血液葡萄糖测定
血液葡萄糖定量测定
血液葡萄糖测定-福林（Folin ）-吴宪氏法
目的
了解测定原理，掌握福林-吴宪氏法测定葡萄糖方法。
原理
葡萄糖是多羟基的醛类化合物，其醛基具有还原性，与碱性铜试剂反应后葡萄糖的醛基被氧化成羧基，铜(Cu 2+)离子被还原成砖红色的氧化亚铜（Cu 2O ）。
氧化亚铜可使磷钼酸还原成钼蓝其
蓝色的深浅葡萄糖浓度成正比，在620nm 处有最大吸收峰。
用标准葡萄糖利用分光光度计一同进行比色测定，可计算出样品中葡萄糖的含量。
测定血糖是在特制福林一吴宪血糖管中进行，该血糖管于4m1容量处，管颈缩小成一细管状，
可以减少在煮沸时管内液体与空气的接触，避免产生的氧化亚铜再氧化。
步骤
1. 用钨酸法制备1：10全血无蛋白滤液(相当于将原血稀释了10倍，已由教师准备好)。
盖紧紧管口颠倒摇匀，在420nm 波长处进行比色测定，用空白管调零读取各管的光密度值（OD ）或光吸收值（A ）。
3. 计算
高浓度标准管：。
血液中葡萄糖的测定
六、附注
4. 轻度溶血的血清对结果无明显影响。根据推导，血清中含血红 蛋白 450毫克/100毫升时，可使测定结果降低约10%。 5. 高脂血的标本最后显色有时会出现浑浊，影响测定结果。可先 制备血滤液后再行测定。 6.试剂的配制 1）葡萄糖标准贮存液(10mg/ml)：准确称取干燥无水葡萄糖1克， 加0.25%苯甲酸液至100毫升，置冰箱内保存备用。 2）葡萄糖标准应用液(1mg/ml)：准确吸取上述贮存液10ml，加 0.25%苯甲酸至100毫升。 3） 0.25%苯甲酸液：称取苯甲酸2.5克，加入煮沸的蒸馏水 1000毫升中，使成饱和液，冷却后，取上清液备用。
葡萄糖
CH 3 4
H NH C OH (CHOH) 4 CH 2 OH
葡萄糖邻甲苯胺
邻甲苯胺
H2 O CH 3 H N= C (CHOH) 4 CH 2 OH
雪夫氏碱 （绿色）
三、实验器材
1.分光光度计（630nm），比色皿 2. 计算纸（9 cm×9 cm） 3. 水浴锅 4. 10ml容量瓶
四、实验试剂
六、附注
1. 本法不需要除去蛋白质，邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，血液中其他还原 性物质基本上无影响。 2. 邻甲苯胺试剂与葡萄糖显色的深浅及其稳定性与试剂中邻甲苯胺浓度、 冰醋酸浓度、加热时间有关。此法显色稳定，24小时内无变化。如将加热时 间缩短，生成颜色容易消褪。 3. 此法也适用于全血葡萄糖测定，特别是小儿病人作静脉抽血困难时，可 采用指端血或耳垂血 0.1毫升，加入 3% 三氯醋酸溶液1.9 毫升中，以沉淀 蛋白质。离心后吸取上清液 1.0毫升，加入邻甲苯胺试剂 5毫升作为测定管。 在标准管中加入葡萄糖标准应用液（0.05mg/ml）1.0毫升及邻甲苯胺试剂 5 毫升，在空白管中加入蒸馏水 1.0毫升及邻甲苯胺试剂 5毫升，然后按上表 进行测定。测定结果即为 上述稀释葡萄糖 全血 蒸馏水 质量/mg A 630nm
[生活]血液中葡萄糖含量的测定
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血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法）一目的掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。
二原理血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺（Schiff碱）。
血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。
将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在630nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。
邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9～6.11mmol / L (即100ml血清中葡萄糖的正常值为70～100mg)。
邻甲苯胺法对葡萄糖特异性高，测定结果为真糖值，为临床上常用的血糖测定方法。
此方法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。
由于血液葡萄糖在进食后明显升高，所以必须采取空腹血做血液葡萄糖测定，血细胞糖酵解作用会降低血液葡萄糖浓度，所以血液抽出后应及时测定，或用含氟化钠的抗凝剂抑制糖酵解，可稳定24小时。
三操作1.采得待测血样（抗凝）后立即离心以分离血浆（3,000转离心15分钟）。
2.取干燥试管4支，分别标出号码，按下表添加试剂。
4.以空白管调零，读取各管630nm处吸光度值。
5.计算血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5标准管吸光值四实验器材与试剂分光光度计、沸水浴、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹。
邻甲苯胺试剂：称取硫脲(AR)级1.5g，溶于940ml冰醋酸(AR级)中，加邻甲苯胺60ml。
置棕色瓶中至少可用两个月。
此试剂腐蚀性极强，应避免接触皮肤。
12 mmol/L苯甲酸溶液：900ml蒸馏水中加入1.4g苯甲酸，加热助溶，冷却后定容到1L。
葡萄糖标准储存液（100 mmol / L）：称取无水葡萄糖（烘箱80烘干至恒重，干燥器中保存）1.802g，溶于80ml苯甲酸溶液中，再定容到100ml。
葡萄糖标准应用液（5 mmol / L）：取标准储存液5ml，加苯甲酸溶液至100ml。
血液葡萄糖的测定方法
血液葡萄糖的测定方法血液葡萄糖测定方法是用于检测人体血液中葡萄糖含量的一种方法。
葡萄糖是人体重要的能量供应来源，它在体内的浓度与机体的代谢状态密切相关。
因此，对于糖尿病患者来说，监测血液葡萄糖水平非常重要，有助于他们控制血糖水平，维持身体健康。
血液葡萄糖的测定方法有很多种，根据实际需求和方法的可行性，可以选择不同的方法进行测定。
以下将介绍几种常见的血液葡萄糖测定方法。
首先是基于试纸的葡萄糖测定方法。
这种方法常用于家庭血糖监测，便携式血糖仪就是基于试纸原理的。
使用这种方法，只需将试纸置于一滴血液上，试纸上的葡萄糖酶会与葡萄糖发生反应，产生氧化还原反应，导致试纸变色，通过比色板或仪器来判断血糖水平。
这种方法操作简便，但准确度相对较低，适用于一般家庭血糖监测。
其次是荧光法葡萄糖测定方法。
这种方法是基于葡萄糖氧化酶的反应原理，葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成辅酶还原型，再与辅酶反应产生荧光染料，测量荧光强度来计算血糖浓度。
这种方法灵敏度高，准确度较高，但需要专业的仪器和技术支持，适用于实验室中血糖测定。
此外，还有电化学法葡萄糖测定方法。
这种方法是将血液样品置于电极上，通过电化学反应来测量葡萄糖浓度。
常用的电极有电化学氧化酶电极和谐振速度电极。
电化学法测定血糖准确度高，但仪器复杂，需要专业的操作技术和维护。
最后是光学法葡萄糖测定方法。
这种方法是利用光学仪器，通过检测葡萄糖溶液对特定波长光的吸收或散射来测定葡萄糖浓度。
光学法测定速度快，操作简便，适用于实时监测。
总之，血液葡萄糖测定方法多种多样，每种方法都有其适用的场景和特点。
在选择合适的测定方法时，需要根据实际需求，考虑准确性、操作便捷性以及成本等因素。
对于糖尿病患者来说，定期监测血液葡萄糖水平非常重要，可以根据医生的建议选择合适的测定方法，并保持良好的血糖控制，以维持健康的生活。
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法的步骤如下：
1. 采集血液样本，一般常用的是静脉血。
2. 将血样离心，使血浆和血细胞分离开。
3. 取血浆样本进行血清葡萄糖测定。
常用的血清葡萄糖测定方法有：酶促反应法、葡萄糖氧化酶法、光度法等。
4. 酶促反应法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖酰胺酶和葡萄糖脱氢酶一起反应，生成NADH。
通过测量NADH的吸光度来计算血清中的葡萄糖含量。
5. 葡萄糖氧化酶法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖氧化酶反应，生成过氧化氢和D-酮糖。
再用过氧化物酶反应掉过氧化氢，最后通过吸光度计算血清中的葡萄糖含量。
6. 光度法：将血清样本与一定浓度的酚啉试剂和磷酸缓冲液混合后，通过加热反应，测量其吸光度，然后计算血清中的葡萄糖含量。
7. 根据所用方法的不同，测定结果会有一些差异，请根据实验室所用的方法进行测定。
FosdelinWu法测定血液葡萄糖含量
实验23 Folin—Wu法测定血液葡萄糖含量一、目的学会用Folin—Wu法测定血液中葡萄糖含量。
二、原理葡萄糖的半缩醛羟基具有还原性，在加热条件下可使碱性铜试剂中的Cu2+还原为黄色的氧化亚铜沉淀，而其本身被氧化为羧基。
氧化亚铜可使磷钼酸还原成蓝色的钼蓝，蓝色的深度与葡萄糖的浓度成正比，故可用比色法测定钼蓝的光吸收值来测定葡萄糖的浓度。
3Cu2O + 2MoO3 →6CuO + Mo2O3(氧化亚铜) （钼蓝）血糖即指血液中存在的葡萄糖。
由于血液中成分复杂，尤其有许多种蛋白质存在，它们对血糖的测定会产生干扰。
因此，目前常用钨酸法处理抗凝血来制备无蛋白滤液，然后用来测定无蛋白滤液中的葡萄糖含量。
Na2WO4+ H2SO4→H2WO4+ Na2SO4(钨酸钠) （钨酸）在测定过程中，由于空气中的氧对Cu2O会产生再氧化作用从而影响测定结果，因此实验中要采用特制的福林—吴宪血糖管——有一细颈，可以尽量减少与空气的接触。
（图23-1）1 2图23-1 血糖管和奥氏吸管1．（Folin-吴宪式）血糖管 2.奥氏吸管三、材料、试剂和器具（一）材料饥饿16小时的鸡或兔（二）试剂1、草酸钾（A.R）2、0.25%苯甲酸溶液3、10%钨酸钠溶液称取10g钨酸钠，用双蒸水溶解后定容至100ml。
4、1/3mol/L硫酸溶液5、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）称取1.000g无水葡萄糖，用苯甲酸水溶液溶解后定容至1000ml，其浓度为1mg/ml。
可长期保存使用。
使用时用蒸馏水稀释，配成0.1mg/ml的葡萄糖溶液。
6、碱性铜试剂分别称取40g无水碳酸钠、7.5g酒石酸、4.5g硫酸铜结晶，用蒸馏水溶解后混合，定容至1000ml。
本试剂于室温下可长期保存使用，若有沉淀产生，应过滤后再使用。
7、磷钼酸试剂称取70g钼酸、10g钨酸钠，量取10%氢氧化钠400ml及蒸馏水400ml，于烧杯中混合加热20~40min（以除去可能夹杂于钼酸中的氨），冷却后加入85%磷酸250ml，混匀后定溶至1000ml..（三）器具1、剪刀2、烧杯3、试管与试管架4、玻璃棒5、奥氏吸量管（见图23—1）6、血糖管（见图23—1）7、小漏斗8、可见光分光光度计9、水浴锅10、移液管11、电炉12、天平13、容量瓶四、操作步骤（一）制备无蛋白滤液1．杀鸡取血后立即按2g草酸钾/L血液的比例加入草酸钾，以制备抗凝血。
血清中葡萄糖浓度的测定
实验原理
• 酶法测定血清葡萄糖是用以过氧化物酶作指示酶 的偶联酶反应定量法。 • 葡萄糖氧化酶（GOD）利用氧将葡萄糖氧化成葡 萄糖酸，同时释放出过氧化氢。过氧化物酶 (POD)催化过氧化氢氧化色素原，并使色素原氧 化成红色醌类化合物（色素），即Trinder反应。 其生成量与葡萄糖含量成正比。
补充： 葡萄糖氧化酶(GOD): 是从特异青霉（Penicillium notatum）等霉菌和蜂蜜中发现 的酶。近白色粉末,溶于水，几不溶于乙醇、氯仿和乙醚。最适pH 5.2最适温度 55°C 过氧化物酶(POD): 是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶,它们能催化很多 反应。 过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于细胞的过 氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除 过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
实验器材与试剂
（一）器材 5ml移液管，50或100ul微量可调式移液器 721E型分光光度计 ，37度恒温水浴锅 （二）试剂 （1）0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0）：称取 无水磷酸二氢钠8.67g,称取无水磷酸二氢钾5.3g， 溶于蒸馏水800ml中，调节pH=7.0,定容至1L （2）酶试剂：取过氧化物酶12 000 U，葡萄糖 氧化酶1 200 U,4-氨基安替比林10mg，叠氮化钠 100mg，溶入磷酸盐缓冲液80ml中，用磷酸盐缓冲 液定容至100ml，置于4℃保存。
单酶反应定量法：指用一种酶为工具酶定量 测定某种物质的方法。 偶联酶反应定量法：当单酶反应底物或产物 反应底物或产物噢物理化学手段无法区分时 ，还可以借助另一种酶作为指示酶，通过偶 联反应进行定量分析。
由于酶法检测具有快速、渐变、准确、无不良反应、灵敏等优点，现已逐 步取代其他方法，在临床诊断中应用广泛。(详见实验教程P103-104)
实验三、血液葡萄糖的测定
• 用公式表示为： • T = I／I0 • 则 A = lg（1／T） =Kbc • 式中 T — 透光率 • I — 透过光强度 • I0 — 入射光强度 • A — 吸光度 • K — 比例常数 • b — 溶液的厚度 • c — 溶液的浓度
7200分光光度计
分光光度计的组成 分光光度计种类很多，一般包括光源、单色器、吸收池、检测器和指示 器五大部件组成。
3、加入磷钼酸后迅速比色。 4、分光光度计的使用。
五、结果计算
葡萄糖 （mg/100ml
）
=
测定管吸收度 ×0.1 ×
标准管吸收度
100 0.1
六、分析讨论
1、分光光度计的原理
• 分光光度计是根据物质对光的选择性吸收来 测量微量物质浓度的仪器，具有灵敏度、准 确度高，操作方便、快速等特点。其工作原 理为光的吸收定律（朗伯—比尔定律）：一 束单色光(强度为I0)通过某吸光物质的溶液 时，其光能量的被吸收与该物质浓度的关系 符合朗伯—比尔定律，即当入射光波长、温 度和溶液的厚度一定时，吸光度与溶液的浓 度成正比。
5.注意事项：
① 使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个 旋钮之功能。仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。
② 如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍 等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段 光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和100” 。
浓度方式(C)和已知标样浓度斜率(K)方式; ④ 波长选择：用波长调节旋钮设置所需的单色光波长; ⑤ 放样顺序：打开样品室盖，在1~4号放置比色皿槽
中，依次放入%T校具(黑体)，参比液，样品液1和 样品液2.
7200型分光光度计的使用方法
市妇幼保健血液葡萄糖测定技术操作规程
市妇幼保健血液葡萄糖测定技术操作规程
1.检测目的
检测血清或血浆中葡萄糖的含量为临床对相关疾病的诊断观察疾病的变化及治疗效果以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值
2.标本要求
1.病人准备空腹12小时
2.标本类型血清或NaF抗凝的血浆采血后及时分离以避
免血清或血浆中葡萄糖被细胞利用而降低
3.设备和试剂
1.仪器设备全自动生化分析仪
2.试剂材料四川迈克公司试剂
参与反应成份
R1酚120mmolL
R2GOD≥35KULPOD≥5KUL4-AAP120mmolL
3.试剂的贮存
2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期
2～8℃避光稳定30天
试剂混浊变色或空白吸光度值 0150时不能继续使用
4.注意此试剂为体外诊断用禁止入口吞下有害试剂含有
叠氮化钠误入眼口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗必要时到医院就诊叠氮化钠可以和铜铅等金属反应形成爆炸性化合物故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管
5.试剂准备即开即用的无需特殊准备
4.质量控制
1.质控物RANDOX多项人基质血清
2.质控措施
3.质控每日日常工作前进行
4.质控参加焦作临床检验中心临床化学室间质评
5.参考区间及可报区间
1.参考范围空腹389～611mmolL
餐后1小时778～889mmolL
餐后2小时389～778mmolL
2.可报范围000～2230mmolL样品GLU含量超过线性范围应
用生理盐水稀释重做结果乘以稀释倍数
6.危急值及处理方法
22.2mmol/L及时与临床联络。
血液中葡萄糖含量的测定实验专题练习
血液中葡萄糖含量的测定实验专题练习介绍本文档旨在为进行血液中葡萄糖含量的测定实验提供专题练。
实验的目的是通过测定血液中葡萄糖的浓度来评估人体的血糖水平，以便及时发现和监测糖尿病等相关疾病。
实验步骤以下是进行血液中葡萄糖含量测定的基本步骤：1. 准备实验材料和设备：包括血糖仪、血液采样器、试验盒、试纸和标准溶液等。
2. 遵循安全操作规范，确保实验环境和操作台面的清洁。
3. 根据血糖仪的说明书，准备和校准设备。
4. 采集血液样本：使用血液采样器从患者的指尖或其他适当的部位采集足够的血液样本。
5. 将血液样本加入试验盒中：根据试验盒的要求，将正确量的血液滴入试验盒中，并按照说明书进行操作。
6. 等待反应时间：根据试验盒的要求，等待一段预定的时间，以使试剂与血液中的葡萄糖反应。
7. 使用血糖仪读取结果：将试验盒插入血糖仪中，按照仪器的指示获取血液中葡萄糖含量的测定结果。
8. 记录和分析结果：将实验结果记录下来，并根据标准葡萄糖溶液的结果进行校准和分析。
实验注意事项- 按照设备和试剂的说明书操作。
- 使用无菌的血糖仪和血液采样器，以避免污染和交叉感染。
- 注意正确掌握血液采集的方法，以减轻患者的不适和减少误差。
- 准备适当的废弃物，将使用过的试纸和试剂等废弃物安全处理。
- 在进行实验之前，确保自己有充足的理论知识和技术培训。
结论通过进行血液中葡萄糖含量测定实验，我们可以及时了解人体的血糖水平，从而帮助识别和监测糖尿病等相关疾病。
然而，在进行实验时必须遵循安全操作规范，并确保设备和试剂的准确性和正常运行。
葡萄糖测定
葡萄糖测定摘要】体液中葡萄糖含量的高低是标志着人体健康状况的重要指标，尤其是糖尿病人的血液葡萄糖监控。
葡萄糖浓度的突然升高与降低都预示着一种异常情况的发生。
许多葡萄糖测定的电化学和光化学方法已经被报道并应用于不同样品的分析。
【关键词】葡萄糖采血管检验(一)葡萄糖氧化酶法1.原理葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生一分子过氧化氢。
在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚)的存在下，过氧化氢分解，释放出初生态氧，氧化色素原，生成有色化合物。
2.试剂推荐使用有批准文号的优质市售试剂盒。
配制方法如下(仅供参考)：(1)0.1 mol／L(pH 7.0)磷酸盐缓冲液：溶解无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g于800 ml蒸馏水中，用1 mol／L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1 L。
(2)酶试剂：取葡萄糖氧化酶l 200 U、过氧化物酶1 200 U、4-氨基安替比林10 mg、叠氮钠100 mg，加上述磷酸盐缓冲液至80 ml左右，调节pH至7.0，加磷酸缓冲液至100 ml。
置冰箱保存，至少可稳定3个月。
(3)酚试剂：重蒸馏酚100 mg溶于100 ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色，可先配成500 g／L的溶液，用时稀释)。
贮存于棕色瓶中。
(4)酶酚混合试剂：酶试剂及酚试剂等量混合，在冰箱内可以存放1个月。
(5)葡萄糖标准贮存液(100 mmol／L)：无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存)。
称取1.802 g，以12 mmol／L苯甲酸溶液溶解并移入100 ml容量瓶内，再以12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至100 ml刻度处，放置2小时后方可应用。
(6)葡萄糖标准应用液(5 mmol／L)：吸取葡萄糖标准贮存液5 ml，于100 ml容量瓶中，用12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
血清葡萄糖测定
建议：临床实验室推荐以氟化钠抗凝血浆为标本测定血糖浓 度。
2.采集时间、部位 可取空腹血，餐后2小时血，或随机血，但意义不同。 对于住院病人尤其要注意采集部位。
3.标本处理 静脉血+2mg/ml草酸钾（EDTA或肝素）（抗凝） +2-5mg氟化钠/ml血（阻止糖酵解） 新鲜采集的全血室温下最初酵解 7% ，以后的酵解则减慢， 有白细胞增多或细菌时酵解增加。 分离出的血清，25℃下稳定8小时，4℃下稳定72小时。 建议：无防腐剂的全血必须在 1小时内分离出血清或血浆， 并及时测定。
2.邻甲苯胺法（O-T法）
原理：Glu + O-T Δ 缩合、脱水 化合物（630nm） 评价 Schiff碱 蓝绿色
1.此法受煮沸时间、比色时间、试剂存放时间等因素的影 响。一般不宜以校正曲线法进行计算，故每次应同时作标 准管。
2.邻甲苯胺在冰醋酸中并不十分稳定，易氧化产生棕色物 质而干扰比色，故在邻甲苯胺试剂中加入硫脲，使试剂有 抗氧化作用，减少棕色干扰，增加试剂的稳定性，降低空 白管的吸光度，并有一定的增色效应。 3.试剂腐蚀性大，邻甲苯胺被怀疑有致癌性。
·
糖是人体的主要能源,也是构成机体结构的重要组成成份。 体内的糖是在有关激素的调节下,维持与机体适应的代谢平 衡,血糖是反映体内糖代谢状况的常用指标。 临床上常见的糖代谢紊乱主要是血糖浓度过高和过低。
二、血糖的测定
（一）标本的采集及处理 1.标本类型： 全血Glu<血浆Glu 静脉Glu<动脉Glu 毛细血管Glu=静脉Glu（空腹），进食后则不一致 毛细血管Glu>静脉Glu（进食后）
操作步骤
加入物(ml) 血清 葡萄糖标准液 蒸馏水 空白管 0.02 标准管 0.02 测定管 0.02 -
便携式血糖仪血液葡萄糖测定标准操作程序
便携式血糖仪血液葡萄糖测定标准操作程序适用于罗氏活力血糖检测系统1.检验目的：定量分析末梢毛细血管全血中的葡萄糖浓度。
2.临床意义：血糖专指血液中的葡萄糖而言。
每个个体全天血糖含量随进食，活动等情况会有波动。
一般在空腹时血糖水平较为恒定。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定。
当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖。
3.测定方法：分光光度法4.试验原理：试纸检测区的化学试剂与血液中的葡萄糖分子反应形成有色物质，有色物质吸收光——血样中葡萄糖越多，反射光越少。
检测器捕捉反射光，将其转化为一个电信号，转换成相应的葡萄糖浓度。
5.标本要求：1)病人准备：采血前应轻轻按摩采血部位，并进行局部清洗或用75%乙醇擦拭采血部位，待干后进行皮肤穿刺。
2)标本类型：新鲜毛细血管全血，含抗凝剂肝素锂或肝素铵或EDTA抗凝的静脉血。
如果采用机外采血的方式，还可适用于动脉和新生儿血。
不用使用含有氟化物作为糖酵解抑制剂的静脉血。
3)标本采集与处理：使用血糖仪配套的采血笔在指尖或耳垂部位取血，轻轻挤压形成一小滴血样，但应避免因过度挤压导致的组织液渗出。
4)标本量：所需标本体积为1—2μL。
6.仪器和试剂：1) 仪器：罗康全活力型血糖仪2) 试剂准备：罗康全活力型血糖试纸。
打开一盒新的罗康全活力型血糖试纸后，请先将血糖仪上的旧密码牌取出，用包装盒内的新密码牌替换。
将密码牌安装并保留在血糖仪的密码牌插槽中直至更换另一筒新试纸。
确认密码牌与试纸筒标签上印刷的三位密码号相匹配。
每次测试前检查：请翻转试纸，将质控窗与试纸筒标签上的色阶”0”区域进行比较，颜色需一致。
如指控窗的颜色不同，则此试纸不能使用，请将其丢弃，否则将导致错误的测量结果。
3) 试纸储存和稳定性：试纸需保存在：+2~+30℃的干燥环境中，避免阳光直射。
取出试纸后请立即使用配套筒盖盖严试纸筒。
这样可以确保试纸在标签标明有效期内完全有效。
4)试剂反应成份：每条试纸含有（每平方厘米最小含量）：葡萄糖染色氧化还原酶0.7单位，双—（2—羟乙基）—（4—羟亚胺环己基—2,5—二烯炔）氯化铵8.3μg，2,18磷钼酸0.18mg。
葡萄糖测定干化学法
葡萄糖测定干化学法
葡萄糖测定干化学法是一种常用的生物实验技术，主要用于测定血液和尿液中的葡萄糖含量。
葡萄糖的测定采用的是“葡萄糖氧化-碘反应”，该反应利用葡萄糖在碘存在下发生氧化还原反应，从而在碘的作用下，产生特征的紫色颜色变化，从而根据深浅程度来判断葡萄糖的数量。
葡萄糖测定干化学法的实验步骤如下：
1、准备实验设备，包括自动分光光度计，集装瓶，pH 计，称重瓶，干式厌氧器，搅拌转子，蒸馏水，碘，葡萄糖标准溶液等。
2、将样本（血液或者尿液）倒入集装瓶中，然后加入碘溶液，使样本中的葡萄糖与碘发生反应，并在干式厌氧器中搅拌混合；
3、在自动分光光度计中测定葡萄糖浓度，通过光度计计算出葡萄糖浓度；
4、将样本中的葡萄糖浓度与标准溶液中的葡萄糖浓度进行比较，计算出样本中的葡萄糖含量。
葡萄糖测定干化学法的优点：
1、快速准确：葡萄糖测定干化学法是一种快速和准确的方法，可以在短时间内获得准确的结果；
2、低成本：葡萄糖测定干化学法所需要的设备和药品都是较为便宜的，而且实验操作简单，容易操作；
3、安全性：葡萄糖测定干化学法不需要放射性物质，是一种安全的实验方法。
葡萄糖测定干化学法也有一定的缺点：
1、操作复杂：葡萄糖测定干化学法的实验操作过程较为复杂，对于操作人员的技术能力有一定的要求；
2、费时费力：葡萄糖测定干化学法的实验操作需要耗费大量的时间和精力，而且实验结果受到温度和pH值的影响；
3、设备昂贵：葡萄糖测定干化学法需要使用到高精度仪器，仪器成本较高。
因此，在使用葡萄糖测定干化学法时，应该根据具体情况来选择合适的实验方法，以保证实验数据的准确性，同时也要注意避免实验操作的出错，以确保实验的安全性和可靠性。
血清葡萄糖测定标准操作规程
⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请：空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU)，餐后2h葡萄糖测定，各种体液葡萄糖测定；组合项⽬申请：葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。
临床医⽣根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采⽤含分离胶的真空采⾎管。
2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。
专⼈负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜：少于0.3ml的全⾎标本，或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。
2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本，包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。
2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。
2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。
2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清，并及时将⾎清与⾎球分离。
2.2.2标本保存时间：不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开，共存同⼀试管中，室温（15～25℃）下⾎清葡萄糖很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1天。
加氟化钠的⾎液标本室温（15～25℃）下稳定4h。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出⾎清后，密闭置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。
2.3.2餐后2h葡萄糖检查，受检者于餐后2h准时抽⾎。
2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本，在服⽤75克葡萄糖后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。
2.3.4为了避免葡萄糖被酵解，单独测定葡萄糖时，⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。
葡萄糖测定方法范文
葡萄糖测定方法范文1.血糖仪检测法血糖仪是一种小型的便携式电子设备，可以准确测量血液中的葡萄糖浓度。
该方法常用于个人家庭监测，也可以由医生在诊所或医院进行测量。
血糖仪通常与测试试纸一起使用，试纸上含有特定的化学物质，可以与血液中的葡萄糖反应产生颜色变化，然后通过电子设备进行读数，从而确定血糖浓度。
2.葡萄糖氧化酶法（GOD-PAP法）葡萄糖氧化酶法是一种常用且经济实惠的葡萄糖测定方法。
它利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并与PAP酶（对氨基酚磺酸酯酶）和4-氨基酚（对氨基酚）发生反应，产生一种可见光吸收的紫色产物。
紫色的强度与血液中的葡萄糖浓度成正比，可以通过比色法或分光光度计进行测量。
3.葡萄糖脱氢酶法（GDH法）葡萄糖脱氢酶法是一种常用的葡萄糖测定方法，也被广泛用于血糖仪中。
该方法利用葡萄糖脱氢酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酮，并与辅酶NAD(P)+反应，产生NAD(P)H。
NAD(P)H的浓度与血糖浓度成正比，可以通过比色法或分光光度计进行测量。
4.高效液相色谱法（HPLC法）高效液相色谱法是一种精确而灵敏的葡萄糖测定方法，常用于临床和科研实验室。
该方法利用高效液相色谱仪分离血液中的葡萄糖，并通过紫外光检测器测量葡萄糖的浓度。
该方法不受干扰物质的影响，并且具有较高的准确性和重复性。
在实际应用中，葡萄糖测定方法的选择取决于不同的因素，包括可用的设备和试剂、测量的准确性和精确性要求、操作的便捷性以及花费等。
此外，不同的葡萄糖测定方法对于样品的要求也有所不同，一般需要经过预处理，如抗凝剂处理、离心沉淀、过滤等。
总之，葡萄糖测定是一项重要的实验室检查方法，能够帮助医生评估人体内的血糖水平，对疾病的诊断和治疗起到重要作用。
各种葡萄糖测定方法各有优缺点，选择适合的方法需要考虑实际需求和实验条件。
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本次课主要介绍: 葡萄糖氧化酶(GOD)法 测定血糖
卫生部临床检验中心血糖测定专 题协作组 推荐方法。
反应原理
葡萄糖氧化酶(GOP)
葡萄糖 + O2 + H2O
葡萄糖酸+H2O2
过氧化物酶（POD）
2H2O2+苯酚+4-氨 基安替吡啉
醌亚胺 +4H2O
醌亚胺在A480nm-A550nm波长有最大吸收， 所产生颜色的强度与血清中葡萄糖的含量 成正比。我们再通过测定标准葡萄糖液和 样品的光密度值相比较，根据公式就可计 算出血清中葡萄糖的含量。
4、标本的采集与处理
标本的采集 样品为血清。空腹采集静脉血1.0ml，注入
于1.5ml试管中，以3000r/分的速度离心10 分钟，分离血清备用。
（二）操作步骤
蒸馏水 葡萄糖标准
样品 工作液
空白管 （ul）
10.0
标准管 （ul）
—
—
10.0
—
—
1000.0 1000.0
测定管 （ul）
—
—
2、材料
注射器（2.0ml）一支; 离心管(1.5ml) 1个; 测定管3支/样品等； 加样器（1000.0ul、20.0ul）各1 支; 吸头50.0ul、1000.0ul数个。
3、仪器设备
（1）分光光度计； （2）微型离心机(1.5ml微量离心管用)； （3）恒温水浴箱（37℃）。
血液葡萄糖测定
一、目的
通过学习血糖检测方法，熟悉和掌握一 些生化指标的检测方法并练习静脉采血 技能，有助于慢性病的流行病学调查与 研究。
二、实验原理
糖尿病的诊断一般根据家族史、患病 史、临床体检和实验室的化验结果综 合而定，其中血糖浓度的测定最为重 要。一些轻症或无症状的糖尿病，主 要依据血糖测定而诊断。
腺机能亢进、肾上腺机能亢进，垂 体前叶嗜酸性细胞腺瘤、垂体前叶 嗜碱性细胞机能亢进症等。
临床意义
2、血糖降低： 见于妊娠期，哺乳期，饥饿及剧 烈运动后。 另见于胰岛细胞瘤及胰腺瘤等。
八、实习报告
1、原理 2、试剂与器材 3、仪器设备 4、实验方法 5、结果计算 6、结果分析
谢谢
将上述⑴和⑵按1：1的比例混合即为工作液。
（4）注意事项
1）缓冲液中含有叠氮钠作为稳定剂，不 要吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。
2）酚试剂是有毒的，切勿吞咽，避免与 皮肤接触，如果与皮肤接触，立 即用大量水冲洗。
3）稳定性和贮存：复溶前试剂在2～8℃ 保存，可稳定至标签上所写的期限。 复溶后，4～8℃可稳定7天，室温可 稳定2天。
10.0
1000.0
将上述液体混合均匀，置37℃水浴保温 10～15分钟（避免太阳光直射）。
取出后倒入比色杯，用直径1.0cm的比色杯， 在波长505nm下，以试剂空白管调零，分别 读取A标准和A样品。
四、计算公式
浓度以C 表示：
A样品
C=
A标准
× 葡萄糖标准C（mmol/L）
五 、参考值（空腹）
三、方法
(一) 试剂与器材
1、试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司提供；
⑴ 葡萄糖氧化酶 (GOD) 1200 U/L
过氧化物酶 (POD) 1200 U/L
⑵ 磷酸缓冲液（pH7.0） 100mmol/L
苯酚
0.1%
4-氨基安替吡啉 0.77mmol/L
⑶ 葡萄糖标准: 5.55mmol/L(100mg/dl)
注意事项
5、本法不宜直接用于尿糖测定，因尿中有 高浓度的干扰过氧化物酶反应的物质（如尿 酸），产生负干扰。
有报告预先用离子交换树脂处理尿，除去干 扰后再测定。
七、临床意义
1、血糖增高：
（1）常见于生理因素及注射肾上腺素后； （2）病理性增高：多见于各种糖尿病； （3）某些内分泌疾病也可增高，如甲状
1、血清或血浆的血糖为 3.89～ 6.11mmol/L
(70～110mg/dl)；
2、全血为3.33～6.1mmol/L
(60～110mg/dl)。
表9-3 糖尿病的诊断标准
糖尿病症状加随机血糖≥11.1 mmoL／L(200 mg/d1)(典型症状
1．
包括多饮、多尿和不明原因的体重下降；随机血糖指不考虑上 次用餐时间，一天中任意时间的血糖
2、试剂应在2～8℃条件下储清要用新鲜的，采集后 不应超过2小时测定完,否则血清葡萄 糖被血细胞糖降解(每小时可降低7% 即 0.28～0.56mmol/L)
4、如果必要时可做葡萄糖耐量试验，口服
葡萄糖75g溶于300ml水中，2小时后采 血，其血糖值应恢复到空腹前（空腹血 糖增高明显者一般不作此实验）。
或
空腹血糖≥7.0 mmoL／L(126 mg/d1)(空腹状态指至少8小时没
2．
有进食热量)
或
3． 75 g葡萄糖负荷后2小时血糖≥11.1 mmoL／L 200 mg/d1) 注：无糖尿病症状者，需另日重复测定血糖明确诊断
六、注意事项
1、如果样品葡萄糖浓度超过 22.2mmol/L(400mg/dl)时，样品量可 减半，改为5ul,标准量不变，重新测 定，结果乘以 2 。