第一章酶催化讲义反应动力学
酶催化反应动力学
适pH.
在不同pH条件下进行某种酶促化学反应， 然后将所测得的酶促反应速度相对于pH 来作图，即可得到钟罩形曲线。
图 pH对酶活力的影响
• 各种酶在一定条件下都有其特定的最适pH， 因此最适pH是酶的特性之一。 • 但是酶的最适pH并不是一个常数，它受诸 如底物种类和浓度、缓冲液种类和浓度等 众多因素的影响，因此只有在一定条件下 最适pH才有意义。
这是由于温度升高，虽然可加速酶的催化反应速率， 同时也加快了酶的热失活速率。
• 只有在某一温度条件下， 酶促化学反应速度达到 最大值，通常把这个温 度称为酶促化学反应的 最适温度(optimum temperature)。
• 在一定条件下每种酶都 有其催化反应的最适温 度。 图 温度对酶促反应速度的影响
• 如，蛋白酶只能催化蛋白质的水解，酯酶只催化 酯类的水解，而淀粉酶只能催化淀粉的水解。若 用一般催化剂，对作用物的要求就不那么严格， 以上三类物质都可以在酸或碱的催化下水解。
绝对专一性
酶只作用于特定结构的底物，进行一种专一 的反应，生成一种特定结构的产物 。
如：
NH2 O C NH2 尿素 NH CH3 O C NH2 甲基尿素 + H2O 脲酶 + H2O 脲酶 2NH3 + CO2
酶催化反应动力学
1. 酶催化作用特性
酶和一般催化剂的共性
• 用量少而催化效率高；在反应中其本身不被消耗， 极少量就可大大加速化学反应的进行。
• 它能够改变化学反应的速度，但不能改变化学反 应平衡。缩短平衡到达的时间，而不改变反应的 平衡点。它对化学反应正逆两个方向的催化作用 是相同的。
• 酶能够稳定底物形成的过渡状态，降低反应的活 化能，从而加速反应的进行。
酶催化反应机理与动力学
酶催化反应机理与动力学酶是一种生物催化剂，可以加速生物体内大量的反应。
其作用原理是更改反应活化能，从而改变反应速度。
酶催化反应机理和动力学的研究，对于理解生命现象和开发生物制品具有重要意义。
酶催化反应机理酶和它所催化的反应之间具有高度特异性。
酶能够选择性地与它的底物或反应物结合，形成酶-底物复合物。
在这种状态下，酶能够更改底物的电子云密度和空间结构，从而改变反应速率。
在酶-底物复合物形成之后，发生了酶活化。
酶活化机制通常与这个复合物的结构和构象变化有关。
酶的结构和构象可以在空间中调整，以适应底物的分子大小和构象。
这样，酶可以保持复合物的相对稳定性，并在反应结束后解离复合物，释放产品。
酶催化可以通过两种基本的机制实现。
一种是物理催化机制，另一种是化学催化机制。
通过物理催化机制，酶可以影响底物分子之间的相互作用，以增加它们之间发生反应的可能性。
通过化学催化机制，酶可以调整底物分子的电子结构，从而使它们更容易发生反应。
酶催化反应动力学酶催化反应动力学是研究酶催化作用的动力学参数，例如反应速率和物质浓度的变化。
酶反应速率是酶作用强度和催化反应条件（如底物激活能、温度和pH）的函数。
酶催化反应动力学可以通过酶反应速率方程来描述。
酶反应速率方程基于酶和底物的浓度，以及温度和pH等因素。
通常情况下，酶反应速率方程可以表示为：v = k [E][S]其中，v 是反应速率，[E] 是酶的浓度，[S] 是底物的浓度，k是反应常数。
酶反应速率方程表明，酶催化速率与酶和底物的浓度有关。
当酶的浓度增加或者底物的浓度降低时，酶反应速率也会增加。
除浓度外，反应条件对酶反应动力学也有重要影响。
例如，温度影响酶和底物之间的自由能变化和复合物的构型。
pH可以影响酶的电荷状态和酶催化剂的亲和力等特性。
这些因素都是在开发新的药物和生物工艺制品时需要考虑的关键因素。
结论酶催化反应机理和动力学是生物化学和工业生命科学中的重要领域。
对酶催化反应的深入研究，可以为药物开发和生物制品制造提供基本知识。
酶催化反应机制课件
酶的活性受到温度、pH值、抑制剂和激活剂等多种因素的影响。
03
酶的分类与命名
根据酶所催化的反应类型，可以将酶 分为氧化还原酶类、水解酶类、转移 酶类、裂合酶类和合成酶类等。
酶的命名一般采用系统命名法，根据 其催化的反应和底物特点进行命名， 例如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。
酶的结构与功能
酶的结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构等 层次，其中一级结构是指氨基酸的排列顺序，二级结构是指 肽链的折叠方式，三级结构是指蛋白质的三维空间结构。
酶的抑制作用
04
竞争性抑制
定义
竞争性抑制是指抑制剂与底物在 酶的活性中心竞争性结合，降低 酶与底物的亲和力，从而抑制酶
的活性。
特点
抑制剂与底物结构类似，能与底物 争夺酶的同一可结合位点，从而干 扰底物与酶的结合。
实例
例如，丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞 争性抑制，因为丙二酸与琥珀酸在 酶的活性中心发生了竞争性结合。
酶的未来发展将面临一些挑战，如提 高酶的稳定性和降低生产成本等。
THANKS.
酶的催化机制模型
锁钥模型
酶活性中心与底物的形状和化学性质相匹配，如同锁与钥匙的关 系。
诱导契合模型
酶与底物结合后诱导酶的构象变化，使酶活性中心更好地适应底物。
三点附着模型
酶活性中心的三个关键位点与底物的三个可结合点相匹配，形成稳 定的复合物。
酶促反应动力学
03
酶促反应速率与底物浓度关系
1 2 3
底物浓度对酶促反应速率的影响
随着底物浓度的增加，酶促反应速率通常会加快， 但当底物浓度达到一定值后，反应速率将不再增 加。
酶饱和现象
当底物浓度增加到一定值时，酶促反应速率达到 最大值，此时酶已经饱和，底物浓度再增加也无 法提高反应速率。
酶催化反应的动力学和热力学模型
酶催化反应的动力学和热力学模型酶催化反应是生命体系中关键的一环，它在细胞代谢、信号传导、免疫反应等生命活动中发挥着至关重要的作用。
酶催化反应的动力学和热力学模型则是研究这些反应本质和控制机制的关键工具。
本文将介绍酶催化反应的动力学和热力学背景，探讨几种常见的酶催化反应模型，并简述大分子反应的特点及控制机制。
一、酶催化反应的动力学和热力学背景酶催化反应是指在生物体内，酶作为催化剂促进化学反应的进行。
酶能够显著降低反应所需的能垒，从而提高反应速率。
这是因为酶与底物之间形成的酶底物复合物能够在化学反应中提供一个更加稳定的、能量较低的过渡态，从而降低反应所需的能量和活化能。
在酶催化反应中，反应速率是非常重要的一个参数。
反应速率和底物浓度、酶浓度、反应温度等因素相关，因此需要建立反应速率的动力学模型。
此外，酶催化反应的热力学特性也是研究的关键点之一，热力学模型的建立可以帮助我们理解反应的驱动力和热力学限制。
二、几种常见的酶催化反应模型1. 米高斯-明茨动力学模型米高斯-明茨动力学模型是最早提出的酶动力学模型之一。
这个模型假设底物结合酶的速率比化学反应速率快很多，因此酶底物复合物的形成是反应速率的控制步骤。
当底物浓度很低时，酶活性不会受到抑制。
但是随着底物浓度的增加，酶活性会逐渐达到饱和，反应速率也会趋于常数。
2. 酶抑制模型酶抑制模型是一种描述酶和抑制剂之间互作关系的动力学模型。
抑制剂可以直接地或者通过结合酶活性部位抑制酶的活性。
在酶活性被抑制的情况下，反应速率呈现非线性关系，其动力学方程可以写成一个双曲线形式。
3. 酶电化学模型酶电化学模型结合了动力学和电化学的理论，描述酶催化反应的电化学过程和催化剂对电极反应动力学的影响。
这种模型在电化学和生物传感领域有着广泛的应用。
三、大分子反应的特点及控制机制除了小分子酶催化反应，大分子反应也是生物体系中一种重要的反应类型。
大分子反应包括蛋白质合成和降解、DNA复制和修复等过程。
酶催化反应机理与动力学分析
酶催化反应机理与动力学分析酶是一种生物催化剂，其存在速度远快于非酶催化的化学反应，而且能够高度选择性地催化特定反应。
酶催化反应机理和动力学分析是当前生物技术与医药学领域的热门研究方向之一。
一、酶催化反应机理酶催化反应的机理可以分为两个阶段：反应前期和反应后期。
反应前期包括酶与底物结合、酶底物复合物的构成、酶底物复合物向过渡态的转化等，在此期间，酶的底物亲和力是至关重要的。
底物在进入酶分子内部前，需要先经过酶的活性位点，同时酶通过某些氨基酸残基与底物形成的亚结构使得中间产物更有利于进一步反应。
反应后期是逐步分离酶与产物、催化过程的结束。
在酶催化反应过程中，有关酶和底物结合的问题是最基本的。
酶和底物的结合解决了基本的反应前期问题。
酶的活性结构上的微细构造可以使酶和底物发生拟吸附，从而加速活性物质的靶向作用，而底物分子的局部作用，也可以促使中间产物更趋于产生。
化学反应的速度还会受到其他条件的影响。
二、酶催化反应动力学酶催化反应的动力学是对反应速率的研究。
酶催化反应速度受到各种因素的影响，包括温度、pH值、底物浓度和酶浓度等。
底物浓度是影响酶催化动力学的关键因素。
在低浓度条件下，酶过程的速率与底物浓度的关系呈指数关系；而在高浓度条件下，速率与底物浓度的关系则将趋于平稳。
反应的速率也跟温度有着密切的关系。
在常温下，酶美中心的活性结构是在水分子中拥有最佳亲和力的，因此当温度过低时，酶的活性会下降。
同时，过高的温度则会造成酶分子氨基酸残基的变性而导致酶失去催化活性。
除了温度和底物浓度外，pH值也会直接影响到酶催化反应的速率。
不同酶的最适pH值范围不相同，某些酶在低pH值下尤其活跃。
三、总结酶催化反应机理和动力学分析是当今生物技术和医药学领域的热门研究方向之一。
酶催化的反应机理研究对于揭示生物化学过程奠定了基础；而酶催化反应动力学则为生命科学研究提供基本方法和技术工具，同时也为药物研发和生物工程开发提供了指引。
酶催化反应动力学概况课件
目 录
• 酶催化反应动力学概述 • 酶催化反应的速率方程 • 酶促反应的速率常数与酶活性 • 酶促反应的抑制剂与激活剂 • 酶催化反应的动力学应用
01
酶催化反应动力学概述
酶的定义与特性
总结词
酶是一种生物催化剂，具有高度专一性和高效性的特性，能够加速生物体内的 化学反应。
03
利用酶的催化作用可以构建生物传感器，用于检测生物分子或
小分子物质，用于医学诊断和环境监测。
酶催化反应在农业领域的应用
有机肥料生产
利用酶催化反应可以将农业废弃物转化为有机肥料，提高土壤肥 力。
生物农药
通过酶的催化作用可以合成具有杀虫、杀菌或除草功能的生物农药 ，减少化学农药的使用。
转基因作物
通过基因工程技术将酶编码基因导入作物中，以提高作物的抗逆性 、产量和品质。
蛋白质工程
通过酶催化反应对蛋白质进行定向进化或改造，以优化蛋白质的性 能，应用于生物医学、工业和农业等领域。
酶催化反应在医药领域的应用
药物研发
01
酶催化反应可用于合成新药或优化现有药物的合成路线，降低
药物的生产成本。
疾病诊断
02
某些酶的活性与某些疾病相关，通过检测酶的活性可以用于疾
病的诊断。
生物传感器
金属离子
如Mg^2+、Zn^2+等， 能够通过提供催化活性所 需的电子或稳定酶的结构 来促进酶促反应。
蛋白质
如蛋白激酶等，能够通过 磷酸化等方式激活酶的活 性。
抑制剂与激活剂的应用
药物研发
通过抑制或激活特定的酶来治疗疾病。
生物工程
在发酵工程、酶工程等领域中，利用抑制剂与激 活剂来调控酶促反应过程。
酶催化反应动力学分析
酶催化反应动力学分析酶是生物体内最常见的催化剂，能够加速化学反应的速率，使化学反应在生命体内发生。
酶结构复杂，需要在特定的温度、pH值和离子浓度等条件下才能发挥最佳催化作用。
酶催化反应动力学分析是研究酶催化反应特性和机理的重要手段。
本文将对酶催化反应动力学分析进行探讨。
一、酶催化反应动力学酶催化反应动力学是研究酶催化反应速率的学科，主要关注酶催化反应的速率常数。
速率常数即反应速度与物质浓度之间的关系。
酶催化反应基本上遵循米氏动力学（Michaelis-Menten，简称M-M）方程。
M-M方程是描述酶催化反应速率的一种数学表达式。
其中，Vmax表示酶反应速率的最大值，Km表示酶与底物结合能力的常数。
酶对底物的亲和力越强，则Km值越小，酶在底物浓度足够大的条件下，其反应速率趋向于最大值Vmax。
当底物浓度为Km时，反应速率的一半为Vmax/2。
公式：V=Vmax*[S]/(Km+[S])其中，V表示反应速率，[S]表示底物浓度。
二、酶催化反应动力学分析过程1.测定酶反应速率酶催化反应速率可以通过测定产生的产物量或消耗的底物量来反应。
通常需要对底物和产物的浓度进行测定分析。
比如，在酶催化下，葡萄糖可以被转化为葡萄糖酸，可以通过测定葡萄糖和葡萄糖酸的浓度来反应酶的催化速率。
2.绘制酶反应速率曲线在实验中，通常会对不同底物浓度下的反应速率进行测定，并将反应速率与底物浓度绘制成曲线。
根据M-M方程，当底物浓度充分大时，反应速率趋向于最大值Vmax。
曲线的最大值即为酶反应速率的最大值Vmax，曲线的一半处即为酶的底物浓度Km。
3.计算酶催化常数通过实验测定的结果，可以计算出酶的催化常数。
其中，Km越小，表示酶与底物结合的亲和力越强，反应速率越快；Vmax则表示酶催化反应的最大速率，与酶的浓度和酶的催化效率有关。
三、酶催化反应动力学分析在生物学中的应用酶催化反应动力学分析是生物学领域中的重要研究方法之一。
酶催化反应机理的研究可以帮助我们理解生物反应的基本特性，例如代谢反应和细胞信号转导等。
酶催化反应动力学(共49张PPT)
❖ 中间络合物学说最早是由 Henri和Wurtz两位科学家 提出的。
❖ 在1903年，Henri在用蔗 糖酶水解蔗糖实验研究化 学反响中底物浓度与反响 速度的关系时发现，当酶 浓度不变时，可以测出一 系列不同底物浓度下的化 学反响速度，以该反响速 度对底物浓度作图，可得 到如图3-2所示的曲线。
酶底物中间络合物学说
本质上来说就是酶的修饰抑制
竞争性抑制剂。 ⑴ Vm值降低，Km值不变；
3酶活力测定时需注意：
测定酶活力常用的方法：
❖ 有某些重金属离子如Ag 、Cu 、Hg 、Pb 等 K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Zn2+及Fe2+
图3-1 酶促反响的速度曲线 测定酶活力常用的方法：
+
2+
2+
2+
对酶的抑制作用也属于这一类。 3激活剂对酶促反响速度的影响
1 竞争性抑制 2 非竞争性抑制 3 反竞争性抑制
①竞争性抑制(competitive inhibition) ：
❖ 是最常见的一种可逆抑制作用。
❖ 大多数竞争性抑制剂与底物的结构相似，能与底
物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形 成，使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑 制作用。 ❖ 其抑制程度取决于底物和抑制剂的相对浓度，可以 通过增加底物浓度的方法来解除这种抑制作用。
竞争性抑制反响模式
❖ 在竞争性抑制中，底物(S)或抑制剂(I)与酶(E)的结合
都是可逆的，因此存在着如下的化学平衡式：
[S]>>[I]：高浓度的底物可解除抑制
图3-5 竞争性抑制曲线
特点：
⑴ Vm值不变，(表观）Km值增大； ⑵ Km随抑制剂浓度[I]的增加而增加； ⑶双倒数作图所得直线相交于纵轴； ⑷抑制作用可以被高浓度的底物减低以致消除。
酶催化反应动力学解析
酶催化反应动力学解析背景介绍：酶是一种生物催化剂，能够加速化学反应速率。
它们在许多生物体内起着至关重要的作用，包括代谢过程、信号转导、分子识别和DNA复制等。
了解酶催化反应动力学是理解生物学中许多关键过程的关键。
酶动力学：酶催化反应的动力学是关于酶催化反应速率与底物浓度、温度和pH等环境因素之间关系的研究。
通过实验测量酶活性并分析数据可以获得这些关系，这对我们理解和控制酶催化反应至关重要。
酶催化反应速率的表达式：酶催化反应速率可以用麦克斯韦-玛格努斯方程（Michaelis-Menten equation）来表达：v = Vmax * [S] / (Km + [S])其中，v是酶催化反应速率，[S]是底物浓度，Vmax是在无限大底物浓度下酶反应速率的最大值，Km是米氏常数，代表底物浓度为一半时的酶催化反应速率。
米氏常数Km的意义：酶的米氏常数Km反映了底物与酶之间相互作用的亲和力。
Km越小，酶的亲和力越大；Km越大，底物与酶的结合较弱。
Km值对于酶活性的影响非常重要，它决定了在给定底物浓度下酶催化反应速率的快慢。
酶催化反应速率与底物浓度的关系：麦克斯韦-玛格努斯方程中的[S] / (Km + [S]) 这一项表示底物浓度对酶催化速率的贡献。
当底物浓度远小于Km值时，可以简化为[S] / Km，速率与底物浓度成正比，速率随着底物浓度的增加而增加；当底物浓度远大于Km值时，可以简化为1，速率不再受底物浓度的影响。
酶反应速率对底物浓度的响应图像通常符合麦克斯韦-玛格努斯方程预测的双曲线形状。
图像的初始阶段速率随底物浓度线性增加，当底物浓度达到一定程度后，速率趋于平缓。
催化常数kcat：酶的催化常数kcat是与酶催化效率相关的参数。
它表示在单位时间内酶分子催化底物数量的能力。
kcat的大小与酶催化底物的速率相关，kcat越大，酶的催化效率越高。
抑制剂对酶催化动力学的影响：抑制剂是一种可以降低酶催化反应速率的物质。
酶催化反应动力学
式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数
（2） 顺序机制
两个底物Sl和s2与酶结合成复合物是有顺序的，酶 先与底物s1结合形成〔Es1〕复合物，然后该复合物Esl再 与s 2结合形成具有催化活性的[ES1S2]。 按同样推导方法求出下述方程式：
式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数。
[SED]为一无催化活性的端点复合物，不能分解为产物，即使增大
底物的浓度也不能解除抑制剂的影响。还有一种是三元复合物SEI 也能分解为产物，但对酶的催化反应速率仍然产生了抑制作用。
核苷对霉菌酸性磷酸酯酶的抑制属于非竞争性抑制。
非竞争性抑制的普遍机理式可表示为
对非竞争性抑制，由于抑制剂的作用使最大反应速率降低
了（1十CI/KI）倍，并且CI增加、KI减小都使其抑制程度增加。
三、反竞争性抑制动力学
反竞争性抑制的特点是抑制剂不能直接与游离酶相结合， 而只能与复合物[Es]相结合生成[SEI]复合物。
四 线性混合型抑制动力学
抑制百分数i: 表示抑制剂对酶催化反应的抑制程度.
i值愈大，表示抑制的程度愈大；
质称为竞争性抑制剂。其主要特点是，抑制剂与底物竞争酶的
活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合之后，底物就不能再 与酶结合，反之亦然。在琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸为延胡索酸 时，丙二酸是其竞争性抑制剂。
式中：I为抑制剂；(EI)为非活性复方物。 上述反应中底物的反应速率方程应为
根据稳态假设，可列出下述方程：
解 以L—B作图法来判断抑制类型并求其参数。
据此上述实验数据分别取其例数，以l／rSI对1／Cs做图，得到如 图所示两条直线，它们在纵轴有一共点交点，这表明该抑制为竞争性 抑制。
第一章酶促反应动力学
time (h)
反应时间
A
35
动力学参数rmax和Km
VPmaxk2[E0]
全部酶呈复合物状态时的反应速率，即最大初
始反应速率。
催化活性中心速率常数kcat:酶的活性中心在单位时
间内能转化底物分子为产物的最大数量，即酶的最大转换
速率。
单底物酶催化： kcat=k+2
A
36
米氏常数Km的意义
反应速率与酶浓度成正比(底物过量) 底物浓度对反应速率的影响：
非线性。底物浓度较低，反应速率随底物浓度 提高而增加；底物浓度较高，反应速率随底物浓度 的提高而趋于稳定。
A
33
底物浓度与反应速率的关系
0.24
反应速率 v (mmol/L/h)
S
0.18
0.12
12vVS,mm 0.06
0.00
0.0
3. 忽略产物的抑制作用，不考虑P+E→ES这个可逆反应的 存在。
4. [ES]在反应开始后与E及S迅速达到动态平衡, ES分解
生成产物的速度不足以破A 坏这个平衡。
23
E ＋S
k+1
k-1
ES k+2 E ＋ P
➢ 对于单底物的酶促反应:
dP
dS
dtt0 dtt0
由假设4可得到： k1[E]S []k1[E]S (1)
A
40
M-M方程动力学参数的确定
作图法(通过方程变换，将方程线性化)
✓L-B法 ✓H-W法 ✓E-H法 ✓积分法
非线性最小二乘法回归处理
✓信赖域法(Matlab的优化工具箱) ✓遗传算法(不依赖于初值，可并行计算)
A
41
第1章 酶催化反应动力学
酶促反应动力学
化学动力学：研究反应速率和反应进程 间的关系。
一级反应:反应速率只与反应物的浓度的 一次方成正比。
二级反应:反应速率与反应物浓度的二次 方(或两种物质浓度的乘积)成正比。
4.Km与Ks：Km不等于Ks，只有在特殊情况下，Km 才可表示酶 和底物的亲和力。
S + E k1
k2
ES k3
∵ Km= （k2 +k3)/k1
E+P
当k2＞＞k3时
Km ≈ k2 / k1
∴ Km可以看作ES的解离常数ks ：
[S][E] Km= ks = ————
[ES]
5. 当反应速度达到最大反应速度的90%，则
rmax CS
CI KI
)(K m
CS )
rI ,max CS Km CS
动力学特点
动力学参数的求解
动力学参数的求解（续）
1 CI
1
rI ,max
KI rmax
1
rmax
1 rmax K I CI
三、反竞争性抑制
动力学方程式
rSI
k2C[ES]
rI ,max CS
零级反应:反应速率与反应物浓度无关。
Michaelis-Menten方程(1913年)
1913年Michaelis和 Menten推导了米氏方程
v Vmax [S] K m [S]
米氏方程的特征
酶和底物的重要性 A反应速率和酶浓度的关系
酶催化反应机理和动力学
酶催化反应机理和动力学酶催化反应是生命体系中的重要过程，它们帮助维持了生物体所有复杂的代谢路径。
许多细胞机体必须通过酶催化来加速反应，使它们在体内发挥作用。
因此，了解酶催化反应的机理和动力学对于理解生物体系的基本原理和解决一些关键问题至关重要。
本文将从机理和动力学两个方面来讲述酶催化反应。
一、酶催化反应的机理酶是蛋白质的一种，能够提供活性位点来催化各种反应。
生物体系中酶的活性位点位置是非常特殊的，它们结合了反应物并促进反应。
酶是选择性的，只会催化特定的反应，这是由于酶结合位点的特殊性。
当分子接近酶的结合位点时，酶分子会形成一个复合物，这是反应的第一步。
与此同时，酶分子的活性位点就开始对反应物进行催化，这是由于它们存在与反应物化学键相互作用的基团。
当反应物结合到活性位点时，它们形成反应中间体，这是一个高能状态的中间体，使得反应能够发生。
如下所示：反应底物 + 酶 - > 过渡态中间体 - > 反应产物 + 酶除了活性位点的存在外，酶的结构上还有一些重要的特点，这些特点可以使酶以特定的方向选择性地催化反应。
例如，在某些酶中，即使存在两种互为镜像的底物，并且它们具有相同的化学性质，酶也只能选择其中的一种进行催化反应。
这常常是由于酶的立体化学结构和修饰功能造成的。
二、酶催化反应的动力学酶动力学涉及到酶反应速率和底物浓度之间的关系。
根据麦克斯韦玻尔兹曼分布定理，分子在系统中的浓度随着温度的升高而增大，从而提高了反应速率。
然而，上述分布定理仅仅适用于基础化学反应，无法解释酶催化反应。
在酶催化反应的过程中，酶并不会影响反应的热力学状态，而只会影响活化能。
这是由于酶的催化作用使得反应可以在更短的时间内完成，反应的全过程变得更加容易。
因此，酶催化反应的动力学表现为反应速率随酶浓度的增加而增加，同时也与反应底物的浓度有关。
一般来说，酶底物复合物的结合速率比较快，而反应产物的脱离速率较低。
因此，在浓度限制下，反应速率取决于底物浓度。
酶快速反应动力学第一章.ppt
是至关重要的符合物，经过一个单分子过程（1.1.4式），ES复合物形成
产物。
下面要推导出能同时满足上述两种机制的速度方程。当考虑EP复 合物的形成时，酶以三种形式存在： E, ES 和 EP。 因此，酶的总浓度为
e0 = [E]0 = [E] + [ES] + [EP] 假定在酶反应中，下述平衡迅速建立起来
这些在实验上可以测得的参数是进行动力学分析的基本常数，通常成
为速度参数或动力学常数，包括 Km, k0 (or kcat)。
现在，我们用Km , V, k0(or kcat)代替速度方程
ν=
β e0 s α+ s
中的α和，那么速度方程有如下形式
ν=
Vs
=
k0 e s0 n kcat e0 s =
Km+ s Km+ s Km+ s
1913年Michaelis and Menten 重新做了蔗糖反应转化酶催化的蔗 糖水解反应的实验。他们改进了实验条件，克服了Henri实验的缺点，采 取了如下的措施：
1. 控制水溶液的pH，使用了pH4.5的醋酸buffer; 2. 考虑了产物的变旋影响，使用NaOH终止反应，加速产物的变旋作 用。
酶的稳态动力学的基本目标是对酶催化的总反应进行测量与分析， 只涉及底物与产物，而不考察酶分子本身。
预稳态动力学可以直接研究总反应中所包含的分步反应。研究者的 兴趣所在是酶分子本身所发生的变化或能够反映这种变化的变化上。
两种动力学方法各有其优缺点。稳态动力学由于所要求酶制剂用量 少，且不需要使用特殊的仪器设备，因而长久以来获得了广泛的应用。 这种方法的缺点在于研究人员所获得的信息是间接的，有时也是不确切 的。预稳态动力学由于测量快速反应，而需要特殊的仪器设备（例如， 停流装置）。它的优点是可以提供用来解释复杂反应机制的信息。应该 指出，两种方法是相辅相成的，对于研究酶反应来说都很重要。
酶催化反应动力学
酶催化反应动力学酶是生物体内一类非常重要的催化剂，可以加速化学反应的速率，而不影响反应的化学平衡。
酶催化反应动力学，即研究酶催化反应速率的变化规律以及影响反应速率的因素。
本文将重点介绍酶催化反应动力学的基本概念、实验方法和相关影响因素。
一、酶催化反应速率酶催化反应速率是反应物转化为产物的速度。
在酶催化下，反应速率明显增加，可以达到每秒数百倍甚至上千倍。
反应速率由酶的浓度、底物浓度、反应温度和pH值等因素决定。
酶催化反应速率通常遵循麦克斯韦-玛尔计算公式，即速率v等于最大反应速率vmax与反应物浓度[S]的比例关系：v = vmax[S] / (Km + [S])。
其中Km称为米氏常数，表示反应物浓度为一半时的速率。
当[S]远大于Km时，速率v ≈ vmax，此时反应速率近似与反应物浓度成正比；当[S]远小于Km时，速率v ≈vmax[S]/Km，此时反应速率与反应物浓度成线性关系。
二、酶催化反应的实验方法进行酶催化反应动力学研究，需要了解反应速率及其影响因素。
实验方法主要包括测定酶催化反应速率的变化和测定酶的两个重要参数：最大反应速率vmax和米氏常数Km。
1. 测定酶催化反应速率的变化测定酶催化反应速率的变化，可以通过观察底物消失或产物增加的速度来确定。
常用的方法包括光度法、荧光法、比色法等。
这些方法都是通过测量反应物和产物的光学性质的变化，建立光学性质与反应速率之间的关系，来间接确定反应速率。
2. 测定最大反应速率vmax测定最大反应速率vmax是了解酶催化能力的重要指标。
最常用的方法是通过实验测量不同底物浓度下的反应速率，并将速率与底物浓度作图。
根据麦克斯韦-玛尔计算公式，绘制速率-底物浓度曲线，可以确定最大反应速率vmax。
3. 测定米氏常数Km米氏常数Km是衡量底物与酶结合力的指标。
测定Km的常用方法是选择一种底物，通过实验测量不同底物浓度下的反应速率，并将速率与底物浓度作图。
绘制速率-底物浓度曲线，可以确定Km。
第1章 酶催化反应动力学
1 酶的催化共性
它能降低反应的活化能，加快生化反应的速率；
但它不能改变反应的平衡常数，而只能加快反 应达到平衡的速率。 酶在反应过程中，其立体结构和离子价态可以 发生某种变化，但在反应结束时，一般酶本身
不消耗，并恢复到原来状态。
2.1 酶催化反应基本特征
反应过程中能的变化
2 酶的催化特性
(1) 有较高的催化效率
2.2.2 方程的特征
1、反应速率与酶浓度的关系 酶催化反应速 率和酶的浓度成正比。 2、反应速率与底物浓度的关系 为非线性的， 关系复杂。 由公式（2-12），可推出：
Cs CES 结合态酶浓度 Km CE 游离态酶浓度
（1）当Cs<<Km，即底物浓度比Km值小得多时， 该曲线近似为直线。表明反应速率与底物浓度近 似成正比，酶催化反应可近似看作一级反应：
南极假丝酵母脂肪酶 在80~90度、pH3~4仍有很强的催化活性
2.1.2 酶的活性中心
酶的活性中心系指酶分子中直接结合底物并将底物转 化为产物的部位。可分为结合部位和催化部位，也可能是 同一部位。
必需集团：活性中心内的必需集团和活性中 心外的必需集团 氨基酸残基：接触残基、辅助残基、结构残 基和非贡献残基
2.1 酶催化反应基本特征
酪氨酸酶的三维结构
2.1.3 酶的催化反应机制
1.酶作用专一性机制
钥匙学说
诱导契合学说
2.酶作用高效性机制
（1）广义的酸碱催化
（2）共价催化
（3）邻近及定向效应
（4）扭曲变形和构象变化效应
（5）多元催化与协同效应
2.2 简单的酶催化反应动力学 简单的酶催化反应动力学是指由一种 反应底物参与的无抑制不可逆反应。属于 此类反应的有酶催化的水解反应 和异构化 反应。这种简单的单底物酶催化动力学， 是酶反 应动力学的基础。
酶催化反应的分子机理和动力学
酶催化反应的分子机理和动力学酶催化反应是一种生物化学过程，能够加速和调节许多重要的细胞代谢反应。
酶分子具有高度特异性，只能催化与其所配对的底物。
酶催化反应的分子机理和动力学包含了许多复杂的生物化学过程，本文将探讨相关的知识点。
1. 酶和底物的结合酶催化反应的第一步是酶和底物的结合。
这个过程针对不同的酶，在时间和空间上都具有不同的特征。
在此过程中，酶分子会通过其催化位点、边缘酸位、氢键、疏水作用等化学作用与底物分子结合形成“酶底物复合物”。
复合物的形成使底物分子更容易被分解，从而对反应速率产生影响。
酶产生的空间构象对底物分子的结合有很大影响。
有的酶的催化位点是靠近酶分子表面，这种情况下，底物分子的溶剂化质子一般要被去掉，这有利于酶分子的催化过程。
2. 亚基间能量传递的方式酶活性中心都是由若干亚基组合而成，亚基之间通过化学键、离子键、范德华力等相互作用形成，在亚基之间有能量传递。
在硫醇酶中，丝氨酸减量使核苷酸调节的新键形成，从而催化酶活性中心内的反应。
在茉莉酸合成酶中，亚基之间通过氢键和范德华力等作用相互作用，从而形成催化活性现场。
3. 转化状态和过渡状态酶催化反应中，底物分子从其原有状态转变为另一状态，即为转化状态。
然而，在酶催化反应中，底物必须经过过渡状态，才能够转化成产物。
过渡状态是一种局部能量和结构的激发态，这种状态通常是较不稳定的，容易分解或爆炸。
4. 动力学控制酶催化反应的速率可以通过多种方式进行调节，最令人感兴趣的是，通过其分子机制来提高或限制酶催化反应的速率。
酶催化反应的速率受反应物浓度、酶活性、酶大致的平衡常数和反应温度等因素影响。
酶催化反应的速率可以通过反应物浓度的调整来改变，大多数酶催化反应都是半饱和曲线，反应速率达到最大值时，底物浓度就被饱和。
总之，酶催化反应的分子机理和动力学是高度复杂且互相关联的。
通过对其深入了解，能够帮助我们更好地理解酶催化反应的本质，并为人类更好地利用生物资源做出深入的贡献。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
二、米氏方程的动力学特征
米氏常数 最大反应速率
一级反应 零级反应
三、动力学参数的求解
L-B法
图解法
E-H法
积分法
最小二乘法
1、L－B作图法
2、E－H作图法
3、H－W作图法
4、E-C-B作图法
第三节 有抑制的酶催化反应动力学
酶的抑制作用
不可逆抑制 可逆抑制
竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制
1、快速平衡假设
限速步骤 快速平衡 酶的总量保持不变
动力学方程
rP
k2CE0CS KS CS
rP,maxCS KS C变化曲线
活性中间复合物的浓度不随时间变化 酶的总量保持不变
rp
k2CE0CS
k1k2 k1
CS
rp,maCx S KmCS
物学说。 1913年，Michaelis和Menten提出了酶催化
反应动力学基本模型---米氏方程。 1925年，Briggs和Haldane对米氏方程做了
修正，提出稳态学说。
第一节 酶催化反应概论
酶和一般催化剂的共性
能够改变化学反应的速度，但是不改变化学反 应平衡。
酶本身在反应前后不发生变化。 降低反应的活化能，加速反应的进行。
不可逆失活
CEtCE0exp kdt()
半衰期
t1 2
ln 2 kd
2、反应稳定性
反应机理
k1
ES [E]S k2EP
k1
kd
kd
D
DS
第六节 酶的界面催化反应动力学
特点
反应体系为多相体系； 反应发生在液固或者液液界面上；
1.6.1 液固界面反应动力学
1.6.2 液液界面反应动力学
rI ,max
K
' mI
rm a x Km
动力学特点
动力学参数的求解
动力学参数的比较
四、底物抑制
k1
k2
ES[ES]EP
k1
k3
S[ES][SES] k3
动力学方程式
rSS
Km
rmaxCS CS
CS2 KS
底物抑制反应的优化
CSopt KmKS
第四节 复杂的酶催化反应动力学
一、可逆酶催化反应动力学
反应机理
k1
k2
ES[ES]EP
k1
k2
r
(
rm K
ax m
)C
S
( rP KP
)C P
1 CS CP
Km KP
二、双底物酶反应动力学
顺序机制 乒乓机制 随机机制
随机机制
rS
1 K4
rmax K3 (1
K1 )
CS1 CS2
CS1
三、变构酶催化反应动力学
动力学方程式
rS
rmaxCSn KH CSn
酶的高效性机制
广义的酸碱催化 共价催化 邻近效应和定向效应 扭曲变形和构象变化 多元催化和协同效应
第二节 简单的酶催化反应动力学
SE k 1 [ES] k 2 EP k1
一、米氏方程的建立
反应速率的定义 速率控制步骤
SE k 1 [ES] k 2 EP k1
动力学方程式
rSIk2C[E]S(1C KIrIm )K (aCx m SCS)K rIm ,maC C xSS
动力学特点
动力学参数的求解
动力学参数的求解（续）
1CI
1 rI,max
KI rmax
1 1 rmax rmaK x I
CI
三、反竞争性抑制
动力学方程式
rSIk2C[ES] KrIm ',m I aC xCSS
参数的求取
第五节 反应条件对酶催化 反应速率的影响
一、pH的影响
反应机理式
二、温度的影响
Arrhenius方程
r k2C[ES]
k2
Aexp(Ea ) RT
三、酶的失活动力学
贮存稳定性 反应稳定性
1、贮存稳定性
一步失活模型
kd
E D kr
C Etkd C E0 kr{krkdex(p kd[kr)t]}
易水寒江雪敬奉 Thanks
Thanks
精品
第一章酶催化反应动力学
第一章
酶催化反应动力学
（6学时）
什么是均相酶催化反应？
酶分子和反应物系(底物分子、产物 分子等)处于同一相－－液相中的反 应
均相酶催化反应的主要特征
不存在相间的物质 分子水平上的反应， 传递，不用考虑传 是本征动力学 质过程的影响
酶催化动力学的研究历史
1897年，Buchner 1903年，Henri提出酶与底物作用的中间复合
一、竞争性抑制
动力学方程式与参数
rSIKm(1rmC K aC xIIS)CS
rmaC xS KmICS
动力学特点
动力学参数的求解
动力学参数的求解（续）
二、非竞争性抑制
ES k 1 [ES] k 2 EP k1
EI k 3 [EI] k3
[ES]I k 4 [SEI] k4 [EI]S k 5 [SEI] k5
酶作为生物催化剂的特性
高效性 专一性 易变性失活：强酸、强碱、高温等 反应条件温和：一般在pH5～8水溶液中进行，
反应温度范围为20～40C。
酶的活性部位
非必需基团 必需基团 活性部位（活性中心）
接触基团 结合基团（结合中心） 催化基团（催化中心）
辅助基团
酶的专一性机制
钥匙与锁学说 诱导契合学说