第二节 支气管肺泡灌洗液检查
《支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识(2020)》要点
《支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识（2020）》要点支气管肺泡灌洗液（BALF）是通过纤维支气管镜对支气管以下肺段、亚肺段水平用无菌生理盐水反复灌洗，回收获取的肺泡表面衬液样本。
BALF 的细胞形态学、病原学、免疫学及分子生物学等一系列检查，在呼吸系统疾病，尤其是下呼吸道疾病的诊断、疗效观察、预后判断及发病机制研究等方面有着重要的意义。
1 检验目的计数BALF中细胞数量（红细胞、有核细胞）及各类有核细胞所占百分比，准确识别BALF中各类细胞、寄生虫、结晶，发现细菌或真菌及其它有形成分，为临床对疾病的诊断、鉴别诊断、治疗效果和预后评估提供检验诊断依据。
2 标本采集BALF由临床医生采集，在常规纤维支气管镜检查气道后，在活检和刷检前获得。
标本采集结束后，贴好标本信息标签，室温2h内送检。
3 标本接收与处理3.1 标本接收3.2 标本处理4 检验程序4.1 标本预处理4.2 理学检查及细胞计数4.3 标本离心4.4 制片4.5 染色4.6 阅片及细胞分类5 报告5.1 报告名称及模式5.2 报告内容5.3 BALF常规报告5.4 BALF细胞学报告5.5 有条件的单位推荐出具BALF常规细胞学检查图文报告5.6 让步检验报告5.7 主动及时报告6 涂片保存7 生物参考区间有核细胞数（90～260）×106/L，肺泡巨噬细胞85%～96%，淋巴细胞6%～15%，中性粒细胞≤3%，嗜酸粒细胞<1%，鳞状上皮细胞/纤毛柱状上皮细胞≤5%。
8 生物安全防护8.1 BALF标本的采集、运送必须符合生物安全要求，防止溢出。
8.2 检验人员在处理BALF标本时，需做好个人防护，严格执行生物安全管理程序，对表明有传染性疾病的BALF 标本按级别进行防护。
9 临床意义9.1 淋巴细胞计数>15%，中性粒细胞>3%，嗜酸性粒细胞>1%，或肥大细胞>0.5%，则分别称为BALF淋巴细胞增多型（即淋巴细胞为主型）、中性粒细胞增多型（即中性粒细胞为主型）、嗜酸性粒细胞增多型（即嗜酸性粒细胞为主型）和肥大细胞增多型（即肥大细胞为主型）。
支气管灌洗液的GM检测
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2016/3/21
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12Biblioteka 单击此处编辑母版标题样式 文献来源
［１０］ Bruno C ，Minniti S ，Vassanelli A ，et al ．Comparison of CTfeatures of Aspergillus and bacterial pneumonia in severelyneutropenic patients［J］ ．J Thorac Imaging ，２００７ ，２２ （２ ） ：１６０‐１６５ ． ［１１］ Oren I ， Avidor I ， Sprecher H ． Lack of intra‐laboratoryreproducibility in using Platelia Aspergillus enzymeimmunoassay test for detection of Aspergillus galactomannanantigen［letter］［J］ ．Transpl Infect Dis ，２０１４ ， １４（１） ：１０７‐１０９ ． ［１２］ Bizzini A ，Marchetti O ，Meylan P ．Response to ：lack ofintralaboratory reproducibility in using Platelia Aspergillusenzyme immunoassay test for detection of Aspergillusgalactomannan antigen［J］ ．Transpl Infect Dis ，２０１２ ， １４ （２ ） ：２１８‐２１９ ． ［１３］ Meersseman W ，Lagrou K ，Maertens J ，et al ．Galactomannanin bronchoalveolar lavage fluid ： a tool for diagnosingaspergillosis in intensive care unit patients［J］ ．Am J Respir Crit Care Med ，２００８ ，１７７（１） ：２７‐３４ ． ［１４］ Park SY ，Lee SO ，Choi SH ，et al ．Aspergillus galactomannanantigen assay in bronchoalveolar lavage fluid for diagnosis ofinvasive pulmonary aspergillosis ［J］ ．J Infect ，２０１０ ，６１ （６ ） ： ４９２‐４９８ ．［１５］ Affolter K ，Tamm M ，Jahn K ，et al ．Galactomannan inBronchoalveolar Lavage for Diagnosing InvasiveFungalDisease［J］ ．Am J Respir Crit Care Med ，２０１４ ，１９０ （３ ） ：３０９‐３１７ ．
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。
注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。
●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。
三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。
2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。
1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。
●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。
支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验
二、标本采集与接收
（二）标本接收
标本送达检验科后,由工作人员在Iis系统扫码登记接收,对标 识不明、采集量不足等不合格的标本,执行标本拒收程序。接 收标本后应及时检验,室温可保存4h,分析后的标本保存24h,不 建议将标本保存24h后再应用于检测分析。
对于部分不合格标本,可执行让步接收与让步检验,与临床进 行沟通,并在报告单中备注,说明标本状况对检验结果的影响。
制作涂片4~6张。
三、检验程序
（六）仪器法制片
采用细胞离心机( Cytospin)甩片,按仪器操作说明书规范操作。 应用此方法制片,细胞分布均匀,结构清晰,利于形态辨识,可提 高病变成分检出率。若标本有核细胞数显著增高时,使用生理 盐水适当稀释标本,将悬液有核细胞数稀释至(100~200)× 106/L为宜,有的标本稀释可达10~200倍。
四、报告
（五）涂片保存
发出报告后,对涂片进行分类归档,妥善保管,保存时限按各实 验室标准操作规程进行处置,一般保存3~5年。
四、报告
（六）生物参考区间
有核细胞数(90~260)× 106/L,肺泡巨噬细胞85%~96%,淋巴细 胞6%~15%,中性粒细胞≤3%,嗜酸粒细胞<1%,鳞状上皮细胞/ 纤毛柱状上皮细胞≤5%。
要>30%。 ➢ ②不可混入血液,红细胞应<10%,上皮细胞应<5%。 ➢ ③多部位灌洗时,注明灌洗部位;注明灌洗液或冲洗液;较多时
弃去第1管。 ➢ ④儿童BALF标本采集应严格按相应标准要求施行。
二、标本采集与接收
（一）标本采集
根据检测目的分装于不同的无菌试管或洁净试管中。用于病 原学分析的标本需用无菌容器收集。常规细胞学分析需选择 硅化的塑料容器或玻璃容器以减少细胞的黏附,采集标本量成 人应不少于l0ml,儿童应不少于3ml。如考虑为大气道疾病时, 建议第1管吸回收液单独处理;非大气道疾病时,可将所有标本 混合后送检。标本采集结束后,贴好标本信息标签,室温2h内 送检。
支气管肺泡灌洗液微生物学检查
操作方法
1.涂片法
进行正确取材，将灌洗液沉淀物均匀平铺在载玻片上，不能聚集，晾干后进行革兰染色或抗酸染色，用显微 镜观察，对结核分支杆菌的检查有较大意义。
2.细菌培养
严格无菌操作，采灌洗液沉淀物进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要 方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CFU/mL时被 认为有诊断意义，但标本采集方法复杂。在无菌环境下，将采集的灌洗液或者经过离心后的沉淀物接种在血琼脂 平板上，在37℃环境中培养24～48小时，若有典型的菌落生长，再挑取菌落作涂片染色后进行显微镜检查。
支气管肺泡灌洗液微生物学检查
介绍
目录
检查前准备
03 临床意义
02 操作方法 04 注意事项
支气管肺泡灌洗液微生物学检查是指利用支气管肺泡灌洗术进行灌洗后，采集肺泡表面衬液，进行微生物学 的检查。可对感染性下呼吸道疾病进行诊断定位、观察病情及判断预后。
检查前准备
检查前向患者解释检查目的、意义、方法等，以消除紧张情绪；检查前应禁饮食4～6小时以防呕吐物误吸； 完善血常规、凝血等实验室检查；使用纤维支气管镜采集支气管肺泡灌洗液，离心后取灌洗液沉淀物进行检查。
临床意义
涂片支气管肺泡灌洗液的非病原性杂菌很少，因此，涂片检查病原菌的意义较大，如进行革兰染色与抗酸染 色，可进行结核分枝杆菌的检查；细菌培养是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检 查，也适用于对支原体的培养和病毒分离。支气管肺泡灌洗液微生物学检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的 地位，可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。对于普通细菌感染者 其细菌培养≥105CFU/mL时为确定感染的阈值。但对于某些特殊感染，如在支气管肺泡灌洗液中分离出结核分枝 杆菌、军团菌即可做出诊断。支气管肺泡灌洗液微生物学检查对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如 对巨细胞病毒感染的敏感性达96%。
痰液与支气管肺泡灌洗液检查
鉴别病毒种类
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液 中的病毒进行分离培养和基因检 测，可鉴别不同种类的病毒，为
临床治疗提供依据。
鉴别真菌种类
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液 中的真菌进行分离培养和形态学 观察，可鉴别不同种类的真菌，
为临床治疗提供依据。
监测治疗效果
监测抗生素疗效
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液中的病原菌进行药物敏感试 验，可监测抗生素的治疗效果，指导临床合理用药。
显微镜检查是通过对支气管肺泡 灌洗液进行涂片和染色，然后在 显微镜下观察细胞和微生物的一
种方法。
通过显微镜检查，医生可以了解 灌洗液中细胞成分的种类和数量， 以及是否存在异常细胞或微生物。
显微镜检查对于诊断肺部感染、 炎症、肿瘤等疾病具有重要意义，
可以为后续治疗提供依据。
支气管肺泡灌洗液的细菌学检查
对于异常结果，应进一步检查 或复查，以排除误差或假阳性 结果。
对于检查结果的解读，应由专 业医生进行，避免误判或漏诊。
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感谢灌 洗液中的微生物，以确定是否存在细 菌、真菌、结核分枝杆菌等病原体的 一种方法。
细菌学检查对于诊断肺部感染具有较 高的敏感性和特异性，尤其对于一些 难以确诊的感染病例具有重要意义。
细菌学检查通常采用定量培养法，即 对灌洗液中的微生物进行计数，并根 据计数结果判断是否存在感染。
监测病情变化
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液中的病原菌数量和种类进行 动态监测，可了解病情的变化情况，为调整治疗方案提供依 据。
04 注意事项
适应症与禁忌症
适应症
痰液检查适用于肺部感染、肺癌等疾病的诊断；支气管肺泡灌洗液检查适用于肺 部炎症、肺泡蛋白沉积症等疾病的诊断。
支气管肺泡灌洗技术及其临床应用
支气管肺泡灌洗技术及其临床应用支气管肺泡灌洗（bron choalveolar lavage, BAL ）是经纤维支气管镜获取下呼吸道主要是肺泡来源的细胞与生化成分，分析探讨肺脏疾病病理学过程的一种比较安全而实用的技术。
BAL不同于以获取大气道来源的样本进行病原学和肿瘤细胞学检查而采用少量液体（10〜30 ml）进行的支气管冲洗，也不同于治疗性灌洗，如采用少量液体进行的支气管冲洗，以移出支气管哮喘、支气管扩张等患者气道内的黏稠分泌物采用大量液体（10〜30 L）进行的全肺灌洗技术，以治疗肺泡蛋白沉积症。
自从20世纪70年代开始应用BAL研究肺脏疾病局部的免疫反应和炎症机制以来，无论是BAL的操作技术，还是支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF的检测手段、检测项目及其应用范围都有了长足的进步。
许多国家的医学团体包括我国还先后制定并发表了指南性意见，规范了BAL的技术操作及BALF实验室处理过程，使其结果更加标准可靠，从而进一步促进了BAL的发展和应用，使其作为研究肺脏疾病的一种检查手段得到了广泛的认可。
最新发布的关于结节病和特发性肺纤维化（idiopathic pulmo nary fibrosis, IPF ）的诊断和治疗的国际性联合声明也将BAL推荐为常规诊断手段。
第一节支气管肺泡灌洗的应用指征因为相对无创，没有明显的并发症，病人容易耐受，所以BAL目前已经成为肺活检的替代或补充手段，用于各种原因引起的弥漫性实质性肺疾病的临床诊断、疗效判断、预后的评价以及病理和发病机制的研究。
临床上，BAL检查主要用于感染性原因、非感染性原因、免疫性原因和肿瘤性原因引起的弥漫性实质性肺疾病（diffuse pare nchyma lung disease, DPLD或间质性肺疾病（in terstitial lu ng disease, ILD ）的诊断和鉴别诊断（表15-1 ）。
支气管肺泡灌洗（BAL）操作方法
支气管肺泡灌洗(BAL) 操作方法：一、术前准备同纤维支气管镜(纤支镜) 术前准备,常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做BAL。
局部麻醉剂为2 %利多卡因。
二、BAL 操作技术1.灌洗部位选择:对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶(B1或B5 ) 或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL2. BAL 操作步骤◎首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅管注入2 %利多卡因1～2ml ,做灌洗肺段局部麻醉◎然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处,再经活检孔通过硅胶管快速注入37 ℃灭菌生理盐水,每次25～50ml ,总量100～250ml ,一般不超过300ml◎立即用50 ～100mmHg(1mmHg = 0. 133kPa) 负压吸引回收灌洗液, 通常回收率为40 %～60 %◎将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液,并记录总量◎装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中(减少细胞粘附) ,置于含有冰块的保温瓶中,立即送往实验室检查支气管肺泡灌洗液(BALF) 实验室检查一、BALF 细胞总数和分类计数检测1.将上述回收灌洗液装入塑料离心管内, 在4 ℃下以1 200r/ min 离心10min ,上清(原液或10 倍浓缩) - 70 ℃储存,用做可溶性成分的检测。
2. 经离心沉淀的细胞成分用Hank’s液(不含Ca2+、Mg2+ ) 在同样条件离心冲洗2 次, 每次5min。
弃去上清后Hank’s 液3～5 ml 制成细胞悬液。
也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失3. 在改良的Neubauer 计数台上计数BALF 中细胞总数,一般以1 ×109/ L表示。
如果细胞数过高时,再用Hank’s液稀释,调整细胞数为5 ×109/ L ,并同时将试管浸入碎冰块中备用4. 细胞分类计数:采用细胞离心涂片装置,加入备用细胞悬液(细胞浓度为5 ×109/ L) 100μl ,在4 ℃下以1 200 r/min 离心10 min通过离心作用将一定数量的BALF 细胞直接平于载玻片上。
临床检验基础痰液与支气管灌洗液检验
第十八章痰液与支气管灌洗液检验本章考点1.痰液检查2.支气管肺泡灌洗液检查一、痰液检查（一）标本采集与处理痰液理学检验以清晨第一口痰标本最适宜。
细胞学检验以上午9〜10时留痰最好。
做漂浮或浓集结核杆菌检验时，应采集12〜24h内的痰液。
测定24h痰量或观察分层情况时，容器可加少量石炭酸防腐。
用于细菌培养的标本，必须无菌采集，并先用无菌水漱口，以避免口腔内正常菌的污染。
为了防止痰液污染，用过的标本应灭菌后再处理。
（二）理学检查1.量：正常人无痰或仅有少量泡沫样或粘液样痰。
痰量增多常见于支气管扩张、肺脓肿、肺水肿和慢性支气管炎，有时甚至超过100ml/24h。
在疾病治疗过程中，如痰量减少，一般表示病情好转；但若发生支气管阻塞而使痰液不能排出时可见痰量减少，反而表明病情加重。
2.颜色与形状：正常人仅有少量白色或灰白色粘液痰，病理情况下痰液颜色可发生改变，但特异性较差，其颜色和形状改变见表1-18-1、1-18-2。
病理情况下常见的异物及临床意义见表1-18-3。
表表表表3.气味：正常人的新鲜痰液无特殊气味。
血腥味见于肺癌、肺结核等。
粪臭味见于膈下脓肿与肺相通时。
恶臭见于肺脓肿、晚期肺癌或支气管扩张等。
（三）显微镜检查直接涂片检验为常规方法，简便、快速，对临床诊断帮助较大。
涂片染色检验主要用于细胞学检验和细菌学检验。
正常痰液中无红细胞，有少量中性粒细胞和少量上皮细胞。
病理性痰液可见较多的红细胞、白细胞及其他有形成分，其临床意义见表1-18-4。
（四）质量控制1.标本采集：应注意：①注意标本留取时间：一般检验以早晨第一口痰为宜；做细胞学检验以上午9〜10h留痰液为好；浓缩法找结核杆菌时，则应留取24h痰液。
②留取痰液标本时，先用清水嗽口，用力咳出气管深处的痰液，注意勿混入鼻咽分泌物。
③细菌学培养时应无菌采集痰标本。
④及时送检。
2.显微镜检验的质量控制（1）检验人员：要加强责任心，掌握痰液中正常和异常有形成分形态特点、数量变化，提高阳性检出率。
支气管肺泡灌洗液检查
第二节支气管肺泡灌洗液检查痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。
[doc]支气管肺泡灌洗液的实验室检查及临床应用
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支气管肺泡灌洗液的实验室检查及临床应用,!!望筻!鲞篁三塑支气管肺泡灌洗液的实验室检查及临床应用苏州市第五人民医院昊兴福综连江苏省医学会陈维忠审校人类下呼吸道的灌洗已应用了数十年,最初此法是用于治疗的(如去除呼吸道的牯液性堵塞物)IKeda把纤维支气管镜插入呼吸道,七十年代实验证实支气管肺泡灌洗(BAL)是完全可行的,最近已作为动物和人类研究的有效工具【l:.本文仅就支气管肺泡灌洗液(BALF)的实验检测项目及临床应用作概略介绍.BALF的采集与处理经纤维支气管镜行支气管肺泡灌洗,共180m1分三移((每次6Gm1)注入生理盐水(无菌,37℃),每次注入后缓缓吸气弓f液并记录回收液的体积,用三层无菌外科纱布过滤(去除粘澈),滤液离心~400g×16mln,4℃),上清液供生化检查,沉淀供细胞学等检查.BALF实验检测项目BALF实验检测项目甚多,主要包插钿胞检查.生化检查,微生物学检查l及免疫学检查四大类..一,细胞学检查细胞学检查主要包括按常规进行的细胞总数和分类计数】,并利用单克隆抗体测定BALF的各类细胞】,包括Leu一1(总T 缅胞),ku一2a(细胞毒性/抑制细胞),Leu一3a(辅助/诱导细胞)和HDL—Dr(巨噬细胞和B淋巴细胞)等.:,生化及免嵌学检查蛋白质测定:包括BALF的总蛋白测定(Lowxy法)】,自蛋白(放射免疫扩散法)【5],纤维结合蛋白(ELISA)L,I【和免疫球蛋l~lgM,lgG和A(tg射免疫扩散法)【5】.2.酶测定:血管紧张素转换酶(ACE)存在于芷常肺内及细胞,转换血管紧张素I 为血管紧张素I.业已证明在内皮细胞损害时AcE渗入血液.如果肺泡毛细血管受损, ACE也进入肺泡内溶液,在BALF中应用较广的一种酶另外,在BALF中已测得并具有价值的另一种酶一胶原酶.3.一糖皮质激素受体(GR)的测定【a1GR测定是利用放射标记的1,2,t(n)0H丙酮去炎松(t~iameinoloeaceloniede)进行的并剩甩台盼兰(IrypanBlue)排斥试验测定细胞活力,结果以受体数/活细胞表示.4.脂类测定:肺表面活性剂(磷脂)是肺泡I型上皮细胞的主要分泌物之一,可经灌洗重新获得,磷脂总量及其成分比率的测定已有报遭.另外,脂蛋白巨甜也在BAbF中发现I8]l三微生特学检查BALF标本中微生物学研究能用于许多肺蘸感染疾病的诊断”J,如卡氏肺囊虫,巨细施病毒(C=MV),嗜肺性军团杆菌,分柱杆菌,曲霉菌类及支愿体等.BALF的临床应用.饵前对BALF的分析芷逐渐受到重视,报道最多的是肺结节病的研究.大量的实验证明,BALF中ACE的测定是肺损害的标志,BALF细胞分类能用于评价肺泡炎的程度.作BALF全面分析,对疾病的诊断,鉴别诊断,预后及疗教的观察及探讨疾辅的发病机理是一种安全有效工具.一,肺结节病:肺结节病是常见的一种白限性疾病,80患者自行消除【.BALF的分析,对结节病的诊断,分期及预后等具有重大价值.BALF细胞以T淋巴细胞为主, 与过敏性肺炎(HP)类似,如用淋巴细胞标记物可提高诊断结节病和HP的特异性. 结节病以辅助细胞(ku一3a或T4)为主, HP以抑制细胞(Leu一2a或)为主,如Tl/Ts>~4/1,95可能为结节病,T<111,可脒外结节病,多为Hpt.肥大细胞数增高(≥O.5)则结节病可能恶亿,如以淋巴细胞增高(>30)或中性粒细胞增高(>15)与肥大细胞增高(≥0.5%)相结合则特异性更高}而仅用BALF中淋巴细胞和中性粒细胞的回收来评价持续性肺结节病的预后价值是有限的113】.BALF胶原酶阳性与结节病的进行性有关.BALF中纤维结台蛋白在结节病中升高,提示纤维结台蛋白通过对成纤维细胞的化学诱导作用而有助于结节瘸的纤维化.另外,纤维结合蛋白与ACE浓度,T细胞百分率及辅助/抑制细胞比率呈正相关,从而提示了其浓度与疾病的活动有关H1.肺结节病晚期患者BALF中的中性粒细胞之百分率显着高于早期口I.脯结节病患者BALF中,蛋白质的中值显着增高,一其含量的增加与肺结节病X线分型呈正相关,增加的顺序是I型>I跫>I望(P<0.05),BALF中的蛋白质主要是白蛋白,?磷脂中值明显减低,但磷酯酰胆硷和磷醣蘸甘油酯的比例无改变,但非磷脂概性脂前中值升高,而中性脂胆固醇明显减l少【.Low RB等分析,结节病患者BALF中磷脂的减少可能与l型肺上皮细胞合成和(或)排出表面活性剂成分的能力减低有关.蛋白质回收量增加可能与脂质异常有关,BALF中大量自蛋白可髓是由于①肺拖毛细血管受损,导致血清蛋白外漏;②蛋白质和其它成分自肺表面清除障碍j③气管和支气管损伤导致蛋圉嚼监鏖莹翅丝堂量捷墅白质聚集于肺泡表面所致.另外,BALF中肥大细胞和透明质酸含量随患者X线分期的增加而升高,x线Ⅲ期,透明质酸浓度和肥大细胞数明显升高[1S1.=,原发性肺纤维化;在原发性肺纤维化(IPF)患者的活检中己发现肺泡Ⅱ型细胞的异常状态,作为肺泡Ⅱ型细胞的主要分泌物之一——肺表面活性剂(磷脂)能经灌洗而回收.因此有作者怀疑也可能发生磷脂的异常状态并作了分析|1】,发现IPF患者的BALF中的磷脂数相当于健康志愿者回收的一半,且发现磷脂甘油比率较低和磷脂肌醇比率较高,这些磷脂成份改变的严重度与进展性纤维组织病理学更大的改变有关.BA—LF中总磷脂降低少的病人用皮质类固酵治疗得到改善,而降低严重者未改变.IPF患者BALF细胞中的中性粒细胞增高[2I,但有报道表明BALF中淋巴细胞比例升高与皮质类固醇治疗有效及良好的预后有关,嗜酸性粒细胞或中性粒细胞升高但淋巴细胞不升高而治疗失败有关,嗜酸性粒细胞升高与很大可能的进行性恶化有关【.三,肺部感采t利用BAcF作微生物学研究在鉴别某些肺部感染性疾病的感染因素是有用的,尤其是卡氏肺囊虫和巨细胞病毒【¨】.也有作者谜宴BAL对诊断可疑的肺结棱憩者是最有效的办法I1”.LehlomakiK等首次ALF中培养出肺炎支原体,为诊断提供了依据u.在肺泡感染受损时,BA—LF的AcE值是升高的,它的升高可反映内度细胞受损,苴已有作者证实tACE酶特殊活力(以U/mg蛋白质表示)是肺损害标志㈣.四,其它疾病HaolamPL等在原发性肺泡脂蛋白病和弥散性间质肺部疾病患者的BALF中利用超结构检查证实了巨大的多层片集团的脂蛋白存在,且在原发性肺泡脂蛋白病BALF中发现了小片状和无定形碎片,在鉴别诊断困难时,这些超结构和生化特性!生蔓鲞蓥_三一可帮助鉴别原发性与其它原因的肺泡脂蛋白病,尤其是早期:.GarciaJ等对类风湿性关节炎患者作B—AL,且对BALF的细胞分类及免疫球蛋白等作了分析,结果提示BAL可作为研究类风湿性肺病可能的致病机理的一种有用方法i.也有作者利用变态原支气管刺激后过敏性气喘病人BAL来探讨过敏性支气管气喘的致病机理㈣.结语随着光学纤维支气管镜的应用,经纤维支气管镜行BAL被广泛用于各种肺部疾病, 实验证明BALF的分析对某些肺部疾病的诊断,分期,预后判断及致病机理之探讨具有重要意义,且证实BAL是安全可行的.国外开展和报道较为普遍,国内因起步娩,开展和报道者不多,相信在不久的将来亦能推广应用.(1)(2)参考文越RankinJeta1chest1985;88(3) :319 RothCetalAmRevRespirDis 1981;124:9[3](4][5](6][7](8](9](103(儿)(12](133[143[】5)r16]5SharmaSeta1chesi1988;93(3):5770ConnorCeEB1Thorax1988;43 (5)393GarciaJeta1A131ReyReopirDis 1988:133(3):450藿音捕国外医学呼吸系统分册1988: 3:156RobinsonPeL81AmRovRospirDis1988;137:585HaslamPLeLa1Thorax1988;4.3 (2):140 SpringmeyerSCeLalChest1981;92(5):7TL BaaghmanReLalChest1986;90(e):791GraeiaJChest1988;93:329 LehtomakikeL0lj1nfectDis1987; 155:1939BjermverLetalThorax1987;42 (12):933RuddReLa1AmRevRespirDis1981:124:l KeaeyJAmRevResplrDis1988;187(3):531MetzgerWJetalChest1986;89(4):477(上接第7页)(2)KishM.A.eLal:JClinMicrobio1 1984.19:94T～948(3]AppelbaumP.cetal:JClinMicroh一|011980,j2:282～28343BarsonW.Jetal:J.ClinMicrobio1i987,25:20I4—2016(5]NewmanP.Eetal:JOphthalmolI984,68:472～4746)ReverdyM.Eet:JClinMierobiol 1084,140—148[T)N~.mnyakS.S.eLal:JClinMicro一1i985,22:470～4I1(8)chandrasekarP+Hetal:I丑f口cti0n 】989.14:2T9—v282(9)李仲兴等:临床细菌学人民卫生出版社】989(io]chesterB.eLal:JClihMicrobiol】9T9.9:425~436(1】】Rub缸S.Jetal:Manualofclinical Microbiology4thedP.330~349】985 2]Igra--siegmanY.atal:JolinMic—robiol1980.:’4～i45(】3]Mandell,W.F.eLal:RevInfectDis i987,9:CO1~]005(i4]Sepkowit.D.V.eLal:Cliapedi~trt987,25:483~5。
简述支气管肺泡灌洗操作方法
简述支气管肺泡灌洗操作方法
支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage, BAL）是一种通过支
气管插管将生理盐水注入肺部，并通过抽取灌洗液来获取肺部细胞和炎症细胞的技术。
以下是支气管肺泡灌洗的基本操作步骤：
1. 准备工作：首先需要准备好所需的设备和材料，包括呼吸机、支气管镜、标本袋、注射器、生理盐水等。
同时，准备好操作所需的个人防护装备，如手套、口罩、护目镜等。
2. 麻醉和镇静：将患者置于半卧位，并进行一般麻醉和镇静，以保证患者的舒适和安全。
3. 插入导管：在经过麻醉后，用支气管镜引导下的插管将导管插入患者的支气管。
4. 灌洗：通过插入导管，将预先准备好的生理盐水注入到肺部，一般注入量为20-50毫升。
注入时需要保持缓慢平稳，以免引
起患者不适。
5. 收集灌洗液：将注入的生理盐水通过相同的导管抽取回来，同时收集到标本袋中。
一般来说，重复多次注入和抽取灌洗液，以增加采样的准确性和可靠性。
6. 沉淀和分离：将收集到的灌洗液放置在离心管中，并进行离心分离，使细胞和炎症细胞沉淀到离心管底部。
7. 细胞计数和分析：将沉淀的细胞用适当染色方法染色，并使用显微镜观察和计数细胞数量和类型。
根据需要，可以进行细胞学和化学分析。
支气管肺泡灌洗是一种常见的临床检查方法，用于评估和诊断肺部疾病，如感染、炎症、肺癌等。
在实施过程中，需要注意操作的细致和患者的安全。
肺泡灌洗液标准
肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid, BALF）的检查标准可以从几个方面来描述：
1.样本采集和处理标准：
o支气管肺泡灌洗术（Bronchoalveolar lavage, BAL）应当按照临床实践指南进行，确保样本获取的正确性。
o标准化的采集流程包括达到规定的灌洗液回收量，通常期望的回收率在50%以上，总量取决于灌洗液注入和回收的体积。
o灌洗液应当尽可能纯净，不混有血液（红细胞比例不超过一定限度，如10%以内），避免过多的上皮细胞（通常<3%）和其他非肺实质
细胞成分。
2.细胞学分类标准：
o正常肺泡灌洗液的细胞分类百分比通常为：
▪巨噬细胞 >85%
▪淋巴细胞≤15%
▪中性粒细胞≤3%
▪嗜酸性粒细胞≤1%
3.细胞总数标准：
o正常肺泡灌洗液中的细胞总数正常范围一般为7000-20000个细胞/微升（cells/μL）。
4.微生物学检查标准：
o微生物检测结果应结合临床表现和影像学证据，没有明显微生物感染的肺泡灌洗液不应检出病原微生物。
5.生化及其他实验室指标：
o可通过肺泡灌洗液检测蛋白含量、乳酸脱氢酶、溶菌酶、免疫球蛋白等生化指标，这些指标异常可能提示肺部疾病的存在。
请注意，不同文献和实验室可能对正常范围的具体数值略有差异，而且随着医疗技术和研究进展，这些正常范围可能会有所更新。
在进行肺泡灌洗液的采集、送检和结果解读时，应参照最新的临床指南和实验室手册。
在实际临床工作中，医师会结合患者的实际情况和检测结果，对可能存在的肺部疾病做出诊断和治疗决策。
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。
注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。
●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。
三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。
2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。
1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。
●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。
支气管肺泡灌洗术(BAL)
支气管肺泡灌洗术（BAL）支气管肺泡灌洗术（BAL）介绍：支气管肺泡灌洗术（BAL）通过纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平，反复以无菌生理盐水灌洗、回收，对其进行一系列检测和分析，从而获得下呼吸道病变的性质特点和活动程度，有助于确立诊断。
支气管肺泡灌洗术（BAL）正常值：正常。
支气管肺泡灌洗术（BAL）临床意义：适应症：肺部感染，特别是免疫受损、免疫缺陷肺部感染的病原学诊断;弥漫型和周围型肺部肿瘤的细胞学诊断;间质性肺疾病，如结节病、特发性肺间质纤维化、外源性变应性肺泡炎、肺泡蛋白沉着症、胶原血管伴肺纤维化等的诊断、治疗、疗效和预后估计。
以纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平，反复以无菌生理盐水灌洗、回收的一项技术，对其回收液进行细胞学、生化学、酶学和免疫学等一系列检测和分析。
1.全肺灌洗：用于肺泡蛋白沉着症、矽肺、肺泡微石症、哮喘持续状态等的治疗。
2.肺段灌洗：主要用于弥漫性间质性肺纤维化、石棉肺和卡氏肺囊虫肺炎的诊断，对弥漫性肺泡癌的诊断，也有重要价值。
支气管肺泡灌洗术（BAL）注意事项：1、严格掌握适应证，年老、体衰患者检查中应以心电图及经皮检测血氧饱和度进行监护。
术中给予鼻导管吸氧或高频通气供氧。
2、术中严格无菌操作，防止继发感染。
3、按要求正规操作，合格的灌洗液应达到规定的回收量，不混有血液(红细胞数<10%)，不应混有多量上皮细胞(<3%)。
4、获得灌洗液后尽早送检。
5、检查后出现发热、出血、肺部感染、支气管痉挛等并发症时，作相应处理。
6.禁忌症：心肺功能损害严重，氧分压低于6.67kPa，新近大咯血，活动性肺结核未经治疗等。
支气管肺泡灌洗术（BAL）检查过程：暂无相关信息。
支气管肺泡灌洗液相关实验室操作ppt课件
02
支气管肺泡灌洗液的实 验室检测
细胞计数与分类
细胞计数
通过显微镜观察或自动细胞计数 仪对灌洗液中的细胞数量进行计 数，以评估炎症程度和肺泡受损 程度。
细胞分类
通过显微镜观察对灌洗液中的细 胞类型进行分类，包括中性粒细 胞、巨噬细胞、淋巴细胞等，以 了解炎症反应的类型和程度。
微生物培养与鉴定
微生物培养
要点二
实验试剂准备
准备好实验所需的试剂，如生理盐水、染色剂、抗体等。
实验室检测的具体操作步骤
细胞计数
对离心后的上清液进行 细胞计数，计算出各类
细胞的比例。
细胞分类
通过染色等技术对细胞 进行分类，鉴别出不同
类型的细胞。
抗原抗体检测
利用抗原抗体反应检测 特定的抗原或抗体。
其他检测
根据需要，进行其他相 关的检测，如细菌培养
实验室安全与防护措施
穿戴个人防护用品
加强通风和空气消毒
在操作过程中，实验人员应穿戴适当 的个人防护用品，如手套、口罩、实 验服等，以减少感染和污染的风险。
实验室应保持良好的通风和空气消毒 ，减少空气中的细菌和病毒含量，降 低感染风险。
正确处理废弃物
实验产生的废弃物应按照相关规定正 确处理，防止对环境和人员造成危害 。
定义与作用
定义
支气管肺泡灌洗液（BALF）是从肺 泡腔内抽取的液体，用于检查肺部疾 病和诊断感染等。
作用
通过分析支气管肺泡灌洗液中的细胞 成分、炎症因子等，有助于了解肺部 炎症、感染、肿瘤等疾病的状态，为 临床诊断和治疗提供依据。
采集方法与注意事项
方法
通过纤维支气管镜插入到肺段或亚段支气管，注入生理盐水，然后回收灌洗液 进行检测。
临床检验基础痰液与支气管灌洗液检验
第十八章痰液与支气管灌洗液检验本章考点1.痰液检查2.支气管肺泡灌洗液检查一、痰液检查（一）标本采集与处理痰液理学检验以清晨第一口痰标本最适宜。
细胞学检验以上午9～10时留痰最好。
做漂浮或浓集结核杆菌检验时，应采集12～24h内的痰液。
测定24h痰量或观察分层情况时，容器可加少量石炭酸防腐。
用于细菌培养的标本，必须无菌采集，并先用无菌水漱口，以避免口腔内正常菌的污染。
为了防止痰液污染，用过的标本应灭菌后再处理。
（二）理学检查1.量：正常人无痰或仅有少量泡沫样或粘液样痰。
痰量增多常见于支气管扩张、肺脓肿、肺水肿和慢性支气管炎，有时甚至超过100ml／24h。
在疾病治疗过程中，如痰量减少，一般表示病情好转；但若发生支气管阻塞而使痰液不能排出时可见痰量减少，反而表明病情加重。
2.颜色与形状：正常人仅有少量白色或灰白色粘液痰，病理情况下痰液颜色可发生改变，但特异性较差，其颜色和形状改变见表1-18-l、1-18-2。
病理情况下常见的异物及临床意义见表1-18-3。
表1-18-1 痰液常见颜色改变原因及临床意义表1-18-2 痰液性状改变及临床意义表1-18-3 痰液常见异物及临床意义表1-18-4 痰液中常见有形成分及临床意义3.气味：正常人的新鲜痰液无特殊气味。
血腥味见于肺癌、肺结核等。
粪臭味见于膈下脓肿与肺相通时。
恶臭见于肺脓肿、晚期肺癌或支气管扩张等。
（三）显微镜检查直接涂片检验为常规方法，简便、快速，对临床诊断帮助较大。
涂片染色检验主要用于细胞学检验和细菌学检验。
正常痰液中无红细胞，有少量中性粒细胞和少量上皮细胞。
病理性痰液可见较多的红细胞、白细胞及其他有形成分，其临床意义见表1-18-4。
（四）质量控制1.标本采集：应注意：①注意标本留取时间：一般检验以早晨第一口痰为宜；做细胞学检验以上午9～10h留痰液为好；浓缩法找结核杆菌时，则应留取24h痰液。
②留取痰液标本时，先用清水嗽口，用力咳出气管深处的痰液，注意勿混入鼻咽分泌物。
诊断 支气管-肺泡灌洗液
↓
白蛋白（双缩脲法定量测定）
婴幼儿70ug/ml（肺泡毛细血管通透性强）
肺泡蛋白沉积症
免疫球蛋白（免疫散射比浊法定量测定）
IgE：肺部寄生虫感染、哮喘
sIgA、IgG缺失：难治性迁延性细菌性肺炎
肿瘤标志物（免疫比浊法测定）
肺癌：肿瘤标志物NSE、CEA、AFP、CYFRA21-1
曲霉菌半乳甘露聚糖（BALF-GM试验）
癌细胞
若检出癌细胞可确诊肺癌，常为肺泡上皮细胞癌
无定形颗粒
常为脂蛋白，提示肺泡蛋白沉积症
真菌孢子或菌丝
BALF中出现真菌，由于采样时混入，并常带入正常菌群
中性粒细胞内吞噬的细菌-相应细菌的感染
若找到真菌孢子及菌丝-真菌感染
若抗酸染色发现抗酸杆菌-结核杆菌感染。
性状
临床意义
无色透明
生理情况或病毒性感染早期
深黄色或黄绿色浑浊
化脓性细菌感染或真菌性肺炎
红色或铁锈色浑浊
出血性疾病如支扩、肺癌、急性左心衰等
黑色浑浊
尘肺、矽肺等导致的BALF中尘细胞增多
乳白色浑浊或牛奶状
肺泡蛋白沉积症
淡黄色或棕黄色浑浊
陈旧性肺泡出血，BALF中含铁血黄素细胞增多
褐色浑浊
因巨噬细胞吞噬焦油颗粒而成，见于吸烟者
早期诊断侵袭性曲霉菌肺部感染最有效的方法
基因组学检测（荧光定量PCR法检测）
甲基化水平辅助早期诊断肺癌
有形成分
临床意义
红细胞
红细胞形态不完整见于出血性疾病或肺泡出血等陈旧性疾病，完整红细胞常见于新鲜出血或纤支镜操作不当
巨噬细胞
生理情况下可达85%以上，增多亦可见于结核杆菌感染
中性粒细胞
生理情况下<3%，增多见于炎症性疾病或细菌感染性疾病
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第二节 支气管肺泡灌洗液检查
痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL ）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL 是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理
通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa 负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF 方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF 应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查
1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF 细胞数见表13-1，正常人的BALF 含有核细胞为（5-10）×106/L 。
2．淋巴细胞亚群分析：BALF 中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。
例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR 等以有助于发病机制的研究。
正常人非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。
3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF 沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。
表13-1 正常非吸烟者BALF 细胞
作者 年 例数 注入量 回收量（ %） 总细胞数（× 106）
细胞（× 106/ml ）
Mac Lym Neut Eos
Hunninghske 1983 8 100 52 14 ．0 26 ．9 93 7 0 0
北医大三院 1987 10 150 62 13 ．4 14 ．7 86 13 0 ．9 0 ．05 Ettensohn 1988 78 120 63 7 ．3 9 ．4 95 4 1 0 注：Mac 巨噬细胞； Lym 淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞
表13-2 正常非吸烟者 BALF 中淋巴细胞表面抗原表型
作者 年 例数 淋巴细胞（ %） 总 -?/FONT>T
TH TS H ：S B 细胞
Yamada 1986 25 13 ．8 63 ．0 45 ．4 25 ．3 1 ．90 5 ．3 Wallaert 1987 12 7 ．7 66 ．4 48 ．4 27 ．5 1 ．8 ?/FONT>
三、可溶性物质检查
BALF 离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表 13-3）。
这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产
生分泌成分。
这些物质反映肺泡表面衬液成份，其测定对了解某些肺部疾病的病变特征，研究发病机制提供重要手段。
表13-3 BALF检测的可溶性物质
溶质浓度近似值溶质浓度近似值
总蛋白70 μg/ml纤维连接蛋白30-150ng/ml
白蛋白70 μg/ml白细胞弹性蛋白酶+
免疫球蛋白胶原酶+
IGG 2.5-10 μg/ml血管紧张素转换酶+
IGA 2.5-6 μg/ml极性脂质78 μg/ml
IGM 100ng/ml 非极性脂质45 μg/ml
IGE 0.06-0.3 μg/ml前列腺素E 200-2000pg/ml
α 1-抗胰α蛋白酶1-2 μg/ml血栓素B 25-85pg/ml
α 2-巨球蛋白0.04 μg/ml
癌胚抗原0.8ng/ml
转铁蛋白 4 μg/ml
四、微生物学检查
1．涂片BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染，也不含气管和左右大支气利害的分泌物，含非病原性阿菌很少，故其涂片检菌的意义较大。
取BALF沉淀物进行本兰氏染色与抗酸染色检查，对结核分支杆菌的检查有较大意义。
2．培养：严格无菌操作采BALF进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CGU/ml时被认为有诊断意义。
但标本采集方法复杂。
五、寄生虫学检查
1．卡氏肺孢子虫：人类一般受感染后多无明显症状。
但若患者的免疫功能低下，特别是AIDS 患者和大量使用免疫抑制剂的患者易受感染，并可引起严重的间质性肺炎。
于患者痰中不易查到寄生虫，而BALF沉淀物检出的阳性率较高。
2．卫氏并殖吸虫卵：轻型肺吸虫病患者痰中可能查不到虫卵，而可从BALF沉淀物中查到。
除以上各项检查外，还可检查BALF 中有无其它异特。
若在BALF 沉淀物中查到石棉小体，有助石棉肺的诊断。
六、临床应用
由于BAL 能获取肺泡表面衬液，因此对其内容物的检查有助于肺部疾病的诊断、治疗、预后判断及发病机制研究。
其应用范围越来越广，此处钗做重点介绍：
1．肺部感染的病原学诊断：BAL检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的地位。
BAL 可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。
对于普通细菌感染者其细菌培养大于等于105cfu/ml时为确定感染的阈值。
但对于某些特殊感染，如在BALF中分离出结核分支杆菌、军团菌即可做出诊断。
BALF对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如对巨细胞病毒感染的敏感性达96%，对肺孢子虫的感染敏感性为85-90%。
2．BALF 检查：诊断呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤有较好效果，也包括周围性肺癌、弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细胞肺癌等。
但BALF检查结果受癌类型和肿瘤大小的影响，以腺癌和肺泡癌阳性率最高。
3．对间质肺疾病的诊断、治疗评价及预后提供帮助
（1）外源性变应性肺泡炎：急性期BALF细胞总数明显增加，达对照组4倍。
急性期早期肥大细胞增多，恢复后降至正常。
淋巴细胞亦明显增多，其亚群以CD8+增多为主，
CD4/CD8比值降低，CD57+ 和CD16+ 也增加。
临床上认为BAL 是外源性变应性肺泡炎最敏感的检测手段。
优于X线胸片及肺功能检查。
（2）结节病：BALF细胞总数增高，主要为T细胞增多，以CD4+ 为主。
CD4/CD8 比值明显增高，这些变化有重要的诊断意义。
中性粒细胞和肥大细胞的增多预示病人闰变的有可能发展为纤维化。
（3）特发性肺间质纤维化：BALF中主要为中性粒细胞增多，嗜酸性粒细胞也可能增加，据此与以淋巴细胞增多为主的其它崩牙肿肺疾病鉴别。
BAL做为一种特殊的检查方法对某些其它肺疾患如支气管哮喘，成人呼吸窘迫综合征、弥漫性肺出血、肺泡蛋白沉着症（BALF外观呈乳状）等的临床意义也处于研究和观察之中。
BALF检查中细胞计数和分类包括T淋巴细胞亚群分类，经过多年的研究已基本标准化了，但对可溶性物质检查还存在某些问题，主要是灌洗液量与方法不同，对肺衬液稀释程度影响测定结果，尚须进一步的研究。
BAL应用越来越广泛，虽然其操作复杂，有上些生理性改变及轻度并发症，但只要选好适应的证，操作正确，还是一种安全有效的检查方法。
进行BAL检查的禁忌证有：①严重的肺功能损害者；②新近发生急性心肌梗死患者；③新近发生大咳血者；④活动性肺结核未经治疗者等。