度烘烤一定时间进行活化，然
后置干燥器中备用。
硅胶
105℃-110℃
30-60min
氧化铝 105℃-110℃
30min
裂开旳薄层板不能使用!
26
操作技术——点样
▪ 配制样品旳溶剂具高度挥发性和尽量非极性，不然易 使斑点扩展。
影响吸附强弱旳原因： 1、流动相：水＞甲醇或乙醇＞丙酮＞氯仿 ＞稀氨水＞甲酰胺; 2、分子构造：a、形成氢键数目多，吸附 能力强。b、形成份子内氢键，吸附力减弱。 C、芳香化合物中，共轭双键多，吸附牢。
16
课本第33页
形成氢键旳数目
化合物构造对 聚酰胺吸附作 用旳影响
成键基团位置
双键旳数目
分子内氢键
► 多数采用直线形上行展开，薄层板水平角度以75 为最佳。
展开剂要接触到吸附剂 下沿，但切勿接触到样 点（0.5cm左右高度）。
盖上盖子，展开。
观察展开情况。
取出薄层板 29
预饱和中
展开中
预防 边沿效应
30
操作技术——显色
观察措施：日光、荧光、显色。
❖ 本身带有颜色
第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术
第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术天然药物是指直接从生物体中提取的药用物质，具有广泛的药理活性和较低的毒副作用。
天然药物化学成分的提取分离和鉴定是研究天然药物的重要环节，也是发展新药的基础和关键步骤。
本文将介绍天然药物化学成分提取分离和鉴定的一些常用方法与技术。
首先，天然药物化学成分的提取一般采用溶剂提取法。
常用的溶剂有乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯等。
提取方法可以选择加热回流法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。
此外，还可以采用固相微萃取、纤维素醚膜萃取等现代高效分离方法。
其次，天然药物化学成分的分离一般采用色谱技术。
其中，薄层色谱是常用的初步分离方法，其原理是将物质在吸附剂（如硅胶）上作上升或水平传质运动，通过物质在固定相和流动相中的相互作用而分离。
另外，高效液相色谱（HPLC）是分析与分离天然药物中成分的关键技术之一，其原理是利用高压在固定相上进行溶剂流动相与样品中分离物质的相互作用，以实现对成分的分离并进行检测与定量分析。
最后，天然药物化学成分的鉴定一般采用质谱技术和核磁共振技术。
质谱技术主要包括气相质谱（GC-MS）、液相质谱（LC-MS）等方法，通过对分离物质的质谱图谱进行分析，可以确定分子的质量，推测其结构和推测化学元素的相对丰度。
核磁共振技术可以进一步验证分离物质的结构和组成，通过分析核磁共振图谱，可以推断分离物质的分子式、功能基团及它们之间的关系。
除了以上的方法和技术，还可以结合化学方法、光谱方法、生物活性测试等进行天然药物化学成分的鉴定。
化学方法包括化学试剂反应、物质特色反应等，可以用于对特定官能团的定性定量分析。
光谱方法包括红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、荧光光谱等，可以用于分析物质的化学键和基团。
生物活性测试可以通过对天然药物样品进行一系列的生物学活性筛选与测试，以确定其药理活性和药用价值。
综上所述，天然药物化学成分提取分离和鉴定是一项复杂而重要的工作，涉及多个方法与技术的综合应用。
第二章 天然药物化学成分的提取,分离和鉴定方法
• 90年代，开始从植物药中提取目标成分，如从蛇床子、 茵陈蒿、桑白皮中提取活性成分。
中 小 型 SFE 装 置 图
第一节 提取方法
5.超声提取法（ultrasonic extraction) 为物理过程，无化 学反应，生物活性不 减。大能量的超声波 产生的极大压力造成 植物细胞壁及整个生 物体破裂，胞内物质 的释放、扩散及溶解。
1.1 结晶法
关键：选择合适的溶剂
① 对被溶解成分的溶解度随温度不同应有显著差别
②与被结晶成分不应产生化学反应
③ 沸点适中
第二节 分离方法
a 分级沉淀法：改变极性
水提醇沉法：含有糖类或蛋白质的水溶液中，分次加 入乙醇，使含醇量逐步增高，逐级沉淀出分子量段 由大到小的蛋白质、多糖、多肽等。 在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚-丙酮混 合液可使极性有差异的皂苷逐段沉淀出来。
R
CHO CH3 CHO
R’
(D-Glc)2 (D-Glc)2 H
R OR" OH OO O R'
黄夹次苷B 黄夹次苷C
黄夹次苷D
CH3 CH2OH
COOH
H H
H
CH3 OCH3
单乙酰黄夹 次苷B
CH3
H
单乙酰黄夹次苷B R”=COCH3, 其它R”=H
第二节 分离方法
答案：
1. 极性大 小：黄夹苷A＞黄夹苷B ＞次 苷D＞次苷C＞次苷A＞次苷B ＞单乙酰黄夹 次苷B
第一节 提取方法
2.水蒸气蒸馏法（water-steam distillation ） 提取具有挥发性，能随水蒸气 蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。
Simple water-steam distillation refluxing assembly
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第一课件网 （ ）
50
4. 离子交换树脂的应用
• 不同电荷离子的分离；
如水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离
51
水提液 强酸性阳离子交换树脂 流出液 （酸性、中性成分） 强碱性阴离子交换树脂 流出液 （中性成分） 树脂 （酸性成分） 流出液 （碱性成分） 树脂 （两性成分） 树脂 （碱性、两性成分） 氨水洗脱 洗脱液 强碱性阴离子交换树脂
4
（3） 常用溶剂提取方法
• 浸渍法： 水或稀醇，常温或低热
优：简单易行，适用于有效成分遇热易破坏者或含大量淀 粉、树胶的药材的提取；
缺：提取效率低（静态），水溶液易发霉变质。
• 渗漉法： 渗漉筒
优：提取效率相对较高（动态）； 缺：溶剂用量大 • 煎煮法： 水 优：简便易行，药材中大部分成分可不同程度地提出； 缺：受热时间长，不宜用于有效成分遇热易破坏和具有挥 发性有效成分的天然药物的提取。
10
第二节 天然药物有效成分的分离与精制
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
11
1. 根据物质的溶解度差异进行分离
• 调节温度
• 改变混合溶剂的极性
• 调节PH
• 加入某种沉淀试剂
12
（1）调节温度
温度不同，导致溶解度改变，如结晶、重结晶。 待纯化物A+杂质B、C
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
44
4．根据物质分子大小差异进行分离
• 透析法
• 超滤法
• 超速离心法
• 凝胶滤过法：也称为凝胶渗透色谱、分子筛滤过
45
凝胶滤过法 原 理
• 凝胶三维网状结构的分子筛作用；
• 按分子量由大到小的顺序分离。
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
第一课件网 （ ）
24
2. 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离
(1) 分配比K
(2) 分离因子β
K= CU / CL
β =KA / KB （KA KB ）
取、纯化 药材（HA）
碱水提取
碱水提取液 （A-）
药渣
酸化
（脂溶性杂质）
酸水液
（水溶性杂质）
沉淀 （HA）
HA
OHH+
A21
C. 调节PH至等电点，沉淀蛋白
22
（4）加沉淀剂
成分中加入某种沉淀试剂，生成水不溶性盐。 如生物碱类成分加入苦味酸、磷钨酸、雷氏盐
等生成沉淀，与其他组分相分离。
23
二、天然药物有效成分的分离与精制
游离型/分子态 B HA 脂溶性 H+ OHOHH+
解离型/离子态 BH+ A水溶性
19
A．酸/碱法（酸提碱沉法）——生物碱的提取、纯化 醇提物浸膏（B）
稀酸水提取
酸水提取液 （BH+）
药渣 （脂溶性杂质）
碱化
碱水液 （水溶性杂质）
沉淀 （B）
B
H+ OH-
BH+
20
B．碱/酸法（碱提酸沉法）——黄酮、蒽醌等酚性成分的提
常用凝胶种类为葡聚糖凝胶
46
二、天然药物有效成分的分离与精制
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
47
离子交换法 1. 步骤及原理
• 离子交换树脂为固定相，用水、或含水溶剂装柱；
• 含水流动相通过树脂； • 可交换离子与树脂上的交换基团交换，吸附到树脂上； • 中性及无交换离子的成分流出； • 用适当溶剂将吸附到柱上的成分洗脱下来。
48
2. 离子交换树脂的结构和性质
• 球形颗粒，不溶于水，可在水中溶胀； • 由两个部分组成： • 母核（苯乙烯通过二乙烯苯交 联而成的大分子网状结构） • 离子交换基团
49
3. 离子交换树脂的种类
• 阳离子交换树脂：强酸性（-SO3-H+） 弱酸性（-COO-H+）
• 阴离子交换树脂：强碱性（-N+（CH3）3Cl-） 弱碱性（-NH2，-NH-，-N=）
设备较为昂贵，清洗较困难。
7
（4） 影响溶剂提取效率的因素
• 粉碎度
• 温度
• 时间
8
2. 水蒸气蒸馏法
• 具有挥发性；
• 能随水蒸气蒸馏而不被破坏，难溶或不溶于
水；
• 沸点在100℃以上，并在100℃左右有一定的
蒸气压。
第一课件网 （ ）
9
3. 升华法
• 具有升华性的固体物质，如茶叶中的咖啡因。
水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离
52
4. 离子交换树脂的应用
• 不同电荷离子的分离；
如水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离
• 相同电荷但解离程度不同离子的分离。 如碱性不同的生物碱的分离
53
；
http://www.99dyw.co/ 九九电影网 / 九九电影网 http://youhuijuan.co/ 淘宝优惠券网 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014
• 硅胶吸附柱色谱 • 氧化铝吸附柱色谱
A．吸附剂：30～60倍，难分离时提高到100～200倍； B．装柱： 干法装柱/湿法装柱；
C．上样：
D．洗脱：
干法上样/湿法上样；
等度/梯度（洗脱剂极性递增）； Rf=0.2～0.3。
E．洗脱系统的选择： TLC
38
（5）聚酰胺柱色谱
• 高分子聚合物
• 不溶于常见有机溶剂
第一节
• 提取前的准备
系统的文献调研
提取分离方法
原材料的处理
保留凭证标本
• 提取分离一原则
已知物或已知结构类型——文献方法
未知物——活性跟踪（定向分离）
1
一、中草药有效成分的提取
• 溶剂提取法：最常用 • 水蒸气蒸馏法：挥发性 • 升华法 ：升华性
2
1. 溶剂提取法
（1） 选择溶剂考虑因素
上层
下层
β 100
1次萃取，基本分离
10β 100 1012次 β 2 β 1 100次以上 无法分离
25
(3) 分配比与PH
• 酸性物质
HA+H2O A- + H3O+
pKa值越小，酸性越强
• 碱性物质，用其共轭酸的pKa值示
BH+ +H2O B + H 3O+
pKa值越小，碱性越弱
（ 石 蜡 强极性溶剂 油 ） MeOH、CH3CN MeOH-H2O、CH3CN-H2O
极性小的成分
reverse phase chromatography
33
二、天然药物有效成分的分离与精制
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
第一课件网 （ ）
32
正相色谱与反相色谱
载体 正 相 色 谱 硅胶 Si-OH 固定相 水 缓冲液 流动相 弱极性溶剂 CHCl3,EtOAC,BuOH 等 适用范围 极性大的成分
normal-Phase Chromatography 反 相 色 谱
硅藻土、纤维素
键合硅胶 Si-OR RP-2/RP-8/ RP-18
聚 酰 胺 性 质
• 对碱稳定
• 对酸特别是无机酸稳定性差
可溶于浓盐酸、冰乙酸、甲酸中
39
吸附原理
分子间氢键——半化学吸附
40
化合物在含水溶剂中大致有以下规律：
影 响 吸 附 力 的 因 素
1. 形成氢键的基团数目：越多，越强。 2. 形成氢键的基团所处的位置：
处于易形成分子内氢键者，减弱。
超临界流体萃取技术法（SFE）：
超临界流体 处于临界温度和临界压力以上，介于气体和液体之间的物质。 具有液体和气体的双重特性 如：密度与液体近似，粘度与气体近似， 扩散系数是液体的100倍，对很多物质有很强的溶解能力。
•
优：提取效率高；不残留有机溶剂；萃取温度低，对成分的破坏少；
缺：对水溶性成分的溶解能力弱，需加入夹带剂；
•
溶剂尽可能多地溶出有效成分，杂质少溶或不溶。
依据有效成分、杂质、溶剂的极性：相似相溶原理。
•
溶剂的安全性、价廉易得、回收方便等
3
（2） 常见溶剂的种类及其特点
石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇，水
极性：
亲脂性：
亲水性： 与水可以以任意比例混溶的有机溶剂： 与水分层的有机溶剂： 能与水分层的极性最大的有机溶剂： 溶解范围最广的有机溶剂：
溶剂极性