培养基的制备(教案设计)

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培养基的制备

培养基的制备

培养基的制备一、配制原则和种类(一)培养基配制原则1、培养基:培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质,如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。

制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子,还要考虑水与pH环境,同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。

因此,可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质,称为培养基。

换言之,培养基必须具备三个条件:含有菌株生长发育所需要的营养物质;具有菌类生长环境条件;经过灭菌,并保持无菌状态。

2、培养基的选择:在整菌种制备过程中,从母种到原种、栽培种,各个阶段的目的要求有所不同,所选用的培养基的配比也应有所区别。

一般母种初生菌丝较嫩弱,分解养分能力差,要求营养丰富、完全,氮源、维生素的比例应高。

须选用易于被菌丝吸收利用的物质,如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多,且菌丝分解能力强,可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。

(二)培养基的种类1、根据营养物质的来源,可以把培养基分炎天然培养基、半合成培养基和合成培养基。

(1)天然培养基天然培养基是指用化学成分还不清楚或化学成分不恒定天然有机物配制而成的培养基,如各种农副产品及其下脚料──小麦、大豆、玉米粉、麸皮、米糠、作物秸秆、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等,以及动植物组织的浸出液──牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦芽汁、豆芽汁等都可以用来配制天然培养基,这种培养基来源广,成本低,营养丰富,适合于在生产上大规模培养菌类使用,但这些天然有机物质因产地、品种、生长期的不同,化学成分不能宣。

每批成分也不稳定,不宜用来做精细的科学实验。

以分离驯化食用菌培养基(2)半合成培养基为了促进食用菌菌丝的生长发育,常在天然培养基中添加适量的无机盐类,或在合成培养基中添加适量的某些天然有机物,就成为半合成培养基。

这类培养基种类繁多,应用广泛,也是生长菌种和实际栽培最常用的培养基。

实验三:培养基的制备与灭菌

实验三:培养基的制备与灭菌

实验三:培养基的制备与灭菌一、实验目的与要求:(1)熟悉玻璃器皿的洗涤包装和灭菌前的准备工作。

(2)学习微生物培养基和无菌水的制备,了解培养基配方中各成分的作用、制备流程及各环节的操作技术与应用。

(3)学习并掌握培养基的高压蒸气灭菌原理、操作关键技术和灭菌技术。

二、实验原理培养基的制备原理培养基是按照微生物生长发育的需要,用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。

人工制备培养基的目的,在于给微生物创造一个良好的营养条件。

把一定的培养基放入一定的器皿中,就提供了人工繁殖微生物的环境和场所。

自然界中,微生物种类繁多,由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究上的目的不同,所以培养基在组成原料上也各有差异。

但是,不同种类和不同组成的培养基中,均应含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、无机盐和生长素以及某些特需的微量元素等。

此外,培养基还应具有适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。

根据制备培养基对所选用的营养物质的来源,可将培养基分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基三类。

按照培养基的形态可将培养基分为液体培养基和固体培养基。

根据培养基使用目的,可将培养基分为选择培养基、加富培养基及鉴别培养基等。

培养基的类型和种类是多种多样的,必须根据不同的微生物和不同的目的进行选择配制,本实验分别配制常用培养细菌、放线菌和真菌的牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号合成培养基和马铃薯蔗糖培养基等固体培养基。

固体培养基是在液体培养基中添加凝固剂制成的,常用的凝固剂有琼脂、明胶和硅酸钠,其中以琼脂最为常用,其主要成份为多糖类物质,性质较稳定,一般微生物不能分解,故用凝固剂而不致引起化学成份变化。

琼脂在95℃的热水中才开始融化,融化后的琼脂冷却到45℃才重新凝固。

因此用琼脂制成的固体培养基在一般微生物的培养温度范围内(25℃-37℃)不会融化而保持固体状态。

高压蒸气灭菌原理高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。

基础培养基的制备

基础培养基的制备
• 加压蒸汽灭菌法 其步骤如下:
1.灭菌器内加入一定量的水,将包扎好的物品放入其中。 封盖。
2.接通电源,进行加热。 3. 排除高压锅内的冷空气,可将排气阀打开,待排出大 气后关闭排气阀。
4.当压力达15bl/in2(即1.05kg/cm2)时,此时灭菌器 内的温度为1210C,维持15~20min。
• 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
• 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
• 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入的目的基因的受体细胞
• 加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞
五、培养基配制的一般程序
• 称量:按照配方正确称取各种原料放于烧杯中。
• 溶化:在烧杯中加入所需水量,玻棒搅匀,加热溶解。
应用微生物与免疫学
一、目的要求
• 了解配制培养基的基本程序,熟悉基础培养 基的配制原则和制备方法。
• 掌握肉汤培养基、普通琼脂培养基的制备及 用途。
二、实验原理
• 培养基为人工培养微生物而制备的、提供适合微生物生长、 繁殖或积累代谢产物的营养基质。
• 人工制造适宜的培养基并给予合适的温度、气体等培养条 件,即能使细菌等微生物在体外迅速生长繁殖。
按培养基 配方称量
加水加 热熔化
调节 pH值
过滤
分装 包装
灭菌
检查灭菌 彻底与否
六、实验内容
(一)材料: • 药品:牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠等。
• 高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱。 • 其它: 1N NaOH、天平、牛角匙、电炉、pH试纸、烧杯、
量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、三角瓶、带棉塞的试管、培 养皿、吸管、各种包装纸、绳索、标签等。
5.灭菌时间一到,切断电源,待压力降至零时,才能打 开排气阀,然后打开灭菌器盖,取出物品。

实验一 培养基的制备消毒灭菌

实验一 培养基的制备消毒灭菌
量的水,将内桶放入。
(2) 装放待灭菌物品:将已包扎好的物品放入内桶。盖上锅盖,以两
两对称方式同时旋紧螺栓,勿使漏气。
(3) 加热排气:接通热源,同时打开排气阀,待见有大量水汽排出时,
维持3---5min,锅内空气排尽,关上排气阀。另外一种排气方法:先将排气 阀关闭,待加热升温内压达到5磅时再打开排气阀,等到压力表指针回到零, 关闭排气阀。
培养基的作用:微生物分离、培养、增殖、保藏及鉴定。
培养基配制原则
◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆
选择适宜的营养物质 营养物质浓度及配比合适 控制pH条件 控制氧化还原电位
原料来源的选择
根据培养目的不同调配
灭菌处理
2 消毒和灭菌的原理
★ 消毒与灭菌是确保 微生物纯培养 (由一个菌体
生长繁殖的群体)的最基本的实验技术。
高 压 蒸 汽 灭 菌 锅
a 方法:一般121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2) 20-30min。 b 适用:耐高温物品如培养基,无菌水,培养皿。 c 注意事项:灭菌开始排净冷空气;
灭菌终了,自然缓慢降压回零;
灭菌结束,趁热取出物品。
三 实验操作步骤
分组操作:分6组,5人1组。
◆ ◆ ◆
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(第1~2组做,每组600ml) 马铃薯糖琼脂培养基(第3~4组做,400ml) 高氏1号培养基(第5~6组做,200ml)
每组需要做的其它工作
(1)每组包1ml吸管5支(塞棉花)(示范) 。 (2)每组包培养皿2包(每包6个) (示范)。 (3)每组装9ml无菌水5管。 (4)每组装20ml无菌水2瓶(50ml三角瓶,内有玻璃珠)。
(5)装锅灭菌。
高压蒸汽灭菌
(1) 灭菌前的准备:将高压蒸汽灭菌锅的内桶取出,向外锅内加入适

培养基的配制高中生物教案

培养基的配制高中生物教案

培养基的配制高中生物教案
目标:学生能够了解培养基的概念和作用,掌握常见培养基的配制方法。

教学重点:培养基的组成和配制方法。

教学难点:掌握不同培养基的配制要点。

教学准备:实验室用具、所需试剂、培养基配制方案、培养基配制步骤等。

教学过程:
一、导入 (5分钟)
通过图片或视频展示不同类型的培养基,引起学生的兴趣,引出培养基的作用和重要性。

二、讲解培养基的概念和分类 (10分钟)
1.介绍培养基的定义和作用。

2.讲解培养基的分类,如固体培养基、液体培养基等。

三、分组讨论培养基的配制方法 (15分钟)
1.将学生分成小组,每组分配一种培养基配制方案,让他们讨论并总结出配制要点。

2.组内学生互相讨论,解决问题,确保每位学生都掌握了配制方法。

四、实验操作 (30分钟)
1.学生按照所分配的配制方案,准备所需试剂和材料。

2.学生根据配制步骤操作,并观察结果,记录实验过程。

五、讨论与总结 (10分钟)
1.带领学生讨论实验中的问题和收获。

2.总结不同培养基的特点和配制要点。

六、作业布置 (5分钟)
要求学生回家复习课堂内容,准备下节课的学习任务。

七、教学反思 (5分钟)
对本节课的教学过程进行反思,总结教学亮点和不足之处,为下节课的教学做准备。

实验五%20培养基的制备、包扎

实验五%20培养基的制备、包扎

实验五培养基的制备、包扎一、实验教学目的与要求目的:1、明确培养基的配制原理。

2、掌握配制培养基的一般方法和步骤。

内容:1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制。

2、SDAY培养基的配制。

二、实验原理培养基是供微生物生长、繁殖和代谢的营养基质。

培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子及水分等。

培养还应具有适宜的pH、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

在液体培养基中加入0.5%-1.0%的琼脂配置为半固体培养基,加入1%-2%的琼脂配置为固体培养基。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的多糖,是应用最广的凝固剂。

琼脂在96-100℃融化,46℃以下凝固。

培养基经灭菌后方可使用。

三、实验材料及用具1.试剂牛肉膏、蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、琼脂、链霉素、1M NaOH、1M HCl、NaCl、蒸馏水。

2.仪器及用具试管、三角瓶、培养皿、烧杯、量筒、玻璃棒、分液漏斗、天平、药匙、pH试纸、称量纸、棉花、纱布、线绳、橡胶管、报纸、铁架台、标签纸。

四、操作步骤(一)培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、蒸馏水1L、pH 7.0~7.2。

SDAY培养基:葡萄糖40g、蛋白胨10g、酵母浸出粉10g、琼脂20g、蒸馏水1L。

(二)步骤:操作图示(1)称量按照培养基配方,准确称量各成份放于烧杯中。

对于不是粉状(如肉膏),应用烧杯称量。

(2)配调向烧杯中加入适量的水,搅拌,使其溶解(可加热助溶)。

如是配制固体培养基,在琼脂的熔化时,需不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。

待完全熔化后,补足所失水分。

如果配方中含有淀粉,先将淀粉用少量冷水调成糊状并在火上加热搅拌,然后加足水分及其他药品,待完全熔化后补足所失水分。

(3)调节pH值培养基溶解均匀并冷却至室温时用pH试纸测pH,然后根据要求加酸或碱(一般用1molHcl和1molNaOH),要缓慢少量且多加搅拌。

《培养基的制备》课件

《培养基的制备》课件

在制备培养基时,需要将 培养基中的气泡排除,以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理,以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础,对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范,保持实验环境的清 洁,确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限,要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存,避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时,必须遵循无菌操作,确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应,影响培养效 果,需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件,课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂,如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度,维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序,将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中,并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅

实验教案 培养基的制备

实验教案 培养基的制备

实验一培养基的制备一目的要求1 明确培养基的配制原理2 通过对基础培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤二基本原理不同培养基中含有不同的微生物生长所需要的营养物质,其可供微生物生长繁殖用,为微生物提供C源、能源、N源和维生素。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。

琼脂在常用浓度下96度溶化,实际应用时,一般在沸水中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免烧焦,琼脂在40度时凝固,通常不被微生物分解利用,固体培养基中琼脂含量根据琼脂的质量和气温的不同有所不同。

牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏:3.0g,蛋白胨10.0g,NACl5.0g,水1000ml,pH 7.2-7.4.马铃薯培养基是霉菌的基本培养基,培养基配方如下:马铃薯100g 蔗糖10g 琼脂10g 水500ml pH 自然三器材:1试剂或溶液:马铃薯、蔗糖、琼脂、蒸馏水。

2仪器或其它用具:试管、三角瓶、烧杯、玻璃棒、天平、牛角勺,纱布、麻绳、牛皮纸、高压灭菌锅四操作步骤1称量:依次称取马铃薯块、蔗糖、,切碎的琼脂放入三角瓶中并加入500ml蒸馏水2 把三角瓶放入锅中,锅盖好后放在电热炉上加热,等琼脂溶解后取出三角瓶3过滤:趁热用多层纱布过滤,去除里面的杂质4分装:将配制好的培养基分装入试管。

5加塞:分装完后在试管口塞上塞子,以阻止外界微生物进入培养基造成污染,并保证有良好的勇气性能。

6包扎:用牛皮纸再包扎瓶口,以防灭菌时弄湿棉塞。

7灭菌:用高压蒸汽锅在0.1MP下灭菌20min8搁置斜面:趁热将试管里的培养基斜面,注意斜面的长度大约为试管长度的1/29无菌检查五:注意事项1培养基配制后,必须立即灭菌2分装过程中,注意不要使培养基沾在管口上,以免沾在塞子上而引起污染实验二革兰氏染色法一目的要求1学习并初步掌握革兰氏染色法2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性二基本原理革兰氏染色法是1884年丹麦病理学家christain Gram 创立的而后作了些改进,革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。

PDA培养基制备技术教案

PDA培养基制备技术教案

《农业生物技术》实训7 PDA培养基制备技术(中等职业教育国家规划教材高等教育出版社)实训7 PDA培养基制备技术案例【实训课题】PDA培养基制备技术【课型】实训课【课时】 1课时【实训目的】通过实训,使学生掌握PDA培养基的制备方法和技术步骤,提高学生的实践操作技能。

【实训重点】PDA培养基的制备方法和步骤。

【实训难点】PDA培养基的制备技术和操作步骤(关键)。

突破方法:通过观看实践片断、学生训练、课堂练习等教学方法,使文字与图像、声音相互协调,共同完成教学目的,从而突破教学难点。

【教具准备】 1. 课前板书实训目的、材料用具、注意事项、方法步骤、检测评价等。

2.教师准备材料用具并先制好1份培养液备用。

【教学方法】仿真影文教学法、目标教学法、分层教学法、分析演示法等。

【学法指导】为引导学生自主探究学习,提高实际动手操作技能,培养学生的细心规范的养成教育学习惯,我安排学生提前预习,课堂上利用课件让学生在很短时间内了解实训目标和实训内容,观看实践片断学习系统规范地操作步骤和安全注意事项,并有针对性地对实训过程作了重点演示,如分装、加棉塞、包扎等技术要领,学生训练过程中巡回指导,及时纠正,充分体现学生的主体作用,以便学生顺利完成实训目标地和学习任务。

【教学过程】一、教材分析:PDA培养基制备技术是种植专业基础课《农业生物技术》实训7培养基制备和灭菌技术的实践应用。

本节课是实训课,主要内容是学习PDA培养基的配方和制备方法,它是在前节学习了金针菇菌种培育之后,对PDA培养基制备技术的实际操作训练,是学生应知应会的实训课程,也是食用菌栽培技术中重要的基本技能之一,实践性强,技术要求相对较高,是食用菌母种培育的必备技术。

学好本节课具有很重要的实践性意义。

二、教学内容:教学内容主要包括PDA培养基的配方和制备技术。

采用自学指导、观看实践片断、学生训练、检测点评等方法让学生学会制备PDA培养基的方法步骤。

三、教学过程及时间分配【板书设计】【教学后记】1、本节课典型实用,实践操作性强,方法恰当,内容逼真,有效地解决了示范操作难,时间紧的问题,为培养食用菌专业人才奠定了基础。

培养基的配制及倒平板——教学设计

培养基的配制及倒平板——教学设计

培养基的配制及倒平板
教学目标:
了解培养基的配方;学会配制培养基;学会倒平板。

教学重难点:
根据不同需求配制不同培养基;学会倒平板的操作。

教学内容:
一.制备培养基
1.配制培养基
称取去皮的马铃薯200g,切成小块,加水1000mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。

向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15-20g琼脂用蒸馏水定容至1000mL。

加琼脂的目的是什么?作为凝固剂
2、灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100 kPa、温度为1219C的条件下,灭菌15-30 min。

将5-8套培养皿包成一包用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160-170°C灭菌2h。

注意:(1)调pH:pH7.6(用0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液把培养基调节到所要求的值)
(2)分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。

分装三角瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。

(3)在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么?在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。

3.倒平板待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。

二、无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。

如果有菌落生长,说明培养基已被污染。

培养基配制教学设计方案

培养基配制教学设计方案

一、教学目标1. 知识目标:- 了解培养基的基本组成及其在微生物培养中的作用。

- 掌握培养基配制的步骤和方法。

- 熟悉不同类型培养基的特点和应用。

2. 能力目标:- 能够独立完成培养基的配制过程。

- 能够根据实验需求选择合适的培养基配方。

- 培养实验操作技能和实验室安全意识。

3. 情感目标:- 培养学生对微生物学的兴趣和好奇心。

- 增强学生的团队协作能力和责任感。

- 增强学生的科学素养和严谨的科研态度。

二、教学对象本教学设计方案适用于生物学、微生物学等相关专业的本科生。

三、教学内容1. 培养基的基本组成:- 营养成分:碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。

- 添加剂:指示剂、抗生素、抑制剂等。

2. 培养基的配制步骤:- 原料准备:称量、溶解、灭菌。

- 配制方法:液体培养基的配制、固体培养基的制备。

- 分装与灭菌:分装、封口、高压灭菌。

3. 常见培养基的类型及其应用:- 选择培养基:用于分离和纯化特定微生物。

- 培养基:用于培养和保存微生物。

- 差异培养基:用于观察微生物的特定特征。

四、教学过程1. 理论教学:- 讲解培养基的基本组成、配制步骤和常见类型。

- 通过PPT、视频等多媒体手段展示培养基配制的实际操作。

2. 实验教学:- 学生分组进行培养基配制实验。

- 教师现场指导,解答学生疑问。

- 学生独立完成培养基配制,包括原料准备、溶解、灭菌、分装与封口等步骤。

3. 课后作业:- 完成实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和分析。

- 撰写实验总结,反思实验过程中的问题及改进措施。

五、教学评价1. 课堂表现:学生的出勤率、参与度、提问积极性等。

2. 实验操作:学生的实验技能、操作规范性、实验结果等。

3. 作业完成情况:实验报告的质量、实验总结的深度等。

六、教学资源1. 教材和参考书籍:《微生物学》、《微生物实验技术》等。

2. 实验室设备:天平、高压灭菌器、移液器、培养皿、试管等。

3. 多媒体资源:PPT、视频、实验操作指南等。

实验4 培养基的制备

实验4 培养基的制备

4)鉴别培养基(differential medium) 用于鉴别不同类型微生物的培养基
特定的化学反应,产生明显的特征性变化(大肠杆菌在伊红美蓝固体 培养基上呈现金属光泽)
根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。 5)选择培养基(selective medium)
用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基 根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不 同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要 的微生物的生长,有利于所需微生物的生长(如用于沙门氏菌培养的 四硫磺酸钠培养基,其可抑制非沙门氏菌的细菌生长)。
2、接种操作
无菌操作: 火焰附近(酒精灯、煤气灯)进行
任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素: 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水
任何培养基一旦配成,必须立即进行灭菌处理
培养基配制原理

依据不同的微生物对生方法
(1)、选择适宜的营养物质
(2)、营养物的浓度及配比合适
(3)、物理、化学条件适宜(如酸碱度)
在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基
一、无菌技术
微生物无处不在,在微生物的操作和研究中无菌 操作的概念必须贯串始终,因此:
1。用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物; 2。在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染;
二 培养基
培养基(medium)是人工配制的,适合微生物生长繁殖或 产生代谢产物的营养基质。
周四


营养琼脂:3000ml 6组,(每组500ml) 真菌培养基(沙保劳氏)1200ml 2组 (500ml,700ml) 麦康凯培养基:1100ml 2组(500ml,600ml

实验三 培养基的制备

实验三 培养基的制备

实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化一、实验目的1. 了解配制培养基的一般方法和步骤;掌握牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁培养基的制备方法。

2. 了解灭菌的原理,掌握高压蒸气灭菌的操作方法。

3. 掌握严格的无菌操作技术,掌握从土壤中分离微生物的方法。

二、实验内容1.学习牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁氏培养基的配制。

2.学习高压蒸气灭菌的操作方法。

3.学习用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌;用平板划线方法分离微生物。

4.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。

三、实验材料和用具牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HClKNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、4.5mL无菌水6管,10%酚液,49.5mL无菌水(带玻璃珠)1瓶。

土壤样品、试管、培养皿、移液管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、称量纸、牛角匙、pH试纸、棉花、报纸、记号笔、线绳、纱布、酒清灯等。

电炉、立式高压蒸气灭菌锅、手提式高压蒸气灭菌锅、超净工作台等。

四、操作步骤(一)培养基的制备1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。

其配方如下:牛肉膏3g,蛋白胨10g,Nacl5g,琼脂15~20g,水1000mL,PH7.4~7.6(1)称药品:按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。

牛肉膏可放在小烧杯中称量,用热水溶解后倒入大烧杯。

蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。

(2)加热溶解:在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。

若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

一、教案基本信息教案名称:《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌学科领域:生物工程、生物技术适用年级:大学本科生物工程专业课时安排:2课时(90分钟)教学目标:1. 了解发酵培养基的作用和种类;2. 学会发酵培养基的制备方法;3. 掌握实罐灭菌的操作步骤和注意事项;4. 培养学生的实验操作能力和团队协作精神。

教学重点:1. 发酵培养基的制备方法;2. 实罐灭菌的操作步骤。

教学难点:1. 发酵培养基的配制过程中的注意事项;2. 实罐灭菌的原理和操作技巧。

二、教学准备实验材料:1. 牛肉膏、酵母提取物、葡萄糖等发酵培养基原料;2. 实验用具:烧杯、玻璃棒、量筒、电子天平等;3. 实罐灭菌设备:高压蒸汽灭菌锅、培养基灌装机等。

实验场地:生物实验室三、教学过程1. 导入(5分钟)教师简要介绍发酵培养基的作用和种类,引出本节课的主要内容:发酵培养基的制备和实罐灭菌。

2. 发酵培养基的制备(15分钟)教师讲解发酵培养基的制备方法,包括牛肉膏、酵母提取物、葡萄糖等原料的配比和溶解过程。

学生分组进行实验操作,制备发酵培养基。

3. 发酵培养基的灭菌(15分钟)四、课后作业1. 复习本节课的实验操作步骤和注意事项;2. 查阅资料,了解发酵培养基的其他制备方法和实罐灭菌的原理;3. 结合实验结果,分析发酵培养基制备和灭菌过程中可能出现的问题及解决方法。

五、教学评价1. 学生实验操作的规范性和准确性;2. 学生对发酵培养基制备和实罐灭菌原理的理解程度;3. 学生课后作业的完成质量和深度。

六、实验操作注意事项1. 发酵培养基制备过程中,应注意称量准确,溶解充分,避免原料残留;2. 实罐灭菌时,应保证高压蒸汽灭菌锅的温度和时间达到灭菌要求,确保培养基无菌;3. 实验操作过程中,要严格遵守实验室安全规范,佩戴好实验防护用品;4. 培养基灭菌后,应等待冷却至适宜温度后再进行接种,以免温度过高杀死菌种;5. 实验过程中,要确保实验用具的清洁和消毒,防止交叉污染。

实验1 培养基的制备技术(讲稿)

实验1 培养基的制备技术(讲稿)

实验1 培养基的制备与微生物接种技术一、实验目的1、掌握基础培养基的制造方法和过程。

2、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。

3、了解各种培养基的特点。

二、实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。

培养基要具备以下条件:①要有适宜的营养物质和水分;②具有适宜的PH值;③配制后应经灭菌呈无菌状态。

培养基按物理状态可分液体培养基、固体培养基、半固体培养基。

常用琼脂作凝固剂。

培养基制备的基本程序:配料、溶化、测定及矫正PH、过滤、分装、灭菌、无菌检验三、仪器设备试管、刻度吸管、纱布、滤纸、三角瓶、培养皿、量筒、漏斗、棉塞、电炉、天平、包装纸、棉线、ph试纸、玻棒。

试剂:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂条、0.1mol/L和1mol/L氢氧化钠、0.1mol/L和1mol/L的盐酸溶液、蒸馏水等。

四、配制原则和种类(一)培养基配制原则1、培养基:培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质,如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。

制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子,还要考虑水与pH环境,同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。

因此,可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质,称为培养基。

换言之,培养基必须具备三个条件:含有菌株生长发育所需要的营养物质;具有菌类生长环境条件;经过灭菌,并保持无菌状态。

2、培养基的选择:在整菌种制备过程中,从母种到原种、栽培种,各个阶段的目的要求有所不同,所选用的培养基的配比也应有所区别。

一般母种初生菌丝较嫩弱,分解养分能力差,要求营养丰富、完全,氮源、维生素的比例应高。

须选用易于被菌丝吸收利用的物质,如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多,且菌丝分解能力强,可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。

(二)培养基的种类1、根据营养物质的来源,可以把培养基分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基。

实验三 培养基的制备

实验三 培养基的制备

实验三 培养基的制备
三、实验仪器与用具 电磁炉、搪瓷缸、50ml的小烧杯、纱布、玻璃 棒、称量纸、分析天平、1mol/lNaOH溶液、 1mol/lHCl溶液、 pH试纸 四、实验材料与试剂 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、可溶性淀粉、KNO3、 K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、 蒸馏水、琼脂、马铃薯、葡萄糖
实验三 培养基的制备
五、实验操作 6、加塞; 7、包扎:注明培养基的名称、组别、配制日 期; 8、灭菌:0.1MPa,121℃,灭菌20min即可。 9、搁置斜面:斜面长度不超过试管高度的1/2左右为宜; 10、无菌检查 将灭菌培养基放入37 ℃的恒温培养箱中培养24~48h, 以检查灭菌是否彻底。
(二)培养基的分类 1、按成分的不同分 天然培养基:主要成分是复杂的有机物质,如马铃薯、豆 饼粉、玉米粉、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等,如 马铃薯培养基、玉米粉、豆饼粉培养基、血琼培养基等 合成培养基:用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而 成的培养基,也称化学成分明确的培养基(chemically defined medium),如高氏一号培养基、查氏培养基等 半合成培养基:在以天然有机物作为微生物营养来源的同 时,适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基, 如PDA培养。
实验三 培养基的制备
(二)培养基的分类 2、按物理状态的不同分 液体培养基:一类外观呈液体状态的培养基,不含任 何凝固剂。 固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂。 凝固剂:琼脂(1.5~2%)和明胶(5~12%) 半固体培养基: 琼脂(0.5%) 脱水培养基:又称脱水商品培养基或预制干燥培养基, 指含有除水以外的一切成分的商品培养基,使用时 只要加入适量水分并加以灭菌即可,是一类既有成 分精确又使用方便等优点的现代化培养基。

培养基配制教学设计

培养基配制教学设计

培养基配制教学设计引言:在生物学、医学和微生物学等领域的实验研究中,培养基配制是一项至关重要的技能。

培养基是一种包含适当营养成分的培养介质,用于培养和繁殖微生物或细胞。

准确配制培养基对于成功进行实验和研究至关重要。

因此,培养基配制教学是生物学相关课程中的重要内容之一。

本文将探讨培养基配制教学的设计,并提供有效的教学方法和策略。

一、目标设定在进行培养基配制教学之前,首先需要设定明确的目标。

以下是一些可能的目标示例:1. 学生能够理解培养基的作用和重要性。

2. 学生能够正确理解和解释培养基配方。

3. 学生能够准确配制出特定种类的培养基。

4. 学生能够识别并解决培养基配制过程中可能遇到的问题。

5. 学生能够运用培养基配制技能进行实验和研究。

二、教学内容培养基配制教学的内容可以根据学习者的水平和需要进行调整。

以下是一些可能包括的内容:1. 理解培养基的基本组成和功能:教授学生培养基的基本成分,如碳源、氮源、矿物质和生长因子等,并解释它们在培养基中的作用和重要性。

2. 培养基配制标准化和常用方法:介绍培养基配制的标准化方法和常用技巧,如重量法和体积法等。

通过示范和实际操作让学生掌握培养基配制的基本步骤和流程。

3. 培养基配方的理解和解释:教授学生如何阅读和解释培养基配方。

指导学生分析培养基配方中每个成分的作用,并解释各种成分的数量和比例对培养基的影响。

4. 培养基配制中的常见问题和解决方法:介绍学生在培养基配制过程中可能遇到的常见问题,并提供相应的解决方法。

例如,PH 调节、溶解度问题和消毒技巧等。

5. 实验和研究中的培养基配制技巧:引导学生应用培养基配制技能进行实验和研究。

例如,在微生物学领域,学生可以通过培养不同细菌株的能力来观察它们的生长和表型特征。

三、教学方法和策略为了有效地教授培养基配制,教师可以采用以下教学方法和策略:1. 理论讲解和示范:通过教室讲解和实验室示范,向学生介绍培养基配制的理论知识和实际操作技巧。

培养基的配制教案

培养基的配制教案

2014-----2015 学年第一学期植物组织培养技术课程教案课程编码:_______________________________________ 课程类型:理实一体化课程(理论课,理实一体化课程,纯实践(技能)课)总学时/周学时:___________64______________________ 开课时间:2014年至2015年第一学期;第1周至第8周授课年级、专业、班级:2013级生物制药使用教材:__________植物组织培养_石文山主编_______ 授课教师:__________ 王玉珍______________班级2013生物制药课程植物组织培养教学内容马铃薯培养基的配制教学时数 2执教教师王玉珍时间2014.11.17上午课型理论(),理实一体化(√),实践()教学目标知识目标1.进一步认识培养基的配制方法2.掌握培养基的配制的要点能力目标1.能够正确进行培养基的配制2.能够对实验结果进行分析3. 能够对实验过程出现的异常现象进行应急处理素质目标1.相互合作的意识2.提高安全意识3.培养创新能力教学方法 1.项目教学法2.理实一体化教学3.小组合作式教学创新精神和职业核心能力(或职业素养)培养 1.培养学生利用基本操作规范,研究发现最适合于红掌和百合生长的培养基,从而形成创新意识,掌握科学研究的方法。

教学难点重点 1.培养基母液的正确移取 2.移液管的正确使用3. 药品的正确称量4. 分装培养基的操作教学条件在理实一体化教室进行操作,多媒体教学,实验药品器材齐全,教师具有丰富的教学经验,教学仪器及药品 1.仪器:电磁炉1个、MS母液6瓶、搪瓷杯(1000ml)1个、培养瓶12个、烧杯(200ml)1个、2L广口瓶(装有蒸馏水)、洗瓶1个、量筒(500ml)1个、量筒(50ml)1个、移液管(10ml)1个、移液管(5ml)5个、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、pH试纸(5.0-7.0)1包、吸耳球1个、镊子1个、玻璃棒1个、抹布1块、称量纸1包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个。

教学设计:培养基制作3.

教学设计:培养基制作3.

教师姓名20 年月日星期授课班级
项目名称
《食品微生物技术实训项目教程》
项目七微生物培养技术实训任务1 培养基制作
目的与要求1.掌握普通培养基的制作技术
2.掌握培养基pH条件调控技术
课时 4
测定原理
培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。

另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

加琼脂制成的培养基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固。

但多次反复融化,其凝固性降低。

仪器、试剂
蛋白胨、牛肉膏、NaCl、琼脂、乳糖、K2HPO4、猪胆盐、2%伊红Y溶液,0.65%美兰溶液,0.04%溴甲酚紫水溶液、15%NaOH溶液、5%HCl 溶液、天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸(7.2-7.4)、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、吸管、平皿、玻璃棒、烧杯、试管架、剪刀、酒精灯、棉花、线绳、牛皮纸或报纸、纱布、乳胶管、电炉、灭菌锅、干燥箱,杜氏小管等。

教学过程及时间安排1.实验内容的讲解45min
2.凝固剂比较讨论30min
3.试剂的称量30min
4.培养基的配置40min
5.培养基的包扎25min
6.讨论评分、整理实验室10min
注意事项1.蛋白胨具有强烈的吸水性,牛肉膏是半固体形态,猪胆盐比较贵;
2.琼脂在加入时要先软化,加入琼脂后,不断搅拌,以防琼脂沸腾贱出;
3.注意在灭菌时不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内培养基冲出容器之外。

结果分析凝固剂选择是否正确,各种成分在培养基中起到的作用。

教案
课后体会。

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