关于生物化学常用试剂配制
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液,待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制:取0.2g苏丹IV,放入 无水乙醇中,加热,使它充分溶解,成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制:0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸-生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸,使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银,溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸,即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里, 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin),固定材料常用5%甲醛溶 液,保存生物标本常用4一5%的,消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液,加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1.乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中,贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时,每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g,蒸馏水l0mL,浓氨水40mL,10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中,然后加浓氨水,最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g,95% 乙醇760mL,蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL,浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g,蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后,微加温使其溶解后,用柠檬酸调节pH 6.1,分装于三角瓶中(30~50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min,备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液:(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g,MgCl2·6H2O1g,用双蒸馏水定容至450mL:(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合,加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液:Na2HPO4·12H2O 1.52g,KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL,然后加氯仿1mL,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液:取上述贮存液的A和B液各25mL,加双蒸馏水定容至450mL,113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意:药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序参加,用适量双蒸馏水溶解,待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品,最后补足水到总量。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液(1)0.5mol/L EDTA(乙二胺四乙酸)在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0(约用10mol/L NaOH 50ml),补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意:EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0,才会溶解。
(2)1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中,用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后,方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L,分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色,应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异,温度每升高1℃,PH值大约降低0.03个单位。
(3)10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,用蒸馏水定容至1L,过滤除菌,室温贮存。
乙酸铵在热水中分解,含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
(4)甘油(10%,V/V)用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份,-20℃贮存。
(5) 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶,磁力搅拌数小时,以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,于4℃避光保存。
注意:溴化乙啶是一种诱变剂,必须小心操作。
(6) 70%乙醇(C2H5OH)100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
(7) 50×葡萄糖Glucose(150ml储备液)将54g D-葡萄糖溶于超纯水,磁力搅拌至完全溶解,并将体积调至150ml,过滤除菌,室温贮存。
(8) 10mol/L氢氧化钠(NaOH)将400g NaOH颗粒,加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中,磁力搅拌至完全溶解。
生物学实验室常用试剂的配制方法
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA 的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
常用化学试剂的配制方法
常用试剂配制的具体操作1.HCL(1+1):在1000ml棕色瓶或白色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢加入盐酸,摇匀,密封备用。
(打开盐酸时,需要用纸,盖在瓶盖上再打开。
因为里面可能存在压力,若是直接打开,可能会因为压力过大,造成液体冲出,伤害到眼睛)也可以放置少量在白色滴瓶中待用。
2.抗坏血酸(5%):用一次性塑料杯,称取抗坏血酸1g,硫脲0.1g,加入20ml纯净水,在超声器中用玻璃棒搅匀,再倒入30ml小棕色瓶中保存。
(在实验前需要看颜色变化,如果颜色变深,则代表试剂过期)。
3.盐酸—硼酸混合酸:用一次性塑料杯称取硼酸25g,500ml量杯分2次量取900ml纯净水,清洗塑料杯,并倒入1000ml烧杯中,再加入HCL(1+1)70ml,放置在超声器中,用玻璃棒搅匀溶解,再倒入1000ml的棕色瓶中保存(也可以用500ml白色塑料瓶,插10ml刻度移液管)4.钼酸钠(6%):用一次性塑料杯称取钼酸钠30g,500ml量杯量取500ml纯净水,边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中,然后放置在超声器中,用玻璃棒搅匀,再倒入至500ml白色塑料瓶中,密封保存。
(插5ml刻度移液管)5.H₂O₂(1+20):全名为过氧化氢或者双氧水。
用1ml刻度移液管,吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中,20ml量杯量取20ml纯净水,倒入塑料杯中,摇匀,再倒入至30ml的小棕色瓶中。
(容易失效,所以做溶液和检测时都需要速度快)6.三乙醇胺(TEA)(1+1):在1000ml棕色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺,摇匀备用。
(也可以用白色塑料瓶,加黑色外袋保存,插5ml刻度移液管)7.H2SO4(1+1):带橡胶手套及口罩。
用500ml量杯先量取300ml纯净水,在1000ml烧杯内,先倒入300ml纯净水。
用脸盆装半脸盆自来水,将烧杯先放入脸盆中,再用500ml量杯量取300ml浓硫酸,缓缓倒入浓硫酸,并用玻璃棒不停搅拌。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1.碘液的配制
取2g碘化钾,溶解在5mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2.斐林试剂
试剂A:将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中,加0.5mL硫酸,混合均匀。
试剂B:将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3.双缩脲试剂
试剂A:10%氢氧化钠试剂B:1%硫酸铜
4.苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不得超过10分钟。
5.二苯胺试剂:
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中,再加2.75mL浓硫酸(置冰箱中可保存根6个月,使用前在室温下摇匀)。
6.醋酸洋红染液
冰醋酸45mL+55mL蒸馏水+0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸10分钟,待冷却后,即可使用。
7.有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
8.有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液
9.卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)
酒精:冰醋酸=3:1(体积比)。
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法l.乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中,贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时,每1000mL 培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g,蒸馏水l0mL,浓氨水40mL,10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中,然后加浓氨水,最后加入10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g,95% 乙醇760mL,蒸馏水100mL。
5. 吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL,浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g,蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后,微加温使其溶解后,用柠檬酸调节pH 6.1,分装于三角瓶中(30~50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min,备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A液:(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g,MgCl2·6H2O1g,用双蒸馏水定容至450mL:(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合,加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液:Na2HPO4·12H2O 1.52g,KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL,然后加氯仿1mL,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液:取上述贮存液的A和B液各25mL,加双蒸馏水定容至450mL,113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意:药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序加入,用适量双蒸馏水溶解,待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品,最后补足水到总量。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。
配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
生物学常用试剂配制
生物学常用试剂配制 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】常用试剂储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。
避免光照。
室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。
包装必须密封,切勿受潮。
应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。
操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。
远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。
EDTA(PH )组分浓度: mol/L EDTA(MW:)配制量: 500ml配制方法:1.称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。
2.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3.用NaOH调节调节pH值至(约需加入20g固体NaOH),当pH 接近时,EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。
4.高温高压灭菌后,室温保存半年。
5M NaCl组份浓度: 5mol/L NaCl (MW:配制量: 1L配制方法:1.准确称取氯化钠,置于1L的蓝盖瓶中。
2.用去离子水溶解并稀释至1L。
3.高温高压灭菌后,常温保存。
CaCl2组份浓度:L CaCl2 (MW:配制量: 50ml配制方法:1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。
2.用去离子水溶解并稀释至500ml,用μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。
3.贮存于4℃。
50% 甘油组分浓度: 50%(V/V) glycerol配制量: 100ml配制方法:1. 量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中: 100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。
3.高温高压灭菌,4℃保存。
4.使用时,到超净台分装。
Amp-氨苄青霉素(钠盐)放置:置于4°C冰箱配方及配法:配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于-20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(200ug/ml)加入培养基。
生化试剂配制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。
2. 熟悉实验操作规范,提高实验技能。
3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。
二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用,它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。
本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂,加深对实验原理和操作步骤的理解。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。
2. 试剂:氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。
四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚,置于烧杯中。
生化实验室常用试剂配方
PBS:我们去买复合片,直接配制。
试剂名称:4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠:40ml500ml 配方操作过程A 液最好在500ml 的三角烧瓶中加热配制(低温比较难溶),至多聚甲醛完全溶解后冷却待 用。
注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B 液和C 液配制好后, 将B 液倒入。
液中,混合后再加入A 液,将pH 调至7.2〜7.4,最后,补充蒸馏水至500ml 充分混合。
或者将多聚甲醛 20g 、Na 2HPO4・2H 2O 3.44g 、NaOH 1.93g 直接溶于500ml 蒸馏水,将pH调至7.2〜7.4即可。
5>Tris-硼酸(TBE )缓冲液(配制1L 溶液各成分的用量)Tris 碱54 g 硼酸27.5 g EDTA 2.92 g实际配 500ml ,那么 Tris 碱 27g ,硼酸 13.75g ,EDTA 1.46gWestern bloting 10%分离胶(两块胶,15ml ) 4%浓缩胶(两块胶 ,5 ml ) 超纯水6ml 超纯水 3.2ml 40%Acr/Bic5.25ml 40%Acr/Bic 0.55ml (37.5: 1)(37.5: 1) LT3.75 HT 1.25 10%AP80 m 10%AP 50 m TEMED 7.6 m TEMED 12.5 mRunning buffer (IX): Trisbase 3.03g;Glycine 18.8g;SDS1.0g 加水至1L所需药品及剂量:A 液:多聚甲醛20g溶于200ml 蒸馏水 B 液:N a HPO4-2H O 3.44g 溶于150ml 蒸馏水 C 液: NaOH1.93g 200ml 蒸馏水可以配成5X(5X电泳缓冲液配方:总量为1L; 15.1g Tris碱;72.0g甘氨酸;5.0gSDS)Transfer Buffer (IX):甘氨酸 2.9gTris (MW121.14) 5.8gSDS 0.37g甲醇200ml,加蒸馏水至1000ml溶解后4°C保存,溶液可重复使用2-3次。
常用的药品试剂和培养基的配制方法
常用的药品试剂和培养基的配制方法药品试剂和培养基在生物化学实验室和微生物实验室中是非常常见而且必需的。
本文将介绍一些常用的药品试剂和培养基的配制方法。
一、药品试剂配制方法1.蒸馏水(distilled water)的制备:将自来水倒入蒸馏水机,设定适当的温度,蒸馏水机将自来水蒸发并再冷凝成蒸馏水,收集蒸馏水即可。
2.缓冲液(Buffer solution)的制备:缓冲液是具有稳定pH值的溶液,常用于生物实验中。
其中一种常见的缓冲液是Tris缓冲液的制备方法:a. 准备50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.6),称取6.051g Tris粉末,加入适量的蒸馏水,溶解并调节pH到7.6b.将溶液用蒸馏水加至总体积1L。
最后,用自来水稀释至适当浓度即可。
3.乙醇(Ethanol)的制备:乙醇是实验室中常见的抗菌剂,用于消毒和杀死细菌和病毒。
一般来说,70%乙醇是最常见的浓度,可以按以下方法配制:a.取足够的无水乙醇(100%)和蒸馏水。
b.以70/30的体积比例混合乙醇和蒸馏水,搅拌混合均匀。
c.最后,将乙醇溶液过滤并储存在干燥、暗处。
4.洗涤液(Washing buffer)的制备:洗涤液用于洗涤和清洁生物实验中的试剂和器皿。
以下是一种简单的洗涤液的制备方法:a. 称取0.05M Tris-HCl缓冲液(pH 7.4),加入适量的NaCl溶液,混合均匀。
b. 在溶液中加入适量的Tween-20(如0.1%)或Triton X-100(如0.5%),混合均匀。
c.用蒸馏水稀释至适当浓度,最后pH值调整到合适的范围内。
二、培养基配制方法1.琼脂培养基(Agar medium)的制备:以下是一种适用于大部分微生物培养的琼脂培养基的制备方法:a.称取适量的琼脂粉末,并加入适量的蒸馏水中,迅速搅拌均匀,但要避免气泡产生。
b.在生物安全柜下,将混合溶液加热至沸腾,同时不断搅拌,直到琼脂完全溶解。
c.将溶液冷却至接近50℃,然后将适量的细菌营养物(如氨基酸和碳源)加入到培养基中。
生物化学实验常用试剂的配制方法
生物化学实验常用试剂的配制方法生物化学实验常用试剂的配制方法1、0.5mol/L 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液□组份浓度组份浓度0.5mol/L □配制量配制量 2L □配置方法配置方法1.准确称取氢氧化钠40g 。
2.用去离子水溶解并稀释至2L 。
2、0.5mol/L 盐酸溶液盐酸溶液□组份浓度□组份浓度 0.5mol/L 0.5mol/L□配制量□配制量 2L 2L□配置方法□配置方法 1. 1.准确量取盐酸准确量取盐酸83.4mL 83.4mL。
2.用去离子水稀释至用去离子水稀释至2L 2L。
3、含、含 0.5mol/L 0.5mol/L 氯化钠的氯化钠的 0.5mol/L 0.5mol/L 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液□组份浓度□组份浓度 0.5mol/L 0.5mol/L 氯化钠、氯化钠、0.5mol/L 0.5mol/L 氢氧化钠氢氧化钠□配制量□配制量 1L 1L□配置方法□配置方法 1. 1.准确量取氯化钠准确量取氯化钠29.3g 29.3g。
2.准确量取氢氧化钠准确量取氢氧化钠20g 20g。
3.用去离子用去离子水稀释至1L 1L。
注意:此溶液供回收纤维素时使用。
注意:此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.20.2%葡萄糖标准溶液%葡萄糖标准溶液%葡萄糖标准溶液□组份浓度□组份浓度 0.2 0.2% □配制量□配制量 1L 1L□配置方法□配置方法 1. 1.称取葡萄糖称取葡萄糖2.5g 置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。
小时。
2. 2.干燥器干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。
中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。
3. 3.准确称取葡萄糖准确称取葡萄糖 2.000g 2.000g。
4.用去用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
4℃保存。
5、250μg/mL 牛血清白蛋白标准液牛血清白蛋白标准液□组份浓度□组份浓度 250 250μg/mL □配制量□配制量 2L 2L□配置方法□配置方法 1. 1.准确称取准确称取250mg 标准牛血清白蛋白。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种,下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍:1.磷酸缓冲液(PBS)PBS是一种常用的缓冲液,用于洗涤细胞和组织,以及稀释试剂等。
它的配方通常包括:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.44g-KH2PO4:0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中,调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值,常用于分子生物学实验。
其配方为:- Tris-HCl:12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
3.氢氧化钠(NaOH)溶液NaOH是一种常用的碱试剂,可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为:-NaOH:4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿/异丙醇提取液氯仿/异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为:-氯仿:24mL-异丙醇:25mL-TE缓冲液:1mL将以上试剂混合,并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠(NaHCO3)缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液,可用于调节溶液的pH值。
其配方为:-NaHCO3:8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白(GFP)提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为:- Tris-HCl(pH 7.5):50 mM-NaCl:150mM-EDTA:1mM- Triton X-100:1%将以上试剂混合,并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子(Zn2+)溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为:-ZnSO4·7H2O:2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为:-生理盐水:9mL-甲苯:1mL将以上试剂混合,即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍,实验室中常用的试剂配方非常多,根据具体实验的需要,需要选择合适的试剂及其配方。
常规生物学试剂配制
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl??????????? □组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)???□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
关于生物化学常用试剂配制
关于生物化学常用试剂配制常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1. Mandels营养盐溶液(1000 mL)名称重量(g)硫酸铵((NH4)2SO4)14磷酸二氢钾(KH2PO4)20尿素(H2NCONH2) 3硫酸镁(MgSO4·7H2O) 3氯化钙(CaCl2·2H2O) 4注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
2. Mandels微量元素溶液(1000 mL)名称重量(g)氯化钴(CoCl2·6H2O)硫酸锌(ZnSO4·7H2O)硫酸锰(MnSO4·H2O)硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
3. DNS试剂的配制(1000 mL)(1)取:3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)7.5 g氢氧化钠(NaOH )14.0 g充分溶解于1000 mL 水中(水预先煮沸10 min)(2)加入:酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)216.0 g苯酚(在50 ℃水浴中融化)mL偏重亚硫酸钠(Na2S2O5) 6.0 g(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置5天后便可使用,平时盛一小瓶(250 mL)使用,要放在冰箱中冷藏。
此溶液每月配制一次。
注意:倒入瓶中时要尽量装满!!4. 考马斯亮蓝G-250的配制(1000 mL)称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中,加入100 mL 85 %磷酸,用蒸馏水稀释至1000 mL ,滤纸过滤。
最终试剂中含%(w/v)考马斯亮蓝G-250,%(w/v)乙醇,%(w/v)磷酸。
5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制(1000 mL)名称分子量Mn 重量(g)柠檬酸(C6H8O7·H2O)210 210NaOH 40准确称取柠檬酸210 g,溶于约750 mL煮沸(10 min)蒸馏水中,待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g,完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中,冷却后将容量瓶定容到1000 mL(原始)。
生物实验常用溶液的配制(整理版)
生物实验常用溶液的配制一、DNA电泳相关:1、DNA电泳缓冲液:(1)Tris-乙酸(TAE)缓冲液:TAE较为常用,且价格低,但其缓冲能力较弱。
所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环,而且TAE需要经常更新;且要加入EDTA,目的在于鳌合二价离子,抑制DNase,以保护DNA。
① TAE使用液:1×:40mmol/L Tris-乙酸1mmol/L EDTA② TAE贮存液(每L):50×:242g Tris碱57.1ml 冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)(2)Tris-硼酸(TBE)缓冲液:① TBE使用液:0.5×:0.045mol/L Tris-硼酸1mmol/L EDTA② TBE贮存液(每L):5×:54g Tris碱27.5ml 硼酸20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)(3)Tris-磷酸(TPE)缓冲液:① TPE使用液:1×:90mmol/L Tris-磷酸2mmol/L EDTA② TPE贮存液(每L):10×:108g Tris碱15.5ml 85%磷酸40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)2、1%(线性DNA分子大小为400-6000)琼脂糖凝胶DNA电泳操作过程:①制胶:按要求取1g琼脂糖加入1×TAE(或0.5×TAE)电泳缓冲液100ml,置于三角瓶中,在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖溶解(一般中低火温,3-5min即可);②溶液冷却至60℃,加入EB至0.5μg/ml(2-3ml即可),充分混匀;③迅速倒入备好的胶模中;④凝胶完全凝固后,小心移去梳子和封口胶带,将凝胶放入电泳槽中;⑤加入能没过胶面1mm深的电泳缓冲液(TAE);⑥DNA样品与加样缓冲液(溴酚蓝)混合后,用微量移液吸头加样;⑦盖上电泳槽并通电,使DNA向正极移动(黑极→红极),1-5V/cm(80V电压左右)进行电泳(30min 左右);⑧电泳完毕,切断电源,取出凝胶于紫外投射光源下观察并拍照。
常用试剂的配制
常用试剂的配制1、2,4-二硝基苯肼溶液I.在15mL浓硫酸中,溶解3克2,4-二硝基苯肼。
另在70mL95%乙醇里加20mL 水,然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红色溶液(若有沉淀应过滤)。
Ⅱ.将1.2克2,4一二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中,配好后储于棕色瓶中,不易变质。
I法配制的试剂,2,4-二硝基苯肼浓度较大,反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大,因此便于检验水中醛且较稳定,长期贮存不易变质。
2、卢卡斯(Lucas)试剂将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融,稍冷后放在干燥器中冷至室温。
取出捣碎,溶于23mL浓盐酸中(比重1.187)。
配制时须加以搅动,并把容器放在冰水浴中冷却,以防氯化氢逸出。
此试剂—般是临用时配制。
3、托伦(Tollens)试剂I.取0.5mL10%硝酸银溶液于试管里,滴加氨水,开始出现黑色沉淀,再继续滴加氨水,边滴边摇动试管,滴到沉淀刚好溶解为止,得澄清的硝酸银氨水溶液,即托伦试剂。
Ⅱ.取一支干净试管.加入1mL5%硝酸银,滴加5%氢氧化钠2滴,产生沉淀,然后滴加5%氨水,边摇边滴加,直到沉淀消失为止,此为托伦试剂。
无论I法或Ⅱ法,氨的量不宜多,否则合影响试剂的灵敏度。
I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱,在进行糖类实验时,用I法配制的试剂较好。
4、谢里瓦诺夫(Seliwanoff)试剂将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100mL。
5、希夫(Schiff)试剂在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐,放置冷却后,加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸,再用蒸馏水稀释至200mL。
或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液,冷却后加入0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色,用蒸馏水稀释至200mL。
此外,也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中,冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失,加入0.5g活性炭,振荡过滤,再用蒸馏水稀释至500mL。
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常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1. Mandels营养盐溶液(1000 mL)名称重量(g)硫酸铵((NH4)2SO4)14磷酸二氢钾(KH2PO4)20尿素(H2NCONH2) 3硫酸镁(MgSO4·7H2O) 3氯化钙(CaCl2·2H2O) 4注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
2. Mandels微量元素溶液(1000 mL)名称重量(g)氯化钴(CoCl2·6H2O)硫酸锌(ZnSO4·7H2O)硫酸锰(MnSO4·H2O)硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
3. DNS试剂的配制(1000 mL)(1)取:3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)7.5 g氢氧化钠(NaOH )14.0 g充分溶解于1000 mL 水中(水预先煮沸10 min)(2)加入:酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)216.0 g苯酚(在50 ℃水浴中融化)mL偏重亚硫酸钠(Na2S2O5) 6.0 g(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置5天后便可使用,平时盛一小瓶(250 mL)使用,要放在冰箱中冷藏。
此溶液每月配制一次。
注意:倒入瓶中时要尽量装满!!4. 考马斯亮蓝G-250的配制(1000 mL)称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中,加入100 mL 85 %磷酸,用蒸馏水稀释至1000 mL ,滤纸过滤。
最终试剂中含%(w/v)考马斯亮蓝G-250,%(w/v)乙醇,%(w/v)磷酸。
5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制(1000 mL)名称分子量Mn 重量(g)柠檬酸(C6H8O7·H2O)210 210NaOH 40准确称取柠檬酸210 g,溶于约750 mL煮沸(10 min)蒸馏水中,待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g,完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中,冷却后将容量瓶定容到1000 mL(原始)。
(检验方法:取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍,测定稀释液的pH值,pH值应为)6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定(1)标准糖溶液的配制准确称取2.000 g葡萄糖/木糖(葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h),蒸馏水溶解,全部转移至1 L容量瓶内,摇匀,配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。
取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶,蒸馏水定容,摇匀。
即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。
取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶,每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液,蒸馏水定容,摇匀。
即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。
(2)标准方程的测定:①葡萄糖/木糖标准方程的测定取10支25mL刻度管,10支1mL刻度吸管,分别加入0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液1 mL,DNS溶液3 mL。
100 ℃煮沸5 min,水浴冷却后定容至25 mL,摇匀。
以蒸馏水作为空白对照,550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标,C为横坐标,制定标准曲线。
(7230型分光光度计输出方程为:A = MC + N,723型分光光度计输出方程为:C = KA + B)②酶解木糖标准方程测定(测定木聚糖酶活力)取6支25 mL刻度管,6支2 mL刻度吸管,分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解木糖标准溶液mL,DNS溶液3 mL,100 ℃煮沸5 min,水浴冷却后定容至25 mL,摇匀。
以蒸馏水作为空白对照,550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标,C为横坐标,制定标准曲线。
(7230型分光光度计输出方程为:A = MC + N,723型分光光度计输出方程为:C = KA + B)③酶解葡萄糖标准方程测定(测定滤纸酶活力、CMC酶活力)取6支小试管,6支2 mL刻度吸管,分别加入1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖标准溶液mL,DNS溶液3 mL,100 ℃煮沸5 min,水浴冷却后,量筒定容至50 mL(定容至25 mL,测定CMC酶活力),摇匀。
以蒸馏水作为空白对照,550 nm测定吸光度A。
以A为纵坐标,C为横坐标,制定标准曲线。
(7230型分光光度计输出方程为:A = MC + N,723型分光光度计输出方程为:C = KA + B)7. 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制注:Na2HPO4,Mr =;mol/L溶液为28.40 g/LNa2HPO4·2H2O,Mr =;mol/L溶液为35.61 g/LC6H8O7·H2O,Mr =;mol/L溶液为21.01 g/L二、酶活力的测定1. 滤纸酶活力的测定—纤维素酶的总体酶活力采用国际理论和应用化学协会(IUPAC)推荐的标准方法测定[Ghose,., et al,Pure & .,1987,59,257-268],一个滤纸酶活力的国际单位(FPIU)等于在标准反应条件下每分钟生成1 μmol葡萄糖量的酶量。
测定方法如下:取7支试管在其中1#-5#支小试管中加入50 mg卷成筒状的滤纸条(1 × 6cm),适当稀释酶液,取7支试管按下表操作。
(5#有底物无酶,6#为有酶无底物空白对照)项目1#2#3#4#5#6#7#稀释酶液(mL)0 酶解葡萄糖标样0.05 M柠檬酸缓冲液(mL) 1将上述试管盖上塑料布,用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中,保持在振幅80和温度50 ℃下保温60 min后立即取出加入3 mL DNS试剂,在沸水中反应5 min,冷却后加水至50 mL并充分摇匀,待滤纸完全沉淀后,取上层清液于550 nm波长下测定吸光度A值。
反应生成的葡萄糖的量根据葡萄糖标准曲线求得。
以、、、酶量所生成葡萄糖的毫克数为横坐标,酶量的对数为纵坐标作图,从图中找出生成2 mg葡萄糖的酶量,按下式计算样品的滤纸酶活力(FPA):2 mg葡萄糖滤纸酶活力=60min×(mg/μmol)×生成2mg葡萄糖的酶量(mL)一个滤纸酶活力单位定义为每分钟生成1μmol葡萄糖所需的酶量,单位:IU/mL。
备注:当加入mL酶液(指酶液没有被稀释的时候!)仍无法生成2 mg葡萄糖时,按下式计算:滤纸酶活= ×(葡萄糖mg数)2.β-葡萄糖苷酶活力的测定方法一:葡萄糖氧化酶测定法按国际标准方法测定[Ghose,.,etal,Pure & .,1987,59,257-268]。
一个β-葡萄糖苷酶活力国际单位(IU/mL)等于标准条件下每分钟转化1 μmol底物即生成2 μmol葡萄糖的酶量来表示。
预先用0.05 M的柠檬酸缓冲液配制15 mmol/L的纤维二糖溶液(0.513 g纤维二糖/100 mL0.05 M的柠檬酸缓冲液,现配现用)(1)每个样品应做三个不同酶量估计β-葡萄糖苷酶活力(IU/mL)<取酶液量(mL)(2)加料:试管中加入酶液、缓冲液和纤维二糖溶液如下:酶液量(mL)0.05 M柠檬酸缓冲液(mL)纤维二糖溶液(mL)样品适量1-酶液 1酶液空白 1 1 0纤维二糖空白0 1 1每个试管共2mL,用塑料纸包扎好。
注意:纤维二糖溶液必须用0.05M柠檬酸配制。
(3)酶解反应:试管置于50 ℃水浴中,保温30分钟,取出,沸水中放置5分钟使酶失活,冷却至室温。
(4)加显色剂(葡萄糖氧化酶测定试剂):取试管中冷却液30 μL,加入显色剂mL,混匀;同时做一个葡萄糖标样:取1 g/L葡萄糖标样30 μL,加显色剂mL,混匀;置于37 ℃水浴中,保温15分钟,取出。
(5) 测吸光度:505 nm ,用蒸馏水调零,测各试管溶液吸光度A 值。
1g/L 葡萄糖标样的吸光度为左右。
(6) 计算产生的葡萄糖mg 数:样 品 吸光度测得 酶 空 白 所含葡萄糖 = 2 × (mg ) 纤维二糖空白 1g/L 葡萄糖标样吸光度 样品实际产生的葡萄糖 = [测得葡萄糖mg]-[纤维二糖空白葡萄糖mg]-[酶空白葡萄糖mg] × [酶液量mL] (mg )注:纤维二糖空白所产生的响应值,当纤维二糖溶液为新鲜配制时,一般很低。
(7) 作图:以log(酶液量mL)为纵坐标,实际产生的葡萄糖mg 为横坐标作图,求出生成1 mg 葡萄糖时对应的酶液量mL 。
(8) 计算β-葡萄糖苷酶活力:β-葡萄糖苷酶活力 = (IU/mL )生成1mg 葡萄糖对应的酶液量(mL )注:当加入1mL 酶液仍不能生成1mg 葡萄糖时,β-葡萄糖苷酶活力 = ×(葡萄糖mg 数)☆ 补充:葡萄糖含量测定采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶终点比色法测定。
葡萄糖测定试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司生产,内含R 1(缓冲液)和R 2(酶试剂),使用时将R 1和R 2等量混合。
葡萄糖经葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将4-氨基安替比林与苯酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
测定该有机化合物的吸光度便能计算出葡萄糖的含量。
测定方法如下:在测定管中加入30 μL 待测试样的稀释液(空白管、标准管分别以蒸馏水及1g/L 的葡萄糖标准溶液代替),每一试管中加入由R 1和R 2等量混合的酶酚混合液,将各试管分别摇匀,置于37℃水浴中保温15min ,冷却至室温后,在7230分光光度计上于505 nm 下测定吸光度A 值,用空白管校正吸光度到零点,葡萄糖含量按下式计算:葡萄糖含量(g/L )= × 稀释倍数测定管吸光度 标准管吸光度方法二:采用pNPG(对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷)试剂测定(1)试剂的配制①50 mmol/L , pH 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制(200 mL)方法:mol/L柠檬酸mL + mol/L磷酸氢二钠mL②1 mol/L Na2CO3溶液(250 mL)称取:26.5 g Na2CO3溶解后定容至250 mL③ 5 mmol/L pNPG(分子量:)溶液的配制(100 mL)称取0.1506 g pNPG,用50mmol/L,柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液溶解后定容至100 mL。