酶传感器工作原理图

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㈢酶促反应动力学 酶促反应动力学是研究酶反应速度及
各种因素对酶反应速度影响的科学。 主要影响因素包括有:底物浓度、酶
浓度、 pH值、温度、抑制剂与激活剂等。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
酶动力学测定的是初速度,是指酶 在反应过程中底物初始浓度被消耗在5% 以内的速度。目的是排除酶反应过程中 出现的各种干扰因素,以便测得准确的 酶反应速度。
产物+H2O2
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基础电极可采用氧、过氧化氢电极, 还可采用近年开发的介体修饰的炭、铂、 钯和金等固体电极或介体修饰电极。
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氧电极:是一个通过测定电解电流来测定 溶液中氧含量的电解池。
工作时,在铂阴极和 Ag阳极之间施加0.6V 的电压。当E=-0.2V时 电极开始电解,产生还 原电流,其还原反应式 为:
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㈠电流型酶电极 电流型酶电极是将酶促反应产生
的物质在电极上发生氧化或还原反应产 生的电流作为测量信号,在一定条件下, 利用测得的电流信号与被测物活度或浓 度的函数关系,来测定样品中某一生物 组分的活度或浓度。
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制作生物传感器最常用的是氧化酶:
底物+O2
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降低胆固醇的食物: § 含膳食纤维丰富的食物 § VC 与 VE § 饮酒可能使血中的高密度脂蛋白升高,
加强防治高胆固醇血症的作用。葡萄酒较合适, 但必须严格限制摄入量。
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胆固醇电极是一种用于临床测定 血清胆固醇含量的电流型酶传感器。
胆固醇 H2O 胆固醇脂酶 游离胆固醇 RCOOH 游离胆固醇 O2 胆固醇氧化酶 胆甾烯酮 H2O2

电化学酶生物传感器

电化学酶生物传感器

响应机理
电流响应
以壳聚糖为载体将血红蛋白、胆固醇 氧化酶、胆固醇酯酶固定在玻碳电极 表面,在不使用任何电子媒介体的条 件下,利用血红蛋白和电极之间的直 接电子转移,制备成高选择性的全胆 固醇生物传感器,用于测定血清中的 总胆固醇含量。 对胆固醇响应的线 性范围为10~110mg /dL ,检测限为 5mg/dL,响应时间为60 s。
换能器(电极)
O2, H2O2, Pt Pt O2 Pt O2 O2
H2O2, O2 O2, H2O2
Pt O2, H2O2
O2 O2
2 肌酸和肌酸酐电化学传感器 肌 酸 酐 H2O 肌 酸 酐 水 解 酶 肌 酸 肌 酸 H2O 脒 基 肌 酸 水 解 酶 肌 氨 酸 脲 肌 氨 酸 H2OO 2 肌 氨 酸 氧 化 酶 甘 氨 酸 H CH OH2O 2
(1)能够快速地与还原性的酶反应; (2)具有可逆的异相反应动力学行为; (3)生成氧化型介体的过电位低而且与pH无关; (4)它的氧化或还原形态都是稳定的; (5)还原型介体不与氧发生反应; (6)在应用中无毒化作用。
常 见 的 媒 介 体 的 化 学 结 构
图5−11 一些常见的媒介体的化学结构 (a) 四硫富瓦烯(TTF),(b) 四氰苯醌二甲烷(TCNQ), (c) 二茂铁,(d) N-甲基苯基吡唑酮鎓(NMP+),(e) 麦多那蓝
酶的分子识别功能及其反应过程的示意图
酶的固定化
酶电极制备过程中的关键在于酶的固定化,固定化的目的在于保持酶稳 定性的同时,尽可能使酶膜与敏感元件紧密接触,这样酶催化反应的产物可 以很快地被酶敏感元件所感知并产生相应的信号。
酶活性中心
黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD) Horseradish Peroxidase 亚铁血红素(Hemin)

酶传感器

酶传感器

食品添加剂
蔬果表面的化学物
酶传感器在食品检测中的应用
酶传感器在食品检测中的应用包括食品成分、食品添加剂、 有害毒物、残留农药兽药等的测定分析。
酶传感器在食品安全中的应用
酶传感器在食品工业中用于食品成分分 析,主要是葡萄糖的测定,葡萄糖含量是衡 量水果成熟度和贮藏寿命的一个重要指标。
还可用来分析白酒、苹果 汁、果酱和蜂器
酶传感器
什么是酶传感器?
酶传感器是生物传感器的 一种,是利用生化反应所产生的 或消耗的物质的量,通过电化学 装置转换成电信号,进而选择性 地测定出某种成分的器件。
酶传感器工作原理示意图
把催化反 应中底物 或产物的 变量转换 成电信号
电 信 号
被检测物质
固定化酶膜
选择性地识别被检测的物 质,并且催化被识别出的物 质发生化学反应
酶传感器在监测环境中广泛存在的有机 污染物、无机污染物和重金属等方面的 应用,并对电化学酶传感器的发展方向进 行了展望。
检测土中含磷量
亚硫酸盐通常用作食品工业的漂白剂和防腐剂, 用酶传感器可以测定食品中的亚硫酸含量。甚至 还可以测定色素和乳化剂。
可以用乙酰胆碱酯酶类传感器,检测果蔬表面有机磷农药。
磷 污 染
酶传感器在环境安全中的应用
三聚磷酸钠进入环境水体,造成了江 湖水体“富营养化”使水体发臭,藻类大 量生长,蚊蝇孽生,有的地方水系水葫芦 在水面生长厚达1米深,给环境造成危害。
酶传感器的实际应用
血糖仪
食品安全
环境安全
血糖仪
酶传感器在血糖仪中的应用
葡萄糖(被检测物质)经葡萄 糖氧化酶(固定化酶膜)催化氧化 成为葡萄糖内酯同时葡萄糖氧化酶 转化为其还原态。进行一系列的催 化氧化反应,通过血糖仪(变化器), 将化学信号转为电信号,在屏幕上 显示。

酶传感器响应过程原理

酶传感器响应过程原理

酶传感器响应过程原理(2013-03-18 15:02:57)转载▼标签:杂谈算是一个科普贴,1991年同导师一起写过一个Review(Clin.Chem.真有点不敢相信,居然二十多年了),这个示意图是当时做的,表示葡萄糖氧化酶传感器的表面结构及反应原理。

现在用一个彩色图来帮助回顾传感器响应过程。

这是一个简化的原理图(简单的传感器膜结构,对电极不在同一个膜内,所以膜需要有导电性),只包括主要步骤,每个数字代表一个步骤(或过程)。

步骤1、2、3、4代表主反应路径:(1)溶液本体内的被测分子经浓差扩散(水溶液扩散系数D)到达传感器膜表面(绿色粗箭头),再经浓差扩散经传感器外膜(外膜的扩散系数D1)达到酶层(绿色细箭头,包括在酶层内的扩散系数D2)。

(2)分子与酶反应(红色区域),产生电活性的反应产物过氧化氢和葡萄糖酸。

酶的总活性要求远大于葡萄糖通过外膜的通量,使进入酶层的葡萄糖瞬时转化完毕,达到酶层内的葡萄糖浓度=0.(3)过氧化氢(黄色箭头)分别向内和向外扩散,其扩散通量的分配比取决于过氧化氢在外膜和内膜材料中的溶解度和各自的扩散系数(D1/D3),向内扩散的部分到达电极表面,发生电极反应。

(4)过氧化氢在电极表面发生电极反应(红色箭头),形成电极电流(紫色箭头)。

电极反应速率必须足够快,使电极表面的过氧化氢浓度等于零。

除主反应路径之外,其它几个构成电化学信号测量回路的因素也同样重要:(5)由于电子交换,负电荷流入电极电路,同时也产生等量正电荷产物氢离子(或其它正离子),使电极表面积累正电荷,此过程形成电位差(电容效应),并降低界面附近的pH值。

并由此产生正负离子的浓差扩散。

正离子向溶液迁移,溶液中的负离子向电极表面迁移。

(6)如果葡萄糖分子在外膜内的扩散系数足够大,会在传感器-溶液界面上产生浓度梯度,进而形成浓度扩散层(两个黑色箭头间距离),使外膜表面的表观浓度小于溶液本体浓度。

扩散层的存在使信号电流受液体扰动的影响。

酶传感器工作原理图

酶传感器工作原理图

酶法分析的主要方法:
单酶反应定量法和偶联酶反应定量法
• 单酶反应定量法:指用一种酶为工具酶定 量测定某种物质的方法。 • 偶联酶反应定量法:当单酶反应底物或产 物反应底物或产物的物理化学手段无法区 分时,还可以借助另一种酶作为指示酶, 通过偶联反应进行定量分析。
• 方法
类型
原 理
用途及备注
血清尿液脑脊液、 公认参考方法 操作简便,特异 3;4e=======4OH-

• •
A是一般的商品化电极型血糖仪的组成部分,包括血糖试纸和用作电化学读数计的血 糖仪。血糖试纸即敏感元件,血糖仪集换能器与信号处理系统于一体。当血糖试纸插 入血糖仪的插槽并加入血样后,以铁氰化钾/亚铁氰化钾为导电介质实施血糖的电化学 测定时血糖试纸的电极上将发生如图2B中所示的反应。葡萄糖(Glucose)经葡萄糖氧 化酶(GO/FAD)催化氧化成为葡萄糖内酯(d-Gluconolactone),同时葡萄糖氧化酶 转化为其还原态(GO/FADH2)。接着,葡萄糖内酯水解为葡萄糖酸(Gluconic Acid),还原态葡萄糖氧化酶将铁氰离子([Fe(CN)6]3-)还原为亚铁氰离子 ([Fe(CN)6]4-)。当血糖仪施加一定的电压后,亚铁氰离子([Fe(CN)6] 4-)还原为铁 氰离子([Fe(CN)6]3-),并产生电流,电流大小与葡萄糖浓度成正比,该线性关系由电 流-葡萄糖浓度线性方程来描述: 电流=K[葡萄糖浓度]+B 直线的斜率(K)和截距(B)是二者的相关系数。 K和B已经经过校准并存储在血糖 仪内,每次测定血糖时产生的电流值就会被转换为血糖浓度值,并直接在血糖仪上显示。
可制试纸片定量
(4-氨基安替比林+酚 半定量筛选试验 →红色琨类化合物505nm)

酶生物传感器

酶生物传感器

酶生物传感器湖 南 大 学生物学院生物医学工程彭健S132220018主要内容三、酶生物传感器中酶的固定技术三、酶生物传感器中酶的固定技术一、酶生物传感器概述二、酶生物传感器的特点及工作原理四、酶生物传感器的应用五、酶生物传感器的总结与展望一、酶生物传感器概述(1)发展背景自1962 年Clark 等人提出把酶与电极结合来测定酶底物的设想后, 1967 年Updick和Hicks 研制出世界上第一支葡萄糖氧化酶电极, 用于定量检测血清中葡萄糖含量。

此后, 酶生物传感器引起了各领域科学家的高度重视和广泛研究, 得到了迅速发展。

2、酶生物传感器的定义酶生物传感器是将酶作为生物敏感基元,通过各种物理、化学信号转换器捕捉目标物与敏感基元之间的反应所产生的与目标物浓度成比例关系的可测信号,实现对目标物定量测定的分析仪器。

3、酶生物传感器的优点与传统分析方法相比, 酶生物传感器是由固定化的生物敏感膜和与之密切结合的换能系统组成, 它把固化酶和电化学传感器结合在一起, 因而具有独特的优点:(1)它既有不溶性酶体系的优点, 又具有电化学电极的高灵敏度; (2)由于酶的专属反应性, 使其具有高的选择性, 能够直接在复杂试样中进行测定。

4、酶生物传感器的甚本结构及工作原理基本结构酶生物传感器的基本结构单元(1)由物质识别元件(固定化酶膜)(2)信号转换器(基体电极)当酶膜上发生酶促反应时, 产生的电活性物质由基体电极对其响应。

基体电极的作用是使化学信号转变为电信号, 从而加以检侧, 基体电极可采用碳质电极(石墨电极、玻碳电极、碳栩电极)、Pt 电极及相应的修饰电极。

工作原理当酶电极浸入被测溶液, 待测底物进入酶层的内部并参与反应, 大部分酶反应都会产生或消耗一种可被电极侧定的物质, 当反应达到稳态时, 电活性物质的浓度可以通过电位或电流模式进行侧定。

(1)电位型传感器是指酶电极与参比电极间输出的电位信号, 它与被测物质之间服从能斯特关系。

酶生物传感器讲述讲解

酶生物传感器讲述讲解

酶生物传感器是将酶作为生物敏感基元,通过各种物理、化学
,实现对目标物定量测定的分析仪器。与传
,酶生物传感器具有独特的优点:选择性高、 反复多
响应快、体积小、可实现在线监测、成本低,便于推广普及。
酶生物传感器;进展;应用新技术
概述
(Biosensor)是一类特殊的化学传感器,通过各种物理、
,然后将反应的
cardinovascular surgery[J].AnnNYAcad Sc,i 1962, 102: 29.
王建龙,张悦,施汉昌,等.生物传感器在环境污染监测中的应用研
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武文斌.生物传感器及其在微生物检测中的应用评价[J].海军医
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李海虹,严少华,漆德瑶,等.环糊精交联固定酶的生物传感器及
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感器的研究[J].生物化学与生物物理学
,1998,30(6):641-643.
龚毅,叶蕾,陈洪渊,等.锇-聚乙烯吲哚配合物修饰电极对肾上腺
(β-CDP)为主体,电子媒介体二茂铁为客体,形成稳定的
,制成了葡萄糖、乳糖生物传感器。再如朱邦尚等[10]以电子媒
1,1-二甲基二茂铁为客体与β-CDP形成稳定的主客体包络物。
如马全红等[12]以二茂铁为电子
,将含有丰富酪氨酸酶的蘑菇组织肉浆固定在二茂铁(PVC膜)
L-酪氨酸的线性响应范围为2.0
:在导电单体成膜之前,探讨在合适条件下,向底液中加入改
,通过电化学法有效地控制电极上导电复合材

酶传感器

酶传感器
条件: 1.自组装的动力——即分子自组装提供能量 2.自组装的导向作用——指分子的空间尺寸
和方向要达到重排的要求。
2.6 分子自组装 之 SMAs
自组装膜( SAMs)是分子通过化学键作用自发吸 附在固/液或气/固界面上,形成热力学稳定和能量 最低的紧密的有序的二维纳米级的超薄膜。通常在 成膜分子之间还存在范德华力的作用,它可以让所 形成的膜更加稳定。
2.生物传感器中酶的固定化方法
由于酶生物传感器最主要的一个元件是 固定化的生物敏感膜,因此酶膜的固定一直 是生物传感器研究的关键环节。已有的固定 化方法有吸附法、化学交联法、共价键合法、 电化学聚合法、物理包埋法和分子自组装等。 现分别加以介绍。
2.1 吸附法
此法是通过酶分子极性键、氢键、疏水 键的作用,将酶吸附于不溶性载体上。有报 道的载体有多孔玻璃、活性炭、氧化铝等。
优点 :1.在保证酶对底物过量情况下,酶活
性出现小幅度的下降或波动,结果偏差较小 2.线性范围宽且有机磷农药不对OPH
产生抑制,重复使用性强 3.有机磷作为直接底物,操作过程简
单,专一性强
4.2 酶生物传感器的类型
按换能器不同,检测有机磷和氨基甲酸 酯类农药残留常用的EBS主要有: 电化学型生物传感器 光学型以生物传感器 压电晶体生物传感器
3.1 反应机理
化学修正后的GOD 与氧化还原反应电传 导组合体或者将GOD 固定在氧化还原催化剂 中都用来作为电子在电极和氧化还原反应中心 之间传导的途径。
缺点 :电子在电极与GOD 之间的转移效率很低
3.1 反应机理 之 解决方法
1.在处于最佳的空间位置及拥有良好的生物电 催化剂与电极之间电气连接研究中,提出了纳 米金颗粒作为一种电子采集者并可以将电子在 宏观电极与反应中心之间进行有效的传递。

酶传感器_百替生物

酶传感器_百替生物
酶电极(enzyme electrode)是由固定化酶与离子选择电极、气敏电极、氧化还原电极等电化学电 极组合而成的生物传感器。因此它具有酶的分子识别和选择催化功能,又有电化学电极响应快、操作 简便的特点,能快速测定试液中某一给定化合物的浓度,而且所需样品量很少。目前,酶电极在环境 监测、临床检验、食品分析等领域均有广泛应用,用于测定糖类、醇类、有机酸、氨基酸、核苷酸、 激素等成分。根据电化学测量信号,酶电极主要分为电位型和电流型(也称安培型)两类。
传感器种类繁多,应用广阔。按检测对象(被测量)划分,基本上可分为物理传感器和化学传感 器两大类。物理传感器是检测热、光、磁、力等物理量的传感器,它们开发较早,也比较成熟,早已 有商品供应。化学传感器则是能检测化学量的传感器。第一个化学传感器就是由 Gremer 在 20 世纪初 首先研制的 pH 玻璃电极。事实上高等动物的感觉器官就是一套完美的传感系统,通过眼、耳、皮肤 来感知外界的光、声、温度等物理信息,由鼻、舌感知气味和味道等化学信息。生物传感器(biosenors) 是一类特殊的化学传感器,这类传感器的诞生以第一个酶电极——葡萄糖电极的出现为标志,它是由 Updike 和 Hicks 根据 Clark 等 1962 年最先提出的酶电极的设想,于 1967 年制造出的;经过几十年的 发展,已形成独立的门类,而且仍在不断飞速发展,以至于有些学者把生物传感器与物理和化学传感 器并列起来,看作是传感器的第三个类别。
第一节 概 述
传感器(sensor/transducer)是一种信息获取与处理的装置。在新韦氏大词典中的定义为:“从一个 系统接受功率,通常以另一种形式将功率送到第二个系统中的器件”。由此可知,传感器的作用是将一 种能量转换成另一种能量形式,所以又有“换能器”的别称。我国国家标准(GB7665-87)对传感器 的定义为:是能感受规定的被测量并按照一定的规律转换成可用输出信号的器件或装置,它通常由敏 感元件和转换元件组成。其中,敏感元件是指能直接感测或响应被测量的部件,转换ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件是指传感器 中能将敏感元件感测或响应的被测量转换成可用的输出信号(通常是电信号)的部件。

生物传感器

生物传感器

1.3 主要应用
1.在食品加工中的应用 生物传感器在食品分析中的应用包括对食品成分、食品添加剂、 有害毒物及食品鲜度等的测定分析。
在食品中 分析白酒、苹果汁、果酱和蜂蜜中葡萄糖的含量
例 如
在工业中 可用于测定食品中的亚硫酸盐含量
2.在医学中
在临床医学中,酶生物传感器是最早研制且应用最多的一种传感器,目前已成 功应用于血糖、乳酸、维生素C、尿酸、尿素、谷氨酸、转氨酶等物质的检测中。
在军事医学中,生物传感器已应用于监测多种细菌、病毒及毒素。
在法医学中,生物传感器可用作DNA鉴定和亲子认证等。
传感器原理与应用
酶生物传感器又分为电位型酶生物传感器和电流型酶 生物传感器两类。
电位型酶生物传感器可检测出参与反应的物质的浓度; 电流型酶生物传感器可得到被测物质的浓度。
葡萄糖传感器(见图6-19)是第一支酶生物传感器,它是由葡萄糖氧化酶膜和克拉克 型氧电极或过氧化氢电极组成的。葡萄糖传感器也可采用光化学法进行检测。
传感器原理与应用
1.1 结构及工作原理
生物传感器由分子识别部分(敏感元件)和转换 部分(换能器)构成。
转换部分把分子识别部分表达的信号转换为电信 号,它主要包括电化学器件、光学器件、热敏器件、 声波器件、压敏器件等。
图6-18 生物传感器结构
ห้องสมุดไป่ตู้
1.2 常用生物传感器
1.酶生物传感器
酶生物传感器就是将酶作为生物敏感基元,通过各种 物理、化学信号转换器捕捉目标物与敏感基元之间的反应 所产生的与目标物浓度成比例关系的可测信号,实现对目 标物定量测定的分析仪器。
图6-19 葡萄糖传感器
图6-20 葡萄糖传感器工作原理
图6-21 葡萄糖传感器工作过程

第九章 (二)酶传感器

第九章 (二)酶传感器

又称变时法。
当底物浓度固定时,反应速度相对 底物浓度或相对酶浓度作图有一线性 关系,通过分析仪器自动测定反应物 或反应产物变化(物理化学性质变化) 达到其一固定值所需要的时间就可求 得被测物的浓度。

固定时间法
对于一个酶反应,在线性范围内 选取一个恰当时间进行反应的检定, 此时测得的反应(产)物变化无疑与酶 浓度(或其它被测物)有线性比例关系, 测定上述变化就可算出被测物的浓度。
酶传感器
传感器是能将一种被测量的信号(参量)转换成为 一种可输出信号的分析测试装置。 生物传感器(biosensors)就是用生物成分(酶、 蛋白质、抗体、细胞)作为感受器的传感器,可 用于测定混合溶液中某种物质的浓度。通常由感 受器和换能器和电子线路三部分组成。
酶传感器类型
电极密接型:直接在基础电极的敏感面上安装固 定化酶膜 液流系统型:固定化酶填充在反应柱内,底物流 经反应柱发生酶促反应,产生生化信号,再到基础 电极敏感面。
6.3
固定化酶在酶分析中的应用
近年来,固定化酶也已开始渗入到酶分析领
域,并在迅速地扩展,从而有可能使酶分析达 到简便化、连续化和自动化。

酶(膜)极
酶电极主要由选择性电极感应器和 复盖在上面的酶膜组成。通过酶膜层的 作用使底物转化为产物,然后再通过感 应器进行检测。这种转化可用一级反应 动力学关系描述。
6.4 酶分析的自动化问题
所谓酶分析自动化就是指从清洗、加样、 启动反应、测定、数据记录、计算处理直至 提供结果等步骤,全部由仪器自动操作。有 些仪器只能做到半自动,其结果计算需由人 工处理。
要使酶分析自动化就必须使酶反应拟一级 化,即除了被测因素外,其它都应保证过量、 最适,这样酶反应速度与被测因素成比例。

酶反应器和酶传感器

酶反应器和酶传感器
优点:在理想状况下,混合良好,各部分组成相同,并与输出成 分一致。
缺点:搅拌浆剪切力大,易打碎磨损固定化酶颗粒。
反应液出口
底物溶液进口
11
(3) 填充床反应器(Packed Reactor, PBR)
又称固定床反应器。将固定化酶填充于反应器 内,制成稳定的柱床,然后,通入底物溶液, 在一定的反应条件下实现酶催化反应,以一定 的流速,收集输出的转化液(含产物)。
电极组合检测葡萄糖的结果, 可认为是最早提出 了生物传感器(酶传感器)的原理. 1967年 Updike等人实现了酶的固定化技术,研 制成功酶电极, 这被认为是世界上第一个生物传 感器.
22
20世纪70年代中期后,Divies首先提出用 固定化细胞与氧电极配合, 组成对醇类进 行检测的所谓“微生物电极”。
33
其他反应器
鼓泡式反应器 膜反应器 喷射式反应器
15
各种酶反应器的特点
反应器类型 搅拌罐式反应器
填充床式反应器
适用的操作方式 适用的酶
分批式, 流加分批式
游离酶 固定化酶
连续式
连续式
固定化酶
特点 反应比较完全,反应条件容易 调节控制。
密度大,可以提高酶催化反应 的速度。在工业生产中普遍使 用。
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尿素传感器采用脲酶预反应器与铵离子光极联合 应用的方法,主要利用脲酶对尿素的水解作用, 水解方程式为:
脲酶
H2N — CO — NH2 + 3H2O
2NH4+ HCO3-+ OH-
通过铵离子光极检测由尿素水解所放出的铵离子就可以 检测尿素的含量
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(3) 鱼鲜度传感器
鲜度是判断鱼类可食用性的重要指标。 鱼死后体内核酸开始分解而产生次黄嘌呤

酶传感器的工作原理

酶传感器的工作原理

酶传感器的工作原理
酶传感器是一种基于酶催化反应的生物传感器,可以用于检测各种生物分子,如蛋白质、糖类和药物等。

酶作为生物催化剂,可以在生物体内加速化学反应,将底物转化为产物。

酶传感器利用酶的催化作用,将底物转化为电信号,实现对底物的检测。

酶传感器的工作原理可以分为两个步骤:酶催化反应和电信号转化。

酶催化反应
酶传感器中的酶通常被固定在传感器表面的电极上,形成一种生物膜。

当待检测的底物与酶生物膜接触时,酶会催化底物转化为产物。

这个过程可以用下面的方程式表示:
底物 + 酶→ 产物
在酶催化反应过程中,底物的浓度与反应速率成正比。

因此,底物的浓度越高,反应速率就越快。

电信号转化
酶传感器中的电极通常被涂覆一层传导性高的材料,如碳或金属。

在酶催化反应的过程中,产生的电子会从电极表面流出,形成一个电信号。

这个电信号的大小与酶催化反应的速率成正比。

因此,底物的浓度越高,电信号就越强。

电信号可以通过测量电极的电位或电流来检测。

通常,酶传感器会将电信号转化为数字信号或模拟信号,以方便记录和分析。

总结
酶传感器是一种基于酶催化反应的生物传感器,可以用于检测各种生物分子。

酶传感器的工作原理可以分为两个步骤:酶催化反应和电信号转化。

在酶催化反应的过程中,底物的浓度与反应速率成正比。

在电信号转化的过程中,电信号的大小与酶催化反应的速率成正比。

酶传感器可以将电信号转化为数字信号或模拟信号,以方便记录和分析。

酶反应器和酶传感器_图文.

酶反应器和酶传感器_图文.

(3 鱼鲜度传感器鲜度是判断鱼类可食用性的重要指标。

鱼死后体内核酸开始分解而产生次黄嘌呤 (Hx ,且随时间的延长不断增加。

在鱼类质量变化的早期,以次黄嘌呤作为检测指标相当灵敏可靠。

31
将黄嘌呤氧化酶以共价连接法固定于二醋酸纤维素薄膜上,制成的酶膜与极谱式氧电极共同组成黄嘌呤氧化酶传感器。

通过反应过程中消耗氧引起的电位值的变化来测定次黄嘌呤的含量。

原理如下:次黄嘌呤黄嘌呤+ O2 黄嘌呤氧化酶黄嘌呤+ H2O 尿酸+ H2O 黄嘌呤氧化酶 32
酶电极在食品行业中的应用在酿酒过程中,将乙醇酶和葡萄糖氧化酶固定成酶膜,与电极连接,制成的生物传感器可监控葡萄糖和乙醇的浓度;
利用嘌呤氧化酶电极,检测酶催化反应中过氧化氢的产生量,可对鱼新鲜度进行测定;淀粉双酶传感器能够测定食品中淀粉的含量。

测定猪肉、牛乳鲜度的酶传感器也已开发出来。

33。

酶反应器及生物酶传感器-PPT课件

酶反应器及生物酶传感器-PPT课件
9
二、基本类型:
间歇式酶反应器 连续搅拌罐式酶反应器 固定床型酶反应器 流化床型酶反应器 膜式酶反应器
1 0
1.间歇式酶反应器
特点:底物和酶一次性投入反应器中,产物一 次性取出,反应结束后,固定化酶(细胞)用 过滤(或超滤)法回收。
1 1
2.连续搅拌罐式酶反应器
向反应器中投入固定化酶和底物溶液,不断搅拌,反 应达到平衡后,再以恒定流速连续流入底物溶液,同 时,以相同流速输出反应液(含产物)
如果底物和产物在反应器中不够稳定的话,可以采用高浓度的酶,以 减少底物和产物在反应器中的停留时间,从而减少损失。
防止微生物污染 酶反应器操作中,生产能力逐渐降低,主要原因是固定化酶活性降低
或损失。造成固定化酶活性损失的原因: – (1)酶本身的失活; – (2)酶从载体上脱落;
2 – (3)载体的破碎或溶解。 6
3
– 1999年英国PPL医疗公司培育出100只转基因羊, 其奶水中含有用于医疗的人体蛋白,能够治疗严重 呼吸系统疾病、血友病和先天发声缺陷等
– 荷兰一家公司培育出一批转基因牛,这些牛的乳 汁中含有人乳铁蛋白。人乳铁蛋白可以抑制人胃肠 道的细菌感染。
– 中国科学院上海遗传所和复旦大学合作,培育出5 只含有人体某种基因的转基因羊,这些羊的乳汁中 含有能治疗血友病的珍贵药物。
定的,故可反复使用 4.成本相对较低,便于普及
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算是生物电子的一个综合,包含了不少内容.
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四、生物传感器的应用
生命科学与卫生保健 食品检测 工业及环境 。。。。
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生命科学与卫生保健
主要有: 家用便携诊断 医学诊断、检测 基因、蛋白测定 细菌、病毒分析 药物分析 病原体测试(如传染病控制)

酶传感器的原理及应用

酶传感器的原理及应用

酶传感器的原理及应用1. 引言酶传感器是一种基于酶催化反应的生物传感器,可以用于快速、高效地测定生物样品中特定酶的活性和浓度。

酶传感器的原理基于酶与其底物之间的选择性作用和催化反应的速率,通过转化酶催化反应的产物浓度或酶底物的消耗程度来检测样品中目标酶的含量。

本文将介绍酶传感器的原理及其在生物医学、食品安全等领域的应用。

2. 酶传感器的原理酶传感器的原理基于酶的催化作用和底物的特异性结合。

一般来说,酶传感器由酶、底物和信号转导系统组成。

具体原理如下:•酶特异性:酶能够以高选择性地与其底物结合,形成酶底物复合物。

•催化作用:酶底物复合物发生催化反应,产生产物。

•检测方法:通过检测产物的浓度或酶底物的消耗程度来确定目标酶的活性或浓度。

3. 酶传感器的应用领域酶传感器在生物医学、食品安全、环境监测等领域有着广泛的应用。

3.1 生物医学应用•蛋白质检测:酶传感器可以用于检测血液中的特定蛋白质,如糖尿病患者的血液中的胰岛素浓度。

•药物检测:酶传感器可以用于检测药物在体内的代谢率和浓度,有助于调节药物剂量。

•生物传感:酶传感器可以用于监测生物体内的代谢活动,如血液中葡萄糖浓度的监测。

3.2 食品安全应用•食品中有害物质检测:酶传感器可以用于检测食品中的有害物质,如残留农药、重金属等,以保障食品安全。

•食品新鲜度检测:酶传感器可以用于检测食品的新鲜度,如鱼类蛋白酶用于检测鱼类的新鲜度程度。

3.3 环境监测应用•水质监测:酶传感器可以用于监测水中的有害物质浓度,如重金属、有机污染物等,以评估水质的安全性。

•大气环境监测:酶传感器可以用于检测大气中的有害物质浓度,如二氧化硫、一氧化碳等,以评估空气质量。

4. 酶传感器的优势和发展方向酶传感器相比于传统的化学传感器具有以下优势: - 高选择性:酶传感器能够以高选择性地与其底物结合,能够更精准地检测目标酶的活性和浓度。

- 快速响应:酶传感器具有快速的响应速度,可以在短时间内完成检测。

酶生物传感器

酶生物传感器
根据换能器类型
可分为电化学酶传感器、光化学酶传感器、热化学酶 传感器等。
根据应用领域
可分为环境监测酶传感器、食品安全酶传感器、医疗 诊断酶传感器等。
酶生物传感器应用领域
环境监测
用于检测大气、水体中的污染 物,如重金属、农药残留等。
食品安全
用于检测食品中的有害物质, 如毒素、添加剂等,保障食品 安全。
定义
酶生物传感器是一种利用酶作为生物 识别元件,将生物化学反应转化为可 检测的电信号的分析装置。
发展历程
自20世纪60年代酶电极的研制开始, 酶生物传感器逐渐发展并应用于各个 领域,如环境监测、食品安全、医疗 诊断等。
酶生物传感器分类
根据酶的种类
可分为氧化还原酶传感器、转移酶传感器、水解酶传 感器等。
生物仿生结合
借鉴生物体内的酶作用机制,设计具有类似功能的仿生结构或材料,将 其与传感器相结合。这种方式可以模拟生物体内的酶催化过程,提高传 感器的灵敏度和特异性。
03 酶生物传感器制备技术
酶固定化方法
01
02
03
物理吸附法
利用酶与载体之间的物理 作用力(如范德华力、氢 键等)进行固定化,方法 简单但稳定性较差。
08 酶生物传感器发展趋势与 挑战
新型材料在酶生物传感器中应用前景
纳米材料
纳米材料具有优异的物理和化学性质,如高比表面积、高催化活性和良好的生物相容性,可用于 提高酶生物传感器的灵敏度和稳定性。
二维材料
二维材料如石墨烯、二硫化钼等具有优异的电学、光学和机械性能,可用于构建高性能的酶生物 传感器。
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基因诊断
结合基因测序技术,酶生物传感器可用于检测基 因突变和表达水平,为个性化医疗提供精准的诊 断信息。
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酶法分析的主要方法:
单酶反应定量法和偶联酶反应定量法
• 单酶反应定量法:指用一种酶为工具酶定
量测定某种物质的方法。
• 偶联酶反应定量法:当单酶反应底物或产
物反应底物或产物的物理化学手段无法区 分时,还可以借助另一种酶作为指示酶, 通过偶联反应进行定量分析。
• 方法 类型
原理
用途及备注
• 己糖激酶 定量 G+ATP→G-6-P+ADP 血清尿液脑脊液、
(4-氨基安替比林+酚
半定量筛选试验
→红色琨类化合物505nm)
发展史
• 第一阶段:经典葡萄糖酶电极的葡萄糖生物传感器
采用过氧化氢电极作为基础电极,通过检测H2O2的产生量,进而检测血清中 的葡萄糖含量。优点:葡萄糖浓度与产生的H2O2有当量关系,不受血液中氧 浓度变化的影响。采用过氧化氢作为基础电极的生物传感器是最早的生物传感 器。
(HK)法 分光 G-6-P + NADP+
公认参考方法
动态 →GA-6-P + NADPH 操作简便,特异
终点
(340nm) 性和灵敏性均高
推荐常规方法
• 葡萄糖氧 同上 G+O2 → GA+H2O2
化酶(POD) H2O2 + 染料→有色染料
偶联法
(还原型) (氧化型)
可制试纸片定量
(Trinder)
血糖测定的常用方法
无机化学法: Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法:邻甲苯胺法
酶法:葡萄糖氧化酶法
(一)化学法
方法
磷钼酸法 (Folin-Wu)
类型
原理
定量 G+Cu2+→Cu2O↓ 分光 Cu2O +磷钼酸试剂 →蓝色钼化合物(430nm)Fra bibliotek用途及备注
稳定、准确、但对 葡萄糖无特异性, 受血中非糖还原物 质的影响。
2. 氧电极测O2原理:利用氧在阴极上首先被还原的特性。 溶液中的O2穿过特氟隆膜到达Pt阴极上,当外加一个直 流电压为氧的极化电压(如0.7V)时,则氧分子在Pt阴极 上得电子,被还原:其电流值与含O2浓度成比例。
O2+2H2O+4e=======4OH-
• A是一般的商品化电极型血糖仪的组成部分,包括血糖试纸和用作电化学读数计的血 糖仪。血糖试纸即敏感元件,血糖仪集换能器与信号处理系统于一体。当血糖试纸插 入血糖仪的插槽并加入血样后,以铁氰化钾/亚铁氰化钾为导电介质实施血糖的电化学 测定时血糖试纸的电极上将发生如图2B中所示的反应。葡萄糖(Glucose)经葡萄糖 氧化酶(GO/FAD)催化氧化成为葡萄糖内酯(d-Gluconolactone),同时葡萄糖氧化 酶转化为其还原态(GO/FADH2)。接着,葡萄糖内酯水解为葡萄糖酸(Gluconic Acid),还原态葡萄糖氧化酶将铁氰离子([Fe(CN)6]3-)还原为亚铁氰离子( [Fe(CN)6]4-)。当血糖仪施加一定的电压后,亚铁氰离子([Fe(CN)6] 4-)还原为铁 氰离子([Fe(CN)6]3-),并产生电流,电流大小与葡萄糖浓度成正比,该线性关系由电 流-葡萄糖浓度线性方程来描述:

电流=K[葡萄糖浓度]+B
• 直线的斜率(K)和截距(B)是二者的相关系数。 K和B已经经过校准并存储在血糖 仪内,每次测定血糖时产生的电流值就会被转换为血糖浓度值,并直接在血糖仪上显示 。
酶传感器在食品工业中的应用
• 1、葡萄糖酶电极在酶法生产葡萄糖工业中的应用 • 2、用葡萄糖酶电极测定葡萄糖淀粉酶的活性 • 3、氨基酸类的分析 • 4、酒精的测定
应用举例:葡萄糖传感器
工作原理
葡萄糖氧化酶(GOD)
葡萄糖+H2O+O2――――――→葡萄糖酸+H2O2
故葡萄糖浓度测试方法有三种: ①测耗量O2 ②测H2O2生成量 ③测由葡萄糖酸而产生的PH变化。
手掌型血糖分析器
测量氧消耗量的葡萄糖传感器
测量氧消耗量的葡萄糖传感器
1. 氧电极构成:①由Pb阳极和Pt阴极浸入碱溶液,②阴 极表面用氧穿透葡萄糖(基质)膜覆盖[特氟隆,厚约 10μm]
• 第二阶段:介体葡萄糖酶电极的葡萄糖生物传感器
• 在经典葡萄糖酶电极的基础之上改良而成的,引入化学介体代替过氧化氢作为 基础电极,利用具有较低氧化电位的传递介体在电极上产生的氧化电流,在测 定葡萄糖时,可以避免其他电活性物质的干扰,提高了测定的灵敏度和准确性 。
• 第三阶段:直接葡萄糖酶电极的葡萄糖生物传感器
酶传感器
酶传感器工作原理图
酶传感器的类型

热敏电阻传感器

光纤传感器
测 定 物 质
酶膜
H正离子
氧气 过氧化氢 氨气 二氧化碳
电位(电极) 电流(场效应管)
透气膜
铂阴电极 铂阳电极
电流测量
电位测量
氢正离子敏感膜
电极
酶的固定方法
• 1、吸附法 • 2、包埋法 • 3、共价结合法 • 4、交联法
应用实例
直接葡萄糖酶电极的葡萄糖生物传感器是指不采用媒介体,利用酶与电极间的 直接电子传递设计制作葡萄糖传感器。将酶共价键合到化学修饰电极上,或将 酶固定到多孔电聚合物修饰电极上,使酶氧化还原活性中心与电极接近,直接 电子传递就能够相对容易地进行,从而使电极的响应速度更快、灵敏度更高, 真正实现酶的专一和高效催化。
邻甲苯胺法
定量
G+邻甲苯胺→蓝绿色的席弗(Schiff)碱 (630nm)
较Folin-Wu法特异 但不及酶法。 D-甘露糖能与邻甲 苯胺反应,生成类 似吸收光谱,造成 正误差。
(二)酶 法
• 酶法分析是指用酶作为工具定量测定某
种物质含量的分析方法。定量分析的目标 可以是酶的底物,辅酶,也可以是酶的激 活剂或抑制剂。
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