临床微生物样本采集规范
临床微生物项目与样本采集规范
汇报提纲
01
微生物新技术
02
微生物新项目组合
03
微生物项目采集规范
2
1 微生物新技术
3
微生物新技术
• MALDI-TOF-MS • 16S rRNA和真菌ITS/D2（28S)测序
4
微生物质谱仪
16S rRNA
• 判断16S rRNA序列扩增是否成功：经琼脂糖凝胶电泳在1500bp附近 出现条带，说明16S rRNA已经扩增成功。由于16S rRNA序列长度一 般1500bp左右。
• 不可避免地受到污染 • 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。 • 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现
象。
52
咳痰标本不合格，退检吗？
• 如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个， 应不做或仅在特殊要求时做培养。
• 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污 染明显”。
带菌样本
相对无菌样本
痰、咽拭子
尿液
生殖道分泌物：
女：阴道分泌物、宫颈分泌 物、后穹窿分泌物；
血管内导管 肺泡灌洗液
粪便
生殖道分泌物：
男：前列腺液、精液、尿道分 泌物
脓液、伤口分泌物、眼部分泌 物
无菌样本
全血、骨髓
脑脊液
胸腹水
穿刺液：关节腔积液、鞘膜 积液、盆腔积液、心包积液 等全身各个部位的体液穿刺 胆汁
57
六、生殖道标本采集规范 • 推荐使用男性或女性专用拭子，置运送培养基送检。 • 男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通过直肠按摩前列
腺，用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内。 • 男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2～4cm，旋转拭
临床微生物样本采集规范
临床微生物样本采集规范临床微生物样本采集规范1. 范围和目的本规范适用于临床微生物样本的采集、处理和管理，旨在保证样本采集的质量和规范性，确保临床微生物诊断结果的准确性和可靠性。
2. 术语和定义（1）微生物：指包括细菌、真菌、病毒、支原体、立克次体、螺旋体等在内的微小生物体。
（2）临床样本：指从患者体内采集的各种生物标本，如血液、口腔、鼻咽部、骨髓、尿液、痰液、脑脊液等。
（3）采集容器：指用于采集临床样本的容器，如血液采集管、尿样瓶、培养皿等。
（4）采集套装：指一次完整的样本采集过程中所需的所有采集工具和材料。
3. 采集前准备（1）确定采集部位、时间和采集方式，注意患者的生命体征和病情变化。
（2）准备好所需的采集套装和采集容器，在样本采集前做好标签，并核对患者信息。
（3）认真阅读所有相关规范和实验室要求，确保样本采集符合要求。
4. 采集操作步骤（1）根据采集部位和样本类型选择合适的采集套装。
（2）采集前应让患者了解采集的目的和过程，并获得其同意。
（3）采集前要检查采集部位，患者的身体状态和生命体征，确保采集过程安全和无痛苦。
（4）采血时应注意采血量、采血速率、采血部位、采血方式等。
（5）尿样采集时应注意尿样的采集量、采集时间、采集方式、保护好样本的完整性和纯度。
（6）痰液采集时应注意痰液的颜色、黏度、量和纯度，选择合适的采集器具和采集方式。
（7）脑脊液采集时应注意采集部位、采集方式、采集量、采血顺序和样本处理标准等。
（8）其他临床样本采集时，应根据具体要求和操作规范，选择合适的采集方法和器具。
5. 样本运输和储存（1）在采集后，立即将样本放入相应的采集容器中，尽快送至实验室进行处理。
（2）若无法立即处理样本，应按要求在采集容器中注明采集时间和采集者信息，并存储在规定温度下，以便后续处理。
（3）运输过程中应遵循规范，确保样本不泄漏、不污染，并尽快送至目的地。
（4）储存过程中应保持样本的纯度和完整性，控制储存温度，在保质期内使用。
标本采集、运送标准操作规程
4 7
血培养 淋球菌培养
立即 30分钟
1小时 30分钟
阳性结果3天以上，阴性结果7天 2天
8
真菌培养
1小时
2小时
3天后
细菌室项目检验周期表
9 解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培 养 1小时 2小时 2天后
11
一般涂片革兰氏染色
1小时
2小时
5小时
当天下午
12
涂片找抗酸杆菌
1小时
2小时
5小时
当天下午
Байду номын сангаас
查询申请医师，补足标本信息。
仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本
与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本
标本外漏及明显受污染（如开塞） 标本收集不符合采集要求 样本混入消毒液 或防腐剂
与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本 退回申请单，及时通知临床，建议重送标本。
13
新型隐球菌墨汁染色
1小时
1小时
5小时
当天下午
• 注： 1. 细菌室正常上班时间为周一至周六
全天、周日上午；其他时间（包括中午、 夜班、周日下午、）常规培养请送急诊化 验室。 • 2．各类血清学检测周一至周五做；支原体、 衣原体检查周一至周六上午做，其余时间 标本一律不接收。 • 3． 空气培养、物表监测周六、周日不做， 于周一至周五打电话给细菌室告之数量。
【标准操作程序】
• 3. 粪便样本
养：
• 5.1采集指征： • 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培
粪便涂片镜检白细胞＞5/HP 体温＞38.5℃ 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集，储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本，以免皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位：采集时应特别小心；应明确检查的目的菌在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时，如窦道标本，应从窦道底部取活组织检查，而非从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或使用一次性无菌容器，不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂，一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少，可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：三1ml尿液标本：＞3ml4.1.3粪标本：1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊：4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml;4.2.2清晨中段尿：5-10ml;4.2.3粪标本：>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等)：5- 10ml。
2024版年度临床微生物标本采集规范总结
优化采集方法和工具
根据不同类型的标本和采集需求， 选择合适的采集方法和工具，确 保采集到足够的标本量。
规范标本运输和保存
制定详细的标本运输和保存规范， 包括温度、光照等环境条件的控 制，确保标本在运输和保存过程 中保持质量稳定。
2024/2/2
31
未来发展趋势预测
2024/2/2
自动化和智能化技术应用 随着科技的不断发展，自动化和智能化技术将在临床微生 物标本采集中得到更广泛的应用，提高采集效率和准确性。
节。
2024/2/2
关键控制点分析
对标本采集过程中的关键控制点进 行了深入剖析，如无菌操作技术、 标本采集时机、采集量等因素对标 本质量的影响。
成功经验总结
总结了在实际操作过程中取得的成 功经验，如合理选用采集工具、正 确保存和运输标本等。
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存在问题及原因分析
标本污染问题
分析了标本污染的主要原因，包括采集过程中未严格执行无菌操作、 采集容器不洁净等。
2024/2/2
重症患者样本
对于重症患者，其样本也 应优先处理，以便医生及 时了解患者病情。
特殊项目样本
对于某些特殊项目，如细 菌培养、药敏试验等，也 应优先处理，以缩短检验 周期。
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及时反馈问题并改进工作流程
反馈问题
分析原因
在接收和处理过程中发现的问题，应及时反 馈给相关科室和人员。
对反馈的问题进行分析，找出问题产生的原 因。
临床微生物标本采集规范总结
2024/2/2
1
目 录
2024/2/2
• 标本采集重要性 • 标本采集前准备 • 不同类型标本采集方法 • 标本采集过程中质量控制措施 • 实验室接收和处理流程优化建议 • 总结反思与未来展望
临床微微生物标本的采集注意事项接种及涂片染色
导管尖端阳性培养结果
第三十一页，共67页
6、脑脊液标本
⑴ 培养基：5%羊血琼脂、5%兔血巧克力琼脂、
葡萄糖肉汤
⑵ 培养环境：置5 % CO2、35℃环境培养。
第三十二页，共67页
7、胆汁或胸水或腹水标本
⑴ 培养基：如标本量大时可按血液培养方法直接
取16-20ml分别种入需氧和厌氧培养瓶。如标本
的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。
5、长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取
尿标本。
第四页，共67页
（三）分泌物的采集
1、对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃
体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、 生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用灭菌生理盐 水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集 病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。
宜做培养的标本；
当白细胞≤10个／L ，上皮细胞≤25个／L时再参照油
镜观察标本中细菌分布作出判断。
第四十八页，共67页
痰镜检的判断标准：
当标本中细菌种类超过3种以上，未见到钎毛拄状上 皮细胞，作为不合格标本；如见到数量不等的白血
胞或钎毛拄状上皮细胞或两者同在，含1-2种不同细
菌，可考虑继续培养，结果可根据病情再作分析；当 涂片中见到1-3种细菌，少量的扁平上皮细胞，少量 或较多钎毛拄状上皮细胞均可按合格标本继续培养。
10ml）。 9、粪标本培养，放置时间过长，已干。
第十七页，共67页
三、分离培养基本操作规范
合格的标本是保证培养成功的重要条件，但如 果没有适宜的分离培养基、培养环境以及正确 的处理方法同样不能获得好的结果，为此制定
如下基本操作规范以保证致病细菌分离成功 。
临床微生物检验标本采集规范要求★
24小时尿
记录尿量，将尿液混匀后取适量用于 检验。
粪便标本采集
自然排便
排便后用干净竹签取粪便 表面部分。
直肠拭子
在特殊情况下，如肠道感 染，可用直肠拭子采集粪 便。
粪便量
一般需采集足够量的粪便 用于检验。
呼吸道标本采集
痰液
患者自行咳出痰液，避免唾液和 鼻咽部分泌物。
支气管肺泡灌洗
在特殊情况下，如重症肺炎，可通 过支气管肺泡灌洗采集呼吸道标本 。
确定采集时间
根据患者的病情和检验目的，选择最 佳的采集时间，如空腹采集、餐后采 集等。
注意采集时间与用药时间的间隔，避 免药物对检验结果的影响。
采集人员防护措施
采集人员应穿戴符合要求的防护服、手套、口罩等，确保自 身安全。
采集过程中应遵循无菌操作原则，避免交叉感染和环境污染 。
02
标本采集方法
足或采集方法不当导致检验结果出现偏差。
03
标准化采集时间
根据疾病类型和病情发展，选择合适的采集时间可以提高检验准确性。
例如，对于急性感染患者，应在发热期采集标本；对于慢性感染患者，
应选择在疾病活动期采集。
保障患者安全
减少交叉感染风险
遵循无菌操作原则可以降低交叉感染的风险，保护患者安全。
避免患者不适
采集过程中，应避免接触非检 验部位，确保标本不受污染。
采集后应及时送检，避免长时 间存放导致污染。
防止标本变质
采集的标本应尽快送检，避免长时间 存放导致变质。
保存过程中应定期检查，确保标本质 量。
对于需要长时间保存的标本，应采取 适当的保存措施，如低温、干燥等。
其他注意事项
采集前应了解患者病情和用药情 况，避免干扰检验结果。
临床微生物标本采集和运送规范
➢ 可疑细菌性心内膜炎,在1～2h内采集3份血标本,如 果24h后阴性,再采集3份以上的血标本。
12
脑脊液标本采集送检规范
❖ 采集时间：最好在抗菌药物使用前采集。 ❖ 采集方法：通常用腰穿的方法采集脑脊液，
➢ 采集数量：对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连 续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状 出现改变。
➢ 标本运送：标本应尽快送检（1-2h内），如不能及时
送检，室温保存≤2h，4℃冰箱保存≤24h。
16
生殖道标本采集送检规范
❖ 应由临床医师采集，用无菌棉拭子采集。淋球菌 检查时，不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入 尿道及子宫颈3cm深取样送检，要避免受阴道分 泌物污染。
离体后回迅速自溶。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌 离体后极易死亡。）。延迟送检时一定不能放冰 箱，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对温度敏感的 细菌在冰箱会很快死亡。 ❖ 各种无菌体液标本，如胸腹水、浆膜腔积液及各 种穿刺液等亦可注入血培养瓶以提高培养的阳性 率。
14
尿液标本采集运送规范
❖ 采集时间：尽量在抗菌药物使用前（多数药物从尿道 排泄）。
15
痰标本采集运送规范
❖ 采集时间：尽量在使用抗菌药物之前 ❖ 采集方法： ➢ 自然咳痰：以晨痰为佳。咳痰前应清洁口腔如刷牙和
漱口，然后用力咳出呼吸道深部痰，直接吐入于无菌 容器中。痰少或无痰者可用3-5%NaCl水溶液5ml雾化吸 入5min导痰（气道高反应如哮喘病人不宜采用此法）。 对于难于自然咳痰者可用微生物室提供的一次性无菌 吸痰杯抽取气管深部分泌物。 ➢ 小儿取痰法 最好用微生物实验室提供的一次性无菌 吸痰杯抽取气管深部分泌物。
临床微生物学检验标本的采集
快速运输
03
在运输过程中应尽量缩短时间，选择适当的交通工具，保持容
器密封、避光、防震，以确保标本质量不受影响。
05
临床微生物学检验标本采集的常见问
题及解决方案
采集方法不当
总结词
采集方法不正确可能导致微生物污染或样本质量下降，影响检验结果的准确性。
详细描述
采集过程中应遵循无菌操作原则，正确使用采集工具，避免交叉感染。对于不同种类的标本，应采用不同的采集 方法和注意事项。
尿液标本
尿常规检查
检测尿液中的蛋白质、糖、酮体等成分，辅助诊断肾脏疾病和糖尿病等。
尿培养
用于检测尿液中的病原菌，如尿路感染等。
粪便标本
粪便常规检查
检测粪便中的红细胞、白细胞、寄生 虫等，辅助诊断消化道疾病。
粪便培养
用于检测粪便中的病原菌，如细菌性 痢疾等。
呼吸道标本
痰液检查
通过痰液中的细胞和病原菌，辅助诊断呼吸道感染。
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采集时机不当
总结词
采集时机不合适可能影响微生物的存活和繁殖，进而影响检验结果。
详细描述
应根据检验目的和要求选择合适的采集时机，如空腹采集血液、尿液等。同时，应注意采集过程中的 时间控制，避免长时间暴露在空气中。
采集容器选择不当
总结词
采集容器选择不当可能导致微生物死亡或繁殖受限，影响检验结果。
详细描述
量。
减少外界干扰
在采集过程中应尽量减少外界因 素的干扰，如避免过度挤压、避 免接触非采集部位等，以降低外
界微生物的混入。
采集后的保存和运
及时处理
01
采集后的标本应及时进行处理，避免长时间放置，以免影响微
临床微生物标本规范化采集和送检
四)标签及申请单
每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关 临床资料。包括病人情况（病区、病人姓名、住院号）、标本情况（标本类 型、检验目的、采集部位、采集方法、采集时间等）和病人用药等信息。
五)标本运输
标本应在室温下15分钟内送到检验科。如果超过2小时送达，冷藏保存。
六)实验室拒收标准
烧伤患者的创面、组织活检、血培养等的细菌学检测结果对临床医生进行烧伤感染的诊断和治 疗十分重要。创面的拭子标本或组织活检标本都可以进行细菌定量培养。出现全身感染症状时，应 同时采集血培养标本。在采集表面拭子或组织活检标本之前，应对创面彻底清洁，且未局部应用抗 菌药物。
一)临床采样指征：
由于烧伤的早期创面无菌，烧伤后12小时勿采集标本。当患者出现发热、创面恶化时， 考虑采样。
二)采样要求 1.病原体培养应在抗菌药物应用前或停药一周后采集标本。 2.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应遵循无菌操作以减少杂菌 污染。 3.阴道内有大量正常菌群存在，采取宫颈标本应避免触及阴道壁。 4.沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖，采集时尽可能多的取上皮细胞。
尿道分泌物
三）采集方法
（1）男性：取样前至少1小时内不要小便。 用无菌生理盐水清洗尿道口，用灭菌纱布 或棉球擦干，用男性拭子采取从尿道口溢 出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内 2～4厘米取分泌物，置无菌试管中。如无 脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按 摩，促使分泌物溢出。
应尽量送检无菌部位的标本，尤其是血培养。有菌部位标本应避免“正常菌群导致 标本的污染”。人体很多部位，如下呼吸道（痰液标本）、鼻窦、皮肤伤口等处的正常 菌群极易污染标本。因此，从这些部位采集标本，要尽可能降低这些部位正常菌群或定 植细菌对标本污染的可能性。有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。
微生物样本采集的标准化与规范化ppt课件
子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。 肉汤拭子≤2小时，室温；拭子：≤1小时，室温， 1次/天。
咽拭子标本采集
3. 尿
外尿道多寄居有正常菌群，故采集尿液时 更应注意无菌操作，常用清洁中段尿作为 送检标本。中段尿用于细菌培养，最好用 晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般 为菌落计数≥105CFU/ml。针对于老年人多 重症及卧床患者排尿困难，可相应采用导 尿管采集标本。采集和容器为无菌尿瓶， 标本量≥1毫升，条件≤2小时，室温，1次/ 天。
3）肛拭子：小心将拭子插入肛门，大约在括约肌之 上2-3厘米；轻轻旋转拭子采集肛门隐窝的标本；
要在拭子上明显看到粪便，才能检测腹泻病原体 。拭子采集，≤2小时，室温，1次/天。除了长期
卧床、无便（如中毒性痢疾）患者及频繁腹泻患
者，不推荐做拭子常规培养。用于检测淋病奈瑟 菌、志贺菌、弯曲菌、B群链球菌的肛携带者以及 不能留取粪便标本的患者。可检测霍乱弧菌。
培养瓶消毒程序：
用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消 毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡 皮塞表面残余液体．然后注入血液。
血 培 养 标 本 采 集 流 程 需氧和厌氧血培养瓶
采集次数
急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次； 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次，每次
10. 褥疮
褥疮拭子培养的临床意义不大。应选择供 活检组织或注射器吸出物。以无菌盐水清 洗褥疮表面；如不做活检，用力以拭子抹 取褥疮基底部；将拭子置入肉汤培养基中 。≤2小时，室温，1次/天/来源。
参考文献
汪复 张婴元 吴菊芳等，实用抗感染治疗学 ，北京： 人民卫生出版社，2004，24 ~33.
微生物标本采集方法及注意事项
微生物标本采集方法及注意事项一、粪便标本采集和处理(1)采集方法1.自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，2～3g 或 1～2 m1，盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。
2. 直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 4～5cm(幼儿 2～3cm)，轻轻在直肠内旋转。
擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。
(2) 注意事项1.尽可能在抗生素使用之前采集标本。
2.所挑取的粪便不应接触其他部位(如便盆)，粪便样本中不应混入尿液及其他异物，采集过程应尽量无菌操作。
3.不应用厕纸收集粪便。
4.对同一病人在同一天不宜重复送检。
5.宜在感染急性期(通常是5d-7d内)采集标本。
6.下列腹泻患者应连续3d送检标本--社区获得性腹泻(入院前或72h内出现症状)--医院腹泻(入院72h后出现症状)，且至少有下列情况之一：大于65岁并伴有内科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒细胞--怀疑肠道感染的`非腹泻性表现。
7.肠炎和发热病人建议做血培养。
8.伤寒沙门菌感染时骨髓培养高出血培养。
9新鲜粪便标本应在采集后尽快送检，不应超过2h。
(3)标本拒收干燥的拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便、明显污染的粪便、一日内重复送检的标本，应设法与临床医师联系，可要求重新留取标本，并做好记录，在没有与医师沟通之前标本不应丢弃，仍按实验室标本保存原则存放。
二、尿液标本采集和处理(1)采集方法1. 中段尿采集法：清晨起床后用肥皂水清洗尿道口和外阴部，再用清水冲洗尿道口周围，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿 5～10ml盛于带盖的无菌容器内立即送检，采集后于0.5h内进行接种。
2. 耻骨上膀胱穿刺法：评估膀胱内细菌感染的“金标准”。
培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用。
3. 导尿法：采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液，导取 10～15ml 尿液，置无菌容器中送检，尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。
临床微生物标本的采集与送检
①一般要求常温下15-30分钟内接种培养皿，尤其是脑脊液和心包液；除了做结核杆菌、真菌培养的标本应在4℃下保存外，做其他项目的应常温保存。
②严格无菌穿刺。
③为了防止穿刺液的凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液
考虑到方便操作，建议常规血培养应尽量在使用抗菌药物前，于病人寒战或发热开始时30-60分钟内同时于不同部位采集2-3份血培养。
3.采血次数
①.留置深静脉导管且怀疑导管相关血流感染：
至少同时采集2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，另一套从导管采集。（1套血培养定义：
从一个部位如静脉穿刺或静脉导管所获血液的培养，不论被接种在1个还是多个血培养瓶内都只能算是1套）
先以无菌生理盐水清洗外阴部或外生殖器，将无菌试管对准尿道口，待尿排出后送检注意事项严格进行无菌操作，因为尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染杂菌通常应取晨起第一次尿液送检多数药物均通过尿液排泄，因此采集尿液应在用药前进行长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。导尿留取尿液时，集尿袋内的尿液和导尿管末端的尿液不能用于培养。
发热(≥38℃)或低温(≤36℃),寒战,白细胞增多,皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血压降低,C反应蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。
2.采血时机：
据研究表明：
细菌通常在病人寒战和发烧前1小时进入血流，因此规范规定在病人发热高峰前1小时抽血。
（二）、微生物检查的标本采集、运送原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查。
临床微生物检验标本的采集、运送及接种要点
检查采集器具和试剂的有效期
在采集前，检查采集器具和试剂的生产日期和有 效期，确保采集过程中使用的物品符合质量要求。
无菌操作技术规范培训
01
02
03
培训采集人员
对采集人员进行无菌操作 技术规范的培训，确保他 们掌握正确的采集方法和 注意事项。
报告审核
由经验丰富的专业人员对报告进行审核，确 保报告的准确性和可靠性。
报告存档
对出具的报告进行存档管理，以备后续查询 和追溯。
07 注意事项与常见问题解答
采集过程中注意事项
严格无菌操作
采集标本时应避免污染，确保无菌操作，以免影响检验 结果。
采集适量标本
采集标本量应适中，过多或过少均可能影响检验结果。
定期监测
定期对保存条件进行监测和记录，确保标本保存环境稳定可靠。
超出保存期限处理
对于超出保存期限的标本，应按照相关规定进行处理，避免误用 或浪费。
05 标本接种操作要点
接种前培养基准备工作
选择合适培养基
根据待检微生物种类选择合适的培养基，确保能 够提供其生长所需的营养物质和环境条件。
培养基灭菌
对培养基进行高压蒸汽灭菌或干热灭菌，以消除 杂菌和污染。
将拭子插入鼻腔至鼻咽部，轻轻旋 转后取出。
03
02
咽拭子
用无菌拭子擦拭咽后壁及两侧扁桃 体，避免触及舌部。
采集容器
应使用无菌、有盖、干燥的容器， 痰标本也可使用无菌痰杯。
04
其他类型标本采集
脑脊液标本
由医生进行腰椎穿刺采集，过程中需严格无 菌操作。
穿刺液标本
医院感染临床微生物检查标本采集与送检规范
•
血培养标本采集与运送
•
血培养的指征是什么? ? ? ?
血培养的指征是什么? 答 案
• 1. 当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养 • 2. 怀疑患者有血流感染的症状有： • – – 不明原因的发烧( ( ＞ 36 ℃) ) 或体温过低( ( ＜ 36 ℃) ) • – – （ 白细胞增多（ ＞ 10,000/ul ），粒细胞减少（ ＜ 1,000ul ） • – – 休克，寒颤，僵直 • – – 严重的局部感染( ( 脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后
针对如此严重的分析前误差微生物室能做什么？
• • 提供准确的“标本采集输送的标准操作程序” • • 持续的临床教育和交流
三、常见标本的采集与运送规范
做好病原学检查要特别重视标本质量
基本原则: • 及时采集微生物标本作病原学检查 • 在抗菌药物使用前采集标本 • 采样时严格执行无菌操作 • 采样后立即送检
应该采集多少血液? ? ? ?
• 采血量是影响灵敏度最关键因素 • 成人一份标本2 个培养瓶（需氧＋厌氧），每瓶8 －10ml ，共
20ml ；要求至少采两份标本，即 40ml 。 • 儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集血量＜1 1 ％总血量下，
一般为1 － 3ml • 新生儿一般0.5ml • 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90 ％以上的感染为需
• 近年来由各种不同细菌引起的感染性疾病越来越多 ，导致抗生素的过度使用，其结果是耐药菌株的增 加。
• 临床微生物室应如何帮助临床医生合理治疗感染性 疾病成为我们共同目标。
检验误差发生率哪个阶段最高？
微生物结果的影响因素
临床标本采集运送规程
临床标本采集运送规程临床微生物标本采集与送检是目前临床实验室诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影响临床微生物学实验室对感染样本中致病菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈率，而且对预测或及时发现医院感染的暴发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的发病机制和环节、制定有效的医院感染控制措施等，均具有十分重要的意义。
严格实施正确的微生物标本送检和检验方法，是做好医院感染病原体监测的关键。
鉴此，希望临床各科能按照本操作规范采样送检。
一、医院感染标本的采集和运送基本原则1．发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于70％。
2．尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3．标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4．标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。
5．以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子，应立即送检。
6．盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。
7．送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
二、常见医院感染标本送检方法1．血液与骨髓①通常采血部位为肘静脉。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。
切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
②采血部位的局部皮肤应严格消毒。
将采集的血液注入血培养基前，应更换针头或过火消毒针头。
血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保存。
③每次采血量成人5—10ml，婴幼儿l一5ml，培养基与血液之比以lO：1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
④怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。
对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次用药前采血。
⑤每例病人至少采血两次，间隔。
.5—lh,以利于提高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。
临床微生物标本采集和运送规范
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
❖ 本卷须知 ❖ 迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。 ❖ 皮肤消毒对培养结果至关重要。 ❖ 不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶
活动区域或基底部采集标本。 ❖ 除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养 ❖ 标记：不要只写“伤口〞标记标本，应有专门的描述
5
二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
6
血培养的采集、运送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
储存 环境
标本来源
4℃冰 箱
痰、尿液、粪便、气管冲洗物、导尿管、静脉导管、脓液和伤口分泌物 细菌或真菌培养；无菌体液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜积液、胆 汁）真菌培养；支原体培养；衣原体检查；血清学检查（包括ASO、RF、 肥达反应）
室温 脑脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培养、血管导管尖、活检组织细
❖ 注意：从静脉取血；不要与血气和血沉标本一起采血； 不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血〔除非疑心导管相关性血 流感染〕。
8
血培养的采血量
❖ 成人采血量5-10ml〔最好8-10ml〕，儿童采血量1-3ml 〔不超过总血量的1％〕。血液和肉汤之比为1：5~1： 10。骨髓采集量1-2ml。
❖ 应注明具体标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜 还是角膜，并注明左眼还是右眼。
18
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
2024版临床微生物标本采集规范
临床微生物标本采集规范•微生物标本采集意义与原则•临床常见微生物标本采集方法•微生物标本采集注意事项与操作规范•微生物标本运输、保存和处理流程目录•临床微生物实验室检测技术应用与进展•总结回顾与拓展思考01微生物标本采集意义与原则准确诊断指导治疗监测病情变化预防和控制感染通过采集微生物标本，可以对病原体进行准确鉴定和分类，为医生提供准确的诊断依据。
通过对微生物标本的连续检测，可以及时了解患者病情的变化情况，为医生调整治疗方案提供依据。
根据微生物标本的检测结果，医生可以选择针对性的治疗药物和方法，提高治疗效果。
通过对微生物标本的检测和分析，可以及时发现和控制感染源，防止感染的扩散和传播。
无菌操作正确选择采集部位采集足量标本及时送检01020304在采集微生物标本时，必须严格遵守无菌操作原则，避免污染标本和引入外源性微生物。
根据不同的病原体和感染类型，选择正确的采集部位，以提高标本的阳性率和准确性。
采集足够量的标本，以保证检测的准确性和可靠性。
采集后的微生物标本应及时送检，避免延误诊断和治疗。
血液标本通过静脉采血或末梢采血获得，用于检测血液中的病原体和抗体等。
尿液标本通过患者自行排尿或导尿获得，用于检测泌尿系统感染等。
粪便标本通过患者自行排便或灌肠获得，用于检测肠道感染和寄生虫病等。
呼吸道标本通过鼻咽拭子、喉拭子、痰液等获得，用于检测呼吸道感染和肺部感染等。
生殖道标本通过阴道分泌物、宫颈分泌物、前列腺液等获得，用于检测生殖道感染和性传播疾病等。
其他标本如脑脊液、穿刺液、组织活检等，用于检测相应部位的感染和病变情况。
微生物标本类型及来源02临床常见微生物标本采集方法血液及骨髓标本采集建议在患者寒战或发热初起时采集，同时在使用抗生素之前采集。
成人一般选择肘静脉，新生儿和婴儿选择颈静脉或股静脉。
成人一般采集8-10ml，儿童采集3-5ml，婴儿采集1-2ml。
严格无菌操作，避免污染，同时防止溶血。
采集时间采集部位采集量注意事项一般建议清晨第一次尿，即晨尿。
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下呼吸道标本采集方法
3
胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤 其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中， 可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。 4 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭 子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽，可喷出 肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还 可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。
血培养标本的运送
采集后的血培养瓶应在1小时之内送往
实验室。 血培养瓶在采血接种后在室温不超过 数小时。 血培养瓶在接种前和接种后均不得冷 藏或冷冻。
血培养假阳性的危害
1、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担
防止皮肤寄生菌或环境微生物污染
但由于标本的采集和运送常有护士或医
生或病人自己完成，所以也是最不容易 做好的事情，而且不知道问题所在之处 ，造成的后果是: 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。 4.采样后立即送检，最好在2h内。甚至床旁接种尤其是 厌氧培养，棉拭子标本宜用运送培养基，尽量不要以 棉花拭子收集样本。 5. 标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 6.送检标本应注明来源和检验目的 7.混有正常菌群的标本如痰、尿、伤口拭子，不可置肉 汤培养。 8.安全：标本收集时，注意安全防护；标本收集后，须 避免他人被感染。
咳痰标本不合格，退检吗？
如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，
白细胞小于10个，应不做或仅在特殊要求 时做培养。
如做培养，报告中注明“镜检结果表明标
本口咽分泌物污染明显”。
下呼吸道标本采集方法
1
自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道 深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于 无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可 采用雾化吸入45℃10％NaCL 水溶液，使痰 液易于排出。 2 支气管镜采集法：
临床标本的分类
带菌标本
痰 咽拭子 尿液 粪便 其他类别
无菌标本
血液 脑脊液 关节腔积液 胸腹水 其他类别
一、血培养操作规范
临床常见的采血指征
发热（38C）或低温（36C） 寒战 白细胞增多（计数大于 10109/L，特别有“核左
移” 未成熟的或杆状核的白细胞） 粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1000109/L） 血小板减少 皮肤粘膜出血 昏迷 ，休克 多器官衰竭 CRP/PCT升高
特别注意
尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内 或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致 错误的培养结果。 诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标 本就已足够，治疗48 ～ 72小时后再采集第二份标本。 对于症状不明显的病人，需采集2 ～ 3份标本。怀疑肾 结核时，应连续3天采集晨尿。
皮肤消毒程序，严格执行三步法:
1、用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上 2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点 向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿
刺皮肤2遍，待干燥。
3、75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒 液 ，待酒精挥发干燥后采血。
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31
二、泌尿标本采集的规范
尿液培养标本送检指征
1
有典型的尿路感染症状； 2 肉眼脓尿或血尿； 3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸 盐阳性； 4 不明原因的发热，无其他局部症状； 5 留置导尿管的病人出现发热； 6 膀胱排空功能受损； 7 泌尿系统疾病手术前。
您知道吗？
泌尿标本采集的规范
1、采集后的标本应立即送检。标本采集
后应立即送检，否则可暂存于4℃冰箱。 2、采集时间：多数药物从尿道排泄，所 以不管用哪种方法都应在用药前采集。 应采集早晨第一次的尿。 3、标本管不应含防腐剂和消毒剂。
泌尿标本采集的规范
4、采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的
外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然 后用清水冲洗。 5、长期留置导尿管的患者应在更换新管 时留取尿标本。 6、 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。
临床微生物样本采集规范
正确的采取、处理与运送本是临床微生物检 验成功与直接关系检验结果的基本关键。 如果标本采集不当，即使有经验的实 验室工作者及最好的仪器设备也难以弥补 在采集标本时引入的误差和错误。 标本采取与处理不符合要求，则微生 物培养的结果毫无意义。
标本采集和运送是 细菌培养成功的最最重要的关键
三、下呼吸道分泌物（痰培养） 标本采取规范
下呼吸道标本标本送检指征
1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或 红棕色胶胨样痰。 2 咯血：肺结核病人常痰中带血。 3 呼吸困难 4 发热 5 胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸 痛。 肺部感染的患者有25 ～ 50％可能发生菌血症， 应同时作血培养。
尿培养样本采集方法
标本采集应力争在未使用抗生素之前．注意 避免消毒剂污染标本
1 清洁中段尿中段尿（晨尿最佳）约10 ～ 20ml直 接排入专用的无菌容器中，立即送检，2h内接种。 2 耻骨上膀胱穿刺：评估膀胱内细菌感染的“金标 准”方法。 3 直接导尿：可减污染，准确反映膀胱感染情况。 4 留置导尿管收集尿液：穿刺导尿管吸取尿液，不 能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在 更换新尿管时留取尿标本。
我国痰细菌培养现状
结果重复性差 感染菌与污染菌不易区分 药敏结果与治疗反应存在差距
咳痰标本的采集
标本采集方法
– 医师或护士直视下采集标本 – 病人先漱口，去除表面的菌群 – 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液
临床上约半数咳痰标本不合格！
关于咳痰标本
在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1 ～ 2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 ; 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口 ; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导 ; 无痰可用3％ ～ 5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰；
分类中1 ～ 3类不做培养，要求重新留取标本：4、5 类为合格标本：6类为气管穿刺液，如未见到白细胞， 而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野，亦应重新留取标本。
痰培养的送检次数
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，
连续2 ～ 3天。不建议24h内多次采集，除非 痰液外观性状出现改变； ห้องสมุดไป่ตู้怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰 液送检； 怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送 检次数尚无定论。
标本的质量检查
于显微镜低倍镜下检查（10x10），观察WBC及扁平上 皮细胞存在情况，作为参考： 痰标本显微镜检查的分类
分类 (级 ) 6 5 4 3 2 1 细胞数/低倍镜视野 白细胞 扁平上皮细胞 <25 <25 >25 <10 >25 10-25 >25 >25 10-25 >25 <10 >25
正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养 最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有 大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌 又是尿路感染中常见的病源菌。因此要作 好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集 问题。
您知道吗？
尿液经尿道排出时会受到尿道内正常
菌群的污染,但定量培养时计数不会超 过103 CFU /m l, 泌尿系感染时定量 培养在104 ～ 105 CFU /m l 。 另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由 肠杆菌科细菌引起,而此类细菌的硝酸 盐还原实验为阳性,故可参考尿十项检 查中的硝酸盐还原实验来推断是否有 细菌感染。
培养瓶消毒程序
打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血 培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消 毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮 塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消 毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即 送检。
血培养的采血量
血培养中采集血液的量，是影响细菌或真菌血 症检测最重要的因素，特别是成年患者。 成人采集量5-10ml（推荐最好8-10ml），儿童 采血量1-3ml。婴幼儿患者，采血量不超过患 者总血量的1％。 Why?成人血液中每毫升的菌落形成单位(CFU) 很低，是检出率的相关因素, 因此增加送检血 液量可以提升检出率;而儿童的血液中每毫升的 菌落形成单位(CFU)是成人10-100倍，因此采 集血量少于成人。
特别注意
多次收集或24小时尿不能用作培养。 申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于 定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标 本。
室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因 此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏， 但也不能超过24小时。
特别注意
多数药物从尿道排泄,所以标本采集应 力争在未使用抗生素之前或停用抗菌药 5d之后留取尿液标本;尿液在膀胱内应停 留6 ～ 8h以上，使细菌有足够的时间繁 殖,故应尽量采集早晨第一次的尿,同时 注意避免消毒剂污染标本。
菌血症病人血中细菌浓度
成年病人: 链球菌心内膜炎 葡萄球菌心内膜炎 革兰氏阴性菌血症 organisms/ml 革兰氏阳性菌血症 幼儿病人: 革兰氏阴性菌血症 organisms/ml 75%幼儿菌血症病人血液有
1 to 30 organisms/ml 1 to 20 organisms/ml 少于 1 to 10
痰培养的运送和保存
所有病人的下呼吸道标本应在采集后立即送至
微生物室，并于1小时内接种 如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放 置时间不可超过24h。运输时勿置于冰块中 被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌 氧菌培养。 室温下放置>1h会降低肺炎链球菌、流感嗜血 杆菌的分离率而定植于上呼吸道的非致病菌则 会过度生长