维生素C的含量测定(直接碘量法)

维生素C含量测定

维生素C片含量的测定方法很多，各种方法各有其特点，如：（直接/间接）碘量法；2,6-二氯靛酚法；紫外可见分光光度法和高效液相色谱法。《中国药典》2010年版二部采用碘量法测含量，此

法虽然操作简单，但因制剂中常有还原性物质存在，对此法干扰明显，且由于碘具有挥发性，碘离子易被空气所氧化而使滴定产生误差。常

见的其他滴定法存在滴定终点难以准确判断，如2，6-二氯靛酚法：2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性介质中为红色，碱性介质中

为蓝色，与维生素C反应后，生成无色的还原型酚亚胺，因此，在酸

性条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液显玫瑰红色，即为终点；无

需另加指示剂。

分光光度法运用维生素C的旋光性能进行含量测定，但操作费时，而

高效液相色谱法是目前发展较为迅速的一种方法，灵敏度高，选择性好，是一个准确高效的测定维生素C含量的方法。我们主要介绍的是

直接碘量法。

直接碘量法

一．实验原理

维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参

与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。人体不能自身制造维

生素C，所以人体必须不断地从食物中摄入维生素C，通常还需储藏

能维持一个月左右的维生素C。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏

血酸。

维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。分子中的烯二醇基具

有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基，因而可用I2标准溶液直接

测定。

简写为：C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI

使用淀粉作为指示剂，用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、蔬菜、水果中维生素C的含量。

由于维生素C的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。考虑到I - 在强酸性中也易被氧化，故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。

由于碘具有挥发性，碘离子易被空气所氧化而使滴定产生误差；又由于碘的挥发性和腐蚀性，使碘标准滴定溶液的配制及标定比较麻烦。根据维生素C 在稀盐酸溶液中，酸度小于pH3.8时，Vc吸收曲线比较稳定，在243 nm波长处有最大吸收的特性，可建立紫外分光光度法测定维生素C 片含量的方法。

二．实验用品

分析天平、酸式滴定管(50ml)、锥形瓶(250ml)、

I2标准碘溶液(0.05mol/L)、HAc(2mol／L)；淀粉指示剂溶液（10g/L），

紫外分光光度计；容量瓶(50ml)，吸量管,

维生素C标准溶液：准确称取105℃干燥至恒重的维生素C

0.0500g,加10mL3molL盐酸溶解,并以蒸馏水定容到500mL。

HCl( 3mol/L)

样品维生素C片（100mg/片）。

三．实验步骤

（一）直接碘量法测定维生素C的含量：

1. 测定

准确称取约适量（约相当于维生素C 0.2g）研成粉末的维生素C

药片，置于250ml锥形瓶中，加入100ml新煮沸过并冷却的蒸馏水，加入10mL2mol·L-1HAc和1mL淀粉指示剂（10g/L），立即

0.05mol/L I2标准滴定溶液滴定至稳定的浅蓝色，30s 内不褪色即

为终点。每1mL碘单质滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的维生

素C。

平行测定三次。

2. 计算

维生素C的质量分数，数值以%表示，按下式计算：

维生素C具有很强的还原性。它可分为还原型和脱氢型（氧化型）。根据它具

有的还原性质可测定其含量。

还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚(Dichlorophenolindo phenol，

简写 DCPIP)，本身则氧化成脱氢型。在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。

因此，当用2，6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸尚

未被全部氧化前，则滴下的染料立即被还原成为无色。一旦溶液中的抗坏血酸

已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色

转变成微红色时即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被全部氧化，此时即为滴定终点。从滴定时2，6-二氯酚靛酚标准溶液的消耗量，可以计算出被检物质中抗坏血

酸的含量。

该法简便易行，但有下列缺点:1。在生物组织内和组织提取液中，抗

坏血酸能以脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的形式存在。它们同样具有

维生素的生理功能，但不能将2，6-二氯酚靛酚还原脱色。（总抗坏

血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定）2.生物组

织提取物和生物体液中常含有其它还原性物质，其中有些在同样的条

件下也可使2，6-二氯酚靛酚还原脱色。3.在生物组织中，常有色素

类物质存在，给滴定终点的观察造成困难。

2，6-二氯靛酚法

2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性介质中为红色，碱性介

质中为蓝色，与维生素C反应后，生成无色的还原型酚亚胺，因此，

在酸性条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液显玫瑰红色，即为终点；无需另加指示剂。