植物染色体SSG分带方法与带型1)
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E- a i A. a. 17 h o sma el , - l d, e l 95 C rmoo G t : - ( r. 5 B ) 1 1-2 . 9 3
5 9 10
H zm , e a : 0 Jpn J G nt 5: 1 i e M. l 18. a. ee , 3 u t 9 . a . . 5 0
洗 3 次。 -4 7 2 C 溶液处理 . S X S 制 片 放 人 6- 0
衰 1 植物染色体 S G 分带法的处理条件 S
~ 一\
程序
材一 、 料 \ . 一
蚕
大
空 温度 室 室 室
气
干
燥 时间
Hale Waihona Puke Baidu
5 %Na O HC 3
2 s c X s
温布( ℃)
1- 2 7 2
2- 2 2 4
时间( 分)
B( H) 进行变性处理 , aO : 首先在蚕豆上 分带成
4 外醋酸 中, ”-6 ℃ 处理 1 -1 5 于 0 2 ,分钟 , 然
] 6 功, 并取名为 SG法(oi b oa- le 后按照姚珍[的方法,再放人 朽 务酷酸洋红中 S S u c b tS i- d m a n e an r 1-2 小时。这样既可使根尖进一步软化, 2 4 又 Ge s 。此后又应用本方法对大葱、 i a m) 韭葱进行 了分带试验, 效果也良好。现报告如下。 可使经染色后的染色体便于镜检。 4压片 . 将根尖转移到 4 外 醋酸中, 5 用 压片法压片,进行镜检。尔后用冰冻法分离载 片和盖片, 依次放人 9 关、 0 并酒精中进行脱 0 10 水各 1 分钟。 0
遗传 H RDT S ei ) () 7 18 EE IA ( in 7 ; B jg 2 -8 5 9
植物 色 SG 分带 法 带 ‘ 染 体 S 方 与 型,
张 长 顺
( 云南 大学生 物 系, 昆明)
植物染色体 Ge s C 带技术,目前广泛 i a m 一 2固定 . 根尖经预处理后, 9 务 酒精 在 5 31 固定液中固定 1-2 小时, 0 4 转 使用 BG法 (au h r i- le i s . +冰醋酸 (:) S Brm d xe an Ge a i y od Si- m ) 人 7%酒精中 0 贮存备用。 但是, 此法用 B ( H) aO ,进行变性处理, 容易发 3解离 . 经固定的根尖用水洗后,先在 生制片污染t 5 ] ,因此我们改用 N H 0 a C 3代替
8 7 80 8- 9 ,
张长顺:植物染色体 SG 分带方法与带型 S
图版 1
1 . 蚕豆染色体C 带,SG 法, 20; 2大葱染色体 C带, S 法, 28; 一 S X 00 . - SG X 40 3韭葱染色体 C 带, S 法, 90 . 一 SG X12; 4蚕豆间期核染色中 X16; . 心, 70
巧- 3 0 1- 1 3 5 1-2 0 0
温 度( ℃)
6- 6 0 6 6-6 0 6 6-6 0 6
时间( 分)
8 0
豆
葱
温 温 温
4 1夭 - 1 1- 1 2 6天 1- 1 0 3天
5 0 6 0
韭
葱
2.2 3 6
6℃ 的2 S 6 X C盐溶液中温浴 5-8 分钟。 S 0 0 蒸馏水连续洗2 次。 -3
材 料 和 方 法
( )材料 一
蚕豆 (ia L, Vif a 2一 c a ., b
1)大葱归l m us L, ~ 1) 韭 2、 l f lu .2 i i o m n 6、 u s t
葱 (. u L, =3) f p r .2 l o m n 2。以上三种材 r 料
均系昆明地区的栽培品种。
天。
5气千 .
在室温条件下空气千燥 4 6 -1
( 二)方法
操作程序如下:
1预处理 . 萌发的种子根长至 1 厘米左 右时,连种子一起移人一定浓度的秋水仙碱溶 液里:蚕豆用 0 外 的浓度处理 6小时, . 1 大葱、 韭葱用 0 5 . 多的浓度处理 2 0 -3小时。
6碳酸氢钠( . 分析纯或化学纯) 处理 将 气干的制片放人5 N H 0 溶液 (H -9 % a C 3 p8 ) 中, 7 6 于1-2℃处理 1-3 分钟。蒸馏水连续 0 0
或不显带( 图版I1。同张自立等[、Hz e 清洗方便, , ) t im i p u 不会发生药物污染,而用 B( H z aO ) 等【 3 , BG法所显示出的带纹基本一致。 采用 S 进行变性处理, 制片经处理后很难洗净, 容易产
2大葱具有 8 . 对染 色 体。有 1对 带 有随 体。除具随体的染色体外,在所有染色体的两 臂上均显示出 1条极明显的末端带,但带的大 小、 着色深浅略有差别。具随体的染色体, 在随 体臂上显示核仁溢痕带和随体带,在另一臂上 生钡膜污染,影 响分 带; N H O a C 3的碱性比 B( H) 弱, aO a 对染色体破坏较小, 变性处理的时 间、 温度变动范围较大, 容易掌握。 参 考
一 35 0,
在间期核中均显现出染色较 深 的 异 染 色 质颗 粒, 即染色中心, 其清晰程度与 BG法相同, S 尤 其是大葱、 蚕豆的染色中心特别明显( 图版 1 , , 4
8
V s, G : 6 H rd y 3() 33 9, oa C . 17. ei , 3: 一32 . 9 e t 6 8 T Xasy H. “ p 17. UO ou, 8: HOox, A p . 95 双 TAzs 1 ) . : t 7 (
L L. L r . L l. L
一.
4
』. J
1乡
, . J
了亡
~. . J
, 才
. J 』.
张自 立等:17。遗传学报, () 34 3, 98 54: -36 3 陈瑞扬等:17。植物, 2: 6 99 () 2-20 4 朱徽主编: 18,植物染色体及染色体技术, 92 科学出 版社, 5-16 14 5, 宋运淳等:18。植物学报, 51: 93 2() 4-朽。 0 李憋学等:18。遗传, () 3-30 91 32: - 1 3 姚珍:17。遗传学报, () 23 30 99 62: -24 3
8染色 . 经过以上程序的制片, 1 1 用 15
Z a g h n su : G a dn a 9 s t r h n C a gh n S B n ig S n I P tn t ae
i C o sme f ln s n hrmo o o Pa t
1 )本文承肖承宪教授审阅并提出 宝贵意见, 特此致谢。
5大葱间期核染色中心, 16 ; . X 0 7 6韭葱间期核染色中心, 160 . X 0 7
上情况同宋运淳等〔 Txxmq等[采用BG 4 iooi [ 1a , 1 o 3 S
法在其它材料上得到的结果相似。大染色中心
以上操作程序,因材料不同具体处理条件
略有差别, 如表 1 所示。
数少于末端带数, 据杨弘远等。 TxH m 1 m oq , o n
等C认为是某些由端粒形成的染色中心发生并 i a a
. 7
M 6 磷酸缓冲液配制的 1: Ges染液 p . H 8 01 ma i 染色1-1 分钟。蒸馏水洗净、 0 5 晾干。
9封片观察 . 用加拿大树胶封片后进行 带型分析, 并显微照相。
5 6.蚕豆间期核染色中心的乎均数同中期 ,)
染色体上明显的 C 带数接近; 一 大葱间期核大染 色中心数则常少于中期染色体的末端带数。以
』. L F
文 献
有1 条末端带 ( 图版12。同 E-ai等〔 ,) l d 7 G 1
V s9采用 BG 法显示出的带纹基本一致。 o1 a1 S 3韭葱具有 1 对染色体。其带 型 主 要是 . 6
. L r . L
}.
,
一
J
.
2
勺 . J
2
l
}
J
.
核仁溢痕带和随体带, 带纹较小( 图版 13。在 ,) 有的中期分裂相上, 少数染色体还显示末端带。 ( 二)间期核染色中心 三种材料的间期细胞经用 SG 法处理后, S
合的缘故。 ( 三)技术 综上所述, 使用 SG 法在蚕豆、 S 大葱等材
结 果 和 讨 论
( 一)S G 法的带型 S 使用 SG法, S 我们在蚕豆、 大葱、 韭葱三种 S 植物的染色体上均成功地显示出了带纹,其带 料的染色体上显示出的带纹与采用 BG法所 二者均使染色体 型属 C 带范畴。 同陈瑞扬等〔曾描述过的 C 一 2 3 r 显示出的带纹是基本一致的, - 带类型基本一致,即有着丝点带 () C 、中间带 的组成异染色质显带。但由于研究者采用的品 r (、 I 末端带 ( )和核仁溢痕带 ( ) ) T N 。另外还有 种和分带技术的不同,带型也可能出现某些差 随体带() S。但不同材料具有不同的带型特点。 异。张自立等[, zm A Hi e等〔 u 8 在蚕豆的所有 S 1蚕豆具有 6 . 对染色体。 1 对最长而具随 染色体上均显示出着丝点带,而在我们的试验 体的M染色体,对较短而具近端或端着丝点的 中, 5 着丝点带不明显或不显带。E-a 等〔 l d 7 G i 1 在 S 染色体。在M染色体的核仁臂上显示出两条 大葱的染色体上没有显示出着丝点带,我们则 明显的带, 条核仁隘痕带和 1 1 条中间带, 另一 在两条染色体的着丝点区显示出较明显的着丝 臂不显带,着丝点带着色很浅。其余5 S 对 染 点带, 这可作为鉴别这两条染色体的重要依据。 色体的长臂上均显示出中间带, 有的 1 有的 条, 经我们多次试验,SG法用于蚕豆、 S 大葱、 2 有的3 带的形状、 条, 条, 大小、 着色程度各 韭葱染色体的分带是可行的。与 B G 法比较, S 异,且带纹明显肿大。着丝点区仅显极浅的带 其主要优点是:N H O 很容易溶于水,制片 aC ,
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植物染色体 Ge s C 带技术,目前广泛 i a m 一 2固定 . 根尖经预处理后, 9 务 酒精 在 5 31 固定液中固定 1-2 小时, 0 4 转 使用 BG法 (au h r i- le i s . +冰醋酸 (:) S Brm d xe an Ge a i y od Si- m ) 人 7%酒精中 0 贮存备用。 但是, 此法用 B ( H) aO ,进行变性处理, 容易发 3解离 . 经固定的根尖用水洗后,先在 生制片污染t 5 ] ,因此我们改用 N H 0 a C 3代替
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1 . 蚕豆染色体C 带,SG 法, 20; 2大葱染色体 C带, S 法, 28; 一 S X 00 . - SG X 40 3韭葱染色体 C 带, S 法, 90 . 一 SG X12; 4蚕豆间期核染色中 X16; . 心, 70
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( 一)S G 法的带型 S 使用 SG法, S 我们在蚕豆、 大葱、 韭葱三种 S 植物的染色体上均成功地显示出了带纹,其带 料的染色体上显示出的带纹与采用 BG法所 二者均使染色体 型属 C 带范畴。 同陈瑞扬等〔曾描述过的 C 一 2 3 r 显示出的带纹是基本一致的, - 带类型基本一致,即有着丝点带 () C 、中间带 的组成异染色质显带。但由于研究者采用的品 r (、 I 末端带 ( )和核仁溢痕带 ( ) ) T N 。另外还有 种和分带技术的不同,带型也可能出现某些差 随体带() S。但不同材料具有不同的带型特点。 异。张自立等[, zm A Hi e等〔 u 8 在蚕豆的所有 S 1蚕豆具有 6 . 对染色体。 1 对最长而具随 染色体上均显示出着丝点带,而在我们的试验 体的M染色体,对较短而具近端或端着丝点的 中, 5 着丝点带不明显或不显带。E-a 等〔 l d 7 G i 1 在 S 染色体。在M染色体的核仁臂上显示出两条 大葱的染色体上没有显示出着丝点带,我们则 明显的带, 条核仁隘痕带和 1 1 条中间带, 另一 在两条染色体的着丝点区显示出较明显的着丝 臂不显带,着丝点带着色很浅。其余5 S 对 染 点带, 这可作为鉴别这两条染色体的重要依据。 色体的长臂上均显示出中间带, 有的 1 有的 条, 经我们多次试验,SG法用于蚕豆、 S 大葱、 2 有的3 带的形状、 条, 条, 大小、 着色程度各 韭葱染色体的分带是可行的。与 B G 法比较, S 异,且带纹明显肿大。着丝点区仅显极浅的带 其主要优点是:N H O 很容易溶于水,制片 aC ,