鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳急性炎症抑制作用的研究_郭敏

鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳急性炎症抑制作用的研究

郭敏，喻凯*，米可彧，黄先洲，郭乐，曾兰岚

（西南交通大学生命科学与工程学院，四川 成都 610031）

摘　要：目的　研究鸵鸟油的抗炎作用。方法　制备巴豆油所致小鼠耳急性炎症模型，以鸸鹋油为阳性对照，以液体石蜡为阴性对照，观察各组对小鼠耳肿胀的抑制作用；并测定致炎耳组织中的白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α)和一氧化氮（NO）含量。结果　鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳肿胀有抑制作用，抑制率为44.4%。且鸵鸟油能明显降低小鼠耳炎症组织中IL-1β、TNF-α和NO 的含量。结论　鸵鸟油对巴豆油致小鼠耳急性炎症有显著的抑制作用。

关键词：

鸵鸟油；耳肿胀；炎症；巴豆油；NO ；IL-1β；TNF-α中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2013)02-0031-03

Research on Inhibition of Ostrich Oil on Croton Oil Induced Mouse Ear Acute

In fl ammation

GUO Min, YU Kai*, MI Ke-yu, HUANG Xian-zhou, GUO Le, ZENG Lan-lan

(Southwest Jiaotong University, School of Life science and Engineering, Chengdu 610031, China)

Abstract: Objective To research on the antiinflammation of ostrich oil. Methods The ear acute in fl ammation models of mice were made with Croton Oil. The inhibitions on ear edema and effects on expression of NO, IL-1β and TNF-α in ear homogenate of ostrich oil were observed. Results Ostrich oil could alleviate ear edema, its inhibition was 44.4%. And ostrich oil also could decrease the content of NO, IL-1β and TNF-α in ear homogenate signi fi cantly. Conclusion Ostrich oil had curative effect on croton oil induced mouse ear acute in fl ammation.

Key words: Ostrich oil; ear edema; in fl ammation; Croton Oil; NO; IL-1β; TNF-α收稿日期：2012-12-16

作者简介：郭敏，硕士研究生，研究方向：药理学，E -m a i l

595190574@

*通讯作者：喻凯，教授，硕士研究生导师，E-mail yukai2037@

有研究显示，鸸鹋油具有保持皮肤湿润、防腐、减轻皮肤肿胀、抗炎镇痛的作用，能够促进烧伤创面愈合，抑制炎症反应[1,2]。鸵鸟和鸸鹋是近亲，鸵鸟油较鸸鹋油更易得到[3]，而关于鸵鸟油在抗炎方面的研究资料还极少报道。本实验将利用小鼠耳廓急性炎症模型，考察鸵鸟油的抗炎作用，并和目前研究和应用较多的鸸鹋油进行比较，为深入开发利用鸵鸟油奠定理论基础。1　实验材料1.1

1.1　实验动物SPF 级KM 种小鼠40只，雌雄性各半，体重18±2 g，成都达硕生物科技有限公司提供，许可证号：SCXK（川）2008-24。1.2

1.2　实验试剂mTNF-α ELISA 试剂盒（RD 公司，E11121605）；mIL-1β ELISA 试剂盒（RD 公司，E11121606）；mNO ELISA 试剂盒（RD 公司，E11121607）；鸵鸟油、鸸鹋油（由中科院成都生物所提供）、液体石蜡（AR，天津市科密欧化学试剂有限公司，批号20110110）；巴豆油（武汉驰飞化工有限公司，批号20110528）。1.3　

1.3　主要仪器实验室用打孔器（7 X1，长征化学试剂公司）；酶标仪（ELX800UV，BIO-TEK INSTRUMENTS.INS 公司），电子天平(AL104，精确度0.000 1)，微量加样枪。

2　实验方法

2.1　

2.1 动物分组及给药方法本研究拟采用预防性给药，后致炎的方法，观察鸵鸟油的抗炎作用[4]。动物购入后适应饲养一周，随机分成4组，每组10只，分别为：阴性组（液体石蜡)、阳性组（鸸鹋油）、实验组（鸵鸟油）、空白组，前3

组分别于右耳正反面均匀涂擦对应药物，连续涂擦给药5 d，每天一次，空白组不做任何处理。2.2　

2.2　致炎配制致炎剂，以巴豆油0.4 mL、无水乙醚14.6 mL、无水乙醇 4 mL、蒸馏水1 mL，充分混合。给药5 d 后，取50 μL 致炎剂均匀涂在所有小鼠右耳正、反两面。2 h 后脱臼处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用打孔器沿耳廓相同部位冲下左右耳片，分别称重，以左右

耳片重量之差作为肿胀程度，计算肿胀抑制率。

2.3　2.3　耳组织中TNF-α、IL-1β和NO 的含量检测

冰浴下，耳组织用生理盐水稀释30倍制成耳片组织匀浆。按试剂盒说明方法测定耳组织中TNF-α、IL-1β和NO 含量。2.4　

2.4　统计学处理本研究采用完全随机设计，结果用均数±标准t 检验比较各组的差异。3　结果与分析

3.1　

3.1　鸵鸟油对鼠耳朵肿胀的抑制作用的影响在五天给药期间，小鼠右耳无明显的变化，但是当涂擦巴豆油致炎剂后，小鼠右耳在30 min 后开始出现红肿现象，并在2 h 候后达到最大肿胀（如图1）。通过对小鼠左右耳重量的差异比较，计算得到其肿胀度和肿胀抑制率，结果见表1。结果表明鸵鸟油对小鼠耳肿胀抑制率大于鸸鹋油的作用，并且大于其他用药组。说明鸵鸟油较鸸鹋油而言，对巴豆油致小鼠耳

肿胀有较强的抑制作用，其消炎效果明显。

（1）液体石蜡 （2）鸸鹋油 （3）鸵鸟油图1 致炎前后各组小鼠耳肿胀比较（上：致炎前；下：致炎后）

Fig.1 Comparation of ear edema of the mouse before and after aer

inflammation

表1 鸵鸟油对耳朵肿胀的抑制作用

Tab.1 Inbibitional effect of ostrich oil on ear edema of the mouse 组别左耳质量(mg)右耳质量(mg)右耳肿胀度

(mg)肿胀抑制率

(%)

液体石蜡8.9±2.817±1.1 8±2.9---鸸鹋油7±0.712±2.25±1.5▲▲38.77鸵鸟油

7±6.4

11±3.7

4.6±1.4▲▲

44.40

注：与液体石蜡组比较，▲▲P<0.01

3.2　3.2　鸵鸟油对小鼠耳组织中IL-1β、TNF-α和NO 含量的影响

解剖小鼠观察脏器变化，发现小鼠脏器并无明显差异。将右耳进行冰浴匀浆，采用ELISA 法测定耳片组织中IL-1β、TNF-α和NO 的含量差异，结果见表2。结果表明，鸵鸟油对小鼠耳组织中IL-1β、TNF-α和NO 的含量有明显的抑制作用，含量明显偏低。

表2 鸵鸟油对小鼠耳朵组织中IL-β、TNF-α和NO 含量的影响Tab.2 Effect of ostrich oil on contents of IL-β, TNF-α and NO in the

tissue of aer inflammation mousse

组别 IL-1β (pg/ml)

TNF-α (pg/ml)NO (pg/ml)正常124.96±25.6315.52±2.0171.21±8.52液体石蜡202.67±61.9423.07±2.6188.79±4.21鸸鹋油180.03±17.8920.34±1.91▲85.89±5.00鸵鸟油

156.35±20.21▲

19.92±1.82▲

80.96±6.52▲▲

注：与液体石蜡组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01

4　讨论

巴豆油所致耳急性炎症模型是一种筛选抗炎药物的成熟方法。其主要致炎成分是佛波酯（TPA），它可引起血管通透性的改变、炎症细胞的聚集、蛋白激酶PKC 的激活、炎症介质的释放增加，以及促进炎症细胞DNA、RNA 的合成等炎症反应。本研究通过预防性给药，观察比较鸵鸟油和鸸鹋油对巴豆油致小鼠耳急性炎症的消炎作用及其可能的机制。

结果显示鸵鸟油和鸸鹋油对小鼠耳肿胀均有一定的抑制作用。液体石蜡没有这种抑制作用，说明这种作用和油膜的物理保护无关。TNF-α和IL-1β是两个目前研究较深入的炎性细胞因子，在炎症的发生、发展过程中发挥着关键作用。TNF-α是始动因素，IL-1β则起协同作用。它们均能导致NO 的增加。NO 可引起血管舒张，加剧局部的红肿。本实验结果表明，鸵鸟油可以降低炎症组织中这三种物质的含量，因此可以推测，鸵鸟油减轻炎症反应的可能和抑制这些炎症介质的产生有关。鸵鸟油相对于其他动物脂肪含有较多的不饱和脂肪酸，如亚油酸、亚麻酸、油酸[5]。有研究显示，这些不饱和脂肪酸能够抑制IL-1β等炎症因子的表达[6,7]。因此，鸵鸟油的抗炎作用可能和它所含的这些不饱和脂肪酸有关。在鸵鸟油的给药过程中未出现明显的局部不良反应，对脏器也未见明显影响。本结果为深入开发利用鸵鸟油奠定了一定的理论基础。我们将进一步考察鸵鸟的透皮吸收情况，以及对创面愈合的影响，为鸵鸟油的综合

利用提供理论依据。