氨在肝性脑病发病中的作用
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3.通过各组动物的不同处理,进一步加深对医 学研究设计的理解。
【实验原理】
肝性脑病是继发于严重肝功能损害的精神神 经综合症。关于其发病机制尚未完全阐明。其中, 氨中毒学说备受重视,氨中毒学说的中心内容是 肝性脑病的发生与血氨升高密切相关。正常情况 下,血氨的来源和清除保持动态平衡。肝细胞通 过乌氨酸循环把2个氨分子合成为1个尿素分子, 再由肾脏排出体外。本实验人为地阻断肝脏的血 流,造成肝功能急性损伤的同时,再经消化道灌 入复方氯化铵溶液,使血氨水平明显升高,产生 类似肝性脑病的临床表现。
535.91
整理实验数据,填写上表,分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
【思考题】 1、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否复制肝性脑
病的动物模型?为什么? 2、为什么要设立甲、乙、丙组家兔,作用何在? 3、灌入复方氯化铵溶液后,甲组家兔的呼吸如何
变化?为什么? 4、血氨和血尿素氮的变化有何关系?道理何在? 5、氯化铵在哪些方面对CNS起作用?
甲组:结扎肝蒂 乙组:不结扎肝蒂 丙组;结扎肝蒂
(2)十二指肠插管(三组均做): 沿胃幽门向下找出十二指肠,肠壁作一小切口,插入胃
管(顺十二指肠远端方向插入肠腔5cm),结扎并固定,作 荷包缝合。
将腹壁做连锁缝合,关闭腹壁,用胶布把胃管固定于一 侧耳背上,把家兔松开。 三、实验观察
观察家兔的一般状况、呼吸、肌张力、角膜反射和痛觉 反射等指标。
组别
症状
剂量 时间 血氨(mg/L) 血BUN(mg/L)
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲 86 不明显 √ 16.8 23′30″
1948
236.8
乙 88 减弱
√ 25.2 39 ′ 1.23±0.47100
28.0±98 48.21
丙 78 不明显
31.52
0.4ml/10g
4 2.5%NH4Cl, 1.5%NaHCO3溶液 0.4ml/10g
5 50%谷氨酸钠, 2.5%NH4Cl溶液 0.4ml/10g
甲、乙兔灌复方氯化铵( 3ml/kg/ 5min) 丙兔灌入生理盐水(3ml/kg / 5min ) 每次灌药前观察记录上述指标的变化。
四、血氨和血尿素氮(BUN)的测定 在甲兔第一次痉挛抽搐发作时,固定甲兔,心脏采血5ml,
测定血氨( 1ml )和血尿素氮。 其它组按甲兔出现痉挛抽搐的时间进行心脏取血,测定血氨
氨在肝性脑病发病中的作用
The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy
【实验目的】
1.急性阻断肝脏血流造成急性肝功能损伤模型, 观察相关指标的变化。
2.对经不同处理的实验家兔灌入氯化铵或生理 盐水,观察出现相应症状的时间及所需的氯化铵 用量,测定各组动物实验后的血氨和尿素氮水平, 探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
6、根据氨中毒学说和上面的实验结果推理,表 中5只小鼠腹腔注入不同试剂后会出现什么表现? 小鼠可能发生死亡的次序是什么?本实验说明什么 问题?
小鼠氨中毒的实验设计
Biblioteka Baidu
鼠号 给药试剂
剂量
死亡次序
1 0.85%NaCl溶液
0.4ml/10g
2 2.5%NH4Cl溶液
0.4ml/10g
3 0.5%醋酸, 2.5%NH4Cl溶液
( 1ml )和血尿素氮。 【注意事项】
1、动作要准确、轻柔,以免肝叶破裂出血和损伤隔肌造成 气胸;
2、结扎肝脏时,粗棉线要置于肝叶根部避免勒破肝脏,要 用力结扎,阻断肝脏的血液供应。
3、心脏取血时,注射器要肝素化并干燥,以免溶血;入针 部位要准确,垂直进针,深度适当;
4、每组一位同学负责血氨和血尿素氮(BUN)的测定
【实验器材、动物和药品】 见实验指导
【实验步骤和观察项目】
一、家兔称重,固定,上腹部剪毛。在上腹部正中切口部 位用1%普鲁卡因5ml做皮下浸润麻醉。切开皮肤,沿腹白线 剖开腹壁,长约5—6公分,可见肝脏。
二、急性肝功能不全动物模型的制备及分组 1、实验分组 (1)甲组:肝大部分结扎(结扎肝蒂)+复方NH4Cl溶液
(3ml/kg/5min) (2)乙组:假手术(不结扎肝蒂)+复方NH4Cl溶液
(3ml/kg/5min) (3)丙组:肝大部分结扎(结扎肝蒂)+NS溶液
(3ml/kg/5min)
2、急性肝功能不全动物模型的制备: (1)结扎肝门区血管(肝蒂)
①用手轻压肝表面,在肝与膈肌之间小心用眼科剪将镰状 韧带剪断(切莫损伤膈肌);②翻出除右外叶和尾叶外的 全部肝叶;③结扎肝蒂。
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化
组别
症状
剂量 时间 血氨(mg/L) 血BUN(mg/L)
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲
乙
1.23±0.47
28.0±98
丙
整理实验数据,填写上表,分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化
【实验原理】
肝性脑病是继发于严重肝功能损害的精神神 经综合症。关于其发病机制尚未完全阐明。其中, 氨中毒学说备受重视,氨中毒学说的中心内容是 肝性脑病的发生与血氨升高密切相关。正常情况 下,血氨的来源和清除保持动态平衡。肝细胞通 过乌氨酸循环把2个氨分子合成为1个尿素分子, 再由肾脏排出体外。本实验人为地阻断肝脏的血 流,造成肝功能急性损伤的同时,再经消化道灌 入复方氯化铵溶液,使血氨水平明显升高,产生 类似肝性脑病的临床表现。
535.91
整理实验数据,填写上表,分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
【思考题】 1、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否复制肝性脑
病的动物模型?为什么? 2、为什么要设立甲、乙、丙组家兔,作用何在? 3、灌入复方氯化铵溶液后,甲组家兔的呼吸如何
变化?为什么? 4、血氨和血尿素氮的变化有何关系?道理何在? 5、氯化铵在哪些方面对CNS起作用?
甲组:结扎肝蒂 乙组:不结扎肝蒂 丙组;结扎肝蒂
(2)十二指肠插管(三组均做): 沿胃幽门向下找出十二指肠,肠壁作一小切口,插入胃
管(顺十二指肠远端方向插入肠腔5cm),结扎并固定,作 荷包缝合。
将腹壁做连锁缝合,关闭腹壁,用胶布把胃管固定于一 侧耳背上,把家兔松开。 三、实验观察
观察家兔的一般状况、呼吸、肌张力、角膜反射和痛觉 反射等指标。
组别
症状
剂量 时间 血氨(mg/L) 血BUN(mg/L)
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲 86 不明显 √ 16.8 23′30″
1948
236.8
乙 88 减弱
√ 25.2 39 ′ 1.23±0.47100
28.0±98 48.21
丙 78 不明显
31.52
0.4ml/10g
4 2.5%NH4Cl, 1.5%NaHCO3溶液 0.4ml/10g
5 50%谷氨酸钠, 2.5%NH4Cl溶液 0.4ml/10g
甲、乙兔灌复方氯化铵( 3ml/kg/ 5min) 丙兔灌入生理盐水(3ml/kg / 5min ) 每次灌药前观察记录上述指标的变化。
四、血氨和血尿素氮(BUN)的测定 在甲兔第一次痉挛抽搐发作时,固定甲兔,心脏采血5ml,
测定血氨( 1ml )和血尿素氮。 其它组按甲兔出现痉挛抽搐的时间进行心脏取血,测定血氨
氨在肝性脑病发病中的作用
The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy
【实验目的】
1.急性阻断肝脏血流造成急性肝功能损伤模型, 观察相关指标的变化。
2.对经不同处理的实验家兔灌入氯化铵或生理 盐水,观察出现相应症状的时间及所需的氯化铵 用量,测定各组动物实验后的血氨和尿素氮水平, 探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
6、根据氨中毒学说和上面的实验结果推理,表 中5只小鼠腹腔注入不同试剂后会出现什么表现? 小鼠可能发生死亡的次序是什么?本实验说明什么 问题?
小鼠氨中毒的实验设计
Biblioteka Baidu
鼠号 给药试剂
剂量
死亡次序
1 0.85%NaCl溶液
0.4ml/10g
2 2.5%NH4Cl溶液
0.4ml/10g
3 0.5%醋酸, 2.5%NH4Cl溶液
( 1ml )和血尿素氮。 【注意事项】
1、动作要准确、轻柔,以免肝叶破裂出血和损伤隔肌造成 气胸;
2、结扎肝脏时,粗棉线要置于肝叶根部避免勒破肝脏,要 用力结扎,阻断肝脏的血液供应。
3、心脏取血时,注射器要肝素化并干燥,以免溶血;入针 部位要准确,垂直进针,深度适当;
4、每组一位同学负责血氨和血尿素氮(BUN)的测定
【实验器材、动物和药品】 见实验指导
【实验步骤和观察项目】
一、家兔称重,固定,上腹部剪毛。在上腹部正中切口部 位用1%普鲁卡因5ml做皮下浸润麻醉。切开皮肤,沿腹白线 剖开腹壁,长约5—6公分,可见肝脏。
二、急性肝功能不全动物模型的制备及分组 1、实验分组 (1)甲组:肝大部分结扎(结扎肝蒂)+复方NH4Cl溶液
(3ml/kg/5min) (2)乙组:假手术(不结扎肝蒂)+复方NH4Cl溶液
(3ml/kg/5min) (3)丙组:肝大部分结扎(结扎肝蒂)+NS溶液
(3ml/kg/5min)
2、急性肝功能不全动物模型的制备: (1)结扎肝门区血管(肝蒂)
①用手轻压肝表面,在肝与膈肌之间小心用眼科剪将镰状 韧带剪断(切莫损伤膈肌);②翻出除右外叶和尾叶外的 全部肝叶;③结扎肝蒂。
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化
组别
症状
剂量 时间 血氨(mg/L) 血BUN(mg/L)
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲
乙
1.23±0.47
28.0±98
丙
整理实验数据,填写上表,分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化