膜片钳技术数据处理与分析课件

打开Analyze/Adjust/Baseline （1）Subtract mean of（去除均值法）：适用于去除直流偏移。 （2）Subtract slope of（去除斜率法）：适合于去除持续线性漂移。 （3）Subtract fixed value（去除固定值法）：适用于去除直流偏移。数值有正负之 分。 （4）Adjust manually（手工调零法）：适合于单通道电流的基线或基线漂移无规律。
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膜片钳实验数据的处理
（3）Subtract fixed value（去除固定值法） （4）Adjust manually（手工调零法）
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膜片钳实验数据的处理
Patch clamp training源自文库class
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膜片钳实验数据的处理
坏点的赋值 （1）Data value at cursor 1：Cursor 1的数值。 （2）Mean between cursor 1..2：Cursor 1-2之间均值。 （3）Mean between cursor 3..4：Cursor 3-4之间均值。 （4）Straight -line fit between cursor 1..2：Cursor 1-2之间的直线拟合
值。 （5）Fixed value(pA/mV)：输入一个固定的数值。
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膜片钳实验数据的处理
Clampfit演示去除坏点
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膜片钳实验数据的处理
信号采集后的滤波
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膜片钳实验数据的处理
Clampfit滤波类型
Lowpass
膜片钳技术高级培训班
Clampfit 10 膜片钳实验数据的处理与分析
2014年4月23-25日
PPT学习交流
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内容
一、膜片钳实验数据的处理 二、全细胞记录数据的分析 三、单通道记录数据的分析 四、突触放电活动数据的分析
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膜片钳实验数据的处理
注意事项 （1）坏点太多时，应在记录前予以去除。 （2）坏点持续时间短，如果出现持续时间较长的坏点，则数据要废弃。
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膜片钳实验数据的处理
三、滤波
信号采集前的滤波 ➢ 全细胞通道电流记录：1-2 kHz ➢ 全细胞突触活动记录：10 kHz ➢ 单通道电流记录：10 kHz ➢ 动作电位记录：10 kHz
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膜片钳实验数据的处理
一、基线的调零 二、坏点的去除 三、滤波 四、数据文件内部/之间的数学运算
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膜片钳实验数据的处理
一、基线的调零
基线的确认 ➢全细胞记录基线易确认，单通道记录基线不易确认。 • 单通道开放时间较长 • 所记录的时间较短 • 同时开放的通道数目较多且长时间持续开放 ➢确定通道电流的方向：电流方向向上，最负向是基线位置，反之亦然。 如何确定：膜片两侧液体、钳制电位
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膜片钳实验数据的处理
Epoch A段
坐标零点 坐标零点
（1）Subtract mean of（去除均值法）（2）Subtract slope of（去除斜率法）
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膜片钳实验数据的处理
基线不在零点的原因 ➢ 封接电阻的改变：漏电流 ➢ 失调电位的存在：偏移、漂移 ➢ 噪声的干扰：交流干扰 ➢ 高通滤波的影响：对记录线的起始部位产生影响
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膜片钳实验数据的处理
基线调零方法
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Clampfit演示基线调零方法
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二、坏点的去除
坏点产生的原因 ➢ 刺激伪迹：给标本施加刺激时产生。 ➢ 电容瞬变电流：电容的充放电反应。 ➢ 瞬时脉冲干扰（Glitch）：打开电源开关（日光灯、仪器设备开启时） ➢ 手机来电：一过性高频。 ➢人手靠近记录探头：高幅、高频。
Highpass
Bandpass
Notch
Electrical Interference
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通道开放
单通道电流基线的确认 如果通道开放时电流向上，则基线在最下面的位置
基线
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膜片钳实验数据的处理
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基线调零的注意事项 （1）有些只相对值（如电流幅度的变化值），不需要将基线调零。但多数
情况需要基线调零，建议都要进行基线调零。 （2）对于基线变动复杂的数据，基线调零可能会用到上述的几种方法。 （3）对于某些基线变动，Clampfit中的基线调零方法可能也无法准确调零。
建议最好在采集数据时就设法调整好基线。