穿心莲中穿心莲内酯的提取

穿心莲中穿心莲内酯的提取
摘要：从药用植物穿心莲中提取穿心莲内酯。

150克穿心莲粗粉甲醇回流提取，水沉去杂质，二氯甲烷脱酯,活性碳脱色，结晶得穿心莲内酯精品1.5克，收
率为1%，其含量为98.5%。

关键词：穿心莲；穿心莲内酯；提取工艺
Abstract：Withdraws the Andrographis Paniculta lactone from themedicinal plant Andrographis Paniculta．Uses the methyl alcoholbackflow to withdraw，the water sinks ，the methylenechloride escapes the ester，the activated carbon decolorizes，thecrystallization results in the Andrographis Paniculta lactonehigh-quality goods 1.5 grams，the returns-ratio is 1%, its content is98.5%．Key word：Common Andrographis Herb ，Andrographolide ，Extract method
1．前言
穿心莲为爵床科穿心莲属植物，药用叶或全草，秋初茎叶盛时采割，晒干。

在中药里归为凉性药物。

穿心莲在亚洲，几个世纪以前就用于治疗胃肠道和呼吸道感染、发热、疱疹、咽喉痛和各种细菌性感染。

在中医里，穿心莲是一种治疗感冒的重要草药，它用于退热、驱毒[1]。

穿心莲不仅能抑HIV-1，还能抑制HIV-1对细胞的毒性和在细胞间的传播，从多途径抑制HIV-1，因而能防止HIV-1抗药性突变的形成。

穿心莲价格低廉，且经过修饰的穿心莲内酯衍生物具有更强的抗HIV-1活性[2]。

因而穿心莲及其衍生物用于艾滋病的治疗具有广阔的前景。

由于穿心莲内酯是穿心莲的主要有效成分，穿心莲内酯的含量，与其产地、收期、部位和提取工艺有很大的关系。

与茎、果相比，穿心莲叶中含穿心莲内酯最高；穿心莲内酯为酯类结构，在水溶液中易水解、开环、异构化，故影响药物稳定性。

在对穿心莲内酯的稳定性研究中发现，在不同温度、不同pH值环境、不同的生物样品及不同有机溶剂中，穿心莲内酯稳定性都有较明显的差异。

温度越低，穿心莲内酯的稳定性越好；在碱性条件下不稳定，且随着碱性强度的增加，其不稳定性增强；在pH值为7的条件下，该药并不稳定，其最稳定的pH值为3～5；在酸性条件下，该药较稳定，但并非酸性越强，稳定性就越好。

目前已经发现穿心莲内酯具有以下药理作用：抗菌消炎、解热作用；抗癌和免疫调节作用；病毒和免疫增强作用；心血管作用；保护肝脏。

[3-7]
正由于穿心莲内酯具有这样广泛的药理作用，也使得人们对穿心莲内酯的提取工作发
生了强烈的兴趣和关注。

2．材料与方法
2．1 材料与仪器
干燥穿心莲全草购于都江堰某药店其余试剂为分析纯甲醇氯仿丙酮
RE-52型旋转蒸发(上海亚荣生化仪器厂) SHB-3型循环真空多用泵(郑州杜甫仪器厂) 电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗仪器厂) 硅胶薄层板(上海分析仪器厂) 分析天平(上海精科天平厂) 微量移液管(上海求精玻璃仪器厂) 毛细管（上海分析仪器厂）2．2 方法
有关穿心莲内酯提取分离的方法报道较多，有水提醇沉法、碱提乙醇重结晶法、水提大孔吸附树脂洗脱法等[8]。

现综合考虑操作的简易程度、成本高低以及环境保护、提取效率等因素，拟采用甲醇回流提取方法。

2．3具体操作步骤
2.3.1提取：
1000毫升烧瓶加入150克叶粉，再加入95%甲醇水液6倍（900毫升），水浴（72℃）加热回流提取两小时，过滤得滤液；第二次提取加入4倍液，回流两小时；第三次提取加入4倍液，回流提取1.5小时。

三次提取液分别为：650毫升，610毫升，610毫升。

合并三次提取液，备用。

2．3．2浓缩：
水浴（72℃），减压浓缩至稠膏状。

2．3．3水沉：
稠膏加入3倍原料体积的50%甲醇液（450毫升），回流半小时，静置12小时，过滤，除去叶绿素。

色素用少量50%甲醇洗涤一次，合并滤液和洗液。

2．3．4浓缩：
滤液减压浓缩（水浴72℃）至出现严重混浊时为此（原料与药液之比约为1比0.25即40毫升左右）。

放冷析出膏状物，倾出水液，得膏状物15克。

2．3．5脱酯：
膏状物加入3倍二氯甲烷（45毫升），一倍自来水，回流2小时（水浴65℃），静置到室温后，放出二氯甲烷，再加入2倍二氯甲烷（30毫升），搅拌20分钟，静置分层，分出二氯甲烷，再重复一次，分出二氯甲烷后，上层水液及不溶物加热（水浴60℃），赶尽二氯甲烷，放冷，过滤得穿心莲粗膏。

2．3．6脱色：
穿心莲粗膏加入30倍95%甲醇回流溶解，加入3克活性炭，加热回流一小时（水浴70℃），趁热真空抽滤，并用少量甲醇洗涤活性炭，合并滤液及洗液，水浴70度左右减压浓缩至有大量晶体析出为止，真空抽滤，并用少许甲醇洗涤晶体，抽干，70度以下烘干，得穿心莲粗晶2.6克。

2．3．7精制：
穿心莲粗晶2.6克，加入15倍95%以上浓度的甲醇（39毫升），加入1克活性炭，70度水浴回流半小时，趁热真空抽滤，并用少量甲醇洗涤活性炭，合并滤液及洗液，水浴70度左右减压浓缩至有大量晶体析出为止，真空抽滤，并用少许甲醇洗涤晶体，抽干，母液再浓缩一半，再结晶，抽干，70度以下烘干，得穿心莲精品1.5克。

2.4 鉴定
取本品2mg，加乙醇3ml，微温溶解，放冷，加1%3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液1ml，氢氧化钠试液2滴。

取本品10mg，加乙醇2ml溶解后，加乙醇制氢氧化钾试液2-3滴。

取本品加无水乙醇制成1ml中含4mg溶液,作为供试品溶液,另取对照品适量制成每1ml中含0.1mg的对照溶液。

用毛细管分别吸取上述两种溶液点于同一硅胶薄层板上,以氯仿-乙醇(20:2)为展开剂。

展开、凉干,置碘蒸气所中显色。

3.实验结果与分析
3.1提取结果与分析
实验结果如表1所示
原料(g) 浸膏量
(g)
穿心莲粗品
(g)
穿心莲精品
(g)
穿心内酯收率
(%)
150 14 2．6 1．5 1
张春滨等[9]用冷浸提取方法，所用的时间需要2-3天，穿心内酯的收率为0.7%。

用回流提取只需5.5小时，穿心莲内酯的收率为1%。

回流提取方法与冷浸时取方法相比，不仅提取时间短,而且收率也更高。

郭彬等[10]采用水回流提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，有效物质提取量较低，不适合穿心莲的提取。

葛发欢等[11]采用超临界CO2萃取技术，所得萃取物有效成分富集，稳定性好，穿心莲内酯收率高，但是设备投入较大，生产成本高。

与以上两种方法比较，甲醇回流提取方法工艺流程简单，所需设备要求不高，有机溶剂可以回收再次利用，成本较低，且穿心莲内酯收率较高，适用于工业化大生产。

3.2鉴定结果与分析
取本品2mg，加乙醇3ml，微温溶解，放冷，加1%3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液1ml，氢氧化钠试液2滴。

显紫红色。

取本品10mg，加乙醇2ml溶解后，加乙醇制氢氧化钾试液2-3滴.渐显红色。

取本品加无水乙醇制成1ml中含4mg溶液，作为供试品溶液，另取对照品适量制成每1ml中含0.1mg的对照溶液。

用毛细管分别吸上述两种溶液点于同一硅胶薄层板上,以氯仿-乙醇(20:2)为展开剂。

展开、凉干，置碘蒸气所中显色。

显色结果如图1所示，在与对照品相应的位置上显相同的颜色的斑点，未出现杂质斑点。

证明所提取的物质为穿心莲内酯。

图1
参考文献
[1] 中国药典[S].一部，2000.220
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[10] 郭彬，娄勇，蒋群等.穿心莲浸膏的提取工艺研究[J].安徽医药[J],2002,6(3):7-8.
[11] 葛发欢,等.超临界CO2流体萃取穿心莲有效成分时的正交试验研究{[J].中药材[J]，2002，25
（2）：69-71.。