实验一 坐骨神经腓肠肌标本的制备

（2）不同刺激频率对腓肠肌收缩的影响
• 选用最大刺激强度刺激，使刺激频率按 1Hz 、 2Hz、4Hz、6Hz、8Hz、12Hz、16Hz逐渐增加， 分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同 频率刺激时的肌肉收缩（曲线）变化，从而引导 出单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。
实验结果记录
1．记录下不同的刺激强度值对肌肉收缩的 幅度值，绘制不同刺激强度与腓肠肌收缩张 力的关系曲线。 2．分别记录下引起肌肉单收缩，不完全强 直收缩和完全强直收缩时的刺激频率和收缩 幅度（张力）。
• 4、分离两腿：避开坐骨神经，用粗剪刀 从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪 成左右两半，再从耻骨联合中央剪开 （为保证两侧坐骨神经完整，应避免剪 时偏向一侧）。将已分离的标本浸入盛 有任氏液的培养皿中。
• 5、游离坐骨神经：取腿一条，先用玻璃分
针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用大头 针将标本背位固定于干净蛙板上。再用玻璃分 针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵 向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至 腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半 腱肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌 腱。自上向下剪断所有坐骨神经分支。将连着 3～4节椎骨的坐骨神经分离出来。
【方法和步骤】
• • • 1．制备在体坐骨神经腓肠肌标本 2．实验装置（如图） 3．仪器设置
（1）不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响
• 逐渐增大刺激强度，找出刚能引起肌肉出现 微小收缩的刺激强度（阈强度）。继续增强 刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增 大。继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线 不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现 最大收缩的最小的刺激强度，即最适刺激强 度。
思考题
• 1．为什么在一定范围内增加刺激强度， 骨骼肌收缩力增加？ • 2．何谓标本的最适刺激强度？
• 2．剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅 骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱， 右手将粗剪刀沿两侧（避开坐骨神经） 剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部 下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织， 弃于垃圾袋中。
• 3．剥皮 避开神经，用左手持圆头镊子 夹住脊柱，右手捏住皮肤边缘，逐步向 下牵拉剥离皮肤。拉至大腿时，如阻力 较大，可先剥下一侧，再剥另一侧。将 全部皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏 液的培养皿中。
【实验原理－1】
• 一条坐骨神经干是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成 的。保持足够的刺激时间不变，刚能引起其中兴奋性较高 的神经纤维产生兴奋，表现为受这些神经纤维支配的肌纤 维发生收缩，此时的刺激强度即为这些神经纤维阈强度， 具有此强度的刺激叫阈刺激。 • 随着刺激强度的不断增加，有较多的神经纤维兴奋，肌肉 的收缩反应也相应逐步增大，强度超过阈值的刺激叫阈上 刺激。 • 当阈上刺激强度增大到某一值时，神经中所有纤维均产生 兴奋，此时肌肉做最大的收缩。再继续增强刺激强度，肌 肉收缩反应不再继续增大。将引起肌肉最大收缩的最小刺 激强度称为最适刺激强度。
材料
• 牛蛙；蛙板、金属探针、粗剪刀、细剪 刀、尖镊子、玻璃分针、大头针、培养 皿、滴管、 瓷碗、锌铜弓、任氏液。
步骤
• 1．毁脑脊髓 取牛蛙一只，用左手握住，以示指压其头 部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔 处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺 入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织； 再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐 渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时牛蛙下颌 呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊 髓的牛蛙）。否则须按上法再行捣毁。
• 6、完成坐骨神经腓肠肌标本：将已
游离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪 刀自膝关节周围向上剪除并刮净所有大 腿肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。 弃去上段股骨，保留部分即为坐骨神经 腓肠肌标本
实验二
骨骼肌收缩特性和收缩形式的观测
【实验目的】
• 1．观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响； 理解阈刺激、阈上刺激和最大刺激的概念； 理解收缩张力对刺激强度曲线形成的机理。 • 2．观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响， 理解强直收缩的机理。
注意事项
1．在制备离体神经肌肉标本以及实验操作过程中，要适
时滴加任氏液，以防标本干燥而丧失正常生理活性。 2．操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌 肉。 3．每次刺激之后必须让肌肉有一定的休息时间，特别是 在观察刺激频率的影响时。 4．找准最大刺激强度，不能刺激过强而损伤神经。 5．实验过程中保持换能器与标本连线的张力不变。
实验一
坐骨神经腓肠肌标本的制备
目的和原理
• 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类 动物有相似之处，而且其离体组织的生活条件 比较简单，易于控制和掌握，来源也较丰富， 由此在生理学实验，尤其是细胞生理学的某些 实验中，常用蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本 来观察神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律 及肌肉收缩的特点等。制备具有正常兴奋收缩 功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验 的基本操作技术之一。
【实验原理－2】
• 刺激频率较低，每次刺激的时间间隔超过肌肉 单次收缩的持续时间，则肌肉的反应表现为一 连串的单收缩。 • 若刺激频率逐渐增加，刺激间隔逐渐缩短，肌 肉收缩的反应可以融合，肌肉的开始表现为不 完全强直收缩，以后成为完全强直收缩。
Байду номын сангаас
【实验对象】
• 牛蛙
【实验器材】
• 蛙类解剖手术器械、蛙板、任氏 液、铁支架、微调固定器、张力 换能器、计算机、生物信号采集 处理系统。