分子生物学思考题答案
分子生物学复习思考题附答案二
分子生物学复习思考题二1．写出分子生物学广义的与狭义的定义，现代分子生物学研究的主要内容，以及5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）。
广义上:分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究、以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。
狭义概念:既将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。
其中也涉及到与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
现代分子生物学研究的主要内容有：基因与基因组的结构与功能，DNA的复制、转录和翻译，基因表达调控的研究，DNA重组技术，结构分子生物学等。
5个分子生物学发展的主要大事纪（年代、发明者、简要内容）:1.1944年,著名微生物学家Avery 等人在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。
这一重大发现打破了长期以来，许多生物学家认为的只有象蛋白质那样的大分子才能作为细胞遗传物质的观点，在遗传学上树立了DNA是遗传信息载体的理论。
2. 2.1953年，是开创生命科学新时代具有里程碑意义的一年，Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文，他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上，推导出DNA双螺旋结构模型，为人类充分揭示遗传信息的传递规律奠定了坚实的理论基础。
同年，Sanger历经8年，完成了第一个蛋白质——胰岛素的氨基酸全序列分析。
3. 1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律, Crick在前人研究工作基础上，提出了中心法则理论，对正在兴起的分子生物学研究起了重要的推动作用。
4. 1956年Volkin和Astrachan发现了mRNA(当时尚未用此名)。
5. 1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)；Sinsheimer首先提出人类基因组图谱制作计划设想；Smith等报导了DNA测序中应用荧光标记取代同位素标记的方法；Miller等发现DNA结合蛋白的锌指结构。
分子生物学实验思考题李明
分子生物学实验思考题李明集团标准化工作小组 [Q8QX9QT-X8QQB8Q8-NQ8QJ8-M8QMN]思考题1.在基因组DNA提取过程中应注意哪些问题？1）EB一种诱变剂，操作时一定要注意安全操作，必须戴塑料或乳胶手套。
2)点样的时候要特别小心，注意不要把点样孔底部给刺穿，也要注意防止样品扩散到别的点样孔中去。
3）每取完一种试剂，必须换枪头，避免造成污染。
4）注意电极方向不要弄反。
5）操作是动作要轻柔，避免液体内以及液体与容器间产生的剪切力。
6）混合不同的液体时切忌震荡，甚至要静置。
7）之一各试剂的添加顺序。
2.在电场中，带负电荷的DNA向阳极迁移，该过程受哪些因素的影响1）、 DNA的分子大小: 线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。
2）、琼脂糖浓度一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。
DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。
凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。
分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA 片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。
3）、 DNA分子的构象当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。
相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。
如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。
4）、电源电压在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。
现代分子生物学课后思考题答案
第一章绪论1.染色体具有哪些作为遗传物质的特征？答：①分子结构相对稳定；②能够自我复制，使亲子代之间保持连续性；③能够指导蛋白质的合成，从而控制整个生命过程;④能够产生可遗传的变异。
2.什么是核小体？简述其形成过程。
答：由DN用口组蛋白组成的染色质纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。
核小体是由H2A,H2B,H3,H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bp的DNAS成的。
八聚体在中间，DN册子盘绕在外，而H1则在核小体外面核小体的形成是染色体中DNAK缩的第一阶段。
在核小体中DNAa绕组蛋白八聚体核心，从而使分子收缩至原尺寸的1/7。
200bpDNA完全舒展时长约68nm,却被压缩在10nm的核小体中。
核小体只是DNAE缩的第一步。
核小体长链200b尸核酸酶初步处理一核小体单体200b尸核酸酶继续处理一核心颗粒146bp3简述真核生物染色体的组成及组装过程答：组成：蛋白质+核酸。
组装过程：1,首先组蛋白组成盘装八聚体，DNA®绕其上，成为核小体颗粒，两个颗粒之间经过DNA1接，形成外径10nm的纤维状串珠，称为核小体串珠纤维；2,核小体串珠纤维在酶的作用下形成每圈6个核小体，外径30nm的螺线管结构；3,螺线管结构再次螺旋化，形成超螺旋结构；4,超螺线管，形成绊环，即线性的螺线管形成的放射状环。
绊环在非组蛋白上缠绕即形成了显微镜下可见的染色体结构。
4.简述DNA的一，二，三级结构的特征答：DNA一级结构：4种核甘酸的的连接及排列顺序，表示了该DN册子的化学结构DNAT级结构：指两条多核甘酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构DNAE级结构：指DNAZ螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构6简述DNA双螺旋结构及其在现代分子生物学发展中的意义(1)DNA双螺旋是由两条互相平行的脱氧核甘酸长链盘绕而成的，多核甘酸的方向由核甘酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3,另一条是3-----5。
医学分子生物学复习思考题及答案
医学分子生物学复习思考题及答案第十三章真核基因及基因组1、什么是基因组？答：基因组（genome）是指一个生物体内所有遗传信息的总和。
人类基因组包含了细胞核染色体DNA（常染色体和性染色体）及线粒体DNA所携带的所有遗传信息。
不同生物的基因及基因组的大小及复杂程度各不相同，所贮存的信息的量和质存在着巨大的差异。
2、真核基因的基本结构包括哪些？试述之。
答：真核基因的基本结构包括编码序列及非编码序列编码序列（coding seguence）：包括编码蛋白质及功能RNA（mRNA、rRNA、tRNA、特定小分子RNA）的核苷酸序列。
真核基因的编码序列由外显子及内含子组成，外显子及内含子相间排列，称断裂基因。
内含子数目较外显子数少一个，组蛋白编码基因例外，不含有内含子。
外显子决定表达蛋白多肽及RNA的一级结构。
因此，外显子序列结构通常比较保守，一个碱基的突变常致基因功能的改变，而内含子序列相对变异较大。
每个内含子5’末端与外显子相接处，常为GT，3’末端与外显子相接处常为AG，这一共有序列是mRNA剪接加工时的剪接识别信号。
非编码序列（non-coding sequence）：包括编码序列两侧（上游及下游）的对基因表达具有调控作用的一些调控序列：如启动子、增强子等外显子（exon）；在基因序列中，出现在成熟mRNA分子上的序列。
内含子（intron）：外显子之间、与mRNA剪接过程中被删除部分相对应的间隔序列。
3、什么事顺式作用元件？其化学本质是什么？顺式作用元件主要有哪些？答：非编码序列对基因表达起调控作用，又称调控序列。
位于结构基因（编码序列）的上游及下游，称它们为顺式作用元件（cis-acting element），包括启动子、增强子、沉默子、上游调控元件、加尾信号等。
4、真核基因启动子的功用是什么？其位置如何？答：DNA分子上能介导RNApol与DNA结合并形成转录起始复合物的序列，称之为启动子。
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第一章1 简述孟德尔、摩尔根和沃森等人对分子生物学发展的主要贡献 答：孟德尔的对分子生物学的发展的主要贡献在于他通过豌豆实验，发现了遗传规律、分离规律及自由组 合规律；摩尔根的主要贡献在于发现染色体的遗传机制，创立染色体遗传理论，成为现代实验生物学奠基 人；沃森和克里克在 1953 年提出 DAN 反向双平行双螺旋模型。
2 写出 DNARNA 的英文全称答：脱氧核糖核酸（ DNA, Deoxyribonucleic acid ）， 核糖核酸（ RNA, Ribonucleic acid ）3 试述“有其父必有其子”的生物学本质 答：其生物学本质是基因遗传。
子代的性质由遗传所得的基因决定，而基因由于遗传的作用，其基因的 一半来自于父方，一般来自于母方。
4 早期主要有哪些实验证实 DNA 是遗传物质？写出这些实验的主要步骤 答：一，肺炎双球菌感染实验， 1， R 型菌落粗糙，菌体无多糖荚膜，无毒，注入小鼠体内后，小鼠不死亡。
2，S 型菌落光滑，菌体有多糖荚膜，有毒，注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。
3,用加热的方法杀死 S型细菌后注入到小鼠体内，小鼠不死亡； 二，噬菌体侵染细菌的实验： 1，噬菌体侵染细菌的实验过程：吸附7侵入7复制7组装7释放。
2, DNA 中P 的含量多，蛋白质中 P 的含量少；蛋白质中有 S 而DNA 中没有S,所以用放射性同位素 35S 标记一部分噬菌体的蛋白质， 用放射性同位素32P 标记另一部分噬菌体的 DNA 。
用35P 标记蛋白质的噬菌体侵染后，细菌体内无放射性，即表明噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部； 而用32P 标记DNA 的噬菌体侵染细菌后，细菌体内有放射性，即表明噬菌体的DNA 进入了细菌体内。
三，烟草TMV 的重建实验：1957年，Fraenkel-Conrat 等人，将两个不同的 TMV 株系（S 株系和HR 株系）的蛋 白质和RNA 分别提取出来，然后相互对换，将 S 株系的蛋白质和 HR 株系的RNA ,或反过来将HR 株系的蛋 白质和S 株系的RNA 放在一起，重建形成两种杂种病毒，去感染烟草叶片。
分子生物学思考题答案
分子生物学思考题答案1.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA 的特征？真核生物：①真核基因组庞大。
②存在大量的重复序列。
③大部分为非编码序列(>90％)。
④转录产物为单顺反子。
⑤是断裂基因，有内含子结构。
⑥存在大量的顺式作用元件(启动子、增强子、沉默子)。
⑦存在大量的DNA多态性。
⑧具有端粒(telomere)结构原核生物：①基因组很小，大多只有一条染色体，且DNA含量少。
②主要是单拷贝基因，只有很少数基因〔如rRNA基因〕以多拷贝形式存在。
③整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成；④几乎每个基因序列都与它所编码的蛋白质序列呈线性对应状态1.试述基因克隆载体进化过程。
①pSC101质粒载体，第一个基因克隆载体②ColE1质粒载体，松弛型复制控制的多拷贝质粒③pBR322质粒载体，具有较小的分子量（4363bp）。
能携带6-8 kb的外源DNA片段，操作较为便利④pUC质粒载体，具有更小的分子量和更高的拷贝数⑤pGEM-3Z质粒，编码有一个氨苄青霉素抗性基因和一个lacZ'基因⑥穿梭质粒载体，由人工构建的具有原核和真核两种不同复制起点和选择标记，可在不同的寄主细胞内存活和复制的质粒载体⑦pBluescript噬菌粒载体，一类从pUC载体派生而来的噬菌粒载体2.试述PCR扩增的原理和步骤。
对比DNA体内复制的差异。
原理：首先将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子，DNA聚合酶以单链DNA为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸、合适的Mg2+浓度和实验中提供的引物序列合成新生的DNA分子。
步骤：①将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>94℃）环境下加热1分钟，使双链DNA变性，形成单链模板DNA②降低反应温度（退火，约50℃），约1分钟，使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上③将反应混合物的温度上升到72℃左右保温1-数分钟，在DNA聚合酶的作用下，从引物的3'-端加入脱氧核苷三磷酸，并沿着模板分子按5'→3'方向延伸，合成新生DNA互补链与体内复制的差别：①PCR不产生冈崎片段②在高温条件下反应，不需要DNA解旋酶③PCR可经过多个循环④在体外进行，可调控第六章1.基因敲除原理：又称基因打靶，通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有专一性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点方法：高等动物基因敲除技术，植物基因敲除技术2.完全基因敲除和条件型基因敲除完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动植物个体中的靶基因活性，条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除3.基因定点突变原理：通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列，用于研究某个（些）氨基酸残基对蛋白质的结构、催化活性以及结合配体能力的影响，也可用于改造DNA调控元件特征序列、修饰表达载体、引入新的酶切位点等方法：重叠延伸技术和大引物诱变法第七章1.乳糖操纵子的正负调控（—）阻遏蛋白的负调控①当细胞内有诱导物时，诱导物结合阻遏蛋白，此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。
朱玉贤现代分子生物学第一章思考题参考答案
简述孟德尔、摩尔根和沃森等人对分子生物学发展的主要贡献。
孟德尔、摩尔根和沃森等人都是分子生物学研究领域中的杰出科学家，他们对分子生物学发展做出了重要贡献，简述如下：孟德尔：格雷戈里·孟德尔是遗传学的奠基人，他进行的果蝇和豌豆杂交实验发现了基因的遗传规律，为后来遗传学领域提供了有力的实验和定量分析方法，奠定了遗传学的基础。
摩尔根：托马斯·摩尔根在研究果蝇的遗传学时，发现了基因在染色体上的位置，提出了遗传连锁的概念，发明了连锁遗传图，在研究遗传突变产生的变异时，提出了基因突变的概念，并通过实验研究证明了遗传物质的DNA分子是遗传信息的携带者。
沃森：詹姆斯·沃森和弗兰西丝·克里克是现代分子生物学的奠基人之一，在探索DNA 的结构和功能方面取得了突破性的成果。
他们基于罗托谷的x线衍射图像，发现了DNA分子是由两个互补的螺旋结构组成的，并提出了广为人知的“双螺旋模型”，深入揭示了DNA作为遗传信息载体的核心机制，开创了基因组学和癌症基因研究等当前分子生物学和医学领域的重要分支。
总的来说，孟德尔、摩尔根和沃森等人都是分子生物学研究领域中的卓越科学家，他们的研究和发现推动了遗传学、分子生物学领域的快速发展，为现代生命科学领域的进展和应用奠定了坚实的基础。
写出DNA、RNA、mRNA和siRNA的英文全名。
DNA: Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸RNA: Ribonucleic acid 核糖核酸mRNA: Messenger RNA 信使RNAsiRNA: Small interfering RNA 小干扰RNA试述“有其父必有其子”的生物学本质。
“有其父必有其子”是指在有性繁殖中，子代继承了父代的遗传物质，遗传基因、表达内容和表型特征都受到遗传基因的影响而与父亲有着密切的联系。
这一原则体现了细胞和遗传学基础的生物学本质。
遗传学上，遗传物质是存在于生物体内的基因，基因是控制生物所有性状的一种遗传单位，也是一个生物体的DNA序列。
分子生物学思考题汇总版
分子生物学思考题一、总论：人类基因与基因组学1、人类基因组计划的精髓是什么？答案一：人类基因组计划的精髓是人类基因组图谱，包括遗传图谱、物理图谱、序列图谱、转录图谱。
1)遗传图谱：又称连锁图谱，是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。
遗传图谱的建立为基因识别和完成基因定位创造了条件。
2)物理图谱：指有关构成基因组的全部基因的排列和间距的信息。
绘制物理图谱的目的是把有关基因的遗传信息及其在每条染色体上的相对位置线性而系统地排列出来。
3)序列图谱：指测定每条染色体的DNA序列，通过DNA序列可以直接推出基因结构、定位已知基因、研究基因起源。
4)转录图谱：指在识别基因组所包含的蛋白质编码序列的基础上绘制的结合有关基因序列、位置及表达模式等信息的图谱。
通过这张图可以了解某一基因在不同时间不同组织、不同水平的表达；也可以了解一种组织中不同时间、不同基因中不同水平的表达，还可以了解某一特定时间、不同组织中的不同基因不同水平的表达。
答案二：人类基因组计划（Human Genome Project, HGP）是一项规模宏大，跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体（指单倍体）中所包含的30亿个碱基对组成的核苷酸序列，从而绘制人类基因组图谱（包括遗传图谱、物理图谱、序列图谱、转录图谱），并且辨识其载有的基因及其序列，达到破译人类遗传信息的最终目的。
基因组计划精髓在于让人类解码生命、了解生命的起源、了解生命体生长发育的规律、认识种属之间和个体之间存在差异的起因、认识疾病产生的机制以及长寿与衰老等生命现象、为疾病的诊治提供科学依据。
1)草图，许多疾病相关的基因被识别；2)SNP（人与人之间的区别），草图提供了一个理解遗传基础和人类特征进化的框架。
3)草图后，研究人员有了新的工具来研究调节区和基因网络。
4)比较其它基因组可以揭示共同的调控元件，和其他物种共享的基因的环境也许提供在个体水平之上的关于功能和调节的信息。
(0462)《分子生物学》复习思考题答案
（0462）《分子生物学》复习思考题答案一、名词解释1. 狭义的分子生物学——是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平阐明蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控机理的学科。
2. 广义的分子生物学——包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。
例如，蛋白质的结构、运动和功能，酶的作用机理和动力学，膜蛋白结构与功能和跨膜运输等。
3. 基因（gene）——是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位。
包括编码蛋白质和tRNA、rRNA的结构基因，以及具有调节控制作用的调控基因。
基因可以通过复制、转录和决定翻译的蛋白质的生物合成，以及不同水平的调控机制，来实现对遗传性状发育的控制。
基因还可以发生突变和重组，导致产生有利、中性、有害或致死的变异。
4. 断裂基因或割裂基因——指基因的编码序列在DNA分子上不连续排列，而被不编码的序列所隔开。
5. 外显子——基因中编码的序列称为外显子（exon），外显子是基因中对应于信使RNA序列的区域。
6. 内含子——编码的间隔序列称为内含子（intron），内含子是在信使RNA被转录后的剪接加工中去除的区域。
7. C值——指生物单倍体基因组中的DNA含量。
C值矛盾（C value paradox）——指真核生物中DNA含量的反常现象。
8. 半保留复制——在DNA分子上的每一条链都含有合成它的互补链所必需的全部遗传信息。
在复制过程中首先是双链解旋并分开，之后以每条链作为模板在其上合成新的互补链，其结果是由一条链可以形成互补的两条链。
这样新形成的两条双链DNA分子与原来DNA 分子的碱基顺序完全一样。
在此过程中，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种方式称为半保留复制。
9. 遗传转化（genetic transformation）——细菌品系由于吸收了外源DNA（转化因子）而发生遗传性状的改变现象。
分子生物学实验思考题答案
分子生物学实验思考题答案分子生物学实验思考题答案实验一、基因组dna的提取1.构建DNA文库时为什么要使用大分子DNA？答、文库的大小(即数目)取决于基因组的大小和片段的大小，片段大则文库数目小一些也可以包含99%甚至以上的基因组。
而文库数目小则方便研究人员操作和文库的保存。
所以构建文库要用携带能力大的载体克隆尽量大的dna片段.2、如何检测和保证dna的质量？答：凝胶电泳看是否有白质和RNA污染等物质，也可以测量OD，用od260/280确定od260/od280<1.8时，说明od260/od280>2.0时蛋白质含量较高，说明od260/od280=1.8~2时RNA含量较高，说明DNA更纯净。
实验二、植物总rna的提取1.核糖核酸酶的变性剂和灭活剂是什么？哪些种类可以用于总RNA的提取？答、有depc,trizol，氧钒核糖核苷复合物，rna酶的蛋白抑制剂以及sds，尿素，硅藻土等；在总rna提取中用pepc,trizol2.如何从总RNA中分离纯化mRNA。
A.利用成熟mRNA末端Polya尾的特性，合成了一个寡核苷酸（DT）引物。
根据碱基互补配对原理，mRNA可以从总RNA中分离出来实验四、大肠杆菌感受态细胞的制备1.在活性细胞的制备过程中，我们应该注意什么？答、a）细菌的生长状态：不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌，最好从-80℃甘油保储存的细菌被直接转移到用于制备感觉细胞的细菌溶液中。
细胞生长密度应刚好进入对数生长期，这可以通过监测培养基的OD600来控制。
dh5α当菌株的OD600为0.5时，细胞密度为5×约107/ml，此时更合适。
密度过高或不足会影响转换效率。
b）所有操作均应在无菌条件和冰上进行；实验操作时要格外小心，悬浮细胞时要轻柔，以免造成菌体破裂，影响转化。
c）在低温条件下，CaCl2处理细胞的转化率随着时间的推移而增加。
D）化合物和无机离子的作用：在Ca2+的基础上，用其他二价金属离子（如Mn2+或Co2+、DMSO或还原剂）处理细菌，可大大提高转化效率（100-1000倍）；e）使用的器具必须干净。
分子生物学第五章课后思考题答案【修订版】
分子生物学第五章作业1、哪些重要的科学发现和实验推动了DNA重组技术的产生及发展？答：近半个世纪来，分子生物学主要取得了三大成就：第一，20世纪40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题；第二，50年代提示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题；第三，50年代末至60年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说,成功地破译了遗传密码，充分认识了遗传信息的流动和表达。
但事实上，DNA分子体外切割与连接技术及核苷酸序列分析技术的进步直接推动了重组DNA技术的产生和发展。
其中，限制性内切核酸酶和DNA连接酶等工具酶的发现和应用是现代生物工程技术史上最重要的事件。
DNA重组技术的产生及发展过程中比较重要的科学发现和实验如下：1957年A.Kornberg从大肠杆菌中发现了DNA聚合酶I。
1965年S. W. Holley完成了酵母丙氨酸tRNA的全序列测定；科学家证明细菌的抗药性通常由"质粒"DNA所决定。
1967年年世界上有五个实验室几乎同时宣布发现了DNA连接酶。
1970 年H.O.Smith，K.W.Wilcox和T.J.Kelley分离了第一种限制性核酸内切酶。
H.M.Temin和D.Baltimore从RNA肿瘤病毒中发现反转录酶。
1972-1973 年H.Boyer，P.Berg等人发展了DNA重组技术，于72年获得第一个重组DNA分子，73年完成第一例细菌基因克隆。
1978 年首次在大肠杆菌中生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。
1981 年R. D. Palmiter和R. L. Brinster获得转基因小鼠；A. C. Spradling和G. M. Rubin得到转基因果蝇。
1982 年美、英批准使用第一例基因工程药物--胰岛素；Sanger等人完成了入噬菌体48,502bp全序列测定。
(完整word版)分子生物学思考题
第3章核酸的结构和功能DNA结构域：组蛋白：是真核生物体细胞染色质中的碱性蛋白质，富含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸：H1、H2A、H2B、H3和H4。
核小体：是构成真核生物染色质的基本结构单位。
核基质：为真核细胞核内的网架结构。
30nm纤丝：核小体进行高度有序的组装，形成左手螺旋的螺线管。
每个螺旋约6个核小体。
H1组蛋白的功能：ⅰ稳定作用；ⅱ保护DNA免受核酸酶降解。
1、DNA双螺旋结构有哪些形式？说明其主要特点和区别。
A型、B型及Z型螺旋；A型螺旋比较粗短，碱基倾角大，大沟深度明显超过小沟；B型比较适中；Z型细长，大沟平坦，核苷酸构象顺反相间，螺旋骨架呈Z字形。
2、什么是DNA的拓扑异构体，它们之间的相互转变依赖于什么？一级结构相同（序列相同）而L值不同的环形DNA分子称为拓扑异构体，它们之间的相互转变依赖于DNA 的拓扑异构酶。
3、简述真核生物染色体的组成，它们是如何组装的？细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构。
DNA--核小体--30nm纤丝--核基质固定--压缩--染色体4、简述细胞内RNA的结构特点以及与DNA的区别。
P575、引起DNA变性的主要因素有哪些？核酸变性后分子结构和性质发生了哪些变化？1）加热；2）极端pH值；3）有机溶剂、尿素和酰胺等。
DNA双螺旋解链。
性质变化：DNA溶液的黏度大大下降、沉降速度增加、浮力密度上升、紫外吸收光谱升高、酸碱滴定曲线改变、生物活性丧失。
6、检测核酸变性的定性和定量方法是什么？具体参数如何？紫外吸收光谱的变化。
以50μg/ml DNA溶液在A260下测定，三者的A260数值为：双链DNA A260=1.00；单链DNA=1.37；游离碱基、核苷酸=1.6。
（结构越有序，吸收光越少）7、DNA的T m值一般与什么因素有关？Tm=4（G+C）+2（A+T）1）DNA的均一性（均质较小）；2）G-C碱基对的含量；3）介质中离子强度。
分子生物学思考题
分子生物学思考题绪论1.简述孟德尔、摩尔根和Wstson等人对分子生物学发展的主要贡献。
2.写出DNA、mRNA和siRNA的英文全名。
3.试述“有其父必有其子”的生物学本质。
4.早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质？写出这些实验的主要步骤。
5.定义重组DNA技术。
6.说出分子生物学的主要研究内容。
7.你认为本世纪初叶分子生物学将在哪些领域取得进展？第2章（染色体与DNA）1.染色体具备哪些作为遗传物质的特征？2.简述真核细胞内核小体的结构特点。
3.请列举3项实验证据来说明为什么染色质中DNA与蛋白质分子是相互作用的。
4.简述DNA的一、二、三级结构。
5.简述组蛋白都有哪些类型的修饰，其功能分别是什么？6.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征？7.DNA双螺旋结构模型是有谁提出的？简述其发现的主要实验依据及其在分子生物学发展中的重要意义。
8.DNA以何种方式进行复制？如何保证DNA复制的准确性？9.简述原核生物DNA的复制特点。
10.什么是DNA的Tm值？它受哪些因素的影响？11.DNA复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制？请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。
12.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？13.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？14.什么是转座子？可分为哪些种类？15.什么是SNP？SNP作为第三代遗传标记的优点。
第三章（生物信息的传递——从DNA到RNA）1.什么是编码链和模板链？2.简述RNA的种类及其生物学作用。
3.RNA的结构特点。
4.简述RNA转录的概念及其基本过程。
5.请比较复制与转录的异同点。
6.大肠杆菌的RNA聚合酶由哪些组成成分？各个亚基的作用？7.什么是闭合复合物、开链复合物及三元复合物？8.简述o因子的作用。
9.什么是Pribnow box？它的保守序列是什么？10.什么是上升突变？什么是下降突变？11.简述原核生物和真核生物mRNA的区别。
分子生物学思考题答案
分子生物学思考题答案【篇一：现代分子生物学课后答案】=txt>第一章绪论1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。
狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或dna的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。
所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。
这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。
阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。
2. 分子生物学发展前景如何？21世纪是生命科学世纪，生物经济时代，分子生物学将取得突飞猛进的发展，结构基因组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、信号跨膜转导成为新的热门领域，将在农业、工业、医药卫生领域带来新的变革。
3. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？社会意义：人类基因组计划与曼哈顿原子计划、阿波罗登月计划并称为人类科学史上的三大工程，具有重大科学意义、经济效益和社会效益。
（1）极大地促进生命科学领域一系列基础研究的发展，阐明基因的结构与功能关系、生命的起源和进化、细胞发育、生产、分化的分子机理，疾病发生的机理等，为人类自身疾病的诊断和治疗提供依据，为医药产业带来翻天覆地的变化（2）促进生命科学与信息科学、材料科学和与高新技术产业相结合，刺激相关学科与技术领域的发展，带动起一批新兴的高技术产业（3）基因组研究中发展起来的技术、数据库及生物学资源，还将推动对农业、畜牧业（转基因动、植物）、能源、环境等相关产业的发展，改变人类社会生产、生活和环境的面貌，把人类带入更佳的生存状态。
现代分子生物学-第二章 染色体与DNA思考题解析
第二章染色体与DNA 重点难点解析1．染色体具备哪些作为遗传物质的特征？答：染色体作为遗传物质的特征：(1）能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性：(2）分子结构相对稳定：(3）能指导蛋白质的合成，控制生命过程：(4)能产生可遗传的变异。
2．简述真核细胞内核小体的结构特点。
答：1）核小体是由 H2A 、 H2B 、 H3、 H4 各两个分子生成的八聚体以及大约200bp DNA 组成。
(2)H3.H4四聚体的形成启动核小体的组装，四聚体与 DNA 结合，再与两个 H2A.H2B 二聚体结合，完成核小体的组装。
(3八聚体在中间， DNA 分子盘绕在外， H1 在核小体的外面，每个核小体只有一个 H1 。
(4）核小体串联起来形成染色质细丝。
形成过程：两分子的H3 和两分子的H4 先形成四聚体，然后由 H2A 和 H2B 形成的异二聚体在该四聚体的两侧，分别结合形成八聚体。
长146bp的 DNA 以左手螺旋的形式盘绕在八聚体上1.8圈，形成核小体的核心颗粒，每圈约80bp。
核心颗粒两端的DNA 各有11bp与从结合，形成完整的核小体。
3．请列举3项实验证据来说明为什么染色质中DNA 与蛋白质分子是相互作用的。
答：证据一：用小球菌核酸酶处理染色质后进行电泳，可以得到一系列片段，这些被保留的 DNA 片段均为200bp基本单位的倍数。
证据二：染色质的电子显微镜图显示出由核小体组成的念珠状结构，可以看到由一条细丝连接着的一连串直径为10nmn的球状体。
在染色质的 X 射线衍射图中也发现了10nm的重复单位。
证据三：在染色质状态下，由 DNA 聚合酶和 RVA 聚合酶催化的 DNA 复制和转录活性大大低于在自由 DNA 中的反应。
DNA 酶 I 对染色质 DNA 的消化远远慢于对纯 DNA 的作用。
4．简述组蛋白的主要修饰类型并说出其功能。
答：组蛋白的修饰作用只发生在细胞周期的特定时间和组蛋白的特定位点上，由于其富含精氨酸和赖氨酸，可以发生包括甲基化、乙基化、磷酸化及泛素化等修饰，所有这些修饰作用都有一个共同的特点：降低组蛋白所携带的正电荷，直接或间接影响基因的转录活性。
分子生物学思考题
分子生物学思考题分子生物学考试重点（前四章+第七、八章）第一章一、DNA重组技术和基因工程技术（p12）答：DNA重组技术：将不同的DNA片段，按照人们的设计定向连接起来，于特定的受体细胞中和载体一起复制并得到表达，产生影响受体的新的遗传性状的技术。
基因工程技术：除DNA重组技术外还包括其他对生物细胞基因组结构进行改造的体系。
关键：工具酶的发现和应用前景：1、合成正常细胞中含量很低的多肽2、定向改造基因组结构3、进行基础研究二、请简述现代分子生物学的研究内容。
（第二版前言、p12标题）答：分子生物学：研究核酸等生物大分子的功能、形态、结构特征的重要性和规律性的科学，主要关心的是核酸在细胞生命过程中的作用，包括核酸的复制和保存、基因的表达和调控。
研究内容：DNA重组技术，基因的调控和表达，生物大分子的功能结构——结构分子生物学，基因组、功能基因组和生物信息学。
第二章一、核小体（P27）答：核小体：由H2A、H2B、H3、H4各两分子组成的八聚体和约200bp的DNA组成。
八聚体在内，DNA盘绕在外。
其是DNA压缩的第一步。
若用核酸酶降解核小体，只能得到约146bp的核心颗粒。
（另：H1在核小体的外面）核心颗粒：除去接头DNA的核小体单体，长度约146bp核小体单体：八聚体+200bpDNA组成，包括接头DNA二、DNA的半保留复制（p38）答：DNA在复制过程中，碱基间的氢键首先断裂，双螺旋解旋解链，每条单链分别作为模板合成新链。
新生成的DNA 分子与原DNA 分子的碱基顺序完全一样，这样每个子代分子的DNA一条单链来自模板链，另一条单链来自新合成的链，这种复制方式成为DNA的半保留复制。
三、转座子（p57）答：转座子是存在于DNA上的可以自主复制和移动的基本单位，其可以分为两大类：插入序列和复合型转座子，另外还有TnA家族。
四、DNA的一、二、三级结构特征。
（P32～p37）答：1、各级结构的定义：DNA的一级结构：指四种核苷酸的连接和排列顺序DNA的二级结构：指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构DNA的三级结构：在DNA双螺旋基础上进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。
(完整word版)医学分子生物学思考题作业答案.
《医学分子生物学》作业(供“专升本”中西医临床医学专业学生使用成人教育学院《医学分子生物学》思虑题1、述 DNA 的右手双螺旋模型构造重点。
(1 两股反向平行的DNA 链绕成同轴右手双螺旋 ,双螺旋表面有大沟和小沟。
(2 脱氧核糖和磷酸经过3’ ,5-磷’酸二酯键相连 ,组成 DNA 主链 ,位于双螺旋的外表面 ,糖基平面与螺旋轴平行 ;碱基则位于双螺旋的内部 ,碱基平面与螺旋轴垂直。
(3 两股 DNA 链经过 Watson-Crick 碱基对联合 ,即 A 与 T 经过两个氢键联合 ,G 与 C 经过三个氢键联合 ,称为碱基互补原则。
这样 ,一股 DNA 的碱基序列决定了另一股 DNA 的碱基序列 ,两股 DNA 链相互当为互补链。
(4 双螺旋直径为 2cm2、真核生物基因组构造与功能的特色。
1.真核生物基因组 DNA 是线性分子 ,其尾端序列特别 ,由寡核苷酸短串连重复序列组成 ,称为端粒。
2.真核生物基因组DNA 有多个复制起点。
3.真核生物有完好的细胞核,核 DNA 与组蛋白、非组蛋白及RNA 形成染色体构造。
4.每一种真核生物的染色体数量都是必定的,除了配子 (精子和卵子是单倍体以外 ,体细胞一般是二倍体。
5.真核生物基因组序列中仅有不到10%是编码序列。
编码序列在基因组序列中的比率是真核生物、原核生物和病毒基因组的重要差别,并且在必定程度上是生物进化的标尺。
6.真核生物基因组含大批重复序列,包含高度重复序列和中度重复序列。
7.真核生物基冈是断裂基因 ,即基因是不连续的 ,由外显子和内含子交替组成。
8.真核生物基因的转录产物是单顺反子mRNA 。
9.真核生物基因组中存在各样基因家族 ,基因家族成员能够串连在一同 ,也能够相距很远 ,但即便串连在一同的基因也是分别表达的。
3、阐述参加 DNA 复制的酶和蛋白质及其作用。
原核生物 DNA 的复制过程需要 30 多种酶和蛋白质参加。
主要有 DNA 聚合酶、解旋酶、拓扑异构酶、引物酶和 DNA 连结酶等 :(1DNA 聚合酶 DNA 聚酶的作用是催化 dNTP 按 5' →3'方向合成 DNA 。
分子生物学实验思考题 李明
思考题1.在基因组DNA提取过程中应注意哪些问题？1）EB一种诱变剂，操作时一定要注意安全操作，必须戴塑料或乳胶手套。
2)点样的时候要特别小心，注意不要把点样孔底部给刺穿，也要注意防止样品扩散到别的点样孔中去。
3）每取完一种试剂，必须换枪头，避免造成污染。
4）注意电极方向不要弄反。
5）操作是动作要轻柔，避免液体内以及液体与容器间产生的剪切力。
6）混合不同的液体时切忌震荡，甚至要静置。
7）之一各试剂的添加顺序。
2.在电场中，带负电荷的DNA向阳极迁移，该过程受哪些因素的影响1）、 DNA的分子大小: 线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。
2）、琼脂糖浓度一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。
DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。
凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。
分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA 片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。
3）、 DNA分子的构象当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。
相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。
如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。
4）、电源电压在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。
但是随着电场强度的增加，不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。
现代分子生物学黑板思考题520
现代分子生物学黑板思考题520分子生物学思考题及参考答案第一章绪论1、什么是基因组？什么是蛋白质组？请具体分析两者的特点以及两者之间的关系。
答：基因组（Genome），一般的定义是单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。
可是基因组测序的结果发现基因编码序列只占整个基因组序列的很小一部分。
因此，基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA 分子。
具体讲，核基因组是单倍体细胞核内的全部DNA 分子；线粒体基因组则是一个线粒体所包含的全部DNA 分子；叶绿体基因组则是一个叶绿体所包含的全部DNA 分子。
蛋白质组(Proteome)提出，指由一个细胞或组织的基因组所表达的所有蛋白质. 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别，它随着组织、甚至环境状态的不同而改变.在转录时，一个基因可以多种mRNA 形式剪接，并且同一蛋白可能以许多形式进行翻译后的修饰. 因此，一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物，蛋白质组中蛋白质的数目有时可以超过基因组的数目。
第二章核酸的结构与功能1、维持或影响双螺旋结构的稳定因素。
P2①氢键作用，弱键加热解链②磷酸二酯键，强键，需要酶降解③静电斥力，在一定离子强度下可以削弱如0.2mol/l的氯化钠溶液④碱基堆积力包括范德华力，疏水作用力2、DNA结构多样性及原因。
2、DNA结构多样性及原因。
答：脱氧核苷酸的含氮碱基的不同,碱基对的排列顺序不同,碱基的数目不同。
DNA二级结构的多态性：除B型DNA外，还发现了A型DNA 和Z型DNA，这一现象称为DNA的多态性；产生的原因在于多核苷酸链的骨架含有许多可以转动的单链，从而可以使糖环采取不同的构象。
3、十字架结构形成的原因。
答：在双链DNA中，如果两条互补的链分开，每条链上的互补序列就有机会发生碱基互补配对形成发夹结构（对单练而言），两个相对的发夹结构形成了十字架构型（对双链而言）。
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1、原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA得特征？真核生物：①真核基因组庞大.②存在大量得重复序列。
③大部分为非编码序列(>９0％).④转录产物为单顺反子.⑤就是断裂基因，有内含子结构。
⑥存在大量得顺式作用元件（启动子、增强子、沉默子)。
⑦存在大量得DNA多态性。
⑧具有端粒（telomerｅ)结构原核生物:①基因组很小,大多只有一条染色体，且DNＡ含量少.②主要就是单拷贝基因，只有很少数基因〔如ｒRNA基因〕以多拷贝形式存在。
③整个染色体DＮA几乎全部由功能基因与调控序列所组成;④几乎每个基因序列都与它所编码得蛋白质序列呈线性对应状态１、试述基因克隆载体进化过程.①pSC10１质粒载体,第一个基因克隆载体②CｏlE1质粒载体,松弛型复制控制得多拷贝质粒③pBR32２质粒载体，具有较小得分子量(４３6３bp)。
能携带6-8ｋb得外源DNＡ片段，操作较为便利④pUＣ质粒载体，具有更小得分子量与更高得拷贝数⑤ｐGEM-３Z质粒，编码有一个氨苄青霉素抗性基因与一个lacZ’基因⑥穿梭质粒载体,由人工构建得具有原核与真核两种不同复制起点与选择标记，可在不同得寄主细胞内存活与复制得质粒载体⑦pBlueｓｃriｐt噬菌粒载体,一类从pUC载体派生而来得噬菌粒载体2、试述PCR扩增得原理与步骤。
对比DNA体内复制得差异.原理：首先将双链DＮＡ分子在临近沸点得温度下加热分离成两条单链DNＡ分子，DNＡ聚合酶以单链DNA为模板并利用反应混合物中得四种脱氧核苷三磷酸、合适得Mg2+浓度与实验中提供得引物序列合成新生得ＤNA分子.步骤:①将含有待扩增ＤNＡ样品得反应混合物放置在高温（〉94℃)环境下加热1分钟，使双链ＤNＡ变性,形成单链模板DNＡ②降低反应温度(退火,约50℃)，约１分钟,使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA结合在靶DNＡ区段两端得互补序列位置上③将反应混合物得温度上升到72℃左右保温1-数分钟，在ＤNA聚合酶得作用下，从引物得3'-端加入脱氧核苷三磷酸,并沿着模板分子按5’→3'方向延伸，合成新生DN Ａ互补链与体内复制得差别：①PＣR不产生冈崎片段②在高温条件下反应，不需要ＤＮA解旋酶③PCR可经过多个循环④在体外进行，可调控第六章1、基因敲除原理：又称基因打靶，通过外源ＤＮＡ与染色体DNA之间得同源重组，进行精确得定点修饰与基因改造,具有专一性强、染色体DＮA可与目得片段共同稳定遗传等特点方法：高等动物基因敲除技术,植物基因敲除技术２、完全基因敲除与条件型基因敲除完全基因敲除就是指通过同源重组法完全消除细胞或者动植物个体中得靶基因活性,条件型基因敲除就是指通过定位重组系统实现特定时间与空间得基因敲除3、基因定点突变原理:通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码得氨基酸序列，用于研究某个（些）氨基酸残基对蛋白质得结构、催化活性以及结合配体能力得影响，也可用于改造DNA 调控元件特征序列、修饰表达载体、引入新得酶切位点等方法:重叠延伸技术与大引物诱变法第七章1、乳糖操纵子得正负调控（—)阻遏蛋白得负调控①当细胞内有诱导物时，诱导物结合阻遏蛋白，此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。
②当无诱导物时,阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录.（=）CAP正调控①当细胞内缺少葡萄糖时ATＰ→CAMＰ结合,CRP生成CＡP与CAP位点结合,增前RNA聚合酶转录活性。
②当有葡萄糖存在时CAＭP分解多合成少,CAＰ不与启动子上得CＡP位点结合RＮA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降2、色氨酸可阻遏、可诱导操纵子3、真核与原核生物基因转录有哪些差异？(1）只有一种RNA聚合酶参与所有类型得原核生物基因转录，而真核生物有３种以上得RN Ａ聚合酶来负责不同类型得基因转录，合成不同类型得、在细胞核内有不同定位得RNA （２)转录产物有差别.原核生物得初级转录产物大多数就是编码序列,与蛋白质得氨基酸序列呈线性关系；而真核生物得初级转录产物很大，含有内含子序列，成熟得mRNA只占初级转录产物得一小部分(3）原核生物得初级转录产物几乎不需要剪接加工,就可直接作为成熟得mRＮA进一步行使翻译模板得功能；真核生物转录产物需要经过剪接、修饰等转录后加工成熟过程才能成为成熟得mＲNA(4）在原核生物细胞中,转录与翻译不仅发生在同一个细胞空间里，而且这两个过程几乎就是同步进行得，蛋白质合成往往在mRNA刚开始转录时就被引发了。
真核生物mＲＮA得合成与蛋白质得合成则发生在不同得空间与时间范畴内７、蛋白质有哪些翻译后得加工修饰？其作用机制与生物学功能就是什么？①Ｎ端ｆMet或Mｅｔ得切除细菌蛋白质氨基端得甲酰基能被脱甲酰化酶水解,不管就是原核生物还就是真核生物，N端得甲硫氨酸往往在多肽链合成完毕之前就被切除。
②二硫键得形成mRNA中没有胱氨酸得密码子,而不少蛋白质都含有二硫键，这就是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸得氧化作用生成得.二硫键得正确形成对稳定蛋白得天然构象具有重要得作用。
③特定氨基酸得修饰氨基酸侧链得修饰作用包括磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化、泛素化、羟基化与羧基化等。
④切除新生肽链中得非功能片段由多个肽链及其她辅助成分构成得蛋白质,在多肽链合成后还需经过多肽链之间以及多肽链与辅基之间得聚合过程,才能成为有活性得蛋白质简述大肠杆菌基因组与真核生物基因组得主要区别答：1、真核生物基因组指一个物种得单倍体染色体组(1n)所含有得一整套基因。
还包括叶绿体、线粒体得基因组。
原核生物一般只有一个环状得ＤNＡ分子，其上所含有得基因为一个基因组。
ﻫ2、原核生物得染色体分子量较小,基因组含有大量单一顺序(unique-sｅquences),DNＡ仅有少量得重复顺序与基因。
真核生物基因组存在大量得非编码序列。
包括：、内含子与外显子、、基因家族与假基因、重复ＤNＡ序列.真核生物得基因组得重复顺序不但大量，而且存在复杂谱系.3、原核生物得细胞中除了主染色体以外，还含有各种质粒与转座因子。
质粒常为双链环状DNA,可独立复制,有得既可以游离于细胞质中，也可以整合到染色体上。
转座因子一般都就是整合在基因组中。
ﻫ真核生物除了核染色体以外，还存在细胞器ＤNA，如线粒体与叶绿体得DＮA,为双链环状，可自主复制。
有得真核细胞中也存在质粒，如酵母与植物。
ﻫ4、原核生物得DNＡ位于细胞得中央,称为类核(nucleｏid)。
真核生物有细胞核,DNA序列压缩为染色体存在于细胞核中。
ﻫ5、真核基因组都就是由DN Ａ序列组成,原核基因组还有可能由ＲNＡ组成，如ＲＮA病毒.第七章1、简述代谢物对基因表达调控得两种方式。
答:①转录水平上得调控;②转录水平上得调控，包括mRNA加工成熟水平上得调控与翻译水平上得调控3、简述乳糖操纵子得调控模型。
答：Ａ、乳糖操纵子得组成:大肠杆菌乳糖操纵子含 Z、Y、Ａ三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶与半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列 O，一个启动子 P 与一个调节基因I.B、阻遏蛋白得负性调节:没有乳糖存在时,I 基因编码得阻遏蛋白结合于操纵序列Ｏ处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖得三种酶；有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖得三种酶。
所以,乳糖操纵子得这种调控机制为可诱导得负调控.Ｃ、CＡP 得正性调节:在启动子上游有 CAP 结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源得环境转变为以乳糖为碳源得环境时，cAMP 浓度升高，与 CAP 结合，使 CAP 发生变构，CA Ｐ结合于乳糖操纵子启动序列附近得 CＡＰ结合位点，激活 RＮA 聚合酶活性，促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因得转录,对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖得三种酶。
Ｄ、协调调节：乳糖操纵子中得 I 基因编码得阻遏蛋白得负调控与 CAP 得正调控两种机制,互相协调、互相制约。
5、什么就是弱化作用？答:1、当培养基中色氨酸得浓度很低时,负载有色氨酸得tRＮA Trｐ也就少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子得速度就会很慢，当4区被转录完成时,核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻得trｐ密码子处),这时得前导区结构就是２－３配对,不形成3－４配对得终止结构,所以转录可继续进行,直到将trp操纵子中得结构基因全部转录。
2、当培养基中色氨酸浓度较高时，核糖体可顺利通过两个相邻得色氨酸密码子，在4区被转录之前就到达２区,使2－３区不能配对，3—4区自由配对形成基一环终止子结构，转录被终止，trｐ操纵子被关闭。
怎么去掉模板呢？再简单得方法就就是用DpnI酶，ＤｐnI能够识别甲基化位点并将其酶切，我们用得模板一般都就是双链超螺旋质粒,从大肠杆菌里提出来得质粒一般都被甲基化保护起来(除非您用得就是甲基化缺陷型得菌株)，而ＰCR产物都就是没有甲基化得，所以DpnI 酶能够特异性地切割模板(质粒）而不会影响PＣR产物，从而去掉模板留下PCR产物，所以提质粒时那些菌株一定不能就是甲基化缺陷株，不会那么凑巧吧，哈哈。
ﻫ关于第三个问题:ﻫ直接把通过DpnI处理得ＰCR产物拿去做转化就行了,呵呵,然后再筛选出阳性克隆,并提出质粒，拿去测序(这个就不用我多说了吧)，验证突变结果,一般都没问题得啦，我做了几十个突变了，到目前为止还没有做不出来得，呵呵，不要砸我啊。
要使动物中编码激素得基因在大肠杆菌中表达，通常遇到得问题有：(１）细菌得RNA聚合酶不能识别真核生物得启动子。
(2)大多数真核基因有内含子,这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mＲNA.细菌细胞没有这样得机制来去除内含子。
(3)有些真核生物得蛋白质就是通过前体分子加工而来得，例如胰岛素就就是通过加工去除前体分子内部得33个氨基酸残基而来，剩下得两段肽链分别形成胰岛素得a、b 链。
ﻫ(4）产生得真核生物得蛋白质产物可以被细菌得蛋白酶所识别与降解。
针对上述可能出现得问题，建议在克隆得过程中采取以下措施：①应将激素得编码序列置于含有核糖体结合位点与起始密码子ATG得细菌强启动子得附近（含有这种序列得载体称表达载体）。
ﻫ②可以以激素得mＲNA为模板用反转录酶合成激素得基因。
这种ＤＮＡ不含内含子可插入到载体中进行克隆。
此外,如果蛋白质序列短则可通过化学合成得到该基因。
合成得基因应含起始密码ATG、通过该激素蛋白得氨基酸序列推测而来得编码序列,以及1～2个终止密码：AＴG—————-编码序列—-——————TＧA ＴＡG ﻫ现在,这个合成基因可被插入载体中. ﻫ③有时加工过程可以在离体条件下进行。
如果加工有困难,可以用合成基因,从而免除加工过程.④选用合适得突变型宿主从而防止蛋白酶水解。