电转化注意事项
电源等效变换方法及注意事项
电源等效变换方法及注意事项电源等效变换方法及注意事项在电路设计中，经常需要对电源进行处理。
为了方便设计和分析，我们需要将复杂的电源变换成等效的电源。
本文将从概念入手，详细介绍电源等效变换方法及注意事项。
一、概念电源等效变换是指将一个电源转化为另一个具有相同电学特性的电源，以便对电路进行分析和设计。
电源等效变换有两种，分别是Thevenin等效和Norton等效。
Thevenin等效是指在恒流源和恒压源之间进行等效。
也就是把一组电源电阻等效为一个电压源与一个电阻的串联，或者将一组电源电阻等效为一个电流源与一个电阻的并联。
Norton等效是指将一个电流源与一个电阻等效为一个电压源与一个电阻串联或者将一个电压源与一个电阻等效为一个电流源与一个电阻并联。
二、Thevenin等效Thevenin等效是将一个电路的某个部分用电压源和电阻串联等效的方法，这种方法可以方便我们对复杂的电路进行分析。
1.方法Thevenin等效的一般方法如下：（1）去除待等效电路中部分电源和电阻，以及与外界相连的部分。
（2）在原等效点处通过网络而不产生环流的地方，将两个端子之间的电压作为输出电压E0。
（3）将原电路中的电源电阻置于等效点处，如果原电路中没有电源电阻，则置于等效点处的作用也是等效负载，在原电路中读取等效点的电流Isc。
（4）输出电路的等效电路如图1所示。
2.注意事项在进行Thevenin等效时，需要注意以下几点：（1）等效点处是指指标流向的节点，也是输出电路的两个端点。
（2）等效点外的电源和电阻不用考虑。
（3）等效点处产生的环路电流应该为0。
（4）任何一个电源都可以转化为电压源或电流源，所以Thevenin等效和Norton等效具有对等的关系。
三、Norton等效Norton等效是将一个电路的某个部分用电流源和电阻并联等效的方法，这种方法同样可以方便我们对电路进行分析。
1.方法Norton等效的一般方法如下：（1）去除待等效电路中部分电源和电阻，以及与外界相连的部分。
电转感受态细胞的制备
电转感受态细胞的制备电转感受态细胞 (Electroporated sensitized cells) 是指通过电穿孔技术将外源 DNA 或 RNA 导入细胞内的一种技术。
该技术广泛应用于基因治疗、疫苗研究、基因编辑等领域。
本文将介绍电转感受态细胞的制备方法、原理以及注意事项。
下面是本店铺为大家精心编写的5篇《电转感受态细胞的制备》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《电转感受态细胞的制备》篇1一、电转感受态细胞的制备方法电转感受态细胞的制备方法主要包括以下步骤:1. 细胞培养：将细胞接种到培养皿中，并在适当的条件下培养细胞，使细胞生长至对电穿孔敏感的阶段。
2. 制备电穿孔缓冲液：根据细胞类型和实验需要，选择适当的电穿孔缓冲液，将其制备好。
3. 处理细胞：将细胞与电穿孔缓冲液混合，并在一定条件下进行电穿孔处理。
4. 收集细胞：将处理后的细胞收集到离心管中，并进行离心。
5. 检测细胞：通过荧光显微镜或 Western blot 等方法，检测细胞内是否成功导入外源 DNA 或 RNA。
二、电转感受态细胞的原理电转感受态细胞的原理是利用高电压电流产生的电场，使细胞膜通透性增加，从而使外源 DNA 或 RNA 通过细胞膜进入细胞内。
电穿孔过程中，细胞膜上的脂质分子重新排列，形成一个暂时的孔道，外源 DNA 或 RNA 通过这个孔道进入细胞内。
三、注意事项在进行电转感受态细胞制备时，需要注意以下几点:1. 细胞选择：不同类型的细胞对电穿孔的敏感性不同，因此需要根据实验需要选择适当的细胞类型。
2. 电穿孔缓冲液：电穿孔缓冲液的组成和浓度对电转感受态细胞的制备非常重要，需要根据实验需要进行优化。
3. 处理条件：电穿孔处理的条件，如电压、电流、时间等，需要根据细胞类型和实验需要进行优化。
4. 检测方法：检测细胞内是否成功导入外源 DNA 或 RNA 的方法需要与实验目的相符，并进行严格的对照实验。
《电转感受态细胞的制备》篇2电转感受态细胞是一种常用于分子生物学和基因工程领域的实验技术，它可以将外源 DNA 或 RNA 转入细胞中，从而实现基因转移和表达。
感受细胞的制备与电转化
一、B.subtilis感受态细胞的制备与电击转化1、培养基GM：40 mL（LB+0.5M山梨醇）：蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L，NaCl 10 g/L，3.6 g山梨醇pH=7.2；ETM：200mL电转缓冲液(0.5M山梨醇,0.5M甘露醇,10%甘油)：18g山梨醇,18.5g甘露醇,甘油；RM：10mL（LB+0.5 M山梨醇+0.38 M甘露醇）：0.9 g山梨醇，0.7 g甘露醇，LB液体培养基。
2个50ml离心管，灭菌。
2、枯草芽孢杆菌WB600感受态的制备1)在新鲜平板上挑取单菌落（小一点为好）接种于5mL的LB液体培养基中，过夜培养(12小时)；2)测量摇管内菌液的吸光值，控制好接种量，使接种完毕后培养基的吸光值在0.19~0.2 左右，培养基为5mLGM。
37℃，180r/min 培养至OD600=1.0(3-4h)左右；3)取全部菌液冰水浴10min，然后5000r/min，8min，4℃离心收集菌体；4)用40mL预冷的电转缓冲液(0.5M山梨醇,0.5M甘露醇,10%葡萄糖)洗涤离心后的菌体，5000r/min，8min，4℃离心倾去上清，如此反复漂洗3次；5)将洗涤后的菌体重悬于500µl电转缓冲液中，每管分装60µl，即为制备好的枯草芽孢杆菌感受态细胞，放于-70℃冰箱中保存。
3、枯草芽孢杆菌WB600电击转化1)向预先制备好的60µl枯草芽孢杆菌WB600感受态细胞中加入6µl重组质粒，冰水浴保温5min，然后加入到预冷的电转杯(1mm)中，电击一次，电转仪设置：2.0KV，25µF，200 Ω，电击一次(持续时间4.5-5ms)；2)电击完毕后立即加入1mL复苏培养基RM（LB+0.5 M山梨醇+0.38 M甘露醇），反复吸打几次，将溶液吸出转移到1.5 mL的离心管中，37℃，180r/min，振荡培养复苏3-5h后。
BIO-RAD电转化仪使用教程(自制)
BIO-RAD Gene Pulser Xcell Electroporation SystemBIO-RAD电转化仪使用教程（自制）cexoihtydx 20110902一电转仪示意图Figure 1 connecting the shockpad to the Gene Pulser Xcell main unit.Figure 2 Shockpod with cuvette.Figure 3 Gene Pulser Xcell front panel.二电转仪主界面在主界面中，我们经常会用到：4. Pre-set protocols和5. User protocolsPre-set protocols(预置方案)中，有Bacterial,Fungal和Mammalian三种预置方案。
下面简单介绍一下Bacterial中E. coli和Fungal中Pichia pastoris的电转化方案和注意事项。
三Electroporation of Bacterial Cells (E. coli)1 制备电转化感受态细胞1). Inoculate 5 ml of a fresh overnight E. coli culture into 500 ml of L-broth ina 2.8 L Fernbach flask.2). Grow the cells at 37°C shaking at 300 rpm to an OD600 of approximately 0.5–0.7. The best resultsare obtained with cells that are harvested at early- to mid-log phase; the appropriate cell densitydepends on the strain and growth conditions but should be about 4–5 x 107cells/ml.3). Chill the cells on ice for ~20 min. For all subsequent steps, keep the cells as close to 0°C as possi-ble (in an ice/water bath) and chill all containers in ice before adding cells. Transfer the cells to asterile, cold 500 ml centrifuge bottle and centrifuge at 4000 xg for 15 minutes at 4°C.4). Carefully pour off and discard the supernatant. It is better to sacrifice yield by pouring off a fewcells than to leave any supernatant behind.5). Gently resuspend the pellet in 500 ml of ice-cold 10% glycerol. Centrifuge at 4000 xg for 15 minutes at 4°C; carefully pour off and discard the supernatant.6). Resuspend the pellet in 250 ml of ice-cold 10% glycerol. Centrifuge at 4000 xg for 15 minutesat4°C; carefully pour off and discard the supernatant.7). Resuspend the pellet in ~20 ml of ice-cold 10% glycerol. Transfer to a 30 ml sterile Oakridge tube.Centrifuge at 4000 xg for 15 minutes at 4°C; carefully pour off and discard the supernatant.8). Resuspend the cell pellet in a final volume of 1–2 ml of ice-cold 10% glycerol. The cell concentration should be about 1–3 x 1010cells/ml.9). This suspension may be frozen in aliquots on dry ice and stored at -70°C. The cells are stable forat least 6 months under these conditions.2 电转化转化参数：Pre-set protocols (E. coli)V oltage(V) 1800Capacitance(µF) 25Resistance(ohm) 200Cuvette(mm) 11). Thaw the cells on ice. For each sample to be electroporated: place a 1.5 ml microfuge tube onice, place either a 0.1 or 0.2 cm electroporation cuvette on ice, and place a 17 x 100 mm tubewith 1 ml of SOC at room temperature.2). To a cold, 1.5 ml polypropylene microfuge tube, add 20 µl of cell suspension if electroporating in 0.1 cmcuvettes, or 20–40 µl of cell suspension if electroporating in 0.2 cm cuvettes. Add 1 to 2 µlof DNA(DNA should be in a low ionic strength buffer such as water or TE). Mix well and incubateon ice for ~1 minute. (Note: it is best to mix the plasmids and cells in a microfuge tube since the narrow gap ofthe cuvettes prevents uniform mixing.)3). From the Home screen on Gene Pulser Xcell open the Pre-set Protocols screen, then the BacterialProtocol screen (press 4, then Enter twice). When using the 0.1 cm cuvettes, press Enter to open E. coli, 1mm cuvette Protocol Detail screen. When using the 0.2 cm cuvettes, press 2 then Enter, or 3 then Enter, to select the Protocol Detail screens for E. coli to pulse at 2.5 or 3.0 kV, respectively.4). Transfer the mixture of cells and DNA to a cold electroporation cuvette and tap the suspension to the bottom. Place the cuvette in the ShockPod. Push the chamber lid down to close.5). Pulse once.6). Remove the cuvette from the chamber and immediately add 1 ml of SOC medium to the cuvette.Quickly but gently resuspend the cells with a Pasteur pipette. (The period between applying the pulse and transferring the cells to out growth medium is crucial for recovering E. coli transformants (Dower et al., 1988). Delaying this transfer by even 1 minute causes a 3-fold drop in transformation.This decline continues to a 20-fold drop by 10 minutes.)7). Transfer the cell suspension to a 17 x 100 mm polypropylene tube and incubate at 37°C for 1 hour,shaking at 225 rpm.8). Check and record the pulse parameters. The time constant should be close to 5 milliseconds. Thefield strength can be calculated as actual volts (kV) / cuvette gap (cm).9). Plate on LB plates with antibiotic.3 溶液和试剂1). L-Broth: 10 g Tryptone peptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl; dissolve in 1.0 L water.Autoclave.2). LB agar plates with selective antibiotic: prepare L broth as above, adding 15g of agar perliter. Autoclave. Cool to 55–60°C and add antibiotic. Pour 12–15 ml per 100 mm plate.3). 10% (v/v) Glycerol: 12.6 g glycerol (density = 1.26 g/cc) in 90 ml of water. Autoclave or filtersterilize.4). TE: 10 mM Tris-HCl pH 8.0, 1 mM EDTA.5). SOB: 2.0 g Tryptone peptone, 0.5 g Yeast extract, 0.2 ml 5 M NaCl, 0.25 ml 1 M KCl; dissolvein 90 ml water. Adjust pH to 7.0. Bring volume to 100 ml. Autoclave. Add 1.0 ml sterile 1 M MgCl2and 1.0 ml sterile 1 M MgSO4.6). SOC: to 100 ml SOB, add 2.0 ml sterile 1 M glucose (sterilize by filtration).4 注意事项1). 细菌电转化电压一般默认为1.8 KV即可，某些细菌可能会需要更高的电压，可以参考电转化仪器厂商的相关资料以及文献报道。
细胞电转基本步骤
细胞电转基本步骤细胞电转作为一种重要的实验技术，被广泛应用于基因工程、药物筛选、病毒研究等领域。
细胞电转是指利用电场作用将外源DNA 导入到细胞中的过程。
本文将介绍细胞电转的基本步骤，帮助读者了解该技术的操作过程。
步骤一：制备细胞需要选择合适的细胞进行电转。
常用的细胞包括大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞等。
细胞的培养条件和培养基的配方因细胞类型而异，需要根据实验要求进行调整。
在培养细胞的过程中，要保证细胞处于良好的生长状态，细胞密度适宜。
步骤二：制备质粒质粒是细胞电转的载体，质粒中携带有我们所需转入的外源DNA。
在进行细胞电转之前，需要制备质粒。
一般来说，质粒包括DNA 序列、选择标记等。
制备质粒的方法可以采用化学法、酶切法等。
制备好的质粒需要通过DNA纯化等手段进行提纯，以去除杂质。
步骤三：电转操作电转操作是整个细胞电转过程中的关键步骤。
首先，将制备好的细胞转移到电转缓冲液中，使细胞处于最佳状态。
然后，将质粒与细胞混合，形成细胞-质粒复合物。
为了提高电转效率，可以对细胞-质粒复合物进行几次冷热冲击处理。
接下来，将细胞-质粒复合物转移到预先装有电极的电转仪中。
步骤四：电转条件在进行细胞电转时，需要设置合适的电转条件。
电转条件包括电场强度、脉冲数目和脉冲宽度等。
不同细胞类型和质粒大小需要不同的电转条件。
一般来说，电场强度越高，电转效果越好，但也会对细胞造成伤害。
因此，需要根据实验要求进行调整，找到最佳的电转条件。
步骤五：复苏和筛选经过电转后，细胞需要一定的时间来复苏和表达转入的外源DNA。
复苏的条件和时间因细胞类型和质粒而异。
复苏后，可以通过添加适当的选择抗生素或荧光标记来筛选转化成功的细胞。
通过筛选，可以得到含有目标基因的细胞群。
步骤六：鉴定和分析对转化成功的细胞进行鉴定和分析。
常用的方法包括PCR、限制酶切、DNA测序等。
通过这些方法，可以验证转入的外源DNA是否正确，进一步确认转化的有效性。
细胞电转作为一种重要的实验技术，为科学研究和应用提供了重要的手段。
九年级科学电能知识点
九年级科学电能知识点电能是我们生活中非常重要的一种能量形式，被广泛应用于各个领域。
在九年级科学学习中，电能是一个重要的知识点。
本文将从电能的定义、产生方式、传输和转化，以及使用中的注意事项等方面进行详细讲解。
一、电能的定义电能是指电荷在电场内由于位置改变而具有的能量。
在物理学中，电能通常用符号"E"表示，其单位为焦耳（J）。
电能的大小与电荷的大小、电场的强度以及电荷在电场中的位置有关。
二、电能的产生方式1. 化学反应：通过化学反应可以产生电能，常见的例子是电池。
电池中的化学能在化学反应中转化为电能，从而实现电能的储存与释放。
2. 光能转化：光能也可以转化为电能。
太阳能电池板是一个典型的例子，它可以将阳光中的光能直接转化为电能。
3. 机械能转化：一些机械设备，如发电机和涡轮机等，可以将机械能转化为电能。
机械能通过转子的旋转驱动发电机转子内的导体产生感应电流，从而生成电能。
三、电能的传输和转化1. 电能的传输：电能可以通过导线进行传输。
在电路中，电能从电源中的正极流向负极，通过导线中的电子流动实现电能的传输。
此外，电能也可以通过电磁波进行传输，如无线充电技术等。
2. 电能的转化：电能可以被转化为其他形式的能量，如热能、光能和机械能等。
例如，当电流通过电阻时，会产生热量，这就是电能被转化为热能的过程。
四、电能的使用中的注意事项1. 安全用电：在使用电能时，必须遵守安全用电的原则，如不乱接乱拔电器插头、不使用损坏的电器等，以免发生火灾和触电等事故。
2. 节约用电：合理使用电能，提高能源利用效率，对环境保护和可持续发展具有重要意义。
应养成随手关灯、合理利用空调等节约用电的良好习惯。
3. 电能的保护：在使用电能时，应注意防止电能的浪费和损耗。
合理设置电路、使用高效率的电器设备，可以减少电能的损耗和浪费。
总结：本文对九年级科学中的电能知识点进行了简要介绍，包括电能的定义、产生方式、传输和转化，以及使用中的注意事项。
电转化大肠杆菌实验
电转化大肠杆菌
所需试剂和器材：
无水乙醇；70%乙醇；双蒸水；感受态细菌（-80℃冰箱）；LB培养基；抗生素（根据实验目的选择）；1.5ml ep管；电转杯；电转仪
操作步骤：
1．将电转杯以此用双蒸水、70%乙醇、无水乙醇充分清洗（很重要，否则电转杯短路，实验就会失败！），置于空气中充分晾干后，放于冰上；
2．将待电转DNA与感受态细菌混合，加入电转杯的缝隙处。
（除了腺病毒同源重组外，均使用1mm电转杯）
3．选择电转仪的Mannul选项，调节电压为1.8KV，按Pulse键进行电转；用无抗生素的LB培养基500μl冲洗电转杯中细菌，随后转入含抗生素的LB培养基中培养或涂布在抗生素平板上筛选单菌落。
注意事项：
1．电转杯要充分预冷
2．在进行腺病毒的重组实验室，要选用2mm内径的电转杯，其它均使用1mm内径的电转杯。
电转的使用方法范文
电转的使用方法范文电转是一种常见的家用电器，主要用于将电能转化为机械能以实现旋转运动，广泛应用于家庭、工业和商业领域。
以下是电转的使用方法，详细介绍了如何安全、有效地使用电转。
一、基本操作：1.充电：使用电转之前，首先需要充电。
插上电源适配器，将适配器插入墙壁插座，并将适配器插入电转底座或相应接口。
2.启动：在电转机身上找到电源开关，并打开它。
通常，开关上会有表示开和关的符号。
3.调速：电转通常具有多种速度调节选项。
根据需要，选择适当的转速档位。
一般来说，转速档位分为低速、中速和高速，可以根据不同的工作要求来调节。
二、安全操作：1.使用平稳的表面：使用电转时，将其放置在平稳的表面上，确保它不会晃动或翻倒。
2.避免过载：不要超过电转的额定功率，否则可能会引发电机过热、损坏甚至起火的风险。
3.防止液体溅入：电转通常不防水，因此需要保持干燥。
避免水、饮料等液体溅入电转中，以免引发触电等安全隐患。
4.避免长时间连续工作：电转在连续工作一段时间后通常会发热。
为了保持其正常运行和寿命，建议在工作一段时间后适当停机让其降温。
5.避免静电：使用电转时，要注意避免与易燃、易爆物质接触，以免产生静电导致危险事故。
三、使用注意事项：1.转换头选择：根据任务需要选择合适的转换头。
电转通常配有多个转换头附件，例如打磨头、切割头、打孔头等。
根据具体的使用需求选择适合的转换头。
2.安装转换头：先关闭电源开关，然后拔下原有的转换头。
拧开固定螺丝，安装新的转换头。
确保螺丝拧紧，防止转换头脱落。
3.操作台：为了方便操作，可以配备一个操作台。
操作台通常具有固定转换头的功能，使其更加稳定，同时提供舒适的工作空间。
4.安全防护装置：为了保护使用者的安全，一些电转设备配备了安全防护装置，如护罩、手柄等。
确保这些装置完好无损，并按照说明使用。
5.维护保养：定期检查电转的电源线和插头，确保没有损坏或老化现象。
清洁电转外壳，避免灰尘和杂质进入内部。
热风机的使用常识及原理
热风机的使用常识及原理热风机是一种能够产生高温热风的电器设备，通常由加热元件和风机组成。
它的主要原理是通过电能转化为热能，然后通过风机将热能传递到目标物体上。
热风机的使用常识有很多，以下是一些常见的注意事项和使用技巧：1. 安全使用：使用热风机时要确保电源插座和电源线良好接触，避免电路短路或触电等安全问题。
在操作热风机前，要先确保没有易燃物品或其他物体靠近加热元件，以免引发火灾。
使用时要注意防止触碰到加热部件，避免烫伤。
2. 适当放置：在使用热风机时，要将其放置在稳固的平面上，避免热风机倾斜或摇晃。
尽量选择通风良好的位置使用热风机，以保证热风散发和排放。
3. 清洁维护：定期清洁热风机以防止尘埃积累和堵塞。
在清洁前，确保已拔下电源插头，避免触电。
可以用软布或刷子轻轻擦拭热风机外壳和风扇叶片，并清除加热部件上的灰尘。
4. 使用环境：热风机最好在干燥的环境中使用，避免在潮湿或容易积水的地方使用，防止电路短路或其他故障。
同时，要避免在易燃气体或蒸汽密集的地方使用热风机，以免引起火灾或爆炸。
5. 使用时间：热风机通常适合短时间的使用，长时间连续使用可能会对热风机内部零件产生过热，影响使用寿命甚至引起故障。
因此，在使用热风机时要控制好使用时间，适当进行休息。
6. 使用场景：热风机适用于许多场合，如室内加热、干燥、烘烤、除湿等。
在不同的使用场景下，可以根据需要调整热风机的风力大小、温度和风向等参数。
热风机的工作原理一般可以分为以下几个步骤：1. 电能转换：当热风机接通电源后，电流通过加热元件（一般是金属丝或电热管），电能被转化为热能。
2. 热能传递：加热元件发热后，产生高温热风。
通过风机的作用，热风被吸入热风机内部，并通过出风口释放到外部环境中。
3. 风力调节：热风机通常配有多档风力调节开关，可以根据需要调整热风机的风力大小。
风力越大，热风传递的速度和范围越大。
4. 温度控制：一些高端热风机配有温度控制设备，可以根据需要设置热风的温度范围。
发电机安全操作规程注意事项
发电机安全操作规程注意事项发电机是一种能够将机械能转化为电能的设备，我们在使用发电机时需要遵守一些安全操作规程。
以下是发电机安全操作规程的注意事项。
1.熟悉使用说明书：在使用发电机之前，必须仔细阅读并理解发电机的使用说明书。
使用说明书会详细介绍发电机的操作方法、注意事项、维护方法等，确保能正确使用发电机。
2.安全检查：在使用发电机之前，必须进行安全检查。
首先检查发电机的外观是否完好无损，是否有明显的划痕或损坏现象。
然后检查发电机的电线是否有裂纹或绝缘损坏现象，确保电线可以正常工作。
最后，检查发电机的油箱是否有足够的燃油，并确保油箱密封良好。
3.安全操作：在启动发电机之前，必须确保发电机处在平稳的地面上，以防止在运行过程中发生震动。
同时，必须确保发电机远离易燃物品，以防止火灾的发生。
在操作发电机时，必须正确连接电线，确保电线没有裸露的金属线暴露在外。
在操纵开关时，必须稳定地握住发电机的手柄，以防止误操作。
4.维护保养：定期维护和保养发电机非常重要，以确保其正常运行。
定期更换发电机的机油，清洁发电机的空气滤清器，清理发电机的散热孔等。
同时，检查发电机的电线是否有损坏，以及连接件是否紧固。
在长时间不使用发电机时，必须将其存放在干燥通风的地方，以防止发电机受潮。
5.避免超载：发电机有一定的功率限制，因此我们在使用发电机时要避免超负荷运转。
超负荷运转会使发电机的负担过重，加快发电机的磨损，并可能导致发电机损坏。
因此，必须根据发电机的额定功率选择合适的负荷，以防止超负荷运转。
6.防止触电：电流是发电机产生的重要成分，因此我们在操作发电机时必须避免触电的危险。
在检查和维护发电机时，必须先断开发电机与电源的连接，避免触碰到电流所带来的伤害。
7.防止漏电：发电机使用过程中也可能出现漏电的情况。
为了防止漏电，必须定期检查发电机的绝缘性能，并及时更换有损坏的绝缘物。
8.防止过热：发电机长时间运行会产生大量的热量，因此我们在使用发电机时必须关注发电机的温度。
化学能转化为电能实验报告
化学能转化为电能实验报告一、实验目的本实验旨在通过将化学能转化为电能的实验，探究化学反应与电能转化之间的关系，加深对能量转化的理解。
二、实验原理化学能是物质内部的能量，而电能是通过化学反应产生的能量。
在本实验中，我们将利用化学反应产生的电能来点亮一盏小灯泡。
具体原理如下：1. 化学反应：选择一种适合的化学反应，例如铜和硫酸之间的反应。
在反应过程中，铜会被氧化，而硫酸会被还原，释放出电子。
2. 电化学反应：将反应物质置于两个电极之间，一个是阴极，一个是阳极。
电子从阴极流向阳极，形成电流。
3. 点亮灯泡：将电流通过导线连接到灯泡上，电能会被转化为光能，从而点亮灯泡。
三、实验步骤1. 准备实验器材：电源、导线、灯泡、两个电极、铜片、硫酸溶液等。
2. 搭建电路：将电源与灯泡通过导线连接，确保电路的通路畅通。
3. 将铜片浸泡于硫酸溶液中，使其与硫酸发生化学反应。
4. 将铜片连接到阴极，另一端连接到电源的负极；将另一个电极连接到阳极，另一端连接到电源的正极。
5. 打开电源，观察灯泡是否点亮。
四、实验结果与分析通过实验，我们成功地将化学能转化为电能，点亮了灯泡。
这表明在化学反应过程中，释放出的电子能够形成电流，并且可以被导线传递到灯泡上，转化为光能。
五、实验总结通过本实验，我们深入了解了能量转化的过程。
化学能转化为电能的实验不仅实践了能量转化的基本原理，还展示了化学反应与电能转化之间的密切关系。
通过该实验，我们对化学能和电能的概念有了更加清晰的认识，并且加深了对能量转化的理解。
六、实验注意事项1. 实验过程中应注意安全，避免接触化学药品和电流。
2. 选用适当的化学反应和电源电压，避免过高的电流对实验设备和人身造成伤害。
3. 实验结束后，应将实验器材清洗干净，恢复实验环境的整洁。
七、拓展实验在本实验的基础上，可以进一步拓展，例如通过改变化学反应的种类和条件，观察电能转化的效果是否有所不同；或者通过改变导线材质和长度，探究电能传导的影响等。
电转化仪注意事项
电转化仪注意事项电转化仪是一种将电能转化为其他形式能量的设备，广泛应用于能源转换、工业制造和科学实验等领域。
在使用电转化仪时，需要注意以下几个方面：1. 设备选择：根据使用需求选择合适的电转化仪，包括功率、电压、电流、频率等参数。
同时要考虑设备的质量和性能，选择可靠、稳定、耐用的产品。
2. 安装环境：电转化仪应安装在干燥通风、无尘、无腐蚀性气体和化学物质的环境中。
应避免阳光直射和高温、高湿等条件，以免影响设备性能和寿命。
3. 电源接入：将电转化仪连接到稳定可靠的电源上，避免电源电压过高或过低对设备造成损害。
在接线过程中，要确保线路连接牢固，防止漏电、短路等安全隐患。
4. 操作规范：使用前请仔细阅读设备的说明书和操作指南，了解设备的使用方法、注意事项和安全警示。
操作时要按照规范操作，不得擅自改变设备的参数或连接方式，以免引发意外或损坏设备。
5. 温度控制：一些电转化仪需要在一定温度范围内工作，为了确保设备的正常工作，请保持恒定的工作环境温度。
同时要注意设备的散热问题，避免发热元器件过热，影响设备性能和寿命。
6. 维护保养：定期对电转化仪进行维护保养，保持设备的清洁和正常工作状态。
定期检查设备的电源线、连接线、绝缘层、接地线等，确保设备的安全运行。
如果发现故障或异常，应及时停机检修或联系售后服务。
7. 负荷控制：在使用电转化仪时，应避免超过设备的额定负荷，以免损坏设备或影响设备寿命。
如果需要提高负荷或长时间工作，可以选择大功率、高性能的设备，确保设备安全可靠。
8. 防护措施：在使用电转化仪时，应戴好个人防护装备，如护目镜、防护手套等，避免因操作不当而造成伤害。
同时要遵守相关的安全操作规范，禁止在设备工作时进行非法操作或触摸设备内部部件。
9. 停机操作：在停止使用电转化仪时，应先关闭设备的电源开关，再拔掉电源插头。
切勿用湿手触摸设备或插拔线缆，以免触电或造成设备故障。
设备长期不用时，应妥善存放并定期开机检查，保持设备的正常使用状态。
质粒电转化注意事项
质粒电转化注意事项质粒电转化是一种常用的DNA转染技术，用于将外源DNA转化到细菌或真核细胞中。
该技术在基因工程、分子生物学和生物医学研究中具有广泛的应用。
在进行质粒电转化实验时，有一些注意事项需要遵循，以确保实验的成功和数据的可靠性。
1. 选择合适的宿主细胞：宿主细胞是进行质粒电转化实验的基础，常用的宿主细胞有大肠杆菌等细菌和哺乳动物细胞。
选择合适的宿主细胞要考虑到宿主细胞的生长特性、耐受性和转化效率等因素。
2. 准备高质量的质粒DNA：质粒DNA是进行质粒电转化实验的关键，需要通过合适的方法提取和纯化。
质粒DNA应该具有高纯度、较高的浓度和完整的DNA序列，以确保转化效率和转化后的表达。
3. 质粒的选择和构建：选择合适的质粒和确认质粒的正确构建也是质粒电转化实验的重要步骤。
质粒应该包含所需的基因或转录子以及适当的选择标记，以方便转化细胞的筛选和鉴定。
4. 电转化条件的优化：电转化条件，包括电压、电容量和电极间距，需要进行优化。
不同的细胞类型和不同的质粒可能需要不同的转化条件，通过实验确定最佳的转化参数，可以提高转化效率。
5. 预处理细胞：在进行质粒电转化前，需要对细胞进行一些预处理，以提高宿主细胞对外源DNA的摄取和存活率。
常用的预处理方法包括向培养基中加入CaCl2，调整温度和存放时间等。
6. 控制质粒浓度：质粒转化效率与质粒浓度密切相关，过低或过高的质粒浓度都会降低转化效率。
因此，在转化实验中要控制好质粒的浓度，并进行合适的测量和稀释。
7. 转化后的筛选和检测：转化后的细胞需要进行筛选和鉴定，以确定质粒转化的有效率。
筛选的方法可以使用选择培养基和选择标记基因等。
在鉴定过程中，可以通过PCR、限制性内切酶切割和测序等方法进行验证。
8. 反复实验或优化：质粒电转化实验的结果不一定是理想的，可能需要进行反复试验和优化。
可以考虑调整转化条件、改变质粒构建和使用不同的细胞株等方法。
总之，质粒电转化是一项需要耐心和技巧的实验技术。
充电交流的基本原理解析
充电交流的基本原理解析充电交流是指利用交流电源给电池充电的过程。
在现代社会中，随着电动汽车、电子设备的普及，充电交流的需求也越来越大。
了解充电交流的基本原理，对于正确、高效地进行充电操作具有重要意义。
本文将对充电交流的基本原理进行解析。
一、交流电的特点交流电是一种周期性变化的电流，其波形通常是正弦曲线。
在交流电中，电流的方向和大小都会随着时间的变化而发生改变，从而形成一种变化的周期性现象。
交流电的参数通常用频率、幅值、相位等来描述。
二、充电交流的原理充电交流是通过交流电源将电能传输到电池中的过程。
在这个过程中，需要实现电源的连接、电流的传输和电能的转化。
下面将对充电交流的主要原理进行分析。
1. 电源连接首先，将充电器的插头插入交流电源插座，确保充电器与电网连接。
在插头插入插座时，充电器内部的开关将接通，使得交流电能够传输到充电器内部。
2. 电流传输充电器内部的电路通过变压器等元器件，将交流电源的电压调整为适合电池充电的电压。
然后，经过整流电路将交流电转换为直流电。
直流电会经过滤波电路，使得电流的波形更为平稳。
最后，经过充电插座和电线，将直流电传输到电池中。
3. 电能转化电池接收到直流电后，开始将电能进行转化。
电池内部的化学反应使得电能被转化为化学能，并以化学形式储存起来。
这样就完成了电能的转化过程。
三、充电交流的注意事项在进行充电交流时，需要注意以下几个方面，保证充电效果和安全性。
1. 充电器选择选择符合国家标准且符合充电设备要求的充电器，以确保充电过程中的稳定电压和电流输出。
2. 充电环境充电应选择通风良好、温度适宜的环境，并远离易燃易爆物品，确保充电过程的安全。
3. 充电时间控制在充电时应控制好充电时间，不宜长时间过度充电，避免电池过热、电解液腐蚀等问题。
4. 充电过程监测充电过程中应时刻关注充电器、电池的温度、电流、电压等数据，确保正常、安全的充电状态。
四、充电交流的应用领域充电交流广泛应用于电动汽车、手机、平板电脑、无线耳机等设备的充电过程中。
电转化注意事项
．连接产物纯化1．将连接产物转移至一1.5ml Eppendorf管中，加入下列试剂:10ul of ddH2O2ul of 3M NaAC（PH5.2）50ul of 无水乙醇轻轻混匀，稍微离心并将其置于-20℃放置1小时以上；2.4℃，top Speed 离心30分钟；3.小心移去上清，避免接触到管底的沉淀物；4.加入500ul70％的乙醇，轻轻颠倒几次洗涤沉淀（注：不要离心混匀）；5.4℃，top Speed离心5分钟；6.小心移去上清，将此Eppendorf管置空气中直至无乙醇气味；7.加入10ulddH2O重新溶解沉淀，4℃短期保存，-20℃长期保存备用；3.电转化1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞，置于冰上解冻；2. 取1 μl 纯化后的质粒于一1.5ml的离心管中，将其和0.1CM的电极杯一起置于冰上预冷。
3. 将40～100ul解冻的感受态细胞转移至此1.5ml 的离心管中，小心混匀，冰上放置10min。
4. 打开电转仪，调至Manual，调节电压为2.1KV。
5. 将此混合物转移至已预冷的电极杯中，轻轻敲击电极杯使混合物均匀进入电极杯的底部；6. 将电极杯推入电转化仪，按一下pulse键，听到蜂鸣声后，向电击杯中迅速加入1000μl的SOC液体培养基，重悬细胞后，转移到1.5ml的离心管中。
7．37℃，220－250rpm复苏1小时。
8. 取20ul转化产物加160ulSOC涂板，放于37℃温室，过夜培养，次日查看转化结果。
其余菌液加1：1的30％的甘油后混匀－80℃保存。
4.电击杯清洗流程1．用清水将电击杯稍冲一下。
2．向电击杯中加入的75%酒精浸泡2hr。
3．弃去酒精，再用蒸馏水冲洗2~3遍，然后用1ml的枪吸取超纯水反复吹打电击杯10遍以上。
4．加入无水乙醇2ml于电击杯中，浸泡30分钟。
5．弃去无水乙醇，于通风厨内挥干乙醇。
6．将清洗好的电击杯放入-20 ℃冰箱内待用。
细菌转化实验注意事项
细菌转化实验注意事项细菌转化实验是基因工程中常用的技术手段之一，它可以将外源DNA导入到细菌中，使其表达新的蛋白质或产生新的特性。
然而，这项实验涉及到许多技术细节和注意事项，只有注意到这些问题，才能保证实验的成功和准确性。
下面将详细介绍细菌转化实验的注意事项。
一、菌种的选择在进行细菌转化实验时，菌种的选择非常重要。
一般来说，大肠杆菌是最常用的宿主细菌，因为它具有较高的转化效率和广泛的遗传工程工具。
但是，不同的宿主细菌对DNA的摄取方式和效率不同，因此应根据实验的需要选择合适的宿主细菌。
二、DNA的制备在进行细菌转化实验之前，需要先制备好外源DNA。
DNA的制备应该避免过度纯化和过度稀释，以免影响转化效率。
此外，在制备DNA时应注意避免DNA的降解和污染，以保证DNA的完整性和纯度。
三、细胞的生长条件在进行细菌转化实验时，细胞的生长条件也非常重要。
一般来说，细胞的生长温度、培养基成分、培养时间等都会影响转化效率。
因此，在进行实验之前，应根据实验的需要选择合适的培养基和生长条件，并进行充分的预处理和优化。
四、化学转化和电转化细菌转化实验有两种常用的方法：化学转化和电转化。
化学转化是利用化学试剂将外源D NA引入到细胞内，而电转化则是利用电场将DNA引入到细胞内。
两种方法各有优缺点，应根据实验的需要选择合适的方法。
在进行化学转化和电转化时，应注意试剂的用量和浓度、电场的强度和时间等参数，以保证转化效率和细胞的存活率。
五、质粒的选择和构建在进行细菌转化实验时，还需要选择合适的质粒和构建相应的载体。
质粒的选择应根据实验的需要选择不同的质粒，比如选择含有适当的启动子、选择子和标签的质粒。
构建载体时，应注意避免过度的修饰和改变，以免影响载体的稳定性和表达效率。
六、转化效率的检测在进行细菌转化实验后，需要对转化效率进行检测。
一般来说，可以通过菌落PCR、荧光素酶活性检测、Western blot等方法来检测转化效率。
电转复 操作指南
电转复操作指南摘要：一、电转复操作简介1.电转复的定义2.电转复的原理二、电转复操作流程1.准备工作2.操作步骤3.注意事项三、电转复操作技巧与常见问题1.操作技巧2.常见问题及解决方法四、电转复操作的安全性与维护1.操作安全性2.设备维护五、电转复操作的应用领域1.医学领域2.农业领域3.其他领域正文：电转复操作指南电转复，即电化学转复，是一种通过电化学方法实现物质转化的过程。
该过程涉及到电极、电解质、电流等多个因素，广泛应用于各个领域。
本文将对电转复操作进行详细介绍，包括操作流程、技巧与常见问题、安全性与维护以及应用领域。
一、电转复操作简介电转复是一种将电能转化为化学能的过程，通常在电极与电解质之间发生。
电极在电解质中发生氧化还原反应，从而改变物质的性质。
电转复原理简单，但涉及到的领域广泛，包括医学、农业、化工等。
二、电转复操作流程1.准备工作：检查电极、电解质、电流表等设备是否正常，确保实验环境安全。
2.操作步骤：将电极插入电解质中，连接电流表，开启电源，调整电流大小，进行氧化还原反应。
3.注意事项：操作过程中要遵循安全规程，避免触电、短路等危险情况。
三、电转复操作技巧与常见问题1.操作技巧：合理选择电极、电解质和电流表，根据实验需求调整电流大小，熟练掌握操作技巧可提高转化效率。
2.常见问题及解决方法：如电流不稳定、电极损耗过快等问题，可能与设备选择不当或操作不规范有关，可通过更换设备或优化操作方法解决。
四、电转复操作的安全性与维护1.操作安全性：遵循安全规程，使用双绝缘手套等防护设备，确保实验过程中不发生触电、短路等事故。
2.设备维护：定期检查电极、电解质等设备，保持设备清洁，发现损坏及时更换，确保设备正常运行。
五、电转复操作的应用领域1.医学领域：电转复在医学领域的应用包括电化学疗法、心脏起搏等。
2.农业领域：电转复可用于土壤改良、水处理等农业领域。
3.其他领域：电转复在化工、能源、环境等领域也有广泛应用。
电转复 操作指南
电转复操作指南（实用版）目录1.电转复的定义和作用2.电转复的操作步骤3.电转复的注意事项正文电转复，全称电子转化复核，是一种将电子文档转化为传统纸质文档的过程。
它主要应用于政府、企事业单位等对文档有严格保密要求的场合。
电转复的过程旨在确保文档在传输、存储和使用过程中的安全性和保密性。
本文将为您详细介绍电转复的操作指南。
一、电转复的定义和作用电转复是指将电子文档通过特定的设备和技术转化为纸质文档，从而实现对文档的保密和安全管理。
电转复的过程可以确保文档在传输、存储和使用过程中的安全性，防止文档被非法获取、篡改或泄露。
二、电转复的操作步骤1.准备电子文档：首先，您需要准备好需要转化为纸质文档的电子文档。
电子文档可以是 Word、PDF 等格式。
2.安装并运行电转复软件：在您的计算机上安装电转复软件，并运行该软件。
3.选择电子文档：在软件界面中，选择需要转化为纸质文档的电子文档。
4.设置转化参数：根据您的需求，设置转化参数，如纸张大小、字体、行间距等。
5.开始转化：点击“开始转化”按钮，软件将开始将电子文档转化为纸质文档。
6.查看并打印纸质文档：转化完成后，您可以查看纸质文档，并根据需要进行打印。
三、电转复的注意事项1.确保计算机安全：在进行电转复操作前，请确保您的计算机已安装防病毒软件，以防止病毒感染。
2.选择正规软件：请选择正版、信誉良好的电转复软件，以确保转化质量和数据安全。
3.保密要求：对于涉及国家秘密、商业秘密等敏感信息的文档，请在电转复过程中严格遵守保密规定。
4.保留电子文档：在电转复过程中，建议您同时保留电子文档和纸质文档，以备不时之需。
总之，电转复操作指南旨在帮助您更好地理解和掌握电转复的过程，从而确保文档的安全和保密。
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电转化注意事项作者: global.wun(站内联系TA)发布: 2009-10-20一、制备感受态的菌液收集时间：1、准确测定OD值：OD在1.2～1.5之间。
1）为了准确测定OD值，建议将菌液稀释不同浓度测定（1、2、4、8、16倍稀释，看其OD值是否呈线性关系）。
每个倍数做3－5个重复，应该可以大致推断OD值是否准确！菌液看上去浑浊，但OD值不高，很可能OD稀释倍数不够！2）OD值是否测准也可以这样估算：OD600为40左右时，菌体湿重（6000rpm离心5min ）约0.95g/10ml。
高密度发酵时菌体湿重将相应下降。
2、75ml的菌，经18h左右的培养，最后sorbital洗涤完毕后，50ml离心管里所剩菌体特别浓，需要1ml sorbitol才可溶解为糊状。
正常培养的OD在1.2～1.5之间的500ml菌液，收集的感受态也用1ml稀释的，没那么粘稠。
可以看看降低培养温度（27摄氏度）或缩短培养时间（12h）。
3、甚至不用转接,直接挑单克隆在50－100mlYPD中摇过夜，效果也很好二、制备感受态的菌液量如果只转一个样品，50ml就够了，一般50ml的培养液如果OD值正常的话够做10管感受态的，其他的按比例缩小。
用大试管摇5ml菌液，然后取1ml毫升在1.5mlEP管中制感受态，每一步的离心时间30秒就行。
整个流程时间短，制备好的感受态用来做转化的效率很高。
山梨醇离心，洗涤的过程之后的重悬的时候注意浓度，不要过于粘稠和稀释。
三、感受态的保存感受态细胞做好后由于电转化杯还没有处理好等原因，在冰上放几个小时再做可能有一定的影响，尽量马上制备马上转化。
如果感受态细胞要保存，不需要加甘油，一般80ul EP 管分装，-70 或-80 摄氏度保存。
另附：酵母GS115点种分离纯化接种GS115于5ml YPD液体培养基，30℃，200rpm振荡过夜，涂布YPD平板，30℃培养48 小时，用YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。
四、电转化注意点：1、感受态做好后，最后一次吸出sorbital时，不是直接倒调的，而是用毛细管轻吸出来的，这样可能使剩下的感受态纯净些。
2、最后用毛细管取出100ul出来，加入质粒，混匀！（怕量不够，吸得很多，电转时效果反而不好。
）3、电转杯清洁处理:一般先冲洗，洗净；然后浸泡在75%的乙醇中；使用前我们都是放在超净台上，开启紫外，边吹风晾干，边进行紫外照射。
电转杯的新包装或重复使用可能对转化率有一定的影响。
4、电击的时候，电压数以及电击时间可以摸索一下，适当增加电压或者延长电击时间都可以。
电击条件比如 1.5kv，放电4.8～5.5ms。
电击所有过程都要尽量在冰上进行，电击时间可以减少一点，设置为5ms左右，电击之后马上加入预冷的山梨醇溶液，转移至EP管，3 0度静止培养1h。
如果菌体悬液浓度比较大的时候，在制备感受态的时候要留心一下操作中的问题了。
5、电击之后，加入1ml的山梨醇，吸入 1.5ml的ep管中，置于30度摇床低速培养1h，再涂板。
6、注意的是处理液中的DTT是在使用前加入，其它配好后于4度保存，DTT单独于-20度保存，可配成100倍的贮备液。
7、转化后1ml用sorbitol重悬的细胞悬液不能全部涂在一块板子上，按标准程序制作的感受态一般3块左右可能比较合适，以干燥后看见一薄层淡淡的白色为宜。
转化子会在白色的薄层上长出圆韵、饱满的大菌落的。
五、转化试剂和培养基的正确准备方法1、MD板子提前几天做好，放在冰箱里，涂板的时候吸收效果会好些。
如果是新板子，可能吸收不是太好，板子上有些积层，反而不利于生长。
2、YNB42度水浴一会，然后过滤除菌，YNB是加到培养基里面的，去离子水pH偏低，建议直接用蒸馏水就可以（关系不是太大）。
3、山梨醇，以及无菌去离子水均是冰冻，存放在4度冰箱中4、一般用10ug以上质粒用SalI酶切，然后直接加乙醇沉淀，70％乙醇洗一遍，约20ul d dH2O重溶。
转化效率一般大于100个克隆每ugDNA。
有人用LiCl和DTT处理细胞，转化效率很高，可以试试。
建议你不要用胶回收kit，回收的DNA可能还有盐，导致电击时放电时间很短。
5个电转化方案方法一：高效1.收集菌体取1mlGS115过夜培养物(OD约6-10) 分装到1.5ml EP管中，4℃、10000g 离心1min，弃上清，沉淀用无菌水(4℃)洗涤，同样条件下离心，弃上清。
2.菌体处理加入1ml处理液，室温下放置20min。
处理液：10mM LiAc10mM DTT0.6M sorbitol10mM TrisHCl(pH7.5)3.离心，弃上清，加入1ml 1M sorbitol ，离心，弃上清，4.用1M sorbitol洗涤二次，到最终体积约为80μl.（菌体太多可适当弃去部分）5.加入10μl.经过BglⅡ酶切处理的工程质粒，混匀后转入电击杯中，冰浴5min.6.电转. 1.5kv，25μF，200Ω条件下进行电转。
7.电击后立刻加入1mL 1M sorbitol，吸出后于30℃培养2h。
8.取一定量涂平板(YPDS + Zeocin，涂布的量分别为100、200微升，剩余的经离心处理后全部涂在一个平板上)有一点要注意的是处理液中的DTT是在使用前加入，其它配好后于4度保存，DTT单独于-20度保存，可配成100倍的贮备液。
举报删除此信息global.wun(站内联系TA)方法二：按下面步骤转化,开始每个板子只长了一二十菌落;小细节修改后,每个板长了约10 0个.步骤如下：1、目的DNA（pPIC9K)，经电泳检测已经线性化（SalI酶切）；2、DNA纯化方法是经酚仿－氯仿两步抽提后，无水乙醇沉淀的，目测定量应足够；3、GS115甘油菌经新鲜平板复苏后，5ML培养过夜，16h左右后，取菌1：100稀释，接种于70ml菌液扩大培养，14h后测得OD600约1.3左右。
4、将sorbital、水和菌液均冰浴；5、菌液离心5min－100ml冰水洗涤－50ml冰水洗涤－4ml sorbital洗涤，然后溶解于300 ul冰sorbital；6、加入约5～10ug的DNA，枪吹匀，置0.2CM电转杯静置5min；7、电击，1,5KV.8、立即加入1ml冰浴的sorbital，静止10min。
9、取100ul转化液，涂布10cm的MD平板。
做了一点修改每块板子大概能长100来个菌落（一般需要2天左右）：1、菌液收集时间：以前可能是OD值测得不太准确，我然后把菌液分别做了1、2、4、8、16倍稀释，看其OD值是否呈线性关系。
1、菌液测OD值时，建议将菌液稀释不同浓度测定，这样才准确些。
菌液看上去浑浊，但OD值不高，很可能就是你的OD稀释倍数不够！你分别稀释2倍、4倍、8倍、10倍等，每个倍数做3－5个重复，应该可以大致推断OD 值是否准确！2、我开始是先挑单克隆于5mlYPD中，过夜16h后，转接于50ml YPD中，培养大概18个小时吧。
OD值是否测准可以这样估算：OD600为40左右时，菌体湿重（6000rpm离心5mi n）约0.95g/10ml。
高密度发酵时菌体湿重将相应下降。
3、电击条件等上面帖子上都有， 1.5kv，放电4.8～5.5ms。
2、其它做法相同，就是感受态做好后，最后一次吸出sorbital时，不是直接倒调的，而是用毛细管轻吸出来的，这样可能使剩下的感受态纯净些。
3、最后用毛细管取出100ul出来，加入质粒，混匀！（我以前怕量不够，吸得很多，电转时效果反而不好。
）4、MD板子提前几天做好，放在冰箱里，涂板的时候吸收效果会好些。
如果是新板子，可能吸收不是太好，板子上有些积层，反而不利于生长。
5、你说的YNB，我用的是成品，只需要直接配制。
42度水浴一会，然后过滤除菌。
我没有加硫酸铵。
YNB是加到培养基里面的，去离子水pH偏低哦，我建议直接用蒸馏水就可以了（关系不是太大）。
方法三：简便独特在筛选高表达菌种中，与大多数人和说明书有区别(成功做出几个基因):每次转化前，均用多种酶BlgII/salI/sacI同时切，转化时，用GS115/KM71/KM71H同时转化，转化的条件也和大家一样，即 1.5/25/200,但是我用的是0.1的杯子，不是0.2的，转化后涂MM及YPD+0.25G，长出菌落后，即进行大规模的表达试验，直接用YPD表达的，一般48h后即进行大量的SDS-PAGE鉴定，鉴定时，样品不用浓缩，直接上样，看到目的带后再做PCR，测序。
方法四：没有转化子（无aa的YNB和硫酸铵称好后，去离子水溶解，然后高压灭菌）1.挑取酵母单菌落，接种至含有50ml YPD培养基的三角瓶中，30℃、250-300rpm培养过夜约14h，OD600约1.32.菌液离心5min－50ml冰水洗涤－25ml冰水洗涤－2ml sorbital洗涤，然后溶解于200ul 冰sorbital；两管分装，每管100ul3.加入约5～10ug的线性化的DNA20ul，枪吹匀，置0.2CM电转杯冰浴5min；4.电击，1,5KV.使用的是Eppendorf 2510，用于转化细菌及酵母。
5.立即加入1ml冰浴的sorbital，静止1h。
将菌体悬液涂布于MD平板上，每300μl涂布一块平板；方法五: 和Invitrogen公司说明书差不多的方法X33菌株于100ml YPD摇到OD600约1.1-1.3，太高影响感受态效率(1) 1500－1700g离心5min，将离心管倒置在吸水纸上轻轻控几下，充分弃上清(2) 加入100ml 冰浴的超纯水ddH2O，可在振荡器上振荡混匀，可静置3－5分钟(3) 离心，弃上清，再加100ml ddH2O洗一遍(4) 离心，弃上清，加20ml 冰浴1M Sorbitol洗一遍(5) 离心，弃上清，菌体置于冰浴中，加入约100－200ul Sorbitol混匀加入Sorbitol量需自己调整，这时菌液很浓，只要能够用200ul黄枪头吸出来就可以了，一般共有约400－500ul，够做几管感受态了。
(7) 吸取100－150ul感受态到线性化的DNA中，用枪头打匀或手指弹匀静置5min，于2mm电转化杯中，电击参数： 1.5KV，25uF，200欧姆（不是400），一般放电时间在4.5-4.9ms之间，小于4说明你的DNA盐浓度太高(9) 立即加入1ml Sorbitol，转入10ml 离心管，30度静置1小时，然后加入1ml YPD，30度，200rpm摇1小时，取50－200ul菌液涂100ul/ml YPDS板(10) 一般转化效率可以达到：200个以上转化子每200ul菌液，足够筛选表达菌株了。