第一章细胞培养设施与基本条件

基本实验室：
准备室 接种室
培养室
辅助实验室： 细胞学实验室
摄影室及暗室
生化分析室
第一章细胞培养设施与基本条件
我系细胞工程实验所涉及的实验室现状
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第一章细胞培养设施与基本条件
课后作业
细胞工程实验室与一般实验室的结 构区别是什么？请同学们参观完我系 现有细胞工程实验室后，从细胞工程 实验室结构设置方面对我系现有细胞 工程实验室的改建工作提出可行性的 建议或意见？
•净化台的工作原理 – 利用鼓风机驱动空气通过高效滤器
除去空气中的尘埃疯粒，使空气得 到净化。
•分类
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④净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持 洁净气流型不受干扰。
⑤一般情况下，高效过滤器三年更换一次。更换 高效滤器应请专业人员操作，以保持密封良好。 要定期将粗过滤器中的过布（无纺布）拆下清洗， 时间应根据环境洁净程度而定，通常间隔3~6个月 进行一次。 ⑥每次使用净化台要及时清除工作台面上的物品， 并用洒精擦洗台面使之始终保持洁净。
划分不同功能区或用铝合金隔板隔开 无菌操作区应在室内较少走动的内侧 清洗和消毒安置在另室
第一章细胞培养设施与基本条件
Chapter 1 细胞培养的设施与基 本条件
◆ 细胞工程实验室的设置
◆ 常用仪器与设备 ◆ 实验室的生物安全
第一章细胞培养设施与基本条件
第一节 细胞工程实验室的设置
第一章细胞培养设施与基本条件
一、 动物细胞工程实验室的设置
动物细胞工程实验室要求严格保持 无菌环境，避免微生物及其他有害因 素的影响。
应能进行六方面的工作：无菌操作、 孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、 储藏。
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1．储藏室 主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮
罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境 也需要清洁无尘。
第一章细胞培养设施与基本条件
•分类
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•使用超净工作台应注意的几点问题
还用来储藏什么？
要求：取放方便。还有什么要求？
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2.清洗和消毒灭菌室 清洁和消毒灭菌室应与其他区域分
开，主要进行所有实验动物材料的处 理、细胞培养器皿的清洗、准备、消 毒及三蒸水制备等工作。
应满足哪些要求？
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3．制备室 在该区主要进行培养液及有关培
养用的液体等的制备。 应具备什么要求？
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4.无菌操作室 相对密封、防尘、防菌的工作空间，
在结构和消毒方面都有具体要求。
更衣室： 缓冲间 无菌操作室
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a 更衣室:供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口 罩。要求
b 缓冲间:位于更衣间与操作间之间，目的是 为了保证操作间的无菌环境，同时可放置 恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
复习细胞工程概念
第一章细胞培养设施与基本条件
课前思考？
到目前为止，同学们都学习了哪些专业实验？
植物学实验
动物学实验
生物化学实验
微生物实验
细胞工程实验室与这些常规实验室相比较的主 要区别是什么？
离体培养
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• 细胞工程实验室设计
– 原则 防止微生物污染和有害因素影响 – 要求 工作环境清洁、空气清新、干燥和无烟尘
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◆ 温度：一般控制在25±2ºC ◆ 光照：第一光章细强胞培、养设光施与质基本、条件光照时间
清洗室: 制备室： 灭菌室： 接种室： 培养室： 鉴定室： 驯化移栽室：
第一章细胞培养设施与基本条件
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第一章细胞培养设施与基本条件
细胞工程实验室它必须满足三个基 本的需要，即：
缓冲间 接种间
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C、培养室
离体细胞、组织等生长发育的场所，应为培养物 创造适宜的生长条件。
①培养室的位置最好设在阴面，阳光不能直接 照射的地方，防止室内温度增高。
②天花板的高度不要超过2.5米，以保证紫外灯 的有效杀菌效应，
③门一般用拉门，以防止空气流动。 ④天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要 镶瓷砖或涂油漆，这样设计，一是便于清洗和消 毒，另外也不易在第墙一章角细胞培堆养设积施与灰基本尘条件。
第一章细胞培养设施与基本条件
第二节 常用仪器与设备
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一、动物与植物细胞工程实验室通用的 仪器设备
1.培养器皿： 培养瓶、培养皿、多孔培养板
2.盛装器皿： 3.计量器皿：
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第一章细胞培养设施与基本条件
第一章细胞培养设施与基本条件
4.超净工作台（净化台）
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•培养室内的无菌操作要点
①紫外灯无人时就要打开； ②进无菌室要穿无菌服、戴帽子和口罩； ③每周清洗消毒一次； ④所用物品要以外科手术方式严格消毒； ⑤室内台面要要保持洁净； ⑥所用物品要一次性准备好； ⑦瓶口要用酒精火焰消毒； ⑧尽量减少出入。
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实验室设计
从总体上来分，实验室主要分为两类：
实验准备室； 无菌操作室； 控制培养室。
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A、准备室
细胞和组织培养所需器具的洗涤、干燥和保
存；培养基的配制、分装和灭菌；化学试剂的
配制；重蒸馏水的生产等。一般建在通风和光
线充足的地方（在向阳面），地面防滑，墙壁
防潮。
消毒和实验前的准备
两间房
实验后污物处理和清洗
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c 无菌操作室:专用于无菌操作。
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5.培养与观察室 本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，
但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰 少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱 或可控制温度的温室中进行，后者费用 高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
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二、 植物细胞培养室的设置
准备室内的常用设备
①水槽两处：实验后的清洗及清洁液浸后的清洗。 ②盛清洁液的陶瓷缸或玻璃缸。 ③清洗后器皿的凉干架和贮存柜。 ④高温干燥消毒箱和高压蒸汽消毒锅。 ⑤消毒后器皿的凉干架和贮存柜。 ⑥重蒸水装置。 ⑦电炉 ⑧工作台 ⑨污物桶
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B、无菌操作室 密封、防尘、防菌的工作空间。无 菌操作室并非无菌，但应该保持清 洁。 作用：接种，培养物的转移和原生 质体的游离培养操作之用。