白细胞检验测定方法及分类计数
白细胞计数与分类
白细胞计数与分类白细胞是人体免疫系统中重要的组成部分，它们起着重要的抵御外界病原微生物入侵以及维持机体内稳定的功能。
白细胞的计数与分类是临床血液学中的重要指标，它能够反映机体免疫系统的功能状态，及时发现疾病和评估疾病的严重程度。
本文将对白细胞计数与分类进行深入介绍。
一、白细胞计数白细胞计数是指在一定的体积内，计算血液中白细胞的数量。
目前临床常用的方法有手工计数法和自动计数法。
手工计数法是通过显微镜下人工统计血液中各类白细胞的数量，相对较为繁琐，但结果准确可靠；而自动计数法则是利用血细胞计数仪来测量血液中不同类型白细胞的数量，速度快，并且具有较高的精确度。
二、白细胞分类白细胞按照形态特点和功能可分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞五类。
1. 中性粒细胞中性粒细胞，也称为多形核白细胞，其细胞核形状不规则，常呈珠链状排列。
中性粒细胞在人体中的比例最高，约占白细胞总数的50-70%。
中性粒细胞的主要功能是吞噬和消化细菌、真菌和病毒等微生物，起着重要的免疫防御作用。
2. 淋巴细胞淋巴细胞是一种淡紫色的细胞，其细胞核很大，占细胞的大部分空间。
淋巴细胞的比例一般占总白细胞的20-40%。
淋巴细胞是人体免疫系统的重要组成部分，它们能够产生抗体来识别和抵御外来抗原，发挥着重要的抗体免疫功能。
3. 单核细胞单核细胞的细胞核形状规则，呈圆形或椭圆形。
单核细胞在白细胞中的比例约为3-8%。
单核细胞具有巨噬细胞的功能，能够吞噬和清除老化的细胞、病毒感染的细胞和细菌等，发挥着重要的清除作用。
4. 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞的细胞核具有分叶状结构，呈弯曲形状。
嗜酸性粒细胞在白细胞中的比例一般为1-5%。
嗜酸性粒细胞含有大量的粒状颗粒，这些颗粒可吸收和降解组织中的异物和寄生虫，对于过敏性疾病和寄生虫感染的免疫应答起着重要的作用。
5. 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞的细胞核常分叶状，呈杆状或弯曲形态。
嗜碱性粒细胞的比例一般占总白细胞的0.5-1%。
白细胞分类计数实验报告
白细胞分类计数实验报告实验目的，通过显微镜观察和计数白细胞，了解不同类型白细胞的形态特征和数量分布，掌握白细胞分类计数的实验方法。
实验仪器和试剂，显微镜、白细胞计数板、涂片、琼脂、血液标本。
实验步骤：1. 取一滴新鲜的血液标本，用吸管吸取血液滴在一块玻片上，再用另一块玻片迅速涂匀，制备涂片。
2. 将制备好的涂片放入琼脂中，用显微镜在高倍镜下观察和计数白细胞。
3. 随机选择视野，计数每个视野中不同类型白细胞的数量，并记录下来。
4. 统计多个视野的计数结果，计算出各类白细胞的平均数目。
实验结果：经过计数和统计，我们得到了不同类型白细胞的数量分布情况。
在本次实验中，我们观察到中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量分别为，中性粒细胞500个/μL，淋巴细胞200个/μL，单核细胞50个/μL，嗜酸性粒细胞20个/μL，嗜碱性粒细胞30个/μL。
实验分析：通过本次实验，我们可以清晰地观察到不同类型白细胞在血液中的数量分布情况。
中性粒细胞是最多的一类白细胞，占据了绝大多数；其次是淋巴细胞，单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞数量相对较少。
这些数据也符合正常血液中白细胞的数量分布规律。
实验总结：本次实验通过显微镜观察和计数白细胞，掌握了白细胞分类计数的实验方法，并且得到了不同类型白细胞的数量分布情况。
通过实验，我们对血液中白细胞的数量分布有了更清晰的认识，也提高了我们的实验操作能力和数据分析能力。
实验中也发现了一些问题，比如在制备涂片的过程中需要注意操作的快速和准确，以避免血液凝固导致涂片质量不佳。
在显微镜观察过程中，需要仔细观察和计数，避免出现计数错误。
这些问题在今后的实验中需要引起重视和改进。
通过本次实验，我们对白细胞分类计数有了更深入的了解，也为今后的相关实验打下了良好的基础。
结语：白细胞分类计数实验是一项重要的实验内容，通过本次实验，我们不仅掌握了实验方法，还对血液中白细胞的数量分布有了更加清晰的认识。
白细胞分类计数
白细胞分类计数白细胞（White Blood Cells，WBC）是人体内重要的免疫细胞之一，具有识别和消灭病原体的功能。
通过对白细胞的分类计数，可以了解人体免疫系统的健康状态，辅助医生判断是否存在炎症、感染、过敏等疾病。
本文将介绍常见的白细胞分类及计数方法。
一、嗜中性粒细胞（Neutrophil）嗜中性粒细胞是最常见的一类白细胞，占据总白细胞数的60-70%。
它们是人体最重要的防御细胞，能通过吞噬和杀死病原体来保护机体免受感染。
计数嗜中性粒细胞的常用方法包括：1. 血液常规检查：通过自动化检测仪器对血液样本中的白细胞进行分类和计数。
结果以绝对计数（白细胞计数）或百分比（白细胞分类百分比）的形式呈现。
2. 酶标仪法：利用特定抗体标记嗜中性粒细胞表面的抗原，然后测定抗原与抗体的反应来计数嗜中性粒细胞。
3. 流式细胞术：使用流式细胞仪检测样本中嗜中性粒细胞的数量和性质。
二、淋巴细胞（Lymphocyte）淋巴细胞是免疫系统的重要成员，占据总白细胞数的20-30%。
它们在人体的免疫反应中起到关键作用，能生成抗体来识别和攻击具体的病原体。
计数淋巴细胞的方法包括：1. 流式细胞术：将样本中的淋巴细胞与特定抗体结合，然后使用流式细胞仪测量相应的细胞群体，从而计数淋巴细胞的数量。
2. 酶标仪法：与嗜中性粒细胞类似，使用特定抗体标记淋巴细胞并测定抗原与抗体的反应来计数淋巴细胞。
三、单核细胞（Monocyte）单核细胞占据总白细胞数的3-8%，是一类具有吞噬能力的免疫细胞。
它们主要负责清除细菌和死亡细胞，同时参与调节炎症反应。
计数单核细胞的常见方法有：1. 静态显微镜法：将血液样本涂片制备后，在显微镜下观察和计数单核细胞的数量。
2. 自动化细胞计数仪：通过自动化检测仪器对血液样本中的白细胞进行分类和计数，其中包括单核细胞的计数。
四、嗜酸性粒细胞（Eosinophil）嗜酸性粒细胞占据总白细胞数的1-4%，主要参与过敏反应和抗寄生虫感染的免疫反应。
白细胞计数和白细胞分类计数
白细胞计数和白细胞分类计数白细胞，也被称为白细胞，是人体免疫系统中的关键组成部分。
它们是我们身体抵抗疾病和维持健康的重要因素。
白细胞计数和白细胞分类计数是评估人体免疫系统功能的重要指标。
本文将介绍白细胞计数和白细胞分类计数的概念、方法以及临床意义。
1. 白细胞计数白细胞计数是指在给定体积的血液中白细胞的数量。
它通常用于评估机体的免疫状况和检测某些疾病。
白细胞计数的常用单位是每升白细胞的数量（白细胞计数每升）。
正常成年人的白细胞计数范围通常在4,000-11,000每升之间。
白细胞计数可以通过不同的方法进行，包括手工计数、自动血细胞分析仪和流式细胞术。
手工计数是指在显微镜下直接观察和计数白细胞。
自动血细胞分析仪是一种广泛应用的方法，它可以自动进行计数和分类。
流式细胞术是一种高级技术，可以对某些特定的白细胞进行进一步的检测和分类。
2. 白细胞分类计数除了总白细胞计数，白细胞分类计数也很重要。
白细胞分类计数是指在给定体积的血液样本中各种类型的白细胞的数量。
常见的白细胞类型包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
白细胞分类计数可以通过显微镜下观察染色的血液样本来进行。
专业的实验室技术人员将血液样本涂片染色，并使用显微镜分析和计数不同类型的白细胞。
一些先进的自动血细胞分析仪也可以进行白细胞分类计数。
3. 临床意义白细胞计数和白细胞分类计数在临床上具有广泛的意义。
它们可以提供重要的信息，帮助医生诊断疾病和监测疾病的进展。
白细胞计数的增加可能表明感染、炎症或其他免疫反应的存在。
相反，白细胞计数的降低可能是由于骨髓抑制、免疫系统缺陷或药物的副作用。
因此，白细胞计数是许多疾病诊断和治疗过程中的重要指标。
白细胞分类计数可以更细致地评估免疫系统的状态。
不同类型的白细胞在不同的疾病和炎症中起着不同的作用。
通过分析白细胞分类计数，医生可以更好地了解疾病的类型和进展，并制定相应的治疗方案。
总结：白细胞计数、白细胞分类计数是评估人体免疫系统功能的重要指标。
一、白细胞计数(White Blood Cell count WBC)及白细胞 ...
四大格所见WBC平均值 判断标准： WBC ≤4×109/L ,RCS ＜30% WBC (4.1--14.9)×109/L, RCS ＜20% WBC≥ 15×109/L, RCS ＜15%
三、变异百分率(v)评价法
V= I Xi-Xm l ×100
中性粒细胞neutrophil：
2）中性粒细胞增多（neutrophilia）：
反应性： 急性感染或炎症 严重的组织损伤或坏死 急性溶血、急性失血 急性中毒 恶性肿瘤
异常增生性：白血病 骨髓增殖性疾病
3）中性粒细胞减少（neutropenia）：
感染 血液系统疾病 理化损伤 单核-吞噬细胞系统功能亢进 自身免疫性疾病
（二）白细胞分类计数
淋巴细胞lymphocyte：
★淋巴细胞
1）增多（lymphocytosis）： 感染性疾病 淋巴细胞性恶性疾病 其他 ：免疫性疾病、急性传染病恢复期 相对增多 2）减少（lymphocytopenia）： 相对减少 绝对减少（接触放射线、应用肾上腺皮质激素、
DC percent（%） Absolute value（ ×109/L）
二、白细胞计数及分类计数的临床意义：
1．白细胞数量的变化： （1）生理变化：
年龄、时间、环境、身体状况等 （2）病理变化：
leukopenia leukophilia 主要受中性粒细胞等各类细胞数量的影响
（二）白细胞分类计数
Cellular morphology
一． The lymphocyte is smaller than neutrophil and possesses an ellipsoidal, slightly eccentrical nucleus.
白细胞分类计数参考方法
白细胞分类计数参考方法白细胞是人体免疫系统中的重要成分，通过对白细胞的分类计数可以了解人体的免疫状况。
白细胞分类计数参考方法是一种常用的检测手段，下面将介绍几种常见的白细胞分类计数参考方法。
一、血液细胞分类计数血液细胞分类计数是一种常见的白细胞分类计数方法，通过对血液中的白细胞进行计数和分类，可以了解人体的免疫功能和炎症反应情况。
常用的血液细胞分类计数方法有血细胞分析仪和血片染色法。
1. 血细胞分析仪血细胞分析仪是一种先进的仪器设备，可以自动对血液中的细胞进行计数和分类。
通过血细胞分析仪，可以快速得到各种类型白细胞的数量和比例。
这种方法快速、准确，且可以同时检测多种血细胞参数，是目前临床常用的白细胞分类计数方法之一。
2. 血片染色法血片染色法是一种传统的白细胞分类计数方法，通过染色血片并在显微镜下观察和计数白细胞的种类和数量。
常用的染色方法有吉姆萨染色和偏碱性染色。
这种方法操作简便，成本较低，但相对于血细胞分析仪，它的计数速度较慢且存在主观性。
二、骨髓细胞分类计数骨髓细胞分类计数是一种更细致的白细胞分类计数方法，通过对骨髓细胞进行计数和分类，可以了解人体造血系统的功能和疾病情况。
常用的骨髓细胞分类计数方法有骨髓涂片染色法和骨髓细胞流式细胞术。
1. 骨髓涂片染色法骨髓涂片染色法是一种常见的骨髓细胞分类计数方法，通过染色骨髓涂片并在显微镜下观察和计数骨髓细胞的种类和数量。
这种方法可以更准确地反映骨髓细胞的分布和比例，对于一些骨髓疾病的诊断和治疗具有重要意义。
2. 骨髓细胞流式细胞术骨髓细胞流式细胞术是一种先进的骨髓细胞分类计数方法，通过利用流式细胞仪对骨髓细胞进行染色和分析，可以快速准确地得到骨髓细胞的种类和数量。
这种方法具有高灵敏度、高准确性和高通量的优点，适用于复杂骨髓细胞疾病的检测和研究。
三、尿液细胞分类计数尿液细胞分类计数是一种非侵入性的白细胞分类计数方法，通过对尿液中的细胞进行计数和分类，可以了解泌尿系统的炎症和感染情况。
白细胞分类计数(手工法)
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白细胞分类计数（手工法）
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页码：第1页，共5页
[测定原理]
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料构成的染色液染色，血片中的细胞由于内容物不同，而被染成不同的颜色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得相对比值（百分率），以观察数量﹑形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。
增多见于：a．某些病毒或细菌所致的传染病：传染性淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。
b．淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。
减少见于：a．应用肾上腺皮质激素、接触放射线。
b．细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。
（5）单核细胞（M）：单核细胞具有游走性和吞噬作用，除吞噬细胞和异物外，又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆菌及麻风杆菌。
甲醇1000ml
磷酸盐缓冲液(pH6.2-6.8)
磷酸二氢钾6.64g
磷酸氢二钠0.26g
石炭酸4.0ml
蒸馏水加至1000ml
应用液
l液、2液按3：1比例混合放置14天后备用。
（二）显微镜。
（三）计数器。
[标本的采集]
取手指血或静脉血1.0ml，置于抗凝管中（2%EDTAK2）摇匀待检。或直接未梢取血涂成血片。
将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。
注：加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E可缩短染色时间。
4．选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值（百分率）。
[参考范围]
中性杆状核粒细胞（N）：1-5%
(1)核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。
白细胞分类计数参考方法
白细胞分类计数参考方法白细胞分类计数是一项重要的检验指标，用于评估人体免疫功能和诊断炎症、感染等疾病。
白细胞的分类计数需要准确可靠的方法和标准参考值，以确保结果的科学性和可比性。
本文将介绍白细胞分类计数的参考方法，帮助读者更好地理解和运用相关的检验结果。
一、白细胞分类计数的方法目前，常用的白细胞分类计数方法有手工计数法和自动计数法两种。
手工计数法是最传统的方法之一，通过显微镜观察染色后的血液标本，手动计数各类白细胞数量。
这种方法操作简单，成本较低，适用于小样本量和基础设备薄弱的实验室。
然而，手工计数法存在操作者主观性强、计数误差和速度较慢等缺点，容易产生结果的不稳定性。
自动计数法则是近年来快速发展的技术，主要利用血液细胞分析仪（Hematology Analyzer）实现白细胞的分类和计数。
该方法通过光学、流式细胞术等原理，自动识别和计算不同类型白细胞的比例和绝对值。
相比手工计数法，自动计数法具有高精度、高通量、快速便捷等优势，大大提高了检验效率和结果的准确性。
二、白细胞分类计数的参考值白细胞分类计数的参考值是指正常人群中不同类别白细胞的数量范围。
这些参考值是通过大样本的健康人群进行统计，经过相关统计学分析和计算得出的。
一般来说，白细胞分类计数的参考值包括中性粒细胞（Neutrophils）、淋巴细胞（Lymphocytes）、单核细胞（Monocytes）、嗜酸性粒细胞（Eosinophils）和嗜碱性粒细胞（Basophils）等五种白细胞的比例和绝对数量。
不同实验室或不同地区的参考值可能存在差异，因此在运用时需要结合具体情况进行解读。
同时，个体差异、年龄、性别、生理状态等因素也可能对白细胞分类计数的参考值产生影响，因此需综合分析结果，避免过度解读或片面评估。
三、进一步优化白细胞分类计数方法为了进一步提高白细胞分类计数的准确性和可比性，一些方法和技术逐渐得到应用。
1. 高级染色技术：传统的白细胞分类计数主要依靠各类染色液的着色效果区分细胞类型。
实验五 白细胞分类计数
WBC 百分率 （%）
中性杆Nst 1~5
中性分Nsg 50~70
嗜酸性 E 0.5~5
嗜碱性B
0~1
淋巴 L
20~40
单核M
3~8
绝对值（ ×109/L ） 0.04~0.50 2.00~7.00 0.05~0.50 0~0.10 0.80~4.00 0.12~0.80
精选课件
8
七、注意事项
1.计数区域：以体尾交界处最佳。
精选课件
19
按胞核的形态分为：
N杆状核 （Nst）
核径最窄处大于最宽处1/3 为杆状核，核型多样，可 呈C形 、S形、V形或不规 则形。
N分叶核 （Nsg）
核径最窄处小于最宽 处1/3为分叶核，细 胞分2~5叶，甚至5叶 以上。
精选课件
20
中性粒细胞
精选课件
21
杆状核
精选课件
22
分叶核
精选课件
胞浆：含粗大但大小不一、分布不均匀的 紫黑色嗜碱性颗粒，颗粒常覆盖于核上， 致使核的轮廓与结构模糊不清
胞核：核分叶不明显，形态不规则。
精选课件
27
嗜碱性粒细胞 （血涂片）
颗粒特点 大小不一 分布不均 嗜碱性强
精选课件
28
精选课件
29
精选课件
30
4. 淋巴细胞（L）
形态：直径6-15um，分为大L和小L。
精选课件
14
淋巴细胞（Lymphocyte，L）பைடு நூலகம்
B细胞 疫
T细胞
浆细胞 生成Ab 免疫活性物质
体液免 细胞免疫
精选课件
15
单核细胞（Monocyte，M）
吞噬，杀灭病原体 清除损伤或已死亡的细胞 处理抗原
白细胞分类计数实验报告
白细胞分类计数实验报告白细胞分类计数实验报告引言：白细胞是人体免疫系统中的重要组成部分，它们在抵御病原体和维持身体健康方面起着关键作用。
因此，对白细胞的分类和计数具有重要意义。
本实验旨在通过显微镜观察和计数方法，对白细胞进行分类和计数，以了解其数量和比例的变化。
材料与方法：1. 血液样本：从健康志愿者采集的静脉血样本。
2. 血细胞计数板：用于盛放血液样本的玻璃平板。
3. 显微镜：用于观察血细胞样本。
4. 小刀：用于在指尖划破皮肤，采集血液样本。
5. 染色剂：用于染色白细胞，以便更好地观察。
6. 盐水：用于稀释血液样本。
实验步骤：1. 用小刀在志愿者的指尖划破皮肤，采集血液样本。
2. 将血液样本滴在血细胞计数板的特定区域上。
3. 使用盐水稀释血液样本，以便更好地观察。
4. 将染色剂滴在血液样本上，使白细胞染色。
5. 将血细胞计数板放在显微镜下，用高倍镜观察白细胞。
结果与讨论：通过观察显微镜下的血细胞计数板，我们可以清晰地看到各种类型的白细胞。
根据形态和颜色，我们将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
中性粒细胞是最常见的白细胞类型，它们通常呈多边形形状，胞浆中含有颗粒。
淋巴细胞则呈圆形，胞浆中几乎没有颗粒。
单核细胞的形状类似于中性粒细胞，但其胞浆中只有少量颗粒。
嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的胞浆中含有特定的颗粒，可以通过染色剂的作用更好地观察到。
通过计数每种类型的白细胞数量，我们可以得出它们在总白细胞中的比例。
这对于评估免疫系统的功能和疾病的诊断具有重要意义。
例如，中性粒细胞增多可能表明感染或炎症的存在，而淋巴细胞增多可能与免疫功能异常有关。
此外，白细胞的计数也可以用于监测治疗效果。
在某些疾病治疗过程中，白细胞计数的变化可以提示治疗是否有效。
如果治疗有效，白细胞计数可能会恢复到正常范围内。
结论：通过白细胞分类计数实验，我们可以了解不同类型白细胞的数量和比例，从而评估免疫系统的功能和疾病的诊断。
白细胞计数及分类计数
白细胞检查
白细胞检查
一、白细胞计数 ［原理］用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数并破 坏成熟红细胞后加入血细胞计数板中，在低倍镜下 计数一定范围白细胞数，经换算即可求得每升血液 中的白细胞数。 ［方法学评价］ 1、显微镜计数法 2、血液分析计数法 ［质量控制］
［参考值］ 成人（4—10）×109/L 新生儿（15－20）×109/L 6月－2岁（11－12） ×109/L ［临床意义］ 同白细胞分类计数
（4）中性粒细胞常见形态异常 ❖ 中性粒细胞毒性变化 ❖ 巨多分叶核中性粒细胞 ❖ 棒状小体 ❖ 其他异常粒细胞
中毒颗粒
空泡形成
杜氏小体
棒状小体
2、嗜酸性粒细胞 ❖ 生理变化 ❖ 增多 （1）变态反应性疾病 （2）寄生虫病 （3）皮肤病 （4）某些传染病 （5）血液病及某些恶性肿瘤 （6）内分泌疾病
二、白细胞分类计数
［原理］将血液制成血涂片，经Wright染色后，于 油镜下按白细胞形态学特征逐个分别计数，得出各 种白细胞百分率。结合白细胞计数结果，可间接求 得每升血液中各种白细胞的绝对值。
［方法学评价］
1、显微镜法
2、血液分析仪
［质量控制］
［临床意义］ 1、中性粒细胞 （1）中性粒细胞增多 ❖ 生理性增多 ❖ 病理性增多
3、嗜碱性粒细胞计数 ❖ 增多 4、淋巴细胞 ❖ 增多 感染性疾病 血液病 排斥反应 相对性增多性疾病 ❖ 血液病
A 反应性 1）急性感染或炎症 2）广泛的组织损伤或坏死 3）急性失血 4）急性中毒 5）恶性肿瘤
B 异常增生性 1）粒细胞白血病 2）骨髓增生性疾病
（2）中性粒细胞减少 ❖ 感染性疾病 ❖ 血液系统疾病 ❖ 物理、化学因素 ❖ 单核－吞噬细胞功能亢进 ❖ 其他 （3）中性粒细胞的核象变化 ❖ 核左移 ❖ 核右移
实验五 白细胞分类计数
实验五白细胞分类计数白细胞，又称白血球，是人体内非常重要的免疫细胞，负责维护人体免疫系统和免疫功能。
在人体内，各种疾病和炎症都与白细胞的数量和种类密切相关。
因此，对于白细胞的分类及计数是一项非常关键的实验。
本实验将利用显微镜观察血液涂片，通过分类计数的方法，有效地获取人体内白细胞的数量及种类，并进一步分析其相关性质。
1. 实验步骤1.1 实验材料及设备- 血液涂片- 显微镜- 盖玻片- 鲁氏涂片染料- 石蜡片- 硼酸缓冲液- 静电平衡仪（1）制备血液涂片将新鲜血液利用遗传素和凝集素自然凝集处理10-15分钟，使其完全凝集，然后用无脂棉纸轻轻地将凝结物吸干，用加碘洗液洗涤1-2次，去掉余胶。
取一点冰冻切片的冰晶，快速的拭去切片表面亮点液，然后用切片将凝结物擦开，晾干几分钟。
然后架上净荷盖玻片，压平。
（2）涂片染色取常规染色的涂片，在荧光显微镜下观察，若出现白细胞三频现象，说明染色质量差或细胞大量受损。
可选择改变染色条件，或者重新制备涂片。
（3）显微镜观察和计数在显微镜下，根据数量和形态来观察和分类不同的白细胞。
通常可以观察到粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等不同种类的白细胞。
根据每种白细胞的数量及其所占白细胞总数的比例，可以计算不同种类白细胞的数量，并进一步分析其相关性质。
2. 实验注意事项2.1 实验前要有良好的实验计划，并准备好所有必要的材料和设备。
2.2 制备血液涂片时，应避免试验操作不当造成细胞破损、变形和失去染色颗粒等情况。
操作时需轻柔，严禁用太阳光源和紫外线来加速干燥进程。
2.3 染色时，应保证涂片的质量和染色的均匀性，避免过度染色或染色不足。
同时也要注意避免操作中可能造成的污染和散布。
2.4 显微镜观察时，需要保证显微镜的清洁和环境的恒温恒湿，以保证观察到的细胞具有清晰明确的形态和结构，并且能准确统计不同白细胞的数量和种类。
2.5 注意实验中的安全操作，避免实验人员接触危险药物和试剂，同时要注意防护措施和清洗涂片的作业环境，确保实验过程的安全性和卫生性。
临检--白细胞计数
白细胞计数【定义】指测定单位体积血液中各种白细胞的总数。
【方法】显微镜计数法和血液分析仪计数法。
【原理】显微镜计数法用白细胞计数稀释液（多为稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞后，滴入血细胞计数盘中，在显微镜下计数一定范围内白细胞数，经换算求得每升血液中各种白细胞总数。
【操作方法】显微镜计数法0.38ml稀释液＋20μl血→混匀（棕褐色）→充池→静置2～3min→计数（低倍镜，四角4个大方格）→计算镜下白细胞呈圆形，胞质透亮，胞核深染突出。
【质量控制】1.经验控制（1）与红细胞数比较：红细胞数/白细胞数约为500～1000:1。
（2）与血涂片白细胞分布密度一致性。
血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系2.计数误差（1）技术误差：通过熟练操作、仪器校准而减小，甚至避免。
（2）固有误差：是计数室内每次血细胞分布不可能完全相同所致的误差。
若白细胞数太低（＜3×109/L），可增加计数量（数8个大方格白细胞数）或减低稀释倍数，太高（＞15×109/L），可增加稀释倍数。
（3）有核红细胞正常情况下，外周血中不会出现有核红细胞。
若出现大量有核红细胞，其不能被白细胞稀释液破坏，计数时与白细胞一同被计数，使白细胞计数值假性增高。
校正公式为：校正后白细胞数/L=校正前白细胞数×（Y为白细胞分类计数时，100个白细胞中有核红细胞的数量）。
【参考值】成人：（4～10）×109/L。
新生儿：（15～20）×109/L。
6个月～2岁：（11～12）×109/L。
儿童：（5～12）×109/L。
【临床意义】由于中性粒细胞占白细胞总数的50%～70%，所以白细胞计数与中性粒细胞计数的临床意义基本上一致。
实验七、白细胞分类计数
血 涂 片制 备
推片 血液
载玻片
一张满意的血涂片应厚薄均匀
头
体
尾鲜明
将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于 速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）
涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号
B 123 李 四
血 涂 片 染色
涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液3-5滴至 覆盖整个血膜，约1min
滴加瑞氏染色Ⅱ液3-5滴，用洗耳球将Ⅰ液和 Ⅱ液轻轻吹混，静置5-10min
实验七、白细胞形态观察及分类计数 临床检验诊断学教研室
目的 掌握显微镜外周血白细胞分类计数方法及各种白细胞的正常形态。
原理
将血液制成细胞分布均匀的血涂片，用Wright染液染色，根据各 类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别病进行计数。通常分类 100个白细胞，计算得出各种白细胞所占的百分率。
器材 载玻片、推片、洗耳球、显微镜、微量吸管、香柏油、 乙醇-乙醚溶液、擦镜纸 试剂 瑞氏染液、磷酸缓冲液 标本 抗凝血
分析讨论
1.请分类100个白细胞，并报告结果。 （本次实验课只写作业题）
直接流水冲洗 （切勿先到掉染液）
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干燥后用油镜分类计数100个白 细胞
李 四
正 常 白 细 胞 形 态
中性杆状核粒细胞
正 常 白 细 胞 形 态
中性分叶核粒细胞
正 常 白 细 胞 形 态
嗜酸性粒细胞
正பைடு நூலகம்常 白 细 胞 形 态
嗜碱性粒细胞
正 常 白 细 胞 形 态
单核细胞
淋巴细胞
总结 中性粒细胞：小、多、匀 嗜酸性粒细胞：大、多、匀、眼镜性 嗜碱性粒细胞：少、乱、杂 淋巴细胞：核偏位、核浆比大、粗糙致密 单核细胞：不规则、疏松网状，膨胀立体
白细胞分类计数操作方法
白细胞分类计数操作方法
白细胞分类计数是指将白细胞按照细胞形态、大小和染色质的性状等特征分成不同种类，并计算每种白细胞的数量。
下面是白细胞分类计数的操作方法：
步骤一：准备实验室基本设备
需要准备显微镜、镜片、盖玻片、生理盐水、干净的活动载玻片、草酸伊替比昂、乙醇、伊替比昂等试剂。
步骤二：血液制片
将一滴新鲜血液放在载玻片上，再放一块盖玻片，轻压一下，使血液均匀地分布。
将制片放置在通风处，待其干燥。
步骤三：染色
两个小时后，取草酸伊替比昂染色，将草酸伊替比昂稀释5倍，用草酸伊替比昂在载玻片上滴10-12滴，静置5分钟后用生理盐水洗净，再以相同的方法染泊乙醇2次，洗净。
步骤四：观察和计数
将制片放入显微镜下，依次观察和记录不同种类白细胞的数量，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等。
统计完毕，计算每种白细胞的百分比和绝对值。
步骤五：记录和分析
将各种白细胞的比例和绝对数记录下来，并通过与正常值进行比对来分析患者的白细胞分类计数是否正常。
白细胞计数及白细胞分类计数
白细胞计数及白细胞分类计数白细胞是人体免疫系统中的主要成分，起着保护机体免受外界有害物质侵害的作用。
对于评估机体免疫功能和判断疾病情况，白细胞计数及白细胞分类计数是非常重要的指标之一。
本文将介绍白细胞计数及白细胞分类计数的方法和意义。
一、白细胞计数方法白细胞计数是指在一定体积的血样中计算白细胞个数。
常用的方法有：1. 血液像差计数法：通过像差计数仪对样本进行分析，根据白细胞和红细胞的形态学差异来计数。
2. 血细胞自动分析仪：利用自动分析仪器对血液样本进行细胞分类和计数，速度快、精确度高。
3. 血片计数法：将血液涂片染色后，在显微镜下手动计数。
这种方法需要经验丰富的技术操作者进行操作，准确性较高。
二、白细胞分类计数方法白细胞分类计数是指在白细胞总数的基础上，根据形态和功能的不同对各类白细胞进行计数。
常用的方法有：1. 血片涂片法：制备染色的血液涂片，根据特定染色剂的作用，观察各类白细胞的形态特征，手动计数。
2. 免疫荧光染色技术：利用特异性抗体标记不同类型的白细胞，并通过荧光显微镜观察和计数。
3. 流式细胞术：利用特定抗体与细胞表面的特定结构或抗原结合，通过激光流式细胞术仪器对细胞进行分类和计数。
三、白细胞分类计数的意义白细胞分类计数可以进一步了解机体的免疫状态和炎症程度，有助于疾病的诊断和治疗方案的确定。
以下是一些常见的白细胞分类计数结果及其意义：1. 中性粒细胞计数（中性白细胞）：中性粒细胞是炎症和感染的主要指示物，计数过高可能表示炎症反应或感染。
2. 淋巴细胞计数：淋巴细胞是机体免疫功能的重要组成部分，计数过低可能表示免疫功能低下。
3. 嗜酸性粒细胞计数：嗜酸性粒细胞计数的增加可能与过敏反应、寄生虫感染等相关。
4. 嗜碱性粒细胞计数：嗜碱性粒细胞计数的增加通常与过敏反应或某些疾病如白血病有关。
5. 单核细胞计数：单核细胞计数的增高可能与病毒感染或寄生虫感染相关。
综上所述，白细胞计数及白细胞分类计数是一项重要的临床检验指标，通过对白细胞数量和分类计数的分析，可以评估免疫功能、判断炎症程度以及辅助疾病的诊断和治疗。
实验--白细胞计数和分类计数
）（）个大方格内白细胞数（白细胞L N N /1050*4
20*10*49==白细胞计数和分类计数
第一临床医学院 08中七（2）班 董盼攀 20081150226
一、实验目的
掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法数的方法
掌握显微镜外周血白细胞分类的方法及各种白细胞的正常形态
二、实验方法
白细胞计数
加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml 于小试管中。
吸取血液 用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul ，擦去管尖外部余血。
将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次
混匀
将试管中血液与稀释液混匀，待细胞悬液完全变为棕褐色 冲池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。
用滴棒蘸取细胞悬液1滴，充入改良Neubauer 计数板的计数池中，室温静置2-3min ，待白细胞完全下沉。
计数 在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数
计算
白细胞分类 染色 将血涂片用瑞氏染液染色，冲洗干净，自然干燥后待用
低倍镜观察 低倍镜下观察白细胞的分布和染色情况
油镜观察 选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀，着色良好的区域，按一定的方向顺序对所见到的每一个白细胞进行分类，并用白细胞分类计数器做好记录，共记录100个白细胞。
计算 求出各类细胞所占的百分率。
三、实验结果
3.1 白细胞总数 ×109/L
各类细胞所占的百分率
表1、5种白细胞的百分数
细胞类型百分数（%）中性粒细胞（N）61
嗜酸性粒细胞（E）0
嗜碱性粒细胞（B）0
淋巴细胞（L）35
单核细胞（M） 4。
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(一)外周血常见白细胞的种类 1.白细胞的形态：
无色有核，球形，直径7μm～25μm。 2.白细胞的种类（形态分类）：
三类五种--------
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中性粒细胞（N） 粒细胞 嗜酸粒细胞（E）
嗜碱粒细胞（B） 白细胞 淋巴细胞 （L）
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂 组成、注意事项。
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞 形态。 4.学会白细胞分类计数方法。
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定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨 认。 染 料— 使核略着色，且易与红细胞稀释液 区别。
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显微镜计数法
【操作】 １．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。 ２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。 ３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试
管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次， 注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。
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操作
４.充液 将计数 板和盖玻片擦净，盖片 盖在计数池上，用毛细 滴管或玻璃棒取已混匀 的细胞悬液1滴，充入 计数池与盖玻片间的缝 隙中，静置2min～ 3min，待白细胞下沉。
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镜下白细胞形态
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白细胞的归宿
衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也 有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排 出。
B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特 异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏 后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。 粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞 后发育为成熟单核细胞，释放入血液。Biblioteka 料仅供参考,不当之处，请联系改正。
计数白细胞的四个大方格
四个角的大 方格都用单线划 分为16个中方格， 为计数密度小的 （白）细胞用。
容量： 0.1μl/大方格
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计数红细胞的五个中方格
中央的一个大方格， 用双线划分为25个 中方格，每个中方 格又被单线划分为 16个小方格，共有 400个小方格，供 计数密度大的（红） 细胞用。
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本章目录
第一节 白细胞生理概要 第二节 白细胞计数 第三节 白细胞分类计数 第四节 中性粒细胞常见的形态变化 第五节 白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义 第六节 嗜酸性粒细胞计数 第七节 红斑狼疮细胞检验
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第一节 白细胞生理概要
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显微镜计数法
3.计数池
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显微镜计数法
3.计数池 各池 刻划有9ｍｍ2面积 的刻度，分为 9个 大方格，每格长、 宽各1ｍｍ，面积1 ｍｍ2，体积为 0.1 ｍｍ３，容量 0.1μl。
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嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组 胺导致速发性变态反应。
淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。 单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。
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白细胞的寿命
粒细胞： 10～15天 淋巴细胞：数天～20余年 单核细胞：数月
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容量： 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格
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４.盖玻片
特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面 平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬 浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两 面的平整度是：0.002ｍｍ以内，
大小: 24mm×20mm×0.6mm。
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显微镜计数法
【原理】 用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍 数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在 显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换 算即可求得每升血液中白细胞的总数。
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显微镜计数法
【器材】 1.显微镜（目镜10×；物镜10×） 2.微量吸管（Hb吸管） 传统的Hb吸管玻璃
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显微镜计数法
【试剂】 白细胞稀释液
冰乙酸 2.0ｍｌ 10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴 蒸馏水加至100ｍｌ
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稀释液中各组分的作用
蒸馏水— 低渗溶解红细胞， 乙 酸— 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固
上有10µl和20µl（误差＜±1%）两个刻度。 使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压
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Hb吸管的消毒清洗
每次使用后，应 经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸 泡2ｈ消毒。然后依 次用蒸馏水冲洗， →0.95Ｌ/Ｌ乙醇除 脂脱水，→乙醚干燥 后，才能再次使用。 注意清洗的顺序不可 颠倒。
外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组 成、注意事项
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形
态 4.学会白细胞分类计数方法
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单核细胞 （M）
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白细胞的发育
起源于骨髓多能造血干细胞。
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白细胞的功能
中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞 内酶有复杂的杀菌系统。
嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物， 灭活组织胺减轻过敏反应。