细菌代谢产物的检测及鉴定(精选)
简述细菌代谢产物检查的意义
简述细菌代谢产物检查的意义细菌代谢产物检查是一种常见的实验室检测方法,通过检测细菌在代谢过程中产生的化合物,可以了解细菌的生长状态、代谢途径以及其对环境的适应能力。
这些信息对于研究细菌的生物学特性、疾病的诊断和治疗以及环境污染的评估都具有重要意义。
细菌代谢产物检查可以帮助研究者了解细菌的生长状态和代谢途径。
细菌在不同的环境条件下,可能通过不同的代谢途径来获得能量和营养物质。
通过检测细菌代谢产物,可以确定细菌是通过有氧呼吸、厌氧发酵还是其他代谢途径来进行能量代谢。
此外,细菌代谢产物的种类和浓度也可以反映细菌的生长状态,如细菌的生长速率、营养状态和代谢活性等。
这些信息对于理解细菌的生物学特性和研究细菌的生长机制具有重要意义。
细菌代谢产物检查在疾病的诊断和治疗中也具有重要作用。
细菌感染是引起许多疾病的重要原因,包括细菌性肺炎、尿路感染等。
通过检测患者体液中的细菌代谢产物,可以确定感染的细菌种类和数量,从而指导临床医生选择合适的抗生素治疗。
此外,一些细菌代谢产物在感染过程中会引起炎症反应,通过检测这些炎症标志物,可以评估疾病的严重程度和预后,指导医生制定合理的治疗方案。
细菌代谢产物检查还可以用于环境污染的评估。
细菌在环境中的存在和代谢活动是环境污染的重要指标之一。
通过检测环境样品中的细菌代谢产物,可以评估环境中细菌的种类和数量,进而了解环境的卫生状况。
细菌代谢产物检查在科学研究、医学诊断和环境评估中具有广泛应用和重要意义。
通过检测细菌代谢产物,可以了解细菌的生长状态、代谢途径和对环境的适应能力,从而推动细菌生物学、医学和环境科学的发展。
因此,细菌代谢产物检查是一项非常有意义的实验室检测方法。
代谢产物鉴定
代谢产物鉴定简介代谢产物鉴定是一种通过分析生物体内的代谢产物来了解其代谢过程、生理状态以及疾病发展的方法。
代谢产物是指在生物体内由于代谢过程而形成的化合物,包括有机酸、氨基酸、糖类、脂类等。
通过对这些代谢产物的定性和定量分析,可以揭示生物体内不同代谢途径的活性,识别新的生理指标和疾病标志物,并为药物开发和临床诊断提供依据。
代谢产物分析技术液相色谱-质谱联用(LC-MS)液相色谱-质谱联用是目前最常用的代谢产物分析技术之一。
它将液相色谱与质谱技术相结合,能够实现对复杂样品中各种化合物的高灵敏度、高选择性的检测和定量。
在LC-MS分析中,样品首先通过液相色谱柱进行分离,然后进入质谱仪进行离子化和质量筛选。
最终通过检测离子信号来确定代谢产物的种类和含量。
气相色谱-质谱联用(GC-MS)气相色谱-质谱联用是另一种常用的代谢产物分析技术。
它将气相色谱与质谱技术相结合,适用于挥发性或半挥发性的化合物分析。
在GC-MS分析中,样品首先通过气相色谱柱进行分离,然后进入质谱仪进行离子化和质量筛选。
最终通过检测离子信号来确定代谢产物的种类和含量。
核磁共振(NMR)核磁共振是一种非侵入性的代谢产物分析技术,能够提供关于代谢产物结构和组成的详细信息。
在NMR分析中,样品置于强磁场中,通过给样品施加特定频率的射频脉冲,并测量样品响应的信号。
不同化合物具有不同的核磁共振信号,通过对这些信号进行解析可以确定代谢产物的种类和含量。
代谢产物鉴定在生命科学中的应用1. 代谢途径研究通过对代谢产物的分析,可以了解不同代谢途径的活性和互动关系。
例如,在脂类代谢研究中,通过分析脂肪酸代谢产物的种类和含量,可以揭示脂肪酸合成和降解途径的活性水平,为肥胖症等相关疾病的治疗提供依据。
2. 疾病标志物筛选许多疾病会导致特定代谢途径的异常。
通过对患者体液或组织中代谢产物的分析,可以发现与特定疾病相关的标志物。
例如,乳酸在肿瘤患者尿液中的含量增加可能是乳酸酸中毒的标志,而丙氨酸在血液中的含量减少可能与红细胞生成障碍有关。
混合菌代谢产物中有机酸的鉴测分析
SPW 0.20
RT [min] 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 1.1 1.2
实验内容
一.酯层提取方法的确定 二.混合菌代谢物预处理方法的选择 三.气相色谱检测条件的确定 四.标准溶液溶剂的选择 五.外标曲线的绘制 六.确定预处理过程的最优反应时间 七.确定甲酯化程度 八.确定有机酸的浓度
实验过程概述
混合菌代谢物的甲酯化 确定最优检测条件
绘制外标曲线 实现定量分析
混合菌代谢物离心后,定量上清液加入到一 个洁净干燥的试管中,加入适量的甲醇和催 化剂。用橡皮塞塞紧试管口。在适宜温度下 反应一定时间,反应完成经正己烷萃取后进 行气相色谱分析。 改变柱温,升温速率确定最优检测条件。 绘制外标曲线时以正己烷为溶剂,采用梯 度稀释法配制出一系列不同浓度的标准液。 外标曲线方程给出了浓度与气相色谱峰面 积之间的关系,已知峰面积后就可以计算出 混合菌代谢物中有机酸的浓度。
最优检测条件为:起始温度:50 ℃; 终止温度:180 ℃ 升温速率:10℃/min
四、标准溶液溶剂的选择
序号
1 2 3
溶剂种类
甲醇 正己烷 异辛烷
停留时间/min
0.76 0.76 0.72
标准溶液溶剂为:正己烷
五、外标法确定有机酸甲酯的浓度
20000 18000
5000
4000
16000 14000
八、确定有机酸的浓度
最终确定在最优甲酯化条件和最优检测条件下测 得混合菌代谢物中丙酸的浓度为5.728g/L。
实验结论
在预处理阶段最优甲酯化方法为: 1%硫酸-甲醇 甲酯化法;最优反应时间为:0.5h。 气相色谱检测时最优检测条件为:柱箱初始温度: 50℃;初始时间:1min;柱箱终止温度:180℃; 终止时间:1min;升温速率:10℃/min;汽化室温 度:280℃;进样室温度:260℃;
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是一类微小而广泛存在于自然界中的生物体,它们在地球上的生物圈中起着重要的作用。
通过对细菌的生化实验,我们可以更深入地了解它们的生物特性和功能。
本文将介绍一系列细菌的生化实验,包括细菌的酶活性、代谢产物以及对环境的影响等方面。
实验一:酶活性研究酶是细菌体内的重要生物催化剂,它们参与了多种代谢过程。
我们可以通过测定细菌体内特定酶的活性来了解其代谢能力。
以大肠杆菌为例,我们可以使用酶活性检测试剂盒来测定其β-半乳糖苷酶活性。
实验结果显示,大肠杆菌中β-半乳糖苷酶活性较高,这表明其在代谢乳糖方面具有较强的能力。
实验二:代谢产物分析细菌的代谢过程会产生各种化合物,这些化合物可以作为细菌代谢的指标。
我们可以通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)来分析细菌培养液中的代谢产物。
以枯草杆菌为例,通过GC-MS分析,我们发现其培养液中存在着丰富的有机酸和氨基酸,这些代谢产物反映了枯草杆菌的代谢途径和能力。
实验三:抗生素敏感性测试细菌对抗生素的敏感性是临床治疗中的重要指标。
我们可以通过纸片扩散法来测试不同细菌株对不同抗生素的敏感性。
实验结果显示,金黄色葡萄球菌对青霉素敏感,而对庆大霉素耐药。
这些结果对于合理使用抗生素和治疗细菌感染具有重要的指导意义。
实验四:细菌对环境的影响细菌在自然界中广泛存在,它们对环境有着重要的影响。
我们可以通过测定细菌在不同环境条件下的生长情况来研究其对环境的适应性。
以耐盐菌为例,我们可以将其分别培养在不同盐浓度的培养基中,观察其生长情况。
实验结果显示,耐盐菌在高盐浓度环境中生长较好,这表明其对高盐环境具有较强的适应能力。
细菌的生化实验为我们深入了解细菌的生物特性和功能提供了重要的手段。
通过研究细菌的酶活性、代谢产物以及对环境的影响,我们可以更好地理解细菌的代谢途径、生态角色以及与人类健康的关系。
这些实验结果对于开发新的抗菌药物、改良环境治理策略以及预防细菌感染具有重要的指导意义。
简述:代谢产物检测项目及应用
代谢产物检测项目及应用---青岛科标生物实验室代谢产物指新陈代谢中的中间代谢产物(intermediate metabolite)和最终代谢产物(final metabolite)。
农药代谢产物检测:除了农药本身以外,它的代谢产物也会出现残留毒性问题,代谢物的形成都明显提高了农药的急性毒性或慢性毒性,除了要进行农药母体化合物的残留测定外,还要对其主要的代谢产物,特别是毒性有提高的化合物进行残留测定。
细菌代谢产物检测:各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。
用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。
利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。
微生物代谢产物检测:微生物在代谢过程中,会产生多种多样的代谢产物,分为初级代谢产物和次级代谢产物两类。
初级代谢产物是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质,如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。
次级代谢产物,大多是分子结构比较复杂的化合物。
根据其作用,可将其分为抗生素,激素,生物碱,毒素等类型。
检测范围◆农药代谢产物检测◆细菌代谢产物检测◆微生物代谢产物检测等检测方法一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验2.葡萄糖代谢类型鉴别试验3.甲基红(MR)试验4.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)5.VP试验6.胆汁七叶苷水解试验7.淀粉水解试验8.甘油复红试验9.葡萄糖酸氧化试验二、氨基酸和蛋白质的代谢试验1.硫化氢试验2.明胶液化试验3.吲哚试验(靛基质试验)4.苯丙氨酸脱氨酶试验5.氨基酸脱羧酶试验6.精氨酸双水解酶试验7.尿素酶试验8.霍乱红试验三、碳源和氮源利用试验1.枸橼酸盐利用试验2.丙二酸盐利用试验3.醋酸钠利用试验4.马尿酸钠水解试验5、乙酰胺利用试验四、酶类试验1.氧化酶试验2.触酶试验3.凝固酶试验4.DNA酶试验5.胆汁溶菌试验6.硝酸盐还原试验7.卵磷脂酶试验8.磷酸酶试验9.脂酶试验10.CAMP试验11.石蕊牛乳试验。
细胞代谢产物的检测和分析技术
细胞代谢产物的检测和分析技术细胞是生命的基本单位,在其内部进行着多种复杂的代谢反应。
这些代谢过程会产生大量的代谢产物,而这些产物的检测和分析技术对于生物医学、药物研发、环境监测等领域都有着极为重要的意义。
一、代谢产物的检测方法现有的代谢产物检测方法主要包括生物学方法和化学分析方法两种。
1.生物学方法生物学方法是指利用特定的生物体系,通过测量生物体系内相关物质或产物的含量或活性来检测目标代谢产物的方法。
代表性的生物学方法有酶促荧光法(Enzyme-Coupled Fluorescence Assay,ECFA)、酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)以及放射性同位素标记物测定法(Radioisotope Assay,RIA)等。
酶促荧光法是利用酶促反应产生荧光信号来检测物质的存在或活性。
这种方法通常需要在测定前对生物样本进行前处理和样品提取。
ELISA以酶的特异性作用来检测生物样本中的化合物,该方法具有定量简单、通用性强、精度高等优势。
但是ELISA对检测物的结构有一定要求,无法对未知代谢物进行检测。
RIA是指通过测定放射性标记物的存在量来确定生物样本中的化合物含量,该技术对物质的浓度响应曲线通常呈对数线性趋势,具有灵敏度高、特异性强等优势。
2.化学分析方法化学分析方法使用化学试剂或仪器设备对生物样品进行分析,主要包括色谱法(Chromatography)、质谱法( Mass Spectrometry)等。
液相色谱与气相色谱是常用的色谱法,可以对生物样品中的各种成分进行分离和检测。
其中质谱联用技术更是色谱法的重要进展之一,它可以通过对分离出的化合物进行分子量和构造分析,从而对相对分子量较大的化合物进行更加准确的分析。
质谱技术则是现代化学分析中最常用的技术之一,根据检测结果可得到物质的组成、结构、分子量等信息。
例如高分辨质谱(High-Resolution Mass Spectrometry,HRMS)可以通过测定大分子化合物的质谱谱图、质量缺损或化学平移谱,来确定其组成和结构等信息。
细菌生化反应鉴定及其它试验操作规程
细菌生化反应鉴定及其它试验操作规程细菌生化反应鉴定及其它试验操作规程1、氧化-发酵试验(O-F试验)原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型。
可以进行无氧降解的,称为发酵型(发酵型细菌在有氧无氧的条件下均能分解葡萄糖)。
不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。
方法:将待检细菌同时穿刺接种两支Hugh-Leifson培养基,其中一支培养基滴加无菌石蜡(或其它矿物油),高度不少于lcm。
35℃,24小时或更长。
结果:培养基变黄表示细菌分解葡萄糖产酸,两支培养基均无变化为产碱型或不分解糖型;两支培养基均均产酸为发酵型。
若仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。
应用:主要用于肠杆菌科细菌与非发酵细菌的鉴别,前者均为发酵型,而后者均为氧化型或产碱型。
也可用于葡萄球菌与微球菌问的鉴别。
2、β-半乳糖苷酶(ONPG)试验原理:细菌产生半乳糖苷酶,分解邻-硝基酚β-D-半乳糖苷(无色)生成邻-硝基酚(黄色)。
结果:菌悬液呈现黄色为阳性反应,一般在20-30分钟内显色。
应用:主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。
3、七叶苷水解试验原理:有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素,七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子反应,生成黑色的化合物。
结果:培养基变黑为阳性,不变色为阴性。
应用:主要用于D群链球菌与其它链球菌的鉴别。
前者为阳性,后者为阴性。
也可用于革兰阴性菌与厌氧菌的鉴别。
4.甲基红试验原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基pH值降至4.5以下,加入甲基红呈现红色为阳性。
若细菌分解葡萄糖产生的酸少,或产生的酸进一步转化为其他产物,则培养基pH值仍在6.2以上,加入甲基红呈现黄色为阴性。
结果:呈现红色为阳性,橘红色为弱阳性。
黄色为阴性。
应用:主要用于鉴别大肠杆菌与产气杆菌,前者阳性,后者阴性。
此外肠杆菌科中变形杆菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属和志贺菌属等阳性,而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性。
生物体内代谢产物的检测与分析
生物体内代谢产物的检测与分析代谢是指生物体内发生的化学反应,包括能量代谢和物质代谢两个方面。
代谢产物是代谢过程中生成的化合物,必须及时排除,否则会对健康造成影响。
因此,检测和分析生物体内代谢产物对于疾病预防和治疗具有重要意义。
一、代谢产物来源生物体内的代谢产物来自多个渠道,如食物、空气、水、药物等。
例如,糖尿病患者代谢产物中的葡萄糖和血糖水平异常;酒精中毒患者生物体内代谢产物中的乙醇含量升高;肿瘤患者代谢产物中的乳酸水平升高等。
二、代谢产物检测方法1.生化分析法生化分析法是将代谢产物转化为可观测的化学反应,然后通过化学分析方法确定其浓度。
例如,血糖水平可通过葡萄糖氧化反应产生的H2O2量来检测。
由于生化分析法需要一些先进的设备和实验条件,因此应用范围有限。
2.光学检测法光学检测法是利用不同代谢产物的特定吸收谱线进行检测,包括红外光学和紫外光学等方法。
例如,血红蛋白的氧合度可通过不同波长的红外光谱线来测定。
虽然光学检测法具有高灵敏度和准确性,但限于设备和检测条件,其适用范围也有限。
3.质谱分析法质谱分析法将生物体内代谢产物降解成单一分子,利用质量谱仪检测产物的分子量和结构等特性。
例如,质谱分析法可用于检测生物样品中的蛋白质、核酸和小分子等物质。
质谱分析法有很高的分辨率和灵敏度,广泛应用于代谢产物的检测和定量。
4.电化分析法电化分析法是利用电化学原理对代谢产物进行检测。
例如,某些生物分子能在电极表面发生氧化还原反应,可使用电化学传感器将其检测。
电化分析法成本低廉、易于实现,适用于大规模的代谢产物检测任务。
三、代谢产物分析应用代谢产物分析在许多领域都有广泛的应用。
例如,临床医学中可通过检测代谢产物来诊断各种疾病,如糖尿病、肾脏疾病、肿瘤等。
此外,代谢产物分析也可用于农业和环境保护等领域。
四、未来展望随着科学技术的不断发展,代谢产物检测和分析方法也在不断更新和进化。
例如,近年来通过人工智能和机器学习等技术,可自动识别和分析海量的代谢产物数据,提高分析效果和精度。
生物体内代谢产物的检测与分析研究
生物体内代谢产物的检测与分析研究随着科学技术的不断发展,生物化学研究也进入了一个新的阶段。
在疾病的早期诊断和治疗方面,生物体内代谢产物检测和分析愈发重要。
这些代谢产物可以帮助我们更好地研究生物体的生命周期、疾病的发生和发展以及治疗过程的效果。
1. 代谢产物是什么代谢产物是指生物体内代谢产生的物质,按照其作用和形成途径分类可分为有机酸、氨基酸和酮体等多个种类。
它们是生物体的代谢副产物,通过检测这些代谢产物的变化,可以了解生物体的代谢状态。
2. 代谢产物检测的重要性代谢产物检测可以帮助我们更好地了解生物体的生命活动,为疾病早期诊断和治疗提供依据。
例如,人类体内的甲状腺素代谢产物可以作为甲状腺功能的指标,通过检测血中甲状腺素代谢产物的浓度变化,可以判断甲状腺功能是否正常。
此外,代谢产物检测还可以帮助人们更好地了解疾病的发生和发展。
例如,肝癌病人体内的肝酪氨酸代谢产物在肝硬化晚期时会出现明显的变化,代谢产物的检测可以帮助医生更早地发现肝癌的风险。
3. 代谢产物检测的方法目前代谢产物检测的方法包括基于质谱分析和核磁共振检测两种。
质谱分析是最常用的代谢产物检测方法之一。
通过质谱分析可以得到代谢产物的分子质量,进而计算出代谢产物的化学式。
这种方法可以检测出很多分子的代谢物,但其最大的问题是不同的代谢物含量不同,需要先进行前处理。
核磁共振检测是一种非侵入性方法,可以在不破坏样品的条件下进行检测。
它可以测出代谢物的结构,而不仅仅是分子质量。
由于它无需任何前处理步骤,因此对于高通量代谢物研究会更有优势。
4. 代谢产物检测的研究进展目前,代谢产物检测已成为生物医学研究领域的热点之一。
顶尖的研究机构和医院都在投入大量的人力和物力研究代谢产物的检测。
例如,英国爱丁堡大学在研究代谢产物的检测技术方面取得了一系列突破。
他们建立了一个名为“METLIN”的代谢产物数据库,用于存储和分享代谢产物数据;同时他们也研究了一种名为“分子图谱”的新型分析技术,可以帮助拓展代谢产物检测的能力。
生物体内代谢产物检测与诊断技术
生物体内代谢产物检测与诊断技术生命体系是由分子、细胞和组织协同作用而成。
其中,代谢产物就是一个连接着分子、细胞和组织之间的纽带。
代谢产物的研究在生命科学中是一个古老而重要的领域。
代谢产物的高通量检测和分析技术,是当前生物医学研究中的热点领域之一。
生物体内代谢产物的高通量检测技术不仅可以加深对人类健康问题的认识,还可以为未来精准医疗提供有效的技术支持。
本文将探讨当前生物体内代谢产物检测与诊断技术的现状和前景。
一、背景人体是一个充满各种分子的复杂开放系统,这些分子通过代谢来维持着组织的正常生理功能。
其中代谢产物是一种非常重要的分子类型,它们的质量和数量等参数对人体健康有着重要的影响。
因此,代谢产物的高通量检测和分析技术是目前生物医学研究中非常重要的领域之一,被广泛应用于生物样本的分类、预测和诊断等领域。
二、代谢组学技术代谢组学是指对大量代谢产物进行研究,并考虑它们在基因和蛋白质水平下的相互关系,以便更好地理解生命系统的功能和异常情况。
代谢组学可以像遗传学和蛋白质组学一样应用多种技术方法,如气质谱仪(GC-MS)和液质谱仪(LC-MS)技术等。
代谢组学技术通过大量高通量的代谢产物检测和分析,使研究者们能够生成代谢组数据矩阵,从而对数据进行分析和解释。
这些分析和解释可以用于了解代谢通路、动态变化和生物标志物等指标,同时也可以揭示新的生物通路和代谢产物。
代谢组学技术的不断发展和进步为健康科学的深入研究提供了强有力的支持,有助于开拓新的治疗和预防方法。
三、代谢组实验的样本代谢组学实验所涉及的样本种类非常多,包括体液样本、组织样本、细胞样本和小分子样本等。
其中,体液样本和组织样本是最常用的,但是样本的不同状态对代谢组学实验的结果和解释也产生了较大的影响。
例如,针对代谢组实验中样本的预处理和分析方法在临床应用中的不同,可以发现这些方法还需要进行更加优化和完善。
四、单细胞代谢组学技术单细胞代谢组学是代谢组学领域中较新的研究方向,起始于单细胞RNA测序技术的开创。
实验细菌的代谢产物
(二) IMViC试验
原理: IMViC试验是一组用于肠杆菌科细菌鉴别的实 验,由靛基质试验、甲基红试验、VP试验和枸橼酸 盐利用试验组成。
靛基质试验:大肠杆菌阳性;变形杆菌阳性;痢疾杆 菌阴性、沙门菌阴性;
甲基红试验:四种肠道杆菌均为阳性; VP试验:除变形杆菌部分菌株阳性外,其余均为阴性; 枸橼酸盐利用试验:大肠杆菌和痢疾杆菌阴性,变形
[结果]
SS或EMB培养基生长现象观察
EMB菌落 的形态特征
SS菌落的 形态特征
大肠杆菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌 变形杆菌
[结果]
克氏双糖铁培养基
生化反应管
动
力
葡萄糖 乳糖 硫化氢 尿素 H2S 葡萄糖 乳糖
大肠杆菌
伤寒杆菌
痢疾杆菌
变形杆菌
(七)细菌的色素产生试验
1、菌种:金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、 柠檬色葡萄球菌培养物;铜绿假单胞菌 培养物;
实验九 细菌的代谢产物
实验目的要求
1、掌握细菌糖发酵试验、IMViC试验、硫 化氢试验、尿素分解试验的原理、结果判 断及医学意义;
2、熟悉上述试验的操作方法。
实验主要内容:
一、糖发酵试验 二、IMViC试验 三、硫化氢试验 四、尿素分解试验 五、细菌的色素产生 六、其他
[材料]
选择/鉴别培基
克氏双糖铁培养基, 动力-靛基质-尿素 半固体琼脂培养基
血清学鉴定
生化反应
玻片凝 集试验
一、分离培养
(一)SS琼脂平板
(1)营养物质:牛肉膏、蛋白胨
(2)抑制剂:胆盐、枸椽酸盐、煌绿等,抑制非致 病菌的生长;但胆盐能同时促进病原菌的生长。
(3)鉴别用糖:乳糖
(4)指示剂:中性红
实验二细菌培养与代谢产物检查[整理]
实验二细菌培养与代谢产物检查【目的】①学习并初步掌握基础培养基制备方法。
②了解细菌生长繁殖所需要营养以及常用培养基的种类和用途。
③了解细菌所具有的不同生化反应及代谢产物,以利细菌的鉴定和鉴别。
④规范地进行无菌操作。
一、基础培养基的制备(一)培养基的制作程序培养基制作的一般程序:准确称量培养基的各种成分→混合溶解→测定及矫正pH→分装、包装→灭菌→检定→保存备用。
(二)常用培养基的种类按培养基的作用分为:①基础培养基:含有细菌需要的最基本营养成分(蛋白胨1%,牛肉膏0.3%,氯化钠0.5%,用蒸馏水溶解)。
按其性状不同可分为:(1)肉汤培养基。
(2)普通琼脂培养基。
分斜面和平板培养基,内含2~3%的琼脂,呈固体状。
(3)半固体培养基,含0.2~0.5%的琼脂。
②营养培养基:供营养要求较高的细菌用,如血琼脂培养基(在普通琼脂培养基中加入5%~10%的脱纤维动物血)。
③选择培养基:如SS琼脂培养基,可选择性抑制非病原菌生长,有利于分离病原菌。
④鉴别培养基:如含铁双糖培养基,用以鉴定细菌。
⑤厌氧培养基:如庖肉培养基,用以培养厌氧菌。
(三)基础培养基的制备过程1、肉汤(肉浸液)培养基【材料】牛肉、蛋白胨、氯化钠、水(蒸馏水或自来水)、NaOH溶液(1N和N/10)、0.02%酚红指示剂、吸管等。
【方法】①取新鲜瘦牛肉,除去脂肪及筋膜,切成小块后用绞肉机绞碎,每500g碎肉加水1000ml,混合置4℃冰箱过夜(使营养物质即溶解性蛋白质充分渗出)。
②次日取出煮沸半小时左右,使肉渣蛋白质全部凝固;加热过程中不时地用玻璃棒搅拌,以免沉淀烧焦。
也可不放置冰箱过夜,直接煮沸1小时。
③用数层纱布过滤,弃去肉渣(肉渣中的液体应尽量挤净),于滤液中加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠,加热溶解,并补足失水至1000ml。
④冷却到50℃在右,以N/10 NaOH调至pH值7.6~7.8。
⑤待pH矫正后,再加热10min,使肉汤中部分蛋白质等因加碱及再度加热而凝固沉淀。
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细菌代谢产物的测及鉴定
11、战争满足了,或曾经满足过人的 好斗的 本能, 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ,破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果, 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— —马卡 连柯(名 言网)
13、遵守纪律的风气的培养,只有领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致,是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
31、只有永远躺在泥坑里的人,才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭,生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍,就是一下子不要学很多。——洛克
简述:代谢产物检测项目及应用
代谢产物检测项目及应用---青岛科标生物实验室代谢产物指新陈代谢中的中间代谢产物(intermediate metabolite)和最终代谢产物(final metabolite)。
农药代谢产物检测:除了农药本身以外,它的代谢产物也会出现残留毒性问题,代谢物的形成都明显提高了农药的急性毒性或慢性毒性,除了要进行农药母体化合物的残留测定外,还要对其主要的代谢产物,特别是毒性有提高的化合物进行残留测定。
细菌代谢产物检测:各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。
用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。
利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。
微生物代谢产物检测:微生物在代谢过程中,会产生多种多样的代谢产物,分为初级代谢产物和次级代谢产物两类。
初级代谢产物是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质,如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。
次级代谢产物,大多是分子结构比较复杂的化合物。
根据其作用,可将其分为抗生素,激素,生物碱,毒素等类型。
检测范围◆农药代谢产物检测◆细菌代谢产物检测◆微生物代谢产物检测等检测方法一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验2.葡萄糖代谢类型鉴别试验3.甲基红(MR)试验4.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)5.VP试验6.胆汁七叶苷水解试验7.淀粉水解试验8.甘油复红试验9.葡萄糖酸氧化试验二、氨基酸和蛋白质的代谢试验1.硫化氢试验2.明胶液化试验3.吲哚试验(靛基质试验)4.苯丙氨酸脱氨酶试验5.氨基酸脱羧酶试验6.精氨酸双水解酶试验7.尿素酶试验8.霍乱红试验三、碳源和氮源利用试验1.枸橼酸盐利用试验2.丙二酸盐利用试验3.醋酸钠利用试验4.马尿酸钠水解试验5、乙酰胺利用试验四、酶类试验1.氧化酶试验2.触酶试验3.凝固酶试验4.DNA酶试验5.胆汁溶菌试验6.硝酸盐还原试验7.卵磷脂酶试验8.磷酸酶试验9.脂酶试验10.CAMP试验11.石蕊牛乳试验。