名词解释
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固定相和流动相:
层析系统中的两个互不相溶的相:一是固定相(固体或吸附在固体上的液体),一是流动相(液体或气体)。
级联放大作用:
由于酶的共价修饰反应是酶促反应,只要有少量的信号分子(如激素)存在,即可通过加速这种酶促反应,而使大量的另一种酶发生化学修饰,从而获得放大效应,这种调节方式快速,效率极高。
蛋白质超二级结构:
在蛋白质分子中,特别是球状蛋白质中,由若干相邻的二级结构单元(即α-螺旋,β-折叠片和β-转角等)彼此相互作用组合在一起,形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体,充当三级结构的构件单元,称超二级结构。
肽平面:
组成肽键的四个原子及与之相连的两个α-碳原子都处在同一个平面内,这个刚性平面称为肽平面。
酶的国际单位:
1个酶活力单位是指在特定条件下,在1min内能转化1u mol底物的酶量。测定条件为250C 和其他最适条件,该单位为国际单位。
PCR:
聚合酶链式反应,又称体外基因扩增。该法模拟体内DNA的复制过程,首先使DNA变性,两条链分开,然后是引物模板退火,二者碱基配对,DNA聚合酶随即以4种dNTP为底物,在引物的引导下合成与模板互补的DNA新链。重复此过程,DNA以指数方式扩增。引物为特定引物。
RAPD:
随机扩增多态性。其方法是用一个随机核苷酸序列为引物对基因组DNA进行PCR扩增,产生不连续的DNA产物,再通过凝胶电泳来观察扩增片段的多态性,获得特异分子标记。RFLP
限制性片段多态性,由限制性内切酶把很大的DNA分子降解成许多长短不同的较小片段,其数目和长度反映了限制性内切酶的切点在DNA分子上的分布,它能作为某DNA或含这种DNA生物所特有的“指纹”,不同个体的等位基因之间碱基代换、重排、插入、缺失等都会引起这种“指纹”的多态性。
AFLP:
扩增片段长度多态性。是RFLP和PCR技术相结合产生的一项新技术,用限制性内切酶消化基因组DNA,由于不同材料的DNA的酶切片段存在差异,用特定引物选择性的扩增基因组限制性酶切片段,再用凝胶电泳分离就可以观察基因组DNA的多态性
拓扑异构酶
通过切断DNA的一条或两条链中的磷酸二脂键,然后重新纠缠和封口来改变DNA连环数的酶。
DNA拓扑异构体:
天然DNA均呈超螺旋结构,其环数是超螺旋的一个参数,除环数不同外,其他性质(如大小、一级结构等)完全相同的DNA分子成为拓扑异构体。
Na+ .K+—ATPase:
钠钾ATP酶,动物细胞存在于质膜上的一种酶,该酶利用ATP水解把Na+迸出,而把K+泵入细胞。它是维持细胞膜电位的重要装置。
钙调蛋白:
CaM是一种特殊的钙结合蛋白质,广泛存在于各种细胞中,它是由148个氨基酸残基组成的一条多肽链,以单体形式存在。CaM有4个Ca2+结合位点,当没有结合Ca2+时,以无活性的形式存在。当CaM与Ca2+结合后,构象发生变化,变成有活性的Ca2+—CaM复合物。此复合物可以以两种形式调节生理活动:1、直接与靶酶起作用;2、通过激活依赖Ca2+—CaM的PK起作用。
蛋白质组学:
研究某一物种、个体、器官、组织及细胞中全部蛋白质,获得整个体系内所有蛋白质组分的生物学和理化参数,揭示生命活动规律的一门学科。
限制性内切酶:
原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重螺旋对称性的回文序列,并在此序列的某位点水解DNA链,产生粘性末端或平末端,这类酶称为限制性内切酶。
同工酶:
从不同种属或同一种属、同一个体的不同组织或同一组织的同一细胞中获得的具有不同分子形式却催化相同化学反应的一组酶叫做同工酶。又可分为原级同工酶和次级同工酶,由酶蛋白编码基因不同而产生的同工酶叫做原级同工酶,由基因转录产物mRNA或者翻译产物经过不同的加工过程产生的同工酶叫做次级同工酶。
G-蛋白:
一般是指一类与膜受体偶联的异三聚体结合蛋白质,其具有和GTP结合并催化GTP水解成GDP的能力,由α、β、γ三个亚基组成,可充当细胞膜上受体和靶酶之间的信号传递体。
DNA双螺旋多态性:
在多核苷酸链中,脱氧核糖的五元环能折叠成多种构象,此外,分子还可以绕C-N糖苷键以及3’,5’–磷酸二脂键旋转一定的角度,这就使具有同样碱基配对的DNA双螺旋可以采取另一些构象,DNA构象上的这种差异称为多态性。(A、B \Z)
sanger反应:
在弱碱性溶液中,氨基酸的α-氨基易与DNFB(2,4-二硝基氟苯)反应,生成黄色的DNP-AA (二硝基苯氨基酸),此反应最初被sanger用于测定N-末端氨基酸,又被称为sanger反应。Ribozyme:
核酸酶,对RNA有催化活性的RNA。
顺反子:
遗传学上将编译一个多肽的遗传单位称为顺反子。
引发体:
引物酶与相关蛋白质结合成的一个有活性的复合体叫做引发体。
分子病:
由于基因突变导致蛋白质一级结构发生变异,使蛋白质的生物学功能减退或丧失,甚至造成生理功能的变化而引起的疾病,称为分子病。
增色效应与减色效应:
当DNA的双螺旋结构发生解体时,两条链分开,形成无规则线团,一系列理化性质也随之发生改变,260nm紫外吸收值升高,此效应称之为增色效应。反之,由于DNA有规则的双螺旋结构中的碱基紧密的堆积在一起而造成的260nm紫外吸收值降低,此效应称之为减色效应。
固定化酶:
将酶从微生物细胞中提取出,将其用固定支持物(称为载体)固定,使其成为不溶于水或不易散失和可多次使用的生物催化剂,这种固定的酶称为固定化酶。
解偶联作用:
在完整线粒体内,电子传递与磷酸化是紧密偶联的,当使用某些试剂而导致的电子传递与ATP形成这两个过程分开,只进行电子传递而不能形成ATP的作用,称为解偶联作用
亲和层析:
利用共价连有特异配体的层析介质,分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白质或其他分子的层析技术。
信号肽/导肽:
二者都是新生肽链用于指导蛋白质跨膜转移(定位)的N-末端氨基酸序列。
信号肽含10到20个疏水氨基酸,合成后即可特异被SRP识别,并将核糖体引导到内质网停泊蛋白上继续翻译。肽链前端进入内质网腔后,信号肽即被切除。边合成边转运!
导肽富含碱性和疏水氨基酸,这导致它既亲水又疏水,利于穿越脂双层。同时带正电的头更利于顺跨膜电势穿膜。跨膜后被切除。先合成后转运!
Km/Tm
Km为米氏常数,是酶的特征物理常数,Km值是反应速度为最大速度一半时的底物浓度,单位mol/L或m mol/L
Tm是热变性过程中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半(双螺旋结构失去一半)时的温度,单位为0C
DNA文库/c DNA文库
整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和叫做基因文库。
将细胞全部mRNA反转录成cDNA并被克隆的总和称为c DNA文库
超二级结构/结构域
超二级结构是指多态链上若干相邻的构象单元(如α-螺旋,β-折叠,β-转角等)彼此作用,进一步组合成有规则的结构组合体。