血液葡萄糖测定

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10.0
1000.0
将上述液体混合均匀,置37℃水浴保温 10~15分钟(避免太阳光直射)。
取出后倒入比色杯,用直径1.0cm的比色杯, 在波长505nm下,以试剂空白管调零,分别 读取A标准和A样品。
四、计算公式
浓度以C 表示:
A样品
C=
A标准
× 葡萄糖标准C(mmol/L)
五 、参考值(空腹)
注意事项
5、本法不宜直接用于尿糖测定,因尿中有 高浓度的干扰过氧化物酶反应的物质(如尿 酸),产生负干扰。
有报告预先用离子交换树脂处理尿,除去干 扰后再测定。
七、临床意义
1、血糖增高:
(1)常见于生理因素及注射肾上腺素后; (2)病理性增高:多见于各种糖尿病; (3)某些内分泌疾病也可增高,如甲状
将上述⑴和⑵按1:1的比例混合即为工作液。
(4)注意事项
1)缓冲液中含有叠氮钠作为稳定剂,不 要吞咽,避免与皮肤及粘膜接触。
2)酚试剂是有毒的,切勿吞咽,避免与 皮肤接触,如果与皮肤接触,立 即用大量水冲洗。
3)稳定性和贮存:复溶前试剂在2~8℃ 保存,可稳定至标签上所写的期限。 复溶后,4~8℃可稳定7天,室温可 稳定2天。
血液葡萄糖测定
一、目的
通过学习血糖检测方法,熟悉和掌握一 些生化指标的检测方法并练习静脉采血 技能,有助于慢性病的流行病学调查与 研究。
二、实验原理
糖尿病的诊断一般根据家族史、患病 史、临床体检和实验室的化验结果综 合而定,其中血糖浓度的测定最为重 要。一些轻症或无症状的糖尿病,主 要依据血糖测定而诊断。
1、血清或血浆的血糖为 3.89~ 6.11mmol/L
(70~110mg/dl);
2、全血为3.33~6.1mmol/L
(60~110mg/dl)。
表9-3 糖尿病的诊断标准
糖尿病症状加随机血糖≥11.1 mmoL/L(200 mg/d1)(典型症状
1.
包括多饮、多尿和不明原因的体重下降;随机血糖指不考虑上 次用餐时间,一天中任意时间的血糖
本次课主要介绍: 葡萄糖氧化酶(GOD)法 测定血糖
卫生部临床检验中心血糖测定专 题协作组 推荐方法。
反应原理
葡萄糖氧化酶(GOP)
葡萄糖 + O2 + H2O
葡萄糖酸+H2O2
过氧化物酶(POD)
2H2O2+苯酚+4-氨 基安替吡啉
醌亚胺 +4H2O
醌亚胺在A480nm-A550nm波长有最大吸收, 所产生颜色的强度与血清中葡萄糖的含量 成正比。我们再通过测定标准葡萄糖液和 样品的光密度值相比较,根据公式就可计 算出血清中葡萄糖的含量。
腺机能亢进、肾上腺机能亢进,垂 体前叶嗜酸性细胞腺瘤、垂体前叶 嗜碱性细胞机能亢进症等。
临床意义
2、血糖降低: 见于妊娠期,哺乳期,饥饿及剧 烈运动后。 另见于胰岛细胞瘤及胰腺瘤等。
八、实习报告
1、原理 2、试剂与器材 3、仪器设备 4、实验方法 5、结果计算 6、结果分析
谢谢
4、标本的采集与处理
标本的采集 样品为血清。空腹采集静脉血1.0ml,注入
于1.5ml试管中,以3000r/分的速度离心10 分钟,分离血清备用。
(二)操作步骤
wk.baidu.com蒸馏水 葡萄糖标准
样品 工作液
空白管 (ul)
10.0
标准管 (ul)


10.0


1000.0 1000.0
测定管 (ul)


三、方法
(一) 试剂与器材
1、试剂盒:中生北控生物科技股份有限公司提供;
⑴ 葡萄糖氧化酶 (GOD) 1200 U/L
过氧化物酶 (POD) 1200 U/L
⑵ 磷酸缓冲液(pH7.0) 100mmol/L
苯酚
0.1%
4-氨基安替吡啉 0.77mmol/L
⑶ 葡萄糖标准: 5.55mmol/L(100mg/dl)

空腹血糖≥7.0 mmoL/L(126 mg/d1)(空腹状态指至少8小时没
2.
有进食热量)

3. 75 g葡萄糖负荷后2小时血糖≥11.1 mmoL/L 200 mg/d1) 注:无糖尿病症状者,需另日重复测定血糖明确诊断
六、注意事项
1、如果样品葡萄糖浓度超过 22.2mmol/L(400mg/dl)时,样品量可 减半,改为5ul,标准量不变,重新测 定,结果乘以 2 。
2、材料
注射器(2.0ml)一支; 离心管(1.5ml) 1个; 测定管3支/样品等; 加样器(1000.0ul、20.0ul)各1 支; 吸头50.0ul、1000.0ul数个。
3、仪器设备
(1)分光光度计; (2)微型离心机(1.5ml微量离心管用); (3)恒温水浴箱(37℃)。
2、试剂应在2~8℃条件下储存,对于酶 试剂要注意防冻。
注意事项
3、测定血糖的血清要用新鲜的,采集后 不应超过2小时测定完,否则血清葡萄 糖被血细胞糖降解(每小时可降低7% 即 0.28~0.56mmol/L)
4、如果必要时可做葡萄糖耐量试验,口服
葡萄糖75g溶于300ml水中,2小时后采 血,其血糖值应恢复到空腹前(空腹血 糖增高明显者一般不作此实验)。
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