临床生物化学检验重点(DOC)

第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱

教学目标与要求

掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；高尿酸血症和痛风的发生机制；血清总蛋白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。

熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；原发性和继发性氨基酸代谢紊乱的概念；含硫氨基酸检测的临床意义。

了解：苯丙酮酸尿症、酪氨酸血症、嘌呤核苷酸代谢紊乱。

第一节血浆蛋白质及其代谢紊乱

蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45％，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前已有所了解的血浆蛋白质约有500种。

血浆蛋白的IEF/SDS-PAGE电泳图谱

取一滴血浆在电泳板的左下角点样。

先在水平方向进行等电聚焦电泳（IEF），接着在垂直方向进行SDS-PAGE。

一、血浆蛋白质的种类

盐析法:将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。

通过醋酸纤维膜电泳或琼脂糖凝胶电泳将血浆蛋白质分成清蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白等五个主要区带。

二、血清蛋白质电泳组分的临床分析

（一）血清蛋白电泳的正常图谱血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带。

血清蛋白电泳的正常组分

各条区带中多个蛋白质组分可有重叠、覆盖；两区带之间也有少量蛋白质；某些蛋白质组份染色很浅。

用醋酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值：

清蛋白（Alb）：57％～68％、35～52 g/L

α1球蛋白： 1.0％～5.7％、 1.0～4.0 g/L

α2球蛋白： 4.9％～11.2％、4.0～8.0 g/L

β球蛋白：7％～13％、 5.0～10.0 g/L

r 球蛋白：9.8％～18.2％、6.0～13.0g/L 。

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖(agarose)：从琼脂(agar)中去掉杂质和能沉淀脂蛋白的琼脂果胶(agaropectin)后所得，是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质。

评价：电渗作用小，对蛋白质的吸附极微，分辩率和重现性均较好，电泳图谱清晰。

常用的浓度：0.5～1.0%。

商品化的琼脂糖凝胶板透明度好，散热均匀而且快，电泳重现性好，适当的条件可以保存半年。加之结合半干胶技术，电泳时可以不需要缓冲液，是目前自动化电泳系统最佳的介质。（二）血清蛋白电泳的异常图谱

血清蛋白电泳异常图谱分型

血清蛋白电泳典型异常图谱

浆细胞病与M蛋白

1.血清蛋白电泳异常图谱分型

2.血清蛋白电泳典型异常图谱

3.浆细胞病与M蛋白

4.正常血清蛋白电泳上显示的宽γ区带主要成分:免疫球蛋白。

5.发生浆细胞病（plasma cell dyscrasia）时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克隆免疫

球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白，在蛋白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区带较多出现在γ或β区，偶见于α区。

三、血浆蛋白质及其异常分析

（一）前清蛋白（prealbumin，PA）

理化性质：

分子量5.4万，由肝细胞合成，其半衰期很

短，仅约12小时。

生理功能：

作为组织修补的材料和一种运载蛋白。

结合T4与T3，而对T3亲和力更大；PA与

视黄醇结合蛋白形成复合物，具有运载维

生素A的作用。

前清蛋白的临床评价

①作为营养不良的指标，其评价标准是：PA 200mg/L～400mg/L为正常，100mg/L～150mg

／L轻度缺乏，50mg/L～100mg／L中度缺乏，＜50mg／L严重缺乏。

②②作为肝功能不全的指标，在反映肝功能的损害与恢复方面的敏感性优于清蛋白。

③③在急性炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，血清PA均迅速下降，

PA是负性急性时相反应蛋白。

（二）清蛋白（albumin，Alb）

585个氨基酸残基组成

分子量66.2kD

含17个二硫键，是唯一不含糖的血浆蛋白质?！

肝实质细胞合成

半寿期19d！

血浆中含量最多的蛋白质

清蛋白的功能

（1）血浆中主要的载体蛋白：许多水溶性差的物质与清蛋白的结合而被运输，包括胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子（如Cu2+、Ni2+、Ca2+）、药物（如阿司匹林、青霉素等）。

（2）维持血浆胶体渗透压：血浆清蛋白丢失或浓度过低时，可引起水肿、腹水等症状。

（3）具有缓冲酸碱的能力

（4）重要的营养蛋白：清蛋白可以在不同组织中被细胞内吞而摄取，其氨基酸用于组织修补。因疾病等食物摄入不足或手术后病人常给予静脉清蛋白注射液。

血浆Alb作为营养指标的评价标准

＞35g/L 正常

28g/L～34g/L 轻度缺乏

21g/L～27g/L 中度缺乏

＜21g/L 严重缺乏

清蛋白的临床评价

低清蛋白血症：

Alb合成不足、

Alb的分布异常、

Alb过度丢失、

Alb分解代谢增加、

无清蛋白血症(analbuminaemia) 。

血浆Alb增高：少见

Alb的遗传性变异

由Alb含量估计其配体的存在形式和作用

（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1-AT或AAT）

394个氨基酸残基组成；分子量51kD；pI为4.8。

含糖10%～12%。

在醋纤膜电泳中位于α1区带。

主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也能合成。

α1-抗胰蛋白酶的生理功能

作为蛋白酶的抑制物，作用于胰蛋白酶、糜蛋白酶、尿激酶、肾素、胶原酶、弹性蛋白酶、纤溶酶和凝血酶等，占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右。

AA T抑制作用具明显的pH依赖性，最大活力处于中性或弱碱性，当pH≤4.5时活性基本丧失。

α1-抗胰蛋白酶临床意义：①AAT缺陷：ZZ型、SS型甚至MS表型常伴有早年（20～30岁）出现的肺气肿。ZZ表型可引起肝细胞损害。ZZ表型的新生儿中10％～20％在出生数周后易患肝炎，最后因活动性肝硬化致死。

低血浆AA T还可发现于胎儿呼吸窘迫综合征。

②急性时相反应时AA T增加。

（四）α1-酸性糖蛋白（α1- acid glycoprotein，AAG）

181个氨基酸残基组成

分子量约40kD ；pI为2.7～3.5

血浆中含糖量最高（达45%）、酸性最强的糖蛋白

典型的急性时相反应蛋白

主要在肝脏产生, 某些肿瘤组织也可产生

α1-酸性糖蛋白（AAG）的的生理功能

（1）AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，与免疫防御功能有关。

（2）AAG可以结合利多卡因和心得安，在急性心肌梗塞时AAG升高，而干扰药物剂量的有效浓度。

α1-酸性糖蛋白（AAG）的临床评价

①主要作为急性时相反应的指标——风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等一般增加3～4倍，3～5天时出现浓度高峰，AAG增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。

②糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引起AAG升高。

③在营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下，AAG 降低。

④雌激素使AAG降低。

（五）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）

一种急性时相蛋白和转运蛋白。

在电泳中位于α2区带。