常用试剂的配制.

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常用试剂配制方法

常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具，常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。

在实验室中，通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂，合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性，保证实验结果的准确性和可重复性。

接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。

1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一，常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。

溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积，并将溶质溶解在适量的水中。

以盐酸为例，盐酸的浓度通常以摩尔浓度（M）或质量浓度（%）来表示，假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。

- 取适量的去离子水，加入容器中。

- 缓慢地加入计算好的盐酸质量，并充分溶解。

- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。

2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液，以得到所需的浓度。

稀释液的浓度计算方法非常简单，只需要使用C1V1=C2V2的公式即可，其中C1为原液的浓度，V1为原液的体积，C2为稀释液的浓度，V2为稀释液的体积。

以盐酸溶液为例，如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液，则按照下面的步骤进行：- 根据C1V1=C2V2的公式，计算出需要的盐酸的体积。

- 取适量的去离子水，加入容器中。

- 缓慢地加入计算好的盐酸体积，并充分溶解。

- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。

3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液，常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。

缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量，并按照一定的比例混合制备。

以Tris缓冲液为例，Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间，如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液，则按照下面的步骤进行：- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。

常用试剂配制方法

1、裴林甲液：配制：称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ，摇匀，即得。

标定：吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中，加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体，充分混匀并溶解后，加盖避光放置5分钟，用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净，之后，先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加2ml0.5%淀粉指示剂，继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点，同时用5ml 蒸馏水做空白，裴林甲液的比值F 按下式计算：01748.05006357.0V ⨯⨯-=）（空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制：称取0.5000g 淀粉，放入烧杯中，先调成糊状，加入到热的沸水中，并沸腾几分钟，至溶液呈现透明，冷却至室温。

30%醋酸溶液：30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。

2、水中总磷的测定：钼酸铵溶液：称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中，加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸，冷却后，稀释至1L 。

充分混匀后，存于棕色试剂瓶中，贮存期6个月。

硫酸溶液（C=0.5mol/L ）：取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中，冷却至室温，加蒸馏水稀释至1000ml ，摇匀。

24g/L 过硫酸铵溶液：称取24.0g 过硫酸铵固体，用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ，充分混匀即可。

17.6g/L 抗坏血酸溶液：称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中，加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸，充分溶解和混匀后，用蒸馏水稀释并定容至1L ，混匀。

贮存于棕色瓶中，有效期为15天。

3、NaOH 标液（0.5mol/L ，0.1mol/L ）配制：称取20.00g（4.00g）分析纯氢氧化钠固体，用蒸馏水溶解，并稀释定容至1000ml，混匀放置。

标定：取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g（0.4g），精密称定，加新沸过的冷水50ml，完全溶解，加2滴酚酞指示剂，用配好的该0.5mol/L（或0.1mol/L）NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色，其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg（或20.42mg）的邻苯二甲酸氢钾。

常用试剂配方

常用试剂配方常用试剂储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。

避免光照。

室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。

包装必须密封，切勿受潮。

应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。

操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。

远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。

使用后应留意剩余量，注意及时订购。

8M Urea（尿素）组份浓度：8mol/L Urea（MW：60.07）配制量： 1L配制方法： 1.称取尿素480g，置于1L的蓝盖瓶中。

2. 加水至1L，置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3. 于棕色瓶中，4℃保存。

4.使用前，先在常温放置，使析出的尿素溶解。

0.25％AgNO（硝酸银）3（MW：169.87）组份浓度：0.25％（W/V）AgNO3配制量： 500ml配制方法: 1.准确称取硝酸银1.25g。

2.加入500ml的去离子水，充分溶解。

3.于棕色瓶中,常温保存。

0.5M EDTA（PH 8.0）组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24）配制量: 500mlEDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。

配制方法: 1．称取93g Na22．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。

4．高温高压灭菌后，室温保存半年。

5M NaCl组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：58.5)配制量： 1L配制方法： 1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。

2.用去离子水溶解并稀释至1L。

3.高温高压灭菌后，常温保存。

50% 甘油组分浓度： 50%(V/V) glycerol配制量： 100ml配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中：100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。

20几种常用试剂配置方法

20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作，准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。

本文将介绍20几种常用的试剂配置方法，帮助实验人员更好地进行实验。

二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一，通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。

该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备，根据需要配置所需体积的试剂溶液。

三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。

该方法通过称量固体试剂，并按照比例配制溶液浓度。

四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。

通过计算反应物的摩尔量和体积，然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。

五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。

通常将两种试剂按照比例称量，然后进行混合。

六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。

通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。

七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式，按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等，并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。

八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积，并进行混合配制。

该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。

九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。

通过计算对数浓度和体积，然后反推得到所需试剂量。

十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式，计算所需溶液的质量、体积，并进行配制。

十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液，并按照一定比例配制出所需的标准溶液。

十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。

十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例，计算所需试剂的质量或体积，并进行配制。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。

将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。

2、二氧化碳水。

将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。

3、磷酸盐缓冲液。

将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。

4、EDTA标准溶液。

将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。

5、肌酐标准溶液。

将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。

二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。

2、弱碱缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。

3、弱盐缓冲液。

生物实验常用试剂配制方法

生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。

用来测定淀粉和标本染色。

2．斐林试剂
试剂A：将结晶硫酸铜溶于500mL水中，加硫酸，混合均匀。

试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。

（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。

5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。

6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。

7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。

8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。

常用试剂配制方法

常用试剂配制方法氨试液取浓氨水200ml，置1000ml量杯中，加水稀释至500ml。

碱性酒石酸铜试液：配600ml。

（1）取硫酸铜结晶20.8g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml试剂瓶中备用。

（可长期保存）（2）取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml 试剂瓶中备用。

（需新鲜配制）临用前将两液等量混合，即得。

0.2％酚酞指示液：配500ml。

（可长期保存）粗称酚酞1g，置500ml量杯中，加95％乙醇500ml，使溶解，即得。

0.02mol/l氢氧化钠滴定液：配500ml。

（可长期保存）取氢氧化钠0.4g，置500ml量杯中，加水使溶解成500ml。

稀硝酸：配4000ml。

（可长期保存）取硝酸（16mol/L）210ml，置3000ml烧杯中，加水稀释至2000ml。

配2次。

标准氯化钠溶液（10ug/ml）：配1000ml。

（可长期保存）精称氯化钠16.5mg，置100ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。

（100μg/ml）临用前，精密量取储备液100.0mL，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

8．硝酸银试液：配500ml。

（需新鲜配制）取硝酸银8.75g，置500ml量杯中，加水溶解至500ml。

9．稀盐酸：配3000ml。

（可长期保存）取盐酸（12.5mol/L）702ml，置5000ml烧杯中，加水稀释至3000ml。

10．标准硫酸钾溶液（100ug SO4-2/ml）：配500ml。

（可长期保存）精称硫酸钾90.5mg，置100ml烧杯中，加水溶解后，转移至500ml量瓶中。

11．25%氯化钡：配3000ml。

（可长期保存，第二年如混浊，过滤）粗称BaCl2750g，置5000ml烧杯中，加水超声溶解并稀释至3000ml（澄清）。

12．标准铅溶液（10ugPb/ml）：配600ml 。

化验室常用试剂

化验室常用试剂的配制1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾加10ml蒸馏水溶解，必要时适当加热促使其溶解，冷却后贮藏于棕色试剂瓶中。

2、三氯甲烷-冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷加入60ml冰乙酸混匀。

3、硫代硫酸钠标准滴定溶液[C(Na2S2O3)=0.1mol/L]：3.1 配制称取26g Na2S2O·5H2O或16g Na2S2O3，加2g Na2CO3 混溶于1000ml蒸馏水中，缓缓煮沸10min，冷却，放置两周后过滤。

3.2 标定称取0.18g 于120℃±2℃干燥至恒重的工作基准试剂重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶解于25ml水，加2g 碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min，加150ml 水（15-20℃），用配制好的Na2S2O3溶液滴定，近终点时加2ml 淀粉指示液（10g/L），继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。

同时做空白试验。

3.3 浓度计算硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度[C(Na2S2O3)]，数值以mol/L表示，按下式（1）计算：（1）式中：m---重铬酸钾的质量的标准数值，单位为克（g）；V---硫代硫酸钠溶液的体积的数值，单位为毫升（mL）；1---空白试验硫代硫酸钠溶液的体积的数值，单位为毫升（mL）；V2M---重铬酸钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔（g/mol）[M(1/6K2CrO7)=49.031]。

4、乙醚乙醇混合液：按乙醚乙醇2:1混合，用氢氧化钾（3g/L）中和至酚酞指示液指示液呈中性。

5、硝酸银标准滴定溶液（0.1mol/L）：5.1 配制称取8.5g AgNo3 溶于 500 mL 不含Cl-的蒸馏水中，贮藏于带玻璃塞的棕色试剂瓶中，摇匀，置于暗处，待标定。

5.2 标定准确称取基准试剂NaCl 0.12-0.15g，放于锥形瓶中，加50mL不含Cl-的蒸馏水溶解，加K2CrO4指示液1mL，在充分摇动下，用配好的AgNo3溶液滴定至溶液呈微红色即为终点。

常用试剂的配制

1、2，4－二硝基苯肼溶液I．在15mL浓硫酸中，溶解3克2，4－二硝基苯肼。

另在70mL95％乙醇里加20mL水，然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。

Ⅱ．将1.2克2，4一二硝基苯肼溶于50mL30％高氯酸中，配好后储于棕色瓶中，不易变质。

I法配制的试剂，2，4－二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。

Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水中醛且较稳定，长期贮存不易变质。

2、卢卡斯（Lucas）试剂将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融，稍冷后放在干燥器中冷至室温。

取出捣碎，溶于23mL浓盐酸中（比重1.187）。

配制时须加以搅动，并把容器放在冰水浴中冷却，以防氯化氢逸出。

此试剂—般是临用时配制。

3、托伦（Tollens）试剂I．取0.5mL10％硝酸银溶液于试管里，滴加氨水，开始出现黑色沉淀，再继续滴加氨水，边滴边摇动试管，滴到沉淀刚好溶解为止，得澄清的硝酸银氨水溶液，即托伦试剂。

Ⅱ．取一支干净试管．加入1mL5％硝酸银，滴加5％氢氧化钠2滴，产生沉淀，然后滴加5％氨水，边摇边滴加，直到沉淀消失为止，此为托伦试剂。

无论I法或Ⅱ法，氨的量不宜多，否则合影响试剂的灵敏度。

I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱，在进行糖类实验时，用I法配制的试剂较好。

4、谢里瓦诺夫（Seliwanoff）试剂将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL。

5、希夫（Schiff）试剂在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐，放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释至200mL。

或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加入0.2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200mL。

此外，也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加入0.5g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。

常用化学试剂的配制方法

常用试剂配制的具体操作1.HCL（1＋1）：在1000ml棕色瓶或白色瓶中，先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水，然后再缓慢加入盐酸，摇匀，密封备用。

（打开盐酸时，需要用纸，盖在瓶盖上再打开。

因为里面可能存在压力，若是直接打开，可能会因为压力过大，造成液体冲出，伤害到眼睛）也可以放置少量在白色滴瓶中待用。

2.抗坏血酸（5%）：用一次性塑料杯，称取抗坏血酸1g，硫脲0.1g，加入20ml纯净水，在超声器中用玻璃棒搅匀，再倒入30ml小棕色瓶中保存。

（在实验前需要看颜色变化，如果颜色变深，则代表试剂过期）。

3.盐酸—硼酸混合酸：用一次性塑料杯称取硼酸25g，500ml量杯分2次量取900ml纯净水，清洗塑料杯，并倒入1000ml烧杯中，再加入HCL（1＋1）70ml，放置在超声器中，用玻璃棒搅匀溶解，再倒入1000ml的棕色瓶中保存（也可以用500ml白色塑料瓶，插10ml刻度移液管）4.钼酸钠（6%）：用一次性塑料杯称取钼酸钠30g，500ml量杯量取500ml纯净水，边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中，然后放置在超声器中，用玻璃棒搅匀，再倒入至500ml白色塑料瓶中，密封保存。

（插5ml刻度移液管）5.H₂O₂（1＋20）：全名为过氧化氢或者双氧水。

用1ml刻度移液管，吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中，20ml量杯量取20ml纯净水，倒入塑料杯中，摇匀，再倒入至30ml的小棕色瓶中。

（容易失效，所以做溶液和检测时都需要速度快）6.三乙醇胺（TEA）（1＋1）:在1000ml棕色瓶中，先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水，然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺，摇匀备用。

（也可以用白色塑料瓶，加黑色外袋保存，插5ml刻度移液管）7.H2SO4（1＋1）：带橡胶手套及口罩。

用500ml量杯先量取300ml纯净水，在1000ml烧杯内，先倒入300ml纯净水。

用脸盆装半脸盆自来水，将烧杯先放入脸盆中，再用500ml量杯量取300ml浓硫酸，缓缓倒入浓硫酸，并用玻璃棒不停搅拌。

常用试剂配制方法

常用试剂配制方法
1、酚酞指示液(10g/L)
称取1.0g 酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100 ml 。

2、溴甲酚绿指示液(1g/L)
称取0.1g 溴甲酚绿，溶于乙醇，用乙醇稀释至100 ml 。

3、百里香酚酞( 1g/L )
称取0.1g 百里香酚酞，溶于无水乙醇，用无水乙醇稀释至100ml 刻度线。

4、氢氧化钠标准溶液0.5N :准确称取20.01-20.02gNaOH固体置于
250ml 烧杯中，加入100ml 纯水溶解，并定容于1000ml 容量瓶中摇匀，保存在聚乙烯瓶容器中。

5、硝酸银溶液(17g/L)
称取1.7g 硝酸银，溶于水，稀释至100ml。

6、0.1N硝酸银试剂：
称取17.0 g 硝酸银试剂溶于1 000毫升纯水中，溶解后装入1000毫升的棕色试剂瓶中。

7、1:1 硝酸溶液：
用量筒量取500ml 浓硝酸于1000 毫升的棕色瓶中，加500 毫升纯水摇匀即可。

8、1:1 甲醛溶液
用量筒量取10ml甲醛溶液至试剂瓶中，加入10ml纯水摇匀即可，必须当天配当天用，不可过夜(此操作需在带有抽风设备内进行)。

常用试剂的配制方法

推荐］常用试剂的配制方法乙氧基黄叱精指示液取乙氧基黄叱精0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

变色范围pH3.5〜5.5 （红- 黄）。

二甲基黄指示液取二甲基黄0.1g。

加乙醇100ml使溶解，即得。

变色范围pH2.9〜4.0 （红-黄）。

二甲基黄—亚甲蓝混合指示液取二甲基黄与亚甲蓝各15mg，加氯仿100ml,振摇使溶解（必要时微温）,滤过，即得。

二甲基黄—溶剂蓝19 混合指示液取二甲基黄与溶剂蓝19 各15mg, 加氯仿100ml 使溶解，即得。

二甲酚橙指示液取二甲酚橙0.2g，加水100ml使溶解，即得。

二苯偕肼指示液取二苯偕肼1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

儿茶酚紫指示液取儿茶酚紫0.1g，加水100ml使溶解，即得。

变色范围pH6.0〜7.0〜9.0 （黄-紫-紫红）。

中性红指示液取中性红0.5g，加水使溶解成100ml，滤过，即得。

变色范围pH6.8〜8.0 （红-黄）。

孔雀绿指示液取孔雀绿0.3g，加冰醋酸100ml使溶解，即得。

变色范围pH0.0〜2.0 （黄-绿）；11.0〜13.5（绿-无色）石蕊指示液取石蕊粉末10g,加乙醇40ml,回流煮沸1小时，静置，倾去上层清液，再用同一方法处理2次, 每次用乙醇30ml,残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml煮沸，放冷，滤过，即得。

变色范围pH4.5〜8.0（红-蓝）。

甲基红指示液取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

变色范围pH4.2〜6.3 （红-黄）。

甲基红一亚甲蓝混合指示液取0.1 %甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2%亚甲蓝溶液8ml，摇匀，即得。

甲基红—溴甲酚绿混合指示液取0.1 %甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2 %溴甲酚绿的乙醇溶液30ml，摇匀，即得。

甲基橙指示液取甲基橙0.1g，加水100ml使溶解，即得。

变色范围pH3.2〜4.4 （红-黄）。

常用试剂配方

常用试剂配方1. 10×YNB(13.4%的无氨基酸酵母氮源)：100mL ： 13.4gYNB(含硫酸铵)固体溶于100mL 去离子水，过滤灭菌，4℃保存；2. 500×B （0.02%生物素）：100mL ：生物素(Biotin)20mg 溶于100mL 去离子水，过滤灭菌，4℃保存；3. 10×M(5%甲醇)：100mL ：5mL 甲醇与95mL 去离子水混合，过滤除菌，4℃保存。

4. 1M 山梨醇：100mL ：18.2g D-山梨醇溶于100mL 去离子水，过滤除菌，4℃保存。

5. 1M 的磷酸缓冲液(pH6.0)：1L ：将 132mL 1M 的磷酸氢二钾（K 2HPO 4）和 868mL 1M的磷酸二氢钾（KH 2PO 4），用磷酸和氢氧化钾调pH 值到6.0, 过滤灭菌，常温保存；6. 10×GY(10%的甘油)：1L ：100mL 甘油溶于900mL 去离子水，过滤灭菌，室温保存；7. 10×D （20％葡萄糖）：1L ：200g D-葡萄糖溶于1L 去离子水，过滤灭菌，4℃保存；6. YPD 完全培养基：1L ：酵母粉 l0g ，蛋白胨 20g ，溶于900mL 去离子水，湿热灭菌30min ，冷却后加入100mL 10×D ，4℃保存（固体培养基含1.5%琼脂，一同湿热灭菌）7. 选择培养基MD ：100mL ：向80mL 水中加琼脂糖2g(终浓度20 g/L) 121℃湿热灭菌 20分钟，待温度降至60℃以后在超净台上加入10×YNB 10mL(终浓度13.4 g/L)，500×生物素0.2mL(终浓度4×10-4 g/L)，10×D(20%葡萄糖)10mL(终浓度20 g/L)。

8. 选择培养基MM ：100mL ：向80mL 水中加入琼脂糖2g(终浓度20 g/L) 121℃湿热灭菌20分钟，待温度降至60℃以后在超净台上加入10×YNB 10mL(终浓度13.4 g/L)，500×生物素0.2mL(终浓度4×10-4 g/L)，10×M(5%甲醇) 10mL(终浓度0.5%V/V) 9 .诱导表达培养基BMGY ：1L ：酵母粉 10g ，蛋白胨 20g ，溶于700mL 去离子水，湿热灭菌20min ，冷却后加入100mL 1M ，pH6.0，磷酸钾缓冲液，100mL 10×YNB ，2mL 500×B ，100mL 10×GY ，4℃保存10.诱导表达培养基BMMY ：1L ：酵母粉 l0g ，蛋白胨20g ，溶于700mL 去离子水，湿热灭菌30min ，冷却后加入100mL 1M pH6.0磷酸钾缓冲液，100mL 10×YNB ，2mL 500×B ，100mL 10×M ，4℃保存。

20几种常用试剂配置方法

3、1mol/L 氯化钙
（1）配制方法：在20ml纯水中（Milli-Ce水或相当级别的水）溶解54g Cacl2 ? 6H2O用0.22um滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20 ℃。
（2）说明：制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用纯水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45um孔径）过滤除菌，然后聚冷至0℃。
20、Tris缓冲液溶液
（1）配制方法：在800ml蒸馏水中溶解8g Nacl、0.2Kcl和3g Tris碱，加入0.015g酚红并用Hcl调pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在15 1bf/in2（1.034 × 10 5 Pa)高压下蒸汽灭菌l为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃，X-gal溶液无须过滤除菌。
（2）说明：小心，酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
11、10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）
（1）配制方法：用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20 ℃，如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。
15、5mol/L氯化钠
（1）配制方法：在800ml水中溶解292.2g Nacl加水定容至1L，分装后高压灭菌。
16、10%十二烷基硫酸钠（SDS）
（1）配制方法：在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68 ℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。

常用试剂配制方法

试剂配制方法第 1 页共 1 页试剂配制方法当溶液出现混浊、沉淀或颜色变化时，应重新配制。

1.乙酸—乙酸钠缓冲溶液(1) PH ≈3 称取0.8g 乙酸钠(CH 3COONa 〃3H 2O),溶于水,加 5.4ml 冰乙酸,稀至1000ml.(2)PH ≈4 称取54.4g 乙酸钠(CH 3COONa 〃3H 2O),溶于水,加92ml 冰乙酸,稀至1000ml.(3) PH ≈4.5 称164g 乙酸钠(CH 3COONa 〃3H 2O),溶于水,加84ml 冰乙酸,稀至1000ml.(4)PH ≈4-5 称68.0g 乙酸钠(CH 3COONa 〃3H 2O),溶于水,加28.6ml 冰乙酸,稀至1000ml.(5)PH ≈6 称取100g 乙酸钠(CH 3COONa 〃3H 2O),溶于水,加 5.7ml 冰乙酸,稀至1000ml.2.乙酸铅溶液(100g/L)称取10g 乙酸铅,加新沸过的冷水溶解后,滴加乙酸使溶液澄清,再用同样的水稀释到100mL. 3.乙酸铅棉花的制备取脱脂棉花,用乙酸铅[Pb(CH 3COO)2〃3H 2O]]溶液(50g/L)湿透后,除去过多的溶液,晾干,保存于密闭瓶中.4.二乙基二硫代氨基甲酸银(DDTA —Ag)—三乙基胺三氯甲烷溶液(2.5g/L) 称取0.25g 二乙基二硫代氨基甲酸银,用少量三氯甲烷溶解,加入1.8g 三乙基胺,用三氯甲烷稀释至100mL.静置过夜,过滤,贮存于棕色瓶中.放在阴凉处,一周内有效.5.铜试剂溶液(1g/L)称取0.10g 铜试剂(二乙基二硫代氨基甲酸钠),溶于水,稀释至100ml.使用期为一个月.6.氯化亚锡盐酸溶液(1)氯化亚锡溶液(400g/L 盐酸溶液)称取40.0g 氯化亚锡(SnCI 2〃2H 2O),溶于40ml 盐酸中,用水稀释至100ml.(2)氯化亚锡溶液(5g/L 盐酸溶液)称取0.50g 氯化亚锡(SnCI 2〃2H 2O),溶于1ml 盐酸中(必要时加热),用水稀释至100ml. 7.氯化铁溶液(100g/L)称取10.0g 三氯化铁(FeCI 3〃6H 2O),溶于盐酸溶液(1+9)中,用盐酸溶液(1+9)稀释至100ml.8.硝酸银溶液(17g/L)称取1.70g 硝酸银,溶于水,稀释至100ml. 9.硫酸亚铁溶液(50g/L)称取5.0g 硫酸亚铁(FeSO 4〃7H 2O),溶于适量水中,加10ml 硫酸,稀释至100ml 10. 硫酸亚铁铵溶液(100g/L)称取10.0g 硫酸亚铁铵[(NH 4)2Fe(SO 4)2〃6H 2O],溶于适量水中,加10mL 硫酸,稀释至100ml. 11.溴化汞试纸称取1.25g 溴化汞,溶于25ml 乙醇,将无灰滤纸放入该溶液中浸泡1h,取出于暗处晾干,保存于密闭的棕色瓶中.。

常用试剂的配制

1、乙酸铵（5M）CH3COONH4相对分子质量77取385g乙酸铵，加入800ml超纯水，然后定容至1L。

过滤除菌。

装在密封瓶子，室温保存。

乙酸铵在热水中分解，不能高压蒸汽灭菌。

2、EDTA（0.5M，PH8.0）乙二胺四乙酸二钠C10H16N2Na2O8相对分子质量338乙二胺四乙酸C10H16N2O8取187g EDTA,2Na,2H2O，加入800ml超纯水，磁力搅拌，用NaOH（约20g）调至PH8.0，溶解后加超纯水定容至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH调至接近8.0时才会溶解。

3、NaCl（2M）相对分子质量58.5取117g NaCl，加入800ml超纯水，溶解后加超纯水定容至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

4、1mol/L Tris（三羟甲基氨基甲烷）(HOCH2)3CNH2 相对分子质量121取121g Tris碱加入800ml超纯水，加浓盐酸调PH至所需值（7.4,7.6,8.0）。

一般需要下列量的浓盐酸：PH HCl量7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml待溶液冷至室温后再调定PH值，加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。

Tris 溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03单位。

5、1×Tris EDTA（TE）:100mmol/L Tris-HCl PH8.0，40 mmol/L EDTA。

配100 ml：取1mol/L Tris-HCl PH8.010ml，0.5M EDTA 5ml，加超纯水定容至100 ml。

6、Tris-硼酸液（TBE）5×TBE：Tris碱54g，硼酸27.5g，0.5M EDTA PH8.0 20ml，加超纯水定容至1L。

1×TBE。

实验室常用试剂配制方法

实验室常用试剂配制方法一、50×TAE：称242g Tris溶于800mL 双蒸水中，加入57.1mL 冰醋酸和18.6g（或100mL 0.5mol/L，pH=8.0）EDTA，再加水定容至1L，室温保存备用。

二、1×TAE：将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。

三、LB液体培养基：称取10g蛋白胨（bacto-typtone）、5g 酵母提取物（bacto-yeast extract）和10g NaCl，溶于950mL 双蒸水中，摇动至完全溶解，定容至1L，120℃湿热灭菌20min，冷却至室温后4℃保存备用。

四、100mg/mL氨苄青霉素（Amp）：称取100mg粉末状氨苄青霉素（Amp）置于1.5mL 离心管中，加入800μL 无菌水使其完全溶解，定容至1mL，-20℃保存备用。

五、LA液体培养基：按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素（Amp）加入LB液体培养基中，4℃保存备用。

六、LB固体培养基：称取10g蛋白胨（bacto-typtone）、5g 酵母提取物（bacto-yeast extract）、10g NaCl和15g琼脂粉，溶于950mL 双蒸水中，摇动至完全溶解，定容至1L，120℃湿热灭菌20min，稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素（Amp），充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板，4℃保存备用。

（1L培养基大约可以倒40个平板）七、200mg/mL IPTG：称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中，再定容至10mL，配成200mg/mL 溶液，（用0.22μm滤膜过滤除菌，）分装为每份1mL，-20℃保存备用。

八、20mg/mL X-gal：将X-gal溶于二甲基甲酰胺，配成20mg/mL，分装后于-20℃避光保存。

九、DEPC水：将水加入干净玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%（v/v），放置过夜，高压湿热灭菌，4℃保存备用。

常用化学试剂配置

1.乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾滴定液(0.5mol/L)。

2. 乙醇制氨试液取无水乙醇，加浓氨溶液使每100ml中含NH3 9～11g，即得。

本液应置橡皮塞瓶中保存。

3. 乙醇制硝酸银试液取硝酸银4g，加水10ml溶解后，加乙醇使成100ml，即得。

乙醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。

本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。

一氯化碘试液取碘化钾0.14g与碘酸钾90mg,加水125ml使溶解，再加盐酸125ml，即得。

本液应置玻璃瓶内，密闭，在凉处保存。

医学教.育网搜集整理4. N－乙酰－L－酪氨酸乙酯试液取N－乙酰－L－酪氨酸乙酯24.0mg,加乙醇0.2ml使溶解，加磷酸盐缓冲液（取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38.9ml 与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.6ml，混合，pH值为7.0）2ml，加指示液（取等量的0.1％甲基红的乙醇溶液与0.05％亚甲蓝的乙醇溶液，混匀）1ml,用水稀释至10ml，即得。

5. 乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛1g，加乙醇9.0ml 与盐酸2.3ml使溶解，再加乙醇至100ml，即得。

6. 二乙基二硫代氨基甲酸钠试液取二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1g，加水100ml溶解后，滤过，即得。

7. 二硝基苯试液取间二硝基苯2g，加乙醇使溶解成100ml，即得。

8. 二硝基苯甲酸试液取3，5－二硝基苯甲酸1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。

9. 二硝基苯肼试液取2，4－二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液(1→2)20ml，溶解后，加水使成100ml，滤过，即得。

10. 二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g,加氯仿适量与三乙胺1.8ml，加氯仿至100ml，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。

本液应置棕色玻璃瓶中，密塞，置阴凉处保存。

11. 二苯胺试液取二苯胺1g，加硫酸100ml使溶解，即得。