活细胞共聚焦显微镜操作指南及注意事项
共聚焦开关机流程及使用注意事项
共聚焦开关机流程及使用注意事项一、开机：1．打开PSU主电源（Main），先开开关，再开钥匙。
2．打开MCPSU（含半导体激光电源405，635nm）, 直接开开关3．打开显微镜电源IX2-UCB4．打开电脑，进入共聚焦软件5．打开荧光汞灯光源（15分钟内勿开、关），根据需要开激光器（黑盒子氩离子激光器：488,515nm; 白盒子LD559nm）。
注意：开氩离子激光器时先开开关，再开钥匙。
开LD559激光器时先开开关，见绿灯(Temp）闪烁，待绿灯闪烁约5分钟完毕后，再开钥匙，此时见红灯闪烁，待红灯闪烁约5分钟完毕后即可使用。
二、关机：1．488,515nm氩离子激光器：先关钥匙由1到0，等待风扇凉下来（会听到很大的声音停止）再关开关。
2．LD激光器（559nm），先关钥匙再关开关。
3．其他部件有钥匙的先关钥匙，后关开关。
三、使用注意事项1．每次切换物镜时务必先将其落至最低位置。
每次试验结束后，务必将物镜落至最低位置，然后切换到4倍物镜处。
2．实验完毕后将手动光闸小门关闭，即由空心圈转至实心圈。
使用时开机后再将其打开。
3．调节焦距时，注意微粗调的转换，并且注意观察显示器操作界面上焦距的数值，防止焦平面调得过高使样品片损伤物镜镜头。
一般样品焦平面在正负600µm 以内。
4．只拍CCD图片时，激光器都不用开，只开汞灯即可。
汞灯光源有三个激发波段：WU 330-385nm, NIBA 470-495nm, WIG530-550nm。
汞灯光源的强弱可以用黑色光源盒子的闸调节。
5. 用镜头液擦拭镜头时，向同一个方向擦拭，不要来回擦，用力要轻。
6．通风机组的使用：先打开配电箱的绿色按钮，开启通风，再开空调。
不可单独使用空调。
关闭时，先关空调再关闭配电箱的红色按钮。
显微镜操作技巧与注意事项
显微镜操作技巧与注意事项显微镜是科学研究和教学中常用的一种工具，广泛应用于生物学、医学、物理学等领域。
正确的操作显微镜对于获得清晰的显微图像至关重要。
本文将介绍一些显微镜操作的技巧和注意事项，以帮助读者更好地使用显微镜。
一、准备工作在使用显微镜之前，我们首先需要做一些准备工作。
首先要保证工作台面干净整洁，免得影响显微镜的工作。
其次，要确保显微镜本身处于良好的状态，镜头和目镜应该没有灰尘或污渍。
最后，要提前准备好待观察的样本，使其整齐地放置在载玻片上。
二、样本安装将样本安装在载玻片上是使用显微镜的第一步。
这个过程需要非常细心和耐心。
首先，取一小滴待观察物质放在载玻片上，然后轻轻放置另一块载玻片上方使其与待观察物质接触。
接下来，用抹片夹夹住载玻片两侧并轻轻压紧，确保样本均匀分布并不易挤出。
三、调节光源光源的调节对于获得清晰的显微图像至关重要。
开始时，将光源旋至最低亮度，然后逐渐调高亮度直到观察到适当的光线。
避免直接照射样本，以免损坏细胞结构或造成观察困难。
此外，适当调节光源的角度可以避免镜面反射。
四、调节目镜和物镜调节目镜和物镜是获取清晰显微图像的关键环节。
首先，将待观察物质放置在显微镜上并用夹片夹住。
然后旋转调焦轮，使物镜与样本之间的距离逐渐缩短，直到观察到清晰的图像。
如果图像依然模糊，可以通过转动调焦轮继续微调直至满意为止。
五、调节放大倍率显微镜通常有多个放大倍率可供选择。
在观察过程中，我们可以根据需要调节放大倍率，以获取更清晰的细节。
但需要注意的是，放大倍率增加会使视野范围减小，因此在调节放大倍率时需要移动载物台，以保持观察范围。
六、控制显微镜操作时间在使用显微镜时，我们应该尽量控制每次操作的时间，避免过长或持续的观察。
过长的观察时间可能会导致目镜和电子镜发热，影响显微镜的正常运行。
此外，过度使用显微镜也会对视力造成一定的损害，因此要注意休息和眼保健。
七、妥善保存和维护显微镜显微镜的保存和维护对于其长期使用起着关键作用。
0.共聚焦显微镜样品上机前须知
细胞免疫荧光(供参考)I、步骤：一、固定：PBS 5min×3次振荡洗涤制作好的细胞爬片。
固定液覆盖细胞，RT 静置15min。
PBS 5min×3次振荡洗涤。
注：A．如果检测的目的蛋白为内源蛋白或者表达水平较低的蛋白，固定前可以尝试：用预冷的PBS或预冷的固定液替代常温的PBS清洗细胞，且固定液固定过程置于摇床上进行，目的：防止蛋白降解，避免蛋白降解，导致荧光弥散的现象。
B．如果做组织切片免疫荧光，组织样品离体后请尽快置于预冷的PBS或预冷的固定液中进行清洗和后续的固定工作，且固定液固定过程置于摇床上进行，目的：防止蛋白降解，避免蛋白降解，导致荧光弥散的现象。
二、通透化：通透液覆盖细胞，RT 静置30min。
PBS 5min×3次振荡洗涤。
三、封闭：封闭液覆盖标本表面RT（或者37℃）孵育1h。
四、一抗孵育：一抗以合适浓度稀释PBS，覆盖标本表面。
RT（或者37℃）1h或者4℃孵育过夜（可选步骤：第二天37℃复温1h）。
PBS 5min×3次振荡洗涤。
注：如果实验结果荧光信号较弱，可以尝试以较低的一抗浓度4℃孵育更长的时间（＞24h），可以提高荧光信号强度，降低荧光背景。
五、二抗孵育：荧光基团标记的二抗以合适浓度稀释于PBS，覆盖标本表面。
RT或者37℃避光孵育<60min。
PBS 5min×3次避光振荡洗涤。
注：如果实验结果荧光信号较弱，应该优先调整一抗的孵育条件（浓度、孵育温度和孵育时间），不要随意改变二抗的孵育条件。
六、染核：新鲜稀释的DAPI或者Hoechst覆盖细胞表面，RT避光静置<10min。
PBS 5min ×3次避光振荡洗涤。
七、封片：在干净的载玻片上滴一滴封片剂，将爬片的细胞面扣在封片剂上。
注：封片剂的量不宜过多，只需满足能够完全覆盖盖玻片即可。
封片剂使用量过多，会造成样品偏厚，以致使用高倍油镜时无法找到理想的焦面；封完片后，请勿挤压或大范围挪动盖玻片，避免挤压破坏细胞或组织的形态；使用有颜色的指甲油将盖玻片四周完全封紧，避免封闭剂脱水收缩，压缩组织样品。
显微镜的使用步骤和注意事项总结
显微镜的使用步骤和注意事项总结显微镜，这个听起来就有点神秘的家伙，实际上可是我们探索微观世界的好伙伴。
今天就来聊聊，怎么用好这个神器，让你在观察小小细节的时候，也能乐在其中。
1. 显微镜的准备工作1.1 检查设备首先，使用显微镜前，咱们得把设备检查得妥妥的。
你可别小看这一步，像一台机器，常常是细节决定成败。
检查显微镜的镜头、光源和载物台，看看有没有灰尘、污垢啥的。
记得，清洁的时候要小心，不要用力过猛，搞坏了就得不偿失啦。
可以用专门的清洁布，轻轻擦拭镜头，像是在呵护一个小公主。
1.2 准备样品接下来，准备你要观察的样品。
无论是叶片、细胞还是别的啥，切片的时候尽量薄一点，这样光线才能透得过去哦。
咱们可以用显微镜专用的载玻片，把样品放上去，然后再加一片盖玻片，别让它孤单。
记得加的时候要小心，避免气泡，这可是观察的死敌。
2. 调整显微镜2.1 找到合适的光源一切准备就绪后，接下来就要调整显微镜了。
打开光源，调到适合的亮度，别太亮也别太暗，毕竟我们不是在拍电影。
太亮的话，样品的细节看不清，太暗又会让你眼睛受不了，简直是“像在黑暗中摸索”。
可以根据样品的特点来调整，找个“黄金中间”点，嘿嘿。
2.2 选择合适的物镜然后，选择物镜，通常从低倍物镜开始，慢慢放大。
哎呀，这就像剥洋葱，先从外层开始，逐渐深入，等你找到合适的倍数，就能看到那些令人惊叹的细节了。
别急，慢慢来，急不得哦，耐心是发现美的关键。
3. 观察和记录3.1 观察细节当你终于调整好一切，准备观察时，记得要专注。
眼睛盯着镜头，尽量减少外界的干扰。
仔细观察那些你从未见过的微观世界，兴奋的感觉就像打开了一个宝藏。
发现奇妙的细节时，心里那种“哇塞”的感觉真是无与伦比。
3.2 记录观察结果最后，观察完后，别忘了记录你的发现哦！可以画个图或者写点文字，把那些小细节记录下来。
以后回头看时，像是在翻阅一本微观世界的日记，感觉特别有成就感。
记录的同时，也能帮助你整理思路，理清观察的脉络，简直是“两全其美”。
显微镜的使用方法步骤和注意事项
显微镜的使用方法步骤和注意事项嘿，朋友们！今天咱就来唠唠显微镜的使用方法步骤和那些得注意的事儿。
你可别小瞧这显微镜，它就像是咱的超级眼睛，能带着咱看到平时根本看不到的微小世界呢！就好像你突然有了一双能穿透微小缝隙的神奇眼睛。
先说说使用方法步骤哈。
咱得先把显微镜从它的“小窝”里小心翼翼地请出来，轻拿轻放，可别毛手毛脚的。
然后呢，找个平稳的地儿把它放好，就像给宝贝找个安稳的床一样。
接下来，把你要观察的东西放上去，这就好比给它准备了一道“大餐”。
这时候，你就得调整焦距啦！就跟你戴眼镜找最清楚的那个点一样，得慢慢调，急不得。
你得一点一点地转动那个旋钮，直到你看到的图像清晰得像刚洗过的玻璃一样。
哎呀，那感觉，真的是太奇妙啦！等你看到了清晰的图像，就好好欣赏吧，就像你发现了一个神秘的宝藏世界一样。
不过，这里面可有不少要注意的地方呢！你可别不当回事儿。
比如说，放样本的时候，你得轻点儿，别把它弄伤了呀，它可娇贵着呢！还有调焦距的时候，别使太大劲，万一弄坏了咋办呢？那可就糟糕啦！而且啊，用完显微镜可得好好给它擦擦，让它干干净净的，下次还能更好地为咱服务呢，你说是不是？再就是，别老用手去摸镜片啥的，那上面要是有了指纹，不就看不清了嘛。
就好像你眼镜上有个手印，你还能看清东西吗？肯定不行呀！还有啊，别把显微镜放在太潮湿或者太脏的地方，它也爱干净，也需要一个舒适的环境呢。
总之啊，用显微镜就像是照顾一个小宝贝，得细心、耐心，还得有爱心。
只有这样，你才能真正发挥它的作用，看到那些神奇的微小世界。
你想想，当你通过显微镜看到那些平时看不到的小生物在活动，那是多么有趣的一件事儿啊！所以啊，大家一定要好好对待显微镜，让它成为我们探索微小世界的好帮手！咱可不能浪费了这么个好东西呀！原创不易，请尊重原创，谢谢!。
共聚焦显微镜使用规章(暂行)
共聚焦显微镜使用规章（暂行）为保证共聚焦显微镜正常和充分的利用，维护好使用秩序，更好的为各位服务，特制订本规则，请切实严格遵守。
一、简介：共聚焦显微镜为蔡司LSM710，位于生科楼D511室，该显微镜有优异的灵敏度、反差度和稳定性，可广泛用于细胞与组织的免疫荧光染色实验、活细胞成像实验、以及光漂白实验等，结合软件的强大功能，可对图片做各种后期处理，如进行组织切片的3D重构，荧光强度的定量检测以及共定位系数的测定等。
本显微镜配备物镜倍数为10×、20×、40×和63×，激发光源为405 nm、458 nm、488 nm、514 nm、543 nm和633 nm。
二、预约规则：1、对外开放时间暂定为每周一、三下午14点至17点，其他时段需与管理员沟通协调。
预约仅限2周之内，并至少提前24小时。
由管理员按预约先后安排实验。
如预约取消或更改，需至少提前24小时告知，若预约无更改，管理员一律按预约起始时间开机待用，开机时间自此算起。
开机待用时间超过1小时按取消处理，管理员将关闭系统，预约实验者须支付1小时费用。
2、每次预约上机时间不得超过三小时，活细胞成像实验可酌情延时，但最长不得超过6小时。
每次预约仅限一个时段，请勿一次连续预约多个时段。
3、开放对象：不对非本校人员开放，仅本校人员的课题方可使用该仪器，对外合作课题必须是本校人员承担部分，一经发现非本校人员利用本校人员名义使用该仪器者，取消该实验室全体人员使用资格半年。
4、收费标准：按实际使用时间（即从开机到用毕关机的时间）收费300元/小时，不足1小时者，按1小时计。
费用结算方式另行通知。
5、预约方式：请通过网上预约平台进行预约，等待管理员审核通过。
预约时请务必提交以下详细信息：姓名（限两人以内）、所属实验室、联系方式、预约时段、样品性质（细胞贴片、组织切片或活细胞）、实验所用荧光染料的种类。
其他未尽事宜请及时与管理员沟通。
显微镜的使用步骤及使用注意事项
显微镜的使用步骤及使用注意事项显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。
紧要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器，那么关于产品的使用方法是怎么样的呢？通过以下文章来认得一下吧～显微镜的正确操作使用步骤1、镜检前的准备室内应清洁而干燥，试验台台面水平，稳固无震动，显微镜相近不应放置腐蚀性的试剂。
从显微镜柜或镜箱内取出显微镜时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地取出，放置在试验台桌面上，置于操左前方，距试验台边缘约10cm，镜臂朝本身，镜筒朝前。
试验台右侧放绘图用具。
2、调整光源如需利用外置光源，宜接受散射的自然光或柔和的灯光。
直射的太阳光会对察看者的眼睛造成损害。
转动转换器，使低倍镜正对通光孔，将聚光器上的虹彩光圈开到最大，察看目镜中视野亮度，同时调整反光镜角度，使光照达到光亮最均匀。
自带光源的显微镜，可通过调整电流旋钮来调整光照的强弱。
3、装置待检玻片将待察看的样品制作成临时或永久装片，放在载物台上，用弹簧夹固定，有盖玻片的一面朝上。
移动推动器，调整待检样品至通光孔的中心。
4、低倍镜察看将低倍镜对准通光孔，缓缓转动粗准焦螺旋，将物镜与装片的距离调至近来。
注意不要压碎盖玻片。
通过目镜察看，同时用粗准焦螺旋缓慢调整，直至物像显现，再用细准焦螺旋微调，同时调整光源亮度与虹彩光圈的大小，使物像达到清楚的程度。
并利用推动器把需要进一步放大察看的部分移至视野中央。
假如使用双筒目镜，应在察看前先调整双筒距离，使两眼视场合并。
5、高倍镜察看转动转换器，选择较高倍数的物镜，用细准焦螺旋调整焦距，到物像清楚为止。
6、油镜察看油浸物镜的工作距离（指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离）很短，一般在0.2mm以内，且一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”，因此使用油浸物镜时，调焦速度必需放慢，避开压碎玻片，并使物镜受损。
①在低倍镜下找到察看目标，中、高倍镜下渐渐放大，将待察看部位置于视野中央，调整光源和虹彩光圈，使通过聚光器的光亮达到最大。
Leica TCS SPE共聚焦显微镜操作规程(1)
Living up to Life
4. 通过显微镜侧面的“INT”按钮进行 光强调节
5. 按“TL/IL”转至荧光观察，通过前 面板按钮 选择 适宜的 滤块，见下 图，样品观察完毕后按 Shutter 键 阻断荧光光路以保护样品
共聚焦——设置采图条件
1. 按顺时针方向打开激光电源 2. 在Beam Path下调用已存的采图参数， 或重新进行光路设置： 1) 选择合适的激光谱线 2) 调节激光输出功率 3) 选择合适的分光镜 4) 选择合适的接收范围 (可拖动黑色滑块或双 击后输入接收波长范围) 5) 选择适宜的伪彩 6) 调节PMT Gain值 (检测器灵敏度) 和PMT Offset值 (背景值)
Living up to Life
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共聚焦——三维层切
1. 单击 Live进行预览，调至合适的 焦平面，再调节激光强度、接收 范围、PMT Gain和Offset等参数 2. 单击Set Plane记录焦平面位置
Living up to Life
3. 继续预览，改变 z 轴层面以确定 层切的起点和终点，红色表示已 设定
Living up to Life
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共聚焦——波长扫描
1. 选择xyλ模式 2. 单击Live进行预览，调至合适的焦平 面，再调节激光强度、接收范围、 PMT Gain和Offset等参数 3. 停止预览 4. 设定接收总范围的起点和终点 5. 设定接收带宽 (默认值为10nm) 6. 设定 采集帧数 ，或接收带宽的 步进 值 7. 适当增加激光强度并提高PMT Gain 值，单击Start按键进行波长扫描
5. 根据图像调节激光强度、接收范 围、PMT Gain及Offset等参数 6. 如对图像满意，单击Live停止预览 7. 如有必要，单击 Save 保存当前参 数，便于以后调用
nikon共聚焦显微镜安全操作规程
Nikon 共聚焦显微镜安全操作规程一、操作步骤1、开机：大体按照：电脑→激光台（打开要用的激光按钮）→卤素灯→载物台→显微镜→控制器→软件，荧光灯需要就打开，不需要不用打开2、拍摄流程：打开软件Nikon confocal，ok进入软件操作界面，点eye port，看目镜聚焦，然后点eye port及Interlock解锁切换到激光光路L100，根据自己实验来设置参数和探测方法（DU4），然后点scan，重调Z轴找焦面，对通道进行HV和功率优化，停止scan，点击capture，完成一次拍摄。
3、图像保存：⑴数据保存：File，save as，保存原始数据文件格式.ND2；⑵图片保存：File，Inport/Export，Export ND document，在Export ND document 窗口中Channels，TIF compatibility Options（选择第二个或第三个），保存叠加图像时，在Export ND document 窗口中Channels勾选Insert Overlaps，再点击export4、关机：Z轴降到500以下，物镜转到空挡，最后与开机完全相反顺序进行关机。
二、注意事项：1、放置样品时，确保样品的中心区域在物镜的正上方，且尽量要物镜在两个夹片中心区域，以免转换物镜时，撞坏物镜；2、原则上所有的光源都非常忌讳频繁开关，会大大缩短其使用寿命。
荧光灯、卤素灯：开机后不管是否使用，都最好半小时后再关闭；关机后至少等十五分钟再开机。
激光：开机后不管是否使用，都最好一小时后后关闭；关机后至少等一小时再开机。
3、明场卤素灯的功率值不能超过4，否则会导致温度过高烧坏光纤，影响明场成像；4、60倍和100倍物镜是油镜，滴油时注意只需沾一下，切勿多，滴了油，如果要转物镜，必须先将当前滴了油的物镜用石油醚清洗擦干净才能转换；5、实验结束或者换样品转换镜头时必须按照以下程序进行操作：首先，取下样品，将物镜Z轴值降到500以下，然后，将载物台的载玻片拨至两端，最后再进行物镜的转换。
激光共聚焦使用技巧和注意事项
犹他大学神经生物与解剖学 美国犹他州盐湖城 样品：斑马鱼胚胎视网膜神经轴突 技术：共聚焦显微镜
吉森大学生殖生物学系解剖学与细胞生物学中心 德国吉森 样品：大鼠睾丸冰冻切片 技术：共聚焦显微镜
德国汉堡大学医学中心 德国汉堡 样品：端复胞器 技术：共聚焦显微镜
显微镜常用观察方式：
BF-明场
PH -相差
光谱拆分（Unmixing）
光谱反卷积（deconvolution）
各种荧光蛋品，普遍存在着荧光发射光谱重叠 染料串色（DAPI/FITC… ） 背景自发荧光 （组织FISH、植物标本…）
Spectral Unmixing
YOYO-1 (nuclei) 515-nm emission before unmixing Alexa488 (F-Actin) Colour merged after unmixing
分辨率∝物镜数值孔径（NA） 荧光亮度∝NA4/M2
UPLFLN40XO UAPO40XO PLAPON60XO UPLSAPO60XW UPLSAPO100XO
:NA1.30 :NA1.30 :NA1.42 :NA1.20 :NA1.40
正确使用物镜
低倍至高倍找标本、观察、扫描成像
针孔、激光强度和检测器灵敏度
针孔
一般情况Pinhole处于 Auto状态
实际使用中：
薄标本（活细胞等）：增大针孔，提供图像亮度 ，得到更好反差的图像，有效的保护标本。 厚标本（厚组织切片等）：减小针孔，获取更薄 的图像，更好细节的图像。
针孔大小关系
检测器：PMT
HV推荐值：不高于700
CTRL+H
激光等级:Class 3B
显微镜的使用方法步骤和注意事项
显微镜的使用方法步骤和注意事项光学显微镜由目镜，物镜，粗准焦螺旋，细准焦螺旋，压片夹，通光孔，遮光器，转换器，反光镜，载物台，镜臂，镜筒，镜座，聚光器，光阑组成。
下面是小编整理的关于显微镜的使用方法，希望能够帮到大家。
显微镜的使用方法步骤1、取用和放置使用时首先从镜箱中取出显微镜，必须一手握持镜臂，一手托住镜座，保持镜身直立，切不可用一只手倾斜提携，防止摔落目镜。
要轻取轻放，放时使镜臂朝向自己，距桌边沿5-10厘米处。
要求桌子平衡，桌面清洁，避免直射阳光。
2、开启光源打开电源开关。
3、放置玻片标本将待镜检的玻片标本放置在载物台上，使其中材料正对通光孔中央。
再用弹簧压片夹在玻片的两端，防止玻片标本移动。
若为玻片移动器，则将玻片标本卡入玻片移动器，然后调节玻片移动器，将材料移至正对通光孔中央的位置。
4、低倍物镜观察用显微镜观察标本时，应先用低倍物镜找到物像。
因为低倍物镜观察范围大，较易找到物像，且易能找到需作精细观察的部位。
其法如下：(1)转动粗调螺旋，用眼从侧面观望，使镜筒下降，直到低倍物镜距标本0.5厘米左右为度。
(2)用左眼从目镜中观察，右眼自然睁开，用手慢慢转动粗调螺旋，使镜筒渐渐上升，直到视野内的物像清晰为止。
此后改用微调螺旋，稍加调节焦距，使物像最清晰。
(3)用手前后左右轻轻移动玻片或调节玻片移动器，便可找到欲观察的部分。
要注意视野中的物像为倒像，移动玻片时应向相反方向移动。
显微镜使用注意事项必须轻拿轻放显微镜。
拿时须用右手握镜臂，左手托镜座。
放时让镜座的前端先接触桌面，然后轻轻放下整个镜座，避免镜身受到震动。
为了防止透镜被污染，应做到：1、不要用手指触摸透镜，以免汗液沾污;2、下降镜筒时，一定要从旁边注视物镜，防止物镜碰到盖玻片，损坏玻片标本和物镜;3、当观察新鲜的标本时，一定要盖上盖玻片，并吸去玻片上多余的水或溶液等;4、每次用完显微镜后，应用擦镜纸将目镜、物镜擦干净。
不要随意转动准焦螺旋，观察时必须先用粗准焦螺旋调节焦距，看清物像后再用细准焦螺旋进行微调。
显微镜的操作规程
显微镜的操作规程
《显微镜的操作规程》
一、准备工作
1. 确保显微镜台面干净整洁，无异物。
2. 确保显微镜所需配件齐全，包括镜片、灯泡等。
3. 根据需要调节显微镜的放大倍数和焦距。
二、操作步骤
1. 将待观察的样本放置在显微镜台面上，并用样本夹固定。
2. 打开显微镜灯，调节至适宜的亮度。
3. 调整镜头旋钮，使样本出现清晰的影像。
4. 使用调焦旋钮，调整焦距，使样本清晰可见。
5. 通过眼镜或连接摄像头观察样本。
三、使用注意事项
1. 使用显微镜时需轻拿轻放，避免撞击或摔落。
2. 使用显微镜镜片时，需用干净的纱布轻轻擦拭，避免刮伤镜片。
3. 使用完毕后，关闭灯源，并小心将样本取下，擦拭显微镜台面和外壳。
四、维护保养
1. 每天使用后，清洁显微镜的台面和镜片。
2. 定期检查显微镜的零部件是否完好，如灯泡是否亮、焦距是否正常等。
3. 如发现任何异常，应及时通知维修人员进行维修保养。
五、安全警示
1. 在使用显微镜时，应注意避免眼睛直接接触镜片，以免损坏眼睛。
2. 如在使用中发现设备出现异常，应及时停止使用，并通知相关人员进行处理。
以上就是关于显微镜的操作规程，希望大家在使用显微镜时能够严格按照规程操作，确保设备的正常使用和保养维护。
活细胞共聚焦显微镜操作指南及注意事项
活细胞共聚焦显微镜操作指南及注意事项
1，开机顺序：先开显微镜后面箱子里的激光器，再仪器架上的开关从左到右，从上到下依次打开，长时间观察活细胞动态可打开二氧化碳温控装置，一般尽量不打开汞灯，需要汞灯照明请联系老师，然后打开电脑电源，等待几十秒后再按电脑开机，然后刷卡开启显示器，进入系统后打开软件．汞灯打开时间超过半小时才能关闭，关闭后超过半小时才能打开。
2，将显微镜触摸控制屏上将TIRF转换为EPI，否则无法在显微镜上观察汞灯荧光。
3，使用完油镜后必须清洁镜头。
先用擦镜纸将多余的油吸干，再用新的擦镜纸沾取无水酒精将镜头擦拭干净。
4，使用显微镜期间，必须将空调打开，控制室温在18-24度，否则激光器会出现问题。
5，开机后登记开机时间，关机后登记关机时间，每次试验做好登记。
6，关机顺序：关闭软件程序，关闭电脑系统，仪器架上的开关从下到上，从右向左依次关闭，和开机顺序完全相反，然后关闭激光器，关闭空调。
整理好台面，清洁镜头，拿走垃圾。
管理员：高丁
分析测试中心。
共聚焦成像显微镜安全操作及保养规程
共聚焦成像显微镜安全操作及保养规程共聚焦显微镜是一种先进的成像设备，广泛应用于生命科学、物理科学等多个领域，它能够提供高分辨率、深度和对样本的空间结构进行三维描述等特点，但同时也存在一定的风险。
本文旨在向相关工作人员提供共聚焦显微镜的安全操作及保养规程，以保证人员安全和设备正常运行。
安全操作规程1. 佩戴个人防护装备在使用共聚焦显微镜时，必须佩戴好个人防护装备，包括安全眼镜、手套、长袖上衣等，以预防暴露在激光光束下时对眼睛和皮肤的伤害。
2. 正确开启设备在正式使用设备前，必须确认整个设备是否处于正常的状态。
应该先开启共聚焦显微镜，验证各个系统是否工作正常，包括激光器、探测器和其他系统等，检查完毕后再进行后续的操作。
3. 熟练掌握操作方法在进行具体的实验操作前，需要对设备的部件及相关装置进行仔细学习，全面掌握该设备的使用方法及相应的安全措施。
各种操作的位置和流程都需熟记于心。
4. 控制激光手柄在使用共聚焦显微镜时，必须节制使用激光手柄，尤其是在进行样品扫描和调焦过程中，必须控制激光手柄的强度，调整到安全低于I m ax的最小值；当不再需要激光时，应立即关闭激光器。
5. 防止交叉感染共聚焦显微镜通常应用于生物实验，因此必须防止交叉感染。
慎选样品、消毒液及其他相关材料，严禁在同一个场所同时进行不同的生物实验。
设备保养规程1. 清洁电视显微镜在使用电视显微镜时，需要擦拭透镜，去除灰尘或样本残留物，否则将影响整个系统的成像效果。
当透镜变脏时，可以使用棉球或者干的无菌纱布进行轻轻擦拭，切勿使用水和洗涤剂清洗。
2. 定期维护激光器共聚焦显微镜的激光器需要定期进行维护，以确保激光器的正常工作。
具体的维护包括：•检查整个设备是否有异响或异常的情况。
•清除激光器的滤镜，以确保光线从整个激光器系统中传输有效的光输出。
•应定期更换一定损耗的透射镜片等磨损部件。
3. 清洁镜头在使用共聚焦显微镜时，必须保证样品及相应的镜头是干净的，否则将影响成像效果。
nikon共聚焦显微镜安全操作规程
Nikon 共聚焦显微镜安全操作规程一、操作步骤1、开机：大体按照：电脑→激光台（打开要用的激光按钮）→卤素灯→载物台→显微镜→控制器→软件，荧光灯需要就打开，不需要不用打开2、拍摄流程：打开软件Nikon confocal，ok进入软件操作界面，点eye port，看目镜聚焦，然后点eye port及Interlock解锁切换到激光光路L100，根据自己实验来设置参数和探测方法（DU4），然后点scan，重调Z轴找焦面，对通道进行HV和功率优化，停止scan，点击capture，完成一次拍摄。
3、图像保存：⑴数据保存：File，save as，保存原始数据文件格式.ND2；⑵图片保存：File，Inport/Export，Export ND document，在Export ND document 窗口中Channels，TIF compatibility Options（选择第二个或第三个），保存叠加图像时，在Export ND document 窗口中Channels勾选Insert Overlaps，再点击export4、关机：Z轴降到500以下，物镜转到空挡，最后与开机完全相反顺序进行关机。
二、注意事项：1、放置样品时，确保样品的中心区域在物镜的正上方，且尽量要物镜在两个夹片中心区域，以免转换物镜时，撞坏物镜；2、原则上所有的光源都非常忌讳频繁开关，会大大缩短其使用寿命。
荧光灯、卤素灯：开机后不管是否使用，都最好半小时后再关闭；关机后至少等十五分钟再开机。
激光：开机后不管是否使用，都最好一小时后后关闭；关机后至少等一小时再开机。
3、明场卤素灯的功率值不能超过4，否则会导致温度过高烧坏光纤，影响明场成像；4、60倍和100倍物镜是油镜，滴油时注意只需沾一下，切勿多，滴了油，如果要转物镜，必须先将当前滴了油的物镜用石油醚清洗擦干净才能转换；5、实验结束或者换样品转换镜头时必须按照以下程序进行操作：首先，取下样品，将物镜Z轴值降到500以下，然后，将载物台的载玻片拨至两端，最后再进行物镜的转换。
共聚焦显微镜使用规章(暂行)
共聚焦显微镜使用规章（暂行）为保证共聚焦显微镜正常和充分的利用，维护好使用秩序，更好的为各位服务，特制订本规则，请切实严格遵守。
一、简介：共聚焦显微镜为蔡司LSM710，位于生科楼D511室，该显微镜有优异的灵敏度、反差度和稳定性，可广泛用于细胞与组织的免疫荧光染色实验、活细胞成像实验、以及光漂白实验等，结合软件的强大功能，可对图片做各种后期处理，如进行组织切片的3D重构，荧光强度的定量检测以及共定位系数的测定等。
本显微镜配备物镜倍数为10×、20×、40×和63×，激发光源为405 nm、458 nm、488 nm、514 nm、543 nm和633 nm。
二、预约规则：1、对外开放时间暂定为每周一、三下午14点至17点，其他时段需与管理员沟通协调。
预约仅限2周之内，并至少提前24小时。
由管理员按预约先后安排实验。
如预约取消或更改，需至少提前24小时告知，若预约无更改，管理员一律按预约起始时间开机待用，开机时间自此算起。
开机待用时间超过1小时按取消处理，管理员将关闭系统，预约实验者须支付1小时费用。
2、每次预约上机时间不得超过三小时，活细胞成像实验可酌情延时，但最长不得超过6小时。
每次预约仅限一个时段，请勿一次连续预约多个时段。
3、开放对象：不对非本校人员开放，仅本校人员的课题方可使用该仪器，对外合作课题必须是本校人员承担部分，一经发现非本校人员利用本校人员名义使用该仪器者，取消该实验室全体人员使用资格半年。
4、收费标准：按实际使用时间（即从开机到用毕关机的时间）收费300元/小时，不足1小时者，按1小时计。
费用结算方式另行通知。
5、预约方式：请通过网上预约平台进行预约，等待管理员审核通过。
预约时请务必提交以下详细信息：姓名（限两人以内）、所属实验室、联系方式、预约时段、样品性质（细胞贴片、组织切片或活细胞）、实验所用荧光染料的种类。
其他未尽事宜请及时与管理员沟通。
共聚焦显微镜安全操作及保养规程
共聚焦显微镜安全操作及保养规程共聚焦显微镜是一种高端显微技术，广泛应用于生命科学、生物医学、材料科学等领域的研究，具有高分辨率、高灵敏度、高信噪比等特点。
在使用共聚焦显微镜时，为了保证研究进程和实验结果的可信性，需要严格遵守安全操作规程和保养规程。
本文将对共聚焦显微镜的安全操作和保养作出详细规定。
安全操作规程1. 着装在操作共聚焦显微镜时，首先要保证自己的安全。
穿戴合适的实验服，不要穿短袖、短裙等暴露皮肤的衣物，戴上实验手套和眼镜。
同时，也要保证实验室的通风情况良好，以防呼吸道吸入有害气体。
2. 操作前的检查在开始操作共聚焦显微镜之前，必须将电源关闭，并检查设备是否处于开启状态。
例如，检查是否插上了激光源、物镜、荧光显微镜、控制器等必备设备，并检查传感器、冷却器等是否正常工作。
如果发现任何故障或缺陷，请立即联系管理员或技术人员进行处理。
3. 使用激光共聚焦显微镜使用激光，因此在操作时应特别注意，以防激光对人体产生伤害。
应避免目视激光和过度暴露于光源之下，同时要保证安全提香和操作。
4. 样品准备在进行共聚焦显微镜实验之前，样品准备非常重要。
应认真阅读实验方法和样品使用说明书，避免误操作和污染。
同时，也要注意样品的质量，确保样品的纯度、浓度和稳定性符合要求。
5. 储存样品在操作共聚焦显微镜之前和在操作过程中，需要对样品进行储存。
应避免将样品直接暴露在强光源下，同时，建议将样品储存在低温、低光、低湿的环境中，以确保样品的保持稳定性。
保养规程1. 操作前的准备在保养共聚焦显微镜之前，需要做好准备。
首先检查设备中的所有器材、工具、清洁剂、拖布等是否齐全。
然后根据用户手册中的说明，准备相应的保养方案和流程，以确保平稳有序进行。
2. 清洗显微镜共聚焦显微镜的精液部分需要定期进行清洗，以保持高质量的工作。
清洗过程应轻柔，避免划涂或者损坏玻璃表面。
清洗剂和拖把的选择应遵循厂家建议。
在清洗完成后，应用干燥的拖布轻轻擦拭表面，确保不留水迹和污垢。
共聚焦显微拍摄的步骤及方法
共聚焦显微拍摄的步骤及方法
一、技术简介
激光扫描共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，把光学成像的分辨率提高了30%-40%，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值，膜电位等生理信号及细胞形态的变化，成为形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
激光扫描共聚焦显微镜以激光作为光源，激光器发出的激光通过照明针孔形成点光源，经过透镜、分光镜形成平行光后，再通过物镜聚焦在样品上，并对样品内聚焦平面上的每一点进行扫描。
样品被激光激发后的出射光波长比入射光长，可通过分光镜，经过透镜再次聚焦，到达探测针孔处，被后续的光电倍增管检测到，并在显示器上成像，得到所需的荧光图像，而非聚焦光线被探测针孔光栏阻挡，不能通过探测针孔，因而不能在显示器上显出荧光信号。
二、实验流程
1. 样品的固定（多聚甲醛固定法）。
2. 组织的冷冻包埋和切片（干冰冷冻包埋法）。
3. 免疫荧光标记。
4. 先在荧光显微镜下观察确认标记成功，然后移至共聚焦显微镜下进行观测。
共聚焦固定流程
共聚焦固定流程标题：共聚焦显微镜固定流程详解一、引言共聚焦显微镜是一种高分辨率、高灵敏度的光学显微镜技术，能够提供细胞和组织的三维图像。
在进行共聚焦显微镜观察前，样本的固定是至关重要的步骤，它能保持细胞结构的完整性，防止样品变形或降解。
以下是一份详细的共聚焦显微镜固定流程指南。
二、固定材料准备1. 固定剂：常用的固定剂有4%多聚甲醛（PFA）或10%中性缓冲甲醛溶液（NBF）。
根据实验需求，可以选择合适的固定剂。
2. PBS缓冲液：用于清洗样本，防止固定剂过量或残留。
3. 防脱剂：如明胶或琼脂糖，用于防止细胞在处理过程中脱落。
三、固定流程1. 样本制备：将待观察的细胞或组织样本放置在适当的载玻片上。
2. 初次清洗：用PBS缓冲液轻轻冲洗样本，去除可能影响固定的杂质。
3. 固定：滴加预热至室温的固定剂，确保样本完全浸没。
固定时间通常为30分钟到2小时，具体时间根据样本类型和实验需求调整。
4. 再次清洗：固定完成后，用PBS缓冲液彻底清洗样本，去除多余的固定剂。
5. 防脱处理：在样本上滴加防脱剂，如明胶或琼脂糖，防止后续操作中样本脱落。
6. 保存：将样本置于4℃冰箱中保存，等待进一步的处理，如染色或切片。
四、注意事项1. 固定过程应避免剧烈震荡，以免破坏细胞结构。
2. 固定剂的选择和浓度应根据样本类型和实验目的来定，例如，对蛋白质免疫标记，4% PFA常被推荐。
3. 固定后，样本应尽快进行后续处理，以防止固定剂对样本产生不良影响。
总结，共聚焦显微镜的固定流程需要精细操作，每个步骤都可能影响最终的观察结果。
理解并遵循正确的固定流程，是获取高质量共聚焦图像的关键。
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活细胞共聚焦显微镜操作指南及注意事项
1，开机顺序：先开显微镜后面箱子里的激光器，再仪器架上的开关从左到右，从上到下依次打开，长时间观察活细胞动态可打开二氧化碳温控装置，一般尽量不打开汞灯，需要汞灯照明请联系老师，然后打开电脑电源，等待几十秒后再按电脑开机，然后刷卡开启显示器，进入系统后打开软件．汞灯打开时间超过半小时才能关闭，关闭后超过半小时才能打开。
2，将显微镜触摸控制屏上将TIRF转换为EPI，否则无法在显微镜上观察汞灯荧光。
3，使用完油镜后必须清洁镜头。
先用擦镜纸将多余的油吸干，再用新的擦镜纸沾取无水酒精将镜头擦拭干净。
4，使用显微镜期间，必须将空调打开，控制室温在18-24度，否则激光器会出现问题。
5，开机后登记开机时间，关机后登记关机时间，每次实验做好登记。
6，关机顺序：关闭软件程序，关闭电脑系统，仪器架上的开关从下到上，从右向左依次关闭，和开机顺序完全相反，然后关闭激光器，关闭空调。
整理好台面，清洁镜头，拿走垃圾。
管理员：高丁
分析测试中心
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