白细胞检验测定方法及分类计数

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外周血常见白细胞的种类与功能白细胞的寿命和归宿
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形
态 4.学会白细胞分类计数方法
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显微镜计数法
【试剂】白细胞稀释液
冰乙酸 2.0ｍｌ 10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴蒸馏水加至100ｍｌ
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稀释液中各组分的作用
蒸馏水— 低渗溶解红细胞，乙酸— 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固
嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组胺导致速发性变态反应。
淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。
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白细胞的寿命
粒细胞： 10～15天淋巴细胞：数天～20余年单核细胞：数月
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外周血常见白细胞的种类与功能
(一)外周血常见白细胞的种类 1.白细胞的形态：
无色有核，球形，直径7μm～25μm。 2.白细胞的种类（形态分类）：
三类五种--------
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中性粒细胞（N）粒细胞嗜酸粒细胞（E）
嗜碱粒细胞（B）白细胞淋巴细胞（L）
单核细胞（M）
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白细胞的发育
起源于骨髓多能造血干细胞。
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白细胞的功能
中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。
嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物，灭活组织胺减轻过敏反应。
定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认。染料— 使核略着色，且易与红细胞稀释液区别。
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显微镜计数法
【操作】１．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试
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镜下白细胞形态
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计数白细胞的四个大方格
四个角的大方格都用单线划分为16个中方格，为计数密度小的（白）细胞用。
容量： 0.1μl/大方格
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计数红细胞的五个中方格
中央的一个大方格，用双线划分为25个中方格，每个中方格又被单线划分为 16个小方格，共有 400个小方格，供计数密度大的（红）细胞用。
管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。
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操作
４.充液将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置2min～ 3min，待白细胞下沉。
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项。
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态。 4.学会白细胞分类计数方法。
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显微镜计数法
【原理】用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。
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显微镜计数法
【器材】 1.显微镜（目镜10×；物镜10×） 2.微量吸管（Hb吸管）传统的Hb吸管玻璃
上有10µl和20µl（误差＜±1%）两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压
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Hb吸管的消毒清洗
每次使用后，应经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸泡2ｈ消毒。然后依次用蒸馏水冲洗， →0.95Ｌ/Ｌ乙醇除脂脱水，→乙醚干燥后，才能再次使用。注意清洗的顺序不可颠倒。
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本章目录
第一节白细胞生理概要第二节白细胞计数第三节白细胞分类计数第四节中性粒细胞常见的形态变化第五节白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义第六节嗜酸性粒细胞计数第七节红斑狼疮细胞检验
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第一节白细胞生理概要
容量： 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格
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４.盖玻片
特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两面的平整度是：0.002ｍｍ以内，
大小: 24mm×20mm×0.6mm。
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显微镜计数法
3.计数池
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显微镜计数法
3.计数池各池刻划有9ｍｍ2面积的刻度，分为 9个大方格，每格长、宽各1ｍｍ，面积1 ｍｍ2，体积为 0.1 ｍｍ３，容量 0.1μl。
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白细胞的归宿
衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。
B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞，释放入血液。