白细胞和红细胞检测

小鼠血常规检测：包括血红蛋白测定(Hb)、红细胞(RBC)计数、白细胞（WBC)计数及白细胞分类计数(DC，以比值计）4项。

白细胞分为5类：一是中性粒细胞(Gran)，二是淋巴细胞(Lym)，三是嗜酸性粒细胞，四是嗜碱性粒细胞，五是单核细胞。

白细胞计数

1、白细胞稀释液：取冰醋酸2.0mL和10g/Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴或1%龙胆紫1 mL，混匀，加蒸馏水至100mL。(用滤纸过滤)

2、取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍl。

3、用微量吸管准确吸取抗凝血20ul，擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管2次～3次，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀（完全变为棕褐色）。

4、充液：将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置2min～5min，待白细胞下沉后于显微镜下计数。

5、计数：用低倍镜依次计数四角的4个大格内的白细胞数。对于压线的白细胞，应采取数上不数下；数左不数右（左、上计入，右、下弃去）的原则，保证计数域的一致性，使计数准确。

6、计算四个大格白细胞数

白细胞数／Ｌ＝———————— × 10× 20× 106

4

式中：÷4 得每个大格（即0.1µl）内白细胞平均数

×10 因一大格容积为0.1µl，换算为1µl

×20 血液稀释倍数。

×106 将1µl换算为1Ｌ。

稀释倍数＝（溶质＋溶剂）/溶质注意：体积单位需一致后方能运算。

材料：血细胞计数盘及盖玻片、显微镜、一次性定量采血管 (20ul) 、小试管、刻度吸管、白细胞稀释液。

红细胞计数

1、红细胞稀释液：赫姆（Hayem）稀释液，称取氯化钠（调渗透压）0.5g, 结晶硫酸钠2.5 g（提高相对比密和防止细胞粘连）, 氯化高汞0.25 g（防腐剂），用蒸馏水溶解至100mL。

2、取小试管1支，加红细胞稀释液2ml。

3、用干燥微量吸管吸取抗凝血10μl，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，立即混匀。

4、充池混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放2～5分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。

5、计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。

6、计算红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010

白细胞分类计数

某种白细胞数／L＝某种白细胞％×白细总数／L