项目十五氨基酸态氮的测定(精)
氨基酸态氮的测定
FSPTWPJY003 酱油 氨基酸态氮的测定 中和滴定法F_SP _TWP_JY _003酱油—氨基酸态氮的测定—中和滴定法1 范围本方法采用滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量。
本方法适用于各种类型酱油中氨基酸态氮含量的测定。
以g/100mL 报告其结果，测定值保留两位小数。
2 原理利用氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后定量，以酸度计测定终点。
3 试剂3.1 甲醛溶液，体积百分数为37~40。
3.2 氢氧化钠标准溶液，c (NaOH)＝0.1mol/L3.2.1 配制将氢氧化钠配成饱和溶液，注入塑料瓶（或桶）中，封闭放置至溶液清亮，使用前虹吸上层清液。
量取5mL 氢氧化钠饱和溶液，注入1000mL 不含二氧化碳的水中，混匀。
3.2.2 标定称取0.6g 于105～110℃烘至恒量的基准邻苯二甲酸氢钾，精确至0.0001g 。
溶于50mL 不含二氧化碳的水中，加入2滴酚酞指示剂溶液，以新制备的氢氧化钠标准溶液滴定至溶液呈微红色为其终点。
同时做空白试验。
3.2.3 计算按下式计算氢氧化钠标准溶液的浓度：C ＝2042.0)(1×−V V m 式中：C —氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L ；m —基准邻苯二甲酸氢钾的质量，g ；V —滴定时所消耗氢氧化钠溶液的体积，mL ；V 1 —空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积，mL ；0.2042—与1.00mL 氢氧化钠标准溶液[c (NaOH)=1.000mol/L]相当的，以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。
3.3 氢氧化钠标准滴定溶液，c (NaOH)＝0.05mol/L将配制的0.1mol/L 氢氧化钠标准溶液准确稀释一倍。
4 仪器4.1 分析天平，感量0.1mg 。
4.2 酸度计，附磁力搅拌器；4.3 碱式滴定管，25mL 。
5 操作步骤5.1 仪器校准按仪器使用说明书校正pH 计，并注意校正温度使其与测定时保持一致。
氨基酸总量(氨态氮)的测定(甲醛滴定法)
氨基酸总量(氨态氮)的测定（甲醛滴定法）一、单指示剂甲醛滴定法：(一)原理：氨基酸具有酸、碱两重性质，因为氨基酸含有-COOH 基显示酸性，又含有-NH2基显示碱性。
由于这二个基的相互作用，使氨基酸成为中性的内盐。
当加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失，破坏内盐的存在，就可用碱来滴定-COOH基，以间接方法测定氨基酸的量，反应式可能以下面三种形式存在。
（二）试剂(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
(三)操作步骤：称取一定量样品(约含20毫克左右的氨基酸)于烧杯中(如为固体加水50毫升)，加2-3滴指示剂，用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝色。
加入中性甲醛20毫升，摇匀，静置1分钟，此时蓝色应消失。
再用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝色。
记录两次滴定所消耗的碱液毫升数，用下述公式计算计算：氨基酸态氮(％)=( N V×0.014×100)/W式中：N：NaOH标准溶液当量浓渡。
V：NaOH标准溶液消耗的总量(m1)W：样品溶液相当样品重量(克)。
0.014：氮的毫克当量。
三、双指示剂甲醛滴定法：(一)原理：与单色法相同，只是在此法中使用了两种指示剂。
从分析结果看，双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂，不作介绍)相近单色滴定法稍偏低，主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作为麝香草酚酞的终点。
PH值在9.2，而双指示剂是以氨基酸溶液的PH值作为中性红的终点，PH值为7.0，从理论计算看，双色滴定法较为准确。
(二)试剂：(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
(4) 0.1%中性红(50%乙醇溶液)(三)操作步骤：取相同的两份样品，分别注入100毫升三角烧瓶中，一份加入中性红指示剂2-3滴，用0.100N NaOH溶液滴定终点(由红变琥珀色)，记录用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，摇匀，以0.100N NaOH准溶液滴定至淡蓝色。
实验三-酱油中氨基酸态氮含量的测定
实验三酱油中氨基酸态氮的测定一、实验原理氨基酸态氮是以氨基酸形式存在的氮元素的含量，是酱油的营养指标，也是酱油中含量的特征指标，含量越高酱油的鲜味越强，质量越好。
氨基酸态氮的测定是通过氨基酸羧基的酸度来测定样品中氨基酸态氮的含量。
而氨基酸含有羧基和氨基，在一般情况下呈中性，故需加入甲醛与氨基结合，固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后进行定量，用酸度计测定终点。
R－CH－COOH ＋HCHO= R－CH－COOHNH2NH－CH2OHR－CH－COOH R－CH－COONa＋NaOH= ＋H2ONH－CH2OH NH－CH2OH二、仪器与试剂1. 仪器酸度计、磁力搅拌器，碱式滴定管、100ml烧杯2. 试剂甲醛溶液（36%）、氢氧化钠标准溶液（0.05mol/L）三、实验步骤1. 准确吸取酱油5.0ml置于100ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀后吸取20.0ml 置于100ml烧杯中，加水60ml，插入酸度计，开动磁力搅拌器，用0.05mol/LNaOH 标准溶液滴定酸度计指示pH=8.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积（ml）（按总酸计算公式可以计算出酱油的总酸含量）。
2. 向上述溶液中准确加入甲醛溶液10.0ml，摇匀，继续用0.05mol/LNaOH 标准溶液滴定至pH=9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积（ml），供计算氨基酸态氮含量用。
3. 试剂空白试验：取蒸馏水80ml置于另一200ml洁净烧杯中，先用0.05mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定至pH=8.2（此时不计碱消耗量）。
再加入10.0ml甲醛溶液，继续用0.05mol/LNaOH标准溶液滴定酸度计指示pH=9.2，第二次所用的氢氧化钠标准溶液的体积为测定氨基酸态氮的试剂空白试验。
式中；V——测定用的样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；V0——试剂空白试验中加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；20——样品稀释液取用量，mL；c——氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L；0.014——1.00ml氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=1.000mol/L]相当于氮的质量(g)，g/mmol。
氨态氮测定
食品安全检验技术（理化部分） 食品安全检验技术（理化部分） 食品中氨基酸态氮的测定
2、电位滴定法 、
(1) 原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性， 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使 羧基显示出酸性， 羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入 被测液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据酸度计 被测液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定， 指示的pH值判断和控制滴定终点 值判断和控制滴定终点。 指示的 值判断和控制滴定终点。 (2) 试剂 酚酞乙醇指示液： ①酚酞乙醇指示液：1% 硼砂（标准物质）缓冲液： 称取3.8克 ②硼砂（标准物质）缓冲液：pH9.22 称取 克Na2B4O7 溶 解后，定容至1000mL 解后，定容至 中性甲醛溶液：２０% ③中性甲醛溶液：２０ 氢氧化钠标准溶液： ④氢氧化钠标准溶液：0.0500mol/Ｌ Ｌ
食品安全检验技术（理化部分） 食品安全检验技术（理化部分） 食品中氨基酸态氮的测定
加甲醛前耗 NaOH量/mL 量 1 样 品 滴 定 2 3 平均 1 空 白 滴 定 2 3 平均 加甲醛后耗 NaOH量/mL 量 NaOH标准液 标准液 浓度/mol.L-1 浓度
食品安全检验技术（理化部分） 食品安全检验技术（理化部分） 食品中氨基酸态氮的测定 ② 计算
X=
(V1 V2 ) × c × 0.014 ×100 20 m× 100
式中 X----氨基酸态氮的含量，g/100g; X----氨基酸态氮的含量 氨基酸态氮的含量，
V1----加入甲醛后滴定至终点耗 NaOH的体积，mL； 的体积， ； 加入甲醛后滴定至终点耗 的体积 V2----空白试验加甲醛后滴定至终点所耗 NaOH的体积，mL； 的体积， ； 空白试验加甲醛后滴定至终点所耗 的体积 c----氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L； 氢氧化钠标准溶液的浓度， 氢氧化钠标准溶液的浓度 ； m----测定用样品溶液相当于样品的质量，g ； 测定用样品溶液相当于样品的质量， 测定用样品溶液相当于样品的质量 0.014----氮的摩尔质量，g/mmol； 氮的摩尔质量， 氮的摩尔质量 ；
氨基态氮的测定
电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量一、原理根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极（或复合电极）插入被测液中构成电池，用碱液滴定，根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。
二、仪器与试剂1、仪器酸度计磁力搅拌器烧杯（250mL）微量滴定管2、试剂pH=6.18，9.18标准缓冲溶液36%中性甲醛溶液0.05mol/L的NaOH标准溶液三、测定操作1、吸取酱油5.00mL于100mL容量瓶中,加水定容。
吸取定容液20.00mL于250mL 烧杯中,加水60mL，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速适当。
用pH6.18的标准缓冲液校正好酸度计，然后将电极清洗干净，再插入到上述酱油液中，用NaOH标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗的NaOH溶液体积。
2、氨基酸的滴定在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.00mL的中性甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定至pH9.2,记下消耗的NaOH溶液体积。
3、空白滴定吸取80mL蒸馏水于250mL的烧杯中，用NaOH标准溶液滴定至pH8.2,然后加入10.00mL中性甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定至pH9.2,记下加入甲醛后消耗的NaOH溶液体积。
4、结果计算（ V1 - V2 ）* C * 0.014氨基酸态氮% = ———————————— *20*10020V1 --- 酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH标准溶液的体积mLV2 --- 空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH标准溶液的体积mLC --- NaOH标准溶液的浓度mol/L0.014 --- 氮的毫摩尔质量g/m mol。
氨基酸态氮的测定
氨基酸态氮的测定测定氨基酸态氮（Total Amino Nitrogen，TAN）是用来衡量溶液中氨基酸的氮量的常用指标，它主要用来检测和控制工业水体的性质以及底物、中和剂的浓度。
一、氨基酸态氮的作用1、评价溶液的性质氨基酸态氮（TAN）能够反映溶液中氨基酸的总氮量，从而能够用来判定溶液的性质。
TAN测试值能反映氨基酸在溶液中的浓度，从而可以更准确地了解氨基酸在溶液中的结构和性质，为进一步优化溶液的性质提供参考。
2、控制底物、中和剂的浓度氨基酸态氮的测定还可以用来控制底物和中和剂的浓度，这有助于工业水体的净化和修复。
TAN的测定结果能够提供有关底物和中和剂的信息，这些信息可以指导技术人员如何调节和控制底物和中和剂的浓度，从而达到良好的清洁度水平。
二、氨基酸态氮的测定1、样品准备要测定氨基酸态氮，首先要使用精确滴定量筒准备样品。
样品中氨基酸的浓度应大于1mg/50ml，并需要经过自由基四分法得到准确的样品浓度。
2、试剂配制对要进行TAN测定的溶液，可以使用0.02mol/L硫酸铵配制试剂，当然，这里也可以采用其他试剂，比如氢氟酸或者硝酸。
3、测试方法一般来说，TAN的测试可以采用两种方法，即固体高效液相色谱法（HPLC/GC）和氰化-分光光度法（CN-spectrophotometry）。
除此之外，还可以采用其他的测试方法，比如汞分析、离子色谱法等，并根据实际情况进行选择。
4、结果分析测定完氨基酸态氮后，根据测试结果来分析该溶液的性质，从而确定是否需要调整或者控制底物和中和剂的浓度。
处理过程中要确保参数保持稳定，以达到良好的结果。
三、总结氨基酸态氮（TAN）是用来衡量溶液中氨基酸的氮量的一个重要指标，它主要用来检测和控制工业水体的性质以及底物、中和剂的浓度。
在测定TAN时，需要正确地准备样品，及时准确地分析数据，以期达到良好的结果。
氨基酸态氮测定
+氨基酸态氮测定1 仪器a) 酸度计：附磁力搅拌器；b) 碱式滴定管：25mL；c) 移液管。
2 试剂a) 甲醛溶液：37％～40％；b) 0.05mol/L氢氧化钠标准滴定溶液：按GB/T 601规定的方法配制和标定，如下：氢氧化钠标准滴定溶液1）配制称取110 g氢氧化钠，溶于100 ml无二氧化碳的水中，摇匀，注人聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。
按表1的规定，用塑料管量取上层清液，用无二氧化碳的水稀释至1 000mL，摇匀。
表1氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c(NaOH)]/( mol/L) 氢氧化钠溶液的体积V/mL1 540. 5 270.1 5.42）标定按表2的规定称取于105℃--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾，加无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液(10 g/L)，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30 s。
同时做空白试验。
表 2氢氧化钠标准滴定溶液的工作基准试剂无二氧化碳水的体积V/mL浓度[c(NaOH)]/(mol/l.)邻苯二甲酸氢钾的质量，m/g1 7.5 800.5 3.6 800.1 0.75 50氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c(NaOH)]，数值以摩尔每升(mol/ L)表示，按式(1)计算: c(NaOH)=m×1 000/(V1-V2)M (1)式中 :m—邻苯二甲酸氢钾的质量的准确数值，单位为克(g);V1—氢氧化钠溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);V2-一空白试验氢氧化钠溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);M一邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)[M(KHC8H404)= 204.22 ]。
3 分析步骤吸取5.0mL样品，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL，置于200mL 烧杯中，加水60mL水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=0.05mol/L]滴定至酸度计指示pH＝8.2[记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）的毫升数，可计算总酸含量]。
04-02-004教学课件—发酵液氨基酸态氮测定(精)
6、调节呼吸系统功能
7、调节肾脏功能 8、调节造血功能 9、调节血脂
冬虫夏草的发酵生产 自然冬虫夏草分离纯化→ 试管斜面种→ 振荡器液体一级种 → 二级种→ 小型种子发酵种子罐→ 生产发酵罐 → 浓缩→ 喷粉干燥→ 成品菌粉。
氨基氮的测定在发酵过程中的意义 分析出菌体生长的情况及含氮化合物的合成情况; 控制适量的氮以保证代谢产物的和成; 发现氮元素含量减少，我们必须适当进行补氨操 作，以保 证菌体的正常生长; 在发酵的后期经检测 ,氮含量过高 ,及时进行放罐操作
氨基氮的测定方法 茚三酮比色法 ①原理: 茚三酮与氨基酸作用形成蓝色化合物,580nm波长下测定吸光 度。
甲醛滴定法 单指示剂 ： 氨基酸中的—NH2基的pK值常在9.0以上，不能用NaOH 标准溶液直接滴定。但可以用甲醛法测量。在pH中性和常 温条件下，甲醛迅速与氨基酸中α—氨基相互作用，使滴定 终点移至pH9.0左右，可以用酚酞作指示剂，以NaOH标准 溶液来滴定—NH3+基上的H+，每释放一个氢离子，就相当 有一个氨基氮。
操作步骤： 移取一定量(约含20毫克左右的氨基酸)样品溶液2份,分 别置于250毫升锥形瓶中,加水50毫升;其中一份加3滴中性红 指示剂，用0.100NNaOH溶液滴定至琥珀色为终点。另一份 加入中性甲醛10毫升及3滴百里酚酞指示剂，摇匀，静置1 分钟，(此时蓝色应消失)。再用0.100NNaOH溶液滴定至淡 蓝色。记录两次滴定所消耗的碱液毫升数
计算： 氨基酸态氮(％)=（(V1-V2)×N×0.014）×100/W 式中： N：NaOH标准溶液当量浓渡。
V1：测定样品消耗NaOH标准溶液的体积(ml)。
V2：测定空白消耗NaOH标准溶液的体积(ml)。 W：样品溶液相当样品的质量(克)。 0.014：氮的毫克当量。
项目十五 氨基酸态氮的测定
高。
子项目二 15 双指示剂甲醛滴定法测定氨基酸态氮
——味精
【学习目标】
1、掌握双指示剂甲醛滴定法测定氨基酸态氮技术。
原理
此法根据指示剂变色范围控制滴定终点 适合浅色样液的测定 双指示剂：百里酚酞+中性红
V1-用中性红指示剂滴定时消耗NaOH体积，mL V2-用百里酚酞指示剂滴定时消耗NaOH体积，mL M-样品质量，g
有效数字：
保留2位。
精密度：
在重复性条件下的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算 术平均值的10%
任务五：试验器具的清洗整理
【说明】
1、本法简单易行，在食品发酵中常用于测定发酵液中氨基 酸含量的变化，以此作为控制发酵生产的指标。
2、此法适合一般样品中的游离氨基酸含量的测定，如颜色 较深样品，可加适量的活性碳脱色后再测定，或用电位法进 行测定。
3、脯氨酸与甲醛作用时产生不稳定的化合物，使结果偏低。 4、酪氨酸含有酚酸基，滴定时也会消耗一部分碱而使结果
偏高。 5、溶液中若有铵存在时，也可以与甲醛反应，往往使结果
处理而直接测定。 由于本项目测定是酱油，故选用电位滴定法。
任务一：仪器及试剂的准备
仪器： 10ml碱式滴定管、5ml移液管、200mL烧杯、100mL容
量瓶、 100mL量筒、酸度计、磁力搅拌器、滴定台 试剂： 36%甲醛； 氢氧化钠标准溶液：0.050mol/L
任务二：样品预处理（稀释）
3.0-4.6
黄紫
溴甲酚绿
食品中氨基酸态氮的测定
食品安全国家标准食品中氨基酸态氮的测定1范围本标准规定了酱油㊁酱㊁黄豆酱中氨基酸态氮的测定方法㊂本标准第一法适用于以粮食和其副产品豆饼㊁麸皮等为原料酿造或配制的酱油,以粮食为原料酿造的酱类,以黄豆㊁小麦粉为原料酿造的豆酱类食品中氨基酸态氮的测定;第二法适用于以粮食和其副产品豆饼㊁麸皮等为原料酿造或配制的酱油中氨基酸态氮的测定㊂第一法酸度计法2原理利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,用氢氧化钠标准溶液滴定后定量,以酸度计测定终点㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的三级水㊂3.1试剂3.1.1甲醛(36%~38%):应不含有聚合物(没有沉淀且溶液不分层)㊂3.1.2氢氧化钠(N a O H)㊂3.1.3酚酞(C20H14O4)㊂3.1.4乙醇(C H3C H2O H)㊂3.1.5邻苯二甲酸氢钾(HO O C C6H4C O O H):基准物质㊂3.2试剂配制氢氧化钠标准滴定溶液[c(N a O H)=0.050m o l/L]:经国家认证并授予标准物质证书的标准滴定溶液或配制方法如下:a)酚酞指示液:称取酚酞1g,溶于95%的乙醇中,用95%乙醇稀释至100m L㊂b)氢氧化钠溶液[氢氧化钠标准滴定溶液c(N a O H)=0.05m o l/L]:称取110g氢氧化钠于250m L的烧杯中,加100m L的水,振摇使之溶解成饱和溶液,冷却后置于聚乙烯的塑料瓶中,密塞,放置数日,澄清后备用㊂取上层清液2.7m L,加适量新煮沸过的冷蒸馏水至1000m L,摇匀㊂c)氢氧化钠标准滴定溶液的标定:准确称取约0.36g在105ħ~110ħ干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾,加80m L新煮沸过的水,使之尽量溶解,加2滴酚酞指示液(10g/L),用氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色,30s不褪色㊂记下耗用氢氧化钠溶液毫升数㊂同时做空白试验㊂d ) 计算:氢氧化钠标准滴定溶液的浓度按式(1)计算:c =m (V 1-V 2)ˑ0.2042 (1)式中:c 氢氧化钠标准滴定溶液的实际浓度,单位为摩尔每升(m o l /L );m 基准邻苯二甲酸氢钾的质量,单位为克(g );V 1 氢氧化钠标准溶液的用量体积,单位为毫升(m L );V 2 空白实验中氢氧化钠标准溶液的用量体积,单位为毫升(m L );0.2042 与1.00m L 氢氧化钠标准滴定溶液[c (N a O H )=1.000m o l /L ]相当的基准邻苯二甲酸氢钾的质量,单位为克(g )㊂4 仪器和设备4.1 酸度计(附磁力搅拌器)㊂4.2 10m L 微量碱式滴定管㊂4.3 分析天平:感量0.1m g㊂5 分析步骤5.1 酱油试样称量5.0g 试样于50m L 的烧杯中,用水分数次洗入100m L 容量瓶中,加水至刻度,混匀后吸取20.0m L 置于200m L 烧杯中,加60m L 水,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液[c (N a O H )=0.050m o l /L ]滴定至酸度计指示p H 为8.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数,可计算总酸含量㊂加入10.0m L 甲醛溶液,混匀㊂再用氢氧化钠标准滴定溶液继续滴定至p H 为9.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数㊂同时取80m L 水,先用氢氧化钠标准溶液[c (N a O H )=0.050m o l /L ]调节至p H 为8.2,再加入10.0m L 甲醛溶液,用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至p H 为9.2,做试剂空白试验㊂5.2 酱及黄豆酱样品将酱或黄豆酱样品搅拌均匀后,放入研钵中,在10m i n 内迅速研磨至无肉眼可见颗粒,装入磨口瓶中备用㊂用已知重量的称量瓶称取搅拌均匀的样品5.0g ,用50m L80ħ左右的蒸馏水分数次洗入100m L 烧杯中,冷却后,转入100m L 容量瓶中,用少量水分次洗涤烧杯,洗液并入容量瓶中,并加水至刻度,混匀后过滤㊂吸取滤液10.0m L ,置于200m L 烧杯中,加60m L 水,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液[c (N a O H )=0.050m o l /L ]滴定至酸度计指示p H 为8.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数,可计算总酸含量㊂加入10.0m L 甲醛溶液,混匀㊂再用氢氧化钠标准滴定溶液继续滴定至p H 为9.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数㊂同时取80m L 水,先用氢氧化钠标准溶液[c (N a O H )=0.050m o l /L ]调节至p H 为8.2,再加入10.0m L 甲醛溶液,用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至p H 为9.2,做试剂空白试验㊂6 分析结果的表述试样中氨基酸态氮的含量按式(2)进行计算:X =(V 1-V 2)ˑc ˑ0.014m ˑV 3/V 4ˑ100 (2)式中:X 试样中氨基酸态氮的含量,单位为克每百克(g/100g);V1 测定用试样稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(m L); V2 试剂空白实验加入甲醛后消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(m L);c 氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(m o l/L);0.014 与1.00m L氢氧化钠标准滴定溶液[c(N a O H)=1.000m o l/L]相当的氮的质量,单位为克(g);m 称取试样的质量,单位为克(g);V3 试样稀释液的取用量,单位为毫升(m L);V4 试样稀释液的定容体积,单位为毫升(m L);100 单位换算系数㊂计算结果保留两位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂第二法比色法8原理在p H为4.8的乙酸钠-乙酸缓冲液中,氨基酸态氮与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酸-2,6-二甲基-1,4二氢化吡啶氨基酸衍生物㊂在波长400n m处测定吸光度,与标准系列比较定量㊂9试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的二级水㊂9.1试剂9.1.1乙酸(C H3C O O H)㊂9.1.2无水乙酸钠(C H3C O O N a)或乙酸钠(C H3C O O N a㊃3H2O)㊂9.1.3甲醇(C H3O H)㊂9.1.4乙酰丙酮(C5H8O2)㊂9.2试剂配制9.2.1乙酸溶液(1m o l/L):量取5.8m L冰乙酸,加水稀释至100m L㊂9.2.2乙酸钠溶液(1m o l/L):称取41g无水乙酸钠或68g乙酸钠(C H3C O O N a㊃3H2O),加水溶解后并稀释至500m L㊂9.2.3乙酸钠-乙酸缓冲液:量取60m L乙酸钠溶液(1m o l/L)与40m L乙酸溶液(1m o l/L)混合,该溶液p H为4.8㊂9.2.4显色剂:15m L37%甲醇与7.8m L乙酰丙酮混合,加水稀释至100m L,剧烈振摇混匀(室温下放置稳定3d)㊂。
蛋白质的测定—电位法测定氨基酸态氮含量
甲醛值法测定食品中氨基酸态氮
电位滴定法步骤
• 向烧杯中继续加入10mL36%甲醛， 混匀后用标准氢氧化钠溶液继续滴定 至pH为9.2，记录消耗氢氧化钠标准 溶液的体积。
甲醛值法测定食品中氨基酸态氮
• 原理：氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的-NH2基。它们相互作用而使氨 基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，-NH2基与甲醛结合，从而使其碱 性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定-COOH基，并用间接的方法测定 氨基酸的总量。
H RC
O C
HO R C C OH HCHO R CH COOH NaOH R CH COONa
H3N C
NH2
N(CH2OH)2
N(CH2OH)2
甲醛值法测定食品中氨基酸态氮
电位滴定法
试剂
①36%甲醛溶液 ② 0.050mol/L氢氧化钠标准溶液
仪器
酸度计 磁力搅拌器 10mL微量滴定管
甲醛值法测定食品中氨基酸态氮
电位滴定法步骤
• 吸取酱油5.00mL于100mL容量瓶中， 用蒸馏水稀释至刻度；
甲醛值法测定食品中氨基酸态氮
说明
1.氨基酸态氮是指以氨基酸形式 存在的氮元素的含量。对于酱油 来说，该指标越高，说明酱油中 氨基酸含量越高，酱油鲜味越好；
2.酱油中铵盐的存在会使氨基酸 态氮的测定结果偏高，因此如同 时测定铵盐可使结果更为准确。
总结
• 测定食品中氨基酸态 氮的意义；
• 甲醛值法测定食品中 氨基酸态氮的原理、 方法及注意事项。
课后思考
• 为什么要在pH8.2 时才加入甲醛？
氨基酸态氮---快速测定法
MM_FS_CNW_0001 调味品中－氨基酸态氮测定－Hantzsch 反应快速测定法
１适用范围 本方法适用于调味品中氨基酸态氮的测定。
２原理 利用 Ｈａｎｔｚｓｃｈ反应原理，用乙酰丙酮一甲醛混合溶液作为氨基酸的衍生试剂，测定调
析 固体试样：取 ５～１０ｇ，加水 ２０～５０ｍｌ，用组织捣碎机捣碎后移入 ５０ｍｌ或 １００ｍｌ量瓶内，
水洗至刻度，取上清液或滤纸过滤后测定。
网 ６操作步骤 吸取 １．０～２．０ｍｌ试样溶液或氨氮标准溶液（０～１００μｇＮＨ３－Ｎ）于 １０ｍｌ比色管内，加 ４．０ｍｌ缓冲液、４．０ｍｌ显色剂，水稀释至刻度，混匀。于 １００℃水浴中加热 １５ｍｉｎ，取出用冷 水冷却至室温，移入 １ｃｍ比色皿内，以试剂空白为参比，波长 ４００ｎｍ处测量吸光度。 ７结果计算
中 国 分 析 网
味品中氨基酸态氮的方法。
中 ３试剂 显色剂：１５ｍｌ３７％甲醛和 ７．８ｍｌ乙酰丙酮混合，加水至 １００ｍｌ，剧烈振摇混匀； 国 缓冲溶液：ｐＨ４．８，１ｍｏｌ／Ｌ乙酸钠与 １ｍｏｌ／Ｌ乙酸用 ｐＨ计调制混合；氨氮标准容液； ４仪器
光栅分光光度计；ｐＨ计。
分 ５试样的制备 液体样品（如酱油等）：直接取样或水适量稀释后取样；半固体样品（如面酱等）：称取 ５～ １０ｇ于 ５０ｍｌ或 １００ｍｌ量瓶内，水稀释至刻度，滤纸过滤后取滤液测定；
Ｘ＝ Ｗ×
Ｖ１ Ｖ
Ａ×ｍ
Hale Waihona Puke ×１００×１０００×１０００
式中：Ｘ 试样中 ＡＮ含量，％； Ａ 测得样品吸光度； Ｍ 测得氨氮标准曲线的斜率（本法的斜率值为 ８８．３４８）； Ｗ 取样量，ｍｌ或 ｇ； Ｖ 样品稀释总体积，ｍｌ； Ｖ１ 测定时取样体积，ｍｌ。
氨基酸态氮的测定
↓(0.05mmol/L)NaOH 滴定至PH=9.2，做空白试验
结果计算
氨基酸态氮 %
=
(V2 V1 ) * c * 0.014 m * 20 / 100 *100
式中： V1----试样稀释液加入甲醛后滴定至终点（PH9.2）消耗NaOH标准 溶液的体积，ml V2----空白试验加入甲醛后滴定至终点（PH9.2）消耗NaOH标准 溶液的体积，ml c----氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L m-----测定吸取的试样溶液相当于试样的质量 0.014----氮的毫摩尔质量，g/mmol
试剂
①40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂， 用氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色。 ②0.1%百里酚酞乙醇溶液 ③0.1%中性红50%乙醇溶液 ④0.1%mol/氢氧化钠标准溶液操作步骤
(1) 含氨基酸溶液20~30mg 250ml 滴定终点（红→ 琥珀色） ↓百里红酚酞3d (2) 含氨基酸溶液20~30mg ↓ 0.01mol/l NaOH标液 250ml 中性甲醛20ml 滴定终点（淡蓝色） 摇匀 ↓中性红指示剂 ↓ 0.01mol/l NaOH 2~3d
酸式滴定管：25 ml 胖肚吸量管：10 ml
试剂
酚酞乙醇指示液：1%
缓冲液：PH=6.18
中性甲醛：20%
氢氧化钠标准溶液：0.0500mol/l
操作步骤
(1)吸取氨基酸20 ml 100 ml (2)吸取A 20 ml ↓(0.05mmol/L)NaOH ↓H2O 刻度线 得到A
↓H2O 60 ml
0.014----氮的毫摩尔质量，g/mmol
电位滴定法
原理
根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固 定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸 度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测 液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定， 依据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终 点。
氨基酸态氮的测定国标
氨基酸态氮的测定国标
根据中国法律法规第9367号法规《氨基酸态氮的测定国家标准》，氨基酸态氮的测定应遵循以下标准：
1. 技术要求：
- 氨基酸态氮的测定方法应具有快速、精确、准确的特点，
并且能够对不同样品中的氨基酸态氮进行准确测定。
- 测定方法必须是经过验证并获得可靠结果的。
- 测定结果应以质量百分比或质量含量表示。
2. 仪器设备：
- 必须使用符合国家标准要求的氨基酸态氮测定仪器设备进
行测定。
- 仪器设备应通过国家质量监督检验机构的检验，并且获得
合格证明。
3. 样品准备：
- 样品准备应根据测定方法的要求进行，确保样品的质量和
纯度。
- 样品的保存和运输应符合相关法规要求，以确保样品不受
外界环境影响。
4. 测定方法：
- 测定方法应根据国家标准方法进行，确保测定结果的准确
性和可靠性。
- 测定方法应详细描述样品的准备、分析步骤、计量步骤等。
5. 结果计算和报告：
- 测定结果应根据国家标准方法计算，并以质量百分比或质量含量的形式报告。
- 报告中应标明测定方法的名称和编号，并附上实验数据和结果的原始记录。
以上是氨基酸态氮的测定国家标准的基本要求，具体细节和方法可参考相关国家标准文件进行查阅。
04-02-009例题-发酵液氨基酸态氮测定(精)
例题
问题
1.问题：氨基酸能不能直接采用酸碱滴定法测定？
2.问题：甲醛在氨基酸测定的作用？
3.问题：氨基酸态氮的测定结果与发酵过程的关系？
案例解析
1.答：
氨基酸不能直接采用酸碱滴定法测定。因为氨基酸中的氨基与羧基通常会内部键合，形成内盐，因此羧基无法暴露出来，进而可解离的氢离子很少，与碱发生反应的程度较低与羧基形成内盐，无法暴露羧基。那么加入甲醛，甲醛会与氨基相结合，将内盐键合打破，羧基释放出来，进而即可采用酸碱滴定法来滴定羧基。
3.答：
氮源太多容易导致菌体的大量生长，有些产物的和成收到了抑制，因此必须控制适量的氮以保证代谢产物的和成；在发酵过程中经检测如果发现氮元素含量减少，我们必须适当进行补氨操作，以保证菌体的正常生长；在发酵的后期经检测，如果氮含量过高意味着很有可能，菌体细胞发生了自溶破裂，细胞内的含氮物溶出
食品生物化学实验课件(共38单元)15 实验十五 氨基酸总量 (氨态氮) 的测定———甲醛滴定法
的 ｐＨ 作为中性红的终点， ｐＨ 大约为 ７.０， 故从理论计算
看， 双色滴定法较为准确。
三、 器材与试剂
１.器材
烧杯， 称量瓶， 电子天平， 锥形瓶， 胶头滴管， 量筒， 碱式滴定
管， 滴定台， 蝴蝶夹等。
三、 器材与试剂
２.试剂
邻苯二甲酸氢钾 （固体）， 酚酞指示剂， ４０％中性甲醛溶
液， １ｇ ／ Ｌ 百里酚酞 指示剂 （麝香草酚酞乙醇溶液）， ０.１
ｍｏｌ ／ Ｌ ＮａＯＨ 标准溶液， １ｇ ／ Ｌ 中性红溶液。
四、 实验内容
１.
０.１ｍｏｌ ／ Ｌ ＮａＯＨ 标准溶液的标定
用减量法准确称取在 １０５℃ 干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾
以固定氨基， 摇匀， 静置 １ｍｉｎ， 此时蓝色应消失。 再 用 ＮａＯＨ
标准溶液滴定至淡蓝色。 记录两次滴定所消耗的 ＮａＯＨ 标准溶液的体
积。
四、 实验内容
３.双指示剂甲醛滴定法
取相同的两份样品， 分别放于 １００ｍＬ 锥形瓶中， 其中一份加入
中性红指示 剂 ２～３ 滴， 用 ＮａＯＨ 标准溶液滴定至终点， 滴定终点
３ 份， 每份 ０.４～０.５ｇ， 分别置于 ２５０ｍＬ 锥形瓶中， 加
入新沸过的冷水 ５０ｍＬ 溶解。 然后加 ２ 滴酚酞指示剂， 用 Ｎａ
ＯＨ 标准溶液滴定至溶液刚好由无色变成粉红色， 并保持 ３０ｓ 不
退色为滴定终点。 记下所消耗 ＮａＯＨ 标准溶液的体积。 平行测定
三次， 根 据消耗的 ＮａＯＨ 标准溶液的体积， 计算 ＮａＯＨ 标准
氨基酸具有酸、 碱两重性质， 因为氨基酸含有羧基 （
—ＣＯＯＨ） 显酸性， 又含有氨基 （—ＮＨ ２ ） 显碱性
酱油的分析与检验：氨基酸态氮的测定
《酱油的分析与检验》--------氨基酸态氮的测定基本知识酱油是以蛋白质原料和淀粉原料为主，经微生物发酵酿制而成的调味品。
由于酿制过程中有多种微生物参与，经过复杂的生化反应和食品褐变作用，使酱油含有多种高级醇、酯、醛，酚和有机酸、谷氨酸等，形成酱油特有的香味、鲜味和色素，故酱油是一种色香味俱全，营养丰富的调味品。
前 言氨基酸态氮指的是以氨基酸形式存在的氮元素的含量。
它是酱油的营养指标、酿造酱油中大豆蛋白水解率高低的特征性指标、酱油的质量指标和酱油中氨基酸含量的特征指标。
氨基酸态氮含量越高酱油的鲜味越强，质量越好。
国家标准规定酱油中氨基酸态氮最低含量不得小于0.4 g /(100 mL)。
酱油中氨基肽的检测方法有两种：甲醛值法和比色法酱油中氨基酸肽氮的测定（甲醛值法）1实 验 原 理氨基酸具有酸性的羧基（-COOH）和碱基的氨基（-NH2）,加入甲醛与-NH2结合，可以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用NaOH标准溶液滴定后定量，以酸度计测定终点（PH=9.2）。
本法适合用于粮食及其副产品豆饼、麸皮为原料酿造的酱油。
酱油中的氨基酸态氮的测定反应式如下：RCH(NH2)COOH + HCHO→RCH(NCH2)COOH + H2O RCH(NCH2)COOH + NaOH→RCH(NCH2)COONa + H2O[37%~40%甲醛溶[0.05 mol,L.NaOH 标准溶液试剂仪器[酸度计[磁力搅拌器[移液管[25 mL碱式滴定管VS 23步骤及计算准确吸取酱油5.0mL,置于100ml.容量瓶中,加水至刻度，混匀后吸取20.0 mL，置于200 mL烧杯中，加60mI水，放人搅拌磁子，用蒸馏水清洗电极，并用吸水纸将水滴吸干，把电极插人试液中，开动磁力搅拌器。
用0.05 mol/L.NaOH 标准溶液滴定至酸度计指示pH=8.2,记下消耗NaOH 标准溶液体积V1。
123此处加人10.0ml甲醛溶液，混匀。
氨基酸态氮的测定-精PPT18页
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
谢谢！
Байду номын сангаас
氨基酸态氮的测定-精
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
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2、测定原理
氨基酸含有酸性的 -COOH和碱性的-NH2，它们相互作 用使氨基酸成为中性的内盐，不能直接用碱液滴定 它的羧基。当加入甲醛时，氨基与甲醛结合，其碱 性消失，使羧基显示出酸性，这样就可以用氢氧化 钠溶液滴定 -COOH ，并用间接法测定氨基酸的总量。
N~NaOH
3、电位滴定法原理
此法根据酸度计指示的PH值判断和控制滴定终点 适合有色样液的测定，对于混浊和色深样液可不经 处理而直接测定。
几种常用的酸碱指示剂及其变色范围
指示剂 变色范围（PH） 颜色 酸色 红 黄 红 红 红 红 黄 黄 黄 黄 无 无 碱色 黄 蓝 黄 黄 黄 橙黄 紫 蓝 蓝 红 红 蓝 浓度 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（90%）溶液 0.1%水溶液 0.1%或0.2%乙醇（60%）溶液 0.1%乙醇（50%）溶液 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（20%）溶液 0.1%乙醇（60%）溶液 0.1%乙醇（90%）溶液 用量/d/10ml 试液 1 到3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 到2
任务五：试验器具的清洗整理
【说明】
1、本法简单易行，在食品发酵中常用于测定发酵液中氨基 酸含量的变化，以此作为控制发酵生产的指标。 2、此法适合一般样品中的游离氨基酸含量的测定，如颜色 较深样品，可加适量的活性碳脱色后再测定，或用电位法进 行测定。 3、脯氨酸与甲醛作用时产生不稳定的化合物，使结果偏低。 4、酪氨酸含有酚酸基，滴定时也会消耗一部分碱而使结果 偏高。 5、溶液中若有铵存在时，也可以与甲醛反应，往往使结果 偏高
任务三：成分分析
1、中和样品中游离酸
→吸20ml稀释样品→200ml烧杯→＋水60ml→插入酸度计→开 磁力搅拌→0.05mol/L NaOH滴定→至pH＝.2→记录V（可计 算出总酸含量）
2、中和样品中氨基酸酸基
＋10ml甲醛→混匀→0.05mol/L NaOH滴定→至pH＝9.2→记录V 终
任务二：样品预处理
1、固体（溶解） 味精混匀→准确称量5g→1000ml容量瓶→取5ml（4 份）→250ml三角瓶 →各加50ml蒸馏水 2、液体 混合均匀→直接吸取
任务三：成分分析
→ ＋3d中性红指示剂→ 0.1mol/L NaOH滴定→颜色 由红色→琥珀色→记录V1 → ＋3d百里酚酞指示剂→＋20ml中性甲醛→静置 1min→ 0.1mol/L NaOH滴定→颜色由无色至淡蓝色 →记录V2
3、空白试验
80mL蒸馏水→200mL烧杯→ 0.05mol/L NaOH滴定→至pH＝ 8.2→+10.00mL甲醛→ 0.05mol/L NaOH滴定→至pH＝9.2→ 记录V空
任务四：数据记录与结果分析
项目名称
样品名称
检测日期
检验依据 加甲醛前 V初 V末 V V末 加甲醛后 V终 V1 氨基酸态氮含量X （g/100mL）
由于本项目测定是酱油，故选用电位滴定法。
任务一：仪器及试剂的准备
仪器：
10ml碱式滴定管、5ml移液管、200mL烧杯、100mL容
量瓶、 100mL量筒、酸度计、磁力搅拌器、滴定台
试剂：
36%甲醛；
氢氧化钠标准溶液：0.050mol/L
任务二：样品预处理（稀释）
准确移取5mL酱油溶液→100ml容量瓶→定容→混匀
百里酚蓝（第 一步离解）
百里酚蓝（第 二步离解） 甲基黄 甲基橙 甲基红 中性红 溴酚蓝 溴甲酚绿 溴百里酚蓝 酚红 酚酞 百里酚酞
1.2-2.8（第 一次变色）
8.0-9.6（第 二次变色） 2.9-4.0 3.1-4.4 4.4-6.2 6.8-8.0 3.0-4.6 3.8-5.4 6.0-7.6 6.4-8.2 8.2-10.0 9.4-10.6
任务一：仪器及试剂的准备
仪器： 25ml碱式滴定管、250mL三角瓶4个、50mL量筒、20mL吸量 管、滴定台
试剂： 36%中性甲醛溶液 1g/L百里酚酞乙醇溶液（9.4～10.6无～蓝） 1g/L中性红50%乙醇溶液（6.8～8.0由红色变为琥珀色） 0.1000mol/L的标准氢氧化钠标准溶液
项目十五 食品中氨基酸态氮的
测定
子项目一
14 电位滴定法测定氨基酸态氮——酱油
（GB/T 5009.39-2003 ）
《酱油卫生标准的分析方法》
【学习目标】
1、掌握电位滴定测定氨基酸态氮技术。 2、能够根据样品性质选正确的操作方法。
【基础知识】
1、测定意义
①氨基酸是某些发酵产品的质量指标，如酱油 ②氨基酸含量也是保健食品及酒类饮料中的质量指 标。
滴定次数
1 2 3 空白 CNaOH
氨基酸态氮平均值 （g/100mL） 精密度Cy
有效数字：
保留2位。
精密度：
在重复性条件下的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算 术平均值的10%
任务五：试验器具的清洗整理
【说明】
1、本法准确快速，可用于各类样品中游离氨基酸 含量的测定 2、对于混浊和色深的样液可不经处理而直接测定。
3、36%中性甲醛试剂应避光存放，不含有聚合物。
4、样品中如含有铵盐会使氨基酸态氮测定结果偏 高。
子项目二
15 双指示剂甲醛滴定法测定氨基酸态氮
——味精
【学习目标】
1、掌握双指示剂甲醛滴定法测定氨基酸态氮技术。
原理
此法根据指示剂变色范围控制滴定终点 适合浅色样液的测定 双指示剂：百里酚酞+中性红
(v2 v1 ) c 0.014 x 100 m
（g/100mL）
V1-用中性红指示剂滴定时消耗NaOH体积，mL V2-用百里酚酞指示剂滴定时消耗NaOH体积，mL M-样品质量，g
有效数字：
保留2位。
精密度：
在重复性条件下的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算 术平均值的10%
做2次平行
任务四：数据记录与结果分析
项目名称
样品名称 中性红耗NaOH体积 V1/mL V初 V末 V1
检测日期
检验依据 百里酚酞耗NaOH 体积V2/mL V初 V末 V2
滴定次数 1
2 CNaOH
氨基酸态氮含量X （g/100mL）
mol/L
样品质量m/g 氨基酸态氮平均值 （g/100mL） 精密度