实验诊断学_病原微生物检查文稿演示
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实验诊断学_病原微生物检查详解演示文稿
本章主要内容
一、标本采集、运送和检测方法 二、细菌耐药性检查
三、临床感染常见病原体检查
四、病毒性肝炎检测
五、院内感染
当前第19页\共有41页\编于星期四\17点
一、流行病学和临床类型
流行病学特征 新的病原体不断被发现，如SARS病毒、禽流感染病毒等。 老传染病死灰复燃 如结核、梅毒、霍乱等 多重耐药菌株不断出现 器官移植、放/化疗、侵入性医疗检查或治疗导致医院感染 发生率不断增加
当前第13页\共有41页\编于星期四\17点
耐药性及发生机制
1.当前临床分离的常见细菌 (1)革兰阴性菌 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、 阴沟肠杆菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等，占70%。
(2)革兰阳性菌 葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、卡他布兰汉
菌等，占30%。
滥用抗生素的后果→耐药
当前第14页\共有41页\编于星期四\17点
③常见临床类型：下呼吸道感染（机械通气）为最常见医院感染类型，其 它如尿路感染（插管）、手术切口感染、胃肠道感染、血液感染 （静脉留置和透析常见）、皮肤和软组织感染等。
④病原体：条件致病菌和机会致病菌
⑤传播方式：接触传播多见
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医院感染的常见细菌
1.鲍曼不动杆菌
实验诊断学_病原微生物检查详解演 示文稿
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（优选）实验诊断学_病原微生物检 查
当前第2页\共有41页\编于星期四\17点
本章主要内容 一、标本采集、运送和检测方法
二、细菌耐药性检查
三、临床感染常见病原体检查
四、病毒性肝炎检测 五、院内感染
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常见病原微生物的检测PPT
18
三、主要症状
人感染布氏杆菌表现乏力，全身软弱，食欲不振，失眠，咳 嗽，有白色痰，可听到肺部干鸣，多呈波浪热，也有稽留热、 不规则热或不发热。
盗汗或大汗，一个或多个关节发生无红肿热的疼痛，肌肉酸 痛，由于关节和肌肉疼痛难忍，即使不发烧也不能劳动，成为 能吃不能活懒汉，故该病又被称作"懒汉病"。
病灶发生在生殖器官，影响生育，严重者可引起死亡。
另用灭菌生理盐水稀释兔血浆,制成4倍稀释血浆(以下 简称为稀释兔血浆),分装同上,于-18℃以下冰冻保存,供 试验
2
第一节 炭疽杆菌（一）
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧芽胞杆菌属，
能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。
（一）生物学性状 1.菌体粗大，排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，
1.朊病毒 2.禽流感病毒 3.甲型肝炎病毒
51
一、朊病毒及其检验
朊病毒(prion) ----传染性蛋白粒子/朊粒/朊毒体，是一种不同于 细菌、病毒或类病毒的在分类上尚未定论的病原因子，其本质 为由正常宿主细胞基因编码的、构象异常的蛋白质，称为朊蛋 白(prion protein, PrP)，目前尚未检出任何核酸成分，是人和 动物的传染性海绵状脑病（TSEs)的病原体。
10
三、微生物学检查
1.采集皮肤炭疽的脓液、渗出物，肠炭疽的粪便以及病人的 的血液等送检，兽尸禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送检。
2.将标本直接涂片，沙黄荚膜染色镜检，观察形态及荚膜特 征，可以初步帮助诊断。
11
3.确诊应进行血平板分离培养，37℃孵育12～15小时， 钩取可疑菌落，进行青霉素串珠试验，噬菌体裂解试 验，碳酸氢钠平板二氧化碳培养。荚膜肿胀试验和小 白鼠致病力试验等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
三、主要症状
人感染布氏杆菌表现乏力，全身软弱，食欲不振，失眠，咳 嗽，有白色痰，可听到肺部干鸣，多呈波浪热，也有稽留热、 不规则热或不发热。
盗汗或大汗，一个或多个关节发生无红肿热的疼痛，肌肉酸 痛，由于关节和肌肉疼痛难忍，即使不发烧也不能劳动，成为 能吃不能活懒汉，故该病又被称作"懒汉病"。
病灶发生在生殖器官，影响生育，严重者可引起死亡。
另用灭菌生理盐水稀释兔血浆,制成4倍稀释血浆(以下 简称为稀释兔血浆),分装同上,于-18℃以下冰冻保存,供 试验
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第一节 炭疽杆菌（一）
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧芽胞杆菌属，
能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。
（一）生物学性状 1.菌体粗大，排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，
1.朊病毒 2.禽流感病毒 3.甲型肝炎病毒
51
一、朊病毒及其检验
朊病毒(prion) ----传染性蛋白粒子/朊粒/朊毒体，是一种不同于 细菌、病毒或类病毒的在分类上尚未定论的病原因子，其本质 为由正常宿主细胞基因编码的、构象异常的蛋白质，称为朊蛋 白(prion protein, PrP)，目前尚未检出任何核酸成分，是人和 动物的传染性海绵状脑病（TSEs)的病原体。
10
三、微生物学检查
1.采集皮肤炭疽的脓液、渗出物，肠炭疽的粪便以及病人的 的血液等送检，兽尸禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送检。
2.将标本直接涂片，沙黄荚膜染色镜检，观察形态及荚膜特 征，可以初步帮助诊断。
11
3.确诊应进行血平板分离培养，37℃孵育12～15小时， 钩取可疑菌落，进行青霉素串珠试验，噬菌体裂解试 验，碳酸氢钠平板二氧化碳培养。荚膜肿胀试验和小 白鼠致病力试验等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
诊断学实验室检查ppt课件
2)红细胞生成素非代偿性增加： 与某些肿瘤或肾脏疾患有关。 如：肾癌、肝 细胞癌、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾上腺皮质腺 瘤、子宫肌瘤以及肾盂积水、多囊肾等。
编辑课件
5
(2)真性红细胞增多症(polycytherma vera)： 是一种原因未明的红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造
血干细胞受累所致。 其特点为红细胞持续性显著增多，可高达(7～10)×1012／L， 血红蛋白达180～240g／L，全身总血容量也增加，白细胞和血小板也不同程度 增多。 本病属慢性和良性增生，部分病人可转变为白血病等。
编辑课件
2
编辑课件
3
第一节 血液的一般检测
一· 红细胞的检测和血红蛋白的的测定
健康人群血红蛋白和红细胞数参考值
红细胞计数 [ RBC ]（×1012/L）
血红蛋白 [ HGB ]（g/L）
成年男性 成年女性 新生儿
4.0～5.5 3.5～5.0 6.0～7.0
120～160 110～150 170～200
链球菌等)感染为最常见的原因。应注意，在某些极重度感染时，白细胞总数不但
不高，反而减低。
编辑课件
8
2)严重的组织损伤及大量血细胞破坏：严重外伤，较大手术后，大面积烧伤， 急性心肌梗死及严重的血管内溶血后12～36h，白细胞总数及中性粒细胞可增多。
3)急性大出血：在急性大出血后1～2h内，周围血中的血红蛋白的含量及红细 胞数尚未下降，而白细胞数及中性粒细胞却明显增多，特别是内出血时，白细胞可 高达20×109／L。
※贫血的原因：
（1） 红细贫血:红细胞的减少比血红蛋白下降的程度低。
③巨幼细胞性贫血：红细胞的减少比血红蛋白下降的程度明显
④红细胞缺乏：肾脏疾病
编辑课件
5
(2)真性红细胞增多症(polycytherma vera)： 是一种原因未明的红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造
血干细胞受累所致。 其特点为红细胞持续性显著增多，可高达(7～10)×1012／L， 血红蛋白达180～240g／L，全身总血容量也增加，白细胞和血小板也不同程度 增多。 本病属慢性和良性增生，部分病人可转变为白血病等。
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2
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3
第一节 血液的一般检测
一· 红细胞的检测和血红蛋白的的测定
健康人群血红蛋白和红细胞数参考值
红细胞计数 [ RBC ]（×1012/L）
血红蛋白 [ HGB ]（g/L）
成年男性 成年女性 新生儿
4.0～5.5 3.5～5.0 6.0～7.0
120～160 110～150 170～200
链球菌等)感染为最常见的原因。应注意，在某些极重度感染时，白细胞总数不但
不高，反而减低。
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8
2)严重的组织损伤及大量血细胞破坏：严重外伤，较大手术后，大面积烧伤， 急性心肌梗死及严重的血管内溶血后12～36h，白细胞总数及中性粒细胞可增多。
3)急性大出血：在急性大出血后1～2h内，周围血中的血红蛋白的含量及红细 胞数尚未下降，而白细胞数及中性粒细胞却明显增多，特别是内出血时，白细胞可 高达20×109／L。
※贫血的原因：
（1） 红细贫血:红细胞的减少比血红蛋白下降的程度低。
③巨幼细胞性贫血：红细胞的减少比血红蛋白下降的程度明显
④红细胞缺乏：肾脏疾病
常见病原微生物的检测ppt课件
1 任何分离到A型流感病毒，用0.2mL1:10稀释的无菌尿囊液静 脉或肌肉注射8只4－8周龄易感鸡,10天内的死亡率不低于75%。
2.对所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列 与高致病性禽流感病毒一致。
3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋 白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。
可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一月培养无细
菌生长，可报告阴性。
编辑版ppt
27
（二）血清学检查
通常作凝集试验，判定凝集效价1： 50可疑，1：100以上为阳性。效价增高4 倍以上时，更有诊断价值。
编辑版ppt
28
第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧 芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物 及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。平时，牧民、农 民、皮毛和屠宰工作者易受感染。皮肤 炭疽在我国各地还有散在发生，不能放 松警惕。
家畜患病没有治疗价值。应全部淘汰，消灭传染源。
编辑版ppt
26
四、微生物学检验
本菌传染性大，要注意防止实验室污染。
（一）分离培养
急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接种于双相
肝浸液培养基（一半斜面，一半液体）置37℃
10%CO2环境中培养，每隔2天检查一次，如无细菌生 长则摇荡培养基，使液体浸过斜面上，有细菌生长，
常见病原微生物的检测
编辑版ppt
1
第一节 禽流感病毒
禽流感是禽流行性感冒（Avian Influenza，AI）的简称，这是一种由甲 型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾 病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染 病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。
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2.对所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列 与高致病性禽流感病毒一致。
3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋 白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。
可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一月培养无细
菌生长，可报告阴性。
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（二）血清学检查
通常作凝集试验，判定凝集效价1： 50可疑，1：100以上为阳性。效价增高4 倍以上时，更有诊断价值。
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第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧 芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物 及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。平时，牧民、农 民、皮毛和屠宰工作者易受感染。皮肤 炭疽在我国各地还有散在发生，不能放 松警惕。
家畜患病没有治疗价值。应全部淘汰，消灭传染源。
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四、微生物学检验
本菌传染性大，要注意防止实验室污染。
（一）分离培养
急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接种于双相
肝浸液培养基（一半斜面，一半液体）置37℃
10%CO2环境中培养，每隔2天检查一次，如无细菌生 长则摇荡培养基，使液体浸过斜面上，有细菌生长，
常见病原微生物的检测
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1
第一节 禽流感病毒
禽流感是禽流行性感冒（Avian Influenza，AI）的简称，这是一种由甲 型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾 病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染 病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。
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诊断临床病原体检查PPT教学课件
2020/12/10
2
➢ 多瓶接种 ①厌氧菌菌血症占菌血症5-15%, ②有10%菌血症不是单一微生物引起, ③长 期使用抗生素患者可呈现L型菌. ④免疫低 下患者易发生真菌感染；根据情况做二种 血培养瓶的培养,需氧和厌氧或需氧和L型 培养。
➢ 标本采集操作 应注意严格无菌操作，避免 污染杂菌。
➢ 标本送检 接种血液样本的培养瓶应立即送 检，如因某种原因不能立即送检时，勿放 冰箱存放。
2020/12/10
12
药物敏感试验
1.纸片扩散法（K-B法） ➢ 菌液浓度：0.5麦氏浊度（1.5×108CFU/mL） ➢ 琼脂平板厚度：4mm（9cm，25ml；15cm，60ml) ➢ 抗生素纸片：9cm，6-7张（4张左右）；15cm，
12张 ➢ 培养温度、时间：35℃，18-20小时 ➢ 判断标准：NCCLS当年版
➢ 产酶株不能单独采用青霉素类和三代头孢 治疗。
5.血清学检测 检测病原体刺激机体产生的抗体， IgM型抗体检出为新近感染指标。
2020/12/10
7
细菌耐药性检查
抗菌药物的作用机制 ➢ 干扰细菌细胞壁的合成，使细菌不能生长繁殖。 ➢ 影响细菌细胞蛋白质的合成，使细菌丧失生长
繁殖的物质基础。 ➢ 破坏核酸的代谢，阻碍遗传信息的复制。
2020/12/10
➢ 创伤、组织和脓肿标本 首先清创，用无菌拭 子取材。
2020/12/10
5
二.检查方法
１.显微镜检查 ➢ 悬滴法用于病原体的动力观察，暗视野或
相差显微镜用于病原体的生长、形态、运 动方式。 ➢ 染色检查：革兰氏染色用于细菌和真菌的 检查；抗酸染色用于结核菌及放线菌的检 查；墨汁染色用于新型隐球菌的检查。
临床常见标本的微生物检验文稿演示
处取血； 4.不宜从静脉导管或静脉留置口取血，若从该部位取
血，应在申请单上注明；最好同时静脉取血，以求 进行比对； 5.不推荐静脉血直接入瓶，以免血量控制不好或对患 者不利； 6.不主张换针头入瓶，以免增加污染的机会。 7.采血前把血培养瓶从冰箱拿出后，待恢复至室温后 采集，采集后切勿放回冰箱。
（三）血培养标本采集和运送
瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。
说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。成人
血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与采血量成正 比例增长。每增加1ml的血液，病原菌的检出率增加3.2%。 儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于 成人。对血液病患者或者血容量相对较低的患者建议使用儿 童瓶来减少血液的采集量增加病原菌的检出率。
❖ 血行传播的细菌可定值在血管内导管中，引发新的病灶。
皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管
❖ 怀疑导管相关性血流感染的患者，可采用培养方法（建议同时进行）：
❖ 1.用Maki半定量培养法对血管内导管尖端片段进行培养： ❖ 采集： 用75%酒精消毒导管周围皮肤；移动导管，无菌剪刀剪取
1.采集时间
患者出现寒战、体温升高前； 使用抗菌药物前； 患者已使用抗菌药物的情况下，若出现明显的发热前期症状，可在 寒战前或寒战后1h内采血；若无明显的寒战阶段，应在第二次服抗菌药 物前采血； 对于无明显感染病灶或未找到发热原因的发热患者，先在不同部位 采集2-3份血标本，间隔大于或等于1h，24h-36h后再次采集2份以上； 疑似沙门菌感染的患者在病程第1-2周采集静脉血；
无菌生长，需要进行末次接种。
双相培养瓶
二.导管相关性血流感染的标本培养
❖ 导管相关性血流感染：
血，应在申请单上注明；最好同时静脉取血，以求 进行比对； 5.不推荐静脉血直接入瓶，以免血量控制不好或对患 者不利； 6.不主张换针头入瓶，以免增加污染的机会。 7.采血前把血培养瓶从冰箱拿出后，待恢复至室温后 采集，采集后切勿放回冰箱。
（三）血培养标本采集和运送
瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。
说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。成人
血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与采血量成正 比例增长。每增加1ml的血液，病原菌的检出率增加3.2%。 儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于 成人。对血液病患者或者血容量相对较低的患者建议使用儿 童瓶来减少血液的采集量增加病原菌的检出率。
❖ 血行传播的细菌可定值在血管内导管中，引发新的病灶。
皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管
❖ 怀疑导管相关性血流感染的患者，可采用培养方法（建议同时进行）：
❖ 1.用Maki半定量培养法对血管内导管尖端片段进行培养： ❖ 采集： 用75%酒精消毒导管周围皮肤；移动导管，无菌剪刀剪取
1.采集时间
患者出现寒战、体温升高前； 使用抗菌药物前； 患者已使用抗菌药物的情况下，若出现明显的发热前期症状，可在 寒战前或寒战后1h内采血；若无明显的寒战阶段，应在第二次服抗菌药 物前采血； 对于无明显感染病灶或未找到发热原因的发热患者，先在不同部位 采集2-3份血标本，间隔大于或等于1h，24h-36h后再次采集2份以上； 疑似沙门菌感染的患者在病程第1-2周采集静脉血；
无菌生长，需要进行末次接种。
双相培养瓶
二.导管相关性血流感染的标本培养
❖ 导管相关性血流感染：
诊断学--病原微生物检查PPT共48页
诊断学--病原微生物检查
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
病原微生物检测方法共29页
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。—方法
11、获得的成功越大，就越令人高兴 。野心 是使人 勤奋的 原因， 节制使 人枯萎 。 12、不问收获，只问耕耘。如同种树 ，先有 根茎， 再有枝 叶，尔 后花实 ，好好 劳动， 不要想 太多， 那样只 会使人 胆孝懒 惰，因 为不实 践，甚 至不接 触社会 ，难道 你是野 人。(名 言网) 13、不怕，不悔(虽然只有四个字，但 常看常 新。 14、我在心里默默地为每一个人祝福 。我爱 自己， 我用清 洁与节 制来珍 惜我的 身体， 我用智 慧和知 识充实 我的头 脑。 15、这世上的一切都借希望而完成。 农夫不 会播下 一粒玉 米，如 果他不 曾希望 它长成 种籽； 单身汉 不会娶 妻，如 果他不 曾希望 有小孩 ；商人 或手艺 人不会 工作， 如果他 不曾希 望因此 而有收 益。-- 马钉路 德。
常见病原微生物的检测PPT
2.最适温度为37℃，最适pH为7.2～7.4 3.在琼脂平板培养24小时，粗糙菌落。菌落呈毛玻璃状，边缘不整齐
，呈卷发状，有一个或数个小尾突起，这是本菌向外伸延繁殖所致。
5
第五页，共81页。
4.在5～10%绵羊血液琼脂平板上，菌落周围无明显的溶 血环，但培养较久后可出现轻度溶血。菌落有粘性，用 接种针钩取可拉成丝，称为“拉丝”现象。
55
第五十五页，共81页。
3.导致疾病
疯牛病：牛海绵状脑病。病牛临床表现为步态不稳、共济失调、搔 痒、烦躁不安等神经症状。
绵羊痒病：它是羊的一种慢性致死性疾病，病羊具有中枢神经系 统变性、剧痒、共济失调、高死亡率等特点。
克-雅氏病：人的一种中枢神经系统变性疾病。其临床症状和病理
组织学变化与疯牛病、绵羊痒病十分相似。
56
第五十六页，共81页。
共同特征：潜伏期长（可达数年至数十年），一旦发病即呈 慢性进行性发展，最终死亡。
副霍乱肠毒素Ace 肠段积液
侵袭力 鞭毛 菌毛
46
第四十六页，共81页。
CT的结构
由1个A亚单位和5个B亚单位构成
的多聚体，不耐热。
（前噬菌体基因编码）
B亚单位： 与小肠粘膜上皮细胞 GM1神经节苷脂受体结 合；
1A+5B
47
第四十七页，共81页。
霍乱典型临床特征
患者出现上吐下泻，泻出物呈“米 泔水样”。 并发症有血容量减少， 循环衰竭 及肾功能衰竭，导致尿闭、电解 质、酸碱平衡失调导致肌肉痉挛。
52
第五十二页，共81页。
一、生物学特性
（一）形态与结构
prion 是一种不含核酸和脂类的疏水性糖蛋白，分子量为 27～30×103，因此又称为 PrP27～30。大小30-50nm，电镜下
，呈卷发状，有一个或数个小尾突起，这是本菌向外伸延繁殖所致。
5
第五页，共81页。
4.在5～10%绵羊血液琼脂平板上，菌落周围无明显的溶 血环，但培养较久后可出现轻度溶血。菌落有粘性，用 接种针钩取可拉成丝，称为“拉丝”现象。
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第五十五页，共81页。
3.导致疾病
疯牛病：牛海绵状脑病。病牛临床表现为步态不稳、共济失调、搔 痒、烦躁不安等神经症状。
绵羊痒病：它是羊的一种慢性致死性疾病，病羊具有中枢神经系 统变性、剧痒、共济失调、高死亡率等特点。
克-雅氏病：人的一种中枢神经系统变性疾病。其临床症状和病理
组织学变化与疯牛病、绵羊痒病十分相似。
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共同特征：潜伏期长（可达数年至数十年），一旦发病即呈 慢性进行性发展，最终死亡。
副霍乱肠毒素Ace 肠段积液
侵袭力 鞭毛 菌毛
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CT的结构
由1个A亚单位和5个B亚单位构成
的多聚体，不耐热。
（前噬菌体基因编码）
B亚单位： 与小肠粘膜上皮细胞 GM1神经节苷脂受体结 合；
1A+5B
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第四十七页，共81页。
霍乱典型临床特征
患者出现上吐下泻，泻出物呈“米 泔水样”。 并发症有血容量减少， 循环衰竭 及肾功能衰竭，导致尿闭、电解 质、酸碱平衡失调导致肌肉痉挛。
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第五十二页，共81页。
一、生物学特性
（一）形态与结构
prion 是一种不含核酸和脂类的疏水性糖蛋白，分子量为 27～30×103，因此又称为 PrP27～30。大小30-50nm，电镜下
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本章主要内容
一、标本采集、运送和检测方法 二、细菌耐药性检查 三、临床感染常见病原体检查 四、病毒性肝炎检测 五、院内感染
病毒性肝炎检测ห้องสมุดไป่ตู้P452
甲、乙、丙、丁、戊、庚、输血传播病毒肝炎
甲型肝炎(粪口途径)：
IgM抗体：特异性早期诊断指标,提示HAV现症感染 IgG抗体：出现于恢复期且长期存在,提示既往感染
实验诊断学_病原微生物检查文稿演示
本章主要内容 一、标本采集、运送和检测方法
二、细菌耐药性检查 三、临床感染常见病原体检查 四、病毒性肝炎检测 五、院内感染
一、细菌检验标本采集与送检的基本原则 参考P463
1.注明被检人姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来 源及检验目的、抗生素使用情况。
2.尽量在抗生素使用前采集标本。 3.在采集血液、脑脊液、穿刺液等标本时，应严格执
一、流行病学和临床类型
流行病学特征 新的病原体不断被发现，如SARS病毒、禽流感染 病毒等。 老传染病死灰复燃 如结核、梅毒、霍乱等 多重耐药菌株不断出现 器官移植、放/化疗、侵入性医疗检查或治疗导致 医院感染发生率不断增加
二、检查项目和临床应用
1.细菌感染：细菌培养是最重要的确诊方法 2.病毒感染：常用血清学检查，如HIV 3.真菌和寄生虫感染：形态学检查
其它 丁肝为缺陷病毒，依赖HBV
本章主要内容
一、标本采集、运送和检测方法 二、细菌耐药性检查 三、临床感染常见病原体检查 四、病毒性肝炎检测 五、院内感染
医院感染常见病原体检测
革兰氏染色
阴道毛滴虫
2.分离、培养、鉴定：金标准较费时（3天）,同时 可进行药物敏感试验。
3.血清学检查：如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。 抗体检测应进行双份血清检测，两次抗体效价相 差4倍以上有现症诊断价值，但无早期诊断意义。
（但IgM有早期诊断意义）
主要内容
一、标本采集、运送和检测方法 二、细菌耐药性检查 三、临床感染常见病原体检查 四、病毒性肝炎检测 五、院内感染
1.无菌生理盐水清洗病灶表面后，用无菌拭子取病灶 深部的脓液和分泌物，立即送检。
2.对未溃破的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后，以 无菌注射器抽取脓液送检，也可以切开排脓时用无 菌拭子采样。
3.生殖道标本包括尿道口分泌物、外阴糜烂物、宫颈 口分泌物、前列腺液等，应注意保温。
三、检查方法
1.直接涂片、镜检：初步诊 断但阳性率低。如抗酸染 色找结核杆菌。
乙型肝炎 1.最常用的定性检测 乙肝两对半
常用测定方法：ELISA法 2.乙肝DNA定量PCR检测：病毒复制的指标
正常:HBV DNA<103 Copies/ml
拉米夫定(贺普丁）、干扰素治疗效果的主要指标。
丙肝病毒标志物 RNA病毒 血液传播 1.抗HCV-IgM 近期感染指标 2.抗HCV-IgG 已有感染，不作为感染早期指标 3.HCV-RNA： 阳性提示HCV复制活跃,直接指标
粪便标本的采集
1.挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2～3克盛
于灭菌容器中送检，也可用拭子挑取粪便插 入Cary-Blair运送培养基中送检。 2.对不易获取粪便者，如婴幼儿可用直肠拭子 采集送检。
呼吸道标本的采集
1.自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深 部咳出,以清晨第一口痰为好。
2.气管镜下采集法、气管穿刺法：下呼吸道病原学的 理想标本，可减少污染，但病人有一定的痛苦，不 易接受和推广。
耐药性及发生机制
1.当前临床分离的常见细菌 (1)革兰阴性菌 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假 单胞菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌 等，占70%。 (2)革兰阳性菌 葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、卡 他布兰汉菌等，占30%。
滥用抗生素的后果→耐药
2.耐药机制 (1)耐药基因的整合子系统 (2)产生灭活抗生素的水解酶或钝化酶 (3)改变抗生素作用的靶位 (4)细菌膜的外排泵出系统 (5)生物膜的形成，提高耐药性
3、药物敏感试验
(1)K-B纸片琼脂扩散法：最常用，操作相对方便 (2)稀释法 包括琼脂稀释法和肉汤稀释法
可获得最小抑菌浓度（MIC），但较麻烦 (3)E试验 ：结合稀释法和扩散法，价格昂贵
4.重点耐药菌株监测试验
☆ (1)耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的筛选 (2)氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌 (HLAR)筛选 (3)耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)筛选 (4)染色体Ι型β-内酰胺酶AmpC酶的检测
☆(5)超广谱ß内酰胺酶(ESBL)检测
5.病原菌耐药基因的检测
(1)适全生长缓慢的细菌如结核分枝杆菌 (2)对病原菌的耐药具有确证意义 (3)考核其它耐药性检查方法的金标准,可能成为未
来耐药性检查的主导方法。
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3.应及时送检和处理(<1小时)，放置时间长可导致肺 炎链球菌，流感嗜血杆菌等的检出率明显下降。
脑脊液等无菌体液标本的采集
1.严格无菌条件下采集标本。 2.尽量采集多的标本送检。 3.尽快送检或床旁接种可 提高阳性率，特殊标本 需保温送检。如脑膜炎奈瑟菌、 肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。
其它标本的采集 (伤口、烧伤创面、脓肿等)
行无菌操作，避免杂菌污染。 4.立即送到实验室，某些细菌还应注意保温、保湿。 5.盛标本容器须经灭菌处理，勿用消毒剂。
二、常见标本的采集：血液与骨髓
1.采血部位多为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静 脉处采集血标本，无菌操作。
2.每瓶采血量为5～10ml左右， 培养基与血液之比以10:1为宜， 以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。 3.选择寒战发热之初采血。对已用抗菌药物而又不
能停药者，应在下次用药前采血。 4.每例建议不同时间不同部位采血3次，注意区别
感染菌和皮肤污染菌。
尿液标本的采集
1.中段尿采集：最常用的方法。采样前须消毒尿道 口将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。
2.导尿管采集尿液：可减少污染，但易引起逆行感 染。不可从集尿袋下端管口留取标本。
3.膀胱穿刺采集尿液：病人耻骨上皮肤消毒后，以 无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌 培养或婴幼儿。