MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
食品中胆固醇含量测定方法的研究
食品中胆固醇含量测定方法的研究胆固醇是一种存在于人体细胞中，同时也存在于很多食物中的脂类，它在维持人体健康方面起着重要作用。
然而，高胆固醇摄入可能会导致心血管疾病的发生。
因此，了解食物中胆固醇含量的测定方法具有重要意义。
1. 传统测定方法传统的食品胆固醇含量测定方法是使用气相色谱法，该方法要求将样品中的胆固醇提取出来，并通过气相色谱仪分离和定量分析。
尽管该方法准确可靠，但其操作繁琐，耗时且昂贵。
因此，寻找更简单便捷的方法变得迫切。
2. 光谱测定方法近年来，一些研究者开始探索使用光谱技术测定食品中胆固醇含量。
例如，红外光谱和紫外-可见光谱可以准确地测定食品中的胆固醇含量。
这些光谱技术不需要样品前处理，操作简便，且可快速获得结果。
然而，这些光谱方法的准确性和可靠性仍需进一步验证。
3. 生物传感器测定方法生物传感器作为一种新兴的测定方法，被广泛应用于食品中营养成分的测定。
胆固醇传感器通过利用特定酶或抗体对胆固醇的选择性反应，来测定食品样品中胆固醇的含量。
此类方法具有操作简单、快速响应和高灵敏度等优点，但受到样品矩阵干扰的影响。
因此，相关研究需要进一步优化和完善。
4. 新兴技术的应用为了更好地测定食品中胆固醇含量，一些新兴技术也开始应用于相关研究中。
例如，质谱法能够快速准确地测定食品样品中的胆固醇含量，并能区别其同位素。
此外，核磁共振技术也可以被用来测定食品胆固醇含量，该方法无需样品前处理，且信息量丰富。
然而，这些新兴技术的耗材成本较高，仍需进一步的研究和开发。
总结起来，食品中胆固醇含量的测定方法不断发展和创新。
传统的气相色谱法虽然准确可靠，但操作繁琐。
一些新兴技术如光谱测定方法、生物传感器测定方法以及质谱法和核磁共振技术等也带来了便捷性和高灵敏度。
然而，这些方法仍需进一步验证和完善，以满足实际应用的需求。
随着科学技术的不断进步，相信未来一定会有更简单、快速和准确的方法用于测定食品中胆固醇含量，从而更好地保障人们身体健康。
食品中胆固醇的测定方法研究
食品中胆固醇的测定方法研究胆固醇是一种脂类物质，存在于动物源性食品中，如肉类、蛋类和奶制品中。
大量摄入胆固醇会增加心血管疾病的风险，因此对食品中胆固醇含量的准确测定具有重要意义。
本文将探讨当前用于测定食品中胆固醇的常见方法。
一、霉菌酶法霉菌酶法是目前广泛应用于胆固醇测定的方法之一。
该方法基于霉菌酶对胆固醇的选择性催化作用。
首先，将食品样品中的脂质提取出来，然后通过添加霉菌酶，使胆固醇转化为胆固醇酯。
接下来，通过酶反应或高效液相色谱等分析技术，测定出胆固醇的含量。
这种方法具有操作简单、结果可靠的优点，但也存在一些局限性。
由于霉菌酶只对胆固醇具有选择性催化作用，其他脂类物质可能会对测定结果产生干扰。
此外，该方法对样品的处理时间较长，且需要一些特殊试剂，增加了实验的复杂度。
二、氧化法氧化法是另一种常用的胆固醇测定方法。
这种方法利用氧化剂将胆固醇氧化为胆固酮，然后通过测定反应后的产物来确定胆固醇的含量。
目前常用的氧化剂包括酶、过氧化氢和碳氧化锌等。
氧化法具有测定速度快、操作简单的特点。
它适用于各种食品样品的胆固醇测定，且对其他脂类物质的干扰较小。
然而，氧化法可能会引起一些胆固醇的降解，从而影响测定结果的准确性。
此外，由于氧化剂的使用，需要一些特殊试剂和仪器设备，增加了实验的成本。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种基于分子之间相互作用的测定方法。
该方法将胆固醇和其他脂类物质分离，然后通过检测分离出来的胆固醇来确定其含量。
高效液相色谱法可使用不同的检测器，如紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器等。
高效液相色谱法具有分离效果好、测定结果准确的优点。
它可以对不同样品中的胆固醇进行定量分析，且对其他脂类物质的干扰较小。
然而，该方法的操作较为复杂，需要较长时间进行样品的处理和分析。
此外，高效液相色谱法需要一些昂贵的仪器设备和试剂，增加了实验的成本。
综上所述，目前主要有霉菌酶法、氧化法和高效液相色谱法等用于食品中胆固醇测定的方法。
食品中胆固醇含量测定方法的研究与比较_丁卓平
由于深加工食品中模板含量少，需要利用高效的或
ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｅｓ ａｖａｉｌａｂｌｅ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ
特殊的 Ｄ Ｎ Ａ 提取方法，以提取到其中微量的 Ｄ Ｎ Ａ 。针
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １９９９， （９）： ３８０－３８８．
对不同的深加工食品，需要设计不同的模板提取方法。 ［４］ Ｇｅｏｒｇ Ａ Ｓ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ Ｆｏｒ ｍｅｔｈｏｄｓ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｍｏｄｉ－
酸性溶液和弱碱性水溶液等。经过多次有机溶剂提取， ［１］ Ｄ Ｎ Ａ 大量损失；并且在酸碱和加热等提取条件下，使
Ｄ Ｎ Ａ 断裂成小片段。对于经过提纯的食品或食品原料， ［２］ 如大豆精炼油、大豆异黄酮、大豆卵磷脂、大豆蛋白
等，模板 Ｄ Ｎ Ａ 有二个显著特点：其一是含量少，其二 ［３］ 是片段小。
Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｎｄ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｅｔｈｏｄ
ＤＩＮＧ Ｚｈｕｏ－ｐｕａ，ＨＥ Ｙｕ，ＺＨＡＯ Ｄｏｎｇ－ｙａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，ＳＦＵ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９０， Ｃｈｉｎａ）
130 2004, Vol. 25, No. 1
食品科学
※分析检验
３ 讨 论
样品中十几个拷贝的 Ｄ Ｎ Ａ 模板；用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法检测 Ｎ Ｏ Ｓ ，
大豆异黄酮的提取，主要根据被提取物的性质及伴 存杂质的情况来选择合适的提取用溶剂。对大豆异黄酮 的甙类成分，一般用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、 水或某些极性较大的混合溶剂，甙元用极性较小的溶 剂，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯等来提取。在综合提取
胆固醇含量检测
法测定鸡蛋中胆固醇含量一、原理当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行皂化和提取，用硫磷铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm•处测定。
二、实验仪器及试材1.仪器：分光光度计、水浴锅2.试剂：本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。
试剂纯度均为分析纯。
（1）石油醚（沸点30-60℃）、无水乙醇、冰乙酸。
（2）50%氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（3）25%氯化钠溶液：称取25g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（4）10% 三氯化铁溶液：将10g FeCl3·6 H2O溶于磷酸中，定容至100 mL，储于棕色瓶中，冷藏保存。
（5）磷硫铁试剂：取10% 三氯化铁溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶内，加浓硫酸定容至刻度。
（6）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定容至100mL。
（7）胆固醇标准溶液：临用前将储液用冰乙酸稀释10倍。
三、实验方法与步骤1.样品胆固醇提取准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于25mL具塞比色管中，加入0.5mL50%氢氧化钾溶液和4.5mL无水乙醇，振荡混匀，在80℃恒温水浴中皂化20min。
皂化时每隔5min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出比色管，冷却。
加入3mL 25%氯化钠溶液后再加入10mL石油醚，盖紧玻璃塞，振摇1min，静置分层。
取上层石油醚液1mL，置于25mL具塞比色管内，在65℃水浴中让石油醚自然挥发干，加入4mL冰乙酸，轻摇使胆固醇溶解，待测。
2.样品和标准胆固醇含量测定另取两支25mL具塞比色管，一支（空白管）加入4mL冰乙酸，一支（标准管）加入1mL胆固醇标准溶液（0.1mg/mL）和3mL冰乙酸。
包括样品管，各管分别加入2mL磷硫铁试剂，混匀，25℃放置20min后在560nm波长下比色。
食品中胆固醇的测定
食品中胆固醇的测定食物中胆固醇的测定方法主要有气相色谱法和比色法。
色谱法必须具备气相色谱仪，此仪器价格昂贵，故在国内不易普及，因此选用经济、简便、实用的比色法进行食物中胆固醇的测定。
比色法1.原理固醇类化合物与酸试剂作用，可脱水，发生聚合反应并产生强的颜色反应。
2.适用范围此方法适用于动物性食物中胆固醇的测定。
3.仪器（1）实验室常用设备（2）分光光度计（3）电热恒温水浴4.试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，均为蒸馏水。
（1）石油醚（2）无水乙醇（3）浓硫酸（4）冰乙酸(优级纯）（5）磷酸（6）胆固醇标准（美国Sigma公司）标准储备液：准确称取胆固醇100mg，（胆固醇标准开启后放在干燥器内）溶于冰乙酸中，并定溶至100ml。
其浓度为1g/L。
可保存2个月。
标准工作液：取标准储备液10ml，用冰乙酸定溶至100ml。
其浓度为0.1g/L。
此液用时临时配制。
（7）铁矾显色液：储备液：溶解4.463克硫酸铁铵〔FeNH4（SO4）2·12H2O〕于100ml 85%磷酸中贮于干燥器内，此溶液在室温中稳定。
* 铁矾储备液须在实验前两周配制，因硫酸铁铵不易溶解，每天要进行短时间的振摇待溶质完全溶于磷酸后再定溶到体积。
工作液：吸取储备液10ml用浓硫酸稀释到100ml。
贮于干燥器内。
（8）氢氧化钾50%溶液：溶解50g氢氧化钾于水中，定溶至100ml。
（9）氯化钠5%溶液：溶解5克氯化钠于水中，定溶至100ml。
（10）纯氮（99.99%）5.操作步骤5.1样品脂肪的提取与测定：根据食物种类分别用索氏提取法、研磨法和罗高氏法提取脂肪，并计算出每100克食物中脂肪含量。
5.2样品胆固醇的测定：准确称取提取的油脂3-4滴（约含胆固醇300-500μg）取样量可按样品中胆固醇的浓度增减。
置于25ml试管内，加入4ml无水乙醇，0.5ml50%氢氧化钾，在65℃恒温水浴中皂化1小时。
食品安全地方标准植物油中胆固醇的测定气相色谱-质谱法
表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差%
相对离子丰度 K
K＞50
20＜K≤50
10＜K≤20
K≤10
允许最大偏差
±20
±25
±30
±50
6.3.3 定量测定
在仪器最佳工作条件下，对胆固醇基质标准工作溶液（4.11）进行色谱-质谱分析，以峰面积为纵 坐标，基质标准工作溶液浓度为横坐标绘制，用标准工作曲线对样品进行定量，基质标准工作溶液和样 液中胆固醇的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，胆固醇的参考保留时间 为22.48min，胆固醇标准溶液的总离子流图和质谱图参见附录A中的图A.1、图A.2。
定量离子与定性离子的相对丰度比见表1dbs220062012定量离子与定性离子的相对丰度比项目定量离子定性离子定性离子特征碎片离子mz301368231相对丰度k1004756732定性测定在相同的实验条件下进行样品测定时如果样品中待测物质的色谱峰保留时间与标准品色谱峰保留时间相差在25以内并且在扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现且样品谱图中定性离子的相对丰度与浓度接近的基质标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较偏差不超过表2规定的范围则可判定为样品中存在该种待测物
6.1.3 浓缩
将上述提取液经旋转蒸发仪于45℃条件下蒸发至近干，用正己烷定容至5 mL,待GC-MS测定。
6.2 阴性样品提取液的制备
取不含胆固醇的阴性植物油样品，按7.1步骤制备阴性样品提取液，用于配制胆固醇基质标准工作 溶液。
6.3 测定条件
6.3.1 气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）毛细管色谱柱或相当者； b) 色谱柱温度程序：初始温度 220℃，保持 1min，以 30℃/min 的速率，升温至 280℃，保持 9min； c) 载气：高纯氦气，纯度≥99.999%； d) 载气流速： 1.0 mL/min； e) 进样口温度：260℃； f) 进样量：1μL； g) 进样方式：不分流进样； h) 电子轰击源：70 eV； i) 离子源温度：230℃；
气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究
气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究董晓尉【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2016(000)021【总页数】1页(P69-69)【作者】董晓尉【作者单位】金华市食品药品检验检测研究院【正文语种】中文胆固醇作为人体中维持个人机体正常生理功能所必须的重要物质，而人体内所需的胆固醇含量约为140 g，若人体每天摄入胆固醇的量过高则会形成高脂血症，从而引起动脉粥样硬化，进而诱发冠心病、高血压等一系列心脑血管疾病，预防动脉粥样硬化及心脑血管疾病的重要措施是适度控制外源性胆固醇摄入。
气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）具有色谱分离效率高，定性、定量准确及质谱的灵敏度高、进样量少、分析速度快等特点，适用于易挥发或易衍生化合物的检测和分析。
由于色谱的高分离能力和质谱的鉴别特性，对复杂的混合物样品进行分离、定性和定量分析一次完成，是一种完美的现代检测分析方法。
胆固醇的介绍胆固醇是一种环戊烷多氢菲的衍生物，其又称为胆甾醇。
化学式为C27H46O，是存在动物组织中的一种白色蜡状物质。
胆固醇不溶于水，易溶于氯仿、乙醚等溶剂，其溶解性与脂肪类似。
胆固醇是动物不可缺少的重要物质，不仅参与形成组织细胞的细胞膜，而且是合成维生素D，胆汁酸以及甾体激素的主要原料。
胆固醇同时也是合成几种重要荷尔蒙及胆酸的材料。
高胆固醇的危害人体每天都需要摄入大量的各类食品，如果长期食用胆固醇含量极高的食品会使人体血液中胆固醇的含量升高。
人体每天摄入胆固醇的正常值在0～5.2mmol/L，如果超过这个水平就表现为高胆固醇，而高胆固醇会诱发高血压、心脑血管疾病、肾衰竭疾病、心脏病和牙周病等疾病的发生。
基本原理气相色谱是利用被测物质各组分在不同两相间的微小化学性质差异对物质进行分离的一种方法，这些物质在两相作相对运动时进行反复多次的分配，使不同组分由于原来只有微小的性质差异产生很大的效果而得到分离。
实际为通过样品组分沸点之间的差异先后进柱，然后在气体流动相和固定相之间分配系数的差异进一步分离。
MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
MM_FS_CNG_0356食品胆固醇分光光度法MM_FS_CNG_0356食品中胆固醇的测定方法1.适用范围本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2.原理概要当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂石油醚；无水乙醇；浓硫酸；冰乙酸：优级纯；磷酸；胆固醇标准物质；胆固醇标准液；胆固醇标准储备液（1mg／mL）：精确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，并定容至100mL。
此液至少在2个月内保持稳定；胆固醇标准常备液（100μg／mL）：吸取胆固醇标准储备液10mL，用冰乙酸定容至100mL。
此液用时临时配制；铁矾显色剂；铁矾储备液：溶解4.463g硫酸铁铵[ FeNH4（SO4）2·H2O]于100mL85％磷酸中，贮于干燥器内，此液在室温中稳定；铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL，用浓硫酸定容至100mL。
贮于干燥器内，以防吸水；50％氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；5％氯化钠溶液：称取5g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；钢瓶氮气：纯度99.99％。
3.2.仪器实验室常用设备；721型分光光度计；电热恒温水浴；电动振荡器；具玻塞试管：体积10mL、25mL。
4.过程简述4.1.胆固醇标准线吸取胆固醇标准常备液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0mL分别置于10mL试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL。
沿管壁加入2mL铁矾显色液，混匀，在15～90min内，在560～575nm波长下比色。
以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。
4.2.样品测定4.2.1.食品脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。
并计算出每100g食品中的脂肪含量。
4.2.2.食品胆固醇的测定将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500 μg），置于25mL试管内，准确记录其重量。
食品中胆固醇的测定
食品安全国家标准食品中胆固醇的测定1范围本标准规定了食品中胆固醇的测定方法㊂本标准适用于食品中胆固醇的测定,第一法气相色谱法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品㊁乳及乳制品等各类动物性食品以及植物油脂中胆固醇的测定;第二法高效液相色谱法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品㊁乳及乳制品等各类动物性食品中胆固醇的测定;第三法比色法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品等动物性食品中胆固醇的测定㊂第一法气相色谱法2原理样品经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,石油醚和无水乙醚混合提取,提取液浓缩至干,无水乙醇溶解定容后,采用气相色谱法检测,外标法定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂3.1.2无水乙醇(C2H5OH)㊂3.1.3石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂3.1.4无水乙醚(C4H10O)㊂3.1.5无水硫酸钠(N a2S O4)㊂3.1.6氢氧化钾(K O H)㊂3.2试剂配制3.2.160%氢氧化钾溶液:称取60g氢氧化钾,缓慢加水溶解,并定容至100m L㊂3.2.2石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比):将石油醚和无水乙醚等体积混合均匀㊂3.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂3.4标准溶液配制3.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L)称取胆固醇标准品0.05g(精确至0.1m g),用无水乙醇溶解并定容至50m L,放置0ħ~4ħ密封可贮藏半年㊂3.4.2胆固醇标准系列工作液分别吸取标准储备液(1.0m g/m L)25μL㊁50μL㊁100μL㊁500μL㊁2000μL,用无水乙醇定容至10m L,该标准系列工作液的浓度分别为2.5μg/m L㊁5μg/m L㊁10μg/m L㊁50μg/m L㊁200μg/m L㊂现用现配㊂4仪器和设备4.1气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(F I D)㊂4.2电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂4.3匀浆机㊂4.4皂化装置㊂5分析步骤5.1试样制备5.1.1肉及肉制品等各类固体试样取样品的可食部分200g进行均质㊂将试样装入密封的容器里,防止变质和成分变化㊂试样应在均质化24h内尽快分析㊂5.1.2植物油脂㊁乳品等液体试样取混匀后的均匀液体试样装入密封容器里待测㊂5.2样品处理5.2.1皂化称取制备后的样品0.25g~10g(准确至0.001g,胆固醇含量约为0.5m g~5m g),于250m L圆底烧瓶中,加入30m L无水乙醇,10m L60%氢氧化钾溶液,混匀㊂将试样在100ħ磁力搅拌加热电热套皂化回流1h,不时振荡防止试样黏附在瓶壁上,皂化结束后,用5m L无水乙醇自冷凝管顶端冲洗其内部,取下圆底烧瓶,用流水冷却至室温㊂5.2.2提取定量转移全部皂化液于250m L分液漏斗中,用30m L水分2次~3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分液漏斗,再用40m L石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比)分2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗,振摇2m i n,静置,分层㊂转移水相,合并三次有机相,用水每次100m L洗涤提取液至中性,初次水洗时轻轻旋摇,防止乳化,提取液通过约10g无水硫酸钠脱水转移到150m L平底烧瓶中㊂5.2.3浓缩将上述平底烧瓶中的提取液在真空条件下蒸发至近干,用无水乙醇溶解并定容至5m L,待气相色谱仪测定㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂5.3测定5.3.1仪器参考条件a)色谱柱:D B-5弹性石英毛细管柱,柱长30m,内径0.32mm,粒径0.25μm,或同等性能的色谱柱;b)载气:高纯氮气,纯度ȡ99.999%;恒流2.4m L/m i n;c)柱温(程序升温):初始温度为200ħ,保持1m i n,以30ħ/m i n速率升至280ħ,保持10m i n;d)进样口温度280ħ;e)检测器温度:290ħ;f)进样量:1μL;g)进样方式:不分流进样,进样1m i n后开阀;h)空气流量:350m L/m i n;i)氢气流量:30m L/m i n㊂5.3.2标准曲线的制作分别取胆固醇标准系列工作液注入气相色谱仪,在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值(峰面积),以浓度为横坐标㊁峰面积为纵坐标,制作标准曲线㊂5.3.3测定试样溶液注入气相色谱仪,测定峰面积,由标准曲线得到试样溶液中胆固醇的浓度㊂根据保留时间定性,外标法定量㊂胆固醇标准溶液的色谱图见图A.1㊂6分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(1)计算:(1)X=ρˑVmˑ1000ˑ100式中:X 试样中胆固醇含量,单位为毫克每百克(m g/100g);ρ 试样溶液中胆固醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样溶液最终定容的体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000㊁100 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂8其他当称样量为0.5g,定容体积为5.0m L,方法的检出限为0.3m g/100g,定量限为1.0m g/100g㊂第二法高效液相色谱法9原理样品经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,石油醚和无水乙醚混合提取,提取液浓缩至干,无水乙醇溶解定容后,采用高效液相色谱仪检测,外标法定量㊂10试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂10.1试剂10.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂10.1.2无水乙醇(C2H5O H)㊂10.1.3石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂10.1.4无水乙醚(C4H10O)㊂10.1.5无水硫酸钠(N a2S O4)㊂10.1.6氢氧化钾(K O H)㊂10.2试剂配制10.2.160%氢氧化钾溶液:称取60g氢氧化钾,缓慢加水溶解,并定容至100m L㊂10.2.2石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比):将石油醚和无水乙醚等体积混合均匀㊂10.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂10.4标准溶液配制10.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L):称取胆固醇标准品0.05g(精确至0.1m g),用无水乙醇溶解并定容至50m L,放置0ħ~4ħ密封可贮藏半年㊂10.4.2胆固醇标准系列工作液:分别吸取标准储备液(1.0m g/m L)25μL㊁50μL㊁100μL㊁500μL㊁2000μL,用无水乙醇定容至10m L,该标准系列工作液的浓度分别为2.5μg/m L㊁5μg/m L㊁10μg/m L㊁50μg/m L㊁200μg/m L㊂现用现配㊂11仪器和设备11.1匀浆机㊂11.2高效液相色谱仪:配有紫外检测器或相当的检测器㊂11.3电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂12分析步骤12.1试样制备12.1.1肉及肉制品等各类固体试样样品取可食部分200g,使用绞肉机或匀浆机将试样均质㊂将试样装入密封的容器里,防止变质和成分变化㊂试样应在均质化24h内尽快分析㊂12.1.2乳品等液体试样取混匀后的均匀液体试样装入密封容器里待测㊂12.2样品处理12.2.1皂化称取制备后的样品0.25g~10g(精确至0.001g,胆固醇含量约为0.5m g~5m g),于250m L圆底烧瓶中,加入30m L无水乙醇,10m L60%氢氧化钾溶液,混匀㊂将试样在100ħ磁力搅拌加热电热套皂化回流1h,不时振荡防止试样黏附在瓶壁上,皂化结束后,用5m L无水乙醇自冷凝管顶端冲洗其内部,取下圆底烧瓶,用流水冷却至室温㊂12.2.2提取定量转移全部皂化液于250m L分液漏斗中,用30m L水分2次~3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分液漏斗,再用40m L石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比)分2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗,振摇2m i n,静置,分层㊂转移水相,合并三次有机相,用水每次100m L洗涤提取液至中性,初次水洗时轻轻旋摇,防止乳化,提取液通过约10g无水硫酸钠脱水转移到150m L平底烧瓶中㊂12.2.3浓缩将上述平底烧瓶中的提取液在真空条件下蒸发至近干,用无水乙醇溶解并定容至5m L,溶液通过0.45μm过滤膜,收集滤液于进样瓶中,待高效液相色谱仪测定㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂12.3测定12.3.1仪器参考条件a)色谱柱:C18反相色谱柱,柱长4.6mm,内径150mm,粒径5μm,或同等性能的色谱柱;b)柱温:38ħ;c)流动相:甲醇;d)流速:1.0m L/m i n;e)测定波长:205n m;f)进样量:10μL㊂12.3.2标准曲线的制作分别取10μL胆固醇标准工作液注入高效液相色谱仪,在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值(峰面积),以浓度为横坐标㊁峰面积为纵坐标,制作标准曲线㊂12.3.3测定将10μL试样溶液注入高效液相色谱仪,测定峰面积,由标准曲线得到试样溶液中胆固醇的浓度㊂胆固醇标准溶液的色谱图见图A.2㊂13分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(2)计算:(2)X=ρˑVmˑ1000ˑ100式中:X 试样中胆固醇的含量,单位为毫克每百克(m g/100g);ρ 试样溶液中胆固醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样溶液定容体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000㊁100 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂14精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂15其他当称样量为1g,定容体积为5m L,方法的检出限为0.64m g/100g,定量限为2.1m g/100g㊂第三法比色法16原理样品进行脂肪提取后的油脂,经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,用石油醚提取,浓缩后加入冰乙酸,以硫酸铁铵试剂作为显色剂,采用分光光度计,在560n m~575n m波长下检测,外标法定量㊂17试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的三级水㊂17.1试剂17.1.1无水乙醇(C2H5O H)㊂17.1.2石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂17.1.3硫酸(H2S O4)㊂17.1.4冰乙酸(C2H4O2):优级纯㊂17.1.5磷酸(H3P O4)㊂17.1.6硫酸铁铵[F e N H4(S O4)2㊃H2O]㊂17.1.7钢瓶氮气(N2):纯度99.99%㊂17.1.8海砂㊂17.1.9氢氧化钾(K O H)㊂17.1.10氢氧化钠(N a O H)㊂17.1.11盐酸(H C l)㊂17.1.12乙醚(C2H5O)㊂17.2试剂配制17.2.1铁矾储备液:称取4.463g硫酸铁铵[F e N H4(S O4)2㊃H2O]于100m L磷酸中(如果不能充分溶解,超声后取上清液),贮藏于干燥器内,此液在室温中稳定㊂17.2.2铁矾显色液:吸取铁矾储备液10m L,用硫酸定容至100m L㊂贮藏于干燥器内,以防吸水㊂17.2.350%氢氧化钾溶液:称取50g氢氧化钾,用水溶解,并定容至100m L㊂17.2.45%氯化钠溶液:称取5g氯化钠,用水溶解,并定容至100m L㊂17.2.5盐酸溶液(1+1):将盐酸与水等体积混合均匀㊂17.2.6氢氧化钠溶液(240g/L):称取24g氢氧化钠,用水溶解并定容至100m L㊂17.2.7海砂:取用水洗去泥土的海砂或河砂,先用盐酸溶液(1+1)煮沸0.5h,用水洗至中性再用氢氧化钠溶液(240g/L)煮沸0.5h,用水洗至中性,经100ħʃ5ħ干燥备用㊂17.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂17.4标准溶液配制17.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L):称取胆固醇标准品0.10g(精确至0.1m g),用冰乙酸溶解并定容至100m L㊂放置4ħ密封可贮藏半年㊂17.4.2胆固醇标准工作液(100μg/m L):吸取胆固醇标准储备液(1.0m g/m L)10m L,用冰乙酸定容至100m L㊂现用现配㊂18仪器和设备18.1匀浆机㊂18.2分光光度计㊂18.3电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂19分析步骤19.1胆固醇标准曲线的制作吸取胆固醇标准工作液0.0m L㊁0.5m L㊁1.0m L㊁1.5m L㊁2.0m L分别置于10m L试管中,在各管内加入冰乙酸使总体积均达4m L㊂沿管壁加入2m L铁矾显色液,混匀,在15m i n~90m i n内,在560n m~575n m波长下比色㊂以胆固醇标准浓度为横坐标,吸光度为纵坐标制作标准曲线㊂19.2测定19.2.1食品中脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏脂肪提取法,研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪㊂并计算出每100g食品中的脂肪含量㊂19.2.2食品中胆固醇的测定将提取的油脂3滴~4滴(约含胆固醇300μg~500μg),置于25m L试管中,准确记录其质量㊂加入4m L无水乙醇,0.5m L50%氢氧化钾溶液,混匀,装上冷凝管,在65ħ恒温水浴锅中皂化1h㊂皂化时每隔20m i n~30m i n振摇一次使皂化完全㊂皂化完毕,取出试管,用流水冷却㊂加入3m L5%氯化钠溶液,10m L石油醚,盖紧玻璃塞,在电动振荡器上振摇2m i n,静置分层(一般约需1h以上)㊂取上层石油醚液2m L,置于10m L具塞玻璃试管内,在65ħ水浴中用氮气吹干,加入4m L冰乙酸,2m L铁矾显色液,混匀,放置15m i n后在560n m~575n m波长下比色,测得吸光度,在标准曲线上查出相应的胆固醇含量㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂20分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(3)计算:X=AˑCˑV1V2ˑmˑ1000 (3)式中:X 试样中胆固醇含量,单位为毫克每百克(m g/100g);A 测得的吸光度值在胆固醇标准曲线上的胆固醇含量,单位为微克(μg);C 试样中脂肪含量,单位为克每百克(g/100g);V1 石油醚总体积,单位为毫升(m L);V2 取出的石油醚体积,单位为毫升(m L);m 称取食品油脂试样量,单位为克(g);1000 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂21精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂22其他方法的检出限为2.4m g/100g,定量限为7.2m g/100g㊂附录A胆固醇标准的色谱图A.1胆固醇标准溶液的气相色谱图见图A.1㊂图A.1胆固醇标准溶液的气相色谱图A.2胆固醇标准溶液的高效液相色谱图见图A.2㊂图A.2胆固醇标准溶液的高效液相色谱图。
MM FS CNG 肉与肉制品的胆固醇含量测定
MMFSCNG0029 肉肉制品胆固醇气相色谱法MM_FS_CNG_0029肉与肉制品的胆固醇含量测定1．适用范围本方法适用于肉与肉制品中胆固醇含量的测定。
2．原理概要肉与肉制品中的脂类经皂化后，胆固醇作为不皂化物被提取出来，并与一定量的内标物混合后一起注入气相色谱柱，求出胆固醇与内标物的峰面积比，根据工作曲线计算胆固醇的重量，以求得肉与肉制品中胆固醇含量。
3．主要仪器和试剂3.1 试剂3.1.1 无水乙醚。
3.1.2 氯仿。
3.1.3 1 mol/L 氢氧化钾/乙醇溶液。
3.1.4 无水硫酸钠。
3.1.5 胆固醇：1.0 mg/mL 氯仿溶液。
3.1.6 内标溶液：3.1.6.1 5-α胆甾烷/氯仿标准溶液：1.0 mg/mL。
3.1.6.2 菜油醇/氯仿标准溶液：3.0 mg/mL。
3.1.6.3 胆固醇与5-α胆甾烷混合液：上述两种标准液等体积混合。
3.2 仪器3.2.1 实验室常规仪器。
3.2.2 气相色谱仪，配有 FID 检测器。
4．过程简述4.1 不皂化物的提取称取1.00 g脂肪，置于10 mL容量瓶中用氯仿定容并摇匀。
准确量取该试液1～5 mL、置于25 mL具塞试管中，准确加入0.5～1 mL内标物溶液(3.1.6.1)，然后将氯仿蒸干。
加入1 mol/L氢氧化钾溶液5 mL，装上冷凝管，在85～95℃水浴上缓缓皂化1 h。
取下冷却至室温，全部移入50 mL分液漏斗中，用水10 mL洗具塞试管，洗液并入分液漏斗，加乙醚10 mL轻轻振摇，静置分层后，将水相放入原试管中，加乙醚10 mL振摇，待分层后，将乙醚移入分液漏斗内。
再用10 mL乙醚提取一次，此时分液漏斗中共有30 mL溶液。
用水2～3 mL洗涤乙醚液，分层后，弃去水相，用无水硫酸钠10 g干燥后，将乙醚层移入另一具塞试管中，通氮气吹干后，加入乙醇1 mL。
4.2 色谱条件4.2.1 色谱分离条件选择：对胆固醇峰要求其理论塔板数不少于1600；胆固醇与菜油醇二者峰分辨率不小于2.2；胆固醇的保留时间在8～12 min之间；胆固醇峰强度为满量程的 0.25～0.5。
分光光度法测定胆固醇含量
实验八、分光光度法测定胆固醇含量一、实验目的1、学习721分光光度计的使用2、掌握分光光度法测定胆固醇含量的原理3、学习并掌握利用分光光度法制作胆固醇含量标准曲线的方法二、实验原理当一束平行的单色光照射到有色溶液时，光的一部分被溶液吸收，一部分透过溶液。
假设入射光强度为I 0，透过光强度为It ，溶液的浓度为C ，液层宽度为b ，则b C K I I A t⨯⨯==0log（朗伯－比尔定律的数学表达式） 式中：A 为吸光度，没有单位K 随C 、b 的单位而不同C ：g/L, b : cm , k: L/g·cm ,为吸光系数；C ：mol/L, b : cm , k: L/mol·cm ,为摩尔吸光系数以上式子表明：当一束单色光通过有色溶液时，其吸光度与溶液浓度及宽度成正比。
当k 、b 都一定时，A 与C 成正比，因此若已知浓度溶液（即试样溶液）的吸光值As ，在相同条件下测出未知浓度溶液的吸光值Ax ，则试样溶液的浓度Cx 可通过下式求出：s sx x x s x s C A A C C C A A ⨯=⇒=（标准对照法，适用于非经常性的分析工作） 若是经常性的批量测定，则应用标准曲线法，即配制一系列已知浓度的标准溶液，在选定波长处，用同样的比色皿分别测其吸光值。
作出“吸光值/含量”的标准曲线，在相同条件下测定未知浓度试样的吸光值，直接可从标准曲线上查出相应的浓度。
三、实验药品及仪器药品: FeCl 3·6H 2O ，磷酸(A.R. 即“分析醇”) ， 浓硫酸（A.R.）， 胆固醇（C.P.），无水乙醇。
试剂：10％三氯化铁溶液：10g FeCl 3·6H 2O 溶于磷酸，定容至100ml ，存棕色瓶中，冷藏磷硫铁试剂（P-S-Fe 试剂）：取1.5ml 10％三氯化铁溶液于100ml 棕色容量瓶加T ＝－I 0 I t（透光度或透光率）浓硫酸至刻度。
胆固醇标准溶液（0.08mg/ml）：称取80mg胆固醇溶于无水乙醇定容至100ml，配制成10×的标准贮存液。
高效液相色谱法测定食品中的胆固醇
教学目标：1. 让学生通过自测题了解自己在英语学习中的优势和不足。
2. 培养学生自主学习和自我评价的能力。
3. 提高学生的英语阅读、听力、语法和写作等基本技能。
教学重点：1. 自测题的命题原则和方法。
2. 自测题的评分标准和反馈方式。
教学难点：1. 如何根据学生的实际情况制定合适的自测题。
2. 如何帮助学生正确评价自己的英语水平。
教学过程：一、导入1. 教师简要介绍自测题的作用和意义。
2. 引导学生思考：如何通过自测题提高自己的英语水平？二、自测题命题1. 教师展示自测题的命题原则和方法，如：题型、题量、难度等。
2. 学生分组讨论，根据所学知识，共同命题。
三、自测题实施1. 学生根据自测题进行自我检测，教师巡视指导。
2. 学生独立完成自测题，不得相互抄袭。
四、自测题评分与反馈1. 教师根据自测题的评分标准进行评分。
2. 学生了解自己的得分情况，教师进行针对性指导。
3. 教师针对学生的不足之处，提出改进建议。
五、总结与反思1. 教师总结自测题的实施过程，强调自测题的重要性。
2. 学生分享自己在自测过程中的收获和体会。
3. 教师引导学生思考：如何根据自测结果调整自己的学习方法？教学评价：1. 评价学生自测题的命题质量。
2. 评价学生在自测过程中的表现，如：认真程度、答题速度等。
3. 评价学生对自测结果的反馈和改进措施。
教学延伸：1. 教师根据学生的自测结果，制定个性化的辅导计划。
2. 鼓励学生参加英语角、英语演讲等活动，提高自己的英语实际运用能力。
教学资源：1. 自测题命题模板2. 自测题评分标准3. 英语学习资料教学反思：本节课通过自测题，让学生了解自己在英语学习中的优势和不足，培养学生自主学习和自我评价的能力。
在教学过程中，要注意以下几点：1. 自测题的命题要具有针对性和实用性，避免过于简单或复杂。
2. 教师在自测过程中要关注学生的表现，及时给予指导和帮助。
3. 自测结果的反馈要客观、公正，鼓励学生不断进步。
化学实验测定某种食品中胆固醇含量
化学实验测定某种食品中胆固醇含量随着人们对健康的日益关注，食品中的营养成分成为了大家关注的重点之一。
胆固醇作为一种常见的脂质，其摄入量过高可能会对人体健康产生负面影响。
因此，准确测定食品中的胆固醇含量对于保持身体健康至关重要。
在本文中，将介绍一种化学实验方法，用于测定某种食品中胆固醇含量的准确性。
实验材料和仪器1. 某种食品样品2. 石油醚（溶剂）3. 乙醇4. 无水硫酸铜5. 对氯苯甲酸6. 硫酸亚铁（0.1M）7. 高锰酸钾溶液（0.01M）8. 硝酸钾溶液（2%）9. 烧杯、试管、滴定管、移液管、天平等实验器材实验步骤第一步：样品准备1. 取食品样品适量，将其研磨成粉末状。
2. 称取2g食品粉末，放入玻璃烧杯中。
第二步：提取胆固醇1. 向烧杯中加入15mL石油醚，搅拌10分钟，使样品中的胆固醇充分溶解于石油醚中。
2. 将石油醚层转移至试管中。
第三步：胆固醇的定量分析1. 在试管中加入3mL乙醇，将其蒸发干净。
2. 在试管中加入2mL无水硫酸铜，并用试管架加热，使其变为蓝色。
3. 加入0.3g对氯苯甲酸，继续加热，使试管中的液体变为红色。
4. 将试管放置至水浴中冷却4分钟。
5. 加入1mL 0.1M硫酸亚铁，迅速滴定0.01M高锰酸钾溶液，直到试管中液体变为淡黄色。
记录滴定所需的高锰酸钾溶液体积V1。
计算胆固醇含量所含胆固醇质量 = (V1 × 0.01 ×被试样品质量 × 1000) / (2 × 0.3)实验注意事项1. 实验操作中需要保持实验环境干燥，以免水分与试剂发生反应影响实验结果。
2. 操作时需佩戴手套、护目镜等防护用具，以防实验中的化学品对身体造成伤害。
3. 称量操作应准确，以保证实验数据的精确性。
实验结果与讨论通过以上实验步骤，我们可以得到食品样品中胆固醇的含量。
胆固醇是食品中常见的脂质成分，其含量的准确测定对于人们控制饮食、保持心血管健康至关重要。
食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究
食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究食品油脂是我们日常生活中不可或缺的重要食物成分之一。
然而，过量摄入胆固醇可能导致心血管疾病的发生，因此正确测定食品油脂中的胆固醇含量对我们的健康至关重要。
本文将探讨食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究。
随着科技的不断进步，人们对食品安全和质量的需求也越来越高。
胆固醇在食品油脂中的含量直接关系到食品的营养价值和对人体健康的影响。
那么，如何准确地测定食品油脂中的胆固醇含量，成为了研究的焦点之一。
传统的测定方法主要依靠分光光度法和色谱法。
分光光度法是利用胆固醇在特定波长下的吸光度对其含量进行测定。
这种方法具有操作简单、成本低廉的优点，但是由于在分光光度法中存在一些干扰物质，如脂肪酸和其他酯类化合物，这就要求在测定过程中进行样品的预处理和清洁，以提高准确性。
色谱法是一种高效分离和测定化合物的方法，可以用于分析食品油脂中胆固醇的含量。
色谱法的原理是利用样品中化合物在流动气体和固定相之间的相互作用来对化合物进行分离，并通过探测器来测定其浓度。
色谱法的优点是灵敏度高、分离度好，适用于各种类型的食品油脂中胆固醇的测定。
然而，色谱法的操作过程较为复杂，需要专业的设备和技术支持。
除了传统的测定方法外，近年来，新的测定技术也在不断涌现。
一种颇受关注的新方法是基于纳米技术的胆固醇检测。
纳米技术可以将物料制备成纳米级颗粒，提高分析灵敏度。
这种方法的优点是操作简便、灵敏度和精确度高。
通过纳米技术，研究者可以准确测定食品油脂中的胆固醇含量，为人们提供更精准的营养信息。
此外，利用生物传感器进行胆固醇的检测也是一项具有潜力的技术。
生物传感器是一种利用生物识别原理来检测目标物质的装置。
通过与特定酶的反应，可以对胆固醇进行快速、准确的测定。
这种方法的优点是高灵敏度、实时性强，可应用于食品油脂的快速检测。
但是，生物传感器技术尚处于发展初期，仍需进一步研究和完善。
综上所述，食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究具有深远意义。
食品中胆固醇含量的分析与检测研究
食品中胆固醇含量的分析与检测研究胆固醇，是一种人体内重要的脂类物质，对维持正常的机体生理功能具有重要作用。
然而，摄入过多的胆固醇会导致血液中胆固醇浓度升高，进而引发心血管疾病等健康问题。
因此，对食品中胆固醇含量的分析与检测研究显得尤为重要。
胆固醇主要存在于动物性食品中，如肉类、蛋类、奶制品等。
在过去，人们对食品中胆固醇含量的分析主要依靠化学检测方法。
通常采用酶法测定，通过酶反应将胆固醇转化为一种可测定的物质，并通过颜色的变化来分析胆固醇的含量。
这种方法具有简单、经济的特点，适用于一般食品的检测。
然而，这种方法存在各种局限性，如不能进行定量测定、操作繁琐等。
随着科学技术的发展，分析与检测领域的研究也得到了飞速进展。
近年来，人们开始运用更先进的仪器设备进行胆固醇含量的分析与检测。
其中，气相色谱仪（GC）和高效液相色谱仪（HPLC）被广泛应用于食品质量检测领域。
这些仪器设备通过分离、定量目标物质，使得检测结果更加准确、可靠且具有定量性。
相较于传统的化学检测方法，气相色谱仪和高效液相色谱仪的使用具有以下优势。
首先，这两种仪器可以对多个样品进行同时检测，大大提高了工作效率。
其次，这些仪器不但可以准确地检测胆固醇含量，还可以定量分析其他有害物质的存在。
最后，这些仪器通过对样品的化学成分进行分析，可以更加全面地了解食品的质量和安全程度。
除了仪器设备的改进，近年来还涌现出一种新的胆固醇分析技术——基于光学检测的方法。
这种方法利用光学技术的特性，通过电子显微镜、纳米探测器等设备对样品进行检测。
通过检测微观颗粒的物理性质或者化学反应，可以确定胆固醇的存在和含量。
这种方法具有高效准确、非侵入性等优势，可以应用于各种样品的检测中。
食品中胆固醇含量的分析与检测研究不仅限于以上方法，还包括其他技术的研究与应用。
例如，核磁共振技术、质谱分析等。
这些方法的出现丰富了胆固醇分析领域的研究手段，为食品安全提供了更多保障。
然而，胆固醇含量分析与检测研究仍然面临一些挑战和未解决的问题。
食品中胆固醇含量检测技术的研究与应用
食品中胆固醇含量检测技术的研究与应用近年来，随着人们生活水平的提高和饮食结构的变化，高胆固醇饮食成为一种普遍现象。
胆固醇是人体内一种重要的脂类物质，对于人体的正常生理功能有一定的必要性，但过量的胆固醇摄入会给健康带来危害。
因此，准确检测食品中胆固醇含量的技术研究与应用显得尤为重要。
一、胆固醇的作用及危害胆固醇是人体内合成的一种重要物质，它参与细胞膜的形成，是合成多种激素和维生素的前体，同时也作为胆汁中的重要组分，帮助我们消化脂肪。
然而，长期以来高胆固醇饮食的风气在一些地区广泛存在，导致了胆固醇过量摄入的问题。
过量的胆固醇摄入会导致血液中的胆固醇水平升高，形成胆固醇斑块堆积在动脉血管壁上，容易引发血管堵塞导致心脑血管疾病的发生。
因此，对于食品中胆固醇含量进行准确检测，有助于人们科学选择食材，合理搭配膳食，从而降低心脑血管疾病的风险。
二、胆固醇检测技术的研究与发展为了检测食品中的胆固醇含量，科学家们通过不断研究和探索，开发出了多种检测技术。
传统的胆固醇检测方法主要依靠色谱法和质谱法，这些方法需要先从食品中提取胆固醇，再通过仪器进行分析，但操作比较繁琐，且耗时较长。
近年来，随着生物技术和纳米技术的发展，新型的胆固醇检测技术如单分子分析法、表面等离子共振技术、纳米光谱检测技术等也逐渐应用于食品中胆固醇含量的测定中。
这些新技术的出现，极大地提高了检测的准确性和灵敏度，同时也简化了实验操作，缩短了检测时间。
三、胆固醇检测技术的应用前景食品中胆固醇含量的准确检测技术不仅对我们个人健康有着重要意义，对于食品行业的监督管理也具有重要作用。
在个人层面上，我们可以通过了解食品中胆固醇的含量，选择低胆固醇食材，调整饮食结构，保证身体的健康。
同时，有了相关检测技术，我们还能科学合理地配伍食材，制定科学的饮食计划，以减低心脑血管疾病的风险。
在食品行业层面上，相关检测技术可以帮助监管部门更好地掌握食品安全情况，确保食品质量符合标准要求。
胆固醇测定实验讲义
实验12 直接皂化-比色法测定鸡蛋中胆固醇含量一、原理当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行皂化和提取，用磷硫铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm•处测定。
二、实验仪器及试材1.仪器：分光光度计、水浴锅2.试剂：本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。
试剂纯度均为分析纯。
（1）石油醚（沸点30-60℃）、无水乙醇、冰乙酸。
（2）50%氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（3）25%氯化钠溶液：称取25g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（4）10% 三氯化铁溶液：将10g FeCl3·6 H2O溶于磷酸中，定容至100 mL，储于棕色瓶中，冷藏保存。
（5）磷硫铁试剂：取10% 三氯化铁溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶内，加浓硫酸定容至刻度。
（6）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定容至100mL。
（7）胆固醇标准溶液：临用前将储液用冰乙酸稀释10倍。
三、实验方法与步骤1.样品胆固醇提取准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于25mL具塞比色管中，加入0.5mL50%氢氧化钾溶液和4.5mL无水乙醇，振荡混匀，在80℃恒温水浴中皂化20min。
皂化时每隔5min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出比色管，冷却。
加入10mL 石油醚，盖紧玻璃塞，振摇1min，静置分层。
取上层石油醚液1mL，置于25mL具塞比色管内，在65℃水浴中让石油醚自然挥发干，加入4mL冰乙酸，轻摇使胆固醇溶解，待测。
2.样品和标准胆固醇含量测定另取两支25mL具塞比色管，一支（空白管）加入4mL冰乙酸，一支（标准管）加入1mL胆固醇标准溶液（0.1mg/mL）和3mL冰乙酸。
包括样品管，各管分别加入2mL磷硫铁试剂，混匀，25℃放置20min后在560nm波长下比色。
食品科学与工程《食品生物化学》血清胆固醇的测定实验
实验四血清胆固醇的测定实验目的：掌握磷硫铁法测定血清胆固醇的原理、方法及意义。
实验原理：总胆固醇的测定有化学比色法(磷硫铁法和邻苯二甲醛法)和酶学方法(试剂盒)两类。
本实验采用磷硫铁法测定血清胆固醇含量。
用无水乙醇提取血清中的胆固醇，再与硫磷铁试剂作用，产生颜色反应，呈色度与胆固醇含量成正比，可用比色法测定血清中胆固醇含量。
血清经无水乙醇处理，蛋白质被沉淀，胆固醇及其酯溶解在无水乙醇。
在乙醇提取液中，加磷硫铁试剂，胆固醇及其酯与试剂形成比较稳定的紫红色化合物，此物质在560nm波长处有特征吸收峰，可用比色法作胆固醇的定量测定。
正常血清中胆固醇的含量有随年龄增大而增加的趋势，其平均正常值在110～220mg/100ml。
胆固醇含量在400mg/100ml内，与A（或OD）值呈良好线性关系。
试剂：（1）10％三氯化铁溶液：10gFeCl3.6H2O (A.R) 溶于磷酸(A.R)，定容至100ml。
储于棕色瓶，冷藏。
（2）磷硫铁试剂：取10％FeCl3溶液1.5ml于100ml棕色容量瓶内，加浓硫酸(A.R)至刻度。
（3）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml。
（4）胆固醇标准溶液：将储液用无水乙醇准确稀释10倍即得。
每毫升含0.08mg胆固醇。
（5）无水乙醇(A.R)、无水乙醇(A.R)。
操作（1）吸取血清0.1ml于干燥离心管，先加无水乙醇0.4ml，摇匀后再加无水乙醇2.0 ml，摇匀，10分钟后离心（3000rpm 离心5 min），上清液备用（分两次加入乙醇的目的是使作用完全）。
（2）取干燥试管3支，编号，分别加入无水乙醇1.0ml（空白管）、胆固醇标准溶液1.0ml（标准管）、上述乙醇提取液 1.0ml（样品管），各管皆加入磷硫铁试剂1.0ml，摇匀，10分钟后，分别转移至0.50 cm光径的比色杯内，用分光光度计560nm比色。
硫磷铁试剂须沿管壁缓缓加入，与乙醇液分成两层，立即迅速振摇20次，放置10分钟（冷却至室温）后，于560nm 进行比色，以空白管调零读取各管吸光度。
食品安全检测综合实验
实验一：食品中胆固醇的测定实验一：食品中胆固醇的测定一、实验目的1． 通过本实验的学习，使学生了解测定食品中胆固醇的意义。
通过本实验的学习，使学生了解测定食品中胆固醇的意义。
2． 通过本实验的学习，使学生掌握紫外－可见分光光度检测方法。
二、实验内容1． 样品制备。
样品制备。
2． 分光光度法检测。
三、实验要求采用集中授课形式组织教学。
采用集中授课形式组织教学。
四、实验准备 1． 样品制备及操作。
样品制备及操作。
2． 紫外－可见分光光度仪的使用方法。
紫外－可见分光光度仪的使用方法。
五、实验原理、方法和手段1． 实验原理实验原理当固醇类化合物与酸作用时，当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合发应，可脱水并发生聚合发应，可脱水并发生聚合发应，产生有颜色的物质。
产生有颜色的物质。
产生有颜色的物质。
据据此可先对食品样品进行提取和皂化，而后用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
胆固醇的含量。
2． 实验方法和手段实验方法和手段食品样品的制备，分光光度计的使用。
食品样品的制备，分光光度计的使用。
六、实验条件1． 主要仪器主要仪器 A ． 电子天平（1/10000）B ． 电热恒温水浴电热恒温水浴C ． 电动振荡器电动振荡器D ． 具塞比色管：10 mL 、25 mL E ． 吸量管：2.0 mL2． 试剂试剂A. 石油醚石油醚B. 无水乙醇无水乙醇C. 浓硫酸浓硫酸D. 冰乙酸：优级纯冰乙酸：优级纯E. 磷酸磷酸F . 胆固醇标准物质胆固醇标准物质G . 胆固醇标准液。
胆固醇标准储备液（1 mg/mL ）：准确称取胆固醇100 mg ，溶于冰乙酸中，并定容至100 100 mLmL 。
此溶液至少在2个月内保持稳定。
胆固醇标准使用液（100 m g/mL ）：吸取胆固醇标准储备液10 mL ，用冰乙酸定容至100 mL 。
此液用时临时配制。
液用时临时配制。
H. 铁矾显色剂。
铁矾储备液：溶解4.463 g 硫酸铁铵[FeNH 4(SO 4)2•H 2O]于100 mL 85％磷酸中，贮于干燥器内，此液在室温下稳定。
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MM_FS_CNG_0356食品 胆固醇 分光光度法
MM_FS_CNG_0356
食品中胆固醇的测定方法
1.适用范围
本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2.原理概要
当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
3.主要试剂和仪器
.主要试剂
石油醚；
无水乙醇；
浓硫酸；
冰乙酸：优级纯；
磷酸；
胆固醇标准物质；
胆固醇标准液；
胆固醇标准储备液（1mg ／mL ）：精确称取胆固醇100mg ，溶于冰乙酸中，并定容至100mL 。
此液至少在2个月内保持稳定；
胆固醇标准常备液（100μg ／mL ）：吸取胆固醇标准储备液10mL ，用冰乙酸定容至100mL 。
此液用时临时配制；
铁矾显色剂；
铁矾储备液：溶解硫酸铁铵[ FeNH 4（SO 4）2·H 2O]于100mL85％磷酸中，贮于
干燥器内，此液在室温中稳定；
铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL ，用浓硫酸定容至100mL 。
贮于干燥器内，以防吸水；
50％氢氧化钾溶液：称取50g 氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 5％氯化钠溶液：称取5g 氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 钢瓶氮气：纯度％。
.仪器
实验室常用设备；
721型分光光度计；
电热恒温水浴；
电动振荡器；
具玻塞试管：体积10mL 、25mL 。
4.过程简述
.胆固醇标准线
吸取胆固醇标准常备液、、、、分别置于10mL 试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL 。
沿管壁加入2mL 铁矾显色液，混匀，在15～90min 内，在560～575nm 波长下比色。
以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。
.样品测定
食品脂肪的提取与测定
根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。
并计算出每100g食品中的脂肪含量。
食品胆固醇的测定
将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500 μg），置于25mL试管内，准确记录其重量。
加入4mL无水乙醇， 50％氢氧化钾溶液，在65℃恒温水浴中皂化1h。
皂化时每隔20～30min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出试管，冷却。
加入3mL 5％氯化钠溶液，10mL石油醚，盖紧玻塞，在电动振荡器上振摇2min，静置分层（一般约需1h以上）。
取上层石油醚液2mL，置于10mL具玻塞试管内，在65℃水浴中用氮气吹干，加入4mL冰乙酸，2mL铁矾显色液，混匀，放置15min后在560～575nm波长下比色，测得吸光度，在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。
5.结果计算
X＝m×V×c
×
1
V
1
×m11000
式中：X——样品中胆固醇含量，mg／100g；
m——测得的吸光度值在胆固醇标准线上显示的胆固醇含量，μg；
V——石油醚总体积，mL；
V
1
——取出的石油醚体积，mL；
m
1
——称取食品油脂样品量，g；
c——食品样品油脂含量，g／100g；
1／1000——折算成每100g食品中胆固醇毫克数。
6.平均允许误差
同一实验室同时或连续两次测定结果之差不得超过平均值的10％。
7.标准曲线
胆固醇标准曲线
8.来源：
GB／T 15206—94。