新基因功能研究的策略和方法

生物信息学分析
全长cDNA序列查找开放阅 读框→推导蛋白质氨基酸序列 →信号肽预测分析→蛋白质理 化性质分析→预测其高级结构
以新基因的cDNA 序列来对基因组数 据库进行同源性比 对，获得与其完全 同源的基因组DNA 序列及其染色体定 位信息等
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SMAR或PROSITE 数据库分析蛋白 质功能域
新基因功能研究的策略与方法
对于一个陌生的基因，我们该怎么认识她？
你是谁？→从功能强大的“基
因族谱”——数据库中找“亲戚”
A
到哪里去？→任你乔装易容，你
还是你：从产物着手，顺藤摸瓜
C
B 从哪里来？→上帝才知道
D
价值作用？→你在或者不在，
世界还是一样吗？
你是谁？
生物信息学 分析
1.编码产物序列分析 2.序列同源性分析 3.蛋白质功能域分析
价值作用之“无中生有”
基因功能 获得
基因转染技术 转基因技术
基因转染技术
研究特定基因的 功能
筛选高表达转染 基因的细胞
将基因导入细胞 并鉴定
特定基因的克隆
基因转染技术：通过生化或者物理方法将目 的基因导入真核细胞中 ，并在细胞内表达。
转基因技术
外源目的基因 的分离
转基因载体的 构建
转基因胚胎的 培养和移植
到哪里去？
体内表达 规律分析
mRNA水平的表达谱分析 蛋白质水平的表达分析
体内表达规律分析
mRNA水平 的表达谱分
析
半定量RT-PCR,实时定 量RT-PCR和Northern Blot等检测mRNA的表 达水平
蛋白质水平 的表达分析
制备相应的抗体来检测其 蛋白质终产物的表达情况， 如该蛋白质表达的亚细胞 定位、分子质量大小、聚 体形式等
导入受精卵或 胚胎干细胞
转基因动物的 检测鉴定和品
系筛选
研究特定基因 在体内的功能
价值作用之“有中生无”
基因功能 失活
基因沉默技术 基因敲除技术
基因沉默技术
基因敲除技术
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