02第二章 灭活疫苗
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其代谢产物，接种于动物、鸡胚、组织或
细胞培养物中生长繁殖后，经灭活处理使
其失去致病力，但仍保留免疫原性而制成
的生物制剂。
灭活疫苗
• 主要成分：由细菌体或病毒颗粒组成
• 疫苗中含有的菌体或病毒颗粒是“死”的，故又
称作死疫苗。
• 接种途径：通常是注射途径
– 进入人体后不能生长繁殖，故比较安全、稳定
– 需多次接种，才能产生比较牢固的免疫力。
• 夏秋季，经蚊子叮咬传播，是人畜共患的 中枢神经系统传染病。 • 1954年，灭活疫苗在日本问世（中山株/鼠 脑） • 1968年，中国从开始生产（ P3株/原代仓鼠 肾细胞） • 1988年，WHO颁布了生产规程。
（4）流感
• 由流感病毒引起的，具有高度传染性的急 性呼吸道传染病 • 流行病学特点:
– 突变不断积累，使抗原位点发生构型改变
– 导致人群特异性免疫失败
– 导致流感病毒流行
• 抗原变异
起因未明。
质变
– 指一种新HA和/或NA亚型在人群中突然出现，
流感病毒抗原
特点：
• 抗原的多变性 （1）人类对流感病毒 导致 普遍的易感性 （2）不易从以往获得 的抗体，得到有效的 保护
• 抗原的漂移
（2）霍乱灭活疫苗
霍乱弧菌引起的一种烈性传染病 • 1884年，Ferran研制出霍乱疫苗（注射）
– 保护期短，副反应大。
• 霍乱全菌体灭活疫苗(whole cell vaccine，
WCV) – 霍乱WCV-霍乱毒素B亚单位(B subunit of cholera toxin，
CTB)
– 对小鼠胃肠外免疫，能抵御霍乱毒素(cholera toxin，CT) 2. 25 - 3 LD50的攻击，免疫效果与 CVD103-HgR减毒活疫苗相同。
• 理想的疫苗：
– 含有多种有良好免疫原性和稳定性的抗原、生
产成本低廉、接种途径简单以及一次接种能产
生多种免疫和无毒副作用的疫苗。 • 1991年，儿童免疫计划 (Children‘s Vaccine Initiative， CVI） – 改进现有疫苗，并创制新的疫苗
– 联合免疫得到了进一步的推进。
• 与 常规注射器在皮下、皮内、肌内等免疫 途径进行了比较。
无针注射法的免疫应答效果
• 评估标准
– 血清抗体阳转率 – 抗体几何平均滴度值 – 注射部位的局部反应
• 结果
– 抗白喉和抗破伤风的阳转率偏低
– 其他的疫苗免疫效果均高于或与常规接种方法 一致 – 接种时的局部反应都很小，而且都是瞬时的。
一、灭活疫苗的设计要求
1. 制备过程
• 病原体的培养
• 灭活剂和灭活方法的使用
• 疫苗的后处理
（1）病原体的选择
• ①必需具有很强的免疫原性
• ②具有恒定的培养特性和生化特性，不易
变异
• ③易于在人工培养基上或特定的组织或细 胞中培养并可进行规模化生产
病原体的选择
• ④在培养过程中不产生或产生较小的毒性;
影响联合免疫效果的因素
• 多联疫苗
– 一个组分的添加剂不一定能保证另一组分的稳 定性
– 如：DTwcP/IPV联合疫苗中，用于DTwcP的防腐 剂硫柳汞可破坏IPV活性，故不能混装在一个瓶 中，需采用双室注射器。
• DTwcP：百白破疫苗 • IPV：脊髓灰质炎灭活疫苗
第二节 灭活疫苗制备的技术要求
联合疫苗的分类
• 多联疫苗
– 预防不同病原体引起的传染病 – 百白破联合疫苗——预防百日咳、白喉和破伤 风三种不同的传染病
• 多价疫苗
– 仅预防一种病原体不同血清型引起的传染病 – 肺炎多糖疫苗——由代表23种不同血清型的细 菌多糖组成，但只能预防肺炎球菌的感染。
影响联合免疫效果的因素
• 联合疫苗中各组分间的化学和物理作用可
• 存在多种亚型
因此，虽然1937年就用鸡胚培养流 感病毒获得成功，但至今尚无十分 满意的制品。
流感病毒疫苗
• 长春生物制品研究所
– 新型精制三价流行性感冒灭活疫苗
• 临床免疫效果评价（2000年）
临床反应
血清抗体阳转率 免疫力持续时间 疫苗稳定性
轻微（0.98%）
99%-100% 1年以上
好
总反应率：与国外同类疫苗无明显差 别，具有良好的安全性。
• 具有较强的免疫原性
传统灭活疫苗的缺点
• 制备灭活疫苗需要大量抗原
• 难以培养或尚不能培养的病原体（乙型、丙型和
戊型肝炎病毒及麻风杆菌等）
– 难以制备或无法以制备
• 危险性大的病原体（艾滋病病毒） 基因工程手段 • 存在较大风险 ---新型疫苗
第一节 灭活疫苗概述及现况
一、 灭活疫苗概述
• 灭活疫苗：用免疫原性强的病原微生物或
– 突然暴发，迅速蔓延 – 影响面大，发病率高 – 伴有一定的死亡率。
（4）流感
流感病毒的毒粒表面的抗原变异问题
• 血凝素(hemagglutinin， HA)
• 神经氨酸酶(neuramindase， N A)
抗原性的变异形式
-------甲型流感病毒
• 抗原漂移
量变
– 亚型内HA和/或NA不断发生点突变
2. 细菌性灭活疫苗
（1）脊髓灰质炎灭活疫苗
(inactivated poliomyelitis vaccine， IPV)
• 研究始于1909年，但进展缓慢。 • 1952年，Salk用猴肾上皮细胞培养了三个血 清型的病毒 • 1953年，制备出IPV(又称Salk疫苗)
– 免疫人体，获得较高效价的血清中和抗体 – 中和进入血液中的脊髓灰质炎病毒，从而防止 麻痹症的出现。
近年的研究方向:
（1）针对其不足部分，进行不断改进和完善；
（2）探索新的研制途径。
二、灭活疫苗的研究现状
具体来说：
（1）增强其诱导的免疫反应、改进疫苗免疫
效果、延长持续时间；
（2）选择新的灭活剂，并探索现有灭活剂对 病原体的作用原理，不断研制新疫苗。
二、灭活疫苗的研究现状
1. 病毒性灭活疫苗
– 脊髓灰质炎灭活疫苗 – 甲型肝炎 – 流行性乙型脑炎 – 流感
– 中国军事医学科学院（1997年） – 2000年取得国家一类新药证书 – 免疫保护时间：3年。
• 独到之处：
– 生产B亚单位抗原的工程菌是大肠杆菌，较国 外用霍乱减毒株工艺操作安全、方便;
– 疫苗剂型是胶囊，较国外的水剂便于服用且价 格低廉。
（3）百日咳灭活疫苗
• 儿童常见的呼吸道传染病，传染性强，临 床上主要引起痉孪性阵咳。 • 1932年，Kendrick用羊血包姜培养基，经硫 柳汞灭活制备疫苗成功； • 1981年，纯化百日咳杆菌抗原组成的无细 胞百日咳疫苗（日本）
• 有的灭活疫苗副作用大，甚至引起严重后 遗症或造成死亡，可接受性极差。
（1）伤寒杆菌灭活疫苗
伤寒杆菌----引起伤寒发病的主要病原 • 1886年，英国的Wright、德国的Pfeiffer和 Kolle分别制备出全菌体灭活疫苗 • 丙酮灭活疫苗：
– 保护率较高，但副反应也高，难以推广。
• Vi荚膜多糖疫苗：
2 . 细菌性灭活疫苗
细菌本身结构组成复杂 基础研究的滞后
• 致病机理、免疫机理研究长期无突破性进展
• 因此难以进行疫苗研制，使有些疾病长期得 不到有效控制。
2. 细菌性灭活疫苗
存在问题：
• 有些病原体属于人畜共患，解决起来较为 困难; • 消化道传染病:
– 疫苗诱生的局部免疫力较弱，免疫力持续时间 较短，使用效果往往不好，易于重复感染;
• 病毒的体外培养 1979年，Provost和 Hilleman – 原代恒河猴肝细胞 – 传代恒河猴胚肾细胞株(FRhK6)
• HAV灭活疫苗
– Havrix（美国SmithKline公司） – Vaqta （美国Merck公司） – AVAXIM（法国巴斯德血清和疫苗研究所）
（3）流行性乙型脑炎
影响疫苗的免疫应答。
• 如佐剂、缓冲剂、贮存剂和赋形剂等通常
需要重新配伍。
影响联合免疫效果的因素
• 多价疫苗
– 问题较易解决，因疫苗中含有相同的成分，其 中一个组分的稳定配方通常适用于其他组分， 但也需要对每一个组分做专门的测试以保证成 品的理化配伍性和稳定性。 – 活病毒间可相互干扰，如一个病毒可因激活免 疫应而产生干扰素从而抑制另一个病毒。
直接注射到皮下。
3. 无 针 （ 喷 射 ） 注 射 器
无针注射法的免疫应答效果
• 法国和南非（共1500多人）
– 流感灭活疫苗(Vaxigrip) – Vi多糖伤寒疫苗(TyphimVi) – 破伤风类毒素(Tetavax) – 百白破全细胞疫苗(DTCoq) – 甲肝灭活疫苗(Avaxim)
– 优点：青少年和成人较易接受，并有可能实施 加强免疫。
（3）百日咳灭活疫苗
• 2001年3月，日本一个科研小组使用茶叶中 的儿茶素制造无毒百日咳疫苗获得成功， 免疫功能更强，副作用更小。
• 福尔马林灭活的疫苗：
– 常常引起炎症等病症
• 儿茶素灭活的疫苗：
– 不会产生这些副作用
灭活疫苗的研究现状
灭活疫苗
• 细菌性灭活疫苗
– 1886年，加热方法灭活猪霍乱菌 – 1896年，制备全霍乱弧菌灭活免疫原 – 1935年，福尔马林乙型脑炎鼠脑疫苗 – 1937年，用鸡胚生产流脑灭活疫苗
• 病毒性灭活疫苗
– 1949年，发明人体胚胎组织体外培养方法，使 病原体的体外培养成为可能
二、灭活疫苗的研究现状
– 安全，但保护率又较低。
（1）伤寒杆菌灭活疫苗
新型伤寒疫苗 • Ty21a活疫苗
– 口服活疫苗，保护率达96%，目前已在全世界 使用;
• Vi荚膜多糖疫苗
– 将伤寒杆菌培养后，对其Vi荚膜多糖抗原进行 提纯精制的一种组分疫苗
– 制备工艺简单，安全性好，已在全球推广使用 ，目前我国多家生物制品单位均能生产。
• 1955年开始在美国、加拿大和欧洲国家逐 渐推广使用，取得了良好的保护效果。
（1）脊髓灰质炎灭活疫苗的制备
病毒
猴肾细胞、人二倍体细胞 或Vero细胞
病毒悬液
灭活
37°C， pH7.0， 福尔马林（1 : 4 000） 12--15天
脊髓灰质炎灭活疫苗 皮下注射 三次接种
（2）甲型肝炎
• 甲型肝炎病毒(hepatitis A virus， HA V)引起 的急性传染病，主要通过粪-口途径传播。
• ⑤制备类毒素的菌种：在培养过程中能产
生大量的典型毒素;
• ⑥要针对不同的病原血清型选择符合当地 流行的菌、毒株，以保证所制造的疫苗具 有良好的免疫效果
灭活方法的选择
• 灭活方法的选择关系到疫苗质量的好坏
– 灭活剂（关键） – 灭活条件 – 灭活时间
来自百度文库
• 既要考虑其对疫苗抗原性的破坏作用，同 时又要避免其对毒素的脱毒后又发生毒性 逆转现象。
1. 病毒性灭活疫苗
– 脊髓灰质炎灭活疫苗 – 甲型肝炎 – 流行性乙型脑炎 – 流感
2.细菌性灭活疫苗
– 伤寒杆菌 – 霍乱 – 百日咳
3 . 无针注射免疫法
3. 无针（喷射）注射器
• 起源：美军细菌战的发明
• 在疫苗接种的应用：
– 1954年，白喉和破伤风类毒素疫苗的大规模接
种
• 原理：通过细小、有高压的疫苗液体流，
（2）霍乱灭活疫苗
• 口服B亚单位-全菌体(B subunit-whole cell，
BS-WC)霍乱疫苗（1980’s，瑞典）
– 疫苗的保护期：3年
– 头半年保护率是85%， 3年后是51%。
（2）霍乱灭活疫苗
• 重组霍乱毒素B亚单位-全菌体疫苗(recombinant B subunit-whole cell， rBS- WC),又称冻干口服霍乱疫苗
第二章 灭活疫苗
疫 苗
• 活疫苗-------减毒活疫苗
– 减毒不够：
• 在使用时有致病的可能性
– 过分减毒：
• 造成免疫原性不足或丧失，失去活疫苗的效力
• 灭活疫苗
传统的灭活疫苗
• 将病原体(病毒、细菌及其他微生物)经培养
增殖、灭活、纯化处理
– 使其完全丧失感染性
• 具有较好的安全性
– 保留了病原体的几乎全部组分
3.无针（喷射）注射器
优点：
• 使用便捷，每次接种只需更换疫苗管；
• 无需人员的专业培训；
• 更好地激发机体产生良好的免疫应答
– 与常规肌内注射相比，注射部位浅，但所造成的
创面更大，而且疫苗被输送到表皮深层，在这个
部位有更多的免疫细胞(如巨噬细胞、树突状细胞
等)，抗原能够更好地和这些细胞结合
三、联合免疫研究现状
细菌性灭活疫苗和类毒素的制备工艺
福尔马林对外毒素脱毒的影响因素
• 研究证明:
– 很低浓度的福尔马林即能使外毒素完全脱毒并
能保持其良好的免疫原性，表明福尔马林是一
个较为理想的脱毒剂。
• 福尔马林的脱毒作用较为复杂，在使用时
要特别注意影响福尔马林脱毒的四个因素
细胞培养物中生长繁殖后，经灭活处理使
其失去致病力，但仍保留免疫原性而制成
的生物制剂。
灭活疫苗
• 主要成分：由细菌体或病毒颗粒组成
• 疫苗中含有的菌体或病毒颗粒是“死”的，故又
称作死疫苗。
• 接种途径：通常是注射途径
– 进入人体后不能生长繁殖，故比较安全、稳定
– 需多次接种，才能产生比较牢固的免疫力。
• 夏秋季，经蚊子叮咬传播，是人畜共患的 中枢神经系统传染病。 • 1954年，灭活疫苗在日本问世（中山株/鼠 脑） • 1968年，中国从开始生产（ P3株/原代仓鼠 肾细胞） • 1988年，WHO颁布了生产规程。
（4）流感
• 由流感病毒引起的，具有高度传染性的急 性呼吸道传染病 • 流行病学特点:
– 突变不断积累，使抗原位点发生构型改变
– 导致人群特异性免疫失败
– 导致流感病毒流行
• 抗原变异
起因未明。
质变
– 指一种新HA和/或NA亚型在人群中突然出现，
流感病毒抗原
特点：
• 抗原的多变性 （1）人类对流感病毒 导致 普遍的易感性 （2）不易从以往获得 的抗体，得到有效的 保护
• 抗原的漂移
（2）霍乱灭活疫苗
霍乱弧菌引起的一种烈性传染病 • 1884年，Ferran研制出霍乱疫苗（注射）
– 保护期短，副反应大。
• 霍乱全菌体灭活疫苗(whole cell vaccine，
WCV) – 霍乱WCV-霍乱毒素B亚单位(B subunit of cholera toxin，
CTB)
– 对小鼠胃肠外免疫，能抵御霍乱毒素(cholera toxin，CT) 2. 25 - 3 LD50的攻击，免疫效果与 CVD103-HgR减毒活疫苗相同。
• 理想的疫苗：
– 含有多种有良好免疫原性和稳定性的抗原、生
产成本低廉、接种途径简单以及一次接种能产
生多种免疫和无毒副作用的疫苗。 • 1991年，儿童免疫计划 (Children‘s Vaccine Initiative， CVI） – 改进现有疫苗，并创制新的疫苗
– 联合免疫得到了进一步的推进。
• 与 常规注射器在皮下、皮内、肌内等免疫 途径进行了比较。
无针注射法的免疫应答效果
• 评估标准
– 血清抗体阳转率 – 抗体几何平均滴度值 – 注射部位的局部反应
• 结果
– 抗白喉和抗破伤风的阳转率偏低
– 其他的疫苗免疫效果均高于或与常规接种方法 一致 – 接种时的局部反应都很小，而且都是瞬时的。
一、灭活疫苗的设计要求
1. 制备过程
• 病原体的培养
• 灭活剂和灭活方法的使用
• 疫苗的后处理
（1）病原体的选择
• ①必需具有很强的免疫原性
• ②具有恒定的培养特性和生化特性，不易
变异
• ③易于在人工培养基上或特定的组织或细 胞中培养并可进行规模化生产
病原体的选择
• ④在培养过程中不产生或产生较小的毒性;
影响联合免疫效果的因素
• 多联疫苗
– 一个组分的添加剂不一定能保证另一组分的稳 定性
– 如：DTwcP/IPV联合疫苗中，用于DTwcP的防腐 剂硫柳汞可破坏IPV活性，故不能混装在一个瓶 中，需采用双室注射器。
• DTwcP：百白破疫苗 • IPV：脊髓灰质炎灭活疫苗
第二节 灭活疫苗制备的技术要求
联合疫苗的分类
• 多联疫苗
– 预防不同病原体引起的传染病 – 百白破联合疫苗——预防百日咳、白喉和破伤 风三种不同的传染病
• 多价疫苗
– 仅预防一种病原体不同血清型引起的传染病 – 肺炎多糖疫苗——由代表23种不同血清型的细 菌多糖组成，但只能预防肺炎球菌的感染。
影响联合免疫效果的因素
• 联合疫苗中各组分间的化学和物理作用可
• 存在多种亚型
因此，虽然1937年就用鸡胚培养流 感病毒获得成功，但至今尚无十分 满意的制品。
流感病毒疫苗
• 长春生物制品研究所
– 新型精制三价流行性感冒灭活疫苗
• 临床免疫效果评价（2000年）
临床反应
血清抗体阳转率 免疫力持续时间 疫苗稳定性
轻微（0.98%）
99%-100% 1年以上
好
总反应率：与国外同类疫苗无明显差 别，具有良好的安全性。
• 具有较强的免疫原性
传统灭活疫苗的缺点
• 制备灭活疫苗需要大量抗原
• 难以培养或尚不能培养的病原体（乙型、丙型和
戊型肝炎病毒及麻风杆菌等）
– 难以制备或无法以制备
• 危险性大的病原体（艾滋病病毒） 基因工程手段 • 存在较大风险 ---新型疫苗
第一节 灭活疫苗概述及现况
一、 灭活疫苗概述
• 灭活疫苗：用免疫原性强的病原微生物或
– 突然暴发，迅速蔓延 – 影响面大，发病率高 – 伴有一定的死亡率。
（4）流感
流感病毒的毒粒表面的抗原变异问题
• 血凝素(hemagglutinin， HA)
• 神经氨酸酶(neuramindase， N A)
抗原性的变异形式
-------甲型流感病毒
• 抗原漂移
量变
– 亚型内HA和/或NA不断发生点突变
2. 细菌性灭活疫苗
（1）脊髓灰质炎灭活疫苗
(inactivated poliomyelitis vaccine， IPV)
• 研究始于1909年，但进展缓慢。 • 1952年，Salk用猴肾上皮细胞培养了三个血 清型的病毒 • 1953年，制备出IPV(又称Salk疫苗)
– 免疫人体，获得较高效价的血清中和抗体 – 中和进入血液中的脊髓灰质炎病毒，从而防止 麻痹症的出现。
近年的研究方向:
（1）针对其不足部分，进行不断改进和完善；
（2）探索新的研制途径。
二、灭活疫苗的研究现状
具体来说：
（1）增强其诱导的免疫反应、改进疫苗免疫
效果、延长持续时间；
（2）选择新的灭活剂，并探索现有灭活剂对 病原体的作用原理，不断研制新疫苗。
二、灭活疫苗的研究现状
1. 病毒性灭活疫苗
– 脊髓灰质炎灭活疫苗 – 甲型肝炎 – 流行性乙型脑炎 – 流感
– 中国军事医学科学院（1997年） – 2000年取得国家一类新药证书 – 免疫保护时间：3年。
• 独到之处：
– 生产B亚单位抗原的工程菌是大肠杆菌，较国 外用霍乱减毒株工艺操作安全、方便;
– 疫苗剂型是胶囊，较国外的水剂便于服用且价 格低廉。
（3）百日咳灭活疫苗
• 儿童常见的呼吸道传染病，传染性强，临 床上主要引起痉孪性阵咳。 • 1932年，Kendrick用羊血包姜培养基，经硫 柳汞灭活制备疫苗成功； • 1981年，纯化百日咳杆菌抗原组成的无细 胞百日咳疫苗（日本）
• 有的灭活疫苗副作用大，甚至引起严重后 遗症或造成死亡，可接受性极差。
（1）伤寒杆菌灭活疫苗
伤寒杆菌----引起伤寒发病的主要病原 • 1886年，英国的Wright、德国的Pfeiffer和 Kolle分别制备出全菌体灭活疫苗 • 丙酮灭活疫苗：
– 保护率较高，但副反应也高，难以推广。
• Vi荚膜多糖疫苗：
2 . 细菌性灭活疫苗
细菌本身结构组成复杂 基础研究的滞后
• 致病机理、免疫机理研究长期无突破性进展
• 因此难以进行疫苗研制，使有些疾病长期得 不到有效控制。
2. 细菌性灭活疫苗
存在问题：
• 有些病原体属于人畜共患，解决起来较为 困难; • 消化道传染病:
– 疫苗诱生的局部免疫力较弱，免疫力持续时间 较短，使用效果往往不好，易于重复感染;
• 病毒的体外培养 1979年，Provost和 Hilleman – 原代恒河猴肝细胞 – 传代恒河猴胚肾细胞株(FRhK6)
• HAV灭活疫苗
– Havrix（美国SmithKline公司） – Vaqta （美国Merck公司） – AVAXIM（法国巴斯德血清和疫苗研究所）
（3）流行性乙型脑炎
影响疫苗的免疫应答。
• 如佐剂、缓冲剂、贮存剂和赋形剂等通常
需要重新配伍。
影响联合免疫效果的因素
• 多价疫苗
– 问题较易解决，因疫苗中含有相同的成分，其 中一个组分的稳定配方通常适用于其他组分， 但也需要对每一个组分做专门的测试以保证成 品的理化配伍性和稳定性。 – 活病毒间可相互干扰，如一个病毒可因激活免 疫应而产生干扰素从而抑制另一个病毒。
直接注射到皮下。
3. 无 针 （ 喷 射 ） 注 射 器
无针注射法的免疫应答效果
• 法国和南非（共1500多人）
– 流感灭活疫苗(Vaxigrip) – Vi多糖伤寒疫苗(TyphimVi) – 破伤风类毒素(Tetavax) – 百白破全细胞疫苗(DTCoq) – 甲肝灭活疫苗(Avaxim)
– 优点：青少年和成人较易接受，并有可能实施 加强免疫。
（3）百日咳灭活疫苗
• 2001年3月，日本一个科研小组使用茶叶中 的儿茶素制造无毒百日咳疫苗获得成功， 免疫功能更强，副作用更小。
• 福尔马林灭活的疫苗：
– 常常引起炎症等病症
• 儿茶素灭活的疫苗：
– 不会产生这些副作用
灭活疫苗的研究现状
灭活疫苗
• 细菌性灭活疫苗
– 1886年，加热方法灭活猪霍乱菌 – 1896年，制备全霍乱弧菌灭活免疫原 – 1935年，福尔马林乙型脑炎鼠脑疫苗 – 1937年，用鸡胚生产流脑灭活疫苗
• 病毒性灭活疫苗
– 1949年，发明人体胚胎组织体外培养方法，使 病原体的体外培养成为可能
二、灭活疫苗的研究现状
– 安全，但保护率又较低。
（1）伤寒杆菌灭活疫苗
新型伤寒疫苗 • Ty21a活疫苗
– 口服活疫苗，保护率达96%，目前已在全世界 使用;
• Vi荚膜多糖疫苗
– 将伤寒杆菌培养后，对其Vi荚膜多糖抗原进行 提纯精制的一种组分疫苗
– 制备工艺简单，安全性好，已在全球推广使用 ，目前我国多家生物制品单位均能生产。
• 1955年开始在美国、加拿大和欧洲国家逐 渐推广使用，取得了良好的保护效果。
（1）脊髓灰质炎灭活疫苗的制备
病毒
猴肾细胞、人二倍体细胞 或Vero细胞
病毒悬液
灭活
37°C， pH7.0， 福尔马林（1 : 4 000） 12--15天
脊髓灰质炎灭活疫苗 皮下注射 三次接种
（2）甲型肝炎
• 甲型肝炎病毒(hepatitis A virus， HA V)引起 的急性传染病，主要通过粪-口途径传播。
• ⑤制备类毒素的菌种：在培养过程中能产
生大量的典型毒素;
• ⑥要针对不同的病原血清型选择符合当地 流行的菌、毒株，以保证所制造的疫苗具 有良好的免疫效果
灭活方法的选择
• 灭活方法的选择关系到疫苗质量的好坏
– 灭活剂（关键） – 灭活条件 – 灭活时间
来自百度文库
• 既要考虑其对疫苗抗原性的破坏作用，同 时又要避免其对毒素的脱毒后又发生毒性 逆转现象。
1. 病毒性灭活疫苗
– 脊髓灰质炎灭活疫苗 – 甲型肝炎 – 流行性乙型脑炎 – 流感
2.细菌性灭活疫苗
– 伤寒杆菌 – 霍乱 – 百日咳
3 . 无针注射免疫法
3. 无针（喷射）注射器
• 起源：美军细菌战的发明
• 在疫苗接种的应用：
– 1954年，白喉和破伤风类毒素疫苗的大规模接
种
• 原理：通过细小、有高压的疫苗液体流，
（2）霍乱灭活疫苗
• 口服B亚单位-全菌体(B subunit-whole cell，
BS-WC)霍乱疫苗（1980’s，瑞典）
– 疫苗的保护期：3年
– 头半年保护率是85%， 3年后是51%。
（2）霍乱灭活疫苗
• 重组霍乱毒素B亚单位-全菌体疫苗(recombinant B subunit-whole cell， rBS- WC),又称冻干口服霍乱疫苗
第二章 灭活疫苗
疫 苗
• 活疫苗-------减毒活疫苗
– 减毒不够：
• 在使用时有致病的可能性
– 过分减毒：
• 造成免疫原性不足或丧失，失去活疫苗的效力
• 灭活疫苗
传统的灭活疫苗
• 将病原体(病毒、细菌及其他微生物)经培养
增殖、灭活、纯化处理
– 使其完全丧失感染性
• 具有较好的安全性
– 保留了病原体的几乎全部组分
3.无针（喷射）注射器
优点：
• 使用便捷，每次接种只需更换疫苗管；
• 无需人员的专业培训；
• 更好地激发机体产生良好的免疫应答
– 与常规肌内注射相比，注射部位浅，但所造成的
创面更大，而且疫苗被输送到表皮深层，在这个
部位有更多的免疫细胞(如巨噬细胞、树突状细胞
等)，抗原能够更好地和这些细胞结合
三、联合免疫研究现状
细菌性灭活疫苗和类毒素的制备工艺
福尔马林对外毒素脱毒的影响因素
• 研究证明:
– 很低浓度的福尔马林即能使外毒素完全脱毒并
能保持其良好的免疫原性，表明福尔马林是一
个较为理想的脱毒剂。
• 福尔马林的脱毒作用较为复杂，在使用时
要特别注意影响福尔马林脱毒的四个因素