水产品中多聚磷酸盐的测试

冻鳕鱼片等水产品中多聚磷酸盐测定方法及三聚磷酸盐含

量与含水量的关系研究

崔鹤 李伟才 纪雷 高建国 毛旭斌 李超秀 牟志春 蔡发

(青岛出入境检验检疫局 青岛)

多聚磷酸盐作为保水剂和品质改良剂广泛用于鱼类等水产品加工过程中，起到保持水分改善口感的作用，但在某些水产品中禁止使用，如扇贝加工过程中严禁使用：欧盟和捷克对其进口的鳕鱼片和人工蟹肉严格限制使用多聚磷酸盐，波兰不允许使用。在加工过程中允许使用的情况下，一般冷冻水产品中多聚磷酸盐的允许限量为0.5g/kg。控制水产品中的多聚磷酸盐含量成为人们关注的问题，国外已有人研究了多聚磷酸盐使用对鳕鱼含水量的关系，这些研究报道了鳕鱼等水产品的含水量与浸泡时间及浸泡浓度的关系，但是没有人研究浸泡后，水产品或鱼体内残留多磷酸盐的情况。目前，人们出于安全健康的考虑，要求控制鳕鱼中的多聚磷酸盐的含量。常规的测定多聚磷酸盐含量的方法是将多聚磷酸盐转化为正磷酸盐，然后用磷钼酸喹啉法、重量法或比色法测定，但无法区别多聚磷酸盐的形态。由于鳕鱼和扇贝柱及其他水产品中水溶性磷酸盐的存在，用常规的方法判别在鳕鱼和扇贝柱加工过程中是否加入了多聚磷酸盐是很困难的，目前，国内还沒有检验水产品中多聚磷酸盐的有效方法。离子色谱是一种很好的测定阴离子的方法，具有同时分离测定多种阴离子的特点。有人用离子色谱法测定化工品的多聚磷酸盐的组成。本工作对离子色谱法测定鳕鱼及扇贝柱中多聚磷酸盐的方法进行了研究，采用去离子水超声波萃取鳕鱼及扇贝柱中多聚磷酸盐，沉降去除蛋白质和脂肪，离子色谱电导检测器检测。虽然对于鳕鱼等水产品含水量与浸泡浓度及浸泡时间的关系研究已有报道，但对于鳕鱼等水产品中多聚磷酸盐含量与含水量，浸泡液浓度，浸泡时间的关系尚未见报道，本研究工作分为两个部分。

1.测定方法研究

1.1实验部分

1.1.1仪器

离子色谱仪DX-500（A），配有GP40四元梯度泵，ED40电化学检测器，Ionpac AG11-HC(500*4mm)分析柱，25µl定量管，自动再生抑制器，自身循环抑制，抑制电流300mA，色谱工作站。

1.1.2 试剂

所有试验用水均为去离子水经纯水系统纯化，电阻>18.2MΩ，50％（w/w）NaOH储备液：用NaOH（G.R.Merck）配置。25mmol和100mmolNaOH淋洗液：由50％NaOH贮备液用去离子水稀释得到。20％三氯醋酸：称取200g三氯醋酸溶解于800ml水中。三聚磷酸钠标准溶液（1mg/ml）；称取Na6P3O10(G.R. 96%)，去离子水溶解幷稀释定容到100ml。20％醋酸锌溶液：称取ZnAc200g (A.R.)，加入800ml去离子水容积幷稀释定容到1000ml。15％亚铁氰化钾溶液：称取K3[Fe(CN)8]150g(G,R.),加入850ml去离子水溶解幷稀释定容到100ml。

1.1.3.样品处理

将鳕鱼样品搅碎，在200ml烧杯中称取10g样品，加入50ml去离子水，放置10min，待鱼肉中的冰融化，将烧杯放入超声波清洗机中超声萃取10min中，过滤，虑液中加入5ml 三氯醋酸溶液沉降蛋白质和脂肪，过滤弃去沉淀，滤液收集到100ml容量瓶中，加2molNaOH 调PH>8稀释定容到100ml。

扇贝柱等其他水产品样品的处理方式与鳕鱼样品的处理方式相同。

1.1.4 淋洗过程

采用NaOH溶液进行梯度淋洗，NaOH梯度淋洗条件为,初始100%E1(25mmol/L NaOH),0.0%E2(100mmol/L NaOH); 0.0min 100%E1,0.0%E2;5.0min 100%E1,0.0%E2; 15.0min 0.0%E1,100%E2; 18.0min 0.0%E1,100%E2; 20min 100%E1,0%E2; 25.0min 100%E1,0.0%E2

样品溶液进样前稀释10倍，样品进样通过0.45μm的过滤器。

2.结果与讨论

2.1 萃取条件选择

磷酸钠、焦磷酸钠、六偏磷酸钠、三聚磷酸钠等多聚磷酸盐易溶于水，因而鱼肉、扇贝柱等水产品中的多聚磷酸盐可用去离子水萃取到水中，超声波萃取加快萃取速度，试验表明超声波萃取6min即可达到萃取平衡

2.2 色谱柱的选择

离子色谱测定多聚磷酸盐常选用DIONEX AS11分析柱，由于多聚磷酸盐保留强弱差别较大，如：三聚磷酸盐保留较强，常选用梯度淋洗方式，这里我们分别使用AS11分析柱和AS11-HC分析柱，采用NaOH淋洗液进行梯度淋洗。AS11-HC分析柱和AS11分析柱柱填料性质相同，只是AS11-HC填料的粒度更小，柱容量更大，柱效更高，适合高浓度基体中杂质阴离子的分析，常可以不必进行复杂的前处理去除基体干扰，直接测定某些组分，采用AS11-HC 分析柱和AS11分析柱如果需要测定硝酸盐和硫酸盐，要注意NaOH淋洗液浓度变化硝酸盐和硫酸盐出峰顺序的变化，当淋洗液浓度较高时，硝酸盐在硫酸盐之后出峰，当淋洗液浓度较低时，硝酸盐在硫酸盐之前出峰。

2.3 沉降剂的选择

鱼肉、扇贝柱等水产品中的蛋白质及脂肪会污染分析柱，萃取液中的脂肪和蛋白质可采用沉降剂沉降，通过过滤去除。采用AC11分析柱最好使用醋酸锌和亚铁氰化钾做沉降剂，在此淋洗条件下如采用三氯醋酸做沉降剂，三氯醋酸在磷酸根前出峰干扰磷酸根的测定。如果使用AS11-HC分析柱，亦可以使鱼肉、扇贝柱等水产品中的多聚磷酸盐很好的分离，样品处理时，沉降蛋白质和脂肪，滤液中加入5ml三氯醋酸溶液或1ml亚铁氰化钾均可。三氯醋酸在该试验条件下在多聚磷酸盐后面出峰，不影响各种磷酸盐的测定。多聚磷酸盐在水中不稳定，高温和酸性条件加速其解聚，可用NaOH将溶液调至碱性PH>8；通常情况下，样品溶液在两个小时内进行分析，不要长时间放置；经试验表明在0.1%的三氯醋酸溶液中三聚磷酸钠在10小时内未有明显的解聚变化。

图1和图2为离子色谱检测鳕鱼和扇贝柱中的多聚磷酸盐的色谱图，图中所示的三聚磷酸根等多聚磷酸根离子可很好的分离，三氯醋酸在该试验条件下在多聚磷酸盐后面出峰，不影响多聚磷酸盐的测定。

2.4 测定方法的线性范围、灵敏度、回收率

分别用磷酸钠、焦磷酸钠、六偏磷酸钠、三聚磷酸钠等多聚磷酸盐标准溶液作出工作曲线，其浓度和峰面积在1－100mg/l范围内有良好的线性关系，相关系数分别为r2＝0.9991、0.9985、0.9993、0.9992,9次试验结果测定相对标准偏差RSD分别为2.01％、1.98％、2.62％、2.98％；检出限分别为5mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、5 mg/kg，即水产品中含有大于上述含量的各种多聚磷酸盐均可以检出。样品加标回收实验表面回收率90－105％之间。