下呼吸道分泌物标本采集规程
痰和呼吸道分泌物标本采集规范
痰和呼吸道分泌物标本采集规范一、微生物学【概述】痰标本采集方便，无创伤性，临床应用广泛，对病原学诊断具有重要价值。
痰标本的正确采集、处理是临床细菌检验成功的关键，标本采集与处理的规范化是准确、及时向临床提供重要的感染信息的基础。
目前咳痰标本仍是最常用、最简单的采样方法，必须指导或辅助患者深咳痰，及时送检，并通过镜检筛选合格标本。
损伤性采样技术仅在选择病例(抗生素治疗反应不佳；可疑特殊病原体感染，如寄生虫、痰菌阴性肺结核、混合感染或二重感染等)使用。
【操作方法】1、咳痰标本采集要求患者在清晨用药前留取，因为晨痰量多，且含菌量也多。
留取前刷牙，用清水漱口3次，以除去口腔内大部分杂菌，之后用力咳痰。
咳痰较困难者可用3％～5％氯化钠溶液雾化蒸气吸入进行导痰；对咳嗽乏力或昏迷患者，可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物；对不能咳痰的婴幼儿或病重患者，如须采集痰标本做结核杆菌培养，可插胃管抽吸胃液标本送检，也可留取12～24h痰液，经漂浮浓集后检查，以提高结核杆菌检出率。
若做细菌或真菌培养，痰液必须盛于无菌容器内送检。
观察痰量应留取24h痰液，必要时在容器内加入少许防腐剂。
2、咽拭子采样上呼吸道感染可通过咽拭子获取标本。
标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。
用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确，避免触及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。
如咽拭子标本发现致病菌，如肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等，且数量较多时，提示有该菌所致感染存在。
3、纤维支气管镜抽吸采样以利多卡因做咽喉部局部麻醉后，插入纤维支气管镜(纤支镜)，达到肺炎病灶引流支气管内，纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶或试管及负压吸引装置，用负压将下呼吸道分泌物经纤支镜吸人标本采集瓶内送检。
气管切开或气管插管患者也可用普通无菌吸痰管直接经人工气道插至大约叶支气管水平，接负压装置将痰液经吸痰管吸入标本采集瓶内。
纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物，但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染，所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。
痰液及下呼吸道分泌物培养简易操作规程
、痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程1 观察标本合格后操作。
一般为晨痰，再留取痰之前刷牙、反复漱口，应从气管深部咳出痰，吐进无菌容器内送检。
涂片白细胞小于10，上皮细胞大于25为不合格痰，相反白细胞大于25，上皮细胞小于10-25为合格痰标本。
2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。
平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小时。
4观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
便培养标准操作流程1、收取有粘液或脓血、稀水粪便标本。
2、点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3、接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板、SS平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。
平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养。
4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
尿培养标准操作流程1 收取晨尿第一泡清洁中段尿。
（把外阴用肥皂清洗一遍，再用清水清洗两遍，待干或用干净布擦干）用导尿管得病号需新换导尿管后取标本2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后将标本混匀，用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环）—接种到血平板，接种环灭菌---待冷后取标本接种到中国兰平板（或麦康凯平板上）。
呼吸道标本细菌学检验操作规程SOP
呼吸道标本细菌学检验操作规程（一）目的：规范呼吸道标本细菌学检验,确保检验结果准确可靠。
（二）适用范围及操作人员：呼吸道标本培养和涂片检检查；检验科工作人员。
（三）支持性文件：《WST805-2022临床微生物检验基本技术标准》、《下呼吸道感染细菌培养操作指南》、《全国临床检验操作规程》。
（四）标本类型：痰、咽拭、支气管肺泡灌洗吸出液、支气管冲洗液或刷子、肺穿刺液等。
（五）标本采集时间：尽量在抗生素使用前采集。
（六）标本采集方法:1、咳痰：适用于肺部感染患者,特别是重病监护室(ICU)及住院的社区获得性肺炎(CAP)、慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)、肺脓肿(咳痰非最适标本)、可疑细菌性病原体引起的肺部感染患者。
咳痰前,患者用无菌生理盐水漱口;指导患者咳出深部痰,勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。
2、气管吸出物：仅当气管插管的患者出现肺炎症状时(如发热或浸润),可采集气管吸出物标本。
从气管中吸痰，用无菌容器留取送检。
3、支气管肺泡灌洗液：利用纤维支气管镜向小支气管和肺泡中注入无菌生理盐水灌洗,在40mL～80mL回收的灌洗液中包含约1mL支气管末梢和肺泡中的分泌物;弃去前段可能污染的部分,收集其余部分后立即送检。
4、保护毛刷标本：将纤维支气管镜插入亚段支气管可疑感染部位,经支气管镜刷检孔推出双层套管中的毛刷(远端填塞聚乙二醇),刷取脓性分泌物,采样后将毛刷回收入双层套管并退出纤维支气管镜,用无菌剪刀剪断毛刷,置于含lmL生理盐水的无菌容器中(仅供需氧培养),快速送检。
5、气管穿刺法在环甲膜下穿刺抽取痰液，收集标本，适用于厌氧菌培养。
6、棉拭采集法用无菌棉拭子轻轻擦拭病人鼻咽部黏膜，留取标本，置无菌试管内送检。
（七）标本拒收标准：1、申请单姓名、科别、床号与标本的标签不符。
2、痰标本呈水样或唾液样。
3、痰涂片白细胞<10／低倍视野，上皮细胞>25／低倍视野。
4、标本容器溢漏，无瓶盖。
5、痰标本留取放置时间太长，超过2小时。
呼吸道标本的采集与送检要求
呼吸道标本的采集与送检要求1.采集标本的选择：常用的呼吸道标本有咽拭子、喉拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液、痰液等。
对于喷嚏液或唾液等非特异性标本的采集，不推荐用于病原体的检测。
2.采集时间：最佳的标本采集时间是在症状出现后24小时内采集，对于特定病原体如流感病毒等，应在症状出现48小时内采集。
3.采集方法：采用无菌的采集器具，如棉签、拭子等。
采集咽拭子时，应当将拭子的头部置于扁桃体和咽后壁的分泌物位置，不应担心引起患者咳嗽反射。
鼻拭子的采集方法是将拭子插入鼻腔内，盘旋擦拭鼻腔黏膜。
4.采集指导：采集者应经过专业培训并熟悉标本采集的技术要领。
采集过程中需要保持呼吸道的湿润，确保采集到的标本质量。
5.标本保存与运输：采集得到的标本应立即置于透明的标本袋中，封口完好。
若运输时间不长，可将标本放入4℃冰箱保存，不得冷冻。
如果运输时间较长，应采用冷冻方式运输（-20℃）。
运输过程中应尽量避免震动或损坏。
6.标本的处理：采集得到标本后，应尽快送往实验室进行处理。
痰液在送往实验室前应保持在4℃存放。
对于支气管肺泡灌洗液等标本，需要在接收实验室前制备样本。
7.实验室检测：送往实验室后，应当及时进行病原体的检测。
常用的检测方法包括细菌培养、病毒核酸检测（如PCR）、真菌培养等。
根据病情需要，还可以进行药敏试验、抗体检测等。
8.结果解读与报告：实验室所得结果需要专业人员进行解读，并及时生成报告。
报告应如实反映标本的检测结果，并提供相应的临床意义和建议。
在进行呼吸道标本的采集与送检时，需要确保采集者具备必要的知识与技能，并严格按照采集与送检要求进行操作，以保证最终的结果准确可靠，为诊治提供有力的支持。
痰液及下呼吸道分泌物培养简易操作规程
.痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程1 观察标本合格后操作。
一般为晨痰，再留取痰之前刷牙、反复漱口，应从气管深部咳出痰，吐进无菌容器内送检。
涂片白细胞小于10，上皮细胞大于25为不合格痰，相反白细胞大于25，上皮细胞小于10-25为合格痰标本。
2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。
平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板的底部向上）于35°C培养18-24小时。
4观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
便培养标准操作流程1.收取有粘液或脓血、稀水粪便标本。
2.点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3.接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板、SS平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。
平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板的底部向上）于35°C培养。
4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
尿培养标准操作流程1 收取晨尿第一泡清洁中段尿。
（把外阴用肥皂清洗一遍，再用清水清洗两遍，待干或用干净布擦干）用导尿管的病号需新换导尿管后取标本2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后将标本混匀，用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环）—接种到血平板，接种环灭菌---待冷后取标本接种到中国兰平板（或麦康凯平板上）。
下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求
下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求发布时间：2021-03-22T02:36:38.082Z 来源：《健康世界》2020年16期作者：李晓英[导读] 下呼吸道感染是目前危害大众健康的严重疾病之一，据调查，该病的致死率位列全球疾病死因的第四位，全球每年因下呼吸道感染而死亡的人数占全球总死亡人数的4.83%左右，对于这种危害性极高的疾病，我们需要及时发现、及时治疗，才能够保证患者的生命安全。
李晓英成都锦江大观医院四川成都 610000下呼吸道感染是目前危害大众健康的严重疾病之一，据调查，该病的致死率位列全球疾病死因的第四位，全球每年因下呼吸道感染而死亡的人数占全球总死亡人数的4.83%左右，对于这种危害性极高的疾病，我们需要及时发现、及时治疗，才能够保证患者的生命安全。
而感染性疾病的诊断金标准为病原学诊断，只有了解药敏结果和病原学结果才能够合理选择抗菌药物，正确用药，以此来避免细菌耐药现象的发生，但是病原学诊断结果正确与否，取决于标本的管理，故临床医护人员应该知晓下呼吸道感染微生物检验标本在留取和运送方面的要求，为接下来的微生物检验和临床诊断奠定可靠的基础。
一、下呼吸道感染微生物检验标本类型下呼吸道感染微生物检验标本主要有两种，其一是纤维支气管镜采集的标本，经过纤维支气管镜获取到的支气管肺泡灌洗液和保护性毛刷更适合做细菌定量培养，当潜在的致病菌菌落数高于阈值时，诊断下呼吸道感染的特异度即可达到82%至91%。
纤维支气管镜获取到支气管灌洗液只用于诊断由严格致病菌引起的肺炎，如结核分支杆菌、军团菌，内源性真菌引起的感染，对其他病原菌的检查效果比较差。
其二就是痰标本，分自然咳痰和诱导痰，自然咳痰适合定性培养，且必须结合痰涂片判断标本的质量，提高感染病原菌诊断的特异性和敏感性。
诱导痰不能通过细菌的浓度判断是否有意义，只适用于检测结合分支杆菌以及卡式肺孢子菌，对其他病原菌的检查效果比较差。
相对来讲，纤维支气管镜的诊断价值远高于痰标本。
呼吸道标本的采集、储存和运送规范
㊃ＣＯＶＩＤ-１９特稿标准／指南㊃ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３-５５０１．２０２０．０１．００５呼吸道标本的采集㊁储存和运送规范杨童玲１，３ 夏爱梅１，３ 胡晓静１ 余艮珍２ 史 欢２ 顾 莺１ 张晓波１ 王传清１ 张崇凡１ 黄国英１作者单位 １复旦大学附属儿科医院 上海，２０１１０２；２华中科技大学同济医学院附属同济医院 武汉，４３００３０；３共同第一作者通讯作者 张崇凡，Ｅ-ｍａｉｌ：ｘｔ２１１３１１＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ；黄国英，Ｅ-ｍａｉｌ：ｇｙｈｕａｎｇ＠ｓｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ流感病毒检测最常见的是采集呼吸道标本，可采用拭子㊁刷子㊁吸出物和灌洗液获取呼吸道标本，可以采集鼻咽㊁口咽㊁鼻孔等㊂曾使用培养法或直接法荧光抗体法进行检测［１，２］，现以逆转录多聚酶链反应（ＲＴ-ＰＣＲ）方法，可以通过样本中少量的病毒核酸扩增而提高检测率［３］㊂急性严重呼吸综合征冠状病毒２（ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２）感染流行期间，ＲＴ-ＰＣＲ是ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染确诊的首选方法［４，５］㊂检测准确性最高的标本是下呼吸道标本，但属于有创性操作㊂由于核酸扩增检测可以检测更低浓度的病毒，并且不需要细胞的存在，因此喉部拭子或唾液样本可能是进行分析的合适样本［６］，但其检出率低于８３％［７］㊂相对无创而准确率高的是鼻咽抽吸物标本，能提供高浓度的感染细胞㊂对于儿童，采集一个口咽拭子和一个鼻部拭子的准确性相当于鼻咽拭子的准确性［８］，是检测准确性与无创性采集的理想搭配㊂但临床上为了避免假阴性，通常会同时采集一个口咽拭子和一个鼻咽拭子㊂口咽拭子的采集相对比较简单，鼻咽拭子的采集需要经过培训，而且鼻咽拭子的采集过程可能会引发患者打喷嚏或者咳嗽而导致气溶胶的产生，存在交叉感染的风险［９］㊂本文基于新型冠状病毒肺炎（ＣＯＶＩＤ-１９）作为乙类传染病甲类管理办法，介绍呼吸道标本的采集㊁贮存和运送［１０，１１］㊂１ 采集对象ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染的ＣＯＶＩＤ-１９疑似病例㊁疑似聚集性病例，其他需要进行ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染诊断或鉴别诊断病例，确诊的ＣＯＶＩＤ-１９是否康复的鉴别病例，或其他需要进一步ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染筛查检测的环境或生物材料㊂２ 采集者从事ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训且为合格者和具备相应的实验技能㊂按照‘儿童新型冠状病毒感染／肺炎疑似和确诊病例快速筛查和临床实践指南“［１２］的要求使用三级防护，最好使用全面型电动送风呼吸器面罩进行有效防护㊂３ 采集标本ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２初步诊断测试，中国疾病预防控制中心（ＣＤＣ）建议收集和检测咳嗽患儿的上呼吸道（鼻咽和口咽拭子）和下呼吸道（痰，如果可能）的样本㊂按照国家卫健委ＣＯＶＩＤ-１９诊疗方案（试行第六版）的要求，尽可能留取痰液标本，气管插管患者采集下呼吸道分泌物标本㊂４ 采集标本时机临床怀疑ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染应立即向当地卫生部门报告，当地公共卫生工作人员将确定患者是否符合ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染调查对象的标准㊂临床标本应在临床或公共卫生实验室采集，用于常规呼吸道病原体检测㊂临床实验室不应从ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染者采集的样本中分离病毒㊂一旦确定了符合ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染对象，应尽快采集样本㊂５ 采样管及其保存液上㊁下呼吸道标本采集后均置于含３ｍＬ病毒保存液的采样管中，推荐以Ｅａｇｌｅ'ｓ基础培养液为基础的保存液㊂保存液中也应添加胎牛血清或牛血清白蛋白等稳定病毒的蛋白质外壳的添加液㊂除此之外，还应添加青霉素㊁链霉素㊁庆大霉素及多黏菌素Ｂ等抑制细菌生长，保存液提供的样本基本是活病毒，可以最大程度保持样本的原始性，后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测，还可用于病毒的培养和分离㊂６ 采样拭子应选用合成纤维或人造纤维，不推荐海绵或棉花拭子，棉花的纤维对蛋白质吸附较强，导致病毒不易洗脱到保存液中，也不推荐尼龙类的纤维，其吸水性不佳，导致采样量不足，影响检出效率㊂７ 样本的储存和拒收原则上样本应立即送检㊂以下是各种储存必需的条件：①采集后，应贴上相应的标签，样本可在４ħ以下保存㊃９１㊃中国循证儿科杂志 ２０２０年２月第１５卷第１期７２ｈ，②如果预计提取检验会延迟，则将样本储存在－７０ħ或更低的温度，③提取的核酸应储存于－７０ħ或更低的温度㊂拒收的样本包括：①没有保存在２ ８ħ或－７０ħ或以下的样本；②样本标签或资料不完整；③样本类型不合适；④样本量不足㊂８ 样本的运送①运送人员防护要求：需对运送人员进行专业培训，做好二级防护，目前中国的标本运送由ＣＤＣ的专业人员来取，工作人员通道进入，污染通道离开㊂②样本需要双层密封袋密封，每袋装１份标本，将样本储存在４ħ，并使用密封的标本转运箱（内附有冰袋）立即运送㊂在每个样本容器上贴上患者的具体信息㊁样本的具体信息㊂为每个提交的样本填写卫生行政部门要求的表格㊂③如果样本在－７０ħ下冷冻，运输时则将其放在密封的标本转运箱（内附有干冰）连夜运送，如无－７０ħ保存条件，则于－２０ħ冰箱暂存㊂９ 加强沟通临床和实验室工作人员之间的及时沟通很重要，这样才能在处理可能ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染病例的标本时将感染的风险降到最低㊂１０ 上呼吸道标本采集１０．１ 口咽拭子 ①视野要求：口咽拭子取样时，应该在良好的照明条件下，使用一次性压舌板来确保咽喉部有足够的视野，压舌板将舌压到一边，避开舌头，拭子擦拭扁桃体（图１Ａ㊁Ｂ）㊂②口咽拭子材质的要求：只能使用带塑料柄的合成纤维棉签，不能使用海藻酸钙拭子或带木柄的拭子，因为它们可能含有灭活某些病毒和抑制ＰＣＲ检测的物质㊂③患儿体位和口腔防护要求：患儿取坐位或卧位，采集者坐在患儿对面，以能够看清患儿口咽部扁桃体为准，采集的时候要让患儿头部上抬３０度，采集时患儿应该用口罩罩住鼻部，减少喷嚏或咳嗽飞沫飞溅（图１Ｃ）㊂④取材要求：将口咽拭子深入口咽部，在原位最好保持１０ｓ以吸收分泌物，用拭子棉签同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，轻度用力拭抹咽后壁部位，应避免触及舌部㊂将口咽拭子棉签头浸入采样管中，尾部弃去，旋紧管盖㊂１０．２ 鼻咽拭子采集（图１Ｄ㊁Ｅ） ①鼻咽拭子材质要求同口咽拭子㊂②准备含３ｍＬ病毒保存液的采样管备用㊂③患儿体位和口腔防护要求：患儿头部后仰７０度，采集时患儿应该用口罩罩住下颌，减少咳嗽飞沫飞溅，取材人站在患儿侧方，防止飞沫飞溅㊂④鼻咽拭子棒长度要求：可以用鼻咽拭子棒测量一下，量出耳根到鼻孔的距离，并用手指做标记㊂⑤体验要求：将采样拭子以垂直鼻子（面部）方向插入鼻腔，与上颚平行，拭子伸入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半，如果能够达到先前估计的深度最好，可有阻挡感㊂⑥取材要求：深入鼻咽部，使拭子在鼻内停留１５ ３０ｓ，轻轻旋转３ ５次，以吸收分泌物，然后抽出拭子㊂⑦取材后要求：将鼻咽拭子棉签头浸入采样管中，尾部弃去，旋紧管盖㊂图１ 上呼吸道标本采集注 Ａ：扁桃体；Ｂ：鼻咽１１ 下呼吸道标本１１．１ 支气管灌洗液 将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管，见患儿有咳嗽反射后再稍微深入１ｃｍ后，注入５ｍＬ温生理盐水，开放负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的黏液于病毒采样管中㊂１１．２ 肺泡灌洗 该方法适合危重患儿，患儿往往因为呼吸衰竭或肺不张需要行气管插管或纤维支气管镜灌洗，便于获取肺泡灌洗液标本，需要在支气管镜室局麻下行电子支气管镜术㊂支气管镜由左鼻孔进入气管㊁支气管后，镜端固定于右／左肺中叶开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌温生理盐水，每次８ｍＬ灌洗２ ３次，灌洗后吸出［１３］，收集至采样管中㊂１１．３ 鼻咽和气管抽吸 婴幼儿多需要采用该途径采集标本，使用痰液收集器连接负压吸引器，痰液收集器前端的吸痰管深入到患儿气道内，见患儿有咳嗽反射后再稍微深入１ｃｍ后开放负压，吸出２ ３ｍＬ呼吸道分泌物至采样管中㊂参考文献[１]ＬｏｅｎｓＫ,ＶａｎＨｅｉｒｓｔｒａｅｔｅｎＬ,Ｍａｌｈｏｔｒａ-ＫｕｍａｒＳ,ｅｔａｌ．Ｏｐｔｉｍａｌｓａｍｐｌｉｎｇｓｉｔｅｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｓｐｏｓｓｉｂｌｙｃａｕｓｉｎｇｃｏｍｍｕｎｉｔｙ-ａｃｑｕｉｒｅｄｌｏｗｅｒｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｔｒａｃｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ,４７(１):２１-３１[２]ＲｏｂｉｎｓｏｎＪＬ,ＬｅｅＢＥ,ＫｏｔｈａｐａｌｌｉＳ,ｅｔａｌ．Ｕｓｅｏｆｔｈｒｏａｔｓｗａｂ㊃０２㊃ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒ Ｆｅｂｕｒａｒｙ２０２０，Ｖｏｌ１５，Ｎｏ１ｏｒｓａｌｉｖａｓｐｅｃｉｍｅｎｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｖｉｒｕｓｅｓｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎ．ＣｌｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,４６(７):ｅ６１-６４[３]ＣｅｎｔｅｒｓｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ(ＣＤＣ)．ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｒａｐｉｄｉｎｆｌｕｅｎｚａｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｔｅｓｔｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｉｎｆｌｕｅｎｚａＡ(Ｈ１Ｎ１)Ｖｉｒｕｓ-ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓ,２００９．ＭＭＷＲＭｏｒｂＭｏｒｔａｌＷｋｌｙＲｅｐ,５８(３０):８２６-８２９[４]国家卫生健康委．关于印发新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)的通知(２０２０-０２-１８)．ｈｔｔｐ:／／ｗｗｗ．ｎｈｃ．ｇｏｖ．ｃｎ／,２０２０．０２．１８[５]ＣｏｒｍａｎＶＭ,ＬａｎｄｔＯ,ＫａｉｓｅｒＭ,ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ２０１９ｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ(２０１９-ｎＣｏＶ)ｂｙｒｅａｌ-ｔｉｍｅＲＴ-ＰＣＲ．ＥｕｒｏＳｕｒｖｅｉｌｌ,２０２０,２５(３)．ｄｏｉ:１０．２８０７／１５６０－７９１７[６]ＷａｎｇＷＫ,ＣｈｅｎＳＹ,ＬｉｕＩＪ,ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＳＡＲＳ-ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｉｎｔｈｒｏａｔｗａｓｈａｎｄｓａｌｉｖａｉｎｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓ．ＥｍｅｒｇＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,２００４,１０(７):１２１３-１２１９[７]ＲｏｂｉｎｓｏｎＪＬ,ＬｅｅＢＥ,ＫｏｔｈａｐａｌｌｉＳ,ｅｔａｌ．Ｕｓｅｏｆｔｈｒｏａｔｓｗａｂｏｒｓａｌｉｖａｓｐｅｃｉｍｅｎｓｆｏｒ１８１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｖｉｒｕｓｅｓｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎ．ＣｌｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,４６(７):ｅ６１-６４[８]ＳｐｅｎｃｅｒＳ,ＴｈｏｍｐｓｏｎＭＧ,ＦｌａｎｎｅｒｙＢ,ｅｔａｌ．ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＳｐｅｃｉｍｅｎＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＩｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓＩｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙＲＴ-ＰＣＲ:ＡＬｉｔｅｒａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ,５７(９),ｐｉｉ:ｅ０００２７－１９[９]ＴｅｌｌｉｅｒＲ．ＲｅｖｉｅｗｏｆａｅｒｏｓｏｌｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｉｎｆｌｕｅｎｚａＡｖｉｒｕｓ．ＥｍｅｒｇＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,２００６,１２(１１):１６５７-１６６２[１０]国家卫生健康委．新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第三版)．２０２０．０１．２８[１１]ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｆｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＣＯＶＩＤ-１９ＲｅｑｕｅｓｔｓｆｏｒＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＰａｎｅｌｓａｎｄＶｉｒｕｓ．ｈｔｔｐｓ:／／ｗｗｗ．ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ／２０１９-ｎｃｏｖ／ｌａｂ／ｔｏｏｌ-ｖｉｒｕｓ-ｒｅｑｕｅｓｔｓ．ｈｔｍｌ[１２]复旦大学附属儿科医院．儿童新型冠状病毒感染／肺炎疑似和确诊病例快速筛查和临床实践指南．中国循证儿科杂志,１５(１):１-４[１３]黄宝兴,邓继岿,王红梅．１６９３例难治性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液病原体培养分析．中国感染控制杂志,１４(６):３７９-３８２．（收稿日期：２０２０-０１-３１ 修回日期：２０２０-０２-１１）（本文编辑：张萍）㊃１２㊃中国循证儿科杂志２０２０年２月第１５卷第１期。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范(1)
下呼吸道感染细菌学检验操作规范(1)下呼吸道感染细菌学检验操作规范近年来，下呼吸道感染病例不断增加，给医疗卫生事业带来了严峻的挑战。
为了确保下呼吸道感染病例的快速、准确、可靠的检测和诊断，制定下呼吸道感染细菌学检验操作规范，将有助于提高检验水平和工作效率，本文将针对细菌学检验操作规范进行详细介绍。
一、检验前准备1. 确定样本种类：本次检验需使用的下呼吸道标本种类有：痰、咽拭子或喉拭子等。
2. 样本采集：根据患者的情况进行样本采集，采集时要求患者咳嗽并咳出深部痰液，若患者不配合，则可采用吸痰管等工具进行痰液采集。
同时也可以采用喉拭子或者咽拭子进行标本采集。
3. 样本处理：对采集的样本，应及时送到检验室进行处理，加工前需要做出相应的标签，记录样本采集时间、采集标本证号、病人基本信息等。
二、操作流程1. 样本处理(a) 痰液标本处理方法：对于痰液标本，先进行分液处理，即分离痰液中的黏液、脓液、红细胞和有机杂质等。
然后以0.9%氯化钠溶液洗涤一次，摇匀后进行离心（5000r/min，10min）。
(b) 咽拭子或喉拭子标本处理：将采集的咽拭子或喉拭子样本转移到含有0.9%氯化钠溶液的离心管中，然后离心（5000r/min，5min），离心后取上清液进行下一步检验。
2. 检测**(a) 涂片制备：将上述处理后的纯化液采用无菌钢丝圈或无菌载玻片刷取标本并均匀涂在两张干净的干燥擅菌片上，干燥后送至乙醇固定。
(b) 染色：采用Gram染色方法进行染色，首先用碘酒凝固后，将菌片在床头火上迅速脱色，用80%乙酸洗去多余的碘酒和颜料，再冲洗水清洗，细心观察染色质量，必要时要反复染色。
(c) 细菌形态观察：观察染色后菌的形态。
非典型革兰氏染色细胞如需观察需通过进一步检验的手段，如选择恰当的培养基及培养条件等。
(d) 培养：将涂片标本在含有相应营养物质的培养基上培养，观察菌落的形态及生理生化特性，以进行分类鉴定。
常用的培养基及相应的菌种分类可参见《常用细菌分类鉴定表》。
标准操作规程(SOP)——呼吸道标本采集
标准操作规程（ＳＯＰ）——一、目的本SOP是为了保证呼吸道标本采集的操作的规范性以及确保采集标本的质量而制定。
二、范围适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行呼吸道标本的采集。
三、程序（一）生物安全要求采集疑似人高致病性禽流感病例和不明原因肺炎病人呼吸道标本时，采集人员需以BSL-3级防护；一般流感样病例，呼吸道标本的采集以BSL-2级防护。
具体参见“生物安全个人防护SOP”。
（二）材料1．无菌拭子：聚丙烯纤维头的拭子2．15-mL离心管3．常用的采样液配制：常用的上呼吸道采样液有：pH7.4～7.6的Hank's或MEM液400mL。
加入庆大霉素(50 mg/mL)0.8mL，多粘菌素B(250μg/mL)3.2mL。
加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4，配制好以后，分装每个采样管2～3mL，-20℃冻存。
4．压舌板（三）实验步骤1．采集呼吸道标本呼吸道标本：包括鼻拭子、咽拭子、鼻咽抽提物、鼻洗液、咽漱液。
最佳采集时间为发病后的前3天，不超过7天。
（1）鼻拭子：采集者左手扶住患者的下颌部，右手持无菌拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。
以另一拭子擦拭另侧鼻孔。
将拭子头浸入采样液中，在采样液中挤压拭子头部数次，用力折断拭子的尾部，将拭子的尾部弃去。
（2）咽拭子：左手用压舌板压住患者的舌头。
右手持无菌拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入采样液中，在采样液中挤压拭子头部数次，用力折断拭子的尾部，将拭子的尾部弃去。
亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中。
（3）漱口液：用10mL生理盐水漱喉。
漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理盐水在咽部转动。
然后，用平皿或烧杯收集洗液。
（4）鼻洗液：让患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 mL生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患者同时发K音以关闭咽腔。
然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧杯收集洗液。
重复此过程洗两侧鼻孔。
（5）鼻咽抽取物：常用于采集气管和支气管分泌物。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范-V1
下呼吸道感染细菌学检验操作规范-V1正文：下呼吸道感染细菌学检验操作规范一、前言下呼吸道感染是常见疾病，在临床中必要时需进行细菌学检验。
准确、规范的检验操作能够提高检验结果的准确性和可靠性，为临床诊疗提供科学依据。
本规范是根据相关理论和实践理念，依据实验室质量控制标准及操作规程，对下呼吸道感染细菌学检验进行规范。
二、样本采集1. 选择合适的采集时间：应在晨起后采集，因为上呼吸道分泌物可能污染下呼吸道样本。
2. 检验前禁食禁水：样本采集前应禁食2-3小时。
3. 涂片制备：应该选择新鲜样本制作涂片，将样本从气管插管或支气管导管中采集，避免口咽部分泌物污染。
用无菌取样管采集后制作涂片，将涂片空气干燥并标记好患者姓名及编号。
4. 样本保存：采集后应立即送至实验室，避免长时间储存，同时应保持样本的温度和湿度。
三、实验室检验1. 样本处理：接收样本后应先进行标本登记，然后进行样本处理。
将样本进行深部咳痰涂片和培养，同时进行革兰染色和氧化酶试验等检验。
2. 培养条件：样本应在充足的氧气供应下进行培养，同时应选择适当的温度和时间进行培养。
3. 培养基选择：根据感染细菌科类别，选择适宜的培养基进行培养。
4. 取样及分离：分离出完整菌落后，应进行鉴定。
不同菌种应进行适当的检验，如荚膜、氧化酶及糖发酵等试验。
5. 结果解释及报告：根据结果及时进行结果解读，避免结果误判和报告失误。
四、实验室质量控制1. 内部质控：实验室应制定内部质量控制程序及相应的质控标准，并按时进行检验。
2. 外部质控：实验室应积极参加外部质量控制项目，及时反馈质量问题并进行改进。
3. 仪器设备的维护和保养：实验室仪器设备的维护与保养相当重要，应按照规定的程序进行保养，避免操作失误和仪器损坏。
五、安全措施1. 实验室人员应严格遵守规范操作，如戴手套、口罩，保证实验室的卫生和安全。
2. 避免细菌感染和交叉污染，在操作过程中应严格遵守操作规程和卫生要求。
(完整版)微生物标本采集及保存要求
微生物标本采集及保存要求一、总则：用于培养的标本在收集时应注意严格无菌操作和及时送检，检测后标本应妥善保存。
二、临床标本的采集（一）下呼吸道分泌物（痰液）令患者早上起床后用清水濑口，不要刷牙，立即从下部呼吸道咳出第一口痰，吐在无菌塑料痰盒中，及时送检。
（二）、尿液（中段尿）护理人员协助采取中段尿约3ml入无菌试管中，及时送检。
（三）、粪便：取有粘液、脓血部分的粪便置玻璃大便专用管中，如为稀水便，可直接收集于玻璃管中，及时送检。
（四）、眼、耳、鼻、喉拭子：将棉拭子沾取少许无菌生理盐水（如沾取的太多，可在无菌生理盐水瓶壁上挤去多余的水份），然后采取可疑部位的分泌物，倒悬于无菌试管内,及时送检。
（五）、脓液：用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液，要尽量多取一些，然后将棉拭置于无菌试管中，及时送检。
（六）、：1、凡怀疑菌血症和败血病的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，应在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。
当然在病人发热或寒颤时采集也可。
2、成人每次采血5—10ml，小儿采血2—3ml；3、严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀，4、从抽血到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固，同时要及时送检。
（七）、穿刺液：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液：严格无菌抽取后，注入含肝素抗凝的无菌试管中，轻轻颠倒试管10余次，使肝素与穿刺液混匀达到抗凝的目的，或直接无菌注入血培养瓶内及时送检。
（八）、胆汁：由专科医生以无菌方法取引流液10ml注入无菌试管。
（九）、脑脊液：以无菌方法取脑脊液3-5ml，置无菌试管内，常温保存送检，如只做培养可直接无菌注入血培养瓶内，及时送检。
（十）、生殖器官标本：阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。
如疑为淋病奈瑟菌感染，做培养检查时，采集的标本应床旁接种并及时放入孵箱培养。
呼吸道标本采集
呼吸道标本采集
【一】评估和观察要点
1.评估患者年龄、病情、治疗、排痰情况及配合程度。
2.评估患者口腔黏膜有无异常。
3.观察痰液的颜色、性质、量、分层、气味、黏稠度和有无肉眼可见的异常物质等。
【二】操作要点
1.自行咳痰采集法晨痰为佳，用冷开水漱口，深吸气后用力咳出呼吸道深部痰液，标本量不少于1ml，痰量少或无痰患者可采用10%盐水加至45度左右雾化吸入后，将痰液咳出。
2.难于自然咳痰、不合作或人工辅助呼吸患者的痰液采集法患者取适当卧位，先叩击患者背部，然后将集痰器与吸引器连接，抽吸痰液2~5ml于集痰器内。
3.气管镜采集法协助医生在气管镜引导下，直接采集标本。
4.咽拭子采集法患者用清水漱口，取出无菌拭子蘸取少量无菌生理盐水；用压舌板轻压舌部，迅速擦拭患者口腔两侧腭弓及咽、扁桃体的分泌物，避免咽拭子触及其他部位；迅速把咽拭子插入无菌试管内塞紧。
5.24h痰标本采集法在广口集痰瓶内加少量清水。
患者起床后进食前漱口后第一口痰开始留取，至次日晨进食前漱口后最后一口痰结束，全部痰液留入集瓶内，记录痰标本总量、外观和性状。
【三】指导要点
1.告知患者正确留取标本对检验结果的重要性
2.告知患者痰标本留取的方法及注意事项
3.告知患者避免将唾液、漱口水鼻涕等混入痰中。
【四】注意事项
1.除24h痰标本外，痰液收集时间宜选择在清晨。
2.查痰培养及肿瘤细胞的标本应立即送检。
3.避免在进食后2h内留取咽拭子标本，以防呕吐，棉签不要触及其他部位以免影响检验
结果。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范
下呼吸道感染细菌学检验操作规范下呼吸道感染细菌学检验操作规范1. 检验前准备检验前要检查所需器材是否齐备，且有使用期限、试剂是否过期。
根据标本性质准备适当的试验室和器材，如培养基、消毒剂、培养皿、显微镜、荧光显微镜等。
2. 标本的采集下呼吸道感染标本需由医生经过特殊训练后采集。
标本采集应在患者用药前进行，避免影响细菌培养。
应采集晨起的第一口咳痰标本，或在空腹情况下采集医生所要求的标本。
标本采集应该避免因细菌其他来源被污染。
3. 标本的存储和运输标本应在采集后尽快送至检验室。
标本在送到检验室的途中应密封，并且避免被震动或过热过冷。
气管切开标本应立即进行培养，对于咳痰标本应在收到后的半小时内进行处理。
4. 标本的处理将留有量行的痰液用橡皮塞挤入干净的西门子杯内，有时也可采用锡制雾化器或喷雾器快速将痰液或分泌物喷在玻片上。
用火焰或消毒器对冷凝吸入性肺炎标本进行消毒，尽可能在细菌沉淀区进行采样。
迅速挤压蓝色鼻咽拭子并置入培养皿内。
标本处理时要注意避免散播细菌。
5. 涂片染色将涂片涂上标本，然后进行染色。
无需特殊之处，可以参照常规的涂片染色法。
6. 培养用普通、选择性和不同的富集培养基进行培养。
常用的培养条件和相关的检测菌株如下：a. 长链球菌–用5%的羊血琼脂培养，将其置于CO2孵育箱中。
b. 肺炎球菌，草绿色链球菌，葡萄球菌–用血精灵琼脂培养。
c. 肺炎链球菌–用富集培养基，如VP培养基、耐苯唑芥庚烷琼脂（PBG琼脂）等。
为了纯化不同类型的肺炎链球菌，还可以选择使用灭菌的吞噬细胞进行富集，例如照片长杆菌（F. tularensis.）。
d. 泡沫状微生物和厌氧菌–分别用PPLO或厌氧和普通琼脂培养。
7. 鉴定和鉴别根据培养结果和临床表现，可对菌株进行初步鉴定和分类。
在进行鉴定过程中，应遵循规范化的步骤，选择正确的API、鉴定手段等，并在鉴定手册中查找相关鉴定概念、流程、依据以及最近的病原学方面的知识，避免误判或漏判。
下呼吸道标本采集方法及注意事项
下呼吸道标本采集方法及注意事项以下是关于呼吸道标本采集方法及注意事项的详细介绍。
一、鼻咽拭子采集方法及注意事项：1. 患者应该坐直或卧床，头后仰约70度，保持舒适的姿势。
2. 采用无菌的棉签，握住棉签的一端，患者张开嘴巴，将棉签快速插入鼻咽部，插入深度约为10-15厘米。
3. 保持棉签在鼻咽部停留5-10秒，旋转棉签2-3次以充分搜集样本。
4. 慢慢取出棉签，避免与患者的口腔接触。
5. 将采集好的标本放入一支装有适当保存液的管子中，尽快送至实验室。
二、咽拭子采集方法及注意事项：1. 患者应该坐直或卧床，头后仰约70度，保持舒适的姿势。
2. 采用无菌的棉签，握住棉签的一端，用力打开患者的嘴巴，将棉签快速刮取患者咽部的分泌物。
3. 刮取时要保证棉签的所有部分都接触到咽部的黏膜表面。
4. 刮取的次数和力度要足够，以保证采集到足够的样本。
5. 将采集好的标本放入一支装有适当保存液的管子中，尽快送至实验室。
三、痰液采集方法及注意事项：1. 患者应该清晨起床后，用温水漱口，以清洁口腔。
2. 患者深呼吸几次，然后用力咳嗽，将咳出的痰液吐入干净、无菌的容器中。
3. 确保采集到的痰液足够量，一般要求5-10毫升。
4. 避免将唾液混入痰液中，以免干扰后续实验室检测结果。
5. 将采集好的痰液标本密封好，尽快送至实验室。
四、气管刷检采集方法及注意事项：1. 采集者需戴上手套、口罩和护目镜，确保个人和患者的安全。
2. 患者应该坐直或卧床，头后仰约70度，保持舒适的姿势。
3. 采用无菌的气管刷，握住刷柄，将刷头插入患者气管。
4. 旋转刷子2-3次，确保刷子与气管壁充分接触，搜集到足够的样本。
5. 慢慢取出气管刷，避免对患者的气管造成刺激。
6. 将采集好的气管刷标本放入一支装有适当保存液的管子中，尽快送至实验室。
五、血液标本采集方法及注意事项：1. 采集者需戴上手套，确保个人和患者的安全。
2. 选择合适的抽血部位，常用的有肘部的静脉或手背的静脉。
下呼吸道分泌物标本检测
下呼吸道分泌物标本检测发表时间：2009-07-28T10:30:14.153Z 来源：《中外健康文摘》2009年第17期供稿作者：朱明淑王香芝 (黑龙江省农垦总局牡丹江分局疾病控制中心[导读] 合格标本的采集是取得正确检验结果的关键，因此临床工作者要指导病人如何采取或亲自去收集，要求采集肺深部的痰液，不要唾液。
【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2009)17-0229-02 1 标本采集合格标本的采集是取得正确检验结果的关键，因此临床工作者要指导病人如何采取或亲自去收集，要求采集肺深部的痰液，不要唾液。
1.1自然咳痰法病人清晨起床，用清水漱口3次后，用力自深部咳出当日第一口浓痰，置于无菌容器中送检。
亦可采用雾化或轻压胸骨柄上方排痰。
1.2气管镜采集法用气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或者用支气管刷直接取得，该方法对于病人有一定痛苦，不易接受。
1.3小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上，取出检查。
1.4气管穿刺法通过气管穿刺取得的痰液主要用于厌氧培养。
1.5胃内采集法把咽入胃内的痰液吸出，用于结核杆菌检查，其阳性结果比咯痰高10％左右。
该方法于清晨空腹时，将胃管插入胃内用注射器抽取胃液。
注意事项：痰液标本的采集以晨痰为佳，咳前充分漱口，减少口腔正常菌群的污染。
防止唾液及上呼吸道分泌物污染。
及时送检，有些细菌极易死亡，如奈瑟菌、肺炎链球菌、产气杆菌等。
作结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4℃冰箱，以免杂菌生长。
有1/4到1/2肺部感染的病人可能发生菌血症，可同时做血培养。
2 细菌学检验涂片检查。
2.1一般细菌涂片检查取血脓性部分涂片革兰染色镜检。
2.2结核分枝杆菌抗酸染色镜检。
2.3真菌涂片检查。
2.4厌氧菌涂片检查。
2.5放线菌及奴卡菌涂片检查。
3 细菌培养痰经匀质化及洗净处理。
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新型冠状病毒感染的肺炎患者下呼吸道标本采集操作规程
下呼吸道标本分为三种：痰液、支气管细胞灌洗液、支气管分泌物，主要以痰液为主。
采集方法包括：自行咳痰法、吸引器经口鼻吸痰法、支气管镜下留取标本法。
一、目的：
取患者下呼吸道分泌物做病毒分离，以帮助诊断。
二、评估：
1、评估患者：
（1）双人核对医嘱，打印标签，准备无菌痰杯或一次性痰液收集器。
（2）核对患者，了解患者病情、咳嗽咳痰情况。
（3）向患者解释，取得配合。
2、评估环境：
安静整洁、宽敞明亮、室温适宜、光线充足。
三、操作前准备：
（1）人员准备：防护级别：三级防护（医用防护口罩、一次性帽子、防护服、护目镜、防护面屏、乳胶手套2双、防护靴套）。
（2）物品准备：治疗车上层：无菌痰杯或一次性痰液收集器、温开水、漱口杯、负压吸引装置一套（检查处于备用状态）、一次性吸引器连接管、密封袋2个、75%酒精、纱布数块、快速手消液、必要时备口咽通气道。